Name: Normotermik Ex Vivo Böbrek Koruma Böbrek Nakli Perfüzyon önce greftler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-15T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 12 s
Description: Öğrenin normotermik ekz vivo böbrek perfüzyonu ile böbrek greftlerini nakil öncesi fizyolojik koşullarda koruma yöntemini. Bu teknik soğuk iskemik hasarı önleyerek marjinal greftlerin canlılığını artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Biz özel yapılmış böbrek perfüzyon devreleri bize sağlamış Sorin Group (Milano, İtalya) teşekkür etmek istiyorum. Ayrıca biz Steen çözümü BBraun AG&#39;nin şırınga pompası ile temini için (Melsungen, Almanya) ve Rieber GmbH &amp; Co KG (Reutlingen, Almanya) bize sağlamış XVIVO Perfüzyon A.Ş. (Goteborg, İsveç) teşekkür ederim.

Not: Bu çalışma protokolü şematik bir genel görünüşü Şekil 1&#39;de gösterilmiştir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig1.jpg" /> Şekil 1. Çalışma Protokolü. Normotermik ex vivo böbrek perfüzyon Bu çalışma protokolü bir domuz modeline dayanmaktadır. Cerrahi böbrek greft damarlarının diseksiyonu ve histidin-triptofan-ketoglutaratın 500 ml (HTK) ile yıkama sonrasında greft alınabilir. 3 saat boyunca soğuk hava deposu (SCS) sonra, böbrek greft belirlenen transplantasyon kadar birden fazla saat Normotermik ex vivo (NEVKP) perfüze edilir. Bütün hayvanlar, &#39;Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından yayınlanan&#39; Laboratuvar Hayvanları Bakım için Kılavuzu &#39;Tıbbi Araştırma ve&#39; Ulusal Derneği tarafından formüle &#39;Laboratuar Hayvan Bakımı İlkeleri&#39; ile uyumlu insancıl bakım almışOntario, Canada. Toronto Genel Araştırma Enstitüsü Hayvan Bakım Komitesi, tüm çalışmalarını onayladı. 1. Hayvanlar <ol><li> Bu protokolde - (33 kg 27) erkek Yorkshire domuz kullanın. </li></ol> 2. Organ Alma <ol><li> Ameliyat öncesi Prosedürü <ol><li> Ev, en az bir hafta için bir araştırma tesisi erkek Yorkshire domuz onların stres düzeyini azaltmak için. Anestezi verilmeden önce 6 saat en az domuz oruç. </li><li> Ketamin (25 mg / kg) ve atropin (0,04 mg / kg) ve midazolama (0.15 mg / kg) içeren bir intramüsküler enjeksiyon ile domuz anesthetization başlatın. Daha sonra, ameliyathane (OR) konut tesisinden hayvan taşıma. </li><li> YA masaya yatar pozisyonda domuz yerleştirin. Kendiliğinden izofluran% 5 oksijen 2 L nefes alsın. Gevşeme sonra, bir laringoskop ile ses telleri ortaya çıkarmak ve entübasyon nedeniyle bir spazm önlemek için% 2 lidokain ile püskürtün. Afhava 5 ml - 6,5 mm tüp ile entübasyon ter, 3 manşeti engeller. Not: Kapnometri trakeal tüpün doğru konumunu ortaya koymaktadır. </li><li> % 2.5 izofluran gaz indirin. 16 nefes / dk ve 10 tidal hacim - - 15 ml / kg vücut ağırlığı 14 ventilatör ayarlayın. Yakından domuz izleyin. Kalp hızı ve oksijen satürasyonu Pulse oksimetre ile kaydedilir. </li><li> Steril koşullar altında, bir 8.5 Fr. tanıtmak Seldinger tekniği 13 juguler ven içine x 10 cm kateter. Bu nedenle, venöz damar delinme bir iğne kullanın. Bir tel tanıttıktan sonra, bir kateter ile iğne değiştirin. Tel eleyin ve cildi kateter sabitleyin. Ameliyat boyunca saatte Ringer Laktat solüsyonu 200 ml uygulayın. </li></ol></li><li> Cerrahi Prosedür <ol><li> Dezenfeksiyon ve cerrahi alanın kapsamı ardından, pubis eklemi için xiphoid bir ensizyon gerçekleştirin. Pozlama iyileştirmek için, cerrahi yaklaşım uzatmakBir sol yanal kesi. Bir havlu ile büyük ve küçük bağırsakları Kapak ve sağ böbrekte optimal erişim için sol tarafına onları konumlandırmak. </li><li> Abdominal aorta gelen inferior vena kava (IVC) ayırın. Aort arkasından ligatı aort dalları. </li><li> Arka tam aort diseksiyonu sonra, böbrek dallarına aort kafatasın etrafında bir bitişik harfleri geçmektedir. Ayrıca, iliak çatallanma kafatası iki bitişik harfler yerleştirin. Sol renal arter etrafında bir kravat yerleştirin. </li><li> Onun yapışık dokudan sağ böbreği boşaltın. Renal ven, arter ve üreter teşrih. </li><li> Diyaframı açın ve kalp içine kg donör ağırlığı başına 1,000 IU heparin yönetmek. Bir DCD modeli için, kardiyak arrest ikna etmek için intrakardiyak 3 dk sistemik heparin sonrası KCl 40 mval enjekte. kardiyak arrest sıcak iskemi başlangıç ​​noktası olarak değerlendirilir. </li><li> Öte yandan, kan toplanması için, CPDA torbalar (sitrat, fosfat, dekstroz, a hatlarını bağlamakdenosine) Sol üst juguler ven tanıtıldı kateter. Yumuşak bir bir spin (frensiz 1.500 xg) gerçekleştirin. Plazma ve steril koşullar altında buffy coat (biyogüvenlik kabine sınıf II) çıkartın ve transfüzyon eritrosit saklayın. </li><li> Iliak bifurkasyonunun üstünde bir organ floş hattı ile aorta cannulate. Aorta ve sol renal arter bitişik harfler Kravat. </li><li> 100 cm H2O bir basınç ile histidin-triptofan-ketoglutarat (HTK) çözeltisi ile böbrek yıkayın Torasik cava Kelepçe ve juguler kateter yoluyla kan toplamak. Böbreğin optimal floş güvenli renal venin altında karın cava kesin. </li><li> Sağ böbreğin tam dalgadan sonra, aorta bir segment greft almak. Renal ven kesin ve uzun üreter bırakın. </li></ol></li><li> Perfüzyon için Böbrek Graft geri Tablosu Hazırlama <ol><li> Yapışık doku böbrek boşaltın. Bir kravat a ile aortun kafatası parçasını kapatınnd 1/4 &quot;x 3/8&quot; redüktör ile alt kısmı cannulate. Aorta gelen küçük arter dalları kapalı kravat. </li><li> Doğrudan 1/4 &quot;x 3/8&quot; redüktör ile renal ven cannulate. 8 Fr. ile üreter entübe tüp besleme. </li><li> NEVKP başlangıcına kadar buz üzerinde böbrek yerleştirin. </li></ol></li></ol> 3. Normotermik ex vivo Böbrek perfüzyon (NEVKP) <ol><li> Perfüzyon Devre Hazırlama perfüzyon devresi yenidoğan kardiyopulmoner baypas ekipmanı (Şekil 2) oluşur. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig2.jpg" /> Perfüzyon Devre Şekil 2. şematik çizimi. Devre yenidoğan kardiyopulmoner baypas teknolojisinin oluşur. perfüzyon çözeltisi venöz hazne içinde toplanmaktadır. Santrifüjlü bir pompa oksijen ile zenginleştirilmiş ve 37 ° C&#39;ye ısıtılır oksitleyici, Solüsyonu iter. Pa sonraböbrekte renal arter yoluyla 80 mmHg - arteriyel kabarcık filtresi ssing, Perfüzat 60 bir basınç ile tahrik edilir. Venöz çıkış (0-3 mmHg) venöz hazneye geri perfüzat yol açar. Şırınga ve infüzyon pompaları ek bileşikler ile arzı sağlamak. İdrar perfüzyon boyunca toplanır. Perfüzyon devre karakteristikleri sürekli olarak kaydedilir. Saatlik venöz ve arteriyel kan gazı örnekleri ve böbrek hasarı belirteçleri analiz edilmektedir. <ol> <li> Böbrek perfüzyon cihazına özel yapılmış perfüzyon devresini bağlayın. </li><li> Venöz hazne ve oksitleyici hortumu bağlayın. Oksijenatör arteriyel çıkışına arteriyel hat boru bağlayın ve yuvasına kabarcık filtreyi yerleştirin. Tasfiye hattını bağlayın. Toplar damar haznesinin girişinin venöz hat boru bağlayın. </li><li> Perfüzyon sırasında değerlendirilmesinde, arteriyel prize takın sıcaklık probu debimetre ve met bağlamakbble arteriyel hat boru sensör ve basınç hatlarını bağlayın. Seviye sensörü bağlayın. </li><li> Venöz ve arteriyel örnek limanlarına venöz ve arteriyel örnek hatlarını bağlayın. </li><li> Bir stand organ odasına yerleştirin ve hazırlanan deliklerden venöz ve arteriyel tüp tanıtmak. Sıkıca masa ve odasına boru sabitleyin. </li><li> Roller pompa içine emme hortumunu takın ve sıvıları toplamak için odasına bir ucunu yerleştirin. </li><li> % 95 O 2 /% 5 CO 2 ve oksijenatör ihtiva eden gaz tankına oksijen tüpünü bağlayın. Oksijenatör ve organ odasına ısıtma ünitesi boru bağlayın. </li><li> Kullanım boru venöz ve arteriyel çıkış hatlarını kapatmak için kelepçeler. Venöz rezervuar çıkışına başka boru kelepçe uygulayın. </li></ol></li><li> Perfüzyon Çözüm hazırlanması, Ek Takviyeler ve Devre Astar <ol><li> Üretilen idrar yerine tek infüzyon pompası kullanınRinger laktat. </li><li> Venöz hazne içine ve insülin (5 IU / saat) (0.5 ml / saat, amino asitler 0.5 mi / saat glukoz) besin uygulaması için, bir şırınga pompası kullanın. Şirketinden arteryel hat bir vasodilatör (verapamil, 0.25 mg / st) enjekte etmek için ikinci şırınga pompası kullanmaktadır. </li><li> Perfüzyon çözeltisi ile venöz doldurun. Bu nedenle, Ringer Laktat (175 mi), venöz hazne içine STEEN çözeltisi (200 mi), DRO (27 mi), heparin (1000 IU), pH değerini ayarlamak için, sodyum bikarbonat ve kalsiyum glukonat dökün. Son olarak, yıkanmış eritrositler (125 mi) ilave edin. </li><li> Kalp akciğer makinesi (HLM) açın. Basınç, sıcaklık, seviye ve kabarcık sensörü panelleri etkinleştirin. Perfüzyon boyunca veri kaydetmek için Veri Yönetim Sistemi (DYS) etkinleştirin. Perfüzyon solüsyonu ve 37 ° C, organ bölmeyi ısıtmak için ısıtma ünitesini aktif hale getirin. O 2 beslemesini açın. </li><li> Venöz rezervuar arkasındaki boru kelepçesini açın ve centrifug ücretsizTamamen havadan el pompa kafası. 1000 rpm&#39;de santrifüj pompa başlayın ve çözelti devresi boyunca hareketli izin verir. Arteriyel filtresi atlayarak boru Kelepçe ve arteriyel filtreden havayı serbest bırakın. </li><li> Basınç hatları sıfır. Şırınga ve infüzyon pompaları etkinleştirin. </li></ol></li><li> Böbrek Greft Perfüzyonu <ol><li> Buz böbrek çıkarın ve organ odasında yatak üzerinde böbrek yerleştirin. Idrar kolektörü içine idrar kateteri yerleştirin. Venöz ve arteriyel boru havanın serbest emin olduktan sonra tüp konnektörleri takın. </li><li> Arteriyel ve venöz boru hatları arasında kısayolu kapatın. Santrifüj pompanın hızını düzenleyerek 75 mmHg arter basıncı ayarlayın. </li><li> Tutanak basınçları, arteriyel akış, sıcaklık, ve DMS sürekli kabarcıklar varlığı. Perfüzyon boyunca dikkatli değerleri dikkate alınmalıdır. Perfüzyon sırasında odasına kan sızdırıyor colle olduğunuLütfen venöz hazne içine emiş boruları ile cted. </li><li> Üretilen idrar miktarı kaydedilir. Saatlik venöz kan ve idrar örnekleri toplamak. Venöz ve arteriyel kan gazı örnekleri ve aspartat aminotransferaz (AST) ve laktat analizi alarak perfüzyon izleyin. </li><li> Perfüzyon sonunda renal arter gelen boru bağlantısını kesin ve ven, soğuk HTK ile greft yıkayın ve transplantasyon kadar steril bir organ torba buz üzerinde saklayın. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Wolfe, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+mortality+in+all+patients+on+dialysis%2C+patients+on+dialysis+awaiting+transplantation%2C+and+recipients+of+a+first+cadaveric+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+journal+of+medicine%22%5BJournal%5D)">Comparison of mortality in all patients on dialysis, patients on dialysis awaiting transplantation, and recipients of a first cadaveric transplant.</a> The New England journal of medicine. 341 (23), 1725-1730 (1999).</li>
<li>Rabbat, C. G., Thorpe, K. E., Russell, J. D., Churchill, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+mortality+risk+for+dialysis+patients+and+cadaveric+first+renal+transplant+recipients+in+Ontario%2C+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology+%3A+JASN%22%5BJournal%5D)">Comparison of mortality risk for dialysis patients and cadaveric first renal transplant recipients in Ontario, Canada.</a> Journal of the American Society of Nephrology : JASN. 11 (5), 917-922 (2000).</li>
<li>Fuquay, R., Teitelbaum, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplant+outcomes+and+dialysis+modality%5BTitle%5D)+AND+%22Contributions+to+nephrology%22%5BJournal%5D)">Transplant outcomes and dialysis modality.</a> Contributions to nephrology. 178, 251-257 (2012).</li>
<li>Ingsathit, A., Kamanamool, N., Thakkinstian, A., Sumethkul, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+advantage+of+kidney+transplantation+over+dialysis+in+patients+with+hepatitis+C%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Survival advantage of kidney transplantation over dialysis in patients with hepatitis C: a systematic review and meta-analysis.</a> Transplantation. 95 (7), 943-948 (2013).</li>
<li>Davis, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+extent+and+predictors+of+waiting+time+geographic+disparity+in+kidney+transplantation+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The extent and predictors of waiting time geographic disparity in kidney transplantation in the United States.</a> Transplantation. 97 (10), 1049-1057 (2014).</li>
<li>Perico, N., Cattaneo, D., Sayegh, M. H., Remuzzi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+graft+function+in+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Delayed graft function in kidney transplantation.</a> Lancet. 364 (9447), 1814-1827 (2004).</li>
<li>Maggiore, U., Cravedi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+marginal+kidney+donor%5BTitle%5D)+AND+%22Current+opinion+in+organ+transplantation%22%5BJournal%5D)">The marginal kidney donor.</a> Current opinion in organ transplantation. 19 (4), 372-380 (2014).</li>
<li>Dittrich, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+cold+storage+on+renal+ischemia+reperfusion+injury+after+non-heart-beating+donor+explantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nephron.+Experimental+nephrology%22%5BJournal%5D)">Influence of cold storage on renal ischemia reperfusion injury after non-heart-beating donor explantation.</a> Nephron. Experimental nephrology. 96 (3), e97-e102 (2004).</li>
<li>Summers, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+donor+age+and+cold+storage+time+on+outcome+in+recipients+of+kidneys+donated+after+circulatory+death+in+the+UK%3A+a+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Effect of donor age and cold storage time on outcome in recipients of kidneys donated after circulatory death in the UK: a cohort study.</a> Lancet. 381 (9868), 727-734 (2013).</li>
<li>Hosgood, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((et+al.+pilot+study+assessing+the+feasibility+of+a+short+period+of+normothermic+preservation+in+an+experimental+model+of+non+heart+beating+donor+kidneys%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+surgical+research%22%5BJournal%5D)">et al. pilot study assessing the feasibility of a short period of normothermic preservation in an experimental model of non heart beating donor kidneys.</a> The Journal of surgical research. 171 (1), 283-290 (2011).</li>
<li>Hosgood, S. A., Patel, M., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+conditioning+effect+of+ex+normothermic+perfusion+in+an+experimental+kidney+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+surgical+research%22%5BJournal%5D)">The conditioning effect of ex normothermic perfusion in an experimental kidney model.</a> The Journal of surgical research. 182 (1), 153-160 (2013).</li>
<li>Nicholson, M. L., Hosgood, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+transplantation+after+ex+vivo+normothermic+perfusion%3A+the+first+clinical+study.+American+journal+of+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22official+journal+of+the+American+Society+of+Transplantation+and+the+American+Society+of+Transplant+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Renal transplantation after ex vivo normothermic perfusion: the first clinical study. American journal of transplantation.</a> official journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 13 (5), 1246-1252 (2013).</li>
<li>Seldinger, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catheter+replacement+of+the+needle+in+percutaneous+arteriography%3B+a+new+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+radiologica%22%5BJournal%5D)">Catheter replacement of the needle in percutaneous arteriography; a new technique.</a> Acta radiologica. 39 (5), 368-376 (1953).</li>
<li>Stubenitsky, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exsanguinous+metabolic+support+perfusion--a+new+strategy+to+improve+graft+function+after+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Exsanguinous metabolic support perfusion--a new strategy to improve graft function after kidney transplantation.</a> Transplantation. 70 (8), 1254-1258 (2000).</li>
<li>Delpech, P. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+warm+ischaemia+combined+with+cold+preservation+on+the+hypoxia-inducible+factor+1%CE%B1+pathway+in+an+experimental+renal+autotransplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+British+journal+of+surgery%22%5BJournal%5D)">Effects of warm ischaemia combined with cold preservation on the hypoxia-inducible factor 1α pathway in an experimental renal autotransplantation model.</a> The British journal of surgery. , (1002).</li>
<li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normothermic+ex+vivo+lung+perfusion+in+clinical+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+journal+of+medicine%22%5BJournal%5D)">Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation.</a> The New England journal of medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).</li>
<li>Knaak, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subnormothermic+Ex+vivo+liver+perfusion+reduces+endothelial+cell+and+bile+duct+injury+after+DCD+pig+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+transplantation+%3A+official+publication+of+the+American+Association+for+the+Study+of+Liver+Diseases+and+the+International+Liver+Transplantation+Society%22%5BJournal%5D)">Subnormothermic Ex vivo liver perfusion reduces endothelial cell and bile duct injury after DCD pig liver transplantation.</a> Liver transplantation : official publication of the American Association for the Study of Liver Diseases and the International Liver Transplantation Society. , (2014).</li>
<li>Hosgood, S. A., Nicholson, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+normothermic+perfusion+of+declined+human+kidneys+after+inadequate+in+situ+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22American+journal+of+transplantation+official+journal+of+the+American+Society+of+Transplantation+and+the+American+Society+of+Transplant+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Ex vivo normothermic perfusion of declined human kidneys after inadequate in situ perfusion.</a> American journal of transplantation official journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 14 (2), 490-491 (2014).</li>
<li>Op den Dries, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+normothermic+machine+perfusion+and+viability+testing+of+discarded+human+donor+livers%5BTitle%5D)+AND+%22American+journal+of+transplantation+official+journal+of+the+American+Society+of+Transplantation+and+the+American+Society+of+Transplant+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Ex vivo normothermic machine perfusion and viability testing of discarded human donor livers.</a> American journal of transplantation official journal of the American Society of Transplantation and the American Society of Transplant Surgeons. 13 (5), 1327-1335 (2013).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Bu çalışma, bir eritrosit bazlı solüsyon NEVKP bir domuz modelinde, uzun bir zaman dönemi için mükemmel sonuçlar ile yapılabilir göstermektedir. 10 saat ex vivo perfüzyon sırasında böbrekler istikrarlı perfüzyon parametreleri, aktif renal metabolizma, homeostazını ve minimal böbrek hasarı gösterdi. İdrar üretimi ve böbrek hasarı perfüzyon çözeltisi bileşimine bağlıdır. Bu fizyolojik aralık içinde onkotik basıncı ve perfüzat ozmolarite tutmak önemlidir. Özel olarak, düşük onkotik basıncı önemli derecede böbrek ödem ve böbrek hasarı artan işaretleri ile fizyolojik olmayan şekilde yüksek bir idrar üretimi ile sonuçlanacaktır. STEEN çözeltisi albümin içeren onkotik basıncı düzenlemek için ve böbrek için fizyolojik koşulları taklit etmek için, bu modelde seçilir. Sodyum bikarbonat, ve kalsiyum glukonat, pH fizyolojik değerlerini elde etmek için sisteme eklenen, HCO3 </sub&gt; sodyum, potasyum, kalsiyum ve klorür. vazodilatör seçimi ve doz yeterli kan akımı ve oksijen kaynağı sağlamak için önemlidir. Normotermik ex vivo böbrek perfüzyon tekniği çeşitli sınırlamalar vardır. ex vivo perfüzyon olumsuz artık perfüzyon dönemleri etkileyebilecek böbrek, hormonal desteği ile ilişkili değildir. Buna ek olarak, yeni bir teknoloji, zaman içinde bu noktada, artan maliyetler ile bağlantılıdır. Gelecek gelişmeler teknoloji basitleştirmek ve maliyetleri azaltmak olabilir. taşınabilir böbrek perfüzyon cihazın geliştirilmesi tamamen gelecekte soğuk böbrek depolama önlemek için izin verebilir. Şiddetli ve inatçı organ yetersizliği marjinal organları (AKD veya DCD böbrek greft) 7 bir artış kullanımına yol açar. Şu anda, organ korunması, statik, soğuk depolama veya hipotermik makine perfüzyon dayanmaktadır. Bir uzun süreli soğuk iskemi zaman önemli bir imp vardır şöylestandart kriterlere 15 ve marjinal greft 8,9 böbrek fonksiyonunun sonucu üzerine hareket, soğuk hava deposu minimize yeni koruma teknikleri özel ilgi 16-19 vardır. Bir büyük engel daha geniş marjinal greft kullanımı transplantasyon öncesinde organlarının kalitesi ve canlılığını değerlendirmek için yetersizlik için. Şu anda böyle bir donör yaşı, donör ilgili hastalıklar ve greft sıcak iskemi süresi olarak sadece klinik parametreler bir organ kabul veya transplantasyon için reddedildi olup olmadığı kararı kullanılmaktadır. Normotermik koşullarda greft koruyarak, greft değerlendirme perfüzyon özelliklerine göre ve veri mümkündür. Böyle renal vasküler akış, basınç, böbrek içi direnç, idrar üretimi, oksijen tüketimi ve (örneğin AST ve laktat gibi), böbrek hasarı parametreleri olarak gerçek zamanlı parametreleri greft canlılığını değerlendirmek için yararlı parametreler olması gerekiyordu. Addit olarakion, NEVKP sırasında etkin metabolizma transplantasyon öncesinde marjinal böbrek greft geliştirmek için tamir stratejileri uygulama sağlar. Örneğin, pro-enflamatuar yollar, immünomodülasyon, gen transferi, hem de kök hücre idaresi inhibisyonu korunması süresi boyunca, böbrek greft değiştirebilir ve alıcı sonucunu geliştirmek için, gelecekteki teknikler olabilir.

Böbrekler en sık nakledilen katı organlardır. Diyaliz 1-4 ile karşılaştırıldığında son dönem böbrek hastalığı hastalar için, böbrek nakli daha iyi yaşam beklentisi ve yaşam kalitesi sunuyor. kalıcı organ yetersizliği nakli tıp (Tablo 1) 5 alanda ciddi bir problem teşkil etmektedir. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td></td><td> Amerika Birleşik Devletleri * </td><td> Eurotransplant bölge ** </td></tr><tr><td> Böbrek nakli bekleme listesinde hastalar </td><td> 101.563 (Şubat, 2015) </td><td> 10689 (Aralık 2014) </td></tr><tr><td> Merhum donör böbrekler 2014 yılında nakledilen </td><td> 10.650 </td><td> 3,119 </td></tr><tr><td> Medyan (yıl olarak) Kadavradan böbrek nakli için bekleme süresi </td><td> Up to 5 yıl * </td><td> 4 yıla kadar ** </td></tr></tbody></table> Tablo 1. BöbrekABD ve Eurotransplant Bölgesi&#39;nde Greft yetersizliği. böbrek nakli sonucu olumsuz uzun süreli diyaliz 6 maruz hastalar için kötü sonuçla, bekleme süresi etkilenir. Bu tür kardiyak ölüm (DCD) sonra bağışlanan eski donörden böbrek, birden komorbidite ile donörlerden (genişletilmiş kriterler vericilerden (AKD) ve böbrekler gibi ek bir donör kaynağı olarak marjinal böbrek greft, ilgi tetiklemiştir. Olurdu Marjinal donör böbrek Geçmişte azaldı şimdi transplantasyon 7 için kabul edilir. Marjinal böbrek greft kullanımı için önemli bir engel soğuk anoksik depolama korunması tekniğidir. Şu anda, böbrek greft buz üzerinde statik depolanan veya oksijen olmadan 4 ° C&#39;de perfüze edilir. Soğuk anoksik koruma tekniği böbrek korunması sırasında devam eden greft yaralanması ile ilişkilidir ve bu nedenle Metab eksikliği greft değerlendirmesini izin vermezolism ve idrar üretimi. Özellikle, marjinal böbrek greft önemli böbrek hasarı ile sonuçlanan, kötü soğuk depolama tahammül ve gecikmiş greft fonksiyonu (VGM) 8,9 oranlarının yüksek. VGM kötü uzun dönem greft fonksiyonu için bir prognostik faktördür. Ekstrakorporal böbrek perfüzyon organların korunması, değerlendirilmesi ve onarım için alternatif bir yöntem temsil eder. Bir domuz modelinde, yararlı sonuçlar normotermik koşullarda 10,11 altında ex vivo perfüze böbrekler için sunuldu. Genişletilmiş kriterler donörlerden alınan böbreklerin nakli 12 hemen önce 1 saat perfüze edildi zaman 2013 yılında yapılan ilk klinik deneme gecikmiş greft fonksiyonu daha düşük bir oran gösterdi. Bu kağıt Normotermik ex vivo böbrek perfüzyon (NEVKP) bir model sunuyor. Bu çalışmanın amacı minimum uygulanan soğuk iskemi süresini azaltmak ve NEVKP süresini uzatmaktır. NEVKPsoğuk depolama teknikleri neden olabilir zararı azaltmak için hedefleyen alternatif bir koruma yöntemidir.

<table><tbody><tr><td>Yenidoğan kardiyopulmoner baypas teknolojisi</td><td>SORIN GROUP Canada Inc (Markham, Kanada)</td><td>Özel yapım</td><td>Yenidoğan venöz rezervuarı D100 (500 ml, 1/16 "giriş ve çıkış), yenidoğan oksijenatörü D100, santrifüj pompa kafası (Devrim), arteriyel kabarcık filtresi (D130)</td></tr><tr><td>Kalp akciğer makinesi, St&ouml; ckert S3</td><td>SORIN GROUP Canada Inc (Markham, Kanada)</td><td>Özel yapım</td><td>Santrifüj pompa, makaralı pompa, kontrol paneli (basınç, akış, sıcaklık, kabarcıklar ve seviye sensörleri), oksijen karıştırıcı, ısıtıcı ünitesi</td></tr><tr><td>Boru</td><td>SORIN GROUP Canada Inc (Markham, Kanada)</td><td>01906BPC SG XS</td><td>3/16" x 1/16"</td></tr><tr><td></td><td></td><td>019071PC SG XS</td><td>1/4" x 1/16"</td></tr><tr><td></td><td></td><td>019060PC SG XH</td><td>3/8" x 1/16"</td></tr> <tr><td>Boru konnektörleri</td><td>SORIN GROUP Canada Inc (Markham, Kanada)</td><td></td><td>Çeşitli boyutlarda</td></tr><tr><td>STEEN çözümü</td><td>XVIVO (G&ouml; teborg, SWE)</td><td>19004</td><td>200 ml</td></tr><tr><td>Ringer'ın laktat</td><td>Baxter (Mississauga, AÇIK, CAN)</td><td>JB2324</td><td>175 ml</td></tr><tr><td>Sodyum bikarbonat</td><td>Hospira (Montr&eacute; al, QC, CAN)</td><td>6625050</td><td>pH'a bağlı</td></tr><tr><td>Kalsiyum glukonat</td><td>Kanada'nın İlaç Ortakları (Richmond Hill, ON)</td><td>C31110</td><td>Kalsiyuma bağımlı</td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Sandoz Canada Inc (Toronto, ON, CAN)</td><td>10750</td><td>1.000 IU</td></tr><tr><td>Amino asit ve glikoz, Travasol %10</td> <td>Baxter (Mississauga, ON, CAN)</td><td>JB6760</td><td>1 ml / saat</td></tr><tr><td>Hızlı etkili insülin, Novorapid</td><td>Novo Nordisk Canada Inc (Mississauga, AÇIK, CAN)</td><td>DS6H748</td><td>5 IE/sa</td></tr><tr><td>Verapamil</td><td>Sandoz Canada Inc (Quebec, QC, CAN)</td><td>52216</td><td>0,25 mg/saat</td></tr></tbody></table>

normotermik<em&gt; ex vivo</em&gt; böbrek koruma böbrek nakli perfüzyon önce greftler

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

Böbrek nakli, son dönem böbrek yetmezliği olan hastalar için iyi bilinen bir tedavi seçeneği haline gelmiştir. Devam eden organ kıtlığı ciddi bir sorun olmaya devam ediyor. Bu nedenle, organ bağışçıları için kabul kriterleri genişletilerek marjinal böbrek greftlerinin kullanımına yol açmıştır. Bu marjinal organlar soğuk hava depolarını zayıf bir şekilde tolere eder, bu da koruma yaralanmasının artmasına ve daha yüksek gecikmiş greft fonksiyonu oranlarına neden olur. Soğuk hava deposunun sınırlamalarının üstesinden gelmek için, kapsamlı araştırmalar alternatif normotermik koruma yöntemlerine odaklanmaktadır.
Ex vivo normotermik organ perfüzyonu yenilikçi bir koruma tekniğidir. Ex vivo akciğer, karaciğer ve böbrek perfüzyonları için ilk deneysel ve klinik çalışmalar olumlu sonuçlar göstermiştir.
Normotermik böbrek saklama yöntemi, soğuk iskemik hasarın azaltılmasının yanı sıra organ değerlendirmesi ve onarımı için de olanak sağlar. Bu el yazması, bir domuz modelinde böbrek alımı, organ koruma teknikleri ve izole ex vivo normotermik böbrek perfüzyonu (NEVKP) hakkında bilgi vermektedir. Cerrahi teknikler, perfüzyon çözeltisi ve devre için kurulum, potansiyel değerlendirme seçenekleri ve temsili sonuçlar gösterilmiştir.

Kalp-yenerek böbrek alma modeli kullanarak altı deneylerin sonuçlarını aşağıda sunulmuştur. Yerinde temizleme ve böbrek alma sonrası, greft eritrositler hazırlanmıştır ise 3 saat (SCS) için buz üzerinde bekletildi. Klinik ortamda, bu alma ve geri tablo hazırlanması için gerekli süreyi simüle eder. NEVKP 10 saat süre ile gerçekleştirildi. Fizyolojik koşulları sağlamak ve in vivo böbrek çevredeki simüle etmek için, organ odası ısıtılmış ve mühürlü olmalıdır. Perfüzyon ve idrar değiştirme çözüm kan gazı analizi, onkotik basıncı ve ozmolarite için fizyolojik değerleri temsil etmelidir. In situ Yorkshire domuzlar elde edilen normal değerler (bazal değerleri), her şekil açıklamasında bulunan, sırasıyla (3-13 Şekiller). NEVKP amacı greft yeterli oksijen ve beslenme ile birlikte olduğundan emin olmaktır. Iskemi ca gibiBöylece, intrarenal direncini artırarak istikrarlı bir basınç sabit akış elde, vazokonstriksiyon kullanan yeterli oksijenlenme için iyi bir göstergedir. 37 ° C hedef greft sıcaklığı SCS sonra organ yeniden ısıtma yoluyla ulaşıldıktan sonra, debi değerleri ve intrarenal direnç bütün perfüzyon boyunca etrafında 60-80 mmHg sabit fizyolojik basınç sabit kalır (Şekil 3 ve 4). idrar üretimi miktarı perfüzyon çözeltisi (Şekil 5) bileşimine esas olarak bağlıdır. Venöz ve arteriyel pO 2 saatlik ölçümleri böbrek metabolik aktivitesini gözler önüne sermektedir. (Şekil 6) 14 - oksijen tüketimi denklemini (pO 2 ven) x akışı / ağırlık (pO 2 sanatı) kullanılarak hesaplanmıştır. Perfüzyon pH sırasında, HCO 3 ve elektrolitler müdahaleleri (- 10 Şekil 7) gerektirmeden stabildir. AS Gerçek zamanlıT ve laktat ölçümleri hücresel hasarı izlemek için hizmet vermektedir. Hücre hasarının parametrelerin herhangi bir artış NEVKP süre (Şekil 11 ve 12) içinde tespit edilir. Perfüzyon çözeltisinin ozmolaritesi stabil (Şekil 13). Histolojik değerlendirme küçük değişiklikler (- 16 Şekil 14) ortaya koymaktadır. <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig3.jpg" /> Standart sapma (ml / dakika) ile Şekil 3. Ortalama arteryel akışı. Perfüzyon boyunca akış fizyolojik aralıkta kalır. Yerinde ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: sanatı anlamına gelir. Akış: 170 ± 57 ml / dak (aralık 83-325 ml / dakika). <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig4.jpg" /> Şekil 4. İntrarenal direnç (İKO), ortalama ve standart sapma (mmHg / </strong&gt; Ml / dk). Ortalama arter basıncı (MAP) 60 ila 80 mmHg arasında sabit kalır. intrarenal direnç sürekli / ml / dak 0.5 mmHg altında. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig5.jpg" /> Şekil 5. Toplam idrar hacmi, ortalama ve standart sapma (ml). Total idrar hacmi ağırlıklı perfüzyon çözeltisi bileşimine bağlıdır. idrar üretimi düşük onkotik basıncı ve osmolarite kadar yüksek olur. <img alt="Şekil 6," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig6.jpg" /> Şekil 6. oksijen tüketimi, ortalama ve standart sapma (ml / dk / g). <img alt="Şekil 7," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig7.jpg" /> Şekil 7. pH venöz, ortalama ve standart sapma. PH remabikarbonat idaresi olmadan fizyolojik aralıkta ins sabiti. Yerinde ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: pH 7.46 ± 0.06 (aralık 7,34-7,63). <img alt="Şekil 8," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig8.jpg" /> Şekil 8. HCO3- venöz, ortalama ve standart sapma (mmol / L). HCO3 bikarbonat uygulanmadan fizyolojik aralıkta kalır. Yerinde ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: HCO 3 30.3 ± 2.4 mg / L (aralık 21,6-35,8 mg / L). <img alt="Şekil 9," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig9.jpg" /> Şekil 9. Venöz sodyum konsantrasyonu, ortalama ve standart sapma (mmol / L). Sodyum fizyolojik aralıkta kalır. In situ olarak ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: 137.1 &amp;177.; 3.8 mg / L (aralık 118,7-140,9 mmol / L). <img alt="Şekil 10," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig10.jpg" /> Şekil 10. Venöz potasyum konsantrasyonunun ortalama ve standart sapma (mmol / L). Potasyum fizyolojik aralığında sabit kalır. Yerinde ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: 3.85 ± 0.46 mg / L (aralık 3,5-5,36 mg / L). <img alt="Şekil 11," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig11.jpg" /> Şekil 11. Venöz aspartat aminotransferaz, ortalama ve standart sapma. (AST; U / L) ex vivo normotermik böbrek perfüzyon yılında AST hücre hasarı işaretleyici gösterir. AST değerleri perfüzyon boyunca düşüktür. <img alt="Şekil 12" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig12.jpg" /> Şekil 12: Laktat<html> , Ortalama ve standart sapma (mg / L). Ex vivo normotermik böbrek perfüzyon olarak, laktat hücre hasarı işaretleyici temsil eder. değerler perfüzyon boyunca stabildir. <img alt="Şekil 13," src="/files/ftp_upload/52909/52909fig13.jpg" /> Şekil 13:. Serum Ozmolarite, ortalama ve standart sapma (mosm / L) perfüzyon çözeltisi içinde sabit bir ozmolarite düşük ama sürekli idrar üretimini korur. In situ olarak ölçülen Domuz fizyolojik değerleri: 282 ± 1.7 mOsm / L (erim 279-283 mOsm / L). <img alt="Şekil 14" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig14.jpg" /> Şekil 14:. Histoloji (H &amp; E) hafif tübüler vakuolizasyon gösteren Kortikomedüller kavşak 50X / 200X büyütme. Nekroz belirtisi yok.arget = &quot;_ blank&quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız. <img alt="Şekil 15" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig15.jpg" /> Şekil 15: Histoloji (PAS) hafif tübüler vakuolizasyon gösteren Kortikomedüller kavşak 50X / 200X büyütme.. Nekroz belirtisi yok. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52909/52909fig15large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 16" src="/files/ftp_upload/52909/52909fig16.jpg" /> Şekil 16:. Histoloji (TÜNEL boyama) 25X / 200X büyütme. Çok nadiren çekirdekler apoptoz çok düşük oranları gösteren lekeli. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52909/52909fig16large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a>

Şiddetli organ yetersizliği nakli için marjinal böbrek greft artan kullanımı sonuçlandı. Marjinal greftler, özellikle kötü soğuk depolama tahammül çünkü bu, alternatif depolama yöntemleri ilgi tetikledi. Normotermik ex vivo böbrek perfüzyon tekniği (NEVKP) transplantasyon öncesinde böbrek greft için yeni bir koruma yöntemi temsil eder.

Normotermik<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Böbrek Koruma Böbrek Nakli Perfüzyon önce greftler

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a ...

Bu prosedürün genel amacı, bir böbrek greftini transplantasyon öncesinde, ex vivo olarak normal termik fizyolojik koşullar altında korumaktır. Bu işlem, öncelikle donör böbreğin renal damarlarının kanüle edilmesiyle gerçekleştirilir. Ardından greft devreye bağlanır ve normotermik koşullar altında perfüze edilir.Nihayetinde, greftin transplantasyon için uygunluğunu belirlemek amacıyla böbrekteki hasarın fonksiyon parametreleri ve histolojisi izlenir. Bu tekniğin, soğuk saklama veya hipotermik makine perfüzyonu gibi mevcut koruma yöntemlerine karşı temel avantajı, normotermik XVE perfüzyonun standart veya genişletilmiş kriterli donör greftlerin transplantasyon öncesindeki soğuk iskemik hasarını önlemesidir. Donörün aort ve kavalarını tamamen diseke ettikten sonra, aortun renal dalların kranial kısmına bir ligatür geçirin ve ardından iliak bifurkasyonun kranial kısmına iki ligatür yerleştirin.İliak bifurkasyonun distalinde, cava çevresine bir ligatür geçirin ve sol renal artere bir bağ yerleştirin. Ardından sağ böbreği yapışık dokulardan kurtarın; renal ven, arter ve üreteri disseke edin. Sonrasında diyaframı açın ve donör ağırlığının kilogramı başına 1000 international unit heparin kalbe uygulayın.Kanı toplamak için, CPDA torbalarının hatlarını sol üst juguler ven kateterine bağlayın. Sol renal arter, aorta ve vena cava'ya ligatürleri bağlayın ve yıkama yapmak için iliak bifurkasyonun üzerine bir aortik kanül yerleştirin. Optimal bir yıkama sağlamak için abdominal cava'yı renal venin altından keserek, böbreği derhal 100 centimeters H2O basınçta HTK solüsyonu ile yıkayın.Torasik kavayı aynı anda klempleyiniz ve kanı juguler kateter aracılığıyla toplayınız. Böbrek tamamen yıkandığında, renal veni keserek ve üreteri uzun bırakarak, aortanın bir segmentiyle birlikte grefti çıkarınız. Ardından, aortanın kranial ucunu bir bağla kapatınız ve alt ucunu bir dörtte bir inç x üç sekizde bir inçlik redüktör ile kanüle ediniz.Ardından, renal veni bir dörtte bir inç çarpı üç sekizde bir inçlik bir redüktör ile doğrudan kanüle edin. Üreteri sekiz milimetrelik French bir besleme tüpüyle intübe edin ve böbreği buz üzerine yerleştirin. Perfüzyona başlamadan önce, özel yapım perfüzyon devresini böbrek perfüzyon cihazına bağlayın.Ardından, organ haznesini bir stand üzerine yerleştirin ve venöz ve arteriyel tüpleri hazırlanan deliklerden geçirin. Tüpleri sabitledikten sonra, vakum tüpünü venöz rezervuara bağlayın ve diğer ucunu sızan perfüzyon solüsyonunu toplamak için hazneye yerleştirin. Tüp klempleri kullanarak venöz ve arteriyel çıkış hatlarını ve venöz rezervuarın çıkışını kapatın.Üretilen idrarın yerine Ringer laktat çözeltisi koymak için bir infüzyon pompası kullanın. Perfüzyon boyunca, üretilen idrar miktarına bağlı olarak, besinleri ve insülini venöz rezervuara vermek için bir şırınga pompası, arteriyel hatta doğrudan vazodilatör infüze etmek için ise başka bir şırınga pompası kullanın. Bu sırada venöz rezervuarı perfüzyon çözeltisiyle doldurun.Ardından, devreyi hazırlamak için kalp akciğer makinesini çalıştırın; basınç, sıcaklık seviyesi ve kabarcık sensörü panellerini aktif hale getirin. Perfüzyon boyunca verileri kaydetmek için veri yönetim sistemini ve ısıtma ünitesini çalıştırın. Perfüzyon solüsyonunu ve organ haznesini 37 °C'ye ısıtın.Oksijen beslemesini ve venöz rezervuarın arkasındaki boru klembini açarak santrifüj pompa başlığını tamamen havadan arındırın. Ardından santrifüj pompayı dakikada 1000 devirde çalıştırarak solüsyonun devre boyunca hareket etmesini sağlayın. Arteriyel filtreden havayı tahliye etmek için boruyu klempleyerek arteriyel filtreyi baypas edin.Son olarak, yıkanmış eritrositlerin 125 mililitre seviyesinde basınç hatlarını sıfırlayın ve devre hazır hale getirildiğinde şırınga ve infüzyon pompalarını çalıştırın. Böbreği buzdan alıp organ kamarası yatağına aktarın ve idrar kateterini idrar toplayıcıya yerleştirin. Venöz ve arteriyel tüplerin hava içermediğinden emin olduktan sonra, konnektörleri tüplere bağlayın.Ardından, arteriyel ve venöz tüp hatları arasındaki kısa devreyi kapatın ve arteriyel basıncı 75 mmHg olarak ayarlayın. Basınçları, arteriyel akışı, sıcaklığı ve kabarcık varlığını bir veri yönetim sistemi ile sürekli olarak kaydedin ve perfüzyon boyunca değerleri dikkatle gözlemleyin. Organın perfüzyon sırasındaki fonksiyonunu izlemek için üretilen idrar miktarını kaydedin ve venöz kan ile idrar örneklerini saat başı toplayın; ayrıca venöz ve arteriyel kan, gaz, aspartat aminotransferaz ve laktat analiz örnekleri de elde edin.Perfüzyonun sonunda, tüpleri renal arter ve venden ayırın. Grefti soğuk HTK ile yıkayın ve transplantasyona kadar böbreği steril bir organ torbası içinde buz üzerinde saklayın. Normal termik ex vivo böbrek perfüzyonunun amacı, perfüzyon sırasında grefte yeterli oksijen ve besin sağlanmasını garanti etmektir.Nitekim, organın yeniden ısıtılmasıyla 37 °C olan hedef greft sıcaklığına ulaşıldıktan sonra, üç saatlik buz üzerinde saklamanın ardından, tüm perfüzyon boyunca yaklaşık 70 mmHg sabit fizyolojik basınç ile akış değerleri ve intrarenal direnç stabil kalmaktadır. İdrar üretim miktarı temel olarak perfüzyon solüsyonunun bileşimine bağlıdır.Venöz ve arteriyel oksijen parsiyel basıncının saatlik ölçümleri, perfüzyon sırasında böbreğin metabolik aktivitesini doğrularken; pH, bikarbonat ve elektrolitler de stabil seyretmekte olup herhangi bir müdahale gerektirmemektedir. Gerçek zamanlı aspartat, aminotransferaz ve laktat ölçümleri, hücresel hasarın izlenmesine hizmet eder. Normal termik ex vivo böbrek perfüzyon süresi boyunca bu hücre hasarı parametrelerinde herhangi bir artış gözlemlenmemiş olup, perfüzyon solüsyonunun osmolaritesi de stabildir.Ayrıca, histoloji, hafif düzeyde vakuolizasyon ve çok düşük apoptoz oranları ile dokuda minimal değişiklikler göstermektedir. Uzmanlaşıldığında bu teknik, böbrek greftleri için alternatif bir organ koruma yöntemi olarak kullanılabilir ve transplantasyon öncesinde organ değerlendirmesi ve onarımı için ek seçenekler sunabilir.

normothermic-ex-vivo-kidney-perfusion-for-preservation-kidney-grafts

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu videoda, domuz donör böbreğinde uzun süreli soğuk iskemik depolama süresi yoluyla koruma hasarını indüklemek için bir teknik açıklıyoruz.

Domuz Donör Böbreğinde Koruma Yaralanmasının Modellenmesi: Böbreği Uzun Süreli Soğuk İskemisine Maruz Bırakarak Greft Disfonksiyonunu İndüklemek İçin Bir Prosedür

Hayvan organ fizyolojisinin incelenmesi, deneysel bir ex vivo perfüzyon sistemi gerçekleştirilerek gerçekleştirilebilir. Daha önce geliştirdiğimiz ex vivo karaciğer perfüzyon modelimize homeostatik bir organ olarak bir domuz böbreğinin eklenmesi, daha iyi bir fizyolojik ortam elde etmek için temel bir adım olabilir.

Otolog Ex vivo Perfüze Domuz Karaciğeri-Böbrek Deneyi için Adımlar

Bu tür yağlı karaciğerleri, yaşlı donörden greft veya kardiyak ölüm (DCD) sonra alınan karaciğerinin Marjinal greftler, sadece kötü konvansiyonel, soğuk statik depolama tahammül. Biz transplantasyon öncesinde marjinal karaciğer greft korunması, değerlendirilmesi, ve onarımı için subnormothermic ex vivo karaciğer perfüzyon yeni bir model geliştirdi.

Subnormothermic Tekniği<em&gt; Ex vivo</em&gt; Karaciğer Depolama, Değerlendirme Perfüzyon ve Marjinal Karaciğer Greft Onarımı

Burada, donör karaciğer greftlerinin oksijenli ex situ makine perfüzyonunu tanımlayan bir protokol sunuyoruz. Bu makale, makine perfüzyonu için karaciğer greftini temin etmek ve hazırlamak, perfüzyon sıvısını hazırlamak, perfüzyon makinesini hazırlamak ve karaciğer greftinin oksijenli normotermik makine perfüzyonunu gerçekleştirmek için adım adım bir protokol içermektedir.

Donör karaciğerleri Ex Situ Normotermik Makinesi Perfüzyonu

Önemli karaciğer donör kan olmadığını ve karaciğer bağış için ölçüt genişletilmiştir. Normothermic ex vivo karaciğer perfüzyon (NEVLP) değerlendirmek ve organ işlevini değiştirmek için geliştirilmiştir. Bu çalışma NEVLP bir fare modeli gösterir ve karaciğer koruma yaralanma azaltmak için pegile-katalaz, yeteneğini sınar.

Ex Vivo Normothermic karaciğer perfüzyon küçük bir hayvan Model

Büyük hayvan modelleri klinik öncesi transplantasyon araştırmalarında önemli bir rol oynamaktadır. Klinik kurulum ait benzerlikler nedeniyle, bu makalede açıklanan ortopik böbrek ototransplantasyonunun domuz modeli, organ koruma teknikleri ve terapötik müdahalelerin test edilmesi için mükemmel bir in vivo ayarı sağlamaktadır.

24 Saat Organ Koruma Ve Sürekli Telemetri Kullanılarak Bir Domuz Modelinde Ortotopik Böbrek OtoTransplantasyonu

Normothermic ex vivo makine perfüzyonu (NEVP), pankreas allogreftlerinin korunması için henüz araştırılmamıştır. Bu yazıda pankreas allogreftleri için transplantasyon öncesi yenilikçi bir koruma tekniği sunulmaktadır.

Transplantasyon Öncesi Pankreas Allogreftlerinin Korunması için Normothermic Ex Vivo Pankreas Perfüzyonu

Burada, müteakip makine perfüzyonu veya transplantasyonu için klinik öncesi bir domuz modelinde böbrek alımı için cerrahi bir modeli detaylandıran bir protokol sunuyoruz.

Klinik Öncesi Büyük Hayvan Modelinde Böbrek Alımı

Donör kalp koruma, kalp naklinde başarının önemli belirleyicisidir. Teknolojik gelişmeler, koruma koşullarının optimize edilmesine ve nakil öncesi donör kalbin daha doğru bir şekilde değerlendirilmesine yol açmıştır. Burada, kalp koruma için şu anda uygulanan iki yenilikçi teknolojiyi tanımlıyoruz: uniform soğutma koruma ve normotermik ex-situ kalp perfüzyonu.

Kalp Naklinde Organ Koruma İçin Yenilikçi Stratejiler: Uniform Soğutma Koruma ve Ex-situ Normothermik Perfüzyon

Bu protokol, alıcı bir fareye daha sonra transfer edilmek üzere fare böbreğinin ex vivo normotermik makine perfüzyonu ile uygulanmasını tanımlar.

Nakil için Fare Böbreklerinin Normothermic Makine Perfüzyonu

Öğrenin normotermik ekz vivo böbrek perfüzyonu ile böbrek greftlerini nakil öncesi fizyolojik koşullarda koruma yöntemini. Bu teknik soğuk iskemik hasarı önleyerek marjinal greftlerin canlılığını artırır.

Normotermik

Daha fazla video keşfet