Name: Subnormothermic Makine Perfüzyon Yoluyla Fonksiyonel İnsan Karaciğer Koruma ve Kurtarma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-27T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: Keşfedin, insan karaciğerinin subnormotermik makine perfüzyonu ile korunması ve işlevsel kurtarılması yöntemini. Bu teknik, organın metabolik iyileşmesini ve canlılığını değerlendirmeyi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ABD Ulusal Sağlık Enstitüleri Finansman, CIMIT Projesi No. 12-1732 ve minnetle kabul edilmektedir Çocuklar için Shriners Hastaneler (R01EB008678, R01DK096075, R01DK084053, R00DK088962 ve F32 DK103500 verir). Biz minnetle bu işi desteklemek için New England Organ Bankası kabul etmek istiyorum.

insan dokusunun kullanılması kurumsal inceleme kurulu (KİK) veya eşdeğeri tarafından gözden geçirilmelidir. Burada açıklanan çalışma onaylanmış ve Massachusetts Genel Hastanesi Kurumsal Değerlendirme Kurulu (No 2011P001496) tarafından muaf ilan edildi. 1. Çözüm hazırlanması <ol><li> Aseptik Tablo 1&#39;de belirtildiği gibi kırmızı-ücretsiz Williams&#39;ın &#39;orta E fenol için takviyeleri ekleyin. Çözelti kullanılmadan önce taze olarak hazırlanması gerekir. İnsülin kullanımdan hemen önce ilave edilmelidir. </li></ol> Karaciğer 2. Geri Tablosu Hazırlama <ol><li> Steril, drape yüzeyi üzerinde bir buz dolu bir organ kase yerleştirin. Soğuk muhafaza solüsyonu torbaya bırakarak, kutudan karaciğer çıkarın. Çoğunlukla batık karaciğer tutun. </li><li> Aort yama uzak yer alacak hepatik arter (HA), belirleyin. Metzenbaum makas kullanarak uzunluğu boyunca çeşitli kesim dalları ortaya çıkarmak için serbest arter disseke. Dikkatle dissect arterin tüm uzunluğu karaciğeri besleyen bir gemi kesilmesinin önlemek için. Kesmek veya görünür bir ucunu yoksa dalları kravat etmeyin. </li><li> Kabın boyutuna bağlı olarak, boyut 0 dan 4-0 arasında ipek sütür kullanılarak karaciğer temin tüm atardamar dalları bağlayın. 7-0 prolen bir dikiş ile arter delikler kravat çok kısa ya da yakın şube. Kravat ve çölyak gövde kökenlerine yakın dalak ve sol gastrik arterler kesti. </li><li> Yama altında doğrudan çölyak gövde keserek aort düzeltme ekini kaldırmak. Aort kanülü kullanılarak çölyak gövde cannulate. </li><li> Portal ven (PV) belirlenmesi ve açık açık ücretsiz teşrih. Herhangi bir şubesi kapalı kravat ve boyutu 24 boru hazırlanan segment PV cannulate. </li><li> Ven kendisi kesmeden, suprahepatik vena kava diyaframın bölümleri kaldırın. Doğrudan Organ odasına vena kava drene Çıkışlar. </li><li> 2 tam çevresi ti Cutssue örnekleri koledok ucundan (2-3 mm uzunluk); ek (-80 ° C&#39;de saklayın) sıvı azot içinde bir dondurma ve sırasıyla, doku ve histolojik analiz için% 10 tamponlu formalin içine diğer saklayın. Damar kanül ve membran oksijenatör borudan yapılmış bir drenaj borusu ile ortak safra kanalı cannulate. </li><li> Belirleyin ve 0 ipek kravat ile kistik kanal Arter. sistik kanal koledok ve safra kesesi arasında bulunur. </li><li> Tüm havayı kaldırarak Ringer (LR) solüsyon ve prime boru buz soğuk çanta, ayarlanmış gömme boru bağlayın. </li><li> Yavaş damlamaya gömme boru akış regülatörü ayarlayın. Portal ven kanül aynı hizada boru bağlamadan önce, hilusta de parmakları ile portal ven tıkayan ve portal ven havayı çıkarmak için gömme ile kanül ve ven doldurun. Aşırı basınç önlemek için soğuk yıkama sırasında çantası karaciğer yüksekliği boyunca fazla 20 cm yükseltmesine etmeyinven. </li><li> Floş kısaca sırasında düşük noktada PV tıkamak. Kaçakları için PV inceleyin. Yukarıda tarif edildiği gibi kap dal ayrılır ve kapatılabilir. Buz soğukluğunda LR 2 L bir toplam PV ile karaciğer yıkayın. </li><li> Tekrar LR 1 L ile HA için 2.10, 2.11 adımları. </li></ol> 3. Hazırlama SNMP Sistemi <ol><li> Başbakan Organ kaseye perfüzat (21 ° C) 2 L ekleyerek ve başbakan boru cihazı başlayarak perfüzyon cihazı. 21 ° C sıcaklık ayarı, perfüzyon hazırlanmak için cihazın talimat izleyin. 3 mmHg ve sırasıyla PV ve HA, 30 mmHg basıncı ile başlayın. Gaz tankı açın ve 3 l / dk&#39;lık bir akış ayarlanır. </li><li> Örnek limanlarından 0.3 ml örnek çizim ve üreticinin talimatlarına göre kan gazı analizi makinede çalışan HA ve PV girişi hem de kan gazı örneği alın. Yeterli oksijenasyonu onaylayın (pO 2&gt; 700 mmHg) ve pH (7.35-7.45). </li><li> Bağlı olan karaciğer, -80 ° C&#39;de, bir eppendorf tüpüne ve mağaza 0 ölçüm = itibariyle perfüzat içindeki bir 1.0 ml lik bir numuneyi almadan önce. Tek-kenarlı çelik bıçak kullanarak karaciğer iki ± 250 mg kama biyopsi kesin; Snap (-80 ° C&#39;de mağaza) sıvı azot içinde bir dondurma ve% 10 tamponlu formalin diğer saklayın. Perfüzyon önce karaciğer tartılır. </li></ol> 4. İnsan Karaciğer Perfüzyon <ol><li> Cihaza karaciğer aktarın. Adım 2.10 olarak PV havayı çıkardıktan sonra, PV kanül PV girişi bağlayın. Benzer bir şekilde HA bağlayın. Set PV 3 ve 30 mmHg HA basıncı. Karaciğer neredeyse Perfüzat tarafından batık edilmelidir. Dehidratasyonu önlemek için ıslak steril gazlı bez ile, akış gemileri de dahil olmak üzere, herhangi bir kuru yüzeyleri Kapak </li><li> Bir toplama kabına safra boru drenaj edelim. O safra çalışmasına izin vermek için safra drenaj açılış karaciğer düzeyinde olduğundan emin olun veya daha düşükserbestçe ut. </li><li> Karaciğer 21 ° C&#39;ye ısıtıldı sonra hedef akış hızları sırasıyla 275-325 ml / min.kg ve PV 50-100 ml / min.kg ve HA bulunmaktadır. Her karaciğer perfüzyon farklı tepki beri, ilk dakika boyunca yakından takip akışı. Artırın veya hedef debileri ulaşmış değilse gemilerin ya üzerindeki baskıyı azaltmak. HA 50 mmHg ve üzerinde PV 5 mmHg aşmayın. </li><li> Örnekler araştırmacılar tercih karaciğer dokusu, perfüzat safra alınabilir. Biz perfüzyon sırasında en azından Aşağıdaki örnek toplama rejimi tavsiye ederiz. <ol><li> Doku biyopsileri, n = 2 x 250 mg, her saat. Depolama: -80 ° C, uzun vadede sıvı azot ve mağaza tane dondurma oturtun. Buna ek olarak, önceki ve perfüzyon sonra başka bir biyopsi almak ve% 10 tamponlu formalin içine sabitlemek (n = 1) </li><li> Perfüzat örnekleri, n = 2 x 1 mi, ilk bir saat için her 15 dakikada bir ve daha sonra her 30 dakikada. PV inf örnekleri BeraberlikDüşük numune noktası. Depolama: -80 ° C, uzun vadeli. </li><li> PV ve HA girişi ve vena kava çıkışı Kan gazı analizi. n = 3 x 0.3 mi, 30 dakikada. PV ve HA örnek limanlarından hem örnekleri çizin. Damar içine bir şırınga takarak vena kava 0.3 ml örnek çizin ve kan gazı analizörü çalıştırmak doğrudan. Yeterli oksijenasyonu ve pH sağlamak için çıkışını kullanın. </li><li> Safra üretimi, n = 1 x 1 mi, her saat. Görme safra üretimi her saat ölçmek ve toplama kabından bir örnek almak. Örnekleme sonra kabı yenileyin. Depolama: Kuru buz ve -80 ° C uzun dönem. </li></ol></li><li> 3 saat boyunca perfüzyon devam edin. Basınç, pH ve oksijenasyonu İzleme ve genelinde örnek alma. Perfüzat sodyum bikarbonatın ilave edilmesi ile de pH ayarlayın. </li><li> Karaciğer perfüze edilirken perfüzyon sonunda nihai numune almak. Karaciğer ayırın ve safra kanalı kanül kaldırın. 2 sonrası perfüzyon doku örnekleri al° C ve% 10 tamponlu formalin içine -80 ° C&#39;de depolama için daha önce tarif edildiği gibi safra kanalı. </li><li> Uygun biyolojik tehlike bertaraf yönergeleri izleyerek insan karaciğer atın. </li></ol>

<ol><li>Merion, R. M., Pelletier, S. J., Goodrich, N., Englesbe, M. J., Delmonico, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donation+after+cardiac+death+as+a+strategy+to+increase+deceased+donor+liver+availability%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Donation after cardiac death as a strategy to increase deceased donor liver availability.</a> Ann Surg. 244 (4), 555-562 (2006).</li>
<li>Guarrera, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermic+machine+preservation+facilitates+successful+transplantation+of+%27orphan%27+extended+criteria+donor+livers%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Hypothermic machine preservation facilitates successful transplantation of 'orphan' extended criteria donor livers.</a> Am J Transplant. 15, 161-169 (2015).</li>
<li>Dutkowski, P., Schlegel, A., de Oliveira, M., Müllhaupt, B., Clavien, P. -A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HOPE+for+human+liver+grafts+obtained+from+donors+after+cardiac+death%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">HOPE for human liver grafts obtained from donors after cardiac death.</a> J Hepatol. 60 (4), 765-772 (2013).</li>
<li>Dutkowski, P., Clavien, P. -A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Solutions+to+Shortage+of+Liver+Grafts+for+Transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Solutions to Shortage of Liver Grafts for Transplantation.</a> Br J Surg. 101 (7), 739-774 (2014).</li>
<li>Vogel, T., Brockmann, J. G., Friend, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex-vivo+Normothermic+Liver+Perfusion%3A+An+Update%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Organ+Transplant%22%5BJournal%5D)">Ex-vivo Normothermic Liver Perfusion: An Update.</a> Curr Opin Organ Transplant. 15 (2), 167-172 (2010).</li>
<li>Monbaliu, D., Brassil, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Machine+Perfusion+of+the+Liver%3A+Past%2C+Present%2C+and+Future%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Organ+Transplant%22%5BJournal%5D)">Machine Perfusion of the Liver: Past, Present, and Future.</a> Curr Opin Organ Transplant. 15 (2), 160-166 (2010).</li>
<li>Matsuno, M., Uchida, K., Furukawa, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+Machine+Perfusion+Preservation+of+Liver+Grafts+From+Donation+After+Cardiac+Death%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Impact of Machine Perfusion Preservation of Liver Grafts From Donation After Cardiac Death.</a> Transplant Proc. 46 (4), 1099-1103 (2014).</li>
<li>Schlegel, A., Dutkowski, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+hypothermic+machine+perfusion+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Int%22%5BJournal%5D)">Role of hypothermic machine perfusion in liver transplantation.</a> Transplant Int. , (2014).</li>
<li>Op den Dries, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+normothermic+machine+perfusion+and+viability+testing+of+discarded+human+donor+livers%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Ex vivo normothermic machine perfusion and viability testing of discarded human donor livers.</a> Am J Transplant. 13, 1327-1335 (2013).</li>
<li>Bruinsma, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibiotic+prophylaxis+in+%28sub%29normothermic+organ+preservation%3A+In+vitro+efficacy+and+toxicity+of+cephalosporins%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Antibiotic prophylaxis in (sub)normothermic organ preservation: In vitro efficacy and toxicity of cephalosporins.</a> Transplantation. 95 (8), 1064-1069 (2013).</li>
<li>Post, I. C., Dirkes, M. C., Heger, M., Bezemer, R., van't Leven, J., van Gulik, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+flow+and+pressure+management+in+machine+perfusion+systems+for+organ+preservation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Optimal flow and pressure management in machine perfusion systems for organ preservation.</a> Ann Biomed Eng. 40 (12), 2698-2707 (2012).</li>
<li>Post, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+cell+preservation+at+hypothermic+to+normothermic+conditions+using+clinical+and+experimental+organ+preservation+solutions%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Endothelial cell preservation at hypothermic to normothermic conditions using clinical and experimental organ preservation solutions.</a> Exp Cell Res. 319 (17), 2501-2513 (2013).</li>
<li>Klein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+Donation+and+Utilization+in+the+United+States%2C+1999-2008%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Organ Donation and Utilization in the United States, 1999-2008.</a> Am J Transplant. 10 (4), 973-986 (2010).</li>
<li>Jay, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Increased+Costs+of+Donation+After+Cardiac+Death+Liver+Transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">The Increased Costs of Donation After Cardiac Death Liver Transplantation.</a> Ann Surg. 251 (4), 743-748 (2010).</li>
<li>Seehofer, D., Eurich, D., Veltzke-Schlieker, W., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biliary+Complications+After+Liver+Transplantation%3A+Old+Problems+and+New+Challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Biliary Complications After Liver Transplantation: Old Problems and New Challenges.</a> Am J Transplant. 13, 253-265 (2013).</li>
<li>Morrissey, P., Monaco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donation+After+Circulatory+Death%3A+Current+Practices%2C+Ongoing+Challenges+and+Potential+Improvement%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Donation After Circulatory Death: Current Practices, Ongoing Challenges and Potential Improvement.</a> Transplantation. 97 (3), 258-264 (2014).</li>
<li>Verdonk, R., Buis, C., Porte, R., Haagsma, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biliary+complications+after+liver+transplantation%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Scand+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Biliary complications after liver transplantation: A review.</a> Scand J Gastroenterol. 41, Suppl 243. 89-101 (2006).</li>
<li>Pine, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+Transplantation+Following+Donation+After+Cardiac+Death%3A+An+Analysis+Using+Matched+Pairs%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">Liver Transplantation Following Donation After Cardiac Death: An Analysis Using Matched Pairs.</a> Liver Transpl. 15 (9), 1072-1082 (2009).</li>
<li>Sutton, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Criteria+for+viability+assessment+of+discarded+human+donor+livers+during+ex+vivo+normothermic+machine+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Criteria for viability assessment of discarded human donor livers during ex vivo normothermic machine perfusion.</a> PLoS One. 11, e110642(2014).</li>
<li>Bruinsma, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subnormothermic+Machine+Perfusion+for+Ex+Vivo+Preservation+and+Recovery+of+the+Human+Liver+for+Transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Subnormothermic Machine Perfusion for Ex Vivo Preservation and Recovery of the Human Liver for Transplantation.</a> Am J Transplant. 14, 1400-1409 (2014).</li>
<li>Bruinsma, B. G., Yarmush, M. L., Uygun, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organomatics+and+organometrics%3A+Novel+platforms+for+long-term+whole-organ+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Technology%22%5BJournal%5D)">Organomatics and organometrics: Novel platforms for long-term whole-organ culture.</a> Technology. 02 (1), 13-22 (2014).</li>
<li>Berendsen, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simplified+subnormothermic+machine+perfusion+system+restores+ischemically+damaged+liver+grafts+in+a+rat+model+of+orthotopic+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Res%22%5BJournal%5D)">A simplified subnormothermic machine perfusion system restores ischemically damaged liver grafts in a rat model of orthotopic liver transplantation.</a> Transplant Res. 1 (1), 6(2012).</li>
</ol>

Dr. Uygun, K Uygun ve Yarmush Bu çalışmada (WO / 2011/002926), ve Dr alakalı bir bekleyen patent mucitleri BE. Uygun, K Uygun ve Yarmush Bu çalışmada (WO 2011 / / 35223) alakalı bir bekleyen patent mucitleri BE. Dr. K Uygun ve Bruinsma bu işle ilgili bir geçici patent uygulaması var. Dr K Uygun ve BE Uygun Organ Çözümleri mali ilgi var, bir şirketin organ koruma teknolojisi geliştirilmesi üzerinde duruldu. Dr K Uygun ve Uygun&#39;un en faizler, faiz politikaları onların çatışma doğrultusunda MGH ve Ortakları HealthCare tarafından yönetilen BE.

Iskemi sırasında yaralanan ciğeri kurtarmak için bir girişim soğuk depolama bir süre sonra kullanılabilir bir SNMP sistemi geliştirdi. Subnormothermic makine perfüzyon geleneksel soğuk depolama, yanı sıra hipotermik ve normotermik makine perfüzyon yöntemlerine bir alternatif sunuyor. Çeşitli farklı sistemler var; tüm farklı avantaj ve dezavantajları 3,9,20 sunuyoruz. SNMP 21 metabolik oksijen gerektirdiği gibi, bir oksijen taşıyıcı olmadan perfüzyon sağlar ° C Perfüzat aktif oksijenasyonu tarafından karşılanmaktadır. Subnormothermic koşullarda düşmesine karşın, metabolizma önemli ve besin açısından zengin perfüzyon solüsyonu desteği gerektirir. Bu tür Belzer makine perfüzyon çözeltisi gibi geleneksel perfüzyon için solüsyonlar, bileşim içinde, genel olarak en az ve Soğuk perfüzyon için tasarlanmıştır. Williams Orta E yıllardır bir hepatosit kültür ortamı olarak kullanılabilir, ve c içermemektedirSıcak ex vivo koşullar altında, özellikle de hücre fonksiyonunu desteklemek için evrensel omponents. Makine perfüzyon sırasında yapılan ölçümler organ fonksiyonu olarak yansıtıcı olmaktadırlar. Böyle safra üretimi ve oksijen alımı gibi doğrudan gözlemlenebilir parametreler karaciğer nakli öncesi değerlendirmek için kullanılabilecek gerçek zamanlı ölçümleri vardır. Benzer şekilde, hücresel yaralanma ve iskemi (K +, laktat sürüm) belirteçleri perfüzyon çözeltisi doğrudan ölçülebilir ve organ fonksiyonları 20 göstergesi olabilir. Makine perfüzyon tekniği daha geliştirir ve daha yaygın klinik uygulama elde gibi, ex vivo fonksiyon ve klinik sonuç arasında doğru ilişki yapılabilir ve perfüzyon parametreleri nakli veya marjinal kaliteli ciğeri reddetmek için kararlar yardım yararlı olacaktır. Ayrıca, bakım analitik araçlar peşin noktası olarak, daha sofistike analizler doğrudan perfu makine boyunca kullanılabilir olacaksion 21. Bu çalışmada biz karaciğerleri histoloji ve ALT salınımı ile yansıyan, karaciğer minimal yaralanma ile SNMP sisteminde desteklenen edilebileceğini göstermektedir. Karaciğerin fonksiyonel iyileşme en iyi karaciğer canlılığı için ilişkili olduğu gösterilmiştir ve hayvan modellerinde nakli başarı kuvvetle düşündüren olan ATP tarafından yansıtılır 22. Ex vivo ve karaciğer greftlerinin nakil öncesi kurtarma donör önemli bir genişleme sağlayacak Karaciğer havuzu, arz ve nakli donör karaciğerinin talep arasındaki farkı düzeltme.

Karaciğer transplantasyonu onlarca son dönem karaciğer hastalığı muzdarip hastaların binlerce tek küratif tedavi yöntemidir. Başarılı bir şekilde nakletmenin, bu graft hızlı bozulmasını önlemek için gerekli olan alıcı implante zamanına kadar donörden temin edilir zaman karaciğer en iyi şekilde korunabildiği kolaylaştırmak. Karaciğer korunması için güncel standart &#39;statik soğuk hava &quot;olarak adlandırılmaktadır: Karaciğer ve böylece karaciğer metabolizmasını azaltma ve iskemi zararlı etkileri yavaşlatan bir buz-soğuk muhafaza çözeltisi içinde soğutulur. Bu soğuk hava deposu tekniği başarılı transplantasyon için izin olmasına rağmen, böyle sıcak iskemi veya yağlanma gösterisi alt hasta tarafından zarar DCD organları gibi marjinal kalitede organları 1 çıktıları. Kanıt hızla genişleyen gövde alternatif koruma yöntemi olarak karaciğer greft bu ex vivo makine perfüzyon can potansiyel im varBu marjinal organların 2,3 için sonuçları kanıtlamak. Karaciğer transplantasyonu, kendi başarısının kurbanı haline gelmiştir. Çok daha hasta mevcut karaciğerleri vardır daha nakli için sevk edilir ve her yıl binlerce ABD&#39;de bekleme listesinde ölür. Donör karaciğer yetersizliği gerçekliği ve muhtaç alıcılar için optimal kalite karaciğer greft artan kullanımı göz önüne alındığında, yaygın implantasyon öncesi karaciğer greft ex vivo makine perfüzyon karaciğer transplantasyonu bir paradigma kayması sözünü tuttuğu tutulur. Son yıllarda 4-8 bu konuda araştırma ilgi belirgin bir artış olmuştur. Çeşitli Avrupa ve Kuzey Amerika merkezlerinde hipotermik makine perfüzyon fizyolojik sıcaklıklarda bir klinik giriş 8 ve normotermik makine perfüzyon son zamanlarda atılan insan karaciğerinin uygulanmış ve klinik kullanım yanı sıra 9 tercüme ediliyor yaptı.Sürekli optimizasyon Optimum perfüzyon 10-12 parametreleri tanımlar ise kapsamlı gelişme, çeşitli protokollerin gelişmesine yol açmıştır. Marjinal kaliteli greft kullanımı daha fazla son on 13 üzerinden 10 kat artmıştır. Karaciğer korunması için mevcut standart (statik soğuk depo) ile karşılaştırıldığında, ex vivo makine perfüzyon organı havuzu çok ihtiyaç duyulan genişleme neden ve potansiyel transplantasyon sonrası komplikasyonların insidansı azalma hepsi çok sayıda potansiyel yararları sağlar. Özellikle şu anda naklinden sonra optimal kalite karaciğer greft veba safra komplikasyonlar önemli bir konu 14-18 kalır. Subnormothermic koşullarda Makine perfüzyon bir zaman penceresi nakli 19 uygunluğuyla objektif greft fonksiyonunu değerlendirmek için sağlar. Karaciğer, bir ex vivo devrede perfüze edilirken hem perfüzyon birnd perfüzyon sırasında üretilen safra, organ fonksiyon belirteçlerinin ölçümü için numune alınabilir. Bu şekilde mevcut kriterler altında nakli için atılır karaciğerleri objektif nakli için uygunluk olarak değerlendirilebilir &#39;ciddi tehlikeye&#39;. Bu birçok organı transplantasyon için kullanılması için Canlılık değerlendirme potansiyel sağlar. Makine perfüzyon bir eşit güçlü yarar onarım ve sıcak / soğuk iskemi zarar görmüş karaciğer gelişmedir. ATP sıcak ve soğuk iskemi sonrasında sırasında çok hızlı tükendiği ve önceki karaciğer 20 implantasyonu makine perfüzyon bir dönemde repleted edilebilir. Karaciğer, enerji mağazaları ve metabolik devlet doldurulan, ön şartlandırılmış ve alıcı implantasyon sonrası reperfüzyon hasarı zararlı etkileri daha hazırlıklı. Bu çalışma, insan karaciğer graf ex vivo makine perfüzyon için bir yöntem tarif ederteknik ve ex vivo makine perfüzyon yararlı etkileri hem çalışmak isteyen araştırmacılar için faydalı olacaktır laboratuvarda, ts. Biz transplantasyon için reddedildi ve ardından araştırma amaçlı tahsis insan donör karaciğerinin faydalanmak. Standart karaciğer tedarik tekniği beyin ölü donörlerden (DBD) veya başka bir yerde 20 daha detaylı olarak tarif dolaşım ölüm vericilerden (DCD), dolaşım tutuklanmasından sonra aort kros-klemp aşağıdaki karaciğer in situ arteriyel floş de içerir. Ayrıca, karaciğer buz vericinin karın boşluğunu doldurarak tedarik sırasında soğutulur. Gömme çözüm tercihleri ​​Wisconsin veya Histidin-triptofan-ketoglutarat (HTK) çözeltisi Üniversitesi kullanarak alımlarda çoğunluğu ile, bölgeler arasında değişir. Portal ven bir ek arka-tablo floş artık kan arınma geliştirir. Karaciğerleri genellikle aort segmenti sur bırakarak tedarik edilirÇölyak gövde yuvarlama. safra kesesi safra aspire edilir, kazıma ve safra kanalı temizlendi. karaciğer buz soğuk koruma solüsyonu içeren steril torbalarda paketlenmiş ve belirlenen kutu veya soğutucularda taşınmaktadır. Temsilcisi sonuçları için sıcak ve soğuk iskemi süresi sırasıyla 60 dakika ve 12 saat, sınırlı olmalıdır. İnsan organları teslim sırasında bulaşıcı patojenler için rutin serolojik tarama rağmen, standart önlemler, insan organlarının elde edilen numuneler, ve herhangi bir atık ürünler alınmalıdır. Protokol burada bir ticari olarak temin edilebilir karaciğer perfüzyon cihazı kullanılarak subnormothermic makine perfüzyon tarif etmektedir. Böyle bir cihazın kullanılması klinik ortamda ve araştırma grupları ve transplant merkezleri arasında farklı protokoller ve cihaz ayarları çapraz-doğrulama daha hızlı çeviri için izin verir.

<table><tbody><tr><td>Karaciğer Yardımı perfüzyon cihazı</td><td>Organ Yardımı B.V.</td><td>Karaciğer Yardımı</td><td></td></tr><tr><td>Karaciğer Yardımı tek kullanımlık set</td><td>Organ Yardımı BV</td><td>Karaciğer Yardımı tek kullanımlık</td><td></td></tr><tr><td>Williams' Orta</td><td>E Sigma</td><td>W1878 ve ndash; 6x500ml</td><td></td></tr><tr><td>İnsülin</td><td>Eli Lilly & Co</td><td>Humulin R U-100</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin / Streptomisin 5.000 U / ml</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>15070-063</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamin</td><td>Invitrogen</td><td>25030-156</td><td></td></tr><tr><td>Hidrokortizon</td><td>MGH eczane</td><td>7750500</td><td></td></tr><tr><td>Karbojen gaz tankı% 95 O 2 % 5 CO 2 </td> <td>Airgas</td><td>ZO2OX9522000043</td><td></td></tr><tr><td>Özel gaz regülatörü</td><td>Airgas</td><td>Y11244D580</td><td></td></tr><tr><td>Laktasyonlu Ringer' s çözeltisi</td><td>Baxter</td><td>2B2324X</td><td></td></tr><tr><td>%10 nötr tamponlu formalin</td><td>Fischer Scientific</td><td>316-155</td><td></td></tr><tr><td>Dişli Adson forseps</td><td>Roboz</td><td>RS-5234</td><td></td></tr><tr><td>Debakey doku forseps, 7.75", 2.25 mm</td><td>Roboz</td><td>RS-7562</td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum Makas 7" Kavisli SureCut Tungsten</td><td>Roboz</td><td>RS-6965SC</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo İğne tutucu 5.5 &ndash; 7 inç</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>0 siyah örgülü ipek sütürler</td><td>Ethicon</td><td>SA66G</td><td></td></tr><tr><td>4-0 naylon sütür, Nurolon RB1</td><td>Ethicon</td><td>C554D</td><td></td></tr><tr><td>Kan gazı analiz makinesi</td><td>Siemens</td><td>RapidPoint 500</td><td></td></tr><tr><td>Terazi ölçeği</td><td>Cole Parmer</td><td>EW-10000-12</td><td></td></tr><tr><td>Basınç gösterge kutusu</td><td>Medtronic</td><td>66000</td><td></td></tr><tr><td>Tek kullanımlık basınç gösterge setleri</td><td>Medtronic</td><td>61000</td><td></td></tr><tr><td>El tipi termokupl termometre ve probu</td><td>Cole Parmer</td><td>EW-91500-04 ve EW-08516-55</td><td></td></tr><tr><td>Meşe palamudu uçlu kap kanülü, 4 mm</td><td>Medtronic</td><td>30005</td><td></td></tr><tr><td>Sulama seti gömme boru</td><td>Hospira</td><td>06543-01</td><td></td></tr><tr><td>Karıştırma kabı, 4 L</td><td>Cole Parmer</td><td>EW-07300-40</td><td></td></tr></tbody></table>

subnormothermic makine perfüzyon yoluyla fonksiyonel İnsan karaciğer koruma ve kurtarma

Functional Human Liver Preservation and Recovery by Means of Subnormothermic Machine Perfusion

Şu anda nakil için ciddi bir karaciğer grefti sıkıntısı var. Donör karaciğer havuzunu genişletmek için yeni organ koruma tekniklerine ihtiyaç vardır. Donör karaciğer greftlerinin makine perfüzyonu, karaciğerlerin geleneksel soğuk depolanmasına bir alternatiftir ve donör organ havuzunu genişletmek için bir yöntem olarak çok umut vaat etmektedir. Yakın zamanda insan karaciğerlerinin subnormotermik makine perfüzyonunun potansiyel faydasını tanımladık. Makine perfüze karaciğerler, doku ATP seviyelerinde iyileşme ve restorasyon gösterdi. Ek olarak, karaciğer greftlerinin subnormotermik sıcaklıklarda makine perfüzyonu, bir karaciğerin transplantasyon için işlevselliğinin ve uygunluğunun objektif olarak değerlendirilmesine olanak tanır. Bu yollarla, daha önce yetersiz kaliteleri nedeniyle atılan çok sayıda karaciğer, makine perfüzyonunun restoratif etkileri ile kurtarılabilir ve nakil için kullanılabilir. Burada bu subnormotermik makine perfüzyonu tekniğini ayrıntılı olarak açıklıyoruz. Araştırma için tahsis edilen insan karaciğer greftleri, hepatik arter ve portal ven yoluyla 21 ° C'de aselüler oksijenli bir perfüzat ile perfüze edilir.

Gözlem ve analizler bir dizi, akış oranları ve safra üretimi gibi doğrudan gerçek zamanlı gözlem de dahil olmak üzere, perfüzyon sırasında karaciğer üzerinde gerçekleştirilebilir; Böyle Perfüzat gaz analizi ve biyokimyasal Perfüzat analizi ve doku ve histolojik analiz de dahil olmak üzere numune toplama sonra yapılan post-hoc ölçümleri gibi gerçek zamanlı ölçümleri. Burada sözü Sonuçlar 22 perfüze insan karaciğerinden vardır. Karaciğerleri donör yaşı, aşırı sıcak iskemik süre, biyopsi sonuçları (steatoz, inflamasyon, fibrozis) ve lojistik nedenlerle dahil olmak üzere çeşitli nedenlerle nakli için reddedildi. 18 ciğeri beyin ölümünün ardından kalp ölümünden sonra temin ve 4 edildi. Her iki durumda da, donörler heparin 30,000 birim ile önceden muamele edilmiş ve in situ ve UW çözeltisi ile masaya temizlendi. Soğuk iskemik süresi ortalama 531 ± 237 (SD) dk ve ortalama sıcak iskemi süresi 27 ± 10 (SD) dk, hayatın geri çekilmesi ölçülenSoğuk floş destek. Gerçek zamanlı gözlem ve ölçümler post-hoc ölçümleri perfüzyon sonrasında ortaya ise, perfüzyon sırasında karaciğer değerlendirmek için de kullanılabilir. Gerçek zamanlı gözlemler Karaciğerden akış soğuk karaciğerde daha yüksek bir direncin bir sonucu olarak, hedef akış oranından daha düşük başlar. Hedef akışları genellikle karaciğer kez elde edilebilir HA üzerinde PV 3 mmHg ve 30 mmHg basınç kullanılarak 21 ısındıktan &#160; Perfüzyon (Şekil 1A) 60 dakika sonra ° C. Safra akım, genellikle perfüzyon 10 dakika içinde görülmektedir ve perfüzyon (Şekil 1B) sırasında sürekli olarak üretilir. Safra miktarı karaciğer kalitesine bağlıdır ve 18 ml / dak / kg, 0.3 ml / saat / kg karaciğere arasında değişir. Hatta daha istikrarlı ya da daha kısa sıcak iskemi süresi sonuçları artırırken uzun sıcak iskemik süre ile karaciğerlerinde, safra akışı, incelmek eğiliminde olacaktırsafra üretimi. Gerçek zamanlı ölçümleri Her iki deneysel amaçlar için gerekli kan gazı analizi ile perfüzat Doğrudan ve sık sık ölçüm yanı sıra muhafaza yeterli perfüzyon koşulları önemlisi oksijenlenme ve pH. Çözünmüş oksijen kısmi basıncı PV ve HA hem girişi üzerinde daha büyük 700 mmHg olmalıdır. Vena kava ölçülen Çıkışlar oksijen basıncı, genellikle artan oksijen alımını yansıtan, uzun perfüzyon azalır. T = 3 saat (Şekil 1C) 2,4-9,7 mi O2 / dk / kg perfüzyon başlangıcında, daha önce 13 tarif 0.5-2.2 mi O2 / dk / kg arasında değişmektedir olarak oksijen alım oranları hesaplanabilir. PH düşüşü esas olarak perfüzat laktat serbest bir sonucu olarak, ilk 30 dakika boyunca (Şekil 1D) görülmektedir. Bu% 8.4 sodyum bicarbo ile takviyesi tarafından desteklenenNate ve yaklaşık 90 dakika sonra, pH normal aralığı içine düşmektedir. Genel olarak,% 8.4 sodyum bikarbonat 30-50 mi gereklidir. Laktat konsantrasyonu, hızla ilk 15-30 dakika içinde artar, fakat ilk bir saat (Şekil 1E) sonra ı ölür başlar. Post-hoc ölçümleri ALT gibi karaciğer transaminaz Perfüzat ölçülebilir. İlk 30 dakika içinde ALT büyük bir artış genellikle iskemi (Şekil 1F) sırasında piyasaya sürüldü ALT arınma yansıtan görülmektedir. ALT sıcak iskemik süre 13 ile iyi bir korelasyon gösterilmiştir. Makine perfüzyon bir kurtarma enerji durumunu (Şekil 1G) yansıtan, ATP içeriğinize 2.8 kat artmıştır. H &amp; E histolojik analiz makinesi perfüzyon (Şekil 1 H, I) sırasında sürekli ek yaralanma ortaya koymaktadır. Bu protokolde önerilen biyopsi rejimi res için olduğunu belirtmek gerekirAraması amaçları ve klinik amaçlar için geçerli olmayabilir. <img alt="Şekil 1," src="/files/ftp_upload/52777/52777fig1.jpg" /> Şekil 1:. Makine perfüzyon sırasında insan karaciğerinde Değerlendirilmesi perfüzyonun (B) oksijen geliştirilmiş değeri oranı (OTH), girişi arasındaki farktan hesaplanmıştır (PV saat başına miktarı PV ve HA SNMP (A) boyunca, safra üretimi, içinden akış + HA) ve çıkış (vena kava), çizgiler perfüzat (F), ATP içine perfüzyon sırasında perfüzyon (C), pH ve laktat sırasında giriş ve çıkış kısmi oksijen basınçları (D, E), ALT salınımını göstermek kesintiye (H) ve sonra (I) &#39;perfüzyon önce karaciğer (54 yaşındaki DCD, 19 dakika sıcak iskemi, 559 dakika soğuk iskemi) saatlik biyopsi (G) ve H &amp; E lekeleri doku ölçülen içeriği. Sonuçlar ortalama ± SEM olarak sunulmaktadır. <a= &quot;https://www.jove.com/files/ftp_upload/52777/52777fig1large.jpg&quot; target = &quot;_ blank&quot; href&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için burayı tıklayınız.

Bu subnormothermic sıcaklığında (21 ° C), insan karaciğer greft ex vivo makine perfüzyon için bir yöntem tarif eder.

Subnormothermic Makine Perfüzyon Yoluyla Fonksiyonel İnsan Karaciğer Koruma ve Kurtarma

There is currently a severe shortage of liver grafts available for transplantation.  Novel organ preservation techniques are needed to expand the pool of ...

Bu prosedürün genel amacı, organın korunması, geri kazanımı ve değerlendirilmesi için insan karaciğerinin subnormal termik makine perfüzyonunu gerçekleştirmektir. Klinik öncesi araştırma ortamında bu işlem, öncelikle karaciğerin cihaza bağlanmaya hazırlanmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adımda makine perfüzyon sistemi hazırlanır, karaciğer bağlanır ve son adımda perfüzyon başlatılır.Makinede perfüze edilen karaciğer, subnormal termik bir durumda fonksiyonel olarak aktif hale gelecek ve safra üretecektir. Nihayetinde, perfüzyon sırasında karaciğerden toplanan örnekler, organın metabolik toparlanmasını ve fonksiyonunu incelemek amacıyla analiz edilebilir. Bu tekniğin, soğuk perfüzyon ve normal termik perfüzyon gibi mevcut koruma yöntemlerine göre temel avantajı, subnormal termik makine perfüzyonunun, vücut sıcaklığı perfüzyonunun yüksek metabolik taleplerini karşılama zorunluluğu olmadan karaciğerin fonksiyonel toparlanmasına ve canlılığının değerlendirilmesine olanak tanımasıdır.Bu tekniğin birçok yönü, başarılı bir şekilde tamamlanabilmesi için deneyim veya uygulamalı gösterim gerektirir. Örneğin, arter, ven ve kanal kanalının diseksiyonunu içeren karaciğerin arka masa hazırlığının nasıl yapılacağının gösterilmesi, önceden cerrahi eğitimi olmayan araştırmacılar için faydalı olabilir. Karaciğer teslim alındığında, steril örtülü bir yüzeye buzla doldurulmuş bir organ kabı yerleştirin ve karaciğeri, büyük ölçüde soğuk koruma solüsyonu torbasının içinde kalacak şekilde taşıma kutusundan çıkarın. Ardından, aortadan proper hepatik artere kadar karaciğere giden arteriyel besleme boyunca çeşitli dalları açığa çıkarmak için Metzenbaum makası kullanın.Ardından, görünür bir ucu olmayan dalları kesmeden veya bağlamadan, karaciğeri besleyen damarların kopmasını önlemek için arterin geri kalanını dikkatlice diseke edin. Arter izole edildiğinde, karaciğeri beslemeyen tüm arter dallarını bağlamak için sıfır ile dört sıfır boyutunda ipek süturlar kullanın. Splenik ve gastrik arterleri, çölyak trunkus üzerindeki çıkış noktalarına yakın yerden bağlayıp kesin.Çölyak trunkus çevresinden bir aort yaması kesin. Ardından, çölyak trunkusu kanüle etmek için bir arteriyel perfüzyon kanülü kullanın. Şimdi portal veni serbestçe disseke edin; vendeki tüm dalları bağlayın veya delikleri dikin ve bir portal ven perfüzyon kanülü ile kanüle edin.Venin kendisini kesmeden, diyaframın suprahepatik vena cava bölümlerini çıkarın. Ardından, ana safra kanalının ucundan iki ila üç milimetre uzunluğunda, tam çevre doku örnekleri kesin. Örneklere hassas bir şekilde işlem yapılmalıdır.Örneklerden birini şok dondurun ve negatif 80 °C'de saklamak üzere sıvı azot kullanın, diğerini ise %10 tamponlanmış formalin içinde saklayın. Ardından, ana safra kanalına bir damar kanülü yerleştirin ve küçük çaplı tüplerden yapılmış bir drenaj tüpü bağlayın. Sonrasında, sistik kanalı sıfır numara ipek bağ ile lige edin.Yıkama tüp setini buz gibi soğuk laktatlı Ringer çözeltisi torbalarına bağlayın ve havayı tahliye etmek için tüpleri doldurun. Yıkama tüpündeki akış regülatörünü yavaş bir sızıntı şeklinde ayarlayın ve damardaki havayı boşaltmak için portal veni hilumda oklüde edin. Şimdi, vene yerleştirilen kanülü yıkama çözeltisi ile doldurarak portal vendeki havayı tahliye edin; ven üzerinde aşırı basınç oluşmasını önlemek için torbayı karaciğer yüksekliğinin 20 santimetresinden fazla kaldırmamaya dikkat edin.Ardından karaciğeri, toplam iki litre buz gibi soğuk laktatlı ringer çözeltisi ile yıkayın. Yıkama sırasında, sızıntı olup olmadığını kontrol etmek için portal veni en alt noktadan kısa süreliğine kapatın ve ardından, karaciğer yıkanırken az önce gösterildiği gibi hepatik arter için yıkama işlemini bir litre çözelti ile tekrarlayın; organ havuzuna iki litre oda sıcaklığında profuse eight ekleyerek perfüzyon sistemini hazırlayın ve tüplerin doldurulması için cihazı başlatın. Sıcaklığı 21 degrees Celsius olarak ayarlayın.Ardından portal vene 3 mmHg ve hepatik artere 30 mmHg basınç ayarlayın. Karbogen gaz tankını açın ve akışı dakikada 3 litreye ayarlayın. Sonrasında, portal ven ve hepatik arter giriş örnekleme portlarından bir kan gazı örneği alın ve yeterli oksijenasyonu ve pH değerini doğrulamak için örnekleri üretici talimatlarına uygun olarak kan gazı analiz cihazında analiz edin.pH değerini gerektiği şekilde düzeltmek için sodyum bikarbonat veya hidrojen klorür kullanın. Ardından, karaciğer bağlanmadan önce, zaman sıfır ölçümü olarak perfüzatın bir mililitre örneğini toplayın ve -80 °C'de saklayın. Bu sırada karaciğerden, her biri yaklaşık 250 mg olan iki adet kama biyopsi örneği almak için tek ağızlı çelik bir bıçak kullanın.Bir örneği -80 °C'de saklamak için sıvı azot içerisinde şok dondurun ve diğerini %10 tamponlu formalin içerisinde sabitleyin. Perfüzyona başlamadan önce karaciğeri tartın, ardından organı cihazın organ haznesine aktarın ve kanüllerdeki havayı boşaltın. Az önce gösterildiği gibi.Kanüller yerleştirildiğinde, portal ven ve hepatik arter girişlerini uygun kanüllere bağlayın. Perfüzyona başlayın ve karaciğerin perfüzyon sıvısı tarafından tamamen çevrelendiğinden emin olun; giriş damarları da dahil olmak üzere tüm kuru yüzeyleri ıslak steril gazlı bezle kapatın. Dehidrasyonu önlemek için safra tüpünün bir toplama kabına boşalmasını sağlayın.Safranın serbestçe akmasını sağlamak için safra drenajının ağzının karaciğer seviyesinde veya daha aşağıda olmasına dikkat edin. Karaciğer 21 °C'ye ısıtıldığında, hedef akış hızlarını portal ven için dakikada kilogram başına 275 ila 325 mL ve hepatik arter için dakikada kilogram başına 50 ila 100 mL olarak ayarlayın. Perfüzyon sırasında, uygun şekildele perfüze edilen karaciğer dokusundan ve safradan örnekler alın.Basıncı, pH değerini ve oksijenasyonu izleyerek ve gerektiğinde sodyum bikarbonat ile pH'ı ayarlayarak perfüzyona üç saat boyunca devam edin. Perfüzyonun sonunda, son örnekleri toplayın, karaciğeri ayırın ve safra kanalı kanülünü çıkarın. Son olarak, az önce gösterildiği gibi safra kanalından iki adet perfüzyon sonrası doku örneği alın ve insan karaciğerini atın.Uygun biyotehlike atık bertaraf kılavuzları takip edilmelidir. Soğuk karaciğerdeki yüksek direnç nedeniyle; portal vende 3 mmHg ve hepatik arterde 30 mmHg basınç kullanılarak akış düşük seviyede başlar. Karaciğer, 60 dakikalık perfüzyonun ardından 21 °C'ye ısındığında hedef akış değerlerine genel olarak ulaşılabilir. Kan gazı analizi ile perfüzatın sık aralıklarla ölçülmesi, hem deneysel amaçlar hem de yeterli perfüzyon koşullarının sürdürülmesi için esastır.Örneğin, çözünmüş oksijen parsiyel basıncı, hem portal ven hem de hepatik arter girişinde 700 mmHg'den büyük olmalıdır. Buna karşın, vena cava'da ölçülen çıkış oksijen basıncı, artan oksijen alımını yansıtacak şekilde, daha uzun perfüzyonla birlikte genellikle azalmalıdır. Ayrıca, örneğin PERFU sekizinde hepatik transaminazlar da ölçülebilir.Perfüzyonun ilk 30 dakikasında genellikle alanin transaminaz veya LT düzeylerinde bir artış gözlemlenir ve perfüzyonun geri kalanında minimal bir artış daha görülür. Makine perfüzyonlu karaciğerlerde TP üretiminin daha ileri değerlendirilmesi, karaciğerin A TP içeriğinde, enerji durumunun toparlandığını yansıtan 2,8 katlık bir artışı ortaya koymaktadır. Ayrıca, h ve e histolojik analizi, prosedür sırasında meydana gelen herhangi bir ek hasar olmadığını göstermektedir.Bu prosedürün takip edilmesi, izole karaciğerin kapsamlı bir şekilde analiz edilmesine olanak tanıyarak hepatik fizyoloji ve patoloji hakkında benzersiz bilgiler sağlar. Bu videoyu izledikten sonra, vücut dışındaki fonksiyon değerlendirmesini kolaylaştırmak amacıyla, suberik makine perfüzyonu sırasında insan karaciğerinin nasıl muhafaza edileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

functional-human-liver-preservation-recovery-means-subnormothermic

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu tür yağlı karaciğerleri, yaşlı donörden greft veya kardiyak ölüm (DCD) sonra alınan karaciğerinin Marjinal greftler, sadece kötü konvansiyonel, soğuk statik depolama tahammül. Biz transplantasyon öncesinde marjinal karaciğer greft korunması, değerlendirilmesi, ve onarımı için subnormothermic ex vivo karaciğer perfüzyon yeni bir model geliştirdi.

Subnormothermic Tekniği<em&gt; Ex vivo</em&gt; Karaciğer Depolama, Değerlendirme Perfüzyon ve Marjinal Karaciğer Greft Onarımı

Burada, donör karaciğer greftlerinin oksijenli ex situ makine perfüzyonunu tanımlayan bir protokol sunuyoruz. Bu makale, makine perfüzyonu için karaciğer greftini temin etmek ve hazırlamak, perfüzyon sıvısını hazırlamak, perfüzyon makinesini hazırlamak ve karaciğer greftinin oksijenli normotermik makine perfüzyonunu gerçekleştirmek için adım adım bir protokol içermektedir.

Donör karaciğerleri Ex Situ Normotermik Makinesi Perfüzyonu

Önemli karaciğer donör kan olmadığını ve karaciğer bağış için ölçüt genişletilmiştir. Normothermic ex vivo karaciğer perfüzyon (NEVLP) değerlendirmek ve organ işlevini değiştirmek için geliştirilmiştir. Bu çalışma NEVLP bir fare modeli gösterir ve karaciğer koruma yaralanma azaltmak için pegile-katalaz, yeteneğini sınar.

Ex Vivo Normothermic karaciğer perfüzyon küçük bir hayvan Model

Burada açıklanan karaciğer normotermik makine perfüzyonunun (NMP) domuz modeli, NMP'yi bir koruma stratejisi, canlılık değerlendirmesi için bir araç ve organ onarımı için bir platform olarak incelemek için başarıyla kullanılabilir. Yüksek bir çeviri değerine sahiptir, ancak teknik olarak zorlu ve emek yoğundur.

Domuz Normomik İzole Karaciğer Perfüzyonu

Fare karaciğerleri için normotermik ex vivo karaciğer perfüzyonu (NEVLP) sistemi oluşturuldu. Bu sistem mikrocerrahide deneyim gerektirir ancak tekrarlanabilir perfüzyon sonuçlarına izin verir. Fare karaciğerlerini kullanma yeteneği, yeni perfüzyon katkı maddelerini tanımlamak için moleküler yolakların araştırılmasını kolaylaştırır ve organ onarımına odaklanan deneylerin yürütülmesini sağlar.

Normothermic Ex Vivo Karaciğer Makinesi Farede Perfüzyon

Bu protokol, donör karaciğerin korunması için değişken sıcaklık kontrollü Makine Perfüzyonu (MP) ve ardından ortotopik karaciğer nakli (OLTx) kullanan bir domuz modeli oluşturma metodolojisini ana hatlarıyla belirtir. Dolaşım ölümü (DCD) karaciğerinden sonra donör bağışı kullanarak OLTx'in başarı oranını teşvik etmeyi ve istikrarlı bir model oluşturmayı amaçlamaktadır.

Dolaşım Ölümü (DCD) Karaciğeri Sonrası Domuz Donunun Perfüzyon ve Ortotopik Karaciğer Nakli ile Korunması

Burada, klinik öncesi biyomedikal araştırmalarda daha erişilebilir, uygun maliyetli ve yinelemeli kullanım sağlayan, mevcut platformların yüksek maliyetinin ve sınırlı esnekliğinin üstesinden gelmek için tasarlanmış açık kaynaklı, değiştirilebilir bir normotermik ex vivo perfüzyon sistemi için bir protokol sunuyoruz.

Araştırmacı bilim adamları için tasarlanmış açık kaynaklı bir Normothermic perfüzyon sistemi

Intimal hiperplazi (İH) ve ven greft yetmezliği gelişimine yol açan mekanizmalar hala tam olarak anlaşılamamıştır. Bu çalışma kontrollü akış ve basınç altında, insan damarları serpmek için bir ex vivo sistemini anlatmaktadır. Ayrıca dış hasırlı verimliliği fıtığın gelişimi değerlendirildi sınırlamak için.

İnsan Safen Ven Prosedürü Ex vivo Perfüzyon ve Dış Takviye

Burada, melphalan ile izole karaciğer perfüzyonunun (IHP) nasıl gerçekleştirileceğine dair bir protokol sunuyoruz ve ayrıca uveal melanomun karaciğer metastazları için bir tedavi seçeneği olarak IHP'yi tartışıyoruz.

Uveal Melanom Karaciğer Metastazlı için bir tedavi olarak izole Karaciğer Perfüzyon

Şiddetli organ yetersizliği nakli için marjinal böbrek greft artan kullanımı sonuçlandı. Marjinal greftler, özellikle kötü soğuk depolama tahammül çünkü bu, alternatif depolama yöntemleri ilgi tetikledi. Normotermik ex vivo böbrek perfüzyon tekniği (NEVKP) transplantasyon öncesinde böbrek greft için yeni bir koruma yöntemi temsil eder.

Normotermik<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Böbrek Koruma Böbrek Nakli Perfüzyon önce greftler

Keşfedin, insan karaciğerinin subnormotermik makine perfüzyonu ile korunması ve işlevsel kurtarılması yöntemini. Bu teknik, organın metabolik iyileşmesini ve canlılığını değerlendirmeyi sağlar.

Subnormothermic Makine Perfüzyon Yoluyla Fonksiyonel İnsan Karaciğer Koruma ve Kurtarma

Daha fazla video keşfet