Saldırganlık incelenmesi için Handling ortadan kaldırır Yeni Bir Yaklaşım ve "Loser" Etkisi içinde

Bu yöntemin genel amacı, davranışsal prosedürden sinek elleme işlemini çıkararak drosophila, melanin, gaster'da kaybeden ve kazanan etkilerinin oluşumunu sağlamaktır. Laboratuvar ortamında gerçekleştirilen hayvan davranış çalışmalarıyla ilgili çoğu çalışma, hayvanların elle tutulmasını içerir. Hayvanların ellenmesi ise genellikle hayvanlarda strese yol açar ve stres, gerçekleştirmeye çalıştığınız davranışsal çalışmaları etkileyebilir; bu nedenle hayvanların stresli elleme işlemini ortadan kaldırmaya çalışıyoruz.

Meyve sineklerinde gerçekleştirdiğimiz agresyon çalışmaları için, deneylerin öncesinde, sırasında veya sonrasında hayvanların elle müdahalesini tamamen ortadan kaldıran yeni bir hazne geliştirdik. Bu yeni hazneleri kullandığımızda, ölçtüğümüz tüm davranışsal parametrelerin daha iyi sonuçlar verdiği görülmüştür. Bu yöntemle, bireyler arasındaki davranışsal değişkenliği minimize ediyoruz.

Net bir baskınlık ilişkisi oluşturmak için gereken süreyi kısalttık ve güçlü kaybeden ile kazanan mentalitelerini tetikleyebildik. Bu odacıklar kullanımı kolaydır ve farklı meyve sineği davranışlarını incelemek için çok amaçlı olarak kullanılabilir. Deneye başlamak için, sinek stoklarını 25 °C sıcaklık ve %50 bağıl nemde, 12 saatlik ışık-karanlık döngüsüne sahip bir inkübatörde yetiştirin ve muhafaza edin.

Ardından, taze sinek yemini eriyene kadar ısıtarak izolasyon tüplerini hazırlayın. Bir pasti pipeti kullanarak, yaklaşık 1,5 mililitre erimiş sinek yemini tekli boş cam deney tüplerine aktarın ve yemin ince bir boya fırçası yardımıyla katılaşmasını sağlayın. Stok tüpünden geç evre bir erkek pupayı nazikçe çıkarın ve taze hazırlanmış yem içeren bir deney tüpünün kenarına yerleştirin.

İzolasyon tüplerini pamukla kapatın ve izolasyon tüplerini inkübatöre yerleştirin. İzolasyon sonrası sinekler boyanmaya hazırdır. Sineği karbondioksit ile anestezi edin, ardından ince bir kürdan kullanın.

Toraks üzerine küçük bir nokta akrilik boya sürün; baş, kanatlar, abdomen veya bacakları boyamaktan kaçının. Boyanın yaklaşık 10 saniye boyunca kurumasına izin verin ve sinekleri nazikçe orijinal izolasyon tüplerine geri aktarın. İzolasyon tüplerini inkübatöre geri yerleştirin.

Taze sinek yemini eriyene kadar ısıtarak aparat hazırlığına devam edin. 0,8 mililitre yemi vidalı kap şişesinin kapağına aktarmak için bir posterior pipet kullanın ve yemin soğumasını bekleyin. Yem soğuduğunda.

Taze maya macunundan küçük bir damla, besleme kabı yüzeyinin merkezine uygulayın. Her kullanımdan önce aparatı ve bireysel dövüş odalarını suyla yıkayın ve kağıt havluyla kurulayın. Ardından, besleme kabının üzerine bir damla macun sürün ve kabı her bir dövüş odasının merkezine yerleştirin.

Savaşma bölmelerini aparat kapağı ile kapatın. Kapalı aparatı bir ışık kaynağının altına yerleştirin ve yapının üzerine bir video kamera kurun. Her bir savaşma bölmesine plastik ayırıcılar yerleştirerek davranışsal deneylere başlayın.

İzolasyon tüpündeki pamuk tıkacı çıkarın ve tüpü cihazın yan tarafındaki açık bir deliğin altına yerleştirin. Sineğin negatif geo ekseni aracılığıyla dövüş odasına girmesini sağlayın. Ardından sürgülü duvarı kapatın. Sinek odaya girdikten sonra, aynı işlemi cihazın diğer tarafındaki ikinci sineği dövüş odasına yerleştirmek için tekrarlayın.

Ardından, düzeneği tekrar aydınlatılmış video kayıt konumuna yerleştirin. Video kaydını başlatın ve mağlubiyet etkisi deneyleri için sineklerin etkileşime girmesine izin vermek amacıyla plastik ayırıcıyı çıkarın. Güçlü baskınlık ilişkilerinin oluşmasını sağlamak için ilk dövüşleri 20 dakika boyunca kaydedin.

20 dakika sonra, sinekleri ayırmak için plastik bölmeyi dikkatlice dövüş odalarına geri yerleştirin ve video kaydını durdurun. Güçlü bir kaybeden psikolojisi oluşturmak için, sineklerin ilk dövüş sırasında bir baskınlık ilişkisi kurduğundan ve bunu sürdürdüğünden emin olun; ardından sinekleri ayırmak için bölmeleri yerleştirirken hayvanın rahatsız edilmesini minimuma indirin. 10 dakikalık bir dinlenme süresinin ardından, kayda başlayın ve plastik bölmeyi nazikçe çıkarın.

Sineklerin 20 dakika daha etkileşim kurmasına izin verin. Deneyi sonlandırmak için 20 dakika sonra kaydı durdurun. İlk dövüşleri gözlemlemek için yeni yöntem kullanılmadan önce açıklanan prosedürü tersine çevirerek, sinekleri negatif geo ekseni üzerinden davranış odalarından çıkarın.

Ortalama olarak, ilk karşılaşma iki dakika sonra gözlemlenir. İlk atılım dört dakika sonra gerçekleşir ve sinekler sekiz dakika sonra bir baskınlık ilişkisi kurarlar. Kalan 12 dakika boyunca, baskınlık ilişkisi pekiştirilir.

Kazananlar giderek daha fazla hamle yaparken, kaybedenler giderek daha fazla geri çekilir. Bu yeni yaklaşım, ikinci dövüşler sırasında kaybedenlerin ikinci dövüşleri de kaybetme yüzdesi olan kaybeden etkisini nicelendirmek için kullanılmıştır. Önceki kaybedenler, ikinci dövüşleri için tanıdık kazananlarla veya yabancı kazananlarla eşleştirildiğinde anlamlı bir etki gözlemlenmiştir.

Bu prosedürü uygularken, sosyal izolasyon altında büyütülmüş altı ila yedi günlük erkek sinekler kullanılarak agresyon analizi yapılması gerektiğini hatırlamak önemlidir. Bu düzeneklere hakim olunduğunda; sineklerin hiçbir şekilde elle temas edilmeden kolayca yerleştirilmesine, izlenmesine, etkileşim kurmasına ve ayrılmasına olanak tanır ve bu durum güçlü bir kaybeden etkisi oluşturur. İlk dövüşten sonra sinekleri ayırmak için bölmelerin kullanılması, deneysel protokolde varyasyonlara imkan sağlar.

Kazananları tutup, kazanan etkisini indüklemek için ikinci dövüşte onları farklı rakiplerle eşleştirebiliriz. Küçük düzenlemelerle, aynı odacıklar meyve sineğinin kur yapma, lokomosyon ve diğer sosyal davranışlarını incelemek için de kullanılabilir. Bu videoyu izledikten sonra, agresyon analizlerinin nasıl gerçekleştirileceği ve deneylerden önce veya deneyler sırasında sineklere herhangi bir müdahalede bulunmadan kaybeden etkisinin nasıl indükleneceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.