Farklı Ot Türlerinin Sağlam Herbisit Direnci Testi için Protokoller

Bu prosedürün genel amacı, çok çeşitli yabancı ot türleri ve herbisitlerde herbisit direncini test edip doğrulamak ve herbisit direnç seviyelerini belirlemektir. Bu işlem, öncelikle eş zamanlı çimlenme ve fide çıkışı sağlamak amacıyla, bir herbisit uygulamasından sağ kurtulmuş bitkilerden toplanan tohumların dormansisinin kırılmasıyla gerçekleştirilir. Birkaç günden bir haftadan fazlasına kadar değişen bir tohum vernalizasyon süreci gereklidir.

İkinci adım, potasyum nitrat içeren agar besiyerini plastik kaplara dökmektir. Ardından Vern tohumları katılaşmış agar üzerine yerleştirilir ve kaplar, her yabancı ot türü için optimum koşulların sağlandığı bir çimlendirme kabinine aktarılır. Daha sonra 15 ila 20 fide, standart saksı karışımıyla doldurulmuş plastik tepsilere şaşırtılır.

Her bir tepsiye, benzersiz tanımlama için gerekli tüm bilgileri içeren bir barkod atanır ve fideler iki ila üç yaprak evresine gelene kadar tepsiler ısıtmalı bir seraya yerleştirilir. Son adım, hassas bir tezgah üstü püskürtücü kullanılarak yapılan herbisit uygulamasıdır; tüm herbisitler, önerilen sürfaktanlar ile birlikte ticari formülasyonlar halinde, önerilen tarla dozunun iki katı ve üç katı olacak şekilde iki farklı dozda uygulanır ve uygulamadan üç ila dört hafta sonra nihai değerlendirme yapılır. Hayatta kalan bitki sayısını ve deney birimi başına görsel olarak tahmin edilen biyokütleyi kaydetmek için bir barkod okuyucu kullanılır.

Veriler daha sonra bir bilgisayara indirilir ve herbisit direnç durumunu belirlemek için analiz edilir. Bu yöntemin hem in vivo hem de in vitro tanısal tarama testlerine göre temel avantajı, sağlamlığı ve esnekliği ile ilgilidir. Başka bir ifadeyle, yöntem güvenilirdir ve küçük uyarlamalarla geniş bir tür yelpazesine kolayca adapte edilebilir.

Bu yöntem, direnç kalıbı ve seviyesi gibi, CRO alanlarındaki herbisit dirençli yabancı ot popülasyonlarının incelenmesi ve yönetimiyle ilgili temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olur. Ayrıca, yanıt deneyleri gibi sonraki deneysel adımların uygun şekilde planlanmasını sağlar. Genellikle, herbisit direnci testlerinde yeni olan araştırmacılar, göz önünde bulundurulması ve spesifik deneysel koşullara uyarlanması gereken birçok adım ve yön olduğu için zorluk yaşayabilirler.

Her seferinde tek bir türe ait tohum örneği toplayıp benzersiz bir kod atayarak başlayın. Kavuzları temizleyerek ve tohumların saplarını ayıklayarak tohumları temizleyin. Atanan benzersiz kodu belirterek her örnek için bir form doldurun.

Tür adı, toplama tarihi, GPS koordinatları, belediye, çiftçi adı, tarla büyüklüğü, enfestasyon seviyesi, ürün, sezon boyunca kullanılan herbisitler ve tarlanın geçmiş kayıtları. Tohumları, atanan benzersiz kodla etiketlenmiş mühürsüz kağıt torbalarda saklayın. Nemin buharlaşmasına izin verin ancak tohumları yüksek sıcaklığa veya aşırı sıcaklık dalgalanmalarına maruz bırakmayın.

İkincil dormansinin indüklenmesini önlemek için, vernalizasyonun gerçekleşmesi amacıyla temizlenmiş tohumları karanlık bir odada dört derece Celsius'ta saklayın. Plastik kaplara bir miktar deiyonize su koyun.

Süzgeç kağıdından iki disk ve su ile iki disk arasında kılcallık yoluyla bir köprü oluşturacak bir şerit kesin. Süzgeç kağıtlarını suya batırın ve plastik kaplara yerleştirin. Ardından, havada kurutulmuş tohumları kağıdın üzerine yerleştirin.

Plastik kapları, türe bağlı olarak gerekli süre boyunca dört santigrat dereceye aktarın. Ardından, deiyonize su kullanarak %0,1 potasyum nitrat içeren %0,6'lık bir agar çözeltisi hazırlayın; agarı bir mikrodalga fırında çözün ve agar çözeltisini plastik kaplara dökün. Substrat soğuduğunda, çimlendirilecek Vern tohumlarını katılaşmış agar üzerine yerleştirin.

Plastik kapları çimlendirme kabinine yerleştirin; vernalizasyon süresi ile ışık ve sıcaklık koşulları yabancı ot türüne göre değişiklik gösterir. Doğrudan ekim yerine şaşırtma yapmak, aynı büyüme evresinde homojen bir bitki popülasyonu elde edilmesini sağlar; bu durum, herbisit uygulamasının performansını optimize etmek için önemli bir ön koşuldur. %60 siltli tınlı toprak, %15 kum, %15 tarımsal perlit ve %10 torftan oluşan standart bir saksı karışımıyla doldurulmuş plastik tepsilere 15 ila 20 fide şaşırtın. Her tepsiyi; popülasyon kodu, test edilen herbisit, tekrar numarası ve ardışık tepsi numarası gibi benzersiz tanımlama için gerekli tüm bilgileri içeren bir barkod ile tanımlayın.

Tepsileri ısıtmalı bir seraya yerleştirin ve substratı tarla kapasitesinde veya bu değere yakın tutmak için bitkileri gerektiği şekilde sulayın. Çıkış sonrası herbisitler için büyüme sıcaklığı, yabancı ot türüne göre değişiklik gösterir. Bitkiler iki ila üç yaprak aşamasına geldiğinde püskürtme yapın; sürfaktan çözeltisini etiket talimatlarına göre toplu olarak hazırlayın, nihai konsantrasyon genellikle nihai hacmin bir yüzdesi olarak ifade edilir veya birim alan başına dağıtılacak hacim şeklinde belirtilir.

Sürfaktan çözeltisinde çözülecek ticari ürün miktarı hesaplayın. Bu denklem kullanılarak herbisit dozu; önerilen tarla dozunun, test edilen maksimum doz ve çözeltinin son hacminin, tezgah üstü püskürtücü tarafından iletilen hacme bölünmesiyle çarpılmasıyla hesaplanır. En konsantre herbisit çözeltisini hazırlayın. Ardından, daha düşük konsantrasyonlu çözeltiyi hazırlamak için herbisit çözeltisini üç kez seyreltin.

Bu prosedür, herbisitlerin tartılması veya pipetlenmesi sırasında hata yapma olasılığını azaltır. Herbisit çözeltisi. Konsantrasyon, birim alan başına dağıtılacak hacim olarak ifade edilir.

İşlem dizisine daha düşük bir herbisit dozuyla başlayın. Bu sayede, aynı herbisit ile yapılan iki işlem arasında püskürtme kabinini yıkamaya gerek kalmaz. Herbisit çözeltisini, üç adet yassı yelpaze hidrolik meme ile donatılmış bir bom kullanarak, 215 kilo pascalc basınçta ve 0.75 metre/saniye hızda, hektar başına 300 litre uygulayacak şekilde hassas bir tezgah üstü püskürtücü ile dağıtın.

Herbisit değiştirildiğinde, püskürtme kabinini önce %1'lik çamaşır suyu ile iki kez yıkayın ve ardından durulayın. Test edilen herbisitlerin kayıtlarına bağlı olarak, uygulamadan üç veya dört hafta sonra değerlendirmeyi yapın; her bir tepsiyi otomatik olarak tanımlayan bir barkod okuyucu kullanarak, uygulamadan sağ kurtulan bitki sayısını ve görsel olarak tahmin edilen biyokütleyi (VEB) kaydedin. Renge veya diğer görünüm özelliklerine bakılmaksızın, aktif büyüme göstermeyen bitkiler ölü olarak değerlendirilir.

VEB, aynı popülasyonun işleme tabi tutulmuş ve tutulmamış kontrol grupları arasındaki bitki biyokütlesinin görsel karşılaştırması yoluyla elde edilir. Her bir işlem görmüş tepsiye, herbisitten etkilenmeyen bitkiler için 10'dan, bitkilerin açıkça öldüğü durumlar için sıfıra kadar değişen bir puan verilir. Tüm deneylere, herbisitlerle hiç veya nadiren işlem görmüş bir bölgeden toplanmış bir popülasyon gibi duyarlı bir popülasyon dahil ederek genel işlem etkinliğini değerlendirin.

Bitki sağkalımını, herbisit uygulamasından hemen önce sayılan işlem görmüş bitki sayısının yüzdesi olarak ifade edin ve standart hatayı hesaplayın. Perme değeri, iki herbisit dozunun uygulandığı işlemlerden elde edilen sonuçlara dayanarak popülasyonları dört kategoriye ayırır; bitkilerin %5'inden azı herbisit dozunda sağ kaldığında duyarlı olarak kabul edilir. Bir x hafif dirençli ise, herbisit dozunda sağ kalanların oranı %5 ile %20 arasında olduğunda tanımlanır.

Bitkilerin %20'sinden fazlası herbisit dozuna karşı hayatta kaldığında bir x dirençli olarak kabul edilir. Herbisit dozu bir x'te hayatta kalanlar %20'den fazla ve herbisit dozunda %10'dan fazla olduğunda bir x ve yüksek dirençli olarak kabul edilir. Dört iopa popülasyonunda panolam ile yapılan bir herbisit uygulamasının üç x temsilci sonuçları gösterilmiştir.

Hassas kontrol grubu tamamen kontrol altına alınırken, bitkilerin %20'sinden azı hayatta kaldığı için popülasyon 1410 hafif dirençli olarak kategorize edilmiştir. Popülasyon 1411 üç x dozunda kontrol altına alınmış, ancak bir x dozundaki bitki sağkalımı %20'den yüksek çıktığı için bu popülasyon orta dirençli statüsüne atanmıştır. Son olarak, popülasyon 1412 ne önerilen bir x saha dozunda ne de bunun üç katı dozda kontrol edilebildiğinden, yüksek dirençli kategorisine atanmıştır.

Trien Ron methyl ile işlem görmüş rehas bitkileri popülasyonundaki biyokütlenin görsel tahmini üzerine ikinci bir örnek burada gösterilmiştir. İşlem görmemiş kontrole 10 puan verilirken, bitkilerin tamamen kontrol altına alındığı tepsilere sıfır VEB değeri verilmiştir. Tepsilere ara bir puan olan beş verilmiştir.

Bitkilerin herbisit uygulamalarından etkilenmediği ve bu nedenle yüksek dirençli olduğu, biyokütlesinin işleme tabi tutulmamış kontrol grubuyla karşılaştırılabilir düzeyde olduğu ve toplam bitki biyokütlesinin işleme tabi tutulmamış bitki tepsilerinin yarısı kadar olduğu durumda, VEB değeri 10'dur. Bu prosedür uygulanırken, olgunlaştığında toplanmış ve ardından muhafaza edilmiş yabancı ot tohumlarının kalitesinin, bu prosedürü takip eden deneylerin başarısı üzerinde güçlü bir etkisi olduğunun hatırlanması önemlidir. Direnç seviyesiyle ilgili ek sorulara kesin yanıtlar verebilmek için yanıt yanlılığı yöntemleri gibi diğer yöntemler de uygulanabilir.

Bu videoyu izledikten sonra, herbisit direnç testlerine nasıl yaklaşmanız ve farklı adımları farklı yabancı ot türlerine nasıl uyarlamanız gerektiği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. Özellikle tohum CY kırma ve tohum çimlendirme konularında. Herbisitlerle veya konsantre asitlerle çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini unutmayın; bu prosedür gerçekleştirilirken maske, eldiven ve diğer kişisel koruyucu ekipmanların kullanılması gibi önlemler her zaman alınmalıdır.