Trigeminal Nöropatik Ağrı Eğitim için Rat adlı infraorbital Sinir (ION-CCI) kronik Daralma Yaralanma

Bu el yazması, trigeminal nöropatik ağrıyı incelemek için bir kemirgen modelini tanımlamaktadır. Açıklanan yöntemler, sıçanın infraorbital sinirinin kronik daralma yaralanmasını gerçekleştirmek için cerrahi prosedürleri ve kalıcı ağrı ve allodinin göstergesi olan spontan ve uyarılmış davranıştaki değişiklikleri ölçmek için cerrahi sonrası davranış testlerini içerir.

Bu prosedürün genel amacı, infraorbital sinirde kronik bir daralma yaralanması yoluyla sıçanlarda trigeminal nöropatik ağrıyı incelemektir. Bu, önce orta hatta bir kafa derisi kesisi yapılarak ve infraorbital siniri açığa çıkararak gerçekleştirilir. İkinci adım, sinirin etrafına gevşek bir şekilde bağlanmış iki ligatür yerleştirerek infraorbital siniri daraltmaktır.

Daha sonra, hayvan 10 dakika boyunca bir gözlem kafesine yerleştirilir ve izole yüz tımar miktarı ölçülerek spontan nöropatik ağrı değerlendirilir. Ek olarak, mekanik allodini, sıçanın infraorbital sinir bölgesinin, kademeli bir dizi Von Frey saç filamenti ile uyarılmasıyla, sonuçta tımar davranışı ve tepkisindeki değişikliklerle ölçülür. EPS'de infraorbital sinir bölgesi, trigeminal nöropatik ağrının tedavisini araştırmak için kullanılır.

Kırmızı Infraorbital sinir modelinin siyatik sinir veya spinal sinir ligasyonu modeli gibi diğerlerine göre ana avantajı, infraorbital sinirin motor veya otonomik bileşenleri olmayan tamamen duyusal bir sinir olmasıdır. Ayrıca bu model nöropatik ağrıda en önemli şikayet olan spontan ağrının ölçümünü de içermektedir. Hasta. Hayvanlar, Komite'nin yönergelerine göre tedavi edilir ve bakılır.

IASP'nin Araştırma ve Etik Konular için protokolü Kurumsal Etik Kurul tarafından onaylanır. Hazırlık olarak, beş sıfır kromik bağırsak bağının iki altı santimetrelik parçasını kesin, sertleşmemeleri için steril bir tuzlu su kabında saklayın. Sıçanın bir refleks tepkisi olmaması nedeniyle uyuşturulduğunu doğruladıktan sonra, başını tıraş ederek ameliyata hazırlamaya başlayın.

Kafa derisinin ortasındaki bir kesi için, gözlerin merkez noktasından 25 milimetrelik bir yarıçapı tıraş edin. Daha sonra, farenin kafasını stereotaksik bir çerçeveye sabitleyin ve farenin vücudunun altına ısıtılmış bir ped koyun. Daha sonra biraz oftalmik merhem sürün ve traşlı bölgeyi alternatif alkol ve Betadine fırçaları ile temizleyin.

Kafatasını ve burun kemiğini ortaya çıkarmak için ameliyata orta hat kafa derisi kesisi ile başlayın. Diseksiyon mikroskobu kullanarak ameliyata devam edin. Daha sonra, forseps kullanarak, maksiller, frontal, lakrimal ve elmacık kemiklerinden oluşan yörüngenin kenarı da gerektiği gibi kanı temizler.

Şimdi ION'a erişmek için yörünge içeriğini hassas bir pamuklu çubukla nazikçe saptırın. Bunu yaparken, ION'a üstünden geçen anterior etmoidal siniri aşırı germeyin. Daha sonra, forseps yardımıyla, ION'u çevreleyen bağ dokusundan arındırmak için bir yayılma hareketi kullanın, her zaman gerektiği gibi bir kanamayı temizleyin.

Şimdi, ION'un mediali olan frontal kemik boyunca bir n'yi aşağı doğru iterek ve ardından ION'dan daha düşük kalan ION'a paralel olarak birkaç milimetre ilerleterek ION ile frontal kemik arasına bir bağ parçası yerleştirin. Daha sonra 45 derece açılı bir forsepsin ucunu bağa yakın bir şekilde ION'un altına kaydırın ve ION'u yanal olarak yavaşça geri çekin, bu da forsepsin bağını ve uçlarını ortaya çıkarır. Bağı tutun ve ION'un altından geçirin, açıkta kalan uzunluklar eşit olana kadar dışarı çekin.

Daha sonra uçları bir kayma düğümü ile bağlayın ve düğümü görünür bir şekilde İYON'un üzerine kaydırın. Siniri hafifçe sıkın ve düğümü tamamlayın, böylece daha fazla kaymaz. Şimdi, bağın serbest uçlarını kesin ve aynı tekniği kullanarak ilk bağdan iki milimetre uzağa başka bir bağ yerleştirin.

Bitişik harflerin doğru yerleştirildiğini görsel olarak onaylayın. Kafa derisini dört adet sıfır polyester dikiş ile kapatarak ameliyatı tamamlayın. Ardından, fareyi ısıtılmış bir ped üzerinde iyileşirken izleyin.

Sternal yerleşikliği yeniden kazandığında, uygun bir kafese geri koyun. Sıçan tamamen iyileşene kadar tek başına barındırılmalıdır. Bu test, 60 watt'lık tek bir kırmızı ampulle aydınlatılan karanlık bir odada yapılmalıdır.

Test bölgesinden bir metre uzakta. Gerekirse yeterli arka plan gürültüsü olduğundan emin olun. Test bölgesinde beyaz gürültü sağlayın.

Gözlem kafesinin bir tarafına bir ayna yerleştirin ve fareyi ve aynayı karşı tarafta görmek için bir video kamera yerleştirin. Her deneme için her zaman temiz bir test kafesi kullanılmalıdır. Koloniden tek bir fareyi, aksi takdirde boş bir kafes içinde test alanına getirin.

Hayvanı test kafesine koyun ve 10 dakika boyunca davranışını kaydedin. Kaydı yaptıktan sonra, fareyi koloniye geri koyun ve test kafesini temizleyin. Fareleri birkaç gün boyunca test bölgesine alıştırdıktan sonra, sonraki verileri analiz edin, kayıtları izleyin ve tımar bölümlerini puanlayın.

Yüz bakımı, dört pençenin yüz bölgesine temas ettiği hareket kalıpları olarak tanımlanır. Ayırt edilen izole yüz bakımı, yüz bakımından, vücudun tımarından önce veya sonra gelir. Beden. Tımarlama, pençelerin, dilin veya kesici dişlerin yüz veya dört pençe dışındaki bir vücut bölgesiyle temas ettirildiği herhangi bir harekettir.

Sonraki kayıt. Yüz bakımı için harcanan süre ve bakım bölümlerinin sayısı. Bakım atakları, en az dört saniyelik ölümcül olmayan tımar davranışı ile ayrılır.

Vücut bakımı, yüz bakımı olarak sayılmaz ve iki yüz bakımı bölümü, dört veya daha fazla saniyelik vücut bakımı ile kesintiye uğrayabilir. Sıçanları altı kişilik gruplar halinde test için kapalı kafeslerde test bölgesine taşıyın. Tek bir fareyi yatak takımı ve menteşeli bir kapak ile plastik bir kafese aktarın Kolay erişim için.

Test için beş farklı Von Frey saçına sahip olun. Von Frey tüylerini 10 dakika boyunca en esnekten en serte doğru aşamalı olarak uygulayın. Bu süre zarfında farenin kafese yerleşmesine izin verin.

Her 30 saniyede bir kapağı açın ve bir prob çubuğunu duvara hafifçe dokundurun. Sıçan yerleştiğinde ve sadece burnunu çektiği yerleşim döneminden sonra, ION Bölgesi'ndeki ilk Von Frey kılıyla, mezial vibra göğsünü çevreleyen kıl derisi üzerindeki SLE pedinin merkezinde yer alarak onu dürtün. Filament yeterince serttir, bu nedenle yaklaşık yarım saniye boyunca bükülür.

Yanıt yok için hayvanın yanıtını puanlayın. Sıfır puan bir kaydedin. Sıçan uyaranı fark ederse, ancak başka bir şey yapmazsa, yanıtı iki olarak puanlayın.

Sıçan uyarandan yavaşça çekilirse, bir yüz silme işlemi iki olarak sayılır. Puan, yanıt üç olarak. Sıçan uyarana saldırmaya çalışırsa veya hızlı bir şekilde geri çekilirse, sıçan uyarılan bölgeye en az üç yüz yıkama darbesi ile asimetrik olarak tımar ederek yanıt verirse, yanıtı dört olarak puanlayın.

Tipik olarak altı sıçan, bir sonraki saç kullanılmadan önce her birinde bir saç kullanılarak aynı anda test edilir. Bir saç bir tarafa uygulandıktan sonra, aynı saçı karşı tarafa uygulayın. Her iki taraf da uyarıldığında, bir sonraki saça geçin.

Her sıçan için, önce hangi tarafın uyarılacağını rastgele seçin. ION daraltma işleminden sonra, sıçanların gözlemlenmesi, izole yüz tımarında önemli ölçüde daha fazla zaman harcadıklarını ortaya koydu. ION bölgesinin ipsilateral mekanik stimülasyonu, ilk ameliyat haftasında neredeyse hiç yanıt vermedi.

Ameliyat sonrası ikinci haftada, sıçanlar aşırı duyarlı hale geldi. Bu 120 güne kadar devam etti. Kontralateral tarafta duyarlılıkta çok küçük bir artış da kaydedildi.

Bu videoyu izledikten sonra, sıçanlarda infraorbital sinirin nasıl açığa çıkarılacağını ve bağlanacağını ve spontan nöropatik ağrı ve mekanik allodiniyi ölçmenizi sağlayan davranışsal testlerin nasıl yapılacağını iyi anlamalısınız.