Teton Sisteminin Kullanımı Moleküler Mekanizmalar Zebra balığı Yenilenme Eğitim için

Bu prosedürün genel amacı, bu videodaki yenilenen kuyruk yüzgecinde gösterildiği gibi koşullu dokuya özgü gen ekspresyonunu elde etmek için zebra balığında işlevsel bir TED sistemi kurmaktır. Bu, ilk olarak, ilgilenilen dokuda camgöbeği ile etiketlenmiş bir tetrasiklin ile indüklenebilir transkripsiyonel aktivatörü eksprese eden Tet aktivatör transgenik hatları ve Tet'e duyarlı elemanların kontrolü altında ilgilenilen bir ype tag geni içeren Tet yanıtlayıcı hatları üretilerek gerçekleştirilir. Daha sonra, Tet aktivatörü, Tet yanıtlayıcı çift transgenik balıkların spesifik kombinasyonları kurulur.

Daha sonra dokuya özgü Tet yanıtlayıcı transgen ekspresyonu, doksisiklin uygulaması yoluyla indüklenir. Son olarak, Tet yanıtlayıcı transgen ekspresyonu, burada yüzgeç rejenerasyonlarının doku kesitleri hazırlanarak doğrulanır. Sonuç olarak, dokuya özgü Tet yanıtlayıcı transgen ekspresyonunu görselleştirmek için immünofloresan kullanılır.