Name: Semiokimyasallar için yatak hataların Koku Nöron Cevapları Algılama Tek Sensillum Kaydı Kullanma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-01-18T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 55 s
Description: Öğrenin tek sensillum kaydı yöntemiyle yatak böceklerinin semiokimyasallara karşı koku nöron cevaplarını nasıl algıladığını. Bu teknik, kimyasal ekoloji ve haşere kontrolü stratejileri geliştirmek için değerli bilgiler sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Proje, NL'ye AAES 461Hatch/Multistate Grants ALA08-045 ve ALA015-1-10026 Ödülü tarafından desteklenmiştir.

Araçların, Uyaranlar Çözümleri ve Yatak Bugs 1. Hazırlık <ol><li> 20 ml&#39;lik bir şişe içinde (a / h)% 50 KNO 2 çözeltisi hazırlayın. </li><li> Arka arkaya ve çözeltiden tungsten daldırmalı elektrod ile 5 V KNO 2 çözeltisi içinde iki tungstenli Mikroelektronlar keskinleştirme. <ol><li> Kabaca tungsten telinin ön uç tüketen büyük ölçüde yaklaşık 5 dakika boyunca 2 eğimler / sn hızında ve KNO 2 çözeltisi üzerinden tungsten telinin yaklaşık 10 mm daldırılarak tungsten tel netleştirmek. </li><li> Elektrot ince ve sivri hale getirilmesi için, incelikle en az 1 dakika için 2 eğimler / sn hızında ve solüsyonun dışında tel ucunun yaklaşık 1 mm daldırılarak elektrodu netleştirmek. O bed bug koku Sensillum bir manikür delinme kadar ince olmalıdır 0.2-0.5 mikron, ulaşana kadar sık ​​mikroskop altında elektrot ucu çapını kontrol edin. Not: El keskin ikenelektrotun kal- mış, KNO 2 solüsyon içine tungsten telinin daldırma hızı her zaman sabit değildir. Daha fazla uygulama ile, elektrot bileme içinde nispeten sabit hız tutmak için çok daha kolaydır. Bileme süresi elektrot nasıl olması gerektiği gayet bağlı da belirsiz. Burada ~ 0.2 mikron çapında bir elektrot ucu koku Sensillum yoluyla delmek için yeterli değildir. </li></ol></li><li> Bir stok çözeltisi olarak 01:10 h / h arasında bir başlangıç ​​konsantrasyonuna saf bileşikten dimetil sülfoksit (DMSO) içinde kimyasal uyaranlara her seyreltilir. Her bir kimyasal için stok çözeltileri her birinden, DMSO ile yeniden deney gerekli kaç doz bağlı dekadik dilüsyonları bir dizi oluşturur. Β-pinen ve okaliptol - Al,% 10 (+) kullanın. </li><li> Beslenmemiş ya da yedi gün yerleştirin sonrası beslenme Ft (erkek veya kadın) yetişkin yatak böcek. Dix kolonisi (Kentucky Üniversitesi Haynes bir hediye) t kullanılacakO bir petri deneme. Not: Petri kabındaki yerleştirilen yatak hataların kesin sayı yok. Birkaç veya çok olabilir. </li></ol> 2. Oda Bug Anten Hazırlık <ol><li> Buz (2-3 dk) üzerinde yatak hataların Anesteziyoloji. </li><li> Çift taraflı bant ile bir mikroskop lamel antenler ve böcek vücudu hem Fix ve ince makasla bacakları kaldırmak. </li><li> Sürekli bant onları sopa şekilde yavaşça antenler dokunmak için küçük bir iğne kullanın. </li><li> Manipülasyonunu kolaylaştırmak ve kayıt elektrot (Şekil 1) için uygun bir açıyla (~ 90 °) bunu ayarlamak için diş mumu küçük bir top (~ 1 cm çaplı) karşı lamel dinlendirin. </li><li> Bir kez, bir stereo mikroskop altında bed bug koyun, soğuk ışık kaynağı açmak ve anten açıkça sunulana kadar aydınlatma yoğunluğunu ayarlayın ve yüksek büyütmede bed bug antenin ikinci kamçı üzerinde mikroskop odak, güvenli (720X) . Not: Deneyde kullanılan aydınlatma şiddeti gerçekten deneycinin gözleri aydınlatma yoğunluğunu nasıl hissettiğimi bağlıdır, hangi quantitated değildir. </li></ol> 3. Tek Sensillum Kayıt <ol><li> Sinyal kaydı ve görselleştirme için bilgisayar ile bağlı olan sinyal alımı kontrolörü ile preamplifier (10X) bağlayın. Bilgisayarı açın ve yazılımı, örneğin, AutoSpike32 başlatmak ve menü çubuğundan &quot;Kayıt&quot; modunu tıklayın. Sonra dalga sinyalleri kaydetmeye başlamak üzere &quot;dalga&quot; seçiniz. Not: arka arkaya monitörün sağına soluna çalışan düz çizgi artık görünür olmalıdır. Burada, kayıt penceresi 40 saniye sürer. Maksimum dalga kaydı 10 sn. Seçilen örnekleme hızı 96000 ve dijital örnekleme hızı 0 ofset% ve hiçbir filtreleme, kayıt sinyalleri için hiçbir düzeltme yoktur 240. değildir. Gerektiği gibi yazılımda Tüm bu parametre ayarları değiştirilebilir. </li> &lt;li&gt; antennal Sensillum gelen nöronal yanıtlar için tonlama modu sunmak için kullanılan preamplifikatör, bağlı hoparlör açın. </li><li> Stabilize yatak böcek karın içine referans elektrot yerleştirin. Not: Referans elektrot manyetik hava masaya bağlı standı bir metal gerçekleştirildi. </li><li> Referans elektrot yatak böceğin karın bağlandıktan sonra, yatak bug en antenin arka ucuna doğru, bir micromanipulator tarafından Pre amplifikatör bağlanır ve manipüle kayıt elektrot hareket. </li><li> Kayıt elektrot antenin sağ ucu ile temas halinde olduğunda, mikroskop geçiş ve düşük büyütmede elektrodu bulun. </li><li> Elektrod ve anten Sensillum aynı düzlem içindedir ve mikroskop altında açıkça görülebilir kadar tedricen büyütme artan kayıt sırasında elektrot ayarlayın. Not: Bu zamana kadar, mikroskop olağandırEn yüksek büyütmede ly. </li><li> Mikromanipülatör kullanarak Sensillum şaftı içine kayıt elektrodu yerleştirin ve arka plan gürültü eylem potansiyeline göre yüksek ise biraz daha derine gitmek. </li><li> Β-pinen - Bir kere net aksiyon potansiyelleri kaydedildi Sensillum dan izlenir,% 10 (+) ile bir mikropipet doldurun. Bir cam Pasteur pipeti içine yerleştirilen bir filtre kağıdı şeridi (~ 3 x 15 mm) üzerine β-pinen -% 10 (+) 10 ul tablet yatırmak mikropipet kullanın. <ol><li> Uyarıcı kontrolörünün nabız akış borusunun çıkışına yüklenen pipet bağlayın ve anten yönelik tüp içinde küçük deliğe pipet ucu yerleştirin. </li></ol></li><li> Bütün bu bağlantılar stabilize olduğunda, sürekli nemlendirilmiş hava akımı içine uyarıcı (/ dk 0.5 L) 0.5 sn puf sunmak için uyarıcı kontrolörünün ayak pedalını bastırın. Aksiyon potansiyellerinin kayıt olduğunda footswitc aynı anda başlatılacaktırh depresif. Kayıt işlemi stimülasyon önce 1 sn başlayan 10 saniye son olacak. </li><li> İki 500 msn dönem, önce bir ve uyarıldıktan sonra biri için off-line aksiyon potansiyelleri sayın. Önceki 500 msn sırasında kaydedilen spontan aktivite 500 msn sonrası stimülasyon sırasında başak oranında herhangi bir değişikliğe çıkartın ve 2 ile çarpılarak sivri / s, geleneksel ölçek haline sayar dönüştürün. </li></ol> SSR 4. uyarıcı Değiştirme <ol><li> Bed bug antenleri üzerine pipet β-pinen ve pipet kaldırılır sonra 10 saniye için bu özel odorant yanıtı kayıt - ayak pedalı tetikleyen edildikten sonra,% 10 (+) teslim. </li><li> % 0.001 okaliptol ile yeni bir pipet Etiket test edilecek. Uyaran 10 ul, yeni pipet içine, uygulanmış, bunun üzerine filtre kağıdı, bir parça yerleştirin. </li><li> Uyaran tamamen vapori kadar 2-5 dakika bekleyinCam pipet zed. Nabız akış tüp çıkışına üzerine pipet takın. </li><li> Anten yönelik tüp küçük deliğe pipet yerleştirin. Ayak pedalını basın ve 10 saniye kayda başlamak. </li><li> Pipet çıkarın ve% 0.01 ökaliptol başka pipet hazırlayın. </li><li> Doza bağlı bir yanıt gözlemlemek için anten Sensilla ilgili okaliptol doz (0.001 ila% 10% si), tüm geri kalan test edin. En Test sulandırmak az dozlarda sulandırmak. </li></ol>

<ol><li>Bartonicka, T., Gaisler, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seasonal+dynamics+in+the+numbers+of+parasitic+bugs+%28Heteroptera%2C+Cimicidae%29%3A+a+possible+cause+of+roost+switching+in+bats+%28Chiroptera%2C+Vespertilionidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitol+Res%22%5BJournal%5D)">Seasonal dynamics in the numbers of parasitic bugs (Heteroptera, Cimicidae): a possible cause of roost switching in bats (Chiroptera, Vespertilionidae).</a> Parasitol Res. 100 (6), 1323-1330 (2007).</li>
<li>Thomas, I., Kihiczak, G. G., Schwartz, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bed+bug+bites%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Bed bug bites: a review.</a> Int J Dermatol. 43 (6), 430-433 (2004).</li>
<li>Anderson, A. L., Leffler, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bed+bug+infestations+in+the+news%3A+a+picture+of+an+emerging+public+health+problem+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22J+Environ+Health%22%5BJournal%5D)">Bed bug infestations in the news: a picture of an emerging public health problem in the United States.</a> J Environ Health. 70 (9), 24-27 (2008).</li>
<li>Boase, C. Bed bugs (Hemiptera: Cimicidae): an evidence-based analysis of the current situation. Sixth international conference on urban pests. OOK-Press Kft. Robinnson, W., Bajomi, D. Budapest, Hungary, , (2008).</li>
<li>Doggett, S. L., Geary, M. J., Russell, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Resurgence+of+bed+bugs+in+Australia%3A+with+notes+on+their+ecology+and+control%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Health%22%5BJournal%5D)">The Resurgence of bed bugs in Australia: with notes on their ecology and control.</a> Environ Health. 4 (2), 30-38 (2004).</li>
<li>Ter Poorten, M. C., Prose, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+return+of+the+common+bedbug%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Dermatol%22%5BJournal%5D)">The return of the common bedbug.</a> Pediatr Dermatol. 22 (3), 183-187 (2005).</li>
<li>Yoon, K. S., Kwon, D. H., Strycharz, J. P., Craig, S., Lee, S. H., Clark, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biochemical+and+molecular+analysis+of+deltamethrin+resistance+in+the+common+bed+bug+%28Hemiptera%3A+Cimicidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Entomol%22%5BJournal%5D)">Biochemical and molecular analysis of deltamethrin resistance in the common bed bug (Hemiptera: Cimicidae).</a> J Med Entomol. 45 (6), 1092-1101 (2008).</li>
<li>Wang, L., Xu, Y., Zeng, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resurgence+of+bed+bugs+%28Hemiptera%3A+Cimicidae%29+in+mainland+China%5BTitle%5D)+AND+%22Fla+Entomol%22%5BJournal%5D)">Resurgence of bed bugs (Hemiptera: Cimicidae) in mainland China.</a> Fla Entomol. 96 (1), 131-136 (2013).</li>
<li>Haynes, K. F., Potter, M. F. Recent progress in bed bug management. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHaynes%2C+KF+%22Advanced+technologies+for+managing+insect+pests%22">Advanced technologies for managing insect pests</a>. Ishaaya, I., Palli, S. R., Horowitz, A. R. , Springer. New York. 269-278 (2013).</li>
<li>Carey, A. F., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insect+olfaction+from+model+systems+to+disease+control%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Insect olfaction from model systems to disease control.</a> Proc Natl Acad Sci. 108 (32), 12987-12995 (2011).</li>
<li>Leal, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odorant+reception+in+insects%3A+roles+of+receptors%2C+binding+proteins%2C+and+degrading+enzymes%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Entomol%22%5BJournal%5D)">Odorant reception in insects: roles of receptors, binding proteins, and degrading enzymes.</a> Annu Rev Entomol. 58, 373-391 (2013).</li>
<li>Den Otter, C. J., Behan, M., Maes, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+cell+response+in+female+Pieris+brassicae.+%28Lepidoptera%3A+Pieridae%29+to+plant+volatiles+and+conspecific+egg+odours%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Single cell response in female Pieris brassicae. (Lepidoptera: Pieridae) to plant volatiles and conspecific egg odours.</a> J Insect Physiol. 26 (7), 465-472 (1980).</li>
<li>Levinson, H. Z., Levinson, A. R., Muller, B., Steinbrecht, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+of+sensilla%2C+olfactory+perception%2C+and+behavior+of+the+bed+bug%2C+Cimex+lectularius.%2C+in+response+to+its+alarm+pheromone%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Structural of sensilla, olfactory perception, and behavior of the bed bug, Cimex lectularius., in response to its alarm pheromone.</a> J Insect Physiol. 20 (7), 1231-1248 (1974).</li>
<li>Harraca, V., Ignell, R., Löfstedt, C., Ryne, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+antennal+olfactory+system+of+the+bed+bug+%28Cimex+lectularius%29%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">Characterization of the antennal olfactory system of the bed bug (Cimex lectularius).</a> Chem Senses. 35 (3), 195-204 (2010).</li>
<li>Liu, F., Haynes, K. F., Appel, A. G., Liu, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antennal+olfactory+sensilla+responses+to+insect+chemical+repellents+in+the+common+bed+bug%2C+Cimex+lectularius%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chem+Ecol%22%5BJournal%5D)">Antennal olfactory sensilla responses to insect chemical repellents in the common bed bug, Cimex lectularius.</a> J Chem Ecol. 40 (6), 522-533 (2014).</li>
<li>Olson, J. F., Moon, R. D., Kells, S. A., Mesce, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphology%2C+ultrastructure+and+functional+role+of+antennal+sensilla+in+off-host+aggregation+by+the+bed+bug%2C+Cimex+lectularius%5BTitle%5D)+AND+%22Arthropod+Struct+Dev%22%5BJournal%5D)">Morphology, ultrastructure and functional role of antennal sensilla in off-host aggregation by the bed bug, Cimex lectularius.</a> Arthropod Struct Dev. 43 (2), 117-122 (2014).</li>
<li>Bruyne, M., Foster, K., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor+coding+in+the+Drosophila+antenna%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Odor coding in the Drosophila antenna.</a> Neuron. 30 (2), 537-552 (2001).</li>
<li>Qiu, Y. T., Loon, J. J. A., Takken, W., Meijerink, J., Smid, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+coding+in+antennal+neurons+of+the+malaria+mosquito%2C+Anopheles+gambiae%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">Olfactory coding in antennal neurons of the malaria mosquito, Anopheles gambiae.</a> Chem Senses. 31 (9), 845-863 (2006).</li>
<li>Ghaninia, M., Ignell, R., Hansson, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+classification+and+central+nervous+projections+of+olfactory+receptor+neurons+housed+in+antennal+trichoid+sensilla+of+female+yellow+fever+mosquito%2C+Aedes+aegypti%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Functional classification and central nervous projections of olfactory receptor neurons housed in antennal trichoid sensilla of female yellow fever mosquito, Aedes aegypti.</a> Eur J Neurosci. 26 (6), 1611-1623 (2007).</li>
<li>Hill, S. R., Hanson, B. S., Ignell, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+antennal+trichoid+sensilla+from+female+southern+house+mosquito%2C+Culex+quinquefasciatus+Say%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">Characterization of antennal trichoid sensilla from female southern house mosquito, Culex quinquefasciatus Say.</a> Chem Senses. 34 (3), 231-252 (2009).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Tek Sensillum Kayıt tekniği yaygın böyle bir ortamda farklı kimyasal uyaranlara meyve sinekleri, sivrisinek ve yatak böcek olarak böceklerin sinir yanıtları test kullanılmıştır. Bu kimyasal uyaranlara genellikle çözündürüldü ve işlemlerin farklı dozlarını hazırlamak için, yaygın bir çözücü içinde seyreltilir. Bununla birlikte, farklı çözücüler uyarıcılar için oldukça farklı salım oranları üretebilir. Böyle Drosophila melanogaster, anopheles gambiae, Culex quinquefasciatus ve Aedes aegypti<...

Geçici ektoparazit olarak, onların hayatta kalma, gelişme ve üreme, insan ve hayvanlarda 1,2 de dahil olmak konaklardan kan kaynakları gerektiren anlamına gelir yükümlü kan emici böcek olduğunu,: ortak yatak böcek Cimex L (Cimicidae Hemiptera) lectularius. Virüs iletim nadiren C&#39;ye bağlı bildirilmiş olmasına rağmen lectularius, bir istila tarafından oluşturulan ısırma sıkıntı ciddi fiziksel ve psikolojik 3 ana etkiler. Tanıtım ve kimyasal böcek ilaçlarının yaygın kullanımı, özellikle DDT, salgınlar riskini düşürdü ve 1950&#39;lerde istilası sonunda artık ciddi bir halk endişe vardı böyle düşük bir düzeyde idi. Ancak, olası bir dizi faktöre gibi insektisit kullanımının azaltılması olarak, dünya çapında yatak böcek popülasyonunda diriliş açmıştır, kamu bilincinin bir düşüş, aktivite seyahat artmış ve böcek öldürücüler 4-9 direnç gelişimi. &lt;/ p&gt; Ortamda kimyasal ipuçları tespit edilir ve bu tür anten ve maksiller palps olarak koku organları aracılığıyla böcekler tarafından tanınır. Böcek antenler üzerinde koku Sensilla bu kimyasal ipuçlarını tespit çok önemli bir rol oynamaktadır. Kimyasal moleküller manikür yüzeyindeki gözenekler aracılığıyla antennal manikür girin. Odorant bu kimyasal moleküller antennal lenf bağlama bağlama proteinleri ve odorant reseptörlerinin 10 üzerine taşırlar. Koku reseptörleri ve bu kimyasal moleküller kez depolarize olacak nöral membran üzerinde seçici olmayan katyon iyon kanalının, kendi eş-reseptör odorant reseptörlerinin 11 tarafından tanınır. Tek Sensillum kayıt (SSR), kimyasal ya da kimyasal olmayan uyaranlara ya uygulamadan kaynaklanan aksiyon potansiyeli dışı değişikliği algılamak için geliştirilmiştir. Sensillum lenf ve bir referans elektrotu bir kayıt elektrot konması ileinsektisidin (genellikle göz bileşiminin ya da karın) bazı diğer parça içine, uyarıcıya tepki nöronların ateşleme hızı 12 kaydedilebilir. Sivri uçların sayısında değişiklikler belirli bir uyarana karşı böcek hassasiyetini temsil etmektedir. Farklı kimlikler ve konsantrasyon kimyasal uyaranlara farklı ateşleme oranları ve temporal yapıları, farklı nöral tepkiler olacak ve böylece belirli kimyasallara böceğin kodlama sürecini araştırmak için kullanılabilir. Dokuz yivli peg C Sensilla, 29 saç benzeri E (E1 ve E2) Sensilla ve bir çift Dα, Dβ, Dγ pürüzsüz PEG her: Ortak yatak böcek için, hem de cinsel form antenler üzerindeki koku Sensilla aynı desen paylaşan Sensilla 13,14. Birden çok nöronlar Sensillum her tür tespit edilmiş olarak, bu aynı Sensillum yer farklı nöronlardan aksiyon potansiyelleri ayırt etmek kolay değildir, bu deney için çok totaaksiyon potansiyellerinin l numaraları önce ve stimülasyon sonrasında 500 milisaniye süre için off-line sayılmıştır. Stimülasyon sonrasında aksiyon potansiyelinin sayısı daha sonra stimülasyon öncesi aksiyon potansiyeli sayısından çıkarılır ve ikinci 15 başak her ayrı Sensillum ateşleme hızı değişiklikleri ölçmek üzere iki ile çarpılır.

<table><tbody><tr><td>Tungsten tel</td><td>SİSTEMLERİ</td> <td># 716500</td><td></td></tr><tr><td>KNO2</td><td>Sigma</td> <td># 310484</td><td>elektrotunu hazırlamak için kullanılır Tungsten telini keskinleştirmek için kullanılır</td></tr><tr><td>AC</td><td>Güç Kaynağı BK Precision</td><td>1653A</td><td>Tungsten telin keskinleştirilmesinde voltajın sağlanması</td></tr><tr><td>Leica Z6 APO Mikroskop</td><td>Leica</td><td>10447424</td><td>Antenler üzerindeki sensillayı gözlemlemek için kullanılır</td></tr><tr><td>Simulus kontrolör</td><td>Syntech</td><td>CS-55</td><td>Uyaran uygulamasını kontrol etmek için kullanılır</td></tr><tr><td>4 Kanallı USB Toplama Kontrol Cihazı</td><td>Syntech</td><td>IDAC-4</td><td>Kayıt öncesi ve sırasında tüm sinyallerin gerçek zamanlı ekran görüntüsü</td></tr><tr><td>Işık Kaynağı</td><td>SCHOTT</td><td>A20500</td><td>Gözlem için ışık kaynakları sağlama</td></tr><tr><td>Mikromanupulator</td><td>Leica</td><td>115378</td><td>Küçük hareketler için kullanılır elektrot</td></tr><tr><td>Hoparlör</td><td>Juster</td><td>95a</td><td>Edinme Kontrolörü IDAC-4 ile bağlantılı ve sinyal için ses sağlayan</td></tr><tr><td>Manyetik stand</td><td>Narishige</td><td>GJ-1</td><td>Referans elektrodu, stabilize yatak böceği ve uyaran dağıtım tüpünü tutmak için kullanılır</td></tr><tr><td>TMC Titreşim İzolasyon Tablosu</td><td>TMC</td><td>63-500</td><td>Ekipmanlardan gelen titreşimi izole etmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Lamel</td><td>Tedpella</td><td>2225-1</td><td>Yatak böceğini tutmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Çift Taraflı Bant</td><td>3M</td><td>XT6110</td><td>Yatak böceğini kapak klipsi üzerinde sabitlemek için kullanılır</td></tr><tr><td>Diş Mumu</td><td>Dentakit</td><td>DK-R012</td><td>Yatak böceğinin sabitlendiği kapak klipsini desteklemek için kullanılır&nbsp;</td></tr></tbody></table>

semiokimyasallar için yatak hataların koku nöron cevapları algılama tek sensillum kaydı kullanma

Using Single Sensillum Recording to Detect Olfactory Neuron Responses of Bed Bugs to Semiochemicals

Böcek koku alma sistemi ortamında Semiokimyasallar saptanmasında önemli bir rol oynar. Özellikle, içinde tek ya da çok nöronları ev anten Sensilla, kimyasal uyaranlara yanıt büyük bir katkıda bulunmak kabul edilir. Şirketinden uyaranlara maruz kaldıktan sonra koku Sensillum eylem potansiyeli kaydedilmesiyle tek Sensillum kaydı (SSR) tekniği kimyasal uyaranlara böceklerin sinir yanıtları araştırmak için güçlü bir yaklaşım sağlamaktadır. Bir azılı insan parazit bed bug için, koku Sensillum birden fazla türde karakterize edilmiştir. Bu çalışmada, iki kimyasal uyaranlara ve SSR yöntemi kullanılarak bunlardan biri doza bağımlı yanıtlara bed bug koku Sensilla nöral yanıtları gösterdi. Bu yaklaşım, devel için değerli bilgiler sağlayacaktır bed bug koku Sensilla bireysel kimyasal uyaranlara, erken tarama yapmak için araştırmacılar sağlarYeni yatak hata cezbedicilerde veya kovucular ve faydaları yatak böcek kontrolü çabalarının bir opment.

Tek Sensillum kayıt böcek kimyasal ekoloji ve nöral fizyoloji çalışmalarında kullanılan güçlü bir araştırma tekniğidir. Farklı uçucu bileşiklerin, düşünce özellikle böceklerin sinir tepkileri araştıran böceklerin hayatta kalma ve gelişme ekolojik ilgili olmak değil, sadece bize böcek koku alma sürecine çok değerli anlayışlar verir, ama aynı zamanda potansiyel olarak yol açabilecek umut verici yeni yollar açılıyor Haşere kontrolü için yeni ve faydalı reaktiflerin gelişimi. <p class="j...

Tahtakuruları, ortamdaki semiyokimyasalları tespit etmek için anten koku alma duyularında bulunan koku alma reseptörü nöronlarına güvenir. Tek sensillum kaydını kullanarak, tahtakurusunun semiokimyasallara tepkisini değerlendirmek ve ilgili kodlama sürecini keşfetmek için bir yöntem gösteriyoruz.

Semiokimyasallar için yatak hataların Koku Nöron Cevapları Algılama Tek Sensillum Kaydı Kullanma

The insect olfactory system plays an important role in detecting semiochemicals in the environment. In particular, the antennal sensilla which house ...

Tek sensillum kaydının genel amacı, anten olfactory sensillumunun çeşitli kokulu maddelere verdiği nöronal yanıtları araştırmaktır. Bu yöntem, böceğin çevresindeki kimyasal kokulu maddeleri tespit edip edemediği ve bu kimyasal kokulu maddeleri nasıl işlediği gibi kimyasal ekoloji alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, fonksiyonun tek nöron aktivitesinin yansıtılmasına olanak sağlamasıdır.Bu yöntem, nöronların kimyasal koku maddelerine olan duyarlılığının daha hassas bir şekilde ölçülmesini sağlar. Bu tekniğin uygulamaları, böcek kontrolünde çekicilerin veya kovucuların geliştirilmesine kadar uzanmaktadır. Çünkü bu teknik, böcekler için biyolojik olarak önemli olan çok sayıda kimyasal madde için kullanılabilir.Bu prosedüre, tahtakurularını iki ila üç dakika boyunca buz üzerinde anestezi ederek başlayın. Ardından, böceklerin antenlerini ve gövdelerini çift taraflı bantla bir mikroskop lam üzerine sabitleyin ve bacaklarını ince makasla kesin. Bant üzerindeki antenleri nazikçe ayarlamak için küçük bir iğne kullanın.Ardından, manipülasyonu kolaylaştırmak için lamelin altına küçük bir diş mumu topu yerleştirin ve kayıt elektrodunu yerleştirmek için lameli 90 derecelik bir açıya ayarlayın. Sabitledikten sonra, tahtakuruğunu bir stereo mikroskobun altına yerleştirin. Işık kaynağını açın ve antenler net bir şekilde görünene kadar aydınlatma şiddetini ayarlayın.Ardından mikroskobu, yüksek büyütme ile tahtakurusu antenlerinin ikinci kamçısına odaklayın. Bu adımda, ön yükselticiyi, sinyal kaydı ve görselleştirme için bilgisayara bağlı olan bir sinyal toplama kontrolörüne bağlayın. Son olarak, yazılımı açın ve menü çubuğundan kaydet seçeneğine tıklayın.Ardından, dalga sinyallerini kaydetmeye başlamak için wave seçeneğini seçin. Anten sensillumundan gelen nöronal yanıt tonlarını dinlemek için ön yükselticiye bağlı olan hoparlörü açın. Şimdi, referans elektrodu stabilize edilmiş yatak böceğinin abdomenine yerleştirin.Referans elektrot tahtakurudun abdomenine bağlandıktan sonra, kayıt elektrodunu tahtakurudun antenlerinin posterior ucuna doğru hareket ettirin. Kayıt elektrodu sağ antenin ucuyla temas ettiğinde, elektrodu düşük büyütmede konumlandırın. Ardından, hem elektrot hem de anten sensillumu aynı düzlemde olup mikroskop altında net bir şekilde görülene kadar büyütmeyi kademeli olarak artırarak kayıt elektrodunu ayarlayın.Ardından, mikro manipülatörü kullanarak kayıt elektrodunu sensillum şaftına yerleştirin. Arka plan gürültüsü çok yüksekse elektrodu daha derine indirin. Kaydedilen sensillumdan net aksiyon potansiyelleri gözlemlendiğinde, bir mikro pipeti botanik uyarıcı ile doldurun.Uyarıcıdan 10 µL'lik bir alikotu, cam pastier pipet içindeki bir filtre kağıdı şeridinin üzerine yerleştirmek için mikropipeti kullanın. Kayıt elektrotlarının sensilla üzerine doğru ve doğrudan yerleştirilmesi, deneyin başarısının anahtarıdır. Elektrotlar biraz daha derine yerleştirildikten sonra arka plan gürültüsü kısmen azaltılabilir.Ardından, doldurulmuş pipeti stimülasyon akış tüpünün çıkışına bağlayın ve pipet ucunu tüpteki antenlere doğru yönelmiş küçük deliğe yerleştirin. Tüm bağlantılar stabilize olduğunda, sürekli nemlendirilmiş hava akışına bir stimülasyon iletmek için stimülasyon kontrolcüsünün ayak anahtarına basın ve kayda başlayın. Kayıt işlemi, stimülasyondan bir saniye önce başlayarak 10 saniye sürecektir.Stimülasyondan önceki ve sonraki iki 500 milisaniyelik dönem için aksiyon potansiyellerini çevrimdışı olarak sayın. Başka bir stimulus uygulamak için, test edilecek 001%eucalyptol ile yeni bir pipeti etiketleyin. Üzerine küçük bir filtre kağıdı parçası yerleştirmeden önce 10 µL stimulus uygulayın.Ardından, uyaran cam pipet içinde tamamen buharlaşana kadar iki ila beş dakika bekleyin. Pipeti, uyaran akış tüpünün çıkışına takın. Sonrasında, pipet ucunu tüpteki antenlere yönelmiş olan küçük deliğe yerleştirin.Ayak pedalına basarak 10 saniyelik kaydı başlatın. Ardından pipeti ayırın ve %0,1 okaliptol içeren başka bir pipet hazırlayın. En bağımlı yanıtları gözlemlemek için okaliptolün geri kalan tüm dozlarını anten sensillaları üzerinde test edin.Bu şekilde, sinyal izi, tek sensillum kaydında kontrol olarak kullanılan çözücüye karşı bir olfaktör sensillumun tipik nöral yanıtını göstermektedir. Sinyal kaydı, 0,5 saniyelik puf uyarısından bir saniye önce başlamıştır. Sinyal, uyarım pufu başlatıldıktan sonra 10 saniye boyunca sürekli olarak kaydedilmiştir.Bu sinyal izi, bir koku sensillumunun %10 pozitif betapinen botanik uyarıcısına verdiği son derece güçlü nöral yanıtı göstermektedir. Uyarıcı püskürtme koku sensillumuna iletildikten sonra, bu sensillumun içindeki koku duyusal nöronları, uzun süreli bir zamansal dinamikle yüksek frekansta ateşleme yapar. Çünkü bu prosedürde, güçlü nöron yanıtlarına sahip belirli kimyasallara karşı böceklerin davranışsal yanıtlarının neler olduğu gibi ek soruları yanıtlamak amacıyla bir böceğin sergileyebileceği davranışlara dair mesajlar yer almaktadır.Bu videoyu izledikten sonra, kimyasal uyarana karşı böcek koku alma nöronu yanıtlarının nasıl kaydedileceği konusunda daha iyi bir anlayışa sahip olmanız gerekir.

using-single-sensillum-recording-to-detect-olfactory-neuron-responses

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Koku için koku alma duyu nöronlarının elektrofizyolojik yanıtlar tek sensillum kayıtları kullanarak böcekleri ölçülebilir. Bu video makalede, sirke sineği antenler tek sensillum kayıtları nasıl gerçekleştirileceği gösterecektir...

Böcekler Tek Sensillum Kayıtlar Drosophila melanogaster Ve Anofel gambiae</em

Böcek koku alma sistemleri electroantennograms (EAG) ve anteni bulunan tüm odorant reseptör nöronları (ORNs) ve bireysel ev sahipliği bu yanıtları toplanır tek sensillum kayıtları (SSR), formları kayıt odorant indüklenen yanıtları için eşsiz fırsatlar sunmaya sırasıyla sensilla.

Güve Koku Sistemi Elektrofizyolojik Ölçümler

Olfaktör reseptör nöronları (ORNs) bir reseptör içine ilk sırayla koku ampul içinde ikinci dereceden nöronlara iletilir aksiyon potansiyelleri tetikleyen güncel koku sinyalleri dönüştürmek. Burada aynı anda odorant bağlı reseptör fare ORNs mevcut ve aksiyon potansiyelleri kaydetmek için emme pipet tekniği tarif.

Emme Pipet Tekniği kullanılarak Olfaktör Reseptör Nöronlar Kaydedilmiş odorant bağlı Cevapları

Bu videoda, canlı bir Drosophila sineği elektrofizyolojik çalışmalar için bir tüpe monte edilmiştir. Elektrotlar, sineğin koku alma reseptör nöronları ile feromonlara spesifik nöronal tepkileri kaydetmek için sensillumun tabanına yerleştirilir.

Drosophila Sensilla'dan Uçucu Koku Maddelerine Yanıt Olarak Elektrofizyolojik Kayıtlar

Biz omurgasız koku yolunun ilk üç aşamada koku-uyarılmış yanıtlar karakterize etmek ekstraselüler çoklu ünite kayıt tekniği varyasyonları göstermektedir. Bu teknikler kolayca başka sinir sistemlerinin topluluk etkinliği incelemek için adapte edilebilir.

Locust Sinir Aktivitesi Karakterize Multi-ünite Kayıt Yöntemleri (<em&gt; Schistocerca Americana</em&gt;) Olfaktör Devreler

Otonom robotlarda elektroantennogramlar (EAG'ler) şeklinde böcek antenleri kullanmak için bir protokol açıklıyoruz. Deneysel tasarımımız, bir gün içinde sabit kayıtlara izin verir ve 10 Hz'e kadar bireysel koku yamalarını çözer. Koku aramaları için EAG sensörlerinin verimliliği, bir robotu bir koku kaynağına doğru sürerken gösterilmiştir.

Koku Aramalar için Otonom Robotlar Böcek elektroantenogram Sensörleri kullanarak

Koku alma duyusal nöronlarının fizyolojik özelliklerini analiz etmek hala teknik sınırlamalarla karşı karşıyadır. Burada, gen hedefli farelerde koku alma epitelinin sağlam bir preparasyonu içinde delikli yama klempi yoluyla kaydediyoruz. Bu teknik, membran özelliklerinin karakterizasyonuna ve tanımlanmış koku alma reseptörlerini eksprese eden nöronların spesifik ligandlarına verilen yanıtlara izin verir.

Bozulmamış neuroepithelium Fare Koku Duyu Nöronlar Delikli Patch-kelepçe Kayıt: Bir Belirlenen Odorant Reseptör ifade Nöronlar Fonksiyonel Analiz

C. elegans erkeklerin verimli kalsiyum görüntüleme için bir adapte "koku çip" kullanımı burada açıklanmıştır. Gliserol ve bir feromon erkek maruz çalışmaların da gösterilir.

Yanıt olarak erkek C. Elegans baş nöronlar Feromonlar nöronal aktivite görüntüleme için adapte mikrosıvısal koku kozu kullanımı

Bu protokolün genel amacı, uzun zincirli kütiküler feromonlara tepki gösteren Drosophila olfaktör reseptör nöronlarından tek duyarlılık kaydı için düşük uçuculukta odorantları nasıl göstereceğini göstermektir.

Elektrofizyolojik Kayıt<em&gt; Drosophila</em&gt; Düşük Volatilite Kokularına Karşı Trikoid Sensilla

Bu kağıt sensilla basiconica tek sensillum kayıtları için detaylı ve son derece etkili iletişim kuralı böcek ağız dokunacı üzerinde açıklar.

Tek Sensillum kayıtları Locust Palp Sensilla Basiconica için

Nadiren kullanılan bir elektrofizyolojik kayıt yöntemi olan temel kayıt, geleneksel kayıt yöntemleriyle incelenemeyen tat kodlama özelliklerinin analizine olanak tanır. Temel kayıt, geleneksel elektrofizyolojik yöntemler kullanılarak incelenemeyen hidrofobik uyaranlara verilen tat tepkilerinin analizine de izin verir.

Temel Kayıt: Drosophila'da Tat Nöronlarının Tepkilerini Analiz Etmek İçin Bir Teknik

Öğrenin tek sensillum kaydı yöntemiyle yatak böceklerinin semiokimyasallara karşı koku nöron cevaplarını nasıl algıladığını. Bu teknik, kimyasal ekoloji ve haşere kontrolü stratejileri geliştirmek için değerli bilgiler sunar.

Semiokimyasallar için yatak hataların Koku Nöron Cevapları Algılama Tek Sensillum Kaydı Kullanma

Daha fazla video keşfet