Akış Sütun Perde: Verimliliği ve Duyarlılık Optimizasyonu

Bu yöntemin genel amacı, bir perde akış kolonunun optimizasyonu yoluyla bir ayırmanın verimliliğini ve hassasiyetini iyileştirmektir. Bu yöntem, çevre bilimleri, adli tıp ve verimli ve son derece hassas bir ayırma tekniğinin gerekli olduğu eser numune analizi gerektiren alanlarda temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, geleneksel HPLC ayırma yöntemlerine kıyasla bir ayırma verimliliğini ve analizin hassasiyetini arttırmasıdır.

Bu yöntem, ayırma gücünü ve dolayısıyla hız kapasitesini ekonomik ve zaman açısından verimli bir şekilde artırmak için bir araç sağlayabilir. Perde akış kolonu, HPLC uygulayıcıları için yeni bir kavramdır, ancak kullanımı karmaşık değildir. Sadece uygun akış oranlarının optimizasyonunu gerektirir.

İlk olarak, HPLC cihazının mobil fazları A ve B için yüzde 100 ultra saf su ve 100 metanol şişeleri hazırlayın. Pompaları üreticinin ihtiyacına göre boşaltın. Temizledikten sonra, pompa hattını otomatik örnekleyicinin enjektör valfinden ayırın.

Bağlantısı kesilen hatta bir T parçası takın. T parçasının her bir portuna, 0,13 milimetre iç çapa ve 15 santimetre uzunluğunda boru takın. T parçasından bir tüpü otomatik örnekleyicinin enjektör valfine bağlayın.

Son olarak, pompayı dakikada bir mililitre akış hızına ayarlayın. İki boş toplama kabının darasını alın ve bunları merkezi ve çevre birimi olarak etiketleyin. 60 saniye boyunca, enjektörden gelen hattan çıkan mobil fazı toplamak için merkezi etiketli kabı kullanın.

Merkezi kabı yeniden tartın ve toplanan mobil fazın kütlesini belirleyin. Bu işlemi, çevre birimi etiketli kap ile çevresel bağlantı noktasından geçen akışı toplayarak tekrarlayın. Belirtilen denklemleri kullanarak her satırdan akış yüzdesini veya dakikada mililitre olarak belirleyin.

Merkezi bağlantı noktası yaklaşık yüzde 40 ve çevresel bağlantı noktası yaklaşık yüzde 60 olmalıdır. Değerler yüzde ikiden fazla farklılık gösteriyorsa, akış oranını ayarlamak için boru uzunluğunu veya çapını değiştirin. Ardından toplama ve hesaplama adımlarını tekrarlayın.

Ardından, pompa akışını kapatın ve enjektör hattını kolon girişinin merkezi portuna bağlayın. Ayrıca T parçasından gelen hattı sütun girişinin çevresel bağlantı noktasına bağlayın. Sistemin ayarını bitirmek B.To akış hızını yavaşça yüzde 100 mobil fazın dakikada bir mililitreye yükseltin, sütunu dengelemek için 10 dakika boyunca dakikada bir mililitrede yüzde 100 metanol akıtın.

Başlamak için, merkezi çıkış bağlantı noktasını UV-Vis dedektörüne bağlamak için boru kullanın. Aynı tip ve uzunluktaki boruyu CF kolonunun çevresel çıkış portuna bağlayın. Ardından, pompayı dakikada bir mililitre akış hızına ayarlayın.

İki boş toplama kabının darasını alın ve birini merkezi toplama ve diğerini çevre birimi için tekrar etiketleyin. 60 saniye boyunca, UV-Vis dedektöründen çıkan mobil fazı toplamak için merkezi etiketli kabı kullanın. Kaçan çözelti kütlesini belirlemek için toplama kabını yeniden tartın.

Bu işlemi çevresel çıkış portu ve etiketli toplama kabı ile tekrarlayın. Şimdi, giriş akışıyla daha önce gerçekleştirildiği gibi her hattan gelen yüzde akışını belirleyin. UV-Vis hattı yüzde 21 ve çevresel çıkış akışı yüzde 79 olmalıdır.

Akış oranı önemli ölçüde saparsa, merkezi akış yüzdesini değiştirmek için UV-Vis dedektörünün çıkışına bağlı borunun boyutunu ayarlayın.tage. Perde akış kolonunun optimum performansını sağlamak için kolonun girişindeki ve çıkışındaki merkezi ve periferik arasındaki akış oranlarının bu protokolü takip etmesi önemlidir. Aktif akış teknolojili kolonlar, kolon yatağı heterojenliğinin üstesinden gelmek ve ayırma performansını iyileştirmek için çok portlu kolon uç bağlantı parçalarında özel bir frit tasarımı kullanılarak geliştirilmiştir.

Fenetol, butilbenzen ve pentylbenzen içeren bir test karışımı, geleneksel 4.6 ve 2.1 milimetre iç çaplı kolonlar ve 4.6 milimetre iç çaplı perde akış kolonları üzerinde analiz edildi. Karışımın ayrılması, standart kolonlara göre bir perde akış kolonunun verimliliği ve hassasiyeti açısından geliştirilmiş performansını göstermektedir. Bir perde akış kolonunun kullanılması, azaltılmış tepe hacmine rağmen butilbenzen sinyalini arttırdı.

Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik düzgün bir şekilde yapılırsa yarım saatten daha kısa sürede kurulabilir. Perde akış kolonu kurulumu tekrar tekrar kullanılabilir, ancak akış oranları rutin olarak kontrol edilmelidir. Bu prosedürü denerken, öngörülen akış oranlarına mümkün olduğunca yakın olmayı unutmamak önemlidir.

Perde akış kolonu, HPLC alanındaki araştırmacıların, ayırma performansından ödün vermeden daha hızlı numune analizi elde etmek için kolonların ve UPLC cihazlarının sınırlarını zorlamasının yolunu açmıştır. Bu videoyu izledikten sonra, geleneksel HPLC kolonlarına göre daha iyi ayırma sağlayabildikleri için perde akış kolonlarının önemini anlamalısınız.