β-varil Dış Membran Proteinleri Yapı Tayini Doğru - Yapıların itibaren Crystals

Bu yöntemin genel amacı, kristalleşecek ve parçalanacak olan dış zar beta-fıçı proteinlerinin miligram miktarlarını elde etmektir. Bu yöntem, beta-varil proteinlerinin hücre zarlarına nasıl yerleştirildiği gibi, zar proteini katlanması ve taşınması alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, beta-varil proteinleri için sağlam olmasıdır.

Genel olarak, bu yönteme yeni olan kişiler mücadele edecektir, çünkü saflaştırma, kristalizasyon ve ayrıştırma için deterjan seçimi zordur. Susan Buchanan'ın laboratuvarından bir doktora sonrası araştırmacı olan Jeremy Guerin, kendim ve laboratuvardaki meslektaşlarına ek olarak prosedürü gösterecek. Bu prosedüre, metin protokolünde açıklandığı gibi zara in vivo ekspresyon için kodon optimize edilmiş hedef dış zar proteinini veya OMP genini içeren bir T7 ekspresyon vektörünün inşası ile başlayın.