Name: Farelerde A Novel Mikrocerrahi Heterotopik Modeli, En Bloku Göğüs Duvarı, Thymus ve Kalp Nakli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-01-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 24 s
Description: Öğrenin, farelerde heterotopik göğüs duvarı, timus ve kalp nakli için yeni bir mikrocerrahi modeli. Bu yöntem, bağışıklık toleransı ve allogreft sağkalımı üzerine araştırmaları destekler.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Amerikan Plastik Cerrahlar Derneği 2014 Akademik Bilim İnsanı Ödülü tarafından finanse edilmiştir.

Tüm operatif prosedürler Johns Hopkins Üniversitesi&#39;nde ve ABD Tarım Bakanlığı ve Halk Sağlığı Servisi gereklerine uygun olarak tamamlanmıştır. Bu protokol Johns Hopkins Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi izler, kurumsal inceleme kurulu (protokol numarası M013M490) yönergeleri onayladı. Nihai sağkalım verileri aşağıda açıklanan cerrahi prosedürler için kaydedildi. Hem verici hem alıcı hayvanlar 0.1 mg buprenorfin kullanılarak rüçhan anestezisi / kg sc bir saat önce cerrahi ve alıcı hayvan buprenorfinin nakli sonrasında aynı dozda uygulanan yeniden ilk 48 saat içinde gerektiğinde yeniden dozlanır ameliyat sonrası. 1. Donör Allogreft Kurtarma Not: Alıcı anestezi süresini en aza indirmek için erken alıcı nakli daha nakli 40 dakika donör bölümünü başlayın ve eşzamanlı bitiş saati veya biraz kulak kolaylaştırmak içinAlıcı hazırlık karşı lier bitiş zamanı. <ol><li> Prosedür standart steril mikrocerrahi aletleri ve steril eldiven kullanın. Laboratuvarımız mikrocerrahi aletleri otoklav sterilizasyon kullanır. </li><li> % 4 izofluran indüksiyon buharlaştırıcı kullanılarak donör fare (erkek) anestezisi. Kullanımı atravmatik mekanik makası servikal, torasik saç ve karın bölgesini kaldırın. Yatar pozisyonda hayvan yerleştirin ve bir burun konisi ile% 1-2 üzerinde izofluran korumak. Periyodik ayak tutam çekilme refleksi değerlendirerek işlem boyunca yeterli anestezi sağlayın. </li><li> Cilt kesisi öncesinde, yaygın steril pamuklu çubuk kullanarak izopropil alkol ardından antiseptik povidon iyot uygulayarak operatif hazırlar. </li><li> Servikal ve karın derisi boyunca makas ile yüzeysel enine cilt kesisi ile başlayın. Bilateral orta aksiler çizgisinde her iki kesiler bağlayın. </li><li> Mikrocerrahi forseps kullanarak6-0 ipek sütür ve makasla eksternal juguler venler, tespit bağlanır ve bölmek için bilateral servikal bölgeyi incelemek. Sonra kullanarak elektrokoter bilateral internal juguler venler ve karotis arterler maruz sternokleidomastoid kasları bölün. Sol taraflı ve toplu bir şekilde karotis ve internal juguler venler sağ taraflı altında 6-0 ipek sütür geçirin. NOT: Bunlar bağladılar ve Adım 1.9 daha sonra bölünecektir. </li><li> Keskin, servikal bölgede kalan ekleri ücretsiz makas kullanarak, trakea anterior bulunan kayış kasları ve ilişkili gevşek areolar dokuyu, bölün. </li><li> Bipolar elektrokoter ve keskin diseksiyon kullanarak, subklavian damarları ve Arter (6-0 ipek dikiş) ortaya çıkarmak ve proksimale bölmek için pektoralis majör kas ve clavicles bölün. </li><li> Sonra, yavaşça, kavramak ve hayvanın penisi çekme. Penisin sırtında boyunca penisin dorsal ven görselleştirmek ve dezenfekteizopropil alkol ile bölge. 30 G iğne kullanarak, intravenöz dorsal ven yoluyla heparin 30.000 adet enjekte ve penis tekrar eski konumuna geri tepme için izin verir. Çevre dokuya heparin solüsyonu kısmi akabilir. </li><li> Karotis ve internal juguler ven etrafında önceden yerleştirilen dökme bağları kullanarak, bilateral, bağlanır ve yapıları bölün. </li><li> Sonraki kullanım makas enine intraabdominal kesi yapmak için. Infrahepatic inferior vena kava ortaya çıkarmak ve infrahepatic inferior vena kava içine soğuk Euro-Collins kardiyopleji solüsyonuna 2 ml enjekte etmek için bağırsakları eviscerate. Önce aşağıdaki adıma ilerleyen karaciğer renk değişikliği ve kalp atışı durması görselleştirerek uygun enjeksiyon sağlayın. NOT: Euro-Collins çözümü, laboratuvarımızda hazırlanan özel reaktifler ve araçların tabloya bakınız edilir. </li><li> Kullanımı makas ikili diaph üzerinden intratorasik boşluğu erişmekmaruz karından kesi ragmatic. Interkostal kaslar ve kaburga ile sefalad kesi uzatın. Aynı anda göğüs duvarı boyunca internal torasik damarların korunmasını sağlarken kalp, timus ve büyük damarları açığa göğüs duvarı düşünün. </li><li> Soğuk Euro-Collins kardiyopleji solüsyonuna 4 ml suprahepatik inferior vena kava enjekte edilir. </li><li> Aort kökü tespit ve inen aort distal iz. Keskin azalan aorta (maksimal uzunluğu koruyarak) kesti. </li><li> Pulmoner gövde belirlemek ve (maksimal uzunluğu koruyarak) şube noktasına sadece yakın bölün. Sonra soğuk Euro-Collins kardiyopleji solüsyonuna 2 ml kullanılarak, akciğer gövde lümenine bir yumuşak plastik uç kateter yerleştirerek pulmoner gövde ve kalp yıkayın. </li><li> 6-0 ipek sütür, ligate kullanarak ve pulmoner venlerin izdiham inferior vena kava bölmek ve bilateral superior vena kava aksesuar dalları. Sonra yükseltmesineve hava yolunu girmek için özenle ana kök bronşlarda ve trakea boyunca ekleri kalp sefalad teşrih. Keskin ve bipolar elektrokoter kullanılarak göğüs duvarı, timus ve kalp tamamen donör fare onu kurtarmanın incelemek. </li><li> Son olarak, sternum ve yanal costadan boyunca, makas kullanılarak, daha küçük boyuta allogreft göğüs duvarı ex vivo süs özenle internal torasik damarlar (Şekil 1A) bozmak için değil. Revaskülarizasyon aşağıdaki kanamayı en aza indirmek için, osteomusculocutaneous sternum sınırları boyunca bipolar elektrokoterizasyonunun kullanın. </li><li> Alıcı içerlek hazır değilse Euro-Collins solüsyonu soğuk (4 o Celcius) 10 ml allogreft yerleştirin. Alıcı içerlek için hazır olup olmadığını ancak, düz alıcı ameliyat alanına allogreft aktarın. </li></ol> 2. Alıcı Hazırlık Not: Alıcı anestezi süresini en aza indirmek için,Ayrı bir ameliyat istasyonunda önceki donör allogreft hasat tamamlanması yaklaşık 40 dakika alıcı hazırlık başlar. <ol><li> Standart steril mikrocerrahi aletleri ve prosedür için steril eldiven ayrı bir kümesi kullanın. </li><li> % 4 izofluran indüksiyon buharlaştırıcı kullanılarak (erkek veya kadın) alıcı fare anestezisi. Atravmatik mekanik makası kullanarak doğru servikal ve torasik bölgeden saç kaldırmak. </li><li> Yatar pozisyona ve açı sağ üst ekstremite hafifçe inferiora baş ve sağ üst ekstremite arasındaki 110 derecelik açı oluşturarak fare yerleştirin. Bir burun konisi ile% 1-2 izofluran üzerinde anestezi koruyun. </li><li> Bir pamuk uçlu aplikatör kullanarak fare gözleri petrol oftalmik merhem yerleştirin. Cilt kesisi öncesinde yaygın izopropil alkol ardından antiseptik povidon iyot kullanarak ameliyat sitesi hazırlamak. </li><li> Makas kullanarak, sağ alt bor boyunca orta hattan bir cilt kesi yapmakMandibula der ve sağ göğüs bölgesine infero-lateral kesi uzatmak. Mikrovasküler forseps ile künt diseksiyon kullanarak, yumuşak doku ve adventisyanın gelen çevresel serbest geminin dış juguler ven seferber. Elektrokoter kullanarak tüm şubeleri bölün ve allogreft için boş alan keskin diseksiyon ve elektrokoter kullanılarak submandibular bezin sağ lobunu çıkarın. </li><li> Bir manşet üzerine tersine çevrilmesi için eksternal juguler venin yeterli uzunluğa sahip ve 6-0 ipek sütür kullanılarak damar dış şahdamarını Arter. Bir hazır kesilmiş polimid manşet lümen yoluyla damarını yerleştirin ve yerine gemi-kaf kompleksi düzeltmek için bir buldog mikrovasküler kelepçe kullanın. Sonra proksimale evert manşet üzerine, eksternal juguler ven bölmek ve 10-0 naylon sütür ile yerde düzeltmek, makas kullanılarak. (Şekil 1B) </li><li> Karotis arter ortaya çıkarmak için bipolar elektrokoter ile sağ sternokleidomastoid kas bölün. Çevresel mafyaServikal bölgedeki uzak noktaya en sefalad arter ilize. Bu yumuşak doku ve çevresindeki adventisya kaldırmak için forseps ile kabın künt diseksiyon kullanılarak gerçekleştirilir. </li><li> 6-0 ipek sütür, ligate kullanarak ve karotis arter bölün. Bir hazır kesilmiş polimid manşet lümen yoluyla arter geçirin ve mümkün olduğunca göğüs girişine yakın bir bulldog mikrovasküler kelepçe ile yerine sabitleyin. Hafifçe evert manşet üzerine, bir mikrocerrahi dilatörü kullanarak gemiyi dilate, distale gemi bölün ve 10-0 naylon sütür ile yerde sabitleyin. (Şekil 1B) NOT: Belirli bir mikrocerrahi dilatör özel reaktifler ve araçların tabloda açıklanmaktadır. </li></ol> 3. Allogreft Ankastre <ol><li> Bir baş aşağı ve eğik pozisyonda alıcı servikal bölgede allogreft yerleştirmek için standart steril enstrümantasyon ve steril eldiven koruyun. </li><li> Daha sonra, verici inen AOR yerAlıcının arteriyel manşet yapısının üzerinde tik lümen ve 10-0 naylon sütür (Şekil 1C ve 1D) ile yerine onu bunu düzeltin. </li><li> Donör pulmoner arter ve alıcı fare (Şekil 1C ve 1D) everte eksternal juguler ven-kaf yapı arasındaki adım 3.2 ile aynı anastomoz moda. </li><li> İlk venöz mikrovasküler kelepçesini (eksternal juguler ven kelepçe) kaldırmak ve daha sonra arteriyel kelepçesini (karotis arter kelepçesi) bırakın. Arteriyel reperfüzyon sırasında, herhangi bir kanama ele allogreftin bütününü kontrol edin. Kanama görüntülenmiştir ise, kan kaybını en aza indirmek ve bipolar elektrokoter kullanılarak kanama kaynağını azaltmak için arteriyel kelepçesini yeniden uygulayın. </li><li> Greft kontrol edin ve hemostaz sağlamak. Bırakın ve tamamen arter mikrovasküler kelepçesini çıkarın. Kalp boşluklarının hızlı hacim genişlemesi ile anında görülecektir reperfüzyon belirtileri göstermeye kalbi gözlemleyin, ve b bekleyin0.5-1 dakika içinde başlayacak yeme. Kalbi nemlendirmek için ılık tuzlu su (35 ° C) kullanın. </li><li> Anastomozlar üzerinde herhangi bir dolaşması ya da tansiyonu teşvik etmeyecek şekilde anatomik pozisyona göğüs duvarı örtün. 6-0, sürekli naylon dikiş (Şekil 1E) kullanılarak cerrahi yaranın cilt kapatın. </li></ol> 4. Ameliyat Sonrası Bakım <ol><li> Sıvı replasmanı için hemen ameliyat sonrası bir 0.3 ml normal tuzlu su intraperitoneal sıvı bolus yönetin. </li><li> Daha sonra deri altından, sırasıyla, ağrı ve enfeksiyon profilaksisi için buprenorfin (0.1 mg / kg) ve enrofloksasin (5 mg / kg) enjekte edilir. </li><li> Anestezi uyanan kadar bir ısı lambası altında hayvan yerleştirin ve sternum yatma dönün. Kurtarma sırasında, yeterli allogreft perfüzyon sağlanması allogreftin fibrilasyon kalp görselleştirmek için boyun inceleyin. </li><li> Bir kez uyanık ve yatar pozisyonda, diğer farelerin şirket olmadan ayrı bir kafes (fare iade) O yiyecek ve su ad libitum alabilirsiniz nerede. Sağ üst ekstremite geçici minör kısıtlayıcı harekete, kafesin katta bir jelatin gıda kaynağı bırakın. </li><li> Ameliyat sonrası 1 saat alıcı fare gözlemleyin ve daha sonra gıda ve su ad libitum alabilir ve aktivite ve beslenme alımı için ilk 24 saat günde üç kez denetlenir kafes tesisine iade edin. İlk 72 saat için gereken günde iki defa deri altından ağrı ve sıkıntı ve buprenorfin (0.1 mg / kg) ile yeniden dozunun belirtileri için fareler izleyin. Daha sonra günlük hayvanları inceler ve her hafta onları tartın. </li><li> Herhangi fareler ağrı, sıkıntı belirtileri gösterir, ve yem tüketiminde azalma ise bir veteriner personel ile danışın. Erken ötenazi düşünün (protokolde ötanazi tekniği sonra servikal dislokasyon yapılmıştır, 7 dakika boyunca CO2 aşırı doz kullanmaktadır). </li><li> Allogreft kalp atışının durması s olmak için fareyi isteyen belirli bir son nokta olarak tanımlanıracrificed. </li></ol>

<ol><li>Santiago, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+sternum+transplant+in+rats%3A+A+new+model+of+a+vascularized+bone+marrow+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Heterotopic sternum transplant in rats: A new model of a vascularized bone marrow transplantation.</a> Microsurgery. 19 (7), 330-334 (1999).</li>
<li>Bozkurt, M., Klimczak, A., Nasir, S., Zor, F., Krokowicz, L., Siemionow, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Composite+osseomusculocutaneous+sternum%2C+ribs%2C+thymus%2C+pectoralis+muscles%2C+and+skin+allotransplantation+model+of+bone+marrow+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Composite osseomusculocutaneous sternum, ribs, thymus, pectoralis muscles, and skin allotransplantation model of bone marrow transplantation.</a> Microsurgery. (1), 43-50 (2013).</li>
<li>Klimczak, A., Agaoglu, G., Carnevale, K. A., Siemionow, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+bilateral+vascularized+femoral+bone+marrow+transplantation+for+chimerism+induction+across+the+major+histocompatibility+%28MHC%29+barrier%3A+part+II%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">Applications of bilateral vascularized femoral bone marrow transplantation for chimerism induction across the major histocompatibility (MHC) barrier: part II.</a> Ann Plast Surg. 57 (4), 422-430 (2006).</li>
<li>Agaoglu, G., Carnevale, K. A., Zins, J. E., Siemionow, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+vascularized+femoral+bone+transplant%3A+a+new+model+of+vascularized+bone+marrow+transplantation+in+rats%2C+part+I%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">Bilateral vascularized femoral bone transplant: a new model of vascularized bone marrow transplantation in rats, part I.</a> Ann Plast Surg. 56 (6), 658-664 (2006).</li>
<li>Agaolgu, G., Unal, S., Siemionow, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+the+vascularized+bone+allograft+into+the+inguinal+region%5BTitle%5D)+AND+%22Plas+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Transplantation of the vascularized bone allograft into the inguinal region.</a> Plas Reconstr Surg. 115 (6), 1794-1795 (2005).</li>
<li>Ozer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+tolerance+to+hind+limb+allografts+in+rats+receiving+cyclosporine+A+and+antilymphocyte+serum%3A+effect+of+duration+of+the+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Induction of tolerance to hind limb allografts in rats receiving cyclosporine A and antilymphocyte serum: effect of duration of the treatment.</a> Transplantation. 75 (1), 31-36 (2003).</li>
<li>Mundinger, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tunneled+superficial+inferior+epigastric+artery+%28SIEA%29+myocutaneous%2Fvascularized+femur+chimeric+flaps%3A+a+model+to+study+the+role+of+vascularized+bone+marrow+in+composite+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Tunneled superficial inferior epigastric artery (SIEA) myocutaneous/vascularized femur chimeric flaps: a model to study the role of vascularized bone marrow in composite allografts.</a> Microsurgery. 32 (2), 128-135 (2012).</li>
<li>Barth, R. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+bone+marrow-based+immunosuppression+inhibits+rejection+of+vascularized+composite+allografts+in+nonhuman+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Vascularized bone marrow-based immunosuppression inhibits rejection of vascularized composite allografts in nonhuman primates.</a> Am. J. Transplant. 11 (7), 1407-1416 (2011).</li>
<li>Siemionow, M., Izycki, D., Ozer, K., Ozmen, S., Klimczak, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+thymus+in+operational+tolerance+induction+in+limb+allograft+transplant+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Role of thymus in operational tolerance induction in limb allograft transplant model.</a> Transplantation. 81 (11), 1568-1576 (2006).</li>
<li>Nobori, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thymic+rejuvenation+and+the+induction+of+tolerance+by+adult+thymic+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Thymic rejuvenation and the induction of tolerance by adult thymic grafts.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 103 (50), 19081-19086 (2006).</li>
<li>Menard, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Composite+%E2%80%98thymoheart%E2%80%99+transplantation+improves+cardiac+allograft+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Composite ‘thymoheart’ transplantation improves cardiac allograft survival.</a> Am J Transplant. 4 (1), 79-86 (2004).</li>
<li>Hunt, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taking+heart--cardiac+transplantation+past%2C+present%2C+and+future%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Taking heart--cardiac transplantation past, present, and future.</a> N Engl J Med. 355 (3), 231-235 (2006).</li>
<li>Shah, A. B., Patel, J. K., Rafiei, M., Morrissey, R. P., Kittleson, M. M., Kobashigawa, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+mean+first-year+heart+rate+on+outcomes+after+heart+transplantation%3A+does+it+make+a+difference%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transplant%22%5BJournal%5D)">The impact of mean first-year heart rate on outcomes after heart transplantation: does it make a difference?</a> Clin Transplant. 27 (5), 659-665 (2013).</li>
<li>Kaczmarek, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tacrolimus+with+mycophenolate+mofetil+or+sirolimus+compared+with+calcineurin+inhibitor-free+immunosuppression+%28sirolimus%2Fmycophenolate+mofetil%29+after+heart+transplantation%3A+5-year+results%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Tacrolimus with mycophenolate mofetil or sirolimus compared with calcineurin inhibitor-free immunosuppression (sirolimus/mycophenolate mofetil) after heart transplantation: 5-year results.</a> J Heart Lung Transplant. 32 (3), 277-284 (2013).</li>
<li>Mastrobuoni, S., Dell'Aquila, A. M., Azcarate, P. M., Rabago, G., Herreros, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+%28%3E20+years%29+following+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Long-term survival (>20 years) following heart transplantation.</a> J Cardiovasc Surg. 53 (5), 677-684 (2012).</li>
<li>Hamour, I. M., Khaghani, A., Kanagala, P. K., Mitchell, A. G., Banner, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+outcome+of+heart+transplantation%3A+a+10-year+single+centre+perspective+and+review%5BTitle%5D)+AND+%22QJM%22%5BJournal%5D)">Current outcome of heart transplantation: a 10-year single centre perspective and review.</a> QJM. 104 (4), 335-343 (2011).</li>
<li>Schultz, B. D., Mohan, R., Dorafshar, A. H., Gottlieb, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chest+Wall%2C+Thymus+and+Heart+Vascularized+Composite+Allograft+Proof+of+Concept+Cadaveric+Model+for+Heart+Transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">Chest Wall, Thymus and Heart Vascularized Composite Allograft Proof of Concept Cadaveric Model for Heart Transplantation.</a> Ann Plast Surg. 73 (1), 102-104 (2014).</li>
<li>Sosin, M., Torregrossa, G., Gerosa, G., Tuffaha, S. H., Dorafshar, A. H. Pushing the Boundary of Solid Organ and Vascularized Composite Allotransplantation: A Clinical Chest Wall, Thymus, and Heart Transplant Simulation. American Society of Reconstructive Microsurgery Annual Meeting. 2015 Jan 26, Paradise Island, Bahamas, , (2015).</li>
<li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+Cervical+Heart+Transplantation+Model+Using+a+Modified+Cuff+Technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique.</a> J Vis Exp. (92), e50753(2014).</li>
<li>Huang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+model+of+cervical+heterotopic+cardiac+transplantation+for+chronic+rejection+research%5BTitle%5D)+AND+%22Zhongguo+Xiu+Fu+Chong+Jian+Wai+Ke+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">A modified model of cervical heterotopic cardiac transplantation for chronic rejection research.</a> Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 22 (12), 1508-1510 (2008).</li>
<li>Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+vascularized+murine+cardiac+transplantation+to+study+graft+arteriopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy.</a> Nat Protoc. 2 (3), 471-480 (2007).</li>
<li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+transplantation+in+congenic+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Heart transplantation in congenic strains of mice.</a> Transplant Proc. 5 (1), 733-735 (1973).</li>
<li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primarily+vascularized+allografts+of+hearts+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22The+role+of+H-2D%2C+H-2K%2C+and+non-H-2+antigens+in+rejection.+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Primarily vascularized allografts of hearts in mice.</a> The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection. Transplantation. 16 (4), 343-350 (1973).</li>
<li>Niimi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+technique+for+heterotopic+cardiac+transplantation+in+mice%3A+experience+of+3%2C000+operations+by+one+surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: experience of 3,000 operations by one surgeon.</a> J Heart Lung Transplant. 20 (10), 1123-1128 (2001).</li>
<li>Plenter, R. J., Zamora, M. R., Grazia, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Four+decades+of+vascularized+heterotopic+cardiac+transplantation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invest+Surg%22%5BJournal%5D)">Four decades of vascularized heterotopic cardiac transplantation in the mouse.</a> J Invest Surg. 26 (4), 223-228 (2013).</li>
<li>Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+mouse+cervical+heart+transplantation+using+a+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique.</a> Transplantation. 51 (4), 896-898 (1991).</li>
<li>Tomita, Y., Zhang, Q. W., Yoshikawa, M., Uchida, T., Nomoto, K., Yasui, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heterotopic+cervical+heart+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice.</a> Transplantation. 64 (11), 1598-1601 (1997).</li>
<li>Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+basic+and+translational+research+in+reconstructive+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Birth+Defects+Res+C+Embryo+Today%22%5BJournal%5D)">Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation.</a> Birth Defects Res C Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).</li>
<li>Quaini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chimerism+of+the+transplanted+heart%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Chimerism of the transplanted heart.</a> N Engl J Med. 346 (1), 5-15 (2002).</li>
<li>Laflamme, M. A., Myerson, D., Saffitz, J. E., Murry, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+cardiomyocyte+repopulation+by+extracardiac+progenitors+in+transplanted+human+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Evidence for cardiomyocyte repopulation by extracardiac progenitors in transplanted human hearts.</a> Circ Res. 90 (6), 634-640 (2002).</li>
<li>Leventhal, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chimerism+and+tolerance+without%2C+GVHD+or+engraftment+syndrome+in%2C+HLA-mismatched+combined+kidney+and+hematopoietic+stem+cell+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Chimerism and tolerance without, GVHD or engraftment syndrome in, HLA-mismatched combined kidney and hematopoietic stem cell transplantation.</a> Sci Transl Med. 4 (124), 124-128 (2012).</li>
<li>Talmor, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+marrow-derived+chimerism+in+non-irradiated%2C+cyclosporin-treated+rats+receiving+microvascularized+limb+transplants%3A+evidence+for+donor-derived+dendritic+cells+in+recipient+lymphoid+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">Bone marrow-derived chimerism in non-irradiated, cyclosporin-treated rats receiving microvascularized limb transplants: evidence for donor-derived dendritic cells in recipient lymphoid tissues.</a> Immunology. 86 (3), 448-455 (1995).</li>
<li>Arslan, E., Klimczak, A., Siemionow, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chimerism+induction+in+vascularized+bone+marrow+transplants+augmented+with+bone+marrow+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Chimerism induction in vascularized bone marrow transplants augmented with bone marrow cells.</a> Microsurgery. 27 (3), 190-199 (2007).</li>
<li>Page, E. K., Dar, W. A., Knechtle, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tolerogenic+therapies+in+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Tolerogenic therapies in transplantation.</a> Front Immunol. 3, 198(2012).</li>
<li>Lukomska, B., Durlick, M., Cybulska, E., Olszewski, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+analysis+of+immunological+reconstitution+induced+by+vascularized+bone+marrow+versus+bone+marrow+cell+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Int%22%5BJournal%5D)">Comparative analysis of immunological reconstitution induced by vascularized bone marrow versus bone marrow cell transplantation.</a> Transpl Int. 9, Suppl 1. S492-S496 (1996).</li>
<li>Brandacher, G., Lee, W. P., Schneeberger, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimizing+immunosuppression+in+hand+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Minimizing immunosuppression in hand transplantation.</a> Expert Rev Clin Immunol. 8 (7), 673-683 (2012).</li>
<li>Lin, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neck+as+a+preferred+recipient+site+for+vascularized+composite+allotransplantation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">The neck as a preferred recipient site for vascularized composite allotransplantation in the mouse.</a> Plast Reconstr Surg. 133 (2), 133e(2014).</li>
<li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemiface+allotransplantation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Hemiface allotransplantation in the mouse.</a> Plast Reconstr Surg. 129 (4), 867-870 (2012).</li>
<li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+hind+limb+transplantation%3A+a+new+composite+tissue+allotransplantation+model+using+nonsuture+supermicrosurgery%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Mouse hind limb transplantation: a new composite tissue allotransplantation model using nonsuture supermicrosurgery.</a> Transplantation. 90 (12), 1374-1380 (2010).</li>
<li>Sucher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+hind-limb+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Orthotopic hind-limb transplantation in rats.</a> J Vis Exp. (41), e2022(2010).</li>
<li>Maglione, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+technique+for+heterotopic+vascularized+pancreas+transplantation+in+mice+to+assess+ischemia+reperfusion+injury+and+graft+pancreatitis%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis.</a> Surgery. 141 (5), 682-689 (2007).</li>
<li>Zou, Y., Brandacher, G., Margreiter, R., Steurer, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cervical+heterotopic+arterialized+liver+transplantation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Cervical heterotopic arterialized liver transplantation in the mouse.</a> J Surg Res. 93 (1), 97-100 (2000).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28 (1), 47-50 (1979).</li>
<li>Zimmermann, F. A., Butcher, G. W., Davies, H. S., Brons, G., Kamada, N., Türel, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat+and+some+studies+of+the+immunologic+responses+to+fully+allogeneic+liver+grafts.+Transplant%5BTitle%5D)+AND+%22Proc%22%5BJournal%5D)">Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts. Transplant.</a> Proc. 11 (1), 571-577 (1979).</li>
</ol>

Yazarların beyan edecekleri herhangi bir çıkar çatışması veya finansal açıklamaları yoktur.

Dahil allotransplantasyon, immunolojik soruşturma içine faktör ama akut ve kronik rejeksiyon, doğrudan ve dolaylı antijen sunumu, alıcı duyarlılık ya da karışık kimerizmin indüksiyon mekanizmaları bunlarla sınırlı değildir fenomen çok sayıda bulunmaktadır. 19 hayvan modelleri haline gelmiştir transplant immünolojinin çalışma için altın standardı ve fare modelleri halk nedeniyle düşük bağıl veterinerlik ve konut taleplerini azalma maliyet transjenik ve gen knockout farelerde mevcudiyeti, ticari olarak temin ed...

Kardiyak transplantasyon, son dönem kalp yetmezliği için tercih edilen tedavidir. Hem teknik gelişmeler hem de farmakolojik yenilikler, alanı %90'ın üzerinde erken greft kabul oranlarına itmiştir. 12,13 Buna rağmen, 5 yıllık greft sağkalımının %60-80'i durma noktasındadır ve transplant vaskülopatisi ile karakterize kronik rejeksiyon kaçınılmaz olmaya devam etmektedir. 14-16 Ayrıca, hastalar sırasıyla göğüs duvarı deformiteleri ve tıbbi sekeller ve toksisiteler ile ilişkili olan çok sayıda cerrahi işleme ve ömür boyu immünosupresyona tabi tutulur. Allogreft sağkalımını uzatmak, immünosupresif gereksinimleri en aza indirmek ve anatomik deformiteler için rekonstrüktif seçenekler sunmak için yenilikçi yaklaşımlara olan ihtiyaç acildir.
Vaskülarize kompozit allotransplantasyon, kalp nakli sonuçlarını hem immünolojik açıdan hem de rekonstrüktif açıdan iyileştirmek için benzersiz bir strateji sunar. 17 Vaskülarize kompozit allogreftler, immünosupresyona neden olma ve karışık kimerizmi indükleme ve sürdürme konusunda olumlu bir yetenek gösteren, donör kaynaklı hematopoietik kök hücrelerin doğal bir kaynağına sahip olmaları bakımından da benzersizdir. 1-8 Ek olarak, timusun birlikte transplantasyonunun hem katı organ transplantasyonlarının hem de vaskülarize kompozit allogreftlerin sağkalımını uzattığı gösterilmiştir. 2,9-11 Bu stratejilerin kalp nakli ile birleştirilmesi, kalp naklinin karşı karşıya olduğu yukarıda belirtilen zorluklara yeni bir çözüm sunmaktadır. 18
Murin modelleri, antikorların mevcudiyeti ve iyi tanımlanmış akraba içi ve nakavt suşları nedeniyle mekanik in vivo araştırma için mükemmel platformlar olarak hizmet eder. 19-21 Farelerde kalp nakli yaygın olarak heterotopik intraabdominal mikrocerrahi sütür nakli modeli22-25 kullanılarak çalışılsa da, heterotopik, servikal, dikişsiz manşet tekniği modelinin son derece tekrarlanabilir, güvenilir olduğu ve daha az tromboz oranı taşıdığı gösterilmiştir. 19,26,27 Bu çalışmanın amacı, farelerde heterotopik en blok osteomiyokutanöz göğüs duvarı, timus ve kalp nakli tekniği geliştirmek ve servikal dikişsiz manşet tekniği kullanılarak kombine solid organ ve vaskülarize kompozit allotransplantasyonun immünolojik mekanizmalarını incelemektir. Bu küme allogreft, donör inen aortun anastomozu yoluyla sağ ana karotid artere ve donör pulmoner arterin sağ eksternal juguler ven'e perfüze edilmesidir. İç torasik damarların ve ilişkili timus dallarının korunması, göğüs duvarının (sternum, kaburgalar, kaslar ve deri) ve timusun perfüze edilmesi için çok önemlidir.

<table><tbody><tr><td>Euro-Collins Çözümü</td><td></td><td></td><td>: Çözelti ticari olarak satın alınmaz, laboratuvarda hazırlanır. 500 ml'lik bir çözelti yapmak için, aşağıda listelenen malzemeyi 330 ml'lik çift damıtılmış suya ekleyin. İyice karıştırın ve ardından 170 ml çift damıtılmış suyun geri kalanını 500 ml'lik son hacme kadar çözeltiye doldurun. İçindekiler: 1.02 g KH2PO 4, 3.66 g K 2 HPO 4 , 0.56 g KCl, 0.42 g NaHCO3 ve 17.52 g glikoz.</td></tr><tr><td>Sütür</td><td>Ethilon</td><td>MWI 72667</td><td>6-0 Ethilon

https://www.mwivet.com (MWI - Veteriner Malzemeleri)</td></tr><tr><td>Poliimid Manşet Damar (21G)</td><td>Vention Medical</td><td>141-0043</td><td></td></tr> <tr><td>http://www.ventionmedical.com/products-and-services/polyimide-tubing/ Poliimid Manşet Arter (24G)</td><td>Vention Medical</td><td>141-0027</td><td>http://www.ventionmedical.com/products-and-services/polyimide-tubing/</td></tr> <tr><td>Yumuşak plastik uçlu kateter</td><td>Terumo</td><td>SR*OX2419CA</td><td>24G x 3/4 "&nbsp;</td></tr><tr><td>Mikrocerrahi dilatör</td><td>S & T</td><td>D-5a.1</td><td>Dilatörü, 11 cm, FH, 0,1 mm AT10d</td></tr></tbody></table>

farelerde a novel mikrocerrahi heterotopik modeli, en bloku göğüs duvarı, thymus ve kalp nakli

A Novel Microsurgical Model for Heterotopic, En Bloc Chest Wall, Thymus, and Heart Transplantation in Mice

Allogreft sağkalımını uzatmak ve uzun süreli idame immünosupresyon ihtiyacını en aza indirmek için organ transplantasyonunda yeni stratejilerin araştırılması sürdürülmelidir. Vaskülarize kemik iliği transplantasyonu ve timusun birlikte transplantasyonu bu konuda çeşitli hayvan modellerinde umut vaat etmektedir. 1-11 Vaskülarize kemik iliği nakli, korunmuş donör mikro çevresi içinde donör kemik iliği hücrelerinin kesintisiz transferine izin verir ve timus dokusunun vaskülarize kemik iliği nakli ile dahil edilmesinin, sonuçta immün regülasyonun indüksiyonunda destekleyici bir rol oynayan T hücresi kimerizmini arttırdığı gösterilmiştir. Solid organ ve vaskülarize kompozit allotransplantasyonun kombinasyonu, bu stratejileri yeni bir nakil modeli şeklinde benzersiz bir şekilde birleştirebilir. Murin modelleri, akut ve kronik reddetme, kimerizm ve tolerans indüksiyonu mekanizmalarını keşfetmek için mükemmel bir paradigma görevi görür, böylece daha büyük hayvan modelleri ve gelecekteki klinik uygulamalar için üstün allogreft sağkalım stratejilerini yaymak için temel sağlar. Bu çalışmada, farelerde servikal dikişsiz manşet tekniği kullanılarak yeni bir heterotopik en blok göğüs duvarı, timus ve kalp nakli modeli geliştirildi. Sinjeneik ve allojenik nakil ortamlarındaki deneyim, gelecekteki daha geniş immünolojik araştırmalar için bir eğitim makalesi ve video eki aracılığıyla tanımlanmıştır.

Singenik C57BL / 6 nakli uzun süreli yaşam elde etti. Allogreft (Şekil 1) tasarım bir hayvan hayatta kalma perspektifi ve sürekli allogreft hayatta değerlendirmek yeteneği başarılı olduğunu kanıtladı. Bu canlı, aktif devam eden allogreft saç büyümesini kalan örten deri yoluyla gösterilmiştir ve kalp atışları görselleştirme ve parmak palpasyonla değerlendirilecek başardık. Hayatta kalma verileri, ayni atadan gelme nakledilen farelerde, Şekil 2&#39;de gösterilmiştir. Ortalama yaşam süresi...

Kombine katı organ ve vaskülarize kompozit allotransplantasyonu incelemek için, servikal dikişsiz manşet tekniği kullanarak farelerde yeni bir heterotopik en blok göğüs duvarı, timus ve kalp nakli modelini açıklıyoruz.

Farelerde A Novel Mikrocerrahi Heterotopik Modeli, En Bloku Göğüs Duvarı, Thymus ve Kalp Nakli

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression ...

Bu protokolün genel amacı, donör kaynaklı vaskülarize hematopoietik ve primer lenfoid dokunun immün tolerans ve uzamış allogreft sağkalımı üzerindeki etkilerini araştırmak için solid organ ve vaskülarize kompozit allotransplantasyondan oluşan yeni bir murin modelini tanıtmaktır. Bu yöntem, vaskülarize kemik ve timusun tolerans indüksiyonu üzerindeki rolü gibi rekonstrüktif nakil alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, ilk kez kombine vaskülarize kemik iliği ve timusun solid bir organ, kalp ve immünolojik olarak çok yönlü kitle model sistemi ile nakledilmesidir.Bu tekniğin etkileri, karmaşık doku kusurlarını tedavi etmek ve aynı zamanda katı organ naklinde uzun süreli sağkalımı iyileştirmek için temel immünolojik araştırmalardan klinik arenaya terapötik çeviriye kadar uzanır. Bu prosedürü gösteren, Johns Hopkins Üniversitesi'nde plastik ve rekonstrüktif cerrahi bölümünde doktora sonrası araştırmacılar olan Dr.BC Oh ve Dr.Georg Furtmuller olacaktır. Başlamak için, bir erkek donör fareyi metin protokolüne göre uyuşturduktan sonra, steril eldivenler giyerken, kılları servikal, torasik ve abdominal bölgeden çıkarmak için mekanik makaslar kullanın.Steril bir cerrahi yüzeye, hayvanı sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Bir burun konisi takın ve izofluranı %1 ila 2'de tutun Deri kesisinden önce, povidon iyot antiseptik ve ardından izopropil alkol uygulamak için steril bir pamuklu çubuk kullanarak insizyon bölgesini geniş bir şekilde hazırlayın. Makas kullanarak, servikal ve abdominal cilt boyunca cilt kesilerinin yüzeysel transferini yapın.Her iki insizyonu orta aksiller çizgiler boyunca bilateral olarak bağlayın. Mikroforseps ile, dış juguler venleri tanımlamak için servikal bölgeyi iki taraflı olarak inceleyin. Ve 6-0 ipek sütürle, bölmek için makas kullanmadan önce damarları bağlayın.Daha sonra elektrokoter ile, iç juguler venleri ve ortak karotid arterleri bilateral olarak ortaya çıkarmak için sternokleidomastoid kasları bölün. 6 0 ipek sütürü sırasıyla sol ve sağ ana karotid arterlerin ve iç juguler venlerin altından toplu olarak geçirin. Bipolar elektrokoter ve keskin diseksiyon kullanarak, subklavyen damarları ortaya çıkarmak için pektoralis majör kaslarını ve klavikula kemiklerini bölün.Damarları proksimal olarak bağlamak ve bölmek için 6-0 ipek sütür kullanılır. Ardından, hayvanın penisini nazikçe kavrayın ve geri çekin. Penisin sırtı boyunca, dorsal veni bulun ve bölgeyi dezenfekte etmek için izopropil alkol kullanın.Daha sonra, 30 gauge bir iğne kullanarak, dorsal ven yoluyla intravenöz olarak 30.000 ünite heparin enjekte edin ve penisin orijinal konumuna geri tepmesine izin verin. Ortak karotis arter ve internal juguler ven etrafına önceden yerleştirilmiş toplu bağlar ile yapıları iki taraflı olarak bağlayın ve bölün. Şimdi karın boşluğuna erişmek için enine bir kesi yapmak için makas kullanın.İntrahepatik inferior vena kava'yı açığa çıkarmak için bağırsakları boşaltın ve intrahepatik inferior vena kavaya iki mililitre soğuk EuroCollins kardiyopleji solüsyonu enjekte edin. Karaciğer renk değişikliğini ve kalp atışının durmasını görselleştirerek uygun enjeksiyonu sağlayın. Makas kullanarak, açıkta kalan karından iki taraflı bir diyafram kesisi yoluyla intratorasik boşluğa erişin ve insizyon sefaladını interkostal kaslar ve kaburgalar boyunca uzatın.EuroCollin solüsyonu kullanılarak akciğer gövdesi ve kalbin diş ipi ile diş ipi kullanılması, mikro tromboembolizmin potansiyel olarak koroner dolaşımın içinde kalmasını önlemek için kritik öneme sahiptir. Metin protokolüne göre süper hepatik inferior vena kava içine soğuk EuroCollins solüsyonu enjekte ettikten sonra, aortun kökünü tanımlayın ve distal olarak inen aorta kadar izleyin. Maksimum uzunluğu koruyarak inen aortu keskin bir şekilde kesin.Şimdi pulmoner gövdeyi tanımlayın ve maksimum uzunluğu koruyarak dal noktasına hemen proksimalini bölün. Daha sonra iki mililitre soğuk EuroCollins kardiyopleji solüsyonu kullanarak, pulmoner gövdenin lümenine yumuşak bir plastik bant kateter yerleştirerek pulmoner gövdeyi ve kalbi yıkayın. 6-0 ipek sütür kullanarak, inferior vena kava, pulmoner venlerin birleştiği yer ve bilateral superior vena kavanın aksesuar dallarını bağlayın ve bölün.Daha sonra, hava yoluna girmemek için kalp sefaladını ana gövde bronşları ve trakea boyunca ataşmanlardan dikkatlice değerlendirin ve inceleyin. Keskin ve bipolar elektrokoter ile göğüs duvarını, timusu ve kalbi diseke edin ve donör fareden tamamen kurtarın. Son olarak, makas kullanarak, allogreft göğüs duvarını ex vivo olarak sternum ve lateral kosit boyunca daha küçük bir boyuta kesin ve iç torasik damarları bozmamaya dikkat edin.Revaskülarizasyonu takiben kanamayı en aza indirmek için, osteomuskulokutanöz sternumun sınırları boyunca bipolar elektrokoterizasyon kullanın. Alıcı fareyi metin protokolüne göre hazırladıktan sonra, fareyi sırtüstü pozisyona getirin ve sağ üst ekstremiteyi biraz daha aşağı bir yönelimle açı vererek baş ile sağ üst ekstremite arasında 110 derecelik bir açı oluşturun. Mandibulanın sağ alt sınırı boyunca orta hattan bir kesi yapın ve insizyonu infralateral olarak sağ torasik bölgeye uzatın.Mikrovasküler forseps kullanılarak yapılan künt diseksiyonda, damarı yumuşak doku ve adventitiden çevresel olarak serbest bırakarak dış juguler veni mobilize edin. Tüm dalları bölmek için elektrokoter kullanın ve allogreft için yer açmak için submandibular bezin sağ lobunu keskin diseksiyon ve elektrokoter ile çıkarın. Juguler venin bir manşetin üzerinden geçecek kadar uzun olduğundan emin olun ve 6-0 ipek sütür kullanarak dış juguler veni bağlayın.Daha sonra damarı önceden kesilmiş bir poliamid manşetin lümeninden geçirin ve damar manşet kompleksini yerine sabitlemek için bir bulldog mikrovasküler kelepçe kullanın. Manşetin üzerinden geçirin ve yerine sabitlemek için 10-0 naylon sütür kullanın. Bipolar elektrokoter yaparken, ortak karotis arteri ortaya çıkarmak için sağ sternokleidomastoid kası bölün.Forseps ve künt diseksiyon ile, yumuşak dokuyu ve çevresindeki adventitiyi çıkararak arterler sefaladını servikal bölge içinde en distal noktaya çevresel olarak mobilize edin. 6-0 ipek sütür kullanarak, ortak karotis arteri bağlayın ve bölün. Arteri önceden kesilmiş bir poliamid manşetin lümeninden geçirin ve torasik girişe mümkün olduğunca yakın bir yere sabitlemek için bir bulldog mikrovasküler kelepçe kullanın.Sonra kabı distal olarak bölün. Damarı nazikçe genişletmek için bir mikrocerrahi dilatör kullanın, manşetin üzerinden geçirin ve yerine sabitlemek için 10-0 naylon dikiş kullanın. Steril koşulları korurken, donör inen aort lümenini alıcının üzerindeki arteriyel manşet yapısının üzerine yerleştirin ve yerine sabitlemek için 10-0 naylon sütür kullanın.Donör pulmoner arter ile alıcı farenin everted dış juguler ven manşet yapısı arasında benzer bir anastomoz oluşturun. Ardından Venüs mikrovasküler klempini ve ardından arteriyel klempi çıkarın. Daha sonra, tüm allogrefti kanama açısından inceleyin ve varsa metin protokolüne göre kanamayı azaltın.Arteriyel mikrovasküler klempi serbest bırakmadan ve tamamen çıkarmadan önce grefti inceleyin ve hemostaz sağlayın. Kalp odacıklarının hızlı hacim genişlemesi ile anında ortaya çıkacak olan reperfüzyon belirtilerini belirlemek için kalbi gözlemleyin ve boncuklanmanın 30 ila 60 saniye içinde başlamasını bekleyin. Kalbi nemlendirmek için ılık tuzlu su kullanın, ardından anastomozlarda herhangi bir bükülme veya gerginliğe neden olmamak için göğüs duvarını anatomik bir konuma getirin.Son olarak, cerrahi yaranın derisini kapatmak için 6-0 naylon dikişler kullanın ve metin protokolüne göre ameliyat sonrası bakım yapın. Uç uca dikişsiz manşet anastomozu yapılması, reperfüzyon sırasında elektrokoter ile hemostazın titiz bir şekilde sürdürülmesi ve kompozit doku grafisinin tüm bileşenlerinin perfüzyonunun sağlanması işlemin en kritik adımlarıdır. Kombine VCA ve katı organ allogrefti, alıcının boynuna önceden yerleştirilmiş poliamid manşetin üzerine monte edilir, bu da optimal greft pozisyonunu ve donör damarın manşetin yapısına titiz bir şekilde monte edilmesini gösterir.Burada gösterilen allogreftin tasarımı, alıcı hayvana minimum etki ile göğüs duvarına perfüzyonun sürdürülmesi için uygulanabilir olduğunu onaylamıştır. Burada sunulan, sinjeneik nakledilen fareler için sağkalım verileridir. Ortalama sağkalım süresi 109 günden fazlaydı, bu da nakledilen allogreftin teknik yönünün göğüs duvarı, timus ve kalbin tamamını perfüze etmek için tasarlandığını düşündürdü.Ek olarak, bu fare modeli yalnızca uygulanabilir olmakla kalmaz, aynı zamanda çoğaltılabilir. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik iki takımlı bir yaklaşımla gerçekleştirilirse 90 dakika içinde yapılabilir. Bu prosedürü denerken, prosedürün tamamı boyunca hemostazın çok önemli olduğunu ve allogreft yerleştirme sırasında bükülmenin en aza indirilmesinin de çok önemli olduğunu hatırlamak önemlidir.Bu teknik, rekonstrüktif taşıma ve katı organ taşınması alanlarındaki araştırmacıların, allogreft sağkalımını iyileştirmek için katı organ taşınımına potansiyel yardımcı maddeler olarak vaskülarize kemik iliği ve timusun rolünü keşfetmelerinin yolunu açmaktadır. Bu videoyu izledikten sonra, heterotopik bir blok açma göğüs duvarı, timus ve kalp nakli yoluyla kombine katı organ ve vaskülarize kompozit allotransporttan oluşan bir murin modelinin nasıl oluşturulacağını iyi anlamış olmalısınız.

a-novel-microsurgical-model-for-heterotopic-en-bloc-chest-wall-thymus

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Fare heterotopik kalp transplantasyonu modeli ret ve immün yanıt mekanizmaları eğitim için önemli bir yöntem olduğu birçok araştırmacı tarafından kanıtlanmıştır. Ancak, söz konusu teknikleri hala zorlu. Standart teknikler değiştirerek 1000 nakli ile daha fazla başarı elde ettiler.

Farelerde Heterotopik Kalp Nakli

Sıçangil modeli servikal kalp nakli immünolojik hem de iskemi reperfüzyon yaralanması çalışmasından için uygundur. Biz olmayan bir dikiş manşet tekniği kullanılarak prosedür değiştirilmiş ve bu yaklaşım ile 1.000 'den fazla başarılı nakli gerçekleştirildi.  Burada, videoyu tamamlamak için bu tekniğin ek ayrıntıları.

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

Farelerde kalplerin heterotopik nakli için mikrocerrahi prosedür için, donör toplama ve alıcı damar anastomozu için basitleştirilmiş yöntemler de dahil olmak üzere bir teknik gösterilmiştir.

Heterotopik Fare Kalp NAKLİ için Modifiye Yöntem

Manşet tekniği, küçük damarların teknik olarak zorlayıcı sütür anastomozlarından kaçınarak farelerde heterotopik servikal kalp nakli modelini kısaltır ve kolaylaştırır. Bu video makalesinde gösterilen teknik ayrıntılar, araştırmacıların bu modeli laboratuvarlarında kurmalarına izin vermelidir.

Farelerde Heterotopik Servikal Kalp Nakli

Burada, yeni kardiyokoruyucu stratejileri araştırmak için sıkı bir şekilde kurulan ve kullanılan ortootopik kalp transplantasyonunun klinik öncesi büyük hayvan (porcine) modelini tarif ediyoruz.

Ortootopik kalp transplantasyonunun klinik öncesi porcine modeli

Heterotopik abdominal fare kalp nakli modelinde kan devresi rekonstrüksiyonu için yeni bir teknik gösterilmiştir.

Abdominal Fare Kalp Nakli Modelinde Kan Devresi Rekonstrüksiyonu

Bu protokolde, kardiyak allogreft rejeksiyon mekanizmasını araştırmak için bir fare kalp nakli modeli kullanılmıştır. Bu heterotopik kalp nakli modelinde, modifiye Manşet tekniği kullanılarak kalp implantasyonunun servikal uçtan uca anastomozu ile operasyon etkinliği artırılır ve kalp greftlerinin sağkalımı sağlanır.

Fare Servikal Heterotopik Kalp Transplantasyon Modeli için Modifiye Manşet Tekniği

Fare kardiyak transplantasyon modelleri, transplantasyon immünolojisini incelemek için değerli araştırma araçlarını temsil etmektedir. Mevcut protokol, laminer kan akışına izin vermek için alıcının ortak karotis arterine ve donörün pulmoner arter gövdesine manşetlerin yerleştirilmesini içeren fare heterotopik servikal kardiyak transplantasyonunu detaylandırmaktadır.

Vasküler Manşetler Kullanılarak Fare Heterotopik Servikal Kardiyak Transplantasyonu

Bu protokol, farelerde manşetsiz, dikiş bazlı servikal heterotopik kalp nakli tekniği sunar; bu teknik, donör-spesifik bağışıklık toleransını fizyolojik koşullarda minimum yabancı madde müdahalesiyle değerlendirmek için ikinci heterotopik kalp greftinin güvenilir şekilde yerleştirilmesini sağlamaktadır.

Farelerde Donör-Spesifik Bağışıklık Toleransını Değerlendirmek İçin İkincil Heterotopik Kalp Nakli için Manşetsiz Dikiş Tabanlı Servikal Model

Bu protokol, sare servikal kalp nakli için basitleştirilmiş ve uçtan yana dikiş anastomozu tekniği sunarak nakil immünolojisini incelemek için sağlam ve tekrarlanabilir bir model sunar.

Nakil İmmünolojisini Çalışmak İçin Uçtan Yana Anastomoz Tekniği Kullanılarak Servikal Heterotopik Fare Kalp Nakli

Öğrenin, farelerde heterotopik göğüs duvarı, timus ve kalp nakli için yeni bir mikrocerrahi modeli. Bu yöntem, bağışıklık toleransı ve allogreft sağkalımı üzerine araştırmaları destekler.

Farelerde A Novel Mikrocerrahi Heterotopik Modeli, En Bloku Göğüs Duvarı, Thymus ve Kalp Nakli

Daha fazla video keşfet