Name: İntravenöz Glikoz Tolerans Testi ile insan olmayan primatlarda Metabolik Durumu Karakterizasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-13T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 59 s
Description: Öğrenin, makak maymunlarında metabolik hastalık ilerlemesini karakterize etmek için intravenöz glikoz tolerans testi (IVGTT) protokolünü. Bu yöntem, diyabet ve insülin direnci tedavilerinin araştırılmasında değerli bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarlar DHMRI CLAS hayvan bakım personelinin güçlü bir destek kabul etmek istiyorum, Tesis Müdürü Sayın Daniel Peralta ve katılan veteriner Dr. Glicerio Ignacio, DVM MRCVS.

Butun hayvan prosedürleri, protokol 14-017 altında, Kuzey Karolina Araştırma Campus (NCRC) üzerinde yer alan David H. Murdock Araştırma Enstitüsü IACUC onaylı edildi, diyabet ve prediyabet / insülin direnci ve terapötik etkinliğinin bir insan olmayan üstün ırk modelinin karakterizasyonu geliştirmek insülin duyarlılığı ve metabolik fonksiyonu. 1. Hayvan Seçimi ve Çalışma Hazırlık <ol><li> aylık gıda alımı ve vücut ağırlığı kayıtlarına dayanarak Seç diyet ve kilo istikrarlı hayvanlar. Not: yiyecek alımı stabilize kadar iştah son bir azalma sergiledi hayvanlar, özelliği olmamalıdır. <ol><li> olgun hayvanlar için (&gt; 5-6 yıl), bedeni ay üst üste arasındaki ağırlıklar ilk maymun incelenmesi ve ağırlık dramatik değişim için metabolik durumunu değiştirmeden başka nedenler ekarte etmeden% 10&#39;dan fazla farklılık hayvanları seçmeyin. </li></ol></li><li> glukoz, insülin ve C-peptidleri içinde analitler, proteaz inhibitörü (Aprotinin ve DPP4I) K 2 EDTA numune toplama tüpleri hazırlayın. Not: DPP4I + Aprotinin kokteyli proteaz inhibisyonu geniş spektrumlu bir sağlar, bu ek analitler (glukagon, GLP-1) için gerekli olmalıdır. Ek analitler toplanan olmadığını durumunda, kan tüpleri Numune alımında tutarlılığı korumak için aynı şekilde hazırlanmalıdır. Bu yöntem için doğrulanmamıştır tahliller için alınan örnekler üreticinin önerilerine göre, ayrı ayrı toplanmalıdır. <ol><li> DPP4I 10 ml Aprotinin, liyofilize 100 mg karıştırılarak proteaz inhibitör kokteyli hazırlanır. Toplanan kan, her mililitre için her kan tüpüne Aprotinin + DPP4I karışımı 10 ul ekle. </li><li> olası tahsilat fazlalık her tüpe proteaz inhibitör kokteyli ilave 10 ul ekle. kullanılana kadar -20 ° C&#39;de muamele kan tüpleri saklayın. procedu sırasında ıslak buz üzerinde tüpler tutunyeniden 4 ° C &#39;de dönel. </li><li> Standart serum kimyası analiz için başlangıçta bir kan örneği toplamak için bir serum ayırıcı tüp kullanın. Tam kan sayımı (CBC) için, proteaz inhibitörleri olmadan standart K 2 EDTA kullanın. kan örnekleri sonrasında kısım plazma ve serum kullanın cryovials aşağı bükülmüş edilmiştir. </li><li> hayvan tanımlama, tarih, prosedür, timepoint ve örnek hacmi ile uygun kan tüpleri ve cryovials etiketleyin. Uygun deney için plazmada analiz (ler) ile birlikte cryovials etiketleyin. </li></ol></li><li> normal tuzlu su içinde 250 ml&#39;lik bir torbaya ml heparin 1.000 USP birim 0.15 ml enjekte ile heparinize edilmiş tuz akışı hazırlayın. 0.06 mg heparin / ml bir solüsyon elde edilir. örnekler arasında temizlenmesi için bir tuzlu su kilide Bu çözeltiye 60 ml - 40 çizin. sırasıyla infüzyon önce ve sonra dekstroz infüzyonu noktası yıkama için ayrı şırıngalar içine ilave 1 mL ve 5 mL çizin. </li></ol> 2.Hayvan Sedasyon ve Hazırlık <ol><li> hayvanın kafesinden işlem öncesi en az 14 saat ve en fazla 18 saat yiyecek çıkarın. NOT: Bu hayvanların glisemik değerleri herhangi bir postprandial varyasyonu önlemek için prosedür için aç olması önemlidir. Ayrıca anestezi sırasında yetersizliği ve mide içeriğinin aspirasyonu önlemek için bir önlemdir. </li><li> Genel anestezik olarak kas içinden verilen ketamin ile IVGTT prosedür süresince oturaklı hayvanlar, 10 mg / kg. İşlem sırasında, gerektiğinde, 30 dakika ya da 20 - aralıklarla - (10 mg / kg ve 5), ek ketamin yönetme. <ol><li> sedasyon hayvan tartılır. ısıtılmış bir prosedür masaya yanal yatar pozisyonda hayvan yerleştirin. </li><li> Hayvan anestezi istikrarlı bir düzlemde sağlamak için klinik parametrelerin her 15 ila 20 dakika izleyin. Bir pulse oksimetre ile - (200 bpm 100) ve DPT 2 (&gt;% 92) kalp hızını ölçün. (- 50 nefes / dk 20) ​​w solunum hızını ölçmek<html> Bir kronometre i, görsel ya da on beş saniye boyunca elle solunumda sayarak ve dört ile çarpılarak. Tedbir sıcaklığı (&gt; 97 ° F) rektal. sakız ve dudakların (nemli, pembe) etrafında mukoz membran rengini izleyin. </li></ol></li><li> İki kanül siteleri hazırlayın. Kateter eklenecek ilgi alanından saç kesme ve alternatif klorheksidin scrubs ve% 70 alkol ile tüm bölgeyi sterilize etmek için saç makasları kullanın. <ol><li> Sol veya sağ sefalik veya safen venlerin bölgesinde bir kateter yerleştirilir ve üç yollu ile (mg heparin / ml 0.06) bir heparin tuzlu floş ekleyin. Bu örnekleme kan alımı sitesidir. </li><li> Başka bir bacak ikinci kateter yerleştirin veya sefalik veya safen venlerin bölgede kol ve bir bağlantı noktası ekleyin. dekstroz infüzyon için bu siteyi kullanın. önce dekstroz infüzyon için kanül patent tutmak için, küçük heparinize salin 1 ml floş kullanın. </li></ol></li></ol>e_title &quot;&gt; 3. İVGTT Prosedürü Not: IVGTT Prosedür 8 kan alımı numune zaman noktaları (Tablo 1) oluşur. <ol><li> Bazal örneği alın ve açlık kan şekeri düzeyini ölçmek için bir el glukometre kullanın. hayvanın genel sağlığını değerlendirmek için bir CBC standart kimya analizi için bir serum numunesi, aynı zamanda, bütün bir kan örneği alın. Imalatçının talimatlarına 8, 9 uyarınca makaklarda kullanılmak için kabul edilmiş bir kit kullanılarak taban numuneden glikoz ve insülin seviyelerini analiz etmek için plazma numuneleri toplamak. Not: Bu, önceden kanülün ölü boşluk kalan kan veya heparin çıkarmak için kan toplanması için numune alma kanül alınan 0.5 ml&#39;lik bir ön çekmesi önemlidir. </li><li> Bazal örnek alınmasını takiben, dekstroz infüzyonu portuna 30 saniye içinde% 50 dekstroz (250 mg / kg) infüzyonu. Not: yüksek doz modelleri (500 mg / kg), kullanılabilirgerçi doz uzunlamasına karşılaştırmalar yapmak amacıyla prosedürler arasında sabit olmalıdır. <ol><li> Limanda kalmadı dekstroz olduğundan emin olmak için heparinli serum fizyolojik 5 ml infüzyon portu yıkayın. infüzyon sonu T0 olduğunu. infüzyon arta kalan dekstroz sonraki kan örnekleri kontamine olabilir teknisyen, eldiven yerine var. </li></ol></li><li> sonrası ilk infüzyon örnek zaman noktası T5 dakika T7 dakika, T10 dakika, T15 dakika, T20 min ardından dekstroz infüzyon sonunda, gelen, T3 dk ve son örnek zaman noktası T30 min yer almaktadır. Başlangıç ​​numunesi ile deney glikoz ve insülin düzeyleri her bir zaman noktasında plazmanın kazan (adım 3.1). <ol><li> zaman noktasında dk T3, bir kez daha kan şekeri seviyesini kontrol etmek için el glukometre kullanın. NOT: Başlangıçta Glucometer okumalar ve T3 dekstroz infüzyon onaylamak için sadece. zaman noktasında dk T3 kan glukoz düzeyi ~ 100 mg / dl daha yüksek eş olmalıdıraçlık bazal plazma glukoz düzeyine mpared. </li></ol></li></ol> 4. Hayvan Kurtarma ve Örnek İşleme <ol><li> kanüller çıkarın ve zaman noktası dk T30 sonra hemostaz için kateterize sitelere basınç uygulayın. o kendine geldi ve oturmuş kadar hayvan izleyin. hayvan kez Teklif besleme tamamen iyileşti edilir. </li><li> Hemen buz üzerine K 2, EDTA tüpleri içine her bir tam kan örneği yerleştirin. toplama, 10 dakika içinde 4 ° C arasındaki bir sıcaklıkta 3000 rpm&#39;de santrifüj. analize kadar -80 ° C &#39;de cryovials, dondurulması ve depolanması içine kısım plazma numuneleri. <ol><li> Standart serum kimyası analizleri için serum tüpü içine, kan az 20 dakika ve oda sıcaklığında 3000 rpm&#39;de santrifüjlemeden önce en fazla 30 dakika süreyle, oda sıcaklığında bekletin. toplama 48 saat içerisinde deneye tabi tutulana kadar, serum örnekleri dondurun. NOT: olarak kadar CBC analizi için toplanan buzdolabında tam kan örnekleritoplama 24 saat içinde sayed. </li></ol></li></ol> 5. Veri Tedavisi <ol><li> Plazma insülin ve glikoz eğrisi oluşturulması başlangıçta, 16, 17, yukarıda glukoz değerleri için doğal log A eğiminden glukoz klirensi oranı K belirler. Not: Sağlıklı bir NSP sağlıklı hayvan genellikle 30 dakika içinde, başlangıç glukoz değerlerine geri döner olarak, genellikle daha büyük bir 2 veya daha fazla, iyi 1&#39;in üzerinde bir glükoz klirensi oranı K olması beklenebilir. insülin üretimi devre dışı bırakır gibi, glikoz temizlenme oranı K 1&#39;in altına düşen, daha önemli ölçüde düşecek. </li><li> T30 16, 17 vasıtasıyla, zaman noktaları arasında, her çizgi parçasının eğri altında kalan alan temsil yamuk alanının toplamları toplamı olarak, bir bütün olarak AUC hesaplayın. Not: Geleneksel olarak, işlemin ilk on dakika AUC akut olarak kabul edilirprosedürün son 20 dk AUC geç insülin yanıtı (LIR) kabul edilir ise insülin cevabı e, (AIR) glukoz. Hayvan daha dismetabolik hale geldikçe, insülin AUC insülin duyarsızlığı artırmak için tazminat yansıtan artacaktır. Aşikar diyabet hayvan geçişleri gibi, ancak, AUC AIR tarafından yakalanan, akut insülin aşamasında genellikle başlangıçta, azalacaktır. </li></ol>

<ol><li>Bergman, R., Phillips, L., Cobelli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiologic+evaluation+of+factors+controlling+glucose+tolerance+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Physiologic evaluation of factors controlling glucose tolerance in man.</a> J. Clin. Invest. 68, 1456-1457 (1981).</li>
<li>Bergman, R., Prager, R., Volund, A., Olefsky, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Equivalence+of+the+insulin+sensitivity+index+in+man+derived+by+the+minimal+model+and+the+euglycemic+glucose+clamp%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Equivalence of the insulin sensitivity index in man derived by the minimal model and the euglycemic glucose clamp.</a> J. Clin. Invest. 79, 790-800 (1987).</li>
<li>Hovorka, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partitioning+glucose+distribution%2Ftransport%2C+disposal%2C+and+endogenous+production+during+IVGTT%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Partitioning glucose distribution/transport, disposal, and endogenous production during IVGTT.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 282, E992-E1007 (2002).</li>
<li>Salinari, S., Guidone, C., Bertuzzi, A., Manco, M., Asnaghi, S., Mingrone, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First-phase+insulin+secretion+restoration+and+differential+response+to+glucose+load+depending+on+the+route+of+administration+in+type+2+diabetic+subjects+after+beriatric+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">First-phase insulin secretion restoration and differential response to glucose load depending on the route of administration in type 2 diabetic subjects after beriatric surgery.</a> Diabetes Care. 32 (3), 375-380 (2009).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Clinical+Diabetes+Research%3A+Methods+and+Techniques%22">Clinical Diabetes Research: Methods and Techniques</a>. Roden, M. , John Wiley & Sons. (2007).</li>
<li>Cobelli, C., Pacini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+secretion+and+hepatic+extraction+in+humans+by+minimal+modeling+of+c-peptide+and+insulin+kinetics%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Insulin secretion and hepatic extraction in humans by minimal modeling of c-peptide and insulin kinetics.</a> Diabetes. 37, 223-231 (1988).</li>
<li>Lorenzo, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disposition+index%2C+glucose+effectiveness%2C+and+conversion+to+type+2+diabetes%3A+the+insulin+resistance+atherosclerosis+study%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Disposition index, glucose effectiveness, and conversion to type 2 diabetes: the insulin resistance atherosclerosis study.</a> Diabetes Care. 33, 2098-2103 (2010).</li>
<li>Hansen, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+and+treatment+of+type+2+diabetes+in+nonhuman+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Investigation and treatment of type 2 diabetes in nonhuman primates.</a> Methods Mol Biol. 933, 177-185 (2012).</li>
<li>Hansen, B. C., Bodkin, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardization+of+IVGTT.+Importance+of+method+used+to+calculate+glucose+disappearance%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Standardization of IVGTT. Importance of method used to calculate glucose disappearance.</a> Diabetes Care. 16 (5), 847(1993).</li>
<li>Hardwood, J. H., Listrani, P., Wagner, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonhuman+primates+and+other+animal+models+in+diabetes+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Diabetes+Sci+Tech%22%5BJournal%5D)">Nonhuman primates and other animal models in diabetes research.</a> J Diabetes Sci Tech. 3, 503-514 (2012).</li>
<li>De Koning, E. J., Bodkin, N. L., Hansen, B. C., Clark, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+mellitus+in+Macaca+mulatta+monkeys+is+characterized+by+islet+amyloidosis+and+reduction+in+beta-cell+population%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Diabetes mellitus in Macaca mulatta monkeys is characterized by islet amyloidosis and reduction in beta-cell population.</a> Diabetologia. 36, 378-384 (1993).</li>
<li>Letiexhe, M. R., Scheen, A. J., Gerard, P. L., Desaive, C., Lefebvre, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+secretion%2C+clearance+and+action+before+and+after+gastroplasty+in+severely+obese+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Obes+Relat+Metab+Disord%22%5BJournal%5D)">Insulin secretion, clearance and action before and after gastroplasty in severely obese subjects.</a> Int J Obes Relat Metab Disord. 18, 295-300 (1994).</li>
<li>Letiexhe, M. R., Scheen, A. J., Gerard, P. L., Desaive, C., Lefebvre, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postgastroplasty+recovery+of+ideal+body+weight+normalizes+glucose+and+insulin+metabolism+in+obese+women%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Postgastroplasty recovery of ideal body weight normalizes glucose and insulin metabolism in obese women.</a> J Clin Endocrinol Metab. 80, 364-369 (1995).</li>
<li>Kim, S. H., Abbasi, F., Chu, J. W., McLaughlin, T. L., Lamendola, C., Polonsky, K. S., Reaven, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rosiglitazone+reduces+glucose-stimulated+insulin+secretion+rate+and+increases+insulin+clearance+in+nondiabetic%2C+insulin-resistant+individuals%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Rosiglitazone reduces glucose-stimulated insulin secretion rate and increases insulin clearance in nondiabetic, insulin-resistant individuals.</a> Diabetes. 54, 2447-2452 (2005).</li>
<li>Toffolo, G., Breda, E., Cavaghan, M. K., Ehrmann, D. A., Polonsky, K. S., Cobelli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+indexes+of+beta-cell+function+during+graded+up+and+down+glucose+infusion+from+C-peptide+minimal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Quantitative indexes of beta-cell function during graded up and down glucose infusion from C-peptide minimal models.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 280, E2-E10 (2001).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+beta-cell+insulin+secretory+function+using+a+graded+glucose-infusion+with+C-peptide+deconvolution+in+dysmetabolic%2C+and+diabetic+cynomolgus+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetology+and+Metabolic+Syn%22%5BJournal%5D)">Quantification of beta-cell insulin secretory function using a graded glucose-infusion with C-peptide deconvolution in dysmetabolic, and diabetic cynomolgus monkeys.</a> Diabetology and Metabolic Syn. 5, 40(2013).</li>
<li>Xiao, Y. F., Wang, B., Wang, X., Du, F., Benzinou, M., Wang, Y. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xylazine-induced+reduction+of+tissue+sensitivity+to+insulin+leads+to+acute+hyperglycemia+in+diabetic+and+normoglycemic+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Xylazine-induced reduction of tissue sensitivity to insulin leads to acute hyperglycemia in diabetic and normoglycemic monkeys.</a> Anesthesiology. 13 (33), (2013).</li>
<li>Porte, D., Kahn, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-cell+dysfunction+and+failure+in+type+2+diabetes+potential+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">β-cell dysfunction and failure in type 2 diabetes potential mechanisms.</a> Diabetes. 50, Suppl 1. S160-S163 (2001).</li>
<li>DeFronzo, R. A., Tobin, J. D., Andres, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+clamp+technique%3A+a+method+for+quantifying+insulin+secretion+and+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Glucose clamp technique: a method for quantifying insulin secretion and resistance.</a> American Journal of Physiology. 237 (3), G214-G223 (1979).</li>
<li>Ferrannini, E., Gastaldelli, A., Miyazaki, Y., Matsuda, M., Mari, A., DeFronzo, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-cell+function+in+subjects+spanning+the+range+from+normal+glucose+tolerance+to+overt+diabetes%3A+a+new+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">β-cell function in subjects spanning the range from normal glucose tolerance to overt diabetes: a new analysis.</a> J Clin Endocrinol Metab. 90 (1), 493-500 (2005).</li>
<li>Vaughan, K. L., Szarowicz, M. D., Herbert, R. L., Mattison, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+anesthesia+protocols+for+intravenous+glucose+tolerance+testing+in+rhesus+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Comparison of anesthesia protocols for intravenous glucose tolerance testing in rhesus monkeys.</a> J Med Primatol. 43, 162-168 (2014).</li>
<li>Kemnitz, J. W., Kraemer, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+glucoregulation+in+rhesus+monkeys+sedated+with+ketamine%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Primatology%22%5BJournal%5D)">Assessment of glucoregulation in rhesus monkeys sedated with ketamine.</a> American Journal of Primatology. 3, 201-210 (1982).</li>
<li>Dutton, C. J., Parvin, C. A., Gronowski, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+glycated+hemoglobin+percentages+for+use+in+the+diagnosis+and+monitoring+of+diabetes+mellitus+in+nonhuman+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Measurement of glycated hemoglobin percentages for use in the diagnosis and monitoring of diabetes mellitus in nonhuman primates.</a> Am J Vet Res. 64, 562-568 (2003).</li>
<li>Rai, V., Iyer, U., Mani, I., Mani, U. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+biochemical+changes+in+insulin+dependent+and+non-insulin+dependent+diabetes+mellitus+and+their+role+in+the+development+of+secondary+complications%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Diab+Dev+Countries%22%5BJournal%5D)">Serum biochemical changes in insulin dependent and non-insulin dependent diabetes mellitus and their role in the development of secondary complications.</a> Int J Diab Dev Countries. 17, 33-37 (1997).</li>
<li>Shirasaki, Y., Yoshioka, N., Kanazawa, K., Maekawa, T., Horikawa, T., Hayashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+physical+restraint+on+glucose+tolerance+in+cynomolgus+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Effect of physical restraint on glucose tolerance in cynomolgus monkeys.</a> J Med Primatol. 42, 165-168 (2013).</li>
</ol>

Yazarlar metabolik hastalık alanında aktif bir sözleşmeli araştırma kuruluşuna (Taç Bioscience) ile bağlıdırlar.

İVGTT tahlil itibaren, açlık kan şekeri ve insülin seviyesinin elde edilir. Vücut ağırlığı 5, 12, 13 dayalı tek bir dekstroz infüzyon ile glukoz ile uyarılmış insülin salınımı kapasitesini değerlendirir ve hayvanın kapasitesinin değerlendirilmesini sağlar insülin bırakın ve başlangıca doğru yükselmiş glukoz düzeyi döndürür. Bu normal bir glukoz ve insülin düzeyi, sağlıklı kontrol, Normogliseminin ile hiperinsülinemik dismetabolik hayvan veya bir hiperglisemik insüline dirençli diyabetik hayvan olarak hayvan k...

IVGTT rutin farklı metabolik Devletleri 5 7 insanlarda β-hücresi fonksiyonunu belirlemek için kullanılan uygun bir işlevsel tahlildir. T2D hayvan modellerinde, bu da iyi metabolik hastalık ilerlemesini gösteren hayvanlar karakterize etmek için bir araç olarak kabul edilmektedir bir dismetabolik hiperglisemik hal 8, 9 sağlıklı. T2D en yakın hayvan modeli, rhesus ve sinomolgus maymunları önemli örneklerdir olan insan olmayan primatlarda (NHPs), gösterilmektedir. Bu hayvanlar doğal insanlarda 10 gibi yaş ve sıklığı katkıda obezite aynı risk faktörleri ile T2D gelişir. Ayrıca, orada da benzer bir hastalık ilerlemesi ve dismetabolik hastalığı 11 ilerledikçe pankreas patoloji amiloid birikimi gösteren. İşte bu hayvanlarda metabolik durumunun bizim koloni karakterizasyonu bir parçası olarak NHPs bir İVGTT gerçekleştirme standart yönteme rapor. Bu yöntem, birtüketen diğer, daha zaman ve pahalı teknikler 2 göreli gerçekleştirmek kolay. IVGTT hızlı ve sık sık hayvanların büyük bir koloni karakterize etmek için yararlıdır. Glike hemoglobin (HbA1C) düzeyi ile dikkate alındığında, hayvanın beslenme ve gıda alımı tarih, yanı sıra yüzde yağsız kütle ve vücut yağ, İVGTT normalde aşikar diyabet 6 doğru bir hayvanın metabolik durumunu ve ilerlemesini karakterize etmek için yeterlidir 8. HbA1C üç ay önceki altı hafta içinde glikoz seviyelerinin güvenilir bir ölçümünü sağlayan bir kırmızı kan hücresinin ömrü boyunca ortalama glisemik düzeyini temsil eder. IVGTT&#39;nin oruç bazal kan örneğinden ölçüldüğünde, bu değer prosedürleri arasında aylarda glisemik kontrol içine bir pencere sağlar. hayvan son IVGTT&#39;nin beri diyabetik için dismetabolik dan geçiş ise, önceki değerinden çok daha yüksek bir HbA1C değeri işaret ederGeçiş yakında başladı son IVGTT&#39;nin sonra ise, yakın önceki değere bir HbA1C değeri sadece son zamanlarda geçişini olduğunu işaret eder. Genel olarak, rhesus makak içinde, HbA1C% 6 kötü glisemik kontrolü 10, 23 anormal kabul edilir ve işaret edilir daha fazla değer verir. Glisemi düzeyleri bir bütün olarak hayvan davranışı ve genel sağlığı kapsamında değerlendirilmelidir. Diyabetik makakları - sergi hyperphagia, polidipsi, poliüri ve - insanlar gibi. Hayvanların grup konut dismetabolik ve diyabetik maymunlar için gerekli bu göstergeler ve bireysel bakım ölçümü için önemli zorluklar sağlar. Bu, tek başına fazla kişisel bakım sağlanabilir sırayla hayvanları konut tavsiye ve daha kolay bir şekilde maymun sağlığı davranışsal belirteçleri 8 izlenmelidir. Buna ek olarak, diyabetik makakları kilo kaybı, yanı sıra artan yüksek bir lipid profili (sergileyecekkolesterol, hipertrigliseridemi) ve serum kimyasında rahatsız mineral metabolizması. Bu organlara zarar metabolik bozukluk / diyabet ilerleyen komplikasyonları genellikle, ve glisemik, lipid ve mineral dengesizlikleri 9, 11, 18 ortak belirleyicileri olabilir 24 gibi, karaciğer ve serum kimyasında böbrek fonksiyonunun belirteçleri ölçmek önemlidir . Bu yöntemi kullanırken bir maymunun hayat belirli değere sahip üzerine, tarihi değerleri çoklu sık karakterizasyonu oluşturulan. Böyle bir glikoz kelepçe veya kademeli glukoz infüzyon (GGI) gibi diğer işlemler, tam bir hayvanın sağlığını değerlendirmek için gerekli olup olmadığını kendi geçmişi kullanılamaz olduğunda, ilk karakterizasyonu üzerine yaygın olduğunu. her üç ayda bir bir sıklıkta bir temel oluşturulmuştur Ancak, bir kez tekrarlanan IVGTT&#39;ler, operasyondan bir hayvanın ilerlemesini takip etmek için, normal olarak yeterlidir. hayvanlar üzerinde birden fazla çalışmalar alındı ​​zaman bu özellikle önemlidirtakvim yılı metabolik durumuna dayalı. sağlık bir seferde yıl nispeten istikrarlı kalabilir sırasında bir hayvanın metabolik durumu kötüleşir zaman, insülin direnci ve glukoz intoleransı dramatik bir artış çok hızlı oluşabilir. HbA1C değerleri üç ay arayla planlanan prosedürleri arasında hayvan sağlık durumunun azalması ya da bazı gelişmeler enterpolasyon için izin verir. Bu nedenle, bu yöntem, doğal ömrü boyunca birden fazla uzunlamasına çalışmalarda kullanılan hayvanların vasıflandırılması için idealdir.

<table><tbody><tr><td>Allegra X-15R Santrifüj</td><td></td><td></td><td>plazma: 4 & # 176; 10 dakika boyunca 3.000 rpm'de C</td></tr><tr><td>Sorvall ST16R Santrifüj serumu</td><td></td><td></td><td>: 22 & # 176; 10 dakika boyunca 3.000 rpm'de C</td></tr><tr><td>Thermo Scientific -86 &#176; C Dondurucu, Forma 88000 Serisi</td><td></td><td>Model: 88500A</td><td></td></tr><tr><td>Dekstroz% 50 (D50)</td> <td>Webster</td><td>07-8008986</td><td>IV glikoz infüzyonu</td></tr><tr><td>3 ml Luer Lock Şırınga</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td></td><td>seri kan alımı</td></tr><tr><td>5 ml Luer Lock Şırınga</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td></td><td>heparinize tuzlu su yıkama</td></tr><tr><td>10 ml Luer Lock Şırınga</td><td>Midwest Veteriner Suppy</td><td></td><td>IV D50</td></tr><tr><td>Gazlı Bez süngerlerinin teslimatı 2 x 2</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>366.23000.4</td><td>Kullanılmış Kuru, %70 Alkol ve %2 Kloroheks Solüsyonu</td></tr><tr><td>4 ml serum ayırıcı tüpler ve nbsp;</td><td>Midwest Veterinary Supply</td><td>366.45000.4</td><td>superchem paneli için kan alma tüpü</td></tr><tr><td>K2EDTA, 2 ml</td><td>VWR</td><td>95057-239</td><td>kan alma tüpleri</td></tr><tr><td>Aprotinin, 100 mg</td><td>Sigma</td><td>A1153-100MG</td><td>kan alma tüpü proteaz katkı maddesi</td></tr><tr><td>22 G x 1" Kateterler</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>193.75250.2</td><td>I.V. kateter&nbsp;</td></tr><tr><td>Enjeksiyon Tapası W /</td><td>Kapaklı Midwest Veterinary Suppy</td><td>001.11500.2</td><td>% 50 dekstroz infüzyon portu</td></tr><tr><td>Porus Bant, 1/2 "x 10 yd</td><td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>001.85000.2</td><td>kateterlerin ve hep'in yapışmasını sağlar. Kilitler</td></tr><tr><td>Klorheksidin Çözeltisi% 2</td> <td>Midwest Veterinary Suppy</td><td>193.08855.3</td><td>hazırlık kateter sitesi</td></tr><tr><td>% 70 Etanol</td><td>VWR</td><td>71001-654</td><td>hazırlık kateter sitesi</td></tr><tr><td>turnike</td><td>Webster</td><td>07-8003432</td><td></td></tr><tr><td>3 musluk</td><td>Midwest Veteriner Tedarik</td><td>366.28510.4</td><td>hep. kilit</td></tr><tr><td>37" uzatma seti</td><td>Webster</td><td>07-8454200</td><td>kilit</td></tr><tr><td>Exel 50-60cc LL Şırıngalar</td><td>Midwest Veteriner Suppy</td><td>001.12250.2</td><td>Heparinize salin floş</td></tr><tr><td>250 ml torba %0.9 salin</td><td>Webster</td><td>07-8365593</td><td>yıkama</td></tr><tr><td>1.000 U Heparin, 10 ml</td><td>Webster</td><td>07-883-4916</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin (Ketaset) 100&nbsp; mg / ml</td><td>Fort Dodge</td> <td>(AV siparişi)</td><td></td></tr> <tr><td>Hassas Xtra glikoz test şeritleri 50 / bx</td><td>Abbott (Amerikan Diyabet Toptan)</td> <td>9381599728K7</td><td>test taban çizgisi / T3 kan şekeri seviyeleri</td></tr><tr><td>Masimo Rad 57</td><td>DRE</td><td>6052057V</td><td>nabız oksimetresi</td></tr><tr><td>Pavia rektal termometre</td><td>Patterson</td><td>07-8391335</td><td></td></tr><tr><td>Hassas Xtra Glükometre</td><td>Abbott</td><td>9381599728K7</td><td>El tipi glukometre</td></tr></tbody></table>

İntravenöz glikoz tolerans testi ile insan olmayan primatlarda metabolik durumu karakterizasyonu

Characterization of Metabolic Status in Nonhuman Primates with the Intravenous Glucose Tolerance Test

İntravenöz glikoz tolerans testi (IVGTT) glikoz dengesinin karakterizasyonu önemli bir rol oynar. serum biyokimyasal profilleri, hem beslenen kan glikoz seviyelerinin kapsayıcı ve açlık durumunda, HbA1c, insülin düzeyleri, diyet klinik öykü, vücut kompozisyonu ve vücut ağırlığı durumu, normal ve anormal glisemik kontrolün değerlendirilmesi ile birlikte alındığında yapılabilir . Bir IVGTT&#39;nin yorumlanması dekstroz meydan ilişkin zamanla kan şekeri ve insülin düzeylerinde değişiklikler ölçümü ile yapılır. Dikkate alınması gereken kritik bileşenleri şunlardır: T0 (glikoz infüzyon sonu), ilk 20 dakika içinde hızlı glikoz temizlenmesi eğiminden elde edilen glukoz temizlenme oranı K (T20 T1), zamana göre ulaşılan zirve glikoz ve insülin düzeyleri glikoz taban dönmek için, ve eğri (AUC) altındaki alan. Bu İVGTT önlemler sağlıklı bir t glikoz homeostasis hareket ettikçe karakteristik değişiklikler gösteriroa hastalıklı metabolik durumu 5. Bu yazıda gelen insanlarda Tip II diyabet (T2D) en alakalı hayvan modeli ve İVGTT ve bu hayvanların klinik profilleri insan dışı primatlarda (Rhesus ve sinomolgus makakları), karakterizasyonu anlatacağım bir obez dismetabolik için, sağlıklı yalın, ve T2D devlet 8, 10, 11.

Şekil 1 &#39;de gösterilen sonuçlar, bir 30 dakika IVGTT&#39;nin boyunca, olgun, sağlıklı ve diyabetik sinomolgus makaklar tipik glükoz ve insülin eğrilerinin gösterim bulunmaktadır. Sağlıklı ve ilerlemiş diyabetik maymunlar elde edilen veriler metabolik karakterizasyonu aralığının her iki uç ucundan hayvanlar arasında belirgin farklılıklar kontrast için gösterilmiştir. Bu İVGTT protokol benzer sonuçlar ile rhesus makak yazarlar tarafından başarıyla kullanılmaktadır. </p...

Bu protokolün amacı, insan dışı primatlarda glisemik kontrolü değerlendirmek ve dismetabolik sağlıklı onların metabolik durumunu değerlendirmek için intravenöz glikoz tolerans testi (IVGTT&#39;ler) gerçekleştirmek için standart bir yöntem sunmaktır.

İntravenöz Glikoz Tolerans Testi ile insan olmayan primatlarda Metabolik Durumu Karakterizasyonu

The intravenous glucose tolerance test (IVGTT) plays a key role in the characterization of glucose homeostasis. When taken together with serum biochemical ...

Bu intravenöz glikoz tolerans testinin veya IVGTT'nin genel amacı, makaklarda metabolik hastalığın sağlıklı bir durumdan dismetabolik, hiperglisemik bir duruma doğru ilerleyişini karakterize etmektir. Bu yöntem, diyabetteki insülin direncine yönelik tedavilerin terapötik etkinliğinin diyetle veya farmakolojik olarak araştırılması amacıyla, metabolik durumlarına göre tabakalanmış denek kohortları oluşturmak için kullanılabilir. Bu tekniğin temel avantajı, diğer daha zaman alıcı ve maliyetli tekniklere kıyasla uygulanmasının kolay olmasıdır.Pratikten 14 ila 18 saat önce, glisemik değerlerde herhangi bir postprandiyal değişkenliği önlemek için makağın kafesindeki yiyecekleri kaldırın. Ertesi sabah, sedatize edilmiş hayvanı tartın. Ardından primatı, ısıtmalı bir işlem masasında yan yatar pozisyona getirin.Her 15 ila 20 dakikada bir, kalp hızını ve periferik kapiller oksijen satürasyonunu ölçmek için bir pulse oksimetre kullanın. Solunum hızını ölçmek için bir kronometre ve rektal sıcaklığı ölçmek için bir termometre kullanın. Ayrıca, her klinik parametre kontrolünde diş eti ve dudak çevresindeki mukoza membranının nemli ve pembe olduğunu onaylayın.Hayvanın bazal sağlık durumu onaylandı

characterization-metabolic-status-nonhuman-primates-with-intravenous

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Hiperinsülinemik öglisemik kelepçe, ya da insülin kelepçe, insülin etkisini değerlendirmek için altın...

Bilinçli Mesnetlenmemiş Fare hiperinsülinemik öglisemik Kelepçeleri

Bu videoda, bir laboratuvar faresinde oral glukoz tolerans testinin nasıl yapılacağı anlatılmaktadır.

Oral Glukoz Tolerans Testi (OGTT): Farelerde Glukoz Metabolizmasının Ölçülmesi

Geçerli makalenin üretimi ve yüksek yağlı diyet beslenen farelerin metabolik karakterizasyonu diyet kaynaklı insülin direnci ve obezite bir model olarak açıklar. Daha fazla oral glukoz tolerans testi ve glukoz metabolizma vivo içindetüm vücut değişikliklere izleme insülin tolerans testi gerçekleştirmek için detaylı iletişim kuralları bulunmaktadır.

Vivo glikoz metabolizması farelerde Oral glukoz tolerans testi (OGTT) ve insülin tolerans testi (ITT) kullanarak yüksek yağlı diyet beslenen incelenmesi

Obezite sıklığı artıyor ve kronik akciğer hastalıkları riskini artırır. Temel mekanizmaları ve Önleme stratejileri, iyi tanımlanmış hayvan kurmak için modelleri ihtiyaç vardır. Burada, üç yöntem (glikoz tolerans testi, vücut pletismografisi ve akciğer fiksasyon) obezite etkisi farelerde akciğer sonuçlar üzerine eğitim sağlamak.

Mayi glikoz tolerans testi, akciğer işlev ölçümü ve akciğer fiksasyonu obezite ve pulmoner sonuçlar üzerine Engelli metabolizma etkisini incelemek için

Bu iletişim kuralı bir vücut kompozisyon analiz ve metabolik hayvan izleme sistemi vücut kompozisyonu ve farelerde metabolik parametreleri tanımlamak için kullanımını açıklar. Yüksek yağlı beslenme tarafından indüklenen bir obezite modeli örnek olarak bu tekniklerin uygulanması için kullanılır.

Vücut kompozisyonu ve metabolik Caging Analizi yüksek yağ Fed farelerde

Bu makalede, yabani tip ve ob/ob farelerde obezite ve bozulmuş glikoz metabolizmasına karşı korumak ve tedavi etmek için izokalorik 2:1 aralıklı oruç için ayrıntılı bir protokol açıklanmaktadır.

Farelerde Izokalorik 2:1 Aralıklı Orucun Metabolik Etkilerinin Değerlendirilmesi

Bu protokol, insan dışı primat pankreas adacıklarında oksijen tüketiminin doğru ve tekrarlanabilir ölçümünü göstermektedir. Adacık yükleme teknikleri ve mikroplaka kaplama kültürlü küresel diğer türde solunum verimli ölçümü için bir çerçeve sağlar.

İnsan Dışı Primat Pankreatik Adacık Oksijen Tüketiminin Analizi

Bu çalışma, polikistik over sendromu fare modelinde hepatik glikoz üretiminin hem oruç hem de glikoz bakımından zengin durumlarda kuyruk damarı yoluyla stabil bir izotopik glikoz izleyici kullanılarak doğrudan ölçülen ölçümünü açıklar.

Polikistik Over Sendromu Fare Modelinde Hepatik Glikoz Üretiminin Değerlendirilmesi

Burada, kahverengi yağ dokusu (BAT) aktivitesinin insan metabolizması üzerindeki etkisinin fizyolojik önemini ölçmek için bir protokol sunuyoruz. Bu, karbonhidrat yüklemesi ve dolaylı kalorimetriyi sıcaklıktaki supraklaviküler değişikliklerin ölçümleriyle birleştirerek elde edilir. Bu yeni yaklaşım, insanlarda BAT termojenezi için farmakolojik bir hedef geliştirilmesine yardımcı olabilir.

İnsanlarda kahverengi yağ dokusu termojenezini ölçmek için dolaylı kalorimetri, kızılötesi termografi ve kan şekeri seviyelerinin bir kombinasyonunu kullanma

, Işitsel ve dinleme becerilerini katkıda bilişsel yetenekleri derinlemesine bir değerlendirme yapmak için bir test bataryası (IMAP) açıklanmıştır. Bu çocuk dostu ve dilsel boşa yönetmek için hızlı. Stimulus üretimi ve protokol yönetimi tekrarlanabilir prosedürleri sağlamak için bir yazılım platformu (IHR-STAR) ile kontrol edilir.

Dinlemede Making Sense IMAP Test Batarya:

Öğrenin, makak maymunlarında metabolik hastalık ilerlemesini karakterize etmek için intravenöz glikoz tolerans testi (IVGTT) protokolünü. Bu yöntem, diyabet ve insülin direnci tedavilerinin araştırılmasında değerli bir araçtır.

İntravenöz Glikoz Tolerans Testi ile insan olmayan primatlarda Metabolik Durumu Karakterizasyonu

Daha fazla video keşfet