Tahrik Depresif Belirtiler, Davranış Değişiklikleri ve Kemirgenler Negatif Sağlık Kazanımları için Öngörülemeyen Kronik Hafif Stres Protokolü

Aşağıdaki deneyin genel amacı, bir kemirgen soyunu, hayvanın artan depresif semptomların şiddeti altında etkili bir şekilde telafi edemeyeceği şekilde rastgele belirlenen bir dizi kronik, öngörülemeyen stresöre maruz bırakmaktır. Bu, hayvan için stresli ancak zarar verici veya yaralayıcı olmayan olası uyaranlar listesinden birine günlük olarak maruz bırakılarak gerçekleştirilir. Hayvanlar sekiz hafta boyunca haftada beş ila altı gün düzenli aralıklarla stresörlere maruz bırakılır; ardından kod durumu ve sükroz püskürtme testi gibi dayatılan uyaranlara karşı hayvan tepkilerinin değerlendirilmesi yoluyla depresif semptomların gelişimi izlenir.

Sonuçlar, hayvanın ortamına kronik randomize çözülemeyen stresörlerin uygulanmasının, hayvanın adapte olma yeteneğini engellediğini ve birkaç hafta süresince depresif semptomların gelişmesine neden olduğunu göstermektedir. Bu yöntem, kronik depresif semptomların diğer doku veya organ sistemlerinde nasıl olumsuz sağlık sonuçlarına yol açabileceği gibi kronik hastalıklar alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu yöntemi kullanma fikri ilk olarak, klinik popülasyonlarımızda ileri evre kardiyovasküler hastalık ile hastalık riski arasındaki derin komorbid ilişkileri ve buna eşlik eden derin depresif hastalıkların eş zamanlı seyrettiğini öğrendiğimizde ortaya çıkmıştır.

Bu prosedürü laboratuvarlarımızdan doktora öğrencileri Bay Steven Brooks ve Bayan Kayla Brannon uygulamalı olarak gösterecekler. Ayrı kafeslerdeki ev farelerine hafif stres uygulamak ve fareleri her bir stresör için en az üç ila dört saat olmak üzere günde bir veya iki stresöre maruz bırakmak amacıyla, nemli altlık stresörü için aşağıdaki stresör listesi randomize bir programa göre uygulanmalıdır. Standart bir kafese 10 ila 20 ounce temiz su dökerek altlığı ıslatın.

Fareyi üç ila dört saat boyunca nemli kafeste tutun. Kafesteki altlığı üç ila dört saat boyunca çıkarın ve ardından fareyi boş kafes gerektiren başka bir stresöre geçirin veya taze altlığı olan temiz bir kafese yerleştirin. Altlıksız kafesleri, fare kafes içinde hareket ederken yerinde duracak sağlam bir nesne kullanarak üç ila dört saat boyunca yaklaşık 45 derece eğimli hale getirin. Bu stresör için, normal 12 saat ışık, 12 saat karanlık döngülerini toplam sekiz saat sürecek 30 dakikalık periyotların ardışık dizileriyle değiştirin.

Fareyi kendi kafesinden, üç saatlik stres süresi boyunca çıkarılmış olan komşu bir farenin kafesine aktarın. Kafesteki altlığı çıkarın ve fareler için yaklaşık 0,25 inç derinliğinde su ekleyerek fareyi yaklaşık dört saat boyunca burada bırakın. Suya maruz kalma süreci sona erdiğinde, fareyi yumuşak bir havluyla kısaca kurulayın.

Kafeslerin içine rastgele dağıtılmış tüy kümeleri veya doğal bir yırtıcı türe ait 10 ila 20 mililitre idrar ekleyerek fareleri yırtıcıya, kokulara veya seslere maruz bırakın ve fareyi üç ila dört saat boyunca orada tutun. Alternatif olarak, her günlük stres döneminin sonunda, kafeslerin yakınına doğal yırtıcı türlerine ait hırlama veya yırtıcı sesleri üç saat boyunca dinletin. Fareleri temiz kafeslere yerleştirin ve her gün barındırma tesisine geri götürün.

Her hayvanı haftada bir kez, veteriner tedavisi gerektirebilecek yara veya lezyonların gelişimi açısından inceleyin; kodlu bakım değerlendirmesi konusunda eğitilmiş iki araştırmacı görevlendirin. Her hayvanı inceleyin ve sıfır ile bir arasındaki ölçekte haftalık bir kod puanı atayın. Sekiz vücut bölgesinin her birine, temiz anlamına gelen sıfır veya kirli anlamına gelen bir puan atayarak her bir bireysel puanı ekleyin.

Baş, boyun, sırt bölgesi, karın bölgesi, kuyruk, dört ekstremite, arka ekstremiteler ve genital bölge. Hayvanı, altlığın tüylerine yapışmasını önlemek için pamuklu ped veya havlu serilmiş temiz bir kafese yerleştirin. Ardından, her hayvanın başına ve sırt bölgesine %10 sukroz çözeltisi püskürtün ve beş dakika boyunca toplam bakım davranışını kaydedin.

Bu süre zarfında yüz temizleme davranışının gecikme süresini ve frekansını ölçün. Gecikme süresi, ilk sprey ile yüz temizlemenin başlaması arasında geçen süredir; frekans ise yüzün kaç kez temizlendiği şeklinde ölçülmelidir. Sekiz haftalık öngörülemez kronik hafif stresin ardından, kronik strese maruz kalan kemirgenlerde, strese maruz kalmayan kontrol suşlarına kıyasla hem davranışsal hem de fizyolojik sonuçlarda anlamlı değişiklikler meydana gelmiştir.

Fareler, öngörülemeyen kronik hafif stres sonrası depresyon benzeri semptomlar geliştirmiş ve kürk bakımı skorlarında aşamalı bir düşüş göstermiştir. Kürkün fiziksel durumundaki bu belirgin bozulma, bakım aktivitesinin azaldığını göstermekte ve motivasyon eksikliğiyle paralel seyretmektedir. Güncel kanıtlar, öngörülemeyen kronik hafif strese verilen yanıtlar arasında erkek ve dişi fareler arasında önemli bir sayısal farklılık olduğunu ortaya koymuştur.

Özellikle veriler, yaşları uygun olan erkek farelerle aynı stres protokolüne maruz kalan dişi farelerin, protokole karşı erkeklere göre daha şiddetli davranışsal tepkiler geliştirdiğini göstermektedir. Bu prosedürün ardından, kronik depresif semptomların varlığının ilgili organ sistemindeki normal işlevleri nasıl etkileyebileceği gibi ek soruları yanıtlamak amacıyla, organa özgü fonksiyonlara uygun diğer yöntemler kolaylıkla uygulanabilir. Bu videoyu izledikten sonra, kemirgen modelinizde artan depresif semptom koşullarını kademeli olarak oluşturmak için UCMS protokolündeki farklı adım ve prosedürlerin nasıl kullanılacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.