2 Temmuz 2015
Yabancı ot popülasyonlarında herbisit direncini doğrulamak için sağlam ve esnek bir yaklaşım sunulmuştur. Bu protokol, herbisit direnç seviyelerinin çıkarılmasına ve küçük adaptasyonlarla çok çeşitli yabani ot türlerine ve herbisitlere uygulanmasına izin verir.
Bu prosedürün genel amacı, çok çeşitli yabani ot türlerinde ve herbisitlerde herbisit direncini test etmek ve doğrulamak ve ayrıca herbisit direnç seviyelerini çıkarmaktır. Bu, ilk olarak, aynı anda çimlenme ve fide çıkışı elde etmek için bir herbisit işleminden kurtulan bitkilerden toplanan tohumların uyku halini kırarak gerçekleştirilir. Birkaç günden bir haftaya kadar süren bir tohum vernalizasyon dönemi gereklidir.
İkinci adım, potasyum nitrat içeren bir burgu ortamını plastik tabaklara dökmektir. Vern tohumları daha sonra katılaşmış burgu üzerine yerleştirilir ve bulaşıklar, her yabani ot türü için en uygun koşullara sahip bir çimlenme kabinine aktarılır. Daha sonra, 15 ila 20 fide, standart bir saksı karışımı ile doldurulmuş plastik tepsilere ekilir.
Her tepsiye, benzersiz tanımlaması için tüm bilgileri içeren bir barkod atanır ve tepsiler, fideler iki ila üç yapraklı aşamaya ulaşana kadar ısıtılmış bir seraya yerleştirilir. Son adım, hassas bir tezgah püskürtücü kullanılarak herbisit muamelesidir, tüm herbisitler, önerilen saha dozunda iki dozda önerilen yüzey aktif maddelerle ticari formülasyonlar olarak uygulanır ve tedaviden üç ila dört hafta sonra üç kez son değerlendirme yapılır. Hayatta kalan bitkilerin sayısını ve deney birimi başına görsel tahmini biyokütleyi kaydetmek için bir barkod okuyucu kullanılır.
Veriler daha sonra bir bilgisayara indirilir ve herbisit direnç durumunu belirlemek için analiz edilir. Bu yöntemin in vivo veya in vitro tanısal tarama testlerine göre en büyük avantajı, sağlamlığı ve esnekliği ile ilgilidir. Başka bir deyişle, yöntem güvenilirdir ve küçük uyarlamalar yoluyla çok çeşitli türlere kolayca uyarlanabilir.
Bu yöntem, CRO alanlarındaki herbisite dirençli yabani ot popülasyonlarının incelenmesi ve yönetimi ile ilgili direnç modeli ve seviyesi gibi temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olur. Ayrıca, bu yanıt deneyleri gibi daha ileri deneysel adımların uygun şekilde planlanmasına da izin verir. Genel olarak, herbisite dirençli testlere yeni başlayan araştırmacılar, dikkate alınması ve belirli deney koşullarına uyarlanması gereken birçok adım ve yön nedeniyle mücadele edeceklerdir.
Her seferinde bir türden bir tohum örneği toplayarak ve benzersiz bir kod atayarak başlayın. Samanı çıkararak ve tohumları çekerek tohumları temizleyin. Her örnek için atanan benzersiz kodu gösteren bir form doldurun.
Türün adı, toplanma tarihi, GPS koordinatları, belediye, çiftçinin adı, tarla büyüklüğü, istila seviyesi, sezon boyunca kullanılan mahsul herbisitleri ve tarlanın tarihi kayıtları. Tohumları, atanan benzersiz kodla etiketlenmiş mühürsüz kağıt torbalarda saklayın. Nemin buharlaşmasına izin verin, ancak tohumları yüksek sıcaklığa veya aşırı sıcaklık dalgalanmalarına maruz bırakmayın.
İkincil uyku halinin indüksiyonunu önlemek için. Temizlenmiş tohumları vernalizasyona izin vermek için karanlık bir odada dört santigrat derecede saklayın. Plastik tabaklara biraz deiyonize su koyun.
İki disk ve bir filtre kağıdı şeridi kesin, bu kılcal damardan su ile iki disk arasında bir köprü oluşturacaktır. Filtre kağıdını suya batırın ve plastik tabaklara yerleştirin. Daha sonra havayla kurutulmuş tohumları kağıdın üzerine yerleştirin.
Plastik tabakları, türe bağlı olarak gereken süre boyunca dört santigrat dereceye aktarın. Daha sonra, deiyonize su kullanarak% 0.6'da% 0.1 potasyum nitrat içeren bir burgu çözeltisi hazırlayın, burguyu bir mikrodalga fırında çözün ve burgu çözeltisini plastik tabaklara dökün. Alt tabaka soğuduktan sonra, çimlenecek Vern tohumlarını katılaşmış burgu üzerine yerleştirin.
Plastik tabakları bir çimlendirme dolabına yerleştirin, vernalizasyon süresi, ışık ve sıcaklık koşulları yabani ot türüne göre değişir. Doğrudan dikiş yerine dikim, aynı büyüme aşamasında tek tip bir bitki standının elde edilmesini sağlar, bu da herbisit tedavisinin performansını optimize etmek için önemli bir ön koşuldur 15 ila 20 fideyi, %60 siltli tınlı, toprak, %15 kum, %15 gri perlit içeren standart bir saksı karışımı ile doldurulmuş plastik tepsilere nakledin, ve% 10 turba. Her tepsiyi, benzersiz kimlik popülasyon kodu, test edilen herbisit, çoğaltma numarası ve aşamalı tepsi numarası için tüm bilgiler dahil olmak üzere bir barkodla tanımlayın.
Tepsileri ısıtılmış bir seraya yerleştirin ve alt tabakayı tarla kapasitesinde veya yakınında tutmak için bitkileri gerektiği gibi sulayın. Büyüme sıcaklığı, çıkış sonrası herbisitler için yabancı ot türüne bağlı olarak değişir. Püskürtme tesisleri, iki ila üç yaprak aşamasına ulaştıklarında, yüzey aktif madde çözeltisini etiket talimatlarına göre toplu olarak hazırlar, nihai konsantrasyon genellikle nihai hacmin yüzdesi olarak ifade edilir mi yoksa birim alana dağıtılacak hacim mi?
Yüzey aktif madde çözeltisinde çözülecek ticari ürün miktarını hesaplayın. Bu denklem kullanılarak, herbisit dozu, önerilen tarla dozunun test edilen maksimum doz ile çarpılması ve çözeltinin nihai hacminin tezgah püskürtücü tarafından verilen hacme bölünmesiyle hesaplanır. En konsantre herbisit çözeltisini hazırlayın İlk olarak, daha az konsantre çözeltiyi hazırlamak için herbisit çözeltisini üç kez seyreltin.
Bu prosedür, herbisitleri tartarken veya pipetlerken hata yapma olasılığını azaltır. Herbisit çözeltisi. Konsantrasyon, birim alana dağıtılacak hacim olarak ifade edilir.
Tedavi sırasını daha düşük bir herbisit dozu ile başlatın. Bu şekilde, aynı herbisit ile iki işlem arasında püskürtme kabinini yıkamaya gerek yoktur. Herbisit solüsyonunu, üç düz fanlı hidrolik nozul ile donatılmış bir bom ile 215 kilo paskal basınçta ve saniyede 0,75 metre hızla hektar başına 300 litre sağlayan hassas bir tezgah püskürtücü kullanarak dağıtın.
Herbisit değiştiğinde püskürtme kabinini %1 çamaşır suyu kullanarak iki kez yıkayın ve ardından durulayın. Değerlendirmeyi, test edilen herbisitlerin kaydına, tedaviden kurtulan bitki sayısına ve her tepsiyi otomatik olarak tanımlayan bir barkod okuyucu kullanarak görsel tahmini biyokütle veya VEB'ye bağlı olarak tedaviden üç veya dört hafta sonra yapın. Bitkiler, renk veya diğer görünümden bağımsız olarak aktif bir büyüme göstermezlerse ölü olarak değerlendirilir.
VEB, aynı popülasyonun arıtılmış ve arıtılmamış kontrolü arasında bitki biyokütlesinin görsel olarak karşılaştırılması yoluyla elde edilir. Herbisitten etkilenmeyen bitkiler için 10 ile bitkiler açıkça öldüğünde sıfıra kadar değişen bir puan, tedavi edilen her tepsiye verilir. Herbisitlerle hiç veya nadiren tedavi edilmemiş bir bölgede toplanan bir popülasyon gibi tüm deneylere duyarlı bir popülasyonu dahil ederek genel tedavi etkinliğini değerlendirin.
Herbisit işleminden hemen önce sayılan işlenmiş bitki sayısının yüzdesi olarak bitki sağkalımını ifade edin ve standart hatayı hesaplayın. Perme değeri, bitkilerin %5'inden daha azının herbisit dozundan kurtulduğu durumlarda duyarlı olan iki herbisit dozu ile yapılan tedavilerden elde edilen sonuçlara dayanarak popülasyonları dört kategoriye ayırır. Hayatta kalanlar herbisit dozunda% 5 ila% 20 arasında değiştiğinde bir x hafifçe dirençlidir.
Bitkilerin% 20'sinden fazlası herbisit dozundan kurtulduğunda bir x dirençlidir. Bir x ve hayatta kalanlar herbisit dozunda% 20'den fazla ve herbisit dozunda% 10'dan fazla olduğunda oldukça dirençlidir. Dört iopa popülasyonu üzerinde panolam ile bir herbisit tedavisinin üç x temsili sonucu gösterilmiştir.
Duyarlı kontrol tamamen kontrol edilirken, popülasyon 1410 biraz dirençli olarak kategorize edildi, çünkü bitkilerin% 20'sinden daha azı hayatta kaldı. Popülasyon 1411, üçüncü doz x'te kontrol edildi, ancak birinci doz x'te bitki sağkalımı %20'den daha yüksek sonuçlandı ve bu nedenle durumumuza atfedildi. Son olarak, popülasyon 1412, önerilen alan dozunda bir veya üç kez kontrol edilmedi, bu nedenle yüksek dirençli kategoriye atandı.
Trien Ron metil ile muamele edilmiş bitkilerin pop veya rehas bitkilerindeki görsel tahmin biyokütlesine ilişkin ikinci bir örnek burada gösterilmektedir. İşlem görmeyen kontrole 10 puan atanırken, bitkilerin tamamen kontrol edildiği tepsilerin VEB'si sıfırdır. Tepsilere beş ara puan atanır.
İşlem görmemiş bitkilerin yarısı olan toplam bitki biyokütlesine sahip olan tepsiler, bitkilerin herbisit işlemlerinden etkilenmediği ve bu nedenle oldukça dirençli olarak sonuçlandığı tedavi edilmemiş kontrol ile karşılaştırılabilir bir biyokütleye sahip bitkilerin VEB'si 10'dur. Bu prosedürü denerken, olgunlaştığında toplanması ve daha sonra eski haline getirilmesi gereken yabancı ot tohumlarının kalitesinin, bu prosedürü takiben deneylerin başarısı üzerinde güçlü bir etkisi olduğunu hatırlamak önemlidir. Direnç seviyesi ile ilgili ek soruları tam olarak yanıtlamak için bu yanıt byasları gibi başka yöntemler de gerçekleştirilebilir.
Bu videoyu izledikten sonra, herbisite direnç testine nasıl yaklaşılacağı ve farklı adımların farklı yabani ot türlerine nasıl uyarlanacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. Özellikle, tohum CY frenleme ve tohum çimlenmesi. Herbisitler veya konsantre asitlerle çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini unutmayın, bu prosedürü gerçekleştirirken maske, eldiven ve diğer kişisel koruyucu giysilerin her zaman alınması gereken önlemler alınmalıdır.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, yabani ot popülasyonlarında herbisitlere direnci teyit etmek için sağlam ve esnek bir yaklaşım sunmaktadır. Protokol, çeşitli yabani ot türleri ve herbisitler için direnç seviyelerini çıkarsamak için küçük uyarlamalar ile mümkün kılınmaktadır.
Herbicide resistance testing in weed populations provides a predictive model for target-site resistance mechanisms relevant to agrochemical R&D. The whole-plant bioassay approach enables mechanistic de-risking of herbicide candidates by confirming functional resistance levels across species. This supports early-stage target validation and lead optimization in crop protection pipelines.
The method fits within early discovery to lead identification stages by providing resistance confirmation data that informs herbicide structure-activity relationships.