Name: Mutlak Protein Niceleme Kütle Spektrometresi İzleme Seçilen Tepki (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-08-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 4 s
Description: Öğrenin, seçili reaksiyon izleme (SRM) ile karmaşık biyolojik örneklerdeki hedef proteinlerin mutlak niceliğini nasıl belirleyeceğinizi. Bu yöntem, fare makrofaj kemotaksi sinyal yolunu incelemek için hızlı ve çok yönlü bir alternatif sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu araştırma, Ulusal Alerji ve Bulaşıcı Hastalıklar Enstitüsü NIH'nin Intramural Araştırma Programı tarafından desteklenmiştir.

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Mutlak Protein ölçümü bu biyobelirteç doğrulama ve sinyal iletim yolu modelleme gibi biyomedikal uygulamalarda bir çok farklı aralık için gereklidir. Son zamanlarda, LC-SRM kullanılarak hedeflenen proteomik peptid standart hazırlama, HPLC, qqq-MS ve LC-SRM veri analizi de dahil olmak üzere çok sayıda teknolojilere iyileştirmeler yararlanmıştır. Sonuç olarak, bağışıklık karşı güçlü bir alternatif haline gelmiştir. Immünoanalizler ve / veya uygun değildir multiplekslemesi için, son derece hassas ve yüksek verimli olabilir...

Kütle spektrometrisi (MS) kullanmak proteomik deneyler hedefli olmayan (av tüfeği) veya hedeflenen yöntemleri ya kullanmak için dizayn edilebilir. Keşif proteomik genellikle geleneksel veri bağımlı toplama modunu kullanarak, ya da (örneğin, MS E, SWATH) son zamanlarda geliştirilen veri bağımsız tekniklerden birini 1,2 kullanarak, ya aşağıdan yukarıya av tüfeği MS dayanır. Shotgun proteomik yüksek verimli peptit tanımlama ve nispi ölçümü için güçlü bir araçtır, ama mutlak ölçümü için veya proteinlerin küçük tanımlanan setler (~ onlarca) hedefleme için genellikle uygun değildir. En sık hedeflenen proteomik için kullanılan MS yöntemi nedeniyle yüksek hassasiyet, hız ve dinamik aralık 3-5 tepkisini izleme (SRM) seçilir. SRM alternatifleri yüksek çözünürlüklü, tam MS tarama 6 yararlanır paralel reaksiyon izleme içerir. SRM genellikle nano-akış Rever kullanılarak gerçekleştirilirSED-fazlı yüksek-performanslı sıvı kromatografisi (nano RP-LC) nano-elektrosprey iyonizasyon bağlanmış cihaz üçlü dört kutuplu kütle spektrometresi (qqq-MS) takılmış bir (daha nano-ESI) iyon kaynağı. Tipik bir deneyde, örnek proteinler proteolitik olarak sindirilir ve elde edilen peptitler, kromatografik ayrıldı, desorbe ve iyonize edilebilir. Elde edilen öncül iyonları m / ilk kuadruple (Q1) tarafından filtre z ve çarpışma gazı ile çarpışarak tarafından ikinci kuadropol (q2) parçalanmış bulunmaktadır. Elde edilen fragman, iyonlarıdır m / z-süzüldü üçüncü dört kutuplu (Q3) ve bir dynode ile nicelendirildi. Her bir ön-madde ve fragman iyon çifti bir geçiş olarak ifade edilir ve her bir geçiş belirli bir süre (kalma süresi tipik olarak 2-50 msn) izlenir. LC-SRM sırasında geçişler önceden tanımlanmış bir liste üzerinden qqq-MS döngüleri (görev döngüsü genellikle ≤3 sn olan) ve her bir geçiş kromatogram üretilir. Alternatif strategProtein ölçümü için ler, tipik olarak bu nokta, blotlar, Western blotlar, ELISA antikor mikrodizileri, ters fazlı protein mikrodizilerinin, mikroakışkan bağışıklık dijital ELISA ve mikroküre bazlı bağışıklık 7 olarak immün kullanımı. En iyi immünodeneyler LC-ARM önemli ölçüde daha fazla duyarlı olabilir ve bağışıklık örnek hacmi LC-SRM 5 önemli ölçüde daha yüksek olabilir. Ancak, gelişmekte olan immünoanalizler pahalı olabilir ve / veya zaman alıcı ve elde edilen analizler hücrenin / doku lizis / homojenizasyon yöntemleri ile uyumsuz, çapraz reaksiyon ve / veya müdahale savunmasız olabilir ve / veya uygun olmayan 5.8 multiplekslemesi için. Bu sorunlardan bazıları antikor ve MS tabanlı teknikler birleştirilmesi ele alınabilir. Örneğin, hedef proteinleri önce proteoliz ve LC-SRM 9-12 immunoprecipitation kullanılarak zenginleştirilebilir. Seçenek olarak ise, SISCAPA tekniği peptid leve de proteolize sonra imüno kullanmaktadırl 13,14. Buna ek olarak stratejiler immunoenrichment için, yüksek bolluk proteinlerin bağışıklık sistemine analitleri 15,16 elüsyona alarak paraziti azaltarak LC-SRM duyarlılığını artırmak için istihdam edilebilir. MS-bazlı protein ölçümü etiket özgür ve izotop etiketleme (örneğin, metabolik etiketleme, etiketleme kimyasal ve ağır etiketli protein ve peptid iç standartlar) içine de göreli ve mutlak ölçümü ayrılır ve yapılabilir. Etiket serbest teknikler göreli protein ölçümü için yararlı olabilir, ancak kesin mutlak ölçümü için uygun değildir olabilir. Karşılaştırma olarak, etiketleme teknikleri numune hazırlama ve MS varyans ile ilişkili hata azaltmıştır, ve çoğu zaman görece protein miktarının 17 kullanılmaktadır. Örneğin, izotop etiketli proteome (SILAP) standartları, insan serumu 18 LC-ARM üzerinden olası biyolojik belirteçler nispi miktarını etkin kültürlenmiş insan hücre hattı kullanılarak hazırlandı. MS ile Doğru mutlak protein ölçümü saflaştırılmış, sayısal, izotopik olarak etiketlenmiş protein ya da peptid iç standartlar çivili-içine olması MS öncesinde biyolojik örnekler gerektirir. LC-SRM iş akışına ağır izotop etiketli dahili standartların dahil son derece tekrarlanabilir ve laboratuarlar 16,19 arasında transfer olduğu gösterilmiştir mutlak kantifikasyonunu sağlar. MS ile saf protein ölçümü için izotop etiketli dahili standartlar peptid standartları, katı faz sentezi 20, birleştirilmiş proteaz klivaj peptid standartları 21 oluşan proteinler, ve tam uzunluktaki protein standartlarını 22 kullanılarak hazırlandı bulunmaktadır. Hedef protein kovalent modifikasyon ve eksik numune hazırlama (yani eksik örnek parçalama ve homojenizasyon ve eksik protein solübilizasyon, denatürasyonu, alkilasyon ve proteoliz) doğru kantifikasyon sarsar. İç protein standartlar bu potansiyel sorunların en etkilenecek en az olasıdır, ancak genellikle hazırlamak için en zor bulunmaktadır. Alternatif bir amino- ve karboksi-terminal ana kuşatan kalıntılarını içerecek şekilde tasarlanan çok sayıda dahili peptid standartları kullanılarak her bir hedef protein analiz etmektir. Ne olursa olsun, iç standart türü kullanıldığında bunlar, bu katkılı halinde gereken biyolojik örnekler gibi erken bir noktada mümkün olduğu numune hazırlama sırasında. Ayrıca, birden çok örnek hazırlama teknikleri (örneğin, farklı bir denatürasyon koşulları) test edilmelidir. Birden dik deneysel teknikler (deneysel çapraz doğrulama) kullanımı 23-25 ​​zorluklar çoğu potansiyel kantifikasyon üstesinden gelmek için uygun bir stratejidir. Proteinlerin LC-SRM miktar geniş bir uygulama yelpazesinde kullanılabilir olan son derece esnek bir tekniktir. Özellikle, bu içindeki peptid ve protein biyolojik işaretleri incelemek için kullanılmıştırBöyle serum, çekirdek biyopsiler ve ince iğne aspiratları 5 klinik örnekler. LC-SRM ayrıca, botulinum nörotoksinlerinin 27 tespit etmek için sinyal yolları 5 içinde protein fosforilasyon dinamikleri ölçmek için ve protein konformasyonuna 28 değişiklikleri ölçmek için, protein kompleksleri 5,26 stokiyometri ölçmek için kullanılmıştır. Laboratuvarımız kemotaksis yolu simülasyonları gelişimini desteklemek için makrofaj kemotaksisini arabuluculuk sinyal proteinleri ölçmek için LC-SRM kullanıyor. protokol genel şeması (Şekil 1) kesin olmayan hedef peptidleri sıralaması ile başlar. Daha sonra, ham dış peptid standartları sentezlendi ve biyolojik numunelerin nitel analiz için LC-SRM tahlilleri geliştirmek için kullanılır. Biyolojik numune türetilen hedef peptid tespit edilirse, saflaştırılmış ağır etiketli dahili peptid standartları niceliksel LC-ARM hazırlanır. Bu protokol, ac için kullanılabilircurately biyolojik örneklerin çeşitli proteinleri ölçmek ve protein hedeflerinin çok çeşitli araştırmalar desteklemek.

<table><tbody><tr><td>Asetonitril (ACN), LC-MS sınıfı</td><td>Fisher</td><td>A955-1</td><td></td></tr><tr><td>BCA (bikinkoninik asit) protein tahlil kiti</td><td>Fisher</td><td>23235</td><td></td></tr><tr><td>Boncuk çırpma için boncuklar, zirkonya-silika, 0,1 mm</td><td>BioSpec Ürünleri</td><td>11079101z</td><td></td></tr><tr><td>Bestatin hidroklorür</td><td>Sigma</td><td>B8385-10MG</td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü DMEM (glikozlu, L-glutamin olmadan)</td><td>Lonza</td><td>12-614F</td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü EDTA, 500 mM, pH8</td><td>Gibco</td><td>15575</td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü fetal sığır serumu (FBS)</td><td>Atlanta Biologicals</td><td>S11550</td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü L-glutamin</td><td>Sigma</td><td>G8540-25G</td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü fosfat tamponlu salin (PBS) pH 7.4</td><td>Gibco</td><td>10010-049</td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü Tripan Mavi canlılık lekesi, %0,4 w/v</td><td>Lonza</td><td>17-942E</td><td></td></tr><tr><td>Cellometer Otomatik T4 hücre sayacı</td><td>Nexcelom Bioscience</td><td>Cellometer Auto T4</td><td></td></tr><tr><td>Cellometer Auto T4 tek kullanımlık sayma odaları</td><td>Nexcelom Bioscience</td><td>CHT4-SD100-014</td><td></td></tr><tr><td>Dithiothreitol (DTT)</td><td>Sigma</td><td>D5545-5G</td><td></td></tr><tr><td>Formik asit, LC-MS sınıfı, ampuller</td><td>Fisher</td><td>A117-10X1AMP</td><td></td></tr><tr><td>Hemositometre, Neubauer ile geliştirilmiş, 0,1 mm derinlikte</td><td>Marienfeld-Superior</td><td>0640030</td><td></td></tr><tr><td>HEPES, 1 M, pH 7,2</td><td>Mediatech</td><td>25-060-CI</td><td></td></tr><tr><td>Hidroklorik asit, %37 w/w</td><td>VWR</td><td>BDH3028-2.5LG</td><td></td></tr><tr><td>İyodoasetamid</td><td>Sigma</td><td>I1149-5G</td><td></td></tr><tr><td>Lazer Tabanlı Mikropipet Çektirme</td><td>Sutter Instrument Co.</td><td>P-2000</td><td></td></tr><tr><td>LC kaplı silika kılcal, 50 & m id</td><td>Polymicro Technologies</td><td>1068150017</td><td></td></tr><tr><td>LC flakon, otomatik numune alma cihazı, 12 mm x 32 mm polipropilen</td><td>SUN SRI</td><td>200-268</td><td></td></tr><tr><td>LC flakon vidalı kapak, otomatik numune alma cihazı, ön yarık PTFE/silikon</td><td>SUN SRI</td><td>500-061</td><td></td></tr><tr><td>Luciferase, Photinus pyralis</td><td>Sigma</td><td>L9506-1MG'den</td><td></td></tr><tr><td>Pepstatin A</td><td>EMD Millipore</td><td>516481-25MG</td><td></td></tr><tr><td>pH şeritleri colorpHast (pH 0.0-6.0)</td><td>EMD Chemicals</td><td>9586-1</td><td></td></tr><tr><td>PhosStop fosfataz inhibitör kokteyli</td><td>Roche</td><td>04906837001</td><td></td></tr><tr><td>RapiGest SF</td><td>Suları</td><td>186001861</td><td></td></tr><tr><td>Sep-Pak SPE, C18 1 ml 100 mg kartuş</td><td>Sular</td><td>WAT023590</td><td></td></tr><tr><td>Sep-Pak SPE, ekstraksiyon manifoldu, 20 pozisyon</td><td>Sular</td><td>WAT200609</td><td></td></tr><tr><td>Sep-Pak SPE, düz yüzeyli kauçuk ampul</td><td>Fisher</td><td>03-448-25</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum hidroksit (NaOH)</td><td>Fisher</td><td>S318-500</td><td></td></tr><tr><td>SpeedVac vakum yoğunlaştırıcı</td><td>Fisher</td><td>SPD111V</td><td></td></tr><tr><td>Trifloroasetik asit (TFA), LC-MS sınıfı</td><td>Fisher</td><td>A116-50</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin, sıralama sınıfı, modifiye</td><td>Promega</td><td>V5113</td><td></td></tr><tr><td>Tüp Mikronik tüpler için decapper</td><td>USA Scientific</td><td>1765-4000</td><td></td></tr><tr><td>Tüpler, 2 ml mikrosantrifüj, o-ring vidalı kapak, steril</td><td>Sarstedt</td><td>72.694.006</td><td></td></tr><tr><td>Üre</td><td>Sigma</td><td>U0631-500g</td><td></td></tr><tr><td>Su, LC-MS sınıfı</td><td>Fisher</td><td>W6-1</td><td></td></tr></tbody></table>

mutlak protein niceleme kütle spektrometresi İzleme seçilen tepki

Selected Reaction Monitoring Mass Spectrometry for Absolute Protein Quantification

Karmaşık biyolojik örneklerdeki hedef proteinlerin mutlak miktar tayini, çok çeşitli araştırma ve klinik uygulamalar için kritik öneme sahiptir. Bu protokol, seçilmiş reaksiyon izleme (SRM) kütle spektrometresi (MS) kullanılarak kantitatif tahlillerin geliştirilmesi ve uygulanması için adım adım talimatlar sağlar. İlk olarak, olası kuantotipik hedef peptitler çok sayıda kritere göre tanımlanır. Bu, proteotipik peptitlerin tanımlanmasını, posttranslasyonel modifikasyon bölgelerinden kaçınılmasını ve hedef peptidin hedef proteine benzersizliğinin analiz edilmesini içerir. Daha sonra, ham harici peptit standartları sentezlenir ve SRM tahlilleri geliştirmek için kullanılır ve elde edilen tahliller, biyolojik numunelerin kalitatif analizlerini gerçekleştirmek için kullanılır. Son olarak, saflaştırılmış, niceliklendirilmiş, ağır izotop etiketli iç peptit standartları hazırlanır ve izotop seyreltme serisi SRM testlerini gerçekleştirmek için kullanılır. Elde edilen tüm MS verilerinin analizi sunulmaktadır. Bu protokol, RAW 264.7 hücreleri (bir fare monosit/makrofaj hücre hattı) içindeki kemotaksis sinyal yolunun proteinlerinin mutlak bolluğunu doğru bir şekilde test etmek için kullanıldı. Gi2'nin (heterotrimerik bir G-proteini α-alt birimi) miktar tayini ayrıntılı olarak açıklanmaktadır.

sinyal iletim yollarının tahmini hesaplama modellerinin geliştirilmesi sistem biyolojisi 53 temel hedeflerinden biridir. Ne yazık ki, hatta yoğun çalışılan ve yüksek klinik öneme sahip olan sinyal yolları için, bu nicel tedirginlikler cevaben yolu davranışlarını tahmin etmek için genellikle hala mümkün değildir (örn bu MAPK / ERK yolu 54 için geçerlidir). Son zamanlarda, bir soruşturma yolunun 56 sinyal fare makrofaj kemotaksisini çalışmak için hedeflenen proteomik, transkriptom...

Bu protokol, seçilen reaksiyon izleme kullanılarak karmaşık biyolojik numuneler içindeki hedef proteinlerin mutlak miktar tayini testlerinin nasıl gerçekleştirileceğini açıklar. Fare makrofaj kemotaksisi sinyal yolunun proteinlerini doğru bir şekilde ölçmek için kullanıldı. Hedef peptit seçimi, tahlil geliştirme ve kalitatif ve kantitatif tahliller ayrıntılı olarak açıklanmaktadır.

Mutlak Protein Niceleme Kütle Spektrometresi İzleme Seçilen Tepki

Absolute quantification of target proteins within complex biological samples is critical to a wide range of research and clinical applications. This ...

Bu prosedürün genel amacı, karmaşık biyolojik örnekler içindeki hedef proteinlerin mutlak bolluğunu belirlemek için sıvı kromatografisi, seçilmiş reaksiyon izleme veya L-C-S-R-M kullanmaktır. Peptit hedeflerin seçilmesinin ardından, ham harici peptit standartlar sentezlenir ve sıvı kromatografisi, kütle spektrometrisi veya LCM ms kullanarak SRM analizleri geliştirmek için kullanılır. Ortaya çıkan analizler, hazırlanan biyolojik örneklerin kalitatif lc, SRM analizini gerçekleştirmek için kullanılır.Biyolojik örnekten türetilen hedef peptid tespit edilirse, iç peptid standartlarından oluşan kararlı izotop dilüsyon serileri eklenerek biyolojik örnekler kantitatif lc SRM analizleri ile incelenir. Nihayetinde lc SRM, çok çeşitli biyolojik örneklerdeki proteinlerin doğru şekilde miktarlaştırılması için ve çok çeşitli protein hedeflerinin araştırılmasını desteklemek amacıyla kullanılabilir. Bu tekniğin immünoyasalık gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, analiz geliştirme sürecinin nispeten hızlı ve düşük maliyetli olması, sonuçlandığında analizlerin multiplekslemeye uygun olması ve antikor çapraz reaksiyonuna karşı hassasiyet taşımamasıdır.Başlamak için, metin protokolünde açıklandı

selected-reaction-monitoring-mass-spectrometry-for-absolute-protein

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Kararlı İzotop Standartlar ve Anti-Peptid Antikorlar (SISCAPA) kendi proteinler için vekilleri olarak peptidler kantitatif ölçüm sağlamak için kararlı izotop dilüsyon kütle spektrometresi (MRM-MS) ile peptitler çiftler yakınlık zenginleştirme yakalayın. Burada kısmen otomatik bir biçimde manyetik parçacıklar kullanarak protokol açıklar.

Proteinler Peptid immunoaffiniti Zenginleştirme kullanarak Niceleme Kütle Spektrometresi ile birleştiğinde

Benzer proteinlere sahip türlerin karışımlarındaki bileşenlerin tanımlanması ve miktarının belirlenmesi için bir protokol sunuyoruz. Kütle spektrometresi, tanımlama için peptitleri tespit eder ve tepe alanlarının oranlarına göre nispi nicelik verir. Dolandırıcılık tespiti için bir araç gıda olarak, yöntem sığır etinde% 1 at tespit edebilir.

Et kimlik doğrulaması için peptidler Uygulanan MRM Kütle Spektrometresi kullanarak karışımlar türlerin belirlenmesi ve miktar tayini

Burada, yüksek çözünürlüklü (~ 30.000) MS-algılama, peptid parçacıkları Monoklonal antikor çivili peptid standartları miktar için ardından peptid öncüleri iyon hareketlilik ayrılması ile birleştiğinde bir Kromatografik tahlil açıklamak Özet.

Bir HS-MRM tahlil için Protein Biyofarmasötikler sıvı Kromatografi iyon hareketlilik QTOF kütle spektrometresi tarafından Host-hücre proteinleri miktar

Bir örnek kullanarak biyolojik dokulardan lipidlerin, metabolitlerin ve proteinlerin kapsamlı şekilde ekstraksiyonu için bir protokol sunulmuştur.

Tek Bir Numuneden Metabolitlerin, Lipidlerin ve Proteinlerin Kapsamlı Analizi için Basit Fraksiyonlu Ekstraksiyon Metodu

Biz doğru bir şekilde sıvı Kromatografi yüksek çözünürlüklü bir Kütle Spektrometre için arabirim ile proteinler ile izobarik etiketleme, geniş ayırma, Biyoinformatik araçlarını ve kalite kontrol adımları birlikte quantitate için bir protokol mevcut.

Derin Proteom izobarik etiketleme, kapsamlı sıvı Kromatografi, kütle spektrometresi ve yazılım destekli miktar tarafından profil oluşturma

Kompleks biyolojik örneklerden her yerde bulunan proteinlerden kaynaklanan diGly peptidlerin arıtılmı, saptanması ve tanımlanması için bir yöntem salıyoruz. Sunulan yöntem çoğaltılabilir, sağlam ve ubiquitinome analizinin derinliği düzeyine göre yayınlanmış yöntemleri geride bırakır.

Peptit Zenginleştirme ve Kütle Spektrometresi ile Protein Ubiquitinasyon Sitelerinin Saptanması

Burada, hücre siz protein sentezi reaksiyonlarında merkezi karbon ve enerji metabolizmasında yer alan 40 bileşiği ölçmek için sağlam bir protokol salıyoruz. Hücresiz sentez karışımı ters fazlı sıvı kromatografi kullanılarak etkili ayrıştırma için anilin ile türevize edilir ve daha sonra izotopik olarak etiketlenmiş iç standartlar kullanılarak kütle spektrometresi ile ölçülür.

Ters Faz Sıvı Kromatografi-Kütle Spektrometresi Ile Hücresiz Protein Sentezmetabolizmasının Mutlak Niceliği

Açıklanan protokol, iki yaklaşım kullanarak doku örneklerinin optimize edilmiş bir nicel proteomik analizini sağlar: etiket bazlı ve etiketsiz nicellik. Etiket tabanlı yaklaşımlar proteinlerin daha doğru nicelliği avantajına sahipken, etiketsiz bir yaklaşım daha uygun maliyetlidir ve bir kohorttan yüzlerce örneği analiz etmek için kullanılır.

Doku Örneklerinin Kütle Spektrometresi Bazlı Av Tüfeği Proteomik Kapsamlı İş Akışı

Protokol, klinik örneklerden elde edilen proteinlerin Çoklu Reaksiyon İzlemesi (MRM) için üçlü dörtlü kütle spektrometresi kullanımını sağlamayı amaçlamaktadır. Alınması gereken tüm önlemlerle klinik numuneler için numune hazırlamadan veri analizine kadar sistematik bir iş akışı sağladık.

İnsan Beyin Dokusundan Proteinlerin Çoklu Reaksiyon İzleme Tabanlı Tespiti Kullanılarak Nicel Proteomik İş Akışı

Biyobelirteç progastrin salgılayan peptid (ProGRP) ile örneklenen kurutulmuş serum örneklerinden düşük bollukta biyobelirteçlerin belirlenmesi için bir protokol sunulmuştur. Antikor kaplı manyetik boncuklar, proteotipik bir ProGRP peptidinin seçici temizliği ve zenginleştirilmesi için kullanılır. Yakalanan peptit daha sonra sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometrisi ile analiz edilir.

Düşük Bolluktaki Proteinlerin Hedeflenen Kütle Spektrometrisine Dayalı Protein Analizinde Mikro Örnekleme

Öğrenin, seçili reaksiyon izleme (SRM) ile karmaşık biyolojik örneklerdeki hedef proteinlerin mutlak niceliğini nasıl belirleyeceğinizi. Bu yöntem, fare makrofaj kemotaksi sinyal yolunu incelemek için hızlı ve çok yönlü bir alternatif sunar.

Mutlak Protein Niceleme Kütle Spektrometresi İzleme Seçilen Tepki

Daha fazla video keşfet