Name: Morris Water Maze Testi: Fare Gerilme ve Test Ortamı için Optimizasyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: Öğrenin, Alzheimer hastalığı fare modelinde Morris su labirenti protokolü ile bilişsel bozuklukları değerlendirmeyi. Bu yöntem, stresi azaltmak için alıştırma ve gizli platform denemeleri kullanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Nörolojik Bozukluklar ve İnme Ulusal Enstitüsü, - Bu çalışma Genel Tıp Bilimleri Ulusal Enstitüsü (U54GM104942 Reed / Engler-Chiurazzi) tarafından desteklenmiştir (Ashe - R01NS33249, R01NS63249 ve R01NS79374), Cobre (Engler-Chiurazzi - P20GM109098), Alzheimer Derneği (Reed - NIRG-12-242187), bir WVU Fakültesi Araştırma Senato Grant (Reed), Tıp Dekanlık Ofisi WVU College (Engler-Chiurazzi) bir WVU PSCOR hibe (Reed) ve iç fonlar. Içeriği sadece yazarların sorumluluğundadır ve mutlaka NIH veya Alzheimer Derneği resmi görüşlerini temsil etmemektedir.

<ol><li>Ramsden, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+neurofibrillary+tangle+formation%2C+neuron+loss%2C+and+memory+impairment+in+a+mouse+model+of+human+tauopathy+%28P301L%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Age-dependent neurofibrillary tangle formation, neuron loss, and memory impairment in a mouse model of human tauopathy (P301L).</a> The Journal of Neuroscience. 25, 10637-10647 (2005).</li>
<li>Attar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+shortened+barnes+maze+protocol+reveals+memory+deficits+at+4-months+of+age+in+the+triple-transgenic+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A shortened barnes maze protocol reveals memory deficits at 4-months of age in the triple-transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> PLoS One. 8, e80355(2013).</li>
<li>Johnson, J. M., Bailey, J. M., Johnson, J. E., Newland, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+of+BALB%2Fc+and+C57BL%2F6+mice+under+an+incremental+repeated+acquisition+of+behavioral+chains+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Processes%22%5BJournal%5D)">Performance of BALB/c and C57BL/6 mice under an incremental repeated acquisition of behavioral chains procedure.</a> Behavioural Processes. 84, 705-714 (2010).</li>
<li>Crawley, J. N. What's wrong with my Mouse Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice. , 1st edition, Wiley-Liss. 94-95 (2000).</li>
<li>Westerman, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+abeta+and+memory+in+the+Tg2576+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The relationship between abeta and memory in the Tg2576 mouse model of Alzheimer's disease.</a> The Journal of Neuroscience. 22, 1858-1867 (2002).</li>
<li>D'Hooge, R., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+morris+water+maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Applications of the morris water maze in the study of learning and memory.</a> Brain Research Reviews. 36, 60-90 (2001).</li>
<li>Santa Cruz, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tau+suppression+in+a+neurodegenerative+mouse+model+improves+memory+function%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Tau suppression in a neurodegenerative mouse model improves memory function.</a> Science. 309, 476-481 (2005).</li>
<li>Hunsberger, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+size+of+memory+deficits+in+mice+with+adult-onset+P301L+tau+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect size of memory deficits in mice with adult-onset P301L tau expression.</a> Behavioural Brain Research. 272, 181-195 (2014).</li>
<li>Yue, M., Hanna, A., Wilson, J., Roder, H., Janus, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+difference+in+pathology+and+memory+decline+in+rTg4510+mouse+model+of+tauopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Aging%22%5BJournal%5D)">Sex difference in pathology and memory decline in rTg4510 mouse model of tauopathy.</a> Neurobiology of Aging. 32, 590-603 (2011).</li>
<li>Sandi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+and+mechanisms+of+action+of+glucocorticoid+involvement+in+memory+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+plasticity%22%5BJournal%5D)">The role and mechanisms of action of glucocorticoid involvement in memory storage.</a> Neural plasticity. 6, 41-52 (1998).</li>
<li>Hölscher, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C.+impairs+performance+in+spatial+water+maze+learning+tasks%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">C. impairs performance in spatial water maze learning tasks.</a> Behavioural Brain Research. 100, 225-235 (1999).</li>
<li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> Journal of Neuroscience Methods. 11, 47-60 (1984).</li>
<li>Reed, M. N., Liu, P., Kotilinek, L. A., Ashe, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+size+of+reference+memory+deficits+in+the+morris+water+maze+in+Tg2576+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect size of reference memory deficits in the morris water maze in Tg2576 mice.</a> Behavioural Brain Research. 212, 115-120 (2010).</li>
<li>Huang, Y., Zhou, W., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bright+lighting+conditions+during+testing+increase+thigmotaxis+and+impair+water+maze+performance+in+BALB%2Fc+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Bright lighting conditions during testing increase thigmotaxis and impair water maze performance in BALB/c mice.</a> Behavioral Brain Research. 226, 26-31 (2012).</li>
<li>Baker, R. Water maze. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.watermaze.org">http://www.watermaze.org</a> (2013).</li>
<li>Ivonen, H., Nurminen, L., Harri, M., Tanila, H., Puolivali, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermia+in+mice+tested+in+Morris+water+maze%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Hypothermia in mice tested in Morris water maze.</a> Behavioural Brain Research. 141, 207-213 (2003).</li>
<li>Rubinow, M. J., Arseneau, L. M., Beverly, J. L., Juraska, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+estrous+cycle+on+water+maze+acquisition+depends+on+the+temperature+of+the+water%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Effect of estrous cycle on water maze acquisition depends on the temperature of the water.</a> Behavioral Neuroscience. 118 (4), 863-868 (2004).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

MWM görev yaygın mekansal öğrenme ve hafıza değerlendirmek için kullanılır. Ancak, bu görevin sağlamlığı pek çok faktör tarafından etkilenir ve arka plan zorlanma ve test ortamı hem de optimizasyon gerektirir. Şekil 4, aynı eğitim protokolü gösterilen ve iki farklı test odaları (eşdeğer boyut ve düzeni) kullanılan görsel ipuçları olarak uygulanan önemli ölçüde farklı prob performansını vermiştir. Test odasına birçok özellik mekan hissi 4 katkıda bulunabilecek bu yana, iki oda testi daha zor y...

Transjenik fare modelleri, Alzheimer hastalığı (AD), patofizyolojisi, hem de terapötik müdahalelerin potansiyelini değerlendirmek için etkili olmuştur. Böyle Morris su labirenti (MWM) gibi bilişsel görevler, genellikle bellek açıklarının moleküler korelasyonun gösterilmesi ve klinik öncesi ilaçların etkinliğini değerlendirmek için bu modellerle birlikte kullanılır. Bilişsel görevin dinamik aralık ince tedavi etkilerini saptamak için yeterince geniş olması ki, çok önemlidir. AD fare modelleri ile bilişsel kusurlar genellikle yaşa bağlı olan ve fareler performans ilerici düşüşler görüntüler (örneğin, 1). Hassas bir bilişsel görevin Kullanımı ve böylece yaşlanma hayvanlarla ilgili maliyetleri azaltarak, daha önce hayvanın hayatında ince farklılıkların tespitine olanak sağlayabilir. Örneğin, hipokampus bağımlı Barnes eğitim denemelerinin sayısını azaltarak 15-5 labirent d sonuçlanan, görevin zorluk arttıdaha erken yaşta 3xTg modelinde açıklarının etection önce 2. bildirdi. Açıklarının önceki tespiti değil sadece, aynı zamanda bilişsel açıkları altında yatan moleküler değişiklikler tespit edilebilir olasılığını artırır, önemli bir zaman ve maliyet tasarrufu sağlar. Bilişsel görevlerin duyarlılığını etkileyen faktörlerden biri fare modeli genetik arka plan türdür. Örneğin, BALB / c fareleri gibi C57BL / 6 3 gibi başka suşlar ile karşılaştırıldığında, öğrenme ve hafıza görevlerinde üstün bir performans sergilerler. F1 FVB / N x 129S6 arka AD&#39;nin en yaygın olarak kullanılan model, Tg2576 ve RTG (TauP301L) 4510 iki modelini kullanılmaktadır. Bu suş B6 / SJL fareler 4 dahil olmak üzere diğer suşlar için MWM akrabası üstün öğrenme yeteneğini sergiler. Çünkü bu üstün öğrenme yeteneği, geniş eğitimden sonra tek bir prob kullanımı aşırı eğitime kaynaklanan grup farklılıklarını maskeleyebilir. Buna ek olarak, sensitivitesiProb çalışmalarda y yaşa bağlı olabilir. Biz daha önce erken sonda denemeleri sınırlı gizli platformu eğitimden sonra, daha genç transgen-negatif yavru kontrollere göre genç Tg2576 farklılıkları daha duyarlıdır daha kapsamlı eğitim 5 sonra eklenen prob çalışmalar olduğunu göstermiştir. Daha önce prob denemeleri 5 olduğundan daha aksine, kapsamlı eğitim aşağıdaki sonda denemeleri eski littermates kıyasla Tg2576 fareler yaşlı (20-25 ay) daha duyarlıdır. Boyuna test yapılır ve belirli bir prob deneme duyarlılığı yaşa bağımlı özellikle eğitim boyunca sonda denemeler interspersing ederek, hassas bir deneme tespit edilme olasılığı artar. 1 F1 FVB / N x üstün performans göstermektedir daha geniş eğitim ile bir protokol çerçevesinde eğitimli B6 / SJL arka plan farelere kıyasla bu suş için optimize protokol çerçevesinde 129S6 fareler. MWM olduğunugenellikle zaman ve laboratuvarlar 6 ikisi arasında tekrarlanabilir güvenilir önlemleri sağlamak için düşündüm. Örneğin, başlangıçta bizim Minnesota laboratuvar 1,7 tarafından kullanılan birincil protokol başarıyla Batı Virginia Üniversitesi&#39;nden 8 minör değişikliklerle uygulanmıştır. Benzer şekilde, değer düşüklüğü eşdeğer düzeyleri patojen içermeyen ya da geleneksel koşullar 9 altında muhafaza eğer yavruları kontrol etmek için 4510 fareler göreceli RTG (TauP301L) gözlendi. Ancak, test ortamı MWM görev duyarlılığını etkileyebilir. Böyle oda aydınlatma, hava delikleri, sıcaklık değişimleri ve sesler gibi tüm faktörler sonuçta performansı etkileyebilecek çevresel ipuçlarına 4 katkıda bulunur. Bizim Minnesota laboratuvar ve vivaryum yeni binasına taşındı zaman, yukarı vahşi tip performansında% 38 azalma büyük ölçüde görev ve transgen ilgili açıklarını tespit etme yeteneğine dinamik aralığını azaltarak gözlendi. Pe Bu değişiklikrformance eşdeğer boyut ve konfıgürasyona sahip olacak test odası tasarımı ve aynı uygulanan görsel işaretler kullanarak rağmen meydana geldi. Orijinal protokol A &quot;re-optimize&quot; yeni test ortamında MWM görevin dinamik aralığı artırmak için gerekli oldu. İşte F1 FVB / N ile kullanım için tasarlanmış orijinal protokol 129S6 background 5 açıklanmıştır x. Bazı çalışmalarda stres önermek için performans 11 bu strese bağlı açığı hafifletmek kötü MWM performansı 10 ve ön-işleme ile ilişkili, bir ön-işleme protokol havuzunun oluşturulması ve parçalanmasına önce MWM test fareler ACCLIMATE için tasarlanmıştır . Ön işleme ardından, fareler yükseltilmiş platform bayrak ile işaretlenmiştir hangi görünür bir platform eğitimi, tabi. Görünür bir platform eğitim sensorimotor anormallikleri ile ilgili performans sorunları ile fareler tanımlamak için kullanılır. Prot açıklanan dışlama kriterlerini kullanarakocol bölümünde, performans yetersiz fareler gizli platformu eğitim ve prob çalışmaların daha sonraki sınavlar kaldırılır. Sensorimotor performans verileri dışarı çarpanlarına çünkü gizli eğitim platformu ve prob çalışmalarda bozuklukları bilişsel olarak yorumlanır. Görünür bir platform eğitimin tamamlanmasından sonra, fareler platformu suya ve dış uyaranlara göre aynı konuma kalır gizli bir platform eğitime başlamak. Platform (prob denemeler) çıkarılır hangi Denemeler ek eğitim etkisini değerlendirmek için gizli bir platform eğitimi boyunca serpiştirilmiş. Prob denemeleri Her günün başlangıcında meydana Çünkü, ek gizli platformu eğitimden önce, sonda denemeleri 20 saat gecikme aşağıdaki platformun yerini hatırlamak hayvanın yeteneğini ölçmek, referans hafızasında 12 bir ölçü olarak kabul. Son olarak, hangi yollarla bu orijinal protokol yeniden optimize zaman test ortamında değişikliklerkesintiye kontrol performansı açıklanmıştır.

<table><tbody><tr><td>İzleyici İzleme yazılımı</td><td>Biobserve</td><td></td><td>Bu özel yazılım bir gereklilik değildir - başka izleme sistemleri de mevcuttur</td></tr><tr><td>Ön işleme havuzu</td><td></td><td></td><td>Boyutlar yaklaşık 1 fit genişlik x 2 fit uzunluk x 1,5 fit derinlik</td></tr><tr><td>Plastik beher</td><td></td><td></td><td>1 L</td></tr><tr><td>Kepçe</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Küçük ağ</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kronometre</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Toksik olmayan beyaz tempera boya</td><td></td><td></td><td>Herhangi bir renk boya kullanılabilir; ancak, çoğu izleme yazılımı programı, boyanın hayvanın rengiyle kontrast oluşturmasını gerektirir.</td></tr><tr><td>Görünür platform</td><td></td><td></td><td>Renk, labirentinkiyle kontrast oluşturmalıdır</td></tr><tr><td>Perde çubuğu</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Perdeler</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dairesel küvet</td><td></td><td></td><td>Genellikle beyaz renklidir; yaklaşık 4 fit çapında</td></tr><tr><td>Gizli platform</td><td></td><td></td><td>Su ile aynı renge boyanmış</td></tr></tbody></table>

morris water maze testi: fare gerilme ve test ortamı için optimizasyon

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

Morris su labirenti (MWM), Alzheimer hastalığı gibi nörobilişsel bozukluklar da dahil olmak üzere transgenik fare hastalık modellerinde hipokampal bağımlı uzamsal öğrenmeyi ve hafızayı değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan bir görevdir. Bununla birlikte, kullanılan fare modelinin arka plan suşu, gözlemlenen davranışsal fenotip üzerinde önemli bir etkiye sahip olabilir ve bazı suşlar diğerlerine göre üstün öğrenme yeteneği sergiler. Transgen negatif ve transgen pozitif fareler arasındaki farkların tespit edilebilmesini sağlamak için, arka plan suşuna duyarlı bir eğitim prosedürünün tanımlanması esastır. MWM protokolünün fare modelinin arka plan suşuna göre uyarlanmaması, yetersiz veya aşırı eğitime yol açabilir, böylece prob denemelerinde grup farklılıklarını maskeleyebilir. Burada, F1 FVB/N x 129S6 arka planıyla kullanılmak üzere uyarlanmış bir MWM protokolü açıklanmaktadır. Bu, mutant P301L tau'nun (rTg (TauP301L) 4510 fareleri) Alzheimer hastalığı ile ilişkili hafıza eksiklikleri üzerindeki yaşa bağlı etkilerini incelemek için sıklıkla kullanılan bir arka plan türüdür. Ayrıca, kullanılan belirli test ortamı tarafından dikte edildiği gibi yeniden optimize etmek için bir strateji de açıklanmıştır.

Biz Şekil 3 beta-amiloid (Tg2576 fareler) ve mutant P301L tau uzamsal referans hafızasında (RTG (TauP301L) 4510 fareler) (örn 1,5,7,8). Etkilerini incelemek amacıyla Morris su labirenti kullanmış temsili sonuç motoru ve görsel yeteneklerini değerlendirmek için test ortamı A. kullanan öğrenme ve bellek 8 erişkin başlangıçlı P301L tau ifadesinin etkisini inceleyen çalışmada bildirilen, fareler, her eğitim bloğu oluşuyordu görünür platformu eğitim blokları karşısında karşılaş...

Bu el yazması, Alzheimer hastalığının yaygın olarak kullanılan bir fare modeliyle kullanılmak üzere tasarlanmış bir Morris su labirenti (MWM) protokolünü açıklamaktadır. MWM, transgenik fare modellerinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Fare modelinin arka plan gerilimine duyarlı bir prosedürün uygulanması, grup farklılıklarını tespit etmek için çok önemlidir.

Morris Water Maze Testi: Fare Gerilme ve Test Ortamı için Optimizasyon

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Bu prosedürün amacı, 1 2 9 6 FBB arka plan suşu için uyarlanmış bir Morris Su Labirenti Protokolü kullanarak, bir Alzheimer hastalığı fare modelindeki bilişsel eksiklikleri belirlemektir. Bu işlem, öncelikle stres kaynaklı performans eksikliklerini gidermek amacıyla farelerin göreve alıştırılmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adım ise, görsel ve motor fonksiyonları değerlendirmek için bir platformun su seviyesinin bir inç üzerine çıkarıldığı görsel platform görevinin uygulanmasıdır.Ardından, platformun su yüzeyinin beş milimetre altına batırıldığı gizli platform denemeleri gerçekleştirilir. Son adımda ise, mekansal referans belleğini değerlendirmek ve kullanılan arama stratejisinin türünü belirlemek amacıyla platformun çıkarıldığı prob denemeleri kullanılır. Nihayetinde, bu özelleştirilmiş su MAs prosedürü, yaygın olarak kullanılan bir Alzheimer hastalığı fare modelinde mekansal öğrenme ve belleğin değerlendirilmesine olanak tanır.Genellikle, bu yöntemde yeni olan kişiler; fare hattının arka plan suşu ve farelerin test edildiği ortama bağlı olarak, eğitim denemelerinin sayısı ve kullanılan problar gibi test prosedürlerini optimize etme gerekliliği nedeniyle zorluk yaşayacaklardır. Prosedürün bu bölümü, fareleri giriş ve çıkış çekme işlemine alıştırır. Öncelikle, kutuyu rahat bir yüksekliğe kaldıracak şekilde yerleştirin ve içini 21 °C sıcaklıkta, yaklaşık bir santimetre seviyesine kadar iki litre su ile doldurun.Fareler test odasına getirildikten sonra, bir deneyi kafesinden çıkarın, denek kimliğini doğrulayın ve ardından prosedürden geçmemiş farelerden ayırt etmek için kuyruğunu toksik olmayan kalıcı bir markörle işaretleyin. Bir fareyi yaklaşık beş saniye boyunca transfer beherin içine yerleştirin. Ardından fareyi beheriyle birlikte nazikçe ön işlem havuzuna boşaltın ve fareyi havuzda 20 saniye tutun.Süre dolduğunda, bir kepçeyi eğmeden nazikçe farenin önüne yerleştirin. Farenin kepçeye girmesine ve kepçeyi keşfetmesine izin verin. Gerektiğinde, kepçeyi yavaşça kaldırırken nazikçe farenin altına kaydırarak farenin kepçeye çıkmasını sağlayın. Kepçe ile fareleri korkutmamaya özen gösterin.Bu prosedürleri kafesteki her fare için günde bir kez, 10 gün boyunca tekrarlayın. Her hayvandan sonra, kafesler arası transfer beheri olarak kullanılan bir ağ yardımıyla havuzdaki dışkı toplarını ve altlığı toplayın. Test günleri olan birinci, ikinci ve üçüncü günlerde, her gün altı deneme olacak şekilde ve her deneme arasında yaklaşık 10 dakika ara vererek görünür eğitim uygulayın.Öncelikle, fare performans takip yazılımını kurun ve protokolün metin kısmındaki talimatlara göre çalışma çizelgelerini oluşturun. Yazılım yapılandırıldıktan sonra, her türlü mekansal ipucunu gizlemek için perdeleri asarak odayı hazırlayın. Ardından, küveti 21 °C sıcaklıktaki musluk suyu ile doldurarak hazırlayın.Test boyunca su sıcaklığının bu sıcaklığın bir derece sınırları içerisinde kaldığından emin olmak için bir termometre kullanın. 13 santimetre yüksekliğe ulaşan, 4,5 x 4,5 santimetre boyutlarında ve üzerinde belirgin, kabartmalı S şeklinde bir karakter bulunan bir bayrağın monte edildiği platformu, su yüzeyinin yaklaşık bir inç üzerinde kalacak şekilde küvetin önceden belirlenmiş ilk konumuna yerleştirin.Şimdi kafesteki ilk fareyi alın. Denek kimliğini doğrulayın, kuyruğu uygun renkte kalıcı bir markörle işaretleyin ve bir transfer beherin içine yerleştirin. Fareyi nazikçe küvete yerleştirin.Zamanlayıcıyı başlatın ve takip yazılımının hayvanı takip ettiğinden emin olun. Fareye platformu bulması için iki dakikaya kadar süre tanıyın. Fare platformu bulduktan sonra, fareye platform üzerinde 20 saniye kalmasına izin verin.Hayvan iki dakikalık süre içinde platformu bulamazsa, fareyi kepçe yardımıyla alarak 20 saniye boyunca platformun üzerine yerleştirin. Platformda geçen 20 saniyenin ardından, fareyi alıştırma eğitiminde yapıldığı gibi platformdan çıkarın, kağıt havlularla kaplanmış ısıtmalı bir kafese yerleştirin ve bir ısıtma pedi ile ısı lambası kullanarak yaklaşık 31 degrees Celsius sıcaklığa kadar 30 saniye boyunca ısıtın. Ardından fareyi, denemeler arasında dinlenmesi için yalnızca ısıtma pedi bulunan ancak ısı lambası olmayan bekleme kafesine aktarın.Küveti bir ağ ile kalıntılardan temizledikten sonra, bu adımları gruptaki her bir fare için tekrarlayın. Her fare için ilk deneme tamamlandığında, platformu önceden belirlenmiş ikinci konuma taşıyın. Perdeleri astıktan sonra, dördüncü günden 10. güne kadar gizli platform eğitimini gerçekleştirin.Daha önce yapıldığı gibi, ipuçlarını perdelerin üzerine stratejik olarak yerleştirin. İpuçlarının daha iyi görünürlük için büyük olduğundan ve kontrast renkler içerdiğinden; ayrıca farelerin küvet içinden görebileceği mesafe ve yüksekliğe ayarlandığından emin olun. Yazılımı, protokolün yazılı kısmındaki talimatlara göre yapılandırın.Ardından, platform su yüzeyinin yaklaşık beş milimetre altında kalacak şekilde küveti suyla doldurarak düzeneği kurun. Platformu önceden belirlenmiş konuma yerleştirin. Platformun konumu, tüm günler ve denemeler boyunca test edilenler için aynı kalacaktır.Hayvanların mekansal olmayan, hipokampus dışı motorik bir strateji geliştirmemeleri için başlangıç konumunun değiştirilmesi esastır. Labirenti çözmek için suyu opak hale getirmek amacıyla toksik olmayan beyaz tempera boya kullanın. Bunu, hayvan yüzerken platformun üst kısmının hayvanın göz hizasından görünmez olduğundan emin olmak için yapın.Fareler daha önce tanımlanıp işaretlendikten sonra, burunları duvara bakacak şekilde nazikçe labirente yerleştirin. Her fare, benzersiz bir deneme için aynı başlangıç konumuna yerleştirilecektir. Fare ilk bırakıldığı anda zamanlayıcıyı başlatın ve test yapan kişinin fareler tarafından kolayca görülmediği bir alanda durun.Hayvan platforma ulaştığında, oda içindeki mekansal konumunu belirlemesi için platformda 15 saniye kalmasına izin verin. Fare 60 saniye içinde platformu bulamazsa, fareyi nazikçe alıp platformun üzerine yerleştirin. Platformda 15 saniye geçirdikten sonra fareyi labirentten çıkarın ve ısıtmalı kafesine geri koyun.Labirenti önceden kalıntılardan temizledikten sonra, gruptaki geri kalan fareler için bu prosedürleri tekrarlayın. Böylece, dördüncü günden dokuzuncu güne kadar olan test günlerinde, her deneme arasında yaklaşık 20 dakika olacak şekilde, günde dört kez gizli platform eğitimi denemesi gerçekleştirin. Altıncı, yedinci ve sekizinci günlerde platform eğitiminden önce prob denemelerini ve son prob denemesini gerçekleştirin.10. günde, labirentte platform bulunmaması dışında, proba denemelerini gizli platform eğitimine benzer şekilde gerçekleştirin. Bir fareyi önceden belirlenmiş bir bırakma noktasından salın ve farenin labirentte 60 saniye boyunca yüzmesine izin verin. 10. gündeki proba denemesini takiben, proba denemeleri sırasında ek bir deneme yapılmaz. Hayvanın katettiği yol uzunluğunu, hayvanın labirentin her bir kadranında geçirdiği sürenin yüzdesini ve bir hayvanın daha önce platformun bulunduğu alan üzerinde kaç kez yüzdüğünü takip etmek için hayvan takip yazılımını kullanın.Deney listesi sekmesini açın; veri analizi sekmesi ve su labirenti sekmesinden ölçümleri elde edin. Verileri doğrudan bir Excel hesap tablosuna aktarın. Ardından, verileri protokolün yazılı bölümündeki talimatlara göre analiz edin.İnsan P 3 0 1 LTL geni içeren 41 TP 3 0 1 L fare ve 46 kontrol grubu, yaklaşık 6,5 aylıkken bu protokol kullanılarak test edilmiştir. Bu durum, transgenik farelerde üç aylık Tau P 3 0 1 L ekspresyonuna karşılık gelmektedir. Her grup, yaklaşık olarak eşit sayıda erkek ve dişi yol uzunluğu içermekteydi.Görünmez platform eğitimi, kontrol grubu ile TP 3 0 1 L fareleri arasında farklılık göstermemiştir. Bu farkın olmaması, kontrol ve tau P 3 0 1 LM farelerinin görsel veya lokomotor kapasite açısından farklılık göstermediğini ve dolayısıyla gizli deneme testlerindeki performans eksikliklerinin hafıza bozukluklarına bağlanabileceğini göstermektedir. Ancak, gizli platform eğitimi sırasında TP 3 0 1 LM, tüm eğitim blokları boyunca anlamlı derecede daha uzun yol uzunlukları sergilemiştir.Son olarak, dört prob denemesi boyunca kontrol grubunda iyileşme gözlemlenmiştir. Tau P 3 0 1 L farelerinin aksine, kontrol fareleri görevi çözmek için mekansal bir stratejiyi daha iyi kullanabilmiş ve platformu hedef bölgeye konumlandırmayı daha iyi öğrenmişlerdir. Bu prosedür diğer fare hatlarına uyarlanırken, kontrol grubunun öğrenme hızının değerlendirilmesi, gereken isabetli eğitim denemesi sayısının belirlenmesi ve ilk prob denemesinin ne zaman eklenmesi gerektiğinin tespit edilmesi önemlidir.

morris-water-maze-test-optimization-for-mouse-strain-testing

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Morris su labirenti davranışsal bir görev hipokampus katılımı belgelemek için kullanılan bir iyi kabul edilen bir araçtır.

Morris Su Labirent Deney

Lashley III labirent caydırıcı uyaran ya da görsel ipuçları dayanmaz bir rota-öğrenme görevi. Bu nedenle, özellikle yaşlanma fareler ya da başka stres dikkate, öğrenme ve hafıza değerlendirmek için son derece cazip bir seçenek.

Farelerde Lashley III Labirent Düşük stres Rota Öğrenme

Farelerde Su Maze Testleri Sığ Su (kürek çekmeye) Türevleri

Morris Su Labirent hipokampal-bağımlı öğrenme ve hafıza test etmek için bir davranış iştir. Bu çalışmada, nörobiyoloji, Neuropharmacology ve bilişsel bozukluklar kemirgen modellerinde yaygın olarak kullanılır olmuştur.

Alzheimer Hastalığı Model Fareler Öğrenme ve Hafıza Açıkları Morris Su Labirent Testi

Beyin tümörlerinin radyoterapi yönetimi kaynaklanan bilişsel bozukluk yaşam kalitesini olumsuz etkileyen bir klinik inatçı bir durumu temsil eder. Eleştirel radyasyona bağlı bilişsel azaltır iyileştirmede için potansiyel müdahaleleri değerlendirmek için yeteneği sonuçta biliş sıkı kantitatif değerlendirmeler taahhüt yeteneğine bağlıdır.

Kranial Radyoterapi Yarattığı Bilişsel Azaltır nicel

Kuru toprak Barnes labirent yaygın tepki hafif caydırıcı uyaranlara mekansal navigasyon yeteneği ölçmek için kullanılır. Ardışık gün boyunca, kontrol grubuna performans (kaçış kafes bulmak için, örneğin gecikme), normal öğrenme ve hafıza göstergesi, geliştirir. Sıçanlar ve fareler arasındaki farklar burada ayrıntılı cihaz ve yöntem değişiklikleri gerektirmektedir.

Küçük ve Büyük Kemirgen Modelleri ile Barnes Labirent Test Stratejileri

Motor becerileri, kapsamlı davranış testi dövülmesinin ruh — sosyal etkileşim, depresyon ve anksiyete gibi — ve biliş ateş ile ilgili davranış değişiklikleri farelerde tekrar tekrar değerlendirilmesi için tasarlanmıştır.

Motor becerileri, ruh hali ve biliş farelerde tekrar tekrar değerlendirilmesi için bir davranış Test pil

Burada, Alzheimer hastalığı model farelerin öğrenme ve hafıza yeteneğini değerlendirmek ve bunları tedavi etmek için manuel akupunktur etkisini değerlendirmek için Morris su labirent testleri yapmak için bir protokol açıklanmıştır.

Morris Su Labirenti Kullanarak Alzheimer Hastalığı Fare Modelinde Öğrenme ve Hafıza Yeteneğinin Analizi

Burada, yenidoğan farelerde hipoksiyi indüklemek için değişen oksijen konsantrasyonlarına sahip kontrollü ortamlarda vererek bir protokol sunuyoruz. Doğumda oksijen varyasyonlarına maruz kalan fare modelleri, otizm gibi davranışsal fenotipik değişikliklerin indüksiyonunda yer alan miRNA'ların ekspresyonunu kalıcı olarak değiştirmiştir.

Hipoksi, farelerde otizm spektrum bozukluğunun mendel dışı kalıtımında yer alan miRNA seviyelerini değiştirir

Sekiz kollu radyal su labirenti, deneklerin kaçış platformlarını bulmak için ekstra labirent ipuçlarını kullanmalarını gerektirerek referans ve çalışma belleği performansını aynı anda değerlendirmek ve kara tabanlı radyal kol labirent tasarımlarında gözlemlenen sınırlamaları gidermek için tasarlanmıştır.

Yenidoğan Beyin Hasarını Takiben Çalışma ve Referans Belleğini Değerlendirmek için Sekiz Kollu Radyal Su Labirentinin Kullanımı

Öğrenin, Alzheimer hastalığı fare modelinde Morris su labirenti protokolü ile bilişsel bozuklukları değerlendirmeyi. Bu yöntem, stresi azaltmak için alıştırma ve gizli platform denemeleri kullanır.

Morris Water Maze Testi: Fare Gerilme ve Test Ortamı için Optimizasyon

Daha fazla video keşfet