2 Aralık 2015
Öngörülemeyen kronik hafif stres (UCMS) protokolü, kronik stres ve depresif belirtilerle ilişkili davranışsal ve fizyolojik değişiklikleri incelemek için doğrulanmış bir yöntemdir. UCMS protokolünün sekiz haftalık uygulanması, her iki cinsiyetteki kemirgenlerde davranış değişikliklerine ve kötü sağlık sonuçlarına neden olur.
Aşağıdaki deneyin genel amacı, bir kemirgen suşunu, rastgele belirlenen bir dizi kronik, öngörülemeyen stres etkenine maruz bırakmaktır, öyle ki, hayvanın artan depresif semptomların şiddeti altında etkili bir şekilde telafi edemeyeceği şekilde gelişir. Bu, stresli olacak şekilde tasarlanmış ancak hayvana zarar vermeyecek veya zarar vermeyecek şekilde tasarlanmış olası uyaranlar listesinden birine günlük olarak maruz kalarak elde edilir. Hayvanlar, düzenli aralıklarla sekiz hafta boyunca haftada beş ila altı gün stres faktörlerine maruz bırakılır, hayvanlar, kod durumunu ve sakaroz sprey testi gibi uyaranları empoze etmek için hayvan tepkilerini değerlendirerek depresif semptomların gelişimi açısından izlenir.
Sonuçlar, kronik randomize, çözülemeyen stres faktörlerinin hayvanın çevresine uygulanmasının, hayvanın uyum sağlama yeteneğini engellediğini ve birkaç hafta boyunca depresif semptomların gelişmesine neden olduğunu göstermektedir. Bu yöntem, kronik depresif belirtilerin diğer doku veya organ sistemlerinde nasıl olumsuz sağlık sonuçlarına yol açabileceği gibi kronik hastalık alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu yöntemi kullanma fikri ilk olarak, klinik popülasyonlarımızda ileri kardiyovasküler hastalık ile hastalık riski arasındaki derin komorbid ilişkileri ve aynı zamanda derin depresif hastalıkların eşzamanlı sunumunu öğrendiğimizde ortaya çıktı.
Bu prosedürü laboratuvarlarımızdan doktora öğrencileri Bay Steven Brooks ve Bayan Kayla Brannon gösterecektir. Ayrı kafeslerde hafif stresli ev fareleri üretmek ve fareleri her bir stres etkeni için en az üç ila dört saat boyunca günde bir veya iki stres etkenine maruz bırakmak için, aşağıdaki stres faktörleri listesi nemli yatak stresörü için randomize bir programda gerçekleştirilmelidir. Standart bir kafese 10 ila 20 ons temiz su dökerek yatağı ıslatın.
Fareyi nemli kafeste üç ila dört saat tutun. Yatakları kafesten üç ila dört saat çıkarın, ardından fareyi boş bir kafes gerektiren başka bir stres etkenine geçirin veya yeni yatak takımlarıyla temiz bir kafese yerleştirin. Fare kafes içinde hareket ederken yerinde kalacak sağlam bir nesne kullanarak yataksız kafesleri üç ila dört saat boyunca yaklaşık 45 dereceye kadar eğin Bu stres etkeni için, normal 12 saatlik aydınlık, 12 saatlik karanlık döngüleri 30 dakikalık periyotlarla art arda değiştirin ve toplam sekiz saat sürer.
Fareyi ev kafesinden, üç saatlik stres etkeni süresi boyunca çıkarılmış olan komşu bir farenin kafesine aktarın. Yatağı kafesten çıkarın ve fareler için yaklaşık 0,25 inç derinliğe kadar su ekleyin ve fareyi yaklaşık dört saat bırakın. Kısaca, suya maruz kalmanın sonunda fareyi yumuşak bir havluyla kurulayın.
Doğal bir avcı türünden rastgele dağıtılmış tutamlar veya 10 ila 20 mililitre idrar ekleyerek fareleri yırtıcılara, kokulara veya seslere maruz bırakın ve fareyi üç ila dört saat bekletin. Alternatif olarak, her günlük stres döneminin sonunda üç saat boyunca kafeslere yakın olan doğal yırtıcı türlerden gelen hırıltılı veya yırtıcı sesler oynayın. Fareleri temiz kafeslere koyun ve her gün barınma tesisine geri getirin.
Her hayvanı haftada bir kez veteriner tedavisi gerektirebilecek yara veya yaraların gelişimi açısından inceleyin, kod tımarını değerlendirmek için eğitilmiş iki araştırmacıya sahip olun. Her hayvanı inceleyin ve sıfırdan bire kadar bir ölçekte haftalık bir kod puanı atayın. Sekiz vücut bölgesinin her birine temiz anlamına gelen sıfır veya kirli anlamına gelen bir ayrı puanlar atayarak her bir puanı ekleyin.
Baş, boyun, sırt ceketi, ventral ceket, kuyruk, dört uzuv, arka bacaklar ve genital bölge. Yatağın tüylerine yapışmasını önlemek için hayvanı pamuklu bir ped veya havluyla kaplı temiz bir kafese koyun. Daha sonra her bir hayvanın başına ve sırt kürküne %10'luk bir sükroz solüsyonu püskürtün ve toplam tımar davranışını beş dakika boyunca kaydedin.
Bu süre zarfında yüz bakım aktivitesinin gecikmesini ve sıklığını ölçün. Gecikme, ilk sprey ile yüz bakımının başlatılması arasındaki süredir ve sıklık, yüzün tımar edilme sayısı olarak ölçülmelidir. Sekiz haftalık öngörülemeyen kronik hafif stresin ardından, kronik stresli kemirgenlerde stresli olmayan kontrol suşlarına göre hem davranışsal hem de fizyolojik sonuçlarda önemli değişiklikler oldu.
Fareler, öngörülemeyen kronik hafif stresi takiben depresif benzeri semptomlar geliştirdi ve tüy bakım skorlarında ilerleyici bir düşüş gösterdi. Tüylerin fiziksel durumundaki bu belirgin bozulma, bakım aktivitesinin azaldığını gösterir ve motivasyon eksikliğine paralel olabilir. Son kanıtlar, erkek ve dişi fareler arasında öngörülemeyen kronik hafif strese verilen yanıtlarda önemli bir nicel farklılık olduğunu göstermiştir.
Spesifik olarak, veriler, yaşa uygun erkeklerle aynı stres protokolüne maruz kalan dişi farelerin, protokole erkeklerden daha şiddetli davranışsal tepkiler geliştirdiğini göstermektedir. Bu prosedürü takiben, kronik depresif belirtilerin varlığının ilgilenilen organ sistemindeki normal işlevi nasıl etkileyebileceği gibi ek soruları yanıtlamak için organa özgü işleve uygun diğer yöntemler kolayca uygulanabilir. Bu videoyu izledikten sonra, kemirgen modelinizde artan depresif semptomların koşullarını aşamalı olarak oluşturmak için UCMS protokolündeki farklı adımların ve prosedürlerin nasıl kullanılacağını iyi anlamalısınız.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Öngörülemeyen kronik hafif stres (UCMS) protokolü, kronik stres ve depresif semptomlarla ilişkili davranışsal ve fizyolojik değişiklikleri incelemek için doğrulanmış bir yöntemdir. Bu çalışma, kemirgenleri sekiz hafta boyunca bir dizi kronik, öngörülemeyen strese maruz bırakarak depresif semptomların gelişimine yol açar.
The unpredictable chronic mild stress (UCMS) protocol provides a translationally relevant rodent model for evaluating the behavioral and physiological consequences of chronic stress exposure, which is a major risk factor for clinical depression. By inducing depressive-like symptoms and associated health outcomes such as hypercortisolemia and hypertension, the model supports mechanistic de-risking in early discovery for CNS-targeted therapeutics. It enables preclinical assessment of potential interventions, including chronic SSRI efficacy, thereby informing go/no-go decisions in antidepressant development pipelines.
The UCMS protocol fits within the discovery continuum from target validation through lead identification to preclinical efficacy testing, particularly for CNS and psychosomatic disorder programs. It enables hypothesis-driven interrogation of stress-related mechanisms prior to compound screening.