7 Mart 2016
Hem katılarda hem de sıvılarda redoksa duyarlı türlerin analizine izin vermek için anoksik koşullar altında tortu çekirdeklerinin kesitlendirilmesi ve gözenek sularının çıkarılması için bir protokol sunulmuştur.
Bu prosedürün genel amacı, orijinal oksidasyon durumunu korurken tortu çekirdeklerini bölümlere ayırmak ve bu tortu çekirdeklerinden gözenek sularını çıkarmaktır. Bu yöntem, jeokimyasal alanlardaki araştırmacıların, göller ve sulak alanlar gibi redoksa duyarlı alanlardan gelen gözenek sularındaki ve tortulardaki metal türleşmesini incelemelerine olanak tanıyabilir. Bu tekniğin temel avantajları, esnek ve uyarlanabilir olması, sahada taşınabilir olması, ucuz olması ve tortu katmanlarını bozmamasıdır.
Prosedürü göstermek, laboratuvarımdan bir lisans öğrencisi olan Rahul Sinha olacak. Torpido gözünü kurarak saha laboratuvarını hazırlamaya başlayın. İlk olarak, çekirdek kılavuz plakasını bir çalışma yüzeyine sıkıştırın.
Açık olduğundan emin olmak için tezgahın önüne uzanan çekirdek astar deliğini konumlandırın. Ardından, nitrojen tankını bir tezgah kelepçesi kullanarak sabitleyin. Ardından, eldiven torbasını plakanın üzerine yerleştirin ve torba ile gaz regülatörü arasına boru geçirin.
Torbaya yaklaşık sekiz inç boru uzatın. Şimdi, torbadaki boru bağlantısını elektrik bandı ile kapatın ve torbanın içine bir kelepçe kaydırın.amp tüpün üzerine, ancak cl'yi açık bırakın. Ardından, plakadaki deliğin üzerinden torbanın altına bir X işareti kesin ve ardından torbayı listelenen öğelerle yükleyin.
Listeleri iki kez kontrol edin, çünkü bir öğeyi unutmak çok sakıncalıdır. Bir sonraki görev, çekirdeği kurmaktır. İlk olarak, çalışma yüzeyinin altındaki zemine bir laboratuvar krikosu koyun.
Laboratuvar krikosunun üzerinde, çekirdeği stabilize etmek için ortasında bir delik bulunan bir kontrplak parçası bulunmalıdır. Ardından, çekirdek dik konumdayken, çekirdek kılavuz plakasından ve torpido gözündeki X'ten itin. Yaklaşık dört ila altı inç çekirdek plakanın üzerine uzanmalıdır.
Şimdi, bir kişi çekirdeği desteklerken, çekirdeği X'in etrafındaki torbaya elektrik bandı ile bantlayın. Ardından, çekirdek ekstrüderi kurun. Önce sapı altı inç uzunluğunda, iki inç çapında bir PVC ara parçaya, ardından üç inç uzunluğunda bir kavramaya ve ardından başka bir boşluk ve başka bir kavramaya yerleştirin ve tutamak tamamen kaplanana kadar bu şekilde devam edin.
Şimdi, çekirdek ekstrüderi çekirdeğin altına yerleştirin ve kriko ile destekleyin. Kriko mümkün olduğunca düşük kranklanmalıdır. Daha sonra, bir kutu kesici ile çekirdek kapağın altını dikkatlice kesin.
Çekirdek astarın etrafına bir çekirdek kapak halkası bırakın ve çekirdek malzemelere karşı dairesel bir kapak parçası bırakın. Şimdi, bir kişi çekirdeği sabitlemek için torpido gözüne uzanmalı, diğeri ise krikoyu kaldırmalıdır. Çekirdek ekstrüderi kademeli olarak çekirdek astarına hareket ettirin ve tortuyu yukarı doğru kaldırın.
Ekstrüderi biraz kıpırdatmak gerekebilir. Tortu ve üstteki su çekirdek astarın tepesine ulaşana kadar çekirdeği kaldırmaya devam edin. Son görev, çantayı mühürlemektir.
İlk olarak, her şeyin orada olduğunu iki kez kontrol edin. Ardından, torbada sıkışmış hava içeren tüm nesneleri açın. Şimdi, ideal olarak başka bir kişinin yardımıyla, eldiveni üç kez temizleyin.
İlk olarak, torba mümkün olduğunca sönmüşken, ana açıklığı birkaç bungee kordonu ile kapatın. Ardından, nitrojen akışını 50 psi'de düzenleyen bir asistanla, gazı torbanın etrafına, özellikle havanın sıkışabileceği yarıklara yönlendirin. Torba çok şişirildiğinde, gazı kapatmak için regülatörü kapatın veya kelepçeyi kapatın.
Ardından, ana açıklığı açın ve torbadan mümkün olduğunca fazla gazı dışarı itin. Torbayı tüm yarıklar dahil olmak üzere nitrojenle doldurma ve torbayı boşaltma işlemini iki kez daha tekrarlayın. Bu işlem tamamlandıktan sonra, eldiven çantası çok düşük seviyelerde oksijen içermelidir.
Torpido gözünde rahat bir miktarda gaz ile bitirin. Bu prosedür en iyi çiftler halinde çalışırken gerçekleştirilir. Bu prosedür için, çantadaki yerleşik eldivenlerin üzerine bir çift tek kullanımlık eldiven koyun.
Bu eldivenler kirlendiğinde veya yırtıldığında değiştirin. İlk olarak, bir şırınga kullanarak çekirdeğin üstündeki tüm durgun suyu çıkarın. Daha sonra bu suyu 0,45 mikronluk bir şırınga filtresinden süzün.
Ardından, çekirdek astarın üstüne bir çekirdek kesit halkası yerleştirin. Ardından, tortu halkanın üst kısmıyla buluşana kadar çekirdeği kaldırın. Torbanın içinde, çekirdek astarı sabitleyin, böylece çekirdek hareket ettiğinde astar hareket etmez.
Torpido gözü içinde çalışan operatörün, çekirdek malzeme halkanın üst kısmında olacak şekilde göbek astarını hafifçe aşağı doğru itmesi gerekebilir. Ardından, tortu bölümü dilimleyicinin üzerinde olacak şekilde astarın üst kısmı ile halka arasına bir çekirdek dilimleyici itin. Bu, çekirdeğin ilk bölümüdür.
Plastik kaşıklarla, bölümü 50 mililitrelik konik bir tüpe taşıyın ve sıkıca kapatın. Aletleri yıkayın ve tüm çekirdek bölümlere ayrılıp tüplere yerleştirilene kadar işlemi tekrarlayın. Çekirdek kesit alma işlemi sırasında laboratuvar jakı tamamen uzayabilir.
Böyle bir durumda, çekirdeği yerinde tutun, krikoyu indirin ve çekirdek ekstrüderi uzatmak için PVC parçalarını konumlandırın. Ardından jakı tekrar yerine sabitleyin. Bu işlem sırasında torba çok sönebilir veya şişebilir.
Nitrojen gazı vanasını kısaca açarak veya gazı boşaltmak için ana torba ağzını kısaca açarak ayarlamalar yapın. Çekirdek bölümlere ayrıldıktan ve tüm tortu santrifüj tüplerine girdikten sonra, bu tüpler torpido gözünden çıkarılabilir ve torpido gözü kapatılabilir. Ardından, toplanan tüpleri metin protokolünde açıklandığı gibi santrifüjleme için hazırlayın.
Ardından, 20 dakika boyunca 1.100 g veya daha hızlı bir şekilde döndürün. Santrifüjlemeden sonra, tüpleri oksijensiz ortama geri koyun ve numune toplama için bazı boş tüpler ekleyin. Torba daha sonra daha önce olduğu gibi iki ila üç kez tekrar boşaltılmalıdır.
Şimdi, santrifüjlenmiş bir tüp açın ve ucunda boru bulunan bir şırınga kullanarak gözenek suyunu çıkarın. Ardından, 0,45 mikronluk bir şırınga filtresi kullanarak suyu bir toplama tüpüne süzün. Metin protokolü, numunelerin nasıl daha fazla işleneceğini açıklar.
Açıklanan protokolü kullanarak, Deep Water Horizons Bill'den dokuz ay sonra New Orleans yakınlarındaki bir sulak alandan bir çekirdek alındı. Bu sulak alan yoğun bir şekilde yağlanmıştır. Hach DR 2700 taşınabilir spektrafotometre kullanıldığında, veriler son derece yüksek sülfür konsantrasyonları gösterdi.
Demir konsantrasyonları düşüktü ve üç artı oksidasyon durumunda demir tespit edilmedi. Bu nedenle, bu videoyu izledikten sonra, eldiven torbasındaki oksijeni nasıl temizleyeceğinizi, bölümlere ayırmaya izin vermek için eldiven torbasının içindeki çekirdeği nasıl ekstrüde edeceğinizi ve gözenek sularını tortulardan nasıl ayıracağınızı iyi anlamalısınız. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik, çekirdek uzunluğuna bağlı olarak çekirdek başına bir ila üç saat içinde yapılabilir.
Bu prosedürü denerken, eldiven çantasını iyice temizlemeyi ve göbek yüksekliğini yavaşça ayarlamayı unutmamak önemlidir. Bu prosedürü takiben, sistemin redoks durumu ile ilgili soruları yanıtlamak için ferrousing ile demir türleşmesi, voltametri veya kolon ayırma ile arsenik türleme ve mitilcıva ayırma gibi yöntemler gerçekleştirilebilir. Basınçlı gazlarla çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve bu prosedürü gerçekleştirirken tankın emniyete alınmasının çok önemli olduğunu unutmayın.
Bazı tortu örnekleri tehlikeli maddelerle kontamine olabilir ve uygun önlemler alınmalıdır.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, anoksik koşullar altında tortu çekirdeklerinin kesimi ve gözenekli suların ekstraksiyonu için bir protokol sunmaktadır. Yöntem, hem katılarda hem de sıvılarda, özellikle jeokimyasal araştırmalarda, redoks-duyarlı türlerin analizini sağlamaktadır.
This method supports biopharma R&D by enabling the preservation of redox-sensitive analytes in environmental matrices, which is critical for mechanistic de-risking in toxicology and safety pharmacology studies. By maintaining the original oxidation state during sample processing, the technique ensures data integrity for downstream biomarker validation and predictive modeling of compound behavior in complex biological systems. Its field portability and low cost facilitate early-stage hypothesis testing in disease-relevant systems, reducing uncertainty in lead identification and preclinical workflows.
The method integrates into the discovery continuum by enabling reliable sample preparation for redox biology assays, supporting hypothesis testing in early discovery and informing lead identification through mechanistically de-risked data.