5 Mart 2016
Neonatal domuzlarda efferent lenflerden büyük miktarlarda lipid metabolizması bileşenlerini toplamak için bağırsak lenf gövdesini kateterize etmek için cerrahi bir prosedür sunuyoruz.
Lenfatik kateterizasyon, lipid ve ilaç metabolizması, kanser metastazı ve bağışıklık fonksiyonu ile ilgili mekanizmaları araştırmak için kullanılan önemli bir tekniktir ve çeşitli hayvan modellerinden büyük miktarlarda lenf toplanması, araştırmacıların bu süreçleri incelemesini sağlar. Video, ventral orta hat yaklaşımı kullanılarak yenidoğan domuzlarda bağırsak lenfatik gövdesini kateterize etmek için kullanılan cerrahi prosedürü ayrıntılı olarak göstermektedir. Tüm prosedürler Alberta Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı.
Lenfatik damara erişmek için karın boşluğu açıldı. Kas tabakasını açmak için kesi ayarında elektrokoter kullanıldı. İşlem süresince karın duvarını açık tutmak için bir ekartör yerleştirildi.
Lenfatik damarın lokalizasyonuna yardımcı olmak için önemli abdominal organlar tanımlanır. Lenfatik damara daha iyi erişim için, ince bağırsak ve kolonun segmentleri vücudun sol tarafına dışlanır. Lenfatik damar, karaciğer ve portal venin sağ ventral segmenti tanımlanarak işaretlenir.
Yenidoğan domuzlarda lenfatik damarlar hassastır ve kolayca yırtılır, bu nedenle swablar ve künt aletlerle titiz bir diseksiyon gereklidir. İşte bağırsak lenfatik damarı. Şimdi dikiş künt forseps ile lenfatik damarın altından geçiriliyor.
Şimdi lenfatik damarın altından üç adet 2-0 ipek dikiş geçiriliyor. En kaudal sütür, damarı genişletmek ve kateteri damara sabitlemek için kullanılır. Kraniyal sütürler, kateteri damar içinde sabitlemek için kullanılır.
Lenfatik damardaki küçük bir kesi, künt forsepslerin damarı genişletmesine izin verir. Kateter damar içine yerleştirilir. Bu, lenfatik damarın yırtılmamasını sağlamak için nazikçe yapılmalıdır.
Kateterin iyi oturduğundan emin olmak için çoğu kraniyal sütürün ötesine ilerletilmesi gerekir. Üç adet 2-0 ipek sütür, kateteri lenfatik damara sabitler. Daha da önemlisi, iki kraniyal sütür ilk olarak kateteri damara sabitlemek için kullanılır ve daha sonra kateteri bağlamak için en kaudal sütür kullanılır ve stabilite eklenir.
Karın boşluğunu kapatmadan önce iyi bir lenf akışı olduğundan emin olmak önemlidir. Kateter, domuzun sol orta kanadında dıştan yapılır. Kateteri karın boşluğundan domuzun kanadının dış yüzeyine çekmek için büyük forseps kullanılır.
Kas tabakaları konik bir iğne üzerine 2-0 vicryl sütür ile basit kesikli sütür şeklinde kapatılır. Cilt, çalışan subkutiküler sütür şeklinde bir kesme iğnesi üzerine 2-0 vicryl sütür ile kapatılır. Çıkış kesisi ile kateter ciltten geçer ve kesik ipli dikiş şeklinde bir kesme iğnesi üzerine 2-0 naylon sütür ile kapatılır.
Bu kapatma, kateter boyunca içe doğru ilerleyen artan enfeksiyonların önlenmesine yardımcı olur. Lenf toplama şişelerinin bulunduğu ceket, domuz hala anestezi altındayken domuzun üzerine yerleştirilir. Kateter toplama şişesine yerleştirilir ve domuzu uyandırmadan önce iyi bir lenf akışı sağlanır.
Domuzlar prosedürden iyi bir şekilde iyileşir ve deney boyunca mükemmel lenf akışı korunur. Tablo, lenfatik damardan toplanan lenf bileşenlerini göstermektedir. Bu bileşenler arasında Apolipoprotein B48, Trigliseritler ve Kolesterol bulunur.
Western Blot figürü, toplanan lenf örneğinde hem Apolipoprotein B48 hem de az miktarda plazma kaynaklı Apolipoprotein B100'ün varlığını göstermektedir. Lenfatik damarlar hem hassas hem de kırılgan olduğu için genç domuzlarda lenfatik kateterizasyon teknik olarak zor olabilse de, bu video genç domuzlarda uygun ve dikkatli cerrahi tekniğin kullanılmasının araştırmacılara bağırsak lenflerini toplamak için mükemmel bir model sağlayabileceğini göstermektedir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, yenidoğan domuzlarda intestinal lenf trunkunun kateterizasyonu için ayrıntılı bir cerrahi prosedür sunmaktadır. Bu teknik, efferent lenften önemli miktarlarda lipid metabolizması bileşenlerinin toplanmasına olanak tanıyarak lipid ve ilaç metabolizması üzerine yapılan araştırmaları kolaylaştırmaktadır.
Bu cerrahi teknik, neonatal domuzlardan bağırsak lenfinin sürekli olarak toplanmasını sağlayarak apolipoproteinler ve trigliseritler gibi lipid metabolizması bileşenlerinin incelenmesi için güvenilir bir kaynak sunar. Bu model, fizyolojik olarak ilgili bir sistemde lipid transportu ve inflamatuar mediatörlerin kantitatif analizine olanak tanıyarak erken keşif aşamasındaki mekanistik risk azaltma süreçlerini destekler. İlaç metabolizması ve immün modülasyon yollarının preklinik değerlendirmesi için translasyonel süreklilik sağlar.
Bu yöntem, alt analizler için biyolojik olarak ilgili lenf sağlayarak keşif iş akışlarına entegre olur ve erken hedef hipotez testleri ile preklinik mekanizma doğrulaması arasında bir köprü kurar.