Name: Prematüre Modelleme Ensefalopati Sıçanlarda İçi amniyotik Lipopolisakkarid ile Prenatal Hipoksi-iskemi kullanma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-20T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 36 s
Description: Öğrenin, sıçanlarda prematüre doğumla ilişkili beyin hasarını taklit eden prenatal hipoksi-iskemi ve amniotik iltihaplanma modelini. Bu yöntem, perinatal beyin hasarının patogenezini anlamak ve tedavi stratejileri geliştirmek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar Dan Firl, Chris Corbett ve Jesse Denson, doktora müteşekkiriz. Harçlar SR NIH NINDS R01 NS060765 tarafından sağlandı, LJ için P30 COBRE Pilot Programı ve New Mexico Üniversitesi&#39;nde LJ için Çocuk Sağlığı İmza Programı.

Kurumsal Bakım ve Kullanım Komiteleri hem Boston Çocuk Hastanesi&#39;nde ve New Mexico Sağlık Bilimleri Merkezi Üniversitesi, tüm deneysel prosedürleri onayladı. NOT: Ön işlem, mühür başlamadan, sterilize ve tüm cerrahi aletler ve cerrahi örtüler otoklav. Buna ek olarak,% 0.125 bipivucaine ve 0.1 mg / kg dahil olmak üzere, buprenorfin, steril şişeler içinde post-operatif ilaç hazırlanması. Ayrıca steril lipopolisakarit (LPS) bir çözelti hazırlamak: 0,04 mg / ml LPS (0111: B4) Evan mavisi seyreltik ihtiva eden steril tuzlu su içinde. 1. Anestezi <ol><li> % 3 izofluran dengeli bir% 70 azot ve% 30 oksijen karışımı ile embriyonik gün 18 (E18) hamile Sprague Dawley sıçan anestezi neden. </li><li> Indüksiyon odasından sıçan çıkarın ve 37 ° C&#39;de set dökümlü cerrahi dolaşan su battaniye sıçan sırtüstü yerleştirin. Burun konisi anestezi aktarın ve isoflura azaltmak% 2 ne düzeyde. </li><li> Yavaşça kornea kurumasını önlemek için her gözün oftalmik merhem uygulayın. İşlem sırasında sürekli sıcaklık, solunum hızı ve hayvan kalp atışlarının izlenmesi. Anne fizyolojisi prosedür boyunca sabit kalması gerekir. </li></ol> 2. Cerrahi Hazırlık ve Scrub <ol><li> Kullanımı küçük hayvan kesme alt karın bölgesindeki bütün tüylerden. Meme nicklemek veya canlı doğmuş yavruların gelecekteki hemşirelik için rahatsız edici olabilir jilet döküntü üreten önlemek için dikkatli bir dikdörtgen desen Tıraş. </li><li> Steril pamuklu çubukla povidon iyot ve% 70 etanol fırçalayın uygulama değiştirerek karın cildi hazırlayın. Povidon-iyot ve% 70 etanol her moda alternatif 3x uygulanan olacak şekilde fırçalayın tekrarlayın. Kurumaya bırakın. </li><li> Ayak-tutam refleksinin yokluğu yoluyla anestezi derinliği onaylayın. Ağrı refleksi uyaranların yokluğunda,% 1 izofluran seviyesini azaltır. </li><li> Steril cerrahi havlu kullanarak,hayvan asmak. Onlar rahim boynuzları kan akışını engellediği değil iken absorbe sulama sıvı miktarını maksimize şekilde uygun bir açıyla perdeler yerleştirmek için özen gösterin. </li></ol> 3. Abdominal Laparotomi <ol><li> Bir neşter kullanılarak hazırlanan karın derisinde 3 cm&#39;lik orta hat kesi yapmak. Açık açık makas ile karın fasya deri tabakasını incelemek. Forseps ve cerrahi makas kullanarak, karın fasya tabakası yükseltmek ve periton boşluğuna erişmek için avasküler linea alba bir kesi yapmak. </li><li> Kesi dış cerrahi gazlı bez yerleştirin ve steril tuzlu su ile nemlendirin. Karın künt forseps ve dış basınç kullanarak, yavaşça periton boşluğuna gelen rahim boynuzları kaldırmak ve nemlendirilmiş gazlı bez üzerine yerleştirin. </li><li> Dikkatle dolanması önlemek ve bağırsak ile temasa geçin. Fetusun bireysel amnion kesesi arasındaki tek kas dokusu ile temasa geçerek forseps kullanarak düzenleyin.Açığa ve künt diseksiyon ile 4 uterin arterler izole. NOT: Bakım rahim arterleri incelemek için alınmalıdır. Ortam doku ve damarları kendilerini son derece hassastır. Anne gemilere hasar kanamaya yol ve ciddi vakalarda, fetal ve maternal ölüm olabilir. </li></ol> Anevrizma Klipleri 4. Yerleştirme <ol><li> Her uterin arter üzerinde bir sıçan 30 G anevrizma klibi yerleştirin. Bireysel plasenta rahim dahil gemilerin proksimal ve distal bakliyat ve koyulaşması dahil kan akışının durması emin olun. Maruz boynuzları ve gazlı bez ile tüm cerrahi alanı kapsayacak ve steril tuzlu su ile yıkayın. Sulama yaklaşık her 10 dk ile nemli alan tutmaya özen gösterin. </li><li> 60 dakika sonra, gazlı bez kaldırmak ve alanını sulamak. Rahim boynuzları ve damarlar yeterince başarılı klip kaldırılması için ıslatılmış olduğundan emin olun. Yavaşça forseps kullanarak her anevrizma klibi kaldırın. Gemiye travma ve maint sebebiyet vermemek özen gösterinçıkarılması sırasında ain doku bütünlüğü. </li><li> İyice amnion kesesi gelen gazlı bez herhangi bir sokak Konuları kaldırmak için özen, rahim boynuzları ve alanını sulamak. </li></ol> Amniyon Sacs için Lipopolisakarit 5. Enjeksiyon <ol><li> Her amniyon kesesi dibinde, sadece plasental plaka ön amniyon sıvısına seyreltilmiş Evan mavi boya ile LPS (4 ug / kese) 100 ul enjekte edilir. Stabilize ve enjeksiyon için en uygun pozisyona her amniyotik kese döndürmek için künt forseps kullanın. Seyreltik Evan mavi boya uygun şırınga yerleştirme ve enjeksiyon teyit yararlı bir kontrast ajandır. NOT: intra-amniyotik enjeksiyonlar için ekli 8 mm 31 G iğne ile Yalnızca bir ultra-ince 0.3 ml insülin şırınga. Daha büyük göstergesi iğneler kullanılarak kronik amniyotik sıvı kaybı, fetal ölüm ve gebelik reabzorpsiyonunda neden olacaktır. Şırınga çıkartılması üzerine amniyotik sıvı sızıntı küçük miktarlarda mitig olabiliramniyon kesesi doğrudan basınç ile bir-. Bazı sıçan fetus oligohidramnios bir ölçüde tolere edebilir. Ancak, büyük göstergesi iğne veya kronik sıvı sızıntısı ile sonuçlanan kazayla ponksiyonu, fetal kayıp ve ciddi vakalarda sonuçları, komşu gebelik kaybı ile delinerek akut amniyotik sıvı kaybı. </li><li> Boynuzları steril serum fizyolojik ile 3x uterus yıkayın. </li></ol> 6. laparotomi Kapanış <ol><li> Forseps kullanarak, dikkatli periton boşluğuna rahim boynuzları geri dönün. Amnion kesesi ve orta hat kesi arasında yeterli boşluk sağlanması, çalışan 3-0 ipek sütür kullanılarak muskulofasyal katman kenarlarını yeniden yaklaşmaktadır. Kas kesi kapatırken amnion kesesi yerleştirme farkında olun. Içine veya kese ile sütür için değil dikkatli olun. </li><li> Cilt katmanı kapatarak, bir çalışan 3-0 ipek sütür kullanılarak, cilt tabakası yeniden yaklaşmaktadır. NOT: laparotomi izin devamlı sütür iki kat kapalı olmalıdırCilt ve gebelik artan kas genişleme. Sürekli dikişler eşit olarak dağıtılmış yara gerginliği için izin verir. Birden knot rahatsız edici ve kolayca anestezi kurtarma üzerine sıçan tarafından çiğnenmiş edilebilir Kesilen sütür az arzu edilir. Cerrahi zımba arzu edilmez. Cerrahi knot kuyrukları çok kısa (&lt;3 mm) kesilmelidir. </li><li> Bir 26 G iğne kullanılarak% 0.125 bupivakain deri altından yaklaşık yara kenarlarının 1 ml enjekte edilir. Ense de kg buprenorfin subkutan 0.1 mg tek doz / yönetmek. </li><li> Izofluran ve havlu kuru sıçan gerekirse kapatın. Temiz ev kafeste yerleştirin ve anestezi ayilmanizi. Hipotermik hale gelmez sıçan olun. </li></ol> 7. Ameliyat Sonrası Kurtarma ve Bakım <ol><li> Yavrular (yaklaşık E22 veya E23) doğarlar kadar günlük sonra 72 saat boyunca siçana her 8-12 saat Monitör ve. Buprenorfın q8-12 saat / 72 saat ek doz yönetmek veya IACUC tarafından belirlenen prn. </li><li> Ağrı, rahatsızlık, vajinal kanama ya da cerrahi sitesinden kanama belirtileri için sıçanları izleyin. Sütürler ve kesi kontrol edin ve sıçan çiğneme veya erken kendi sütür kaldırarak görmediğinden emin olmak için özen gösterin. Derece nadir olmasına rağmen, onların sütürler tehlikeye sıçanlar yara açılma riski altındadır. NOT: Bazen sıçanlar yatak ya da gıda dışı maddelerin aşırı miktarda yemek olabilir, buprenorfın yönetiminin bir yan etkisi olarak, pika denir. Çok nadir olmakla birlikte, sıçanlar pika ve potansiyel sonraki barsak tıkanıklığı için izlenmesi gerekir. </li></ol> 8. Doku İşleme ve Cryosectioning <ol><li> , Hematoksilen (H &amp; E) doğum sonrası beyin boyanması için hazırlık doğum sonrası gün 2 (P2) üzerine evlerine kafes yavrular kaldırmak için. Cerrahi makas hafifçe sıçan yavrular başını kesmek ve kullanma kafatası beyin kaldırmak. </li><li> Fosfat tamponlu tuzlu su içinde% 4 paraformaldehit 7 ml içeren 15 ml konik bir tüp içinde düzeltme beyin bırakın(PBS). 4 ° C &#39;de beyin yerleştirin ve 72 saat boyunca sabitlemek. </li><li> 72 saat sonra,% 30 sukroz ihtiva eden bir steril PBS çözeltisi beyinleri transferi (w / v) ve 4 ° C &#39;geri dönün. NOT: beyinleri sukroz çözeltisi damla kez onlar bir kriyostat üzerinde kesitli hazırdır. </li><li> Hızla beynini dondurma ve dondurulmuş koronal kesitlerin edinimi için kriyostat tokmak monte. 20 mikron dondurulmuş koronal bölümleri kesmek ve slaytlar monte. Emin olun bölümler seri toplanır. </li><li> Slaytlar gece boyunca oda sıcaklığında kurumaya bırakın. -20 ° C&#39;de de kayar. </li></ol> 9. Hematoksilen &amp; Eosin Boyama <ol><li> Oda sıcaklığına slayt monte donmuş bölümleri ve sıcak atın. NOT: Tüm çözümler taze hazırlayın. </li><li> 2 saat boyunca 50 ° C&#39;ye kadar bir slayt sıcak grubu yerleştirin kayar. </li><li> Transfer boyama raf kayar. Dip (GKD 2 O) çifte damıtılmış deiyonize su içinde 10x slaytlar. </li><li> 5 dakika boyunca% 100 hematoksilin slaytlar inkübe edin. Tihematoksilin beni mor boyama derecesine bağlı olarak optimize edilebilir. </li><li> Dip slaytlar musluk H 2 O 4x ve 1 dakika süreyle 2 O temiz musluk H bekletilir. </li><li> Dip (250 mi,% 70 etanol + 1 mi konsantre hidroklorik asit) asidi alkol içinde 15x kayar. </li><li> Dip slaytlar musluk H 2 O 4x ve 1 dakika süreyle 2 O temiz musluk H bekletilir. </li><li> 2 dakika için% 1 lityum karbonat inkübe edin. </li><li> Dip slaytlar musluk H 2 O 4x ve 1 dakika süreyle 2 O temiz musluk H bekletilir. </li><li> 1 dakika boyunca% 95 etanol içinde inkübe edin. </li><li> Dip slaytlar% 100 Eosin içinde 7x. Eosin batırma sayısı pembe boyama derecesine bağlı olarak modifiye edilebilir. </li><li> Dip slaytlar% 95 etanol içinde 5 kata. </li><li> % 95 etanol taze değişiklik Lamı 5x. </li><li> 1 dakika boyunca% 100 etanol içinde slaytlar inkübe edin. </li><li> 1 dakika boyunca% 100 etanol içinde taze değişiklik slaytlar inkübe edin. </li><li> 15 dakika% 100 ksilen slaytlar inkübe edin. NOT: Ksilen adımlar veBir çeker ocak içinde gerçekleşmelidir coverslipping. </li><li> 15 dakika boyunca ksilen taze değişiklikler slaytlar kuluçkaya yatmaktadır. </li><li> Permount ile lamel ve davlumbaz kurumaya bırakın. </li><li> Görüntü bir ışık mikroskobu ile kayar. </li></ol>

<ol><li>Blencowe, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preterm+birth+associated+neurodevelopmental+impairment+estimates+at+regional+and+global+levels+for+2010%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Res%22%5BJournal%5D)">Preterm birth associated neurodevelopmental impairment estimates at regional and global levels for 2010.</a> Pediatr Res. 74, Suppl 1. 17-34 (2013).</li>
<li>Mwaniki, M. K., Atieno, M., Lawn, J. E., Newton, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+term+neurodevelopmental+outcomes+after+intrauterine+and+neonatal+insults+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Long term neurodevelopmental outcomes after intrauterine and neonatal insults a systematic review.</a> Lancet. 379, 445-452 (2012).</li>
<li>Dammann, O., Leviton, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+or+sustained+systemic+inflammation+and+the+preterm+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Res%22%5BJournal%5D)">Intermittent or sustained systemic inflammation and the preterm brain.</a> Pediatr Res. 75, 376-380 (2014).</li>
<li>Leviton, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microbiologic+and+histologic+characteristics+of+the+extremely+preterm+infant%27s+placenta+predict+white+matter+damage+and+later+cerebral+palsy%5BTitle%5D)+AND+%22the+ELGAN+study+Pediatr+Res%22%5BJournal%5D)">Microbiologic and histologic characteristics of the extremely preterm infant's placenta predict white matter damage and later cerebral palsy.</a> the ELGAN study Pediatr Res. 67, 95-101 (2010).</li>
<li>Redline, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+responses+in+the+placenta+and+umbilical+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Fetal+Neonatal+Med%22%5BJournal%5D)">Inflammatory responses in the placenta and umbilical cord.</a> Semin Fetal Neonatal Med. 11, 296-301 (2006).</li>
<li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+chorioamnionitis+is+the+most+common+placental+lesion+in+late+preterm+birth%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">Chronic chorioamnionitis is the most common placental lesion in late preterm birth.</a> Placenta. 34, 681-689 (2013).</li>
<li>Lee, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+histologic+chorioamnionitis+is+a+risk+factor+for+adverse+neonatal+outcome+in+late+preterm+birth+after+preterm+premature+rupture+of+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Acute histologic chorioamnionitis is a risk factor for adverse neonatal outcome in late preterm birth after preterm premature rupture of membranes.</a> PloS one. 8, e79941(2013).</li>
<li>Pappas, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chorioamnionitis+and+early+childhood+outcomes+among+extremely+low+gestational+age+neonates%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Peds%22%5BJournal%5D)">Chorioamnionitis and early childhood outcomes among extremely low gestational age neonates.</a> JAMA Peds. 168, 137-147 (2014).</li>
<li>Gaillard, R., Arends, L. R., Steegers, E. A., Hofman, A., Jaddoe, V. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Second+and+third+trimester+placental+hemodynamics+and+the+risks+of+pregnancy+complications+the+Generation+R+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Epidemiol%22%5BJournal%5D)">Second and third trimester placental hemodynamics and the risks of pregnancy complications the Generation R Study.</a> Am J Epidemiol. 177, 743-754 (2013).</li>
<li>Trivedi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+placental+inflammation+but+not+adrenal+activation+is+associated+with+extreme+preterm+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Fetal placental inflammation but not adrenal activation is associated with extreme preterm delivery.</a> Am J Obstet Gynecol. 206, 236(2012).</li>
<li>Yanowitz, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+disturbances+in+premature+infants+born+after+chorioamnionitis+association+with+cord+blood+cytokine+concentrations%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Res%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic disturbances in premature infants born after chorioamnionitis association with cord blood cytokine concentrations.</a> Pediatr Res. 51, 310-316 (2002).</li>
<li>Jantzie, L. L., Corbett, C. J., Firl, D. J., Robinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+Erythropoietin+Mitigates+Impaired+Cerebral+Cortical+Development+Following+Subplate+Loss+from+Prenatal+Hypoxia+Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Cereb+Cortex%22%5BJournal%5D)">Postnatal Erythropoietin Mitigates Impaired Cerebral Cortical Development Following Subplate Loss from Prenatal Hypoxia Ischemia.</a> Cereb Cortex. , (2014).</li>
<li>Jantzie, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Erythropoietin+attenuates+loss+of+potassium+chloride+co+transporters+following+prenatal+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Erythropoietin attenuates loss of potassium chloride co transporters following prenatal brain injury.</a> Mol Cell Neurosci. 61, 152-162 (2014).</li>
<li>Jantzie, L. L., Miller, R. H., Robinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Erythropoietin+signaling+promotes+oligodendrocyte+development+following+prenatal+systemic+hypoxic+ischemic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+Res%22%5BJournal%5D)">Erythropoietin signaling promotes oligodendrocyte development following prenatal systemic hypoxic ischemic brain injury.</a> Pediatric Res. 74, 658-667 (2013).</li>
<li>Mazur, M., Miller, R. H., Robinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+erythropoietin+treatment+mitigates+neural+cell+loss+after+systemic+prenatal+hypoxic+ischemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg+Peds%22%5BJournal%5D)">Postnatal erythropoietin treatment mitigates neural cell loss after systemic prenatal hypoxic ischemic injury.</a> J Neurosurg Peds. 6, 206-221 (2010).</li>
<li>Robinson, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+changes+induced+by+graded+prenatal+systemic+hypoxic+ischemic+insults+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Developmental changes induced by graded prenatal systemic hypoxic ischemic insults in rats.</a> Neurobiol Dis. 18, 568-581 (2005).</li>
<li>Delcour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroanatomical+sensorimotor+and+cognitive+deficits+in+adult+rats+with+white+matter+injury+following+prenatal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Neuroanatomical sensorimotor and cognitive deficits in adult rats with white matter injury following prenatal ischemia.</a> Brain Pathol. 22, 1-16 (2012).</li>
<li>Delcour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+prenatal+ischemia+on+behavior+cognitive+abilities+and+neuroanatomy+in+adult+rats+with+white+matter+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Impact of prenatal ischemia on behavior cognitive abilities and neuroanatomy in adult rats with white matter damage.</a> Behav Brain Res. 232, 233-244 (2012).</li>
<li>Delcour, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+musculoskeletal+and+locomotor+alterations+in+adult+rats+with+white+matter+injury+following+prenatal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Intl+J+Devel+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mild musculoskeletal and locomotor alterations in adult rats with white matter injury following prenatal ischemia.</a> Intl J Devel Neurosci. 29, 593-607 (2011).</li>
<li>Jantzie, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+pattern+of+interaction+between+in+utero+hypoxia+ischemia+and+intra+amniotic+inflammation+disrupts+brain+development+and+motor+function%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflam%22%5BJournal%5D)">Complex pattern of interaction between in utero hypoxia ischemia and intra amniotic inflammation disrupts brain development and motor function.</a> J Neuroinflam. 11, 131(2014).</li>
<li>Back, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+vulnerability+of+late+oligodendrocyte+progenitors+to+hypoxia+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Selective vulnerability of late oligodendrocyte progenitors to hypoxia ischemia.</a> J Neurosci. 22, 455-463 (2002).</li>
<li>Jantzie, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+Expression+of+N+Methyl+d+Aspartate+%28NMDA%29+Receptor+Subunits+in+Human+White+and+Gray+Matter+Potential+Mechanism+of+Increased+Vulnerability+in+the+Immature+Brain%5BTitle%5D)+AND+%22Cereb+Cortex%22%5BJournal%5D)">Developmental Expression of N Methyl d Aspartate (NMDA) Receptor Subunits in Human White and Gray Matter Potential Mechanism of Increased Vulnerability in the Immature Brain.</a> Cereb Cortex. 25, 482-495 (2015).</li>
<li>Jantzie, L. L., Robinson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+Models+of+Encephalopathy+of+Prematurity%5BTitle%5D)+AND+%22Devel+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Preclinical Models of Encephalopathy of Prematurity.</a> Devel Neurosci. , (2015).</li>
<li>Workman, A. D., Charvet, C. J., Clancy, B., Darlington, R. B., Finlay, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+transformations+of+neurodevelopmental+sequences+across+mammalian+species%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Modeling transformations of neurodevelopmental sequences across mammalian species.</a> J Neurosci. 33, 7368-7383 (2013).</li>
<li>Herlenius, E., Lagercrantz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+neurotransmitter+systems+during+critical+periods%5BTitle%5D)+AND+%22Exper+Neurol%22%5BJournal%5D)">Development of neurotransmitter systems during critical periods.</a> Exper Neurol. 190, S8-S21 (2004).</li>
<li>Kelsom, C., Lu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+specification+of+GABAergic+cortical+interneurons%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biosci%22%5BJournal%5D)">Development and specification of GABAergic cortical interneurons.</a> Cell Biosci. 3, 19(2013).</li>
<li>Kinney, H., Back, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+oligodendroglial+development+Relationship+to+periventricualr+leukomalacia%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Pediatr+Neuro%22%5BJournal%5D)">Human oligodendroglial development Relationship to periventricualr leukomalacia.</a> Semin Pediatr Neuro. 5, 180-189 (1998).</li>
<li>Robinson, S., Li, Q., DeChant, A., Cohen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+loss+of+gamma+amino+butyric+acid+pathway+expression+after+human+perinatal+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg+Peds%22%5BJournal%5D)">Neonatal loss of gamma amino butyric acid pathway expression after human perinatal brain injury.</a> J Neurosurg Peds. 104, 396-408 (2006).</li>
<li>Xu, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late+development+of+the+GABAergic+system+in+the+human+cerebral+cortex+and+white+matter%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuropathol+Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Late development of the GABAergic system in the human cerebral cortex and white matter.</a> J Neuropathol Exp Neurol. 70, 841-858 (2011).</li>
<li>Segovia, K. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arrested+oligodendrocyte+lineage+maturation+in+chronic+perinatal+white+matter+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">Arrested oligodendrocyte lineage maturation in chronic perinatal white matter injury.</a> Ann Neurol. 63, 520-530 (2008).</li>
<li>Robinson, S., Li, Q., Dechant, A., Cohen, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+loss+of+gamma+aminobutyric+acid+pathway+expression+after+human+perinatal+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Neonatal loss of gamma aminobutyric acid pathway expression after human perinatal brain injury.</a> J Neurosurg. 104, 396-408 (2006).</li>
<li>Boksa, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+prenatal+infection+on+brain+development+and+behavior+a+review+of+findings+from+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Behav+Immun%22%5BJournal%5D)">Effects of prenatal infection on brain development and behavior a review of findings from animal models.</a> Brain Behav Immun. 24, 881-897 (2010).</li>
<li>Burd, I., Brown, A., Gonzalez, J. M., Chai, J., Elovitz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+term+chorioamnionitis+unraveling+causes+of+adverse+neurological+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Repro+Sci%22%5BJournal%5D)">A mouse model of term chorioamnionitis unraveling causes of adverse neurological outcomes.</a> Repro Sci. 18, 900-907 (2011).</li>
<li>Bergeron, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((White+matter+injury+and+autistic+like+behavior+predominantly+affecting+male+rat+offspring+exposed+to+group+B+streptococcal+maternal+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Devel+Neurosci%22%5BJournal%5D)">White matter injury and autistic like behavior predominantly affecting male rat offspring exposed to group B streptococcal maternal inflammation.</a> Devel Neurosci. 35, 504-515 (2013).</li>
<li>Uchida, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Ureaplasma+parvum+lipoprotein+multiple+banded+antigen+on+pregnancy+outcome+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Immunol%22%5BJournal%5D)">Effects of Ureaplasma parvum lipoprotein multiple banded antigen on pregnancy outcome in mice.</a> J Reprod Immunol. 100, 118-127 Forthcoming.</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Prematüre Ensefalopati nedeniyle yaralanma mekanizmaları örtüşen etiyolojiler, nörogelişimsel zamanla, insan beyin ağ oluşumu karışıklık, karmaşık etkileşim hayvanlarda modellenmesi zordur ve MSS farklı fenotipleri insan erken doğmuş bebeklerde tezahür hakaretler. EOP hücre tipine özel güvenlik ile ilişkilidir (örneğin, olgunlaşmamış oligodendrositler) 21, hem de çok çeşitli gelişimsel olarak düzenlenmiş yolları (örneğin, Plaka yapısı, membran taşıyıcıları ve reseptör alt birimleri) 12,...

37 hafta tahmini gebelik yaşı 1 önce Amerika Birleşik Devletleri&#39;nde doğan bebeklerin% 12&#39;nin üzerinde olan, prematürite perinatal beyin hasarı (PBI) kalıcı sakatlık önemli bir nedenidir. PBI prematürite, prematüre olarak da adlandırılır ensefalopati (EOP), tüm merkezi sinir sistemi (CNS) etkilemektedir. MSS yaralanması genellikle in utero başlar ve koriyoamniyonit ve hipoksi ve sepsis gibi doğum sonrası komplikasyonlar da dahil olmak üzere doğum öncesi süreçler tarafından şiddetlenir. Sistemik hakaret gelen PBI nöro-gelişimsel sürecini değiştirir ve duygusal regülasyonu, bellek ve yürütücü işlev 1,2 etkileyen serebral palsi, epilepsi, bilişsel gecikme ve çok sayıda nöropsikiyatrik bozukluklara yol açar. Çok ilerleme kaydedilmiş olmasına rağmen, sınırlı bir anlayış erken doğumdan itibaren MSS yaralanma hücresel ve moleküler sonuçları preterm doğan çocuklarda nörolojik sekel çokluk çevirmek nasıl kalır. Bilgi hind bu eksikliğiGerçek zamanlı MSS yaralanma şiddetinin tanı ve gelişmekte olan müdahalelerin haberdar dozaj ers. Ayrıca, bu savunmasız hasta popülasyonu için yaşa uygun tedavi stratejileri zor kalır. Rahim içi iltihabı, aşırı prematüre çok yaygın olan ve 3 karmaşık bir fetal-maternal-plasental inflamatuar dizisini içerir. Intrauterin enfeksiyon genellikle subklinik olduğunu. Akut inflamasyon veya histolojik koryoamniyonit ile uyumlu Belirli plasental bulgular, fetal enflamatuar yanıtın önemli belirleyicileri ve erken doğum 3-5 ile ilişkili beyin hasarı ile tesadüf. Nitekim, fetal inflamatuvar yanıt erken doğumdan itibaren uzun vadeli sonuçları için farklı klinik etkileri vardır. Gebelik yaşı (SGA) ya da kim enfeksiyon deneyim için küçük bebekler nörolojik defisit 3,4 ile son derece açıktır. Koryoamniyonit tipik patolojik tanı takip erken doğum olduğunu <sup&gt; 6,7 ve histolojik inceleme çok erken 4 doğan bebeklerin gelen plasenta% 70 iltihabın belirtileri ortaya koymaktadır. Dahası, korioamnionit iki yıl 8&#39;de bilişsel bozukluğu ile ilişkilidir. Son derece erken doğan bebeklerin plasentada maternal vasküler underperfusion kanıtı da çocukluk 9 serebral palsi ile ilişkilidir. Korioamnionit ve plasental perfüzyon defektlerinin sinerjik etkisi de yaş 10,11 iki yıl bu hasta popülasyonunda anormal nörolojik sonuçların oldukça yüksek risk gösterilmiştir. Patojen kaynaklı inflamasyon ile ilişkili insan sistemik plasental perfüzyon defektleri ve koryoamniyonit taklit etmek, sıçanlarda içi amniyotik lipopolisakarit (LPS) ile kombine prenatal geçici sistemik hipoksi-iskemi (TSHI) bir model geliştirdi. Amacımız, intrauterin iltihabı dahil yalnız sıçanlarda 12-16 TSHI bizim modeli adapte olduerken doğum ile ilgili CNS yaralanma preklinik modelleme kolaylaştırmak için. TSHI başına oligodendroglial soyu hücreleri, kortikal nöronlar kalıcı zarar ortaya koymuştur, prenatal beyin hasarı 16 ile uyumlu bir yaralanma kademeli kalıp giden aşamalı iskemik aralıklı, hücre ölümü artışı ve pro-enflamatuar sitokin seviyelerinin yüksek. Onlar 17-19 yaş olarak bu modelin iskemik bileşenlerine değişiklikler de sıçanlarda hafıza kodlama, kısa ve uzun süreli hafıza ve hafif kas-iskelet değişiklikler eksiklikler göstermiştir. Gerçekten de, daha önce TSHI + LPS kombinasyonu oligodendrosit ve nöronal kaybın, aksonal yaralanma, enflamasyon ve fonksiyonel hücre anormallikleri dahil olmak üzere, 20 EOP patofizyolojik işaretlerinden, tekrarlar olduğunu göstermiştir.

<table><tbody><tr><td>Tuzlu Çözelti, %0.9</td> <td>Sigma</td><td>S8776</td><td></td></tr><tr><td>LPS 011B4</td><td>Sigma</td><td>L2630</td><td></td></tr><tr><td>Evan'ın Mavi Boyası</td><td>Sigma</td><td>E2129</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi eldivenler</td><td>Biogel</td><td>40870</td><td></td></tr><tr><td>VEYA Havlular</td><td>Kardinal Sağlık</td><td>287000-008</td><td>Steril</td></tr><tr><td>PDI Alkol Hazırlama Pedleri</td><td>Fisherbrand</td><td>06-669-62</td><td></td></tr><tr><td>Mini Arco Şarj Edilebilir Kesme Makineleri</td><td>Kent Scientific Corp.</td><td>CL8787</td><td></td></tr><tr><td>Betadine cerrahi ovma</td><td>Purdue Ürünleri LP</td><td>67618-151-17</td><td></td></tr><tr><td>Göz Kayganlaştırıcı</td><td>Yenileme Lakri Yağı</td><td>00023-0312</td><td></td></tr><tr><td>Künt Forseps</td><td>Roboz</td><td>RS-8100</td><td></td></tr><tr><td>Makas</td><td>Roboz</td><td>RS-6808</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi Makas</td><td>Roboz</td><td>RS-5880</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi Makas</td><td>FST</td><td>14002-16</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga</td><td>BD</td><td>309628</td><td>1 ml</td></tr><tr><td>İğne</td><td>BD</td><td>305122</td><td>25G 5/8</td></tr><tr><td>İğne</td><td>BD</td><td>305128</td><td>30G 1</td></tr><tr><td>Pamuk Uçlu Aplikatör</td><td>Fisherbrand</td><td>23-400-114</td><td>Küçük, 6 inç steril</td></tr><tr><td>Pamuklu Gazlı Bez Sünger</td><td>Fisherbrand</td><td>22-362-178</td><td></td></tr><tr><td>İğne Tutucular</td><td>Kent Bilimsel A.Ş.</td><td>INS600109</td><td>12.5 CM STR</td></tr><tr><td>Gemi Klipsleri</td><td>Kent Scientific Corp.</td><td>INS600120</td><td>30G Basınç</td></tr><tr><td>3-0 Perma El İpek</td><td>Sütürler Ethicon</td><td>1684G</td><td>Siyah örgülü, 3-0 (2 metrik), 18", emilmez,&nbsp; PS-1 24 mm iğne, 3/8 daire</td></tr><tr><td>İnsülin Şırıngaları</td><td>BD</td><td>328438</td><td>0.3 cc 3 mm 31G</td></tr><tr><td>Pentobarbital</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bupivakain</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>İzofluran</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lityum Karbonat</td><td>Acros Kimyasalları</td><td>554-13-2</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus Mikroskop Slaytları</td><td>VWR</td><td>48311-703</td><td></td></tr><tr><td>Hematoksilen</td><td>Leica</td><td>3801521</td><td>Surgipath Gill II Hematoksilen</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Leica</td><td>3801601</td><td>Surgipath Eosin</td></tr><tr><td>Ksilenler</td><td>Fisherbrand</td><td>X3S-4</td><td>Histolojik Sınıf</td></tr><tr><td>Permount</td><td>Fisherbrand</td><td>SP15-100</td><td></td></tr><tr><td>Coverglass</td><td>Fisherbrand</td><td>12-548-5P</td><td>Fisher En İyi Premium Kapak Camı</td></tr></tbody></table>

prematüre modelleme ensefalopati sıçanlarda İçi amniyotik lipopolisakkarid ile prenatal hipoksi-iskemi kullanma

Modeling Encephalopathy of Prematurity Using Prenatal Hypoxia-ischemia with Intra-amniotic Lipopolysaccharide in Rats

Prematüre Ensefalopati (EOP) en ileri öteleme hedefleri belirleyin. Erken doğum ile ilişkili anormallikleri merkezi sinir sistemini (MSS) kapsayan bir terimdir ve erken doğum ile ilişkili beyin hasarı için yeni tedavi stratejileri ortaya çıkarmak, ÇOP&#39;un preklinik modelleri benzer mekanizmalar içermelidir Prenatal küresel yaralanma insanlarda görülen ve anne-plasental-fetal sistemin birden fazla bileşen içerir. İdeal olarak, modeller, olgun hayvan fonksiyonel açıklarının benzer spektrumunu üretmek ve patofizyoloji birden yönlerini özetlemek gerekir. Erken erken doğum patojen kaynaklı iltihap ile bağlantılı insan plasental perfüzyon sistemik bozuklukları, plasental underperfusion ve / veya koryoamniyonit taklit etmek için, içi amniyotik lipopolisakarit (LPS) ile bir araya prenatal geçici sistemik hipoksi, iskemi (TSHI) içindeki bir model geliştirmiştir. Hamile Sprague Dawley sıçanlarda, TSHI uterin arter tıkanıklığı o yoluylan embriyonik gün 18 (E18) fetusta MSS hasarı artan ilişkili bir kademeli plasental underperfusion kusur neden olur. Intra-amniyotik LPS enjeksiyonu ile kombine edildiğinde, plasental inflamasyon artar ve MSS hasar ilişkili beyaz cevher, yürüme ve manyetik rezonans görüntüleme bulguları ile karmaşıklaşır. Prenatal TSHI ve TSHI + LPS prenatal hakaret nöronlar, oligodendrositler ve akson, Plaka yapısı kaybı ve son derece doğan çocuklarda gözlenen taklit yetişkin hayvanlarda fonksiyonel açıklarının kaybına neden intrauterin hakaret recapitulating içeren bir ÇOP&#39;un modeli kriterlerine çeşitli karşılamak erken. Ayrıca, bu model farklı yaralanma türlerine neden olduğu inflamasyonun diseksiyon sağlar.

E18 de TSHI + LPS&#39;yi ardından, hematoksilen ve eozin boyama önemli histopatolojik plasenta hem anormallikler (Şekil 1) ve beyinde (Şekil 2) ortaya koymaktadır. E19 ve E21 üzerine incelenen plasenta desidua ve labirent boyunca mikro kanama ve nekroz ile fena halde ödemli bulunmaktadır. Önemli inflamatuar infiltrasyon ve artan damarlanma da görülmektedir. P2 incelenen beyinleri ventrikülomegali ortaya yanı sıra beyaz cevher ve Plaka yapısı nöron kaybı Shams göre. Daha önce, TSHI + LPS...

Prematüre ensefalopatisi, erken doğumdan kaynaklanan yaralanma ile ilişkili merkezi sinir sistemi anormalliklerini kapsar. Bu rapor, koryoamniyoniti taklit eden in utero geçici sistemik hipoksi-iskemi ve intra-amniyotik lipopolisakkarit uygulamasının (LPS) klinik olarak anlamlı bir sıçan modelini ve enfeksiyöz uyaranların ve plasental underperfüzyonun CNS gelişimi üzerindeki ilişkili etkisini açıklamaktadır.

Prematüre Modelleme Ensefalopati Sıçanlarda İçi amniyotik Lipopolisakkarid ile Prenatal Hipoksi-iskemi kullanma

Encephalopathy of prematurity (EoP) is a term that encompasses the central nervous system (CNS) abnormalities associated with preterm birth. To best ...

Bu cerrahi prosedürün genel amacı; sıçanlarda plasental yetmezlik ve koryoamniyotisi yeniden canlandırmak için in utero, geçici sistemik hipoksi, iskemi ve intraamniyotik inflamasyon indüksiyonu yoluyla, aşırı prematüre doğumla ilişkili beyin hasarının tekrarlanabilir bir modelini sağlamaktır. Bu yöntem, yönlendirilmiş terapötik stratejilerin geliştirilmesini kolaylaştıran intrauterin süreçlerden kaynaklanan perinatal beyin hasarının patogenezine ilişkin temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, hem enfeksiyon hem de hipoksi ve iskemi kaynaklı intrauterin saldırıları taklit eden sistemik hasarı indüklemesi ve yetişkin sıçanda fonksiyonel nörolojik defisitler oluşturmasıdır.Bu model, özellikle inflamasyonla ilişkili yaralanma mekanizmalarının incelenmesi için uygundur. Hipoksi, iskemi ve enfeksiyöz stimülasyonlar tek başına veya kombine bir yaralanma şeklinde test edilebildiğinden, prosedürü laboratuvarımızdan teknisyen Lindsey Chan gösterecektir. Prosedüre başlamadan önce, embriyonik bir günün alt karın bölgesindeki tüm tüyleri temizlemek için küçük hayvan tıraş makinesi kullanın.Meme uçlarını kesmemeye veya tıraş tahrişi oluşturmamaya dikkat ederek, 18 gebe sıçanı dikdörtgen bir düzende hazırlayın. Ardından, steril pamuklu çubuklar kullanarak cildi sırasıyla povidone iyot ve %70 etanol ile üç kez temizleyin. Cilt kuruduğunda, ayak parmağı sıkıştırma testiyle anestezi derinliğinin uygunluğunu doğrulayın ve hayvanı örtün.Ardından, hayvanın karnında bir skalpel yardımıyla üç santimetrelik bir orta hat insizyonu yapın ve ardından makasla deri tabakasını abdominal fasyadan künt diseksiyonla ayırın. Pens ve cerrahi makas kullanarak abdominal fasya tabakasını kaldırın ve avasküler lineer dirsek boyunca bir insizyon gerçekleştirin.Periton boşluğu açığa çıkarıldığında, insizyonun dış kısmına cerrahi gazlı bez yerleştirin ve gazlı bezi steril salin ile nemlendirin. Ardından, küt uçlu forsepsler kullanarak ve abdomen üzerine dış baskı uygulayarak, uterus kornularını periton boşluğundan nazikçe çıkarın ve kornuları nemlendirilmiş gazlı bez üzerine yerleştirin. Bağırsaklarla temas etmemeye ve dolanıklıklara yol açmamaya dikkat ederek, fetüsleri düzenlemek için yalnızca münferit amniyotik keseler arasındaki kas dokusunu kullanın.Ardından, küt diseksiyon kullanarak dört uterus arterini açığa çıkarın ve izole edin. Arterler izole edildiğinde maternal damarlara zarar vermemeye özen gösterin. Her damara 30 gauge sıçan anevrizma klipsi yerleştirin. Klipsleri uygulamadan önce, çevredeki tüm dokuların tamamen temizlendiğinden emin olmak önemlidir.Klipler yerleştirilirken, küt uçlu pens ile sabitleyin ve ardından paralel olarak yerleştirin. Tüm klipler yerleştirildikten sonra, tam hipoksi iskeminin sağlanması için nabzın durduğunun gözlemlenmesi kritiktir. Proksimal ve distal nabızların durduğunu ve bireysel plasentalar da dahil olmak üzere uterin damarların koyulaştığını doğrulayın.Ardından tüm cerrahi alanı gazlı bezle kapatın ve dokuyu steril serum fizyolojik ile yıkayın. 60 dakika sonra, bir saat boyunca her 10 dakikada bir gazlı bezi kaldırın ve alanı tekrar yıkayın. Uterus boynuzları ve damarlar yeterince nemlendiğinde, damara travma vermemeye ve doku bütünlüğünü korumaya dikkat ederek her bir anevrizma klibini pens yardımıyla nazikçe çıkarın.Ardından boynuzları ve alanı iyice yıkayın. Amniyotik keselerde kalmış olabilecek tüm gazlı bez ipliklerini temizlemeye dikkat ederek bunu son bir kez daha yapın. Fetüsleri LPS ile işlemek için, her bir amniyotik kesenin tabanı görünür hale gelecek şekilde her keseyi sabitlemek ve döndürmek için küt uçlu pens kullanın.Ardından, ucuna 8 mm'lik 31 gauge iğne takılmış olan 0,3 ml'lik bir ultra ince insülin şırıngasını LPS çözeltisi ile doldurun ve her bir plasental plağın hemen önüne 100 µL çözelti enjekte edin. İğne çıkarılırken, herhangi bir sıvı sızıntısını durdurmak için amniyotik kese üzerine doğrudan baskı uygulayın. Amniyotik sıvının dışarı kaçmasına izin vermeden LPS'nin doğru şekilde iletilmesi için amniyotik kesenin tabanına ultra ince 31 gauge iğne yerleştirilmesi kritik öneme sahiptir.Uterin boynuzlar steril salin ile üç kez yıkandıktan sonra, boynuzları periton boşluğuna geri döndürmek için pens kullanın. Ardından, bir kese içine veya üzerinden dikiş atmadan, kas-fasiyal tabaka kenarlarını yeniden yaklaştırmak için sürekli 3-0 ipek sütür kullanın ve bunu derinin başka bir sürekli 3.0 ipek sütür ile kapatılmasıyla takip edin. Daha sonra, deri altına uygulama yapmak için 26 gauge iğne kullanın.Yara kenarlarına 1 ml %0,125 bupivakain enjekte edin. Sıçanı gerektiği şekilde havluyla kurulayın, ensesine kilogram başına 0,1 mg buprenorfin enjekte edin. Hayvanı, tamamen iyileşene kadar izlemek üzere temiz bir ev kafesine yerleştirin.Embriyonik 18. günde uygulanan geçici sistemik hipoksi iskemi ve LPS yönetimini takiben, az önce gösterildiği üzere, hematoksilin ve eozin boyaması hem plasentada hem de beyinde önemli histopatolojik anomaliler olduğunu ortaya koymaktadır. Nitekim, embriyonik 19. ve 21. günlerde incelenen plasentalar, decidua ve labirent boyunca mikro hemoraji ve nekroz ile birlikte makroskopik olarak ödemlidir. Ayrıca anlamlı inflamatuar infiltrasyon ve artmış vaskülarite de gözlemlenmektedir.Postnatal ikinci günde incelenen diğer beyinler, şam grubuna kıyasla ventrikülomegali ile birlikte beyaz cevher ve subplate nöron kaybını ortaya koymaktadır; ayrıca geçici sistemik hipoksi, iskemi ve LPS, postnatal 15. günde kortekste GABAerjik inhibisyonun gelişiminde merkezi bir rol oynayan bir klorür kotransporter olan potasyum klorür kotransporter iki proteininin ekspresyonunu önemli ölçüde azaltmıştır; bu durum, devre olgunlaşmasının kritik postnatal döneminde gözlemlenen bozulmuş gelişimsel yukarı düzenleme ile tutarlıdır. Bu videoyu izledikten sonra, hamile sıçanlarda bu cerrahinin nasıl gerçekleştirileceği ve intraamniyotik lipopolisakkarit solüsyonu enjeksiyonu ile in-utero inflamasyon eşliğinde, uterin arter oklüzyonu yoluyla prenatal geçici hipoksi iskeminin nasıl indükleneceği konusunda sağlam bir anlayışa sahip olmalısınız. Uzmanlaşıldığında, bu teknik uygun şekilde uygulandığında 90 dakika içinde tamamlanabilir.

modeling-encephalopathy-prematurity-using-prenatal-hypoxia-ischemia

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Hipoksik-iskemik beyin hasarı için postnatal sıçan modelinde, insan yenidoğan hipoksik iskemik ensefalopati (HIE) köklü bir model. Bu makalede, doğum sonrası sıçan Yavrularda HIE modeli açıklanmaktadır.

Perinatal İskemi Hipoksik İskemik Ensefalopati Modeli

Biz periventriküler lökomalazi (PVL), prematüre bebeklerde periventriküler beyaz cevher lezyonları ile karakterize baskın beyin hasarı fare modelleri kurdu. Hipoksi / iskemi / sistemik enfeksiyon olmadan PVL birincil nedenleri. Tek taraflı karotis ligasyonu ve / lipopolisakkarid enjeksiyon olmadan hipoksi maruz P6 fareler PVL benzeri lezyonlar oluşturur.

Periventriküler lökomalazi Fare Modelleri

Bu video, lipopolisakkarit (LPS) kullanan bir sıçan modelinde kan-beyin bariyeri (BBB) bozulmasını ve serebral mikrokanamaları indükleme sürecini göstermektedir. BBB geçirgenliğinin artmasına ve ardından beyin dokusu hasarına yol açan bağışıklık tepkilerinin sırasını vurgular.

Lipopolisakkarit Kullanılarak Bir Sıçan Modelinde Serebral Mikrokanamaların İndüksiyonu

Kaynak: Jantzie, L. L., et. al. Sıçanlarda Prenatal Hipoksi-iskemi ile İntramniyotik Lipopolisakkarit Kullanılarak Prematüre Ensefalopatisinin Modellenmesi. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, uterus kan akışını kısıtlayarak ve LPS enjekte ederek, erken doğum çalışmalarıyla ilgili nöroinflamasyonu ve bozulmuş beyin gelişimini modelleyerek fetal sıçanlarda hipoksik-iskemik ve inflamatuar durumları indüklemek için bir protokol göstermektedir.

Prenatal Sıçanlarda Ensefalopatiyi Modellemek için Hipoksik-İskemik ve İnflamatuar Durumların İndüklenmesi

Perinatal asfiksiyi takiben hipoksik-iskemik ensefalopati hayvan modelleri kullanılarak incelenebilir. Yenidoğan hipoksik-iskemik ensefalopatisinin bir domuz yavrusu modeli oluşturmak için gerekli prosedürleri gösteriyoruz.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

Hafif intrauterin hipoperfüzyon metal halkaları embriyonik gün 17 fareler rahim ve yumurtalık arterlerde sarılı olan Artere Stent tarafından üretildi. Bu yordamı doğum öncesi hipoperfüzyon ve intrauterin büyüme kısıtlama üretti.

Microcoil stenoz ile hafif intrauterin hipoperfüzyon fare modeli

Yöntem, p17 gelincik iltihabı duyarlı hipoksik-iskemik ve hiperoksik beyin hasarı uzun süreli inflamasyon ve oksidatif beyin hasarı geç preterm bebeklerin bir dizi deneyimli arasındaki karmaşık etkileşimi modellemek için açıklar.

İnflamasyon duyarlıgeç Preterm Hipoksik-iskemik Beyin Hasarı Bir Gelincik Modeli

Bu yazıda, insanlarda görülen patolojiyi taklit eden sıçan yavrularının kullanıldığı bir yenidoğan intraventriküler kanama modeli sunulmuştur.

İntraventriküler Hemoglobin Enjeksiyonu ile Yenidoğan İntraventriküler Kanamasının Modellenmesi

Posthemorajik prematüre hidrosefali (PHHP), koryoamniyonit ve intraventriküler kanama kombine edilerek neonatal sıçanlarda modellenebilir. Bu doğum öncesi ve doğum sonrası olayların kombinasyonu, yaşam boyu makrosefali, ventrikülomegali ve yüksek kafa içi basınç dahil olmak üzere PHHP'nin klinik özelliklerini doğru bir şekilde özetler.

Sıçanlarda Prematüre Posthemorajik Hidrosefalisinin Modellenmesi

İpliksi Orta serebral arter oklüzyonu farelerde iskemik inme eğitimi için ortak bir model.

Fare Modelleme İnme - Filament Model Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Öğrenin, sıçanlarda prematüre doğumla ilişkili beyin hasarını taklit eden prenatal hipoksi-iskemi ve amniotik iltihaplanma modelini. Bu yöntem, perinatal beyin hasarının patogenezini anlamak ve tedavi stratejileri geliştirmek için kullanılır.

Prematüre Modelleme Ensefalopati Sıçanlarda İçi amniyotik Lipopolisakkarid ile Prenatal Hipoksi-iskemi kullanma

Daha fazla video keşfet