Bir Çok Kanallı Çift elektrik alan mikroakışkan Chip kullanarak Akciğer Kanseri Hücreleri Electrotaxis Çalışmaları

Bu mikroakışkan deneyin genel amacı, kinaz inhibitörlerinin doğrudan bir elektrik alanı altında tümör hücresi göçü üzerindeki etkilerini değerlendirmektir. Dolayısıyla bu yöntem, kanser hücrelerinin elektrik alan güdümlü göçünde belirleyici yolların neler olduğu gibi hücresel elektro Teksas çalışmalarındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Dolayısıyla bu tekniğin ana avantajı, kolayca uygulanabilen, yüksek oranda tekrarlanabilir ve zaman kazandıran bir elektro Texas çalışması olmasıdır.

Bu tekniğin anlamı, kanserin metastatik potansiyelinin teşhisine kadar uzanır. Manyetik kanser hücrelerinin hareketliliği bir elektro alan ile arttırılabilir. Dolayısıyla bu yöntem, tümör hücrelerinin içeriden üler, elektro testisini sağlayabilir.

Yara iyileşmesi gibi cilt yenilenme işlemlerine de uygulanabilir. Bireysel bir akrilik katman deseni çizmek için bir çizim ve tasarım programı kullanarak başlayın. Deseni kaydedin ve ardından lazer çiziciyi açın.

Yazıcıyı kontrol eden dizüstü bilgisayara bağlayın ve akrilik katman desenini açmak için tasarlanmış desen dosyasına tıklayın. Ardından, lazer çizicinin x, Y, Z aşamasına bir parça boş akrilik levha yerleştirin ve uygun karşılık gelen lazer çizici otomatik hizalama çubuğunu kullanın. Lazer ışınının odağını tabakanın yüzeyine ayarlamak için.

Akrilik levhanın doğrudan işlenmesi için tasarlanan deseni lazer çiziciye gönderin. Daha sonra koruyucu kağıdı akrilik levhalardan çıkarmak için forseps kullanın ve yüzeyleri nitrojen gazı ile üfleyerek temizleyin. Şimdi tabakaları istifleyin ve akış elektrik stimülasyon kanalı düzeneğini oluşturmak için 110 santigrat derecede 45 dakika boyunca bir termal bağlayıcıda santimetre kare başına iki kilogramlık bir basınç altında birbirine bağlayın.

Çift taraflı bandı aynı şekilde hazırladıktan sonra, temiz kapak camını akış elektrik stimülasyon kanalı tertibatına bantlayın. Ardından, MDF yonga tuz köprüsü ağını kurmak için çok kanallı çift elektrik alanı veya MDF yonga düzeneğinin birinci katmanındaki ayrı açıklıklara 13 parça akrilik adaptör yapıştırmak için süper yapıştırıcı kullanın. Zemin plastik borularını orta giriş ve çıkış adaptörleri aracılığıyla MDF yonga tertibatına bağlayarak başlayın.

Daha sonra, orta giriş ve çıkış plastik tüplerinin yem konikliğini üç yollu durdurma Cox'a bağlayın 2.5 mililitre karbondioksit dengelenmiş PBS içeren üç mililitrelik bir şırınga, giriş plastik tüpünün üç yollu durdurma musluğuna ve boş üç mililitrelik bir şırıngaya çıkış plastik tüpünün üç yollu durdurma musluğuna. Birinci katman akrilik levha üzerindeki mavi ve yeşil adaptörlerin açıklıklarını kapatmak için beyaz katı parmak sıkı somunlar kullanın. Daha sonra tuz köprüsü kanallarını ve kültür odalarını karbondioksit dengelenmiş PBS ile doldurun ve kabarcıkları önlemeye dikkat edin.

Çift taraflı banttaki çözünmüş havanın ertesi sabah odalar içinde kabarcıklar oluşturmasına izin vermek için çipi gece boyunca 37 santigrat derece %5 karbondioksit hücre kültürü inkübatörüne aktarın. Kabarcıkları temizlemek için hızlı bir PBS akışı oluşturmak için iki şırıngayı kullanın ve PBS'yi gerektiği gibi ileri geri pompalayın. Tüm kabarcıklar çıkarıldığında, PBS'yi kanallardan boşaltmak için orta çıkış borusuna bağlı üç vanayı kullanın.

Daha sonra girişe bağlı şırıngayı, eşit bir DM EM olan 2,5 mililitre karbondioksit içeren üç mililitrelik bir şırınga ile değiştirin ve hazneler dolduğunda hazneleri ortamla yeniden doldurun. Katı somunları yeşil adaptörlerden çıkarın ve en az 70 santigrat dereceye kadar ısıtılmış %3'lük aroları Tuz Köprüsü Kanalına enjekte edin. Adaptörlerdeki açıklıklar sayesinde, sıcak A, enjeksiyon için tuz köprüsü hazırlar ve kültür odaları arasındaki medyan sıranın tıkanmasını sağlar.

Bileşik, tuz köprüsü kanalının uzunluğunun dörtte üçünü doldurduğunda agros enjekte etmeyi bırakın ve gözenekleri katı somunlarla yeniden kapatın. Şimdi mavi adaptörlerdeki katı somunları yarı saydam boru şeklindeki parmak sıkı somunlarla değiştirin ve aros'u boru şeklindeki somunlara yükleyin. Daha sonra, aro katılaşmadan önce gümüş, gümüş klorür elektrotlarını boru şeklindeki somunlara gömün.

Bir elektro taktik deneyi kurmak için, çıkış borusundan MDF çipine 0.3 mililitre hücre enjekte edin ve çipi hücre kültürü inkübatörüne geri koyun. İki ila dört saat sonra, MDF mikroakışkan sistemini şeffaf bir indiyum kalay oksit cam ısıtıcıya kurun ve MDF çipi ile indiyum kalay oksit camı arasına K tipi bir termokupl takın. Çipin sıcaklığını ölçmek için, MDF mikroakışkan sistem inkübasyon sıcaklığını 37 santigrat dereceye ayarlamak için orantılı bir integral türev kontrolörü kullanın ve sıcaklık kontrollü MDF çip düzeneğini, ters çevrilmiş bir mikroskobun bilgisayar kontrollü XYZ motorlu aşamasına monte edin.

Daha sonra dört kanallı bir şırınga pompası kullanarak, saatte 20 mikrolitrelik bir akış hızında girişlerden kültür odalarına tam ortamı dağıtın. Kültür atıklarının çıkışlardan mikro merkezli füj tüplerinde toplanması. Hücreleri 37 santigrat derecede 16 ila 18 saat daha inkübe edin.

Ertesi gün, her odadaki ortamı, 60 dakikalık tedavi için uygun konsantrasyonda kinaz inhibitörü ile takviye edilmiş taze, orta ile değiştirin. Ardından, gümüş, gümüş klorür elektrotları aracılığıyla ve seri olarak MDF çipine bir DC güç kaynağı bağlayın. MDF çipindeki elektrik akımını izlemek için elektrik devresine bir ampermetre bağlayın.

Son olarak, güç kaynağını açın ve voltajı 15 ila 19 volt arasında ayarlayın. Ampermetre akımını 86.94 mikroampere ayarlamak için. Bu temsili MDF Mikroakışkan sistem deneyinde, çeşitli konsantrasyonlarda kinaz inhibitörü ile tedavi edilen akciğer kanseri hücreleri deneyin.

Y 2 7 6 3 2, elektriksel stimülasyon olsun ya da olmasın, hücre göç hızında herhangi bir değişiklik göstermedi. Bununla birlikte, Y 2 7 6 3 2 tedavisi altında bir elektrik alanı ilavesi ile kanser hücrelerinin göçü önemli ölçüde azalmıştır. Gerçekten de, 50 mikromolar konsantrasyonda, kaya inhibitörü, hücrelerin göç hızlarını etkilemeden nautik hareketini tamamen ortadan kaldırdı.

Ayrıca, uygulanan kimyasal konsantrasyonlar ile yönlendirilebilirlik indeksi arasında, axxis'i incelemek için bir yöntem olarak MDF mikroakışkan sisteminin güvenilirliğini ve verimliliğini doğrulayan doza bağlı bir korelasyon vardı. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik, geliştirildikten sonra düzgün bir şekilde gerçekleştirilirse yedi ila sekiz saat içinde tamamlanabilir. Bu teknik, elektro Teksas alanındaki araştırmacıların cilde isabet ederek patlamasını sağlıyor.

Lazer kazıyıcı ile çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve bu işlemi gerçekleştirirken her zaman önlem alınması gerektiğini unutmayın.