Name: Sosyal Space Etkileyen Koşullar Drosophila melanogaster (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-05T15:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 4 s
Description: Öğrenin Drosophila melanogaster'da sosyal mesafe tercihlerini sosyal alan odası kullanarak nasıl nicelendireceğinizi. Bu yöntem davranışsal nörobilim araştırmalarında genetik ve çevresel faktörleri incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarlar, bu el yazmasını hazırlama teşviki için Dr. Tadmiri Venkatesh'e, yapıcı yorumları için Dova Brenman ve Selwyn Chui'ye, ImageJ'deki makroyu tüm uçuş mesafeleri ve en yakın komşu mesafeler için tasarladıkları için Elyssa Burg ve Wayne Rasband'a teşekkür etmek isterler. Yazarlar ayrıca yapıcı yorumları için hakemlere teşekkür etmek isterler.
A.A.A., M.C.C. ve A.F.S. araştırma tasarımından sorumluydu; Deneyleri S.N.J., A.A.A, M.N., Z.R. ve A.J.M. gerçekleştirdi. A.A.A, M.N., A.J.M. ve M.C.C ve A.F.S. verileri analiz etti; El yazmasını A.R.M. ve A.F.S. yazdı.
Bu çalışma, The Professional Staff Congress ve The City University of New York tarafından AFS'ye ortaklaşa finanse edilen PSC-CUNY araştırma ödülleri tarafından desteklenmiştir; Western University'den AFS'ye iç finansmanla; eğitimdeki öğretmenler için Matematik, Biyoloji, Kimya ve Jeoloji ana dalları bursu ve AAA'ya Louis Stokes Azınlık Katılımı İttifakı bursu ile desteklenmiştir.

In-house düzenlendi 1. Ekipman ve Reaktifler (Diğerleri için malzemeler gör Liste) <ol><li> Daha önce 8 açıklandığı gibi bir Drosophila soğuk anestezi cihazı hazırlayın. </li><li> Daha önce 13 açıklandığı gibi bir sinek aspiratör hazırlayın. </li><li> Sosyal uzay odaları ve tutucular hazırlayın. <ol><li> Sipariş veya sosyal alan odaları oluşturmak için cam bölmeleri ve akrilik ayırıcılar yapmak. Her sosyal alanı bölmesi 0.3 cm kalınlığında, 16.5 cm, 8,9 cm bir bazın bir yüksekliğe sahip, iki dik üçgen akrilik aralayıcılar ((0,3 cm kalınlığında, 17.6 cm 17,6 cm) bir, iki kare cam bölmeden oluşur ) ve iki dikdörtgen alanlar (0,3 cm kalınlığında 1,5 cm 9 cm) (Şekil 1A). </li><li> Bu Şekil 1 B &#39;de bölme ile aynıdır, öyle ki cam ve akrilik sosyal alan bölmesini monte edin. Bunu yapmak için, öyle ki cam bir kare bölmesinin üstüne bir üçgen boşluk düz koyarak başlamak dik açıÜçgen aralama kare bölmesinde köşelerinden biri ile uyumludur. Sonraki ilk üçgen ayırıcı yansıtma, kare bölmesinin üstündeki ikinci üçgen boşluk düz yerleştirin. NOT: elinden yağlar ve kokuları ile parçaları kontamine etmeyecek şekilde eldiven giymek emin olun. </li><li> Kapsamında değildir bölmesinin yan tarafı boyunca, kare bölmesinin en düz iki küçük dikdörtgen ayırıcılar yerleştirin. Kare düzlemin üstünde akrilik ayırıcılar şimdi üçgen arenada oluşturmalıdır. </li><li> Aşağıda cam orijinal bölmesinin üzerinde hizalanacak şekilde, akrilik aralama üstünde cam bir ikinci kare bölme yerleştirin. </li><li> Sosyal uzay odasını oluşturmak üzere bir araya bölme ve ara sabitleyen dört bağlayıcı klipleri kullanın. Cam bölmeler içinde onları güvence üçgen aralama her uzun kenarı boyunca, köşeye yakın tek klibi yerleştirin. Bu aynı tarafta, onları güvence dikdörtgen aralama her aşkın, bitişik köşede bir klip yerleştirmekCamların yan. </li><li> Bir destek standı ve sosyal alan odasının çalışma yüzeyinin üstünde onun kenarında dinlendiği gibi kelepçe, dik konumda sosyal alan odasını koruyacaktır böyle bir şişeye kelepçe birleştirin. </li><li> Deneyde her tekrarı için bir sosyal alan odasını montajı ve durmak destekliyoruz. </li></ol></li><li> Test sineklerin tırmanma yeteneği kontrol etmek için bir tırmanma tahlil yanıt cihazı hazırlayın. <ol><li> Daha önce 14,15 tarif edildiği gibi, bir karşı cihazı kullanın. </li></ol></li><li> Beyaz tezgah kapağı ve beyaz zemin önünde kaplı bir çalışma yüzeyine deney yaparak homojen aydınlatma koşulları sağlamak. </li></ol> 2. Deney öncesi Sinekler hazırlanması <ol><li> Standart Drosophila içeren şişelerde sinekler yiyecek sinek koruyun. 12 saat aydınlık / karanlık döngüsünde 25 ° C&#39;de bir kuluçka bölmesinde muhafaza edin. </li><li> E Bir iki gün önceXperiment, toplamak ve daha önce 8 açıklandığı gibi cinsiyet, soğuk anestezi altında uçuyor. <ol><li> Soğuk anestezi cihazı Chill -4 ° C. Yeri 50 ml&#39;lik plastik tüplere uçar. Tamamen sinekler hareketsiz olmak için en az 5 dakika bekleyiniz, yalıtılmış bir buz kovası, buz içine sinekler içeren plastik tüpler daldırın. </li><li> Soğuk anestezi cihazının polietilen levha üzerine sinekler yerleştirin. Oda sıcaklığında, kadınlarda gelen erkeklerin ayırmak için Stereomikroskopta kullanın. Standart Drosophila içeren şişeler içinde, gruplar halinde, sinekler koruyun flakon başına 40 sinekleri aşmayan, gıda sinek. </li></ol></li><li> İki saat deney başlamadan önce, deney gerçekleştirilir oda sıcaklığı 24-25 ° C arasındadır ve nem yaklaşık olarak% 50 olduğundan emin olun. </li><li> Gıda içeren yeni şişe içine sinekler aktarın ve deney yapılacaktır çalışma yüzeyine 2 saat koyun. NOT: Bu experimen içints, kullanılan sinek suşları Drosophila melanogaster suşları vardı: 1118 w, Cs 10 (veya W - Kanton-S 10 kez çaprazlanırlar 1118 w) Kanton-Özel veya Kanton-S (CS), Oregon ve Semerkand sinekler laboratuvarımızda tüm vardı hisse senetleri 16; Elwood sinekler Long Island, New York, ABD 8, Huntington Elwood Mahallesi&#39;nde Sonbahar 2011&#39;de toplanmıştır. Aksi belirtilmediği zaman dışında, sunulan sonuçlar Kanton-S (kırmızı tonlarında) uçar ile elde edilmiştir. </li></ol> 3. Deneme Sahne <ol><li> (- Işık başladıktan sonra saat zaman - Zeitgeber zamanlı ZT 4 ila 7) 12 pm ve 3 saatleri arasında deney yapın. </li><li> Sinekler transferi için sosyal alan odasını hazırlayın. <ol><li> Vücudunuza yakın dikdörtgen aralayıcıları içeren tarafı, bir çalışma yüzeyine bir sosyal alan kamara düz yerleştirin. </li><li> O Kaldırne vücudunuzun en yakın klip ve dikdörtgen spacers arasında yaklaşık 1 cm boşluk yaratarak, dışarıya tek dikdörtgen ayırıcı kaydırın. </li><li> Bandı ve kalem kullanarak, cinsiyet, gerginlik ve tekrar sayısı ile bir üst köşede sosyal alan odasını etiket. İç üçgen arenada kısmını kapsamaz bandı sağlamak için özen gösterin. </li></ol></li><li> Sosyal uzay odasına sinekler aktarın. <ol><li> Aktarım, yeni, boş bir şişe içine gıda içeren flakon kendi uçar. Aspire boş şişeye uçar ve sosyal alan odasına aktarabilirsiniz. <ol><li> Aspiratör ucu içine sinekler çizmek Nefes. Sosyal uzay odasının dikdörtgen aralama arasında 1 cm boşluk içine ucu yerleştirin ve iç üçgen arenaya sinekler zorlamak için tutarlı bir oranda nefes verin. </li><li> Hemen iç üçgen arena tabanını kapanış yerine geri dikdörtgen ayırıcı kaydırın ve tekrar bağlayıcı klibi yerleştirin. </li></ol></li&gt; </ol></li><li> Deneysel çalışmalar gerçekleştiği yerlerdir farklı bankta bulunan bir vurma pedi, üzerinde, dikdörtgen aralama alt tarafta olduğu gibi dik sosyal alan odasını tutun. Tüm sinekler sağlamak için Sterlini üç kez arena altına düşmüş. NOT: sinekler altına düştüğü sağlamak için aparat güvenli bir tutuş korurken küçük odacık boyutu (Şekil 1D) dışarı çıkmış akrilik ayırıcı için çalışma yüzeyinin üzerine dirseklerinizi patlama nedeniyle. </li><li> Bir zamanlayıcı başlatın. </li><li> Çalışma yüzeyine sosyal alan odasına yerleştirin ve dik tutmak için destek standı ve şişe kelepçe kullanın. İç üçgen alanda herhangi bir bölümünü kaplayan bir cetvel ya da sosyal alan odasına karşı düz bilinen uzunlukta bir etiket değil, yerleştirin. <ol><li> Yatay konumlandırılmış deneyler için, destek stand sosyal alan odasına koymayın; yerine çalışma yüzeyine sosyal alan kamara düz yatıyordu. </li></ol&gt; </li><li> Sinekler yerleşti zaman genellikle yaklaşık 30 dakika sonra, sosyal alan odasının bir resim çekmek. Çerçeve tüm iç üçgen arena, cetvel ve etiketi içerdiğinden emin olun. </li><li> Her genotip ve durum (ideal 3 dahili çoğaltır ve 3 bağımsız tekrarlar) için deney tekrarlayın. </li></ol> 4. Sosyal Uzay Veri Analizi <ol><li> ImageJ 17 aşağıdaki makrolar alma <ol><li> ImageJ buradan ulaşabilirsiniz: http://rsbweb.nih.gov/ij/. </li><li> Makro alt adlı &#39;Measure_Distances.txt&#39; ImageJ / plugins klasöründeki bir dosyaya aşağıdaki makro kaydetme ve Yardım&gt; Güncelleme Menüler komutunu kullanarak Eklentiler menüsünden, bir &#39;Ölçü Mesafeler&#39; komutunu oluşturabilirsiniz. &#39; </li><li> Bir .txt kopya ek veriler verilmektedir ve ilk 3&#39;te yayınlanan makro dosyası. </li></ol></li><li> Bir bilgisayara resim yüklemek ve bir pictu açınImageJ kullanarak yeniden. <ol><li> Etiketinde için (aynı yaklaşımı resimde cetvel üzerinde 1 cm işaretleri 0 cm bir çizgi çizerek bir ölçek oluşturmak ve Analiz sekmesi altında, o mesafe için 1 cm&#39;lik bir ölçek ayarlamak için Set Ölçek özelliğini seçin Bilinen uzunluk). Resim ölçeği uygulamadan önce Küresel seçeneği seçin. </li><li> Mümkün olduğunca resmin geri kalanı kadar çıkarırken, bu sinek tümünü içerir böyle Görüntü sekmesi altında Kırpma özelliğini kullanarak resim kırpın. </li><li> Görüntü sekmesi altında Tipi seçeneğinden 8-bit seçerek resim siyah ve beyaz yapın. </li><li> Görüntü sekmesinin ayarla seçeneği altında Eşik özelliği giderek resimden tüm arka plan gürültü çıkarın. Geliştirmek veya her sineğin beden imajı açıkça başka işaretler olmadan görülebilir böylece kontrast kaldırmak için sürgüleri sürükleyin. Değil sinekler olan işaretler varsa, dikdörtgen aracı ile onları yakalamak ve onları silin. </li><li> Yı kurAnaliz sekmesi altında Set Ölçümleri aracını kullanarak ölçümler. Alan, Kütle, Geometrik Merkezi ve Görüntü Etiket seçin. Ardından, analiz Parçacıklar sinekler temsil tüm siyah noktalar numaralı bir liste oluşturmak için Analiz sekmesi altında özelliğini seçin. <ol><li> Tüm parçacıkların analiz kullanılarak set boyutu 0,01-0,1 (piksel birimi seçin DEĞIL); dairesellik 0,00-1,00; göstermek özetliyor; sonuçlarını görüntülemek ve yöneticiye ekleyin. </li><li> Her kara nokta (her parçacık) orijinal resme numaralı liste karşılaştırarak, orijinal resimde olan sinekler doğru bir temsilidir olduğundan emin olun. NOT: birbirine çok yakın olan bazı sinekler tek parçacık olarak sayılmasına, el ikili görüntüde iki sinekler ayırmak için beyaz bir çizgi çizin. </li></ol></li><li> Ea dan, cm, mesafeleri içeren yeni bir liste oluşturmak için Eklentiler sekmesinde ikinci Makro seçeneği altında Liste Mesafeler makro - liste seçili iken, En Yakın Komşu kullanınch kendilerine en yakın komşusu uçmak. </li></ol></li><li> ImageJ en yakın komşu mesafeleri kopyalayın ve elektronik tablo programı sütuna yapıştırın. <ol><li> Aynı e-tabloya üzerine her tekrar tüm verileri derlemek ve genotip ve durumuna göre düzenliyoruz. </li></ol></li><li> İstatistiksel yazılımı kullanarak veri analizi yapın. Bu deneyde, Graph Pad Prism (MacOSX sürüm 6, GraphPad Yazılım, San Diego California USA, www.graphpad.com) tek yönlü ANOVA ve Kruskal Wallis Testleri, Tukey en ve Dunnet Post-Hoc testleri yürütmek için kullanılmıştır. </li><li> Mesafeler dağılımı olmayan bir parametrik dağılımı 1 izler ve veri kutusu ve Tukey bıyıkları (outliers ortadan kaldırmak için) olarak temsil edilmektedir. </li></ol> 5. Tırmanma Testi (Kontrol Davranışı) <ol><li> Yeteneği 14,15,18 tırmanma testi sinekler bir kontrol olarak bir tırmanma tahlil kullanın. <ol><li> Karşı akım cihazı kullanın şekilde üç deneme cBir paralel çalıştırılabilir. </li></ol></li><li> Karşıt konumlarda taze boş şişeleri ile karşı akım aparatı dibinde 1., 3 rd içine 100 naif sinekler üç farklı test şişelerde (daha önce test edilmemiş sinekler) ve bunları ek Transfer 50 ve son yuvaları. </li><li> Aparatın altındaki boş yuvalara taze, boş şişeleri yerleştirin. </li><li> Denemeyi başlatmak için, bütün sinekler her tüpün dibinde öyle ki, aygıtına üç kere aşağı dokunun. </li><li> 15 saniye Sayacı başlat (üst flakon ulaşmaya 3-7 gün eski Kanton-S ~% 100 için yeterli zaman - Şekil 3F bakınız). </li><li> Bir yuva ile üst şişeleri yerini almaya, karşı-akım cihazının üst kısmını kaydırın. </li><li> Alt şişelerde tüm sinekler getirmek için aşağı aparatı dokunarak sinekler toplayın. <ol><li> 1 ve 2. tüpleri (veya 3 ve 4., 5. </s&gt; ve 6 th) kontör ulaşamadı sinekler ve üst şişe ulaştı sinekler sırasıyla gelmektedir. </li></ol></li><li> Performans Endeksi (PI) hesaplayın. <ol><li> Her flakon sineklerin sayısını. </li><li> PI üst tüp tırmanmak mümkün sinekler yüzdesidir. </li><li> PI araçları normal dağılıma 1 izleyin ve veri ortalama (SEM) ile ortalama artı veya eksi standart hata sütun grafikleri olarak temsil edilmektedir. NOT: Alternatif olarak, PI eski sinekler için alt flakon (üst kısmını ulaşmak mümkün sinekler yüzdesi olarak hesaplanır, 5 sn 12 gün eski enfekte enfekte olan ve olmayan arasındaki yeteneği tırmanma fark ölçmek için yeterli zaman Hareketsiz bir resimden miktarı Kanton-S: sonuçlarını görmek). Diğerleri de yeteneği 19-22 tırmanma ölçmek için uygun irkilme-kaynaklı olumsuz geotaxis performans farklı tedbirler, kullandık. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Simon, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+assay+to+study+social+behavior+in+Drosophila.%3A+measurement+of+social+space+within+a+group%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">A simple assay to study social behavior in Drosophila.: measurement of social space within a group.</a> Genes Brain Behav. 11, 243-252 (2012).</li>
<li>Kaur, K., Simon, A. F., Chauhan, V., Chauhan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+bisphenol+A+on+the+behavior+of+Drosophila+melanogaster.+-+Potential+use+of+Drosophila+as+a+model+in+the+study+of+neurodevelopmental+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of bisphenol A on the behavior of Drosophila melanogaster. - Potential use of Drosophila as a model in the study of neurodevelopmental disorders.</a> Behavioural Brain Research. , (2015).</li>
<li>Burg, E. D., Langan, S. T., Nash, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+social+clustering+is+disrupted+by+anesthetics+and+in+narrow+abdomen+ion+channel+mutants%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Drosophila social clustering is disrupted by anesthetics and in narrow abdomen ion channel mutants.</a> Genes Brain Behav. 12, 338-347 (2013).</li>
<li>Wise, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+autism+candidate+gene+Neurobeachin+%28Rugose%29+mutants+in+Drosophila+exhibit+neuro-developmental+disorders%2C+aberrant+synaptic+properties%2C+altered+locomotion%2C+impaired+adult+social+behavior+and+activity+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The autism candidate gene Neurobeachin (Rugose) mutants in Drosophila exhibit neuro-developmental disorders, aberrant synaptic properties, altered locomotion, impaired adult social behavior and activity patterns.</a> J Neurosci. , 1-9 (2015).</li>
<li>Parrish, J. K., Edelstein-Keshet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complexity%2C+pattern%2C+and+evolutionary+trade-offs+in+animal+aggregation%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Complexity, pattern, and evolutionary trade-offs in animal aggregation.</a> Science. 284, 99-101 (1999).</li>
<li>Sokolowski, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+interactions+in+%E2%80%98%E2%80%98simple%E2%80%99%E2%80%99+model+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Social interactions in ‘‘simple’’ model systems.</a> Neuron. 65, 780-794 (2010).</li>
<li>Rittschof, C. C., Robinson, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomics%3A+moving+behavioural+ecology+beyond+the+phenotypic+gambit%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behaviour%22%5BJournal%5D)">Genomics: moving behavioural ecology beyond the phenotypic gambit.</a> Animal Behaviour. 92, 263-270 (2014).</li>
<li>Fernandez, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Straightforward+assay+for+quantification+of+social+avoidance+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22JoVE%22%5BJournal%5D)">Straightforward assay for quantification of social avoidance in Drosophila melanogaster.</a> JoVE. (94), e52011(2014).</li>
<li>Hahn, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monogenic+heritable+autism+gene+neuroligin+impacts+Drosophila.+social+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Monogenic heritable autism gene neuroligin impacts Drosophila. social behaviour.</a> Behav Brain Res. 252, 450-457 (2013).</li>
<li>Mogilner, A., Edelstein-Keshet, L., Bent, L., Spiros, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutual+interactions%2C+potentials%2C+and+individual+distance+in+a+social+aggregation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Math+Biol%22%5BJournal%5D)">Mutual interactions, potentials, and individual distance in a social aggregation.</a> J Math Biol. 47, 353-389 (2003).</li>
<li>Liu, L., Davis, R. L., Roman, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploratory+activity+in+Drosophila+requires+the+kurtz+nonvisual+arrestin%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Exploratory activity in Drosophila requires the kurtz nonvisual arrestin.</a> Genetics. 175, 1197-1212 (2007).</li>
<li>Soibam, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Open-field+arena+boundary+is+a+primary+object+of+exploration+for+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Open-field arena boundary is a primary object of exploration for Drosophila.</a> Brain Behav. 2, 97-108 (2012).</li>
<li>Ejima, A., Griffith, L. C. Ch. 30. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aEjima%2C+A+%22Drosophila+Neurobiology+-+A+laboratory+Manual.%2C+Ch%22">Drosophila Neurobiology - A laboratory Manual., Ch</a>. , Cold Spring Harbor Press. 475-481 (2010).</li>
<li>Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+mutants+of+Drosophila+melanogaster.+isolated+by+countercurrent+distribution%5BTitle%5D)+AND+%22PNAS%22%5BJournal%5D)">Behavioral mutants of Drosophila melanogaster. isolated by countercurrent distribution.</a> PNAS. 58, 1112-1119 (1967).</li>
<li>Connolly, J. B., Tully, T. Drosophila: A practical approach. Roberts, D. B. 1, 2nd, IRL Press. 265-317 (1998).</li>
<li>Simon, A. F., Shih, C., Mack, A., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Steroid+control+of+longevity+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Steroid control of longevity in Drosophila melanogaster.</a> Science. 299, 1407-1410 (2003).</li>
<li>Rasband, W. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRasband%2C+WS+%22ImageJ%22">ImageJ</a>. , US National Institutes of Health. Maryland, U.S.A. (1997).</li>
<li>Simon, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila%2C+vesicular+monoamine+transporter+mutants+can+adapt+to+reduced+or+eliminated+vesicular+stores+of+dopamine+and+serotonin%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Drosophila, vesicular monoamine transporter mutants can adapt to reduced or eliminated vesicular stores of dopamine and serotonin.</a> Genetics. 181, 525-541 (2009).</li>
<li>Barone, M. C., Bohmann, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+neurodegenerative+phenotypes+in+Drosophila+.dopaminergic+neurons+by+climbing+assays+and+whole+brain+immunostaining%5BTitle%5D)+AND+%22JoVE%22%5BJournal%5D)">Assessing neurodegenerative phenotypes in Drosophila .dopaminergic neurons by climbing assays and whole brain immunostaining.</a> JoVE. (74), e50339(2013).</li>
<li>Ali, Y. O., Escala, W., Ruan, K., Zhai, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assaying+locomotor%2C+learning%2C+and+memory+deficits+in+Drosophila.+models+of+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22JoVE%22%5BJournal%5D)">Assaying locomotor, learning, and memory deficits in Drosophila. models of neurodegeneration.</a> JoVE. , e2504(2011).</li>
<li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+iterative+negative+geotaxis+%28RING%29%3A+a+new+method+for+assessing+age-related+locomotor+decline+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila.</a> Exp Gerontol. 40, 386-395 (2005).</li>
<li>Simon, A. F., Liang, D. T., Krantz, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+decline+in+behavioral+performance+of+Drosophila+melanogaster.+with+age%5BTitle%5D)+AND+%22Mech+Ageing+Dev%22%5BJournal%5D)">Differential decline in behavioral performance of Drosophila melanogaster. with age.</a> Mech Ageing Dev. 127, 647-650 (2006).</li>
<li>Khalil, S., Jacobson, E., Chambers, M. C., Lazzaro, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+bacterial+infection+and+immune+defense+phenotypes+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22JoVE%22%5BJournal%5D)">Systemic bacterial infection and immune defense phenotypes in Drosophila melanogaster.</a> JoVE. , (2015).</li>
<li>Fernandez, R. W., Akinleye, A. A., Nurilov, M., Rouzyi, Z., Simon, A. F. 54th Annual Drosophila Research Conference, Washinton D.C., , (2013).</li>
<li>Suh, G. S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single+population+of+olfactory+sensory+neurons+mediates+an+innate+avoidance+behaviour+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A single population of olfactory sensory neurons mediates an innate avoidance behaviour in Drosophila.</a> Nature. 431, 854-859 (2004).</li>
<li>Helfrich-Förster, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+control+of+morning+and+evening+components+in+the+activity+rhythm+of+Drosophila+melanogaster.--Sex-specific+differences+suggest+a+different+quality+of+activity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Rhythms%22%5BJournal%5D)">Differential control of morning and evening components in the activity rhythm of Drosophila melanogaster.--Sex-specific differences suggest a different quality of activity.</a> J. Biol. Rhythms. 15, 135-154 (2000).</li>
<li>Fujii, S., Krishnan, P., Hardin, P. E., Amrein, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nocturnal+male+sex+drive+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Nocturnal male sex drive in Drosophila.</a> Curr Biol. 17, 244-251 (2007).</li>
<li>Pellegrino, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weather+forecasting+by+insects%3A+modified+sexual+behaviour+in+response+to+atmospheric+pressure+changes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Weather forecasting by insects: modified sexual behaviour in response to atmospheric pressure changes.</a> PLoS One. 8, e75004(2013).</li>
</ol>

Yazarlar, rekabet eden hiçbir finansal çıkarları olmadığını beyan ederler.

Bu protokol, sosyal alan ölçümü için detaylı bir prosedür tarif edilmiştir. Denemeyi sağlamak için bazı önemli adımlar başarılı şunlardır: 1) temizlik ve 2) sinekler önce en az bir gün toplanır sağlamak, aparatın iç odasının kapalı kendi yağlar ve kokular tutmak, aparat kurarken hep eldiven kullanın Deney soğuk anestezi olası etkilerini azaltmak için, 3) deneyden önce 2 saat sinekleri hasret değil, kendilerini temizlemiş sağlamak için taze gıda içeren yeni şişeleri sağlamak, 4) Bu 2 saat boyunca izin sinekler için iklim...

Sosyal etkileşimler, bir bütün olarak, bir grup içindeki bireylerin doğru gelişmesi ve sağlığı için çok önemlidir ve bu meyve sinekleri (Drosophila melanogaster) 5,6 olarak basit organizmalar için insanlarda (Homo sapiens) dan, çok sayıda türler arasında görülebilir. Işitsel, görsel, koku, dokunma, tatma veya: Tek bir meyve sineği ya da insan payı ortak araçlar duyusal o olsun bu etkileşimler sırasında bilgi, işlemek için. Biz ve diğerleri sosyal etkileşimler ve evrimsel olabilir ilgili nöronal hücreleri ve genler 7 korunmuş olduğu davranışsal tepkileri altında yatan potansiyel ortak neurocircuitry olduğunu varsayımında. İlk etkileşim meydana geldi sonra, etkileşim, bireyler arasındaki sosyal alan olacak, ya bir artış (sosyal kaçınma 8) veya azaltmak (grup oluşumu / yığılması 5). Daha karmaşık etkileşimler, saldırganlık ya da kur gibi, o zaman gerçekleşebilir. <p class = &quot;jove_content&quot;&gt; sofistike araçlar ve yöntemler, ne zaman ve eğitim büyük yatırımlar ne güçlü bir analitik araç haline toplumsal davranışın bu basit formu ölçmek için gereklidir. Burada, aşağıdaki çalışmalarda 1-4,9 kullanılan, Drosophila melanogaster stabil gruplarında sosyal etkileşim değerlendirmek arası uçucu mesafe veya sosyal alan nicelleştiren basit bir protokol açıklar. Sosyal alan sinek ve en yakın komşusu 10 arasındaki mesafe bir ölçüsü anlamına gelir. Sosyal alan D. verilen nüfus için tutarlı deneysel koşullar (yaklaşık 1-2 içinde vücut uzunluklarının ortalama) korunmuş ve bireysel izolasyonu 1 muhafaza edilmiş ise artan sineklerin sosyal deneyim açısından farklılık vardır melanogaster. Doğru görme, klasik koku veya SVO algı 1 normal bir sosyal mesafeyi korumak için gerekli değil ama. Sosyal alan ölçüsü böylece olabilirSosyal etkileşimleri analiz ve D&#39;de sosyal davranışı ölçmek için bir tanı aracı olarak kullanılan melanogaster 1.. Biz bu ölçümü gerçekleştirmek için, ve ne ölçüde ortak deneysel değişkenler bu davranışını etkileyen nasıl ayrıntılarıyla burada açıklamak. Bir ölçüde - - yapılacak sosyal alan etki Biz deney gerçekleştirilir boşluğun yanı sıra, sineklerin sayısı yönü göstermektedir. Daha önce kamara geometri sinekler 11,12 spontan keşif hareketi etkilediği gösterilmiştir ve onlar yerleşmeye karar nerede bu fenomen sonuçta etkileyebilir. Ancak, sürece sinek yoğunluğu (sinek / cm 2) ve bölme yönelim aynı tutulur, sineklerin sosyal alan da sabit kalır. Bu testte sağlamlığı bağımsız laboratuvarlar wh mutantlar tarafından görüntülenen sonucu çoğaltabilirsiniz farklı odacık boyutlarını, şeklini kullanarak ve oryantasyon gerçeği ile gösterilmektedirbir artış, sosyal alan olan ite geni (göz pigmentasyon etkileyen), (1 dikey üçgen veya yatay daire, 3, hava akımı ile yatay kare). Biz erkekler değil, kadınlar, daha da ayrı akşamları olduğunu göstermektedir Bizim sonuçları, sosyal alan deney yapıldığı zaman muhafaza sonuçların tutarlılığı açısından son derece önemli olduğunu göstermektedir. Ancak, gündüz ve akşam saatleri arasında görülen farklar sineklerin faaliyet farklılıklara bağlı değildir ve sosyal alanı ile ilişkili olmadığını aktivite düzeylerini gösteren argümanları tartışmak. Son olarak, beyaz mutant tarafından belirtildiği gibi toplumsal alanın belirlenmesi genetik temelleri şimdiden 1,3 tarif vardır, ve biz burada sunuyoruz sinekler çeşitli kendilenmiş ve vahşi yakalanmış suşlar arasındaki farklar. Bu nedenle, bu deney, mükemmel bir araç f yaparveya genetik etkilerini yanı sıra çevresel faktörleri araştırmak.

<table><tbody><tr><td>Stereo Zoom Mikroskop&nbsp;</td><td>Nikon&nbsp; &nbsp;</td><td>SMZ-645</td><td>Sinek işleme için başka herhangi bir standart kapsam işe yarayacaktır</td></tr><tr><td>Küçük boya fırçaları&nbsp;</td><td></td><td></td><td>sinekleri itmek için</td></tr><tr><td>Jazz-mix</td><td>Fisher</td><td>33545</td><td>diğer herhangi bir standart drosophila yiyeceği işe yarar</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mini Alarm Zamanlayıcı / Kronometre</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; Sharpie kalemler</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yapışkan Bant</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Orta boy bağlayıcı klipsler</td><td></td><td>Odaları bir arada tutmak için zımbalar: 1-1 / 4 "(32mm) 5/8 "kapasiteli</td>küçük Destek Standları Carolina ve nbsp;<td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>Odaları dikey yönde tutmak için</td> <td>707161</td></tr><tr><td>Büret kelepçeleri</td><td>Carolina</td><td>707362</td><td></td></tr><tr><td>Dijital Fotoğraf Makinesi</td><td>Nikon</td><td>&nbsp; Coolpix S8000&nbsp;</td><td>Hareketsiz fotoğraflar çekmek için</td></tr><tr><td>beyaz bir arka plan ve homojen bir ışık sağlamak için</td> resmi<td>üç katlı tahta ve beyaz tezgah kapağını</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>ölçeklendirebilmek</td>için <td>küçük cetvel</td><td></td><td></td></tr>.<tr><td>Vurma pedi</td><td></td><td></td><td>herhangi bir mouse pad çalışır.</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Prizma 6</td><td>GraphPad Yazılım A.Ş.</td><td>Mac OS X için Prism 6</td><td>T-testi, tek yönlü ve iki ANOVA'lı herhangi bir istatistiksel analiz yazılımı işe yarayacaktır</td></tr></tbody></table>

sosyal space etkileyen koşullar<em&gt; drosophila melanogaster</em

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

Ya da diğer küçük böcekler - - basit bir şekilde burada açıklanan sosyal alan tahlil Drosophila melanogaste r sosyal etkileşimlerini ölçmek için kullanılabilir. Daha önce 1 gösterdiği gibi, iki boyutlu bir oda içinde, ilk önce, sıkı bir grubu oluşturmak için sinekler kuvvet, daha sonra, birbirlerinden kendi tercih edilen mesafe almaya izin verir. Sinekler yerleşmiş sonra, biz ücretsiz çevrimiçi yazılımları (ImageJ) ile statik bir resim işleme, yakın komşuya (veya sosyal alan) mesafeyi ölçün. Potansiyel karıştırıcı faktörlerin kontrol altında tutarken en yakın komşusu mesafe analizi, araştırmacılar sosyal etkileşim üzerine genetik ve çevresel faktörlerin etkilerini belirlemek için izin verir. Böyle tırmanma yeteneği, gün, cinsiyet zaman ve sinek sayısı gibi çeşitli faktörler, sineklerin sosyal aralığı değiştirebilirsiniz. Böylece bu karıştırıcı etkilerini azaltmak amacıyla deneysel kontrollerin bir dizi öneriyorum. Bu tahlil canen az iki amaçlar için kullanılabilir. İlk olarak, araştırmacılar (örneğin izolasyon, sıcaklık, stres veya toksinler gibi) sevdikleri çevresel vardiya sosyal aralığı 1,2 nasıl etkileyeceğini belirleyebilirsiniz. İkincisi, araştırmacılar sosyal davranış 1,3 bu temel formu genetik ve sinirsel temellerini incelemek olabilir. Özellikle, bu tür insanlarda 4 otizm için aday genlerin gibi diğer organizmalar, sosyal davranış dahil olmak üzere düşünce orthologous genlerin rolünü araştırmak için bir tanı aracı olarak kullanılır.

Sosyal uzay odasının Drosophila melanogaster sosyal davranışlarını ölçmek için bir araç olarak kullanılabilir. Akrilik aralama ve cam levhalar birçok potansiyel karıştırıcı ipuçlarının olmaksızın stabil grupları oluşturabilirler uçan olan bir iki boyutlu alanı sağlayan bir iç üçgen arena oluşturmak üzere birlikte kırpılır. Sinekler dikey arenada transfer edildiğinde, onlar aşağı vurdu edilerek ürküyor ve onlar bir kaçış davranışı ile cevap vardır: Negatif geotaxis. Onlar sıkı bir gruba zorla dik üçgenin tepe, t...

Genlerin ve çevrenin Drosophila melanogaster'in sosyal alanı üzerindeki etkisi, güçlü ama basit bir analitik paradigma ile ölçülebilir. Burada, bu sosyal alanı etkileyebilecek ve bu paradigmadaki deneyleri tasarlarken göz önünde bulundurulması gereken farklı faktörleri gösteriyoruz.

Sosyal Space Etkileyen Koşullar<em&gt; Drosophila melanogaster</em

The social space assay described here can be used to quantify social interactions of Drosophila melanogaster &#8212; or other small insects &#8212; in a ...

Bu prosedürün genel amacı, sineklerin sosyal davranışlarının bir yönü olan tercih edilen sosyal mesafelerini nicelleştirmektir. Bu işlem, öncelikle sosyal alan odasının kurulmasıyla gerçekleştirilir. Bu sırada, bir grup sinek, oradaki yeni bir flakona aktarılarak çevresel kontrollü analiz odasına alıştırılır.İki saat sonra, sinek grubu sosyal alan haznesine aktarılır. Sinekler aşağıya doğru hafifçe vurularak indirilir ve ardından bir klempli stand ile dikey olarak konumlandırılır. Sinekler yerleştikten sonra konumları kaydedilir ve sinekler arasındaki mesafeler, çekilen bu fotoğraflar üzerinden yazılım aracılığıyla hesaplanır.Sonuç olarak sosyal alan deneyi, bu davranışın etkili çevresel faktörlerini ve nörogenetiğini incelemek için kullanılabilecek bir sosyal davranış biçimini nicelleştirir. Sosyal davranışı nicelleştirmek için kullanılan bu tekniğin, bilgisayar destekli video takibi gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, gelişmiş araçlar veya yöntemler gerektirmemesi ve zaman ile eğitim açısından büyük yatırımlar istememesidir. Bu yöntem, sosyal davranış alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir.Bu yöntemi, sosyal davranışla ilişkili olduğu düşünülen otolog

conditions-affecting-social-space-in-drosophila-melanogaster

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Drosophila melanogaster bir yüzyıl 1 aşkın süredir birçok önemli biyolojik işlemlerin moleküler ve hücresel temelini anlamak için kullanılan bir genetik ve davranışsal uysal modeli sistemidir. Drosophila iyi sinek davranışının genetik temeli içgörü kazanmak için istismar edilmiştir.

Test için Yöntemler Drosophila Davranış

Drosophila melanogaster gibi spontan lokomotor aktivite gibi davranışları etkileyen genetik veya çevresel manipülasyonlar okuyan yararlıdır. Burada kızılötesi ışınları ve spontan lokomotor aktivitesini ölçmek için veri analiz yazılımı ile monitör kullanan bir protokol açıklar.

Olarak spontan lokomotor aktivitenin belirlenmesi<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Burada, stresli bireylerin kaçınma durumunu ölçmek için bir protokol sunuyoruz. Bu paradigma güçlü ancak kullanıcı dostudur ve Drosophila melanogaster'de genlerin ve çevrenin bir tür sosyal etkileşim üzerindeki etkisini değerlendirmek için kullanılabilir.

Sosyal Kaçınma Niceleme için Basit Testi Drosophila melanogaster

Meyve sırasında davranış kalıpları dinamikleri mücadele, gözlenen ve ilişkili öğrenme ve bellek deneysel koşullar etkilenmiştir, kavgalar sinek. Burada sunulan protokol tamamen deneyler sırasında sinekler işlenmesini ortadan kaldıran yeni bir yordam açıklanır. Bu mücadele dinamikleri geliştirir ve güçlü "kaybeden" etkilerinin oluşumunu verir.

Saldırganlık incelenmesi için Handling ortadan kaldırır Yeni Bir Yaklaşım ve &quot;Loser&quot; Etkisi içinde<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Aksenik ve gnotobiyotik koşullarda Drosophila melanogaster yetiştirme için bir yöntem sunulmuştur. Fly embriyolar, sodyum hipoklorit dechorionated steril diyet aseptik transfer ve kapalı kaplarda yetiştirilir. Bakteri ile diyet ve embriyolar aşılamak gnotobiyotik dernekler yol açar ve bakteriyel varlığı tüm vücut Drosophila homojenatları kaplama ile teyit edilir.

Meyve Fly Yetiştirme<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Aksenik ve gnotobiyotik Koşullarında

Drosophila melanogaster meyve sinekinde çiftleşme davranışını etkileyen çevresel ve genetik ipuçlarını analiz etmeye yönelik bir analiz yapacağız.

Çevresel İpuçlarının Eklem Davranışı Üzerine Etkisini Test Etmek İçin Bir Yöntem<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Endokrin parçalayıcı kimyasalları (EDCs), organizmalar ve doğal ortamlar için ciddi bir sorun oluşturmaktadır. Drosophila melanogaster EDC efektleri içinde vivo çalışmak için ideal bir model temsil eder. Burada, Drosophila endokrin bozulması araştırmak için yöntemler mevcut, fitabet üzerinde EDC etkileri ele, fertilite, gelişimsel zamanlama, ve sinek ömrü.

Drosophila melanogaster endokrin bozulma test yöntemleri

Flypub tsay meyve etanol etkisi altında Drosophila melanogaster görüntüler sineği davranışları ölçer. Tsay kolayca her düzeyde deneyciler tarafından hakim olabilir ve çeşitli buharlaşmış uyaranlara uygulanabilir, madde bağımlılığı ve bağımlılık çalışmaları kolaylaştırmak.

Flypub Etanol Kaynaklı Davranış saldirisi ve Sensitizasyon Çalışma

Otizm Spektrum Bozukluğu (OSB), bozulmuş sosyal ve iletişimsel davranış ve tekrarlayan davranışların ortaya çıkması ile ilişkilidir. Drosophila modelinde ASD genleri ve davranışsal eksiklikler arasındaki ilişkiyi incelemek için, bu yazıda sosyal boşluk, saldırganlık, kur yapma, tımar etme ve alışkanlık davranışını test etmek için beş davranışsal paradigma açıklanmaktadır.

Otizm Spektrum Bozukluğunun Drosophila Modelinde Davranışsal Değerlendirme Paradigmaları

Protokol, geleneksel memeli modellerine bir alternatif olarak lokomotor disfonksiyonun nicelleştirilmesi yoluyla meyve sineğindeki nörotoksisiteyi değerlendirmek için yüksek verimli, uygun maliyetli bir yöntem sunar. Farmasötik bileşiklerin, çevresel ajanların veya genetik modifikasyonların nörotoksik etkilerini hassas, tekrarlanabilir ve etik açıdan uygun bir model kullanarak değerlendirmeyi amaçlar.

Drosophila melanogaster'de Lokomotor Disfonksiyonun Nörotoksisite için Bir Okuma Olarak Davranışsal Analizi

Öğrenin Drosophila melanogaster'da sosyal mesafe tercihlerini sosyal alan odası kullanarak nasıl nicelendireceğinizi. Bu yöntem davranışsal nörobilim araştırmalarında genetik ve çevresel faktörleri incelemek için kullanılır.

Sosyal Space Etkileyen Koşullar

Daha fazla video keşfet