Name: Bilgisayar Destekli Video ve Dijital Görüntü Analizi Sulu Bakır Akut Maruz Cevabı Balık Yüzme Davranışı nicel (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-02-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 21 s
Description: Öğrenin beyaz mersin balığında bakır maruziyetine bağlı yüzme davranışlarını video analiziyle nicel olarak değerlendirme yöntemini. Bu hassas protokol, ekotoksikoloji ve su yaşamı koruma çalışmaları için erken toksisite belirtilerini objektif şekilde tespit eder.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

ABD Jeolojik Araştırmalar Merkezi Ekoloji Şubesi, Toksikoloji Şubesi ve Çevre Kimyası Şubesi personeline, Columbia Çevre Araştırma Merkezi'ne teknik ve analitik yardım için teşekkür ederiz. Kısmen Teck American Incorporated tarafından ABD Çevre Koruma Ajansı (USEPA) Bölge 10 ile yapılan bir anlaşma yoluyla USEPA tarafından İçişleri Bakanlığı Merkezi Hazmat Fonu aracılığıyla ABD Jeolojik Araştırmalarına (USGS) sağlanan fonlarla sağlanan finansman.

<ol><li>Gerhardt, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aquatic+behavioral+ecotoxicology-prospects+and+limitations%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Ecol+Risk+Assess%3A+An+International+Journal%22%5BJournal%5D)">Aquatic behavioral ecotoxicology-prospects and limitations.</a> Hum Ecol Risk Assess: An International Journal. 13 (3), 481-491 (2007).</li>
<li>Beitinger, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+reactions+for+the+assessment+of+stress+in+fishes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Great+Lakes+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral reactions for the assessment of stress in fishes.</a> J Great Lakes Res. 16, 495-528 (1990).</li>
<li>Beitinger, T. L., McCauley, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-animal+and+physiological+processes+for+the+assessment+of+stress+in+fishes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Great+Lakes+Res%22%5BJournal%5D)">Whole-animal and physiological processes for the assessment of stress in fishes.</a> J Great Lakes Res. 16, 542-575 (1990).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Behavioural+Ecotoxicology%22">Behavioural Ecotoxicology</a>. Dell'Omo, G. , J Wiley & Sons. Chichester, UK. (2002).</li>
<li>Little, E. E., Finger, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Swimming+behavior+as+an+indicator+of+sublethal+toxicity+in+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Toxicol+Chem%22%5BJournal%5D)">Swimming behavior as an indicator of sublethal toxicity in fish.</a> Environ Toxicol Chem. 9, 13-19 (1990).</li>
<li>Rand, G. M. Behavior. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRand%2C+GM+%22Fundamentals+of+Aquatic+Toxicology%3A+Methods+and+Applications%22">Fundamentals of Aquatic Toxicology: Methods and Applications</a>. Rand, G. M., Petrocelli, S. R. , Hemisphere Publishing. New York. 221-256 (1985).</li>
<li>Calfee, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+sensitivity+of+white+sturgeon+%28Acipenser+transmontanus%29+and+rainbow+trout+%28Onchorhynchus+mykiss%29+to+copper%2C+cadmium%2C+or+zinc+in+water-only+laboratory+exposures%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Toxicol+Chem%22%5BJournal%5D)">Acute sensitivity of white sturgeon (Acipenser transmontanus) and rainbow trout (Onchorhynchus mykiss) to copper, cadmium, or zinc in water-only laboratory exposures.</a> Environ Toxicol Chem. 33 (10), 2259-2272 (2014).</li>
<li>Little, E. E., Calfee, R. D., Linder, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+of+smelter+slag-contaminated+sediments+from+Upper+Lake+Roosevelt+and+associated+metals+to+early+life+stage+White+Sturgeon+%28Acipenser+transmontanus+Richardson%2C+1836%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Ichthyol%22%5BJournal%5D)">Toxicity of smelter slag-contaminated sediments from Upper Lake Roosevelt and associated metals to early life stage White Sturgeon (Acipenser transmontanus Richardson, 1836).</a> J Appl Ichthyol. , 1-11 (2014).</li>
<li>Wang, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+sensitivity+of+white+sturgeon+%28Acipenser+transmontanus%29+and+rainbow+trout+%28Onchorhynchus+mykiss%29+to+cadmium%2C+copper%2C+lead+or+zinc+in+water-only+laboratory+exposures%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Toxicol+Chem%22%5BJournal%5D)">Chronic sensitivity of white sturgeon (Acipenser transmontanus) and rainbow trout (Onchorhynchus mykiss) to cadmium, copper, lead or zinc in water-only laboratory exposures.</a> Environ Toxicol Chem. 33 (10), 2246-2258 (2014).</li>
<li>Little, E. E. Behavioral measures of injuries to fish and aquatic organisms: regulatory considerations. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLittle%2C+EE+%22Behavioural+Ecotoxicology%22">Behavioural Ecotoxicology</a>. Dell'Omo, G. , J Wiley & Sons. Chichester, UK. 411-431 (2002).</li>
<li>Little, E. E., Brewer, S. K. Neurobehavioral toxicity in fish. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLittle%2C+EE+%22Target+Organ+Toxicity+in+Marine+and+Freshwater+Teleosts+New+Perspectives%3A+Toxicology+and+the+Environment.+Volume+2%22">Target Organ Toxicity in Marine and Freshwater Teleosts New Perspectives: Toxicology and the Environment. Volume 2</a>. Schlenk, D., Benson, W. H. , Taylor and Francis. London and New York. 139-174 (2001).</li>
<li>Mount, D. I., Brungs, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simplified+dosing+apparatus+for+fish+toxicological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Water+Res%22%5BJournal%5D)">A simplified dosing apparatus for fish toxicological studies.</a> Water Res. 1, 21-29 (1967).</li>
<li>Standard guide for performing early life-stage toxicity tests with fishes. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Annual.Book+of+ASTM+International+Standards.+Volume+11.06%22">Annual.Book of ASTM International Standards. Volume 11.06</a>. , ASTM International. West Conshohocken, PA. SOURCE: http://www.astm.org/Standards/E1241.htm (2014a) 1241-1305 (2013).</li>
<li>Standard guide for measurement of behavior during fish toxicity tests. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Annual.Book+of+ASTM+Standards.+Volume+11.06%22">Annual.Book of ASTM Standards. Volume 11.06</a>. , ASTM International. West Conshohocken, PA. SOURCE: http://www.astm.org/Standards/E1711.htm (2014b) 1711(2014).</li>
<li>Standard guide for conducting acute toxicity tests on test materials with fishes, macroinvertebrates, and amphibians. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Annual.Book+of+ASTM+Standards.+Volume+11.06%22">Annual.Book of ASTM Standards. Volume 11.06</a>. , ASTM International. West Conshohocken, PA. SOURCE: http://www.astm.org/Standards/E729.htm (2014c) 729-796 (2014).</li>
<li>Brunson,, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+bioaccumulation+of+contaminants+from+sediments+from+the+upper+Mississippi+River+using+field-collected+oligochaetes+and+laboratory-exposed+Lumbriculus+variegatus%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Environ+ConTox%22%5BJournal%5D)">Assessing bioaccumulation of contaminants from sediments from the upper Mississippi River using field-collected oligochaetes and laboratory-exposed Lumbriculus variegatus.</a> Arch Environ ConTox. 5, 191-201 (1998).</li>
<li>Brumbaugh, W. G., May, T. W., Besser, J. M., Allert, A. L., Schmitt, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+elemental+concentrations+in+streams+of+the+New+Lead+Belt+in+southeastern+Missouri%2C+2002-05%5BTitle%5D)+AND+%22U.S.+Geological+Survey+Scientific+Investigations+Report+2007-5057%22%5BJournal%5D)">Assessment of elemental concentrations in streams of the New Lead Belt in southeastern Missouri, 2002-05.</a> U.S. Geological Survey Scientific Investigations Report 2007-5057. , (2007).</li>
<li>Kane, A. S., Salierno, J. D., Gipson, G. T., Molteno, T. C. A., Hunter, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+video-based+movement+analysis+system+to+quantify+behavioral+stress+responses+of+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Water+Res%22%5BJournal%5D)">A video-based movement analysis system to quantify behavioral stress responses of fish.</a> Water Res. 38, 3993-4001 (2004).</li>
<li>Sprague, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Avoidance+of+Copper-Zinc+Solutions+by+Young+Salmon+in+the+Laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22JWater+Pollut+Control+Fed%22%5BJournal%5D)">Avoidance of Copper-Zinc Solutions by Young Salmon in the Laboratory.</a> JWater Pollut Control Fed. 36 (8), 990-1004 (1964).</li>
<li>Saunders, R. L., Sprague, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+copper-zinc+mining+pollution+on+a+spawning+migration+of+Atlantic+salmon%5BTitle%5D)+AND+%22Water+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of copper-zinc mining pollution on a spawning migration of Atlantic salmon.</a> Water Res. 1 (6), 419-432 (1967).</li>
<li>Barron, M. G. Environmental contaminants altering behavior. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBarron%2C+MG+%22Behavioural+Ecotoxicology%22">Behavioural Ecotoxicology</a>. Dell'Omo, G. , Wiley & Sons. Chichester, UK. 167-186 (2002).</li>
<li>Ellgaard, E. G., Guillot, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetic+analysis+of+the+swimming+behavior+of+bluegill+sunfish%2C+Lepomis+macrochirus+rafinesque%2C+exposed+to+copper%3A+hypoactivity+induced+by+sublethal+concentrations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Fish+Biol%22%5BJournal%5D)">Kinetic analysis of the swimming behavior of bluegill sunfish, Lepomis macrochirus rafinesque, exposed to copper: hypoactivity induced by sublethal concentrations.</a> J Fish Biol. 33, 601-608 (1998).</li>
<li>Drummond, R. A., Spoor, W. A., Olson, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Some+short-term+indicators+of+sublethal+effects+of+copper+on+brook+trout%2C+Salvelinus+fontinalis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Fish+Res+Board+Can%22%5BJournal%5D)">Some short-term indicators of sublethal effects of copper on brook trout, Salvelinus fontinalis.</a> J Fish Res Board Can. 30, 698-701 (1973).</li>
<li>Hansen, J. A., Rose, J. D., Jenkins, R. A., Gerow, K. G., Bergman, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chinook+salmon+%28Oncorhynchus+tshawytscha%29+and+rainbow+trout+%28Oncorhynchus+mykiss%29+exposed+to+copper%3A+neurophysiological+and+histological+effects+on+the+olfactory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Environl+Toxicol+Chem%22%5BJournal%5D)">Chinook salmon (Oncorhynchus tshawytscha) and rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) exposed to copper: neurophysiological and histological effects on the olfactory system.</a> Environl Toxicol Chem. 18, 1979-1991 (1999).</li>
<li>Sandahl, J. F., Baldwin, D. H., Jenkins, J. J., Scholz, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sensory+system+at+the+interface+between+urban+stormwater+runoff+and+salmon+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">A sensory system at the interface between urban stormwater runoff and salmon survival.</a> Environ Sci Technol. 41 (8), 2998-3004 (2007).</li>
<li>McIntyre, J. K., Baldwin, D. H., Beauchamp, D. A., Scholz, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-level+copper+exposures+increase+visibility+and+vulnerability+of+juvenile+coho+salmon+to+cutthroat+trout+predators%5BTitle%5D)+AND+%22Ecol+Appl%22%5BJournal%5D)">Low-level copper exposures increase visibility and vulnerability of juvenile coho salmon to cutthroat trout predators.</a> Ecol Appl. 22 (5), 1460-1471 (2012).</li>
<li>Green, W. W., Mirza, R. S., Wood, C. M., Pyle, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Copper+binding+dynamics+and+olfactory+impairment+in+fathead+minnows+%28Pimephales+promelas%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Copper binding dynamics and olfactory impairment in fathead minnows (Pimephales promelas).</a> Environ Sci Technol. 44 (4), 1431-1437 (2010).</li>
</ol>

Ticari, firma veya ürün adlarının herhangi bir şekilde kullanılması yalnızca açıklama amaçlıdır ve ABD Hükümeti tarafından onaylandığı anlamına gelmez.

nedeniyle kirletici maruz kalma davranış değişiklikleri genellikle alt öldürücü toksisite için bir son nokta olarak kullanılır, ancak ölçmek zor olabilir. Genellikle, davranış yanıtları işlemek için çok fazla zaman gerektiren görsel gözlem ve manuel veri analizi ile ölçülmektedir. Ancak ilerleyen teknolojiyle birlikte, ölçülmesi yüzme faaliyeti için yöntemler işleme ve analiz süresini kısaltır videography 18 ve hareket analizi veya dijital izleme yazılımını kullanarak odaklanmıştır. Videonun analizi sırasında yani mersin balığı yüzme davranışlarını analiz için daha etkin ve verimli bir şekilde sağlanan video veri kayıtları ve balık izleme yazılımı kullanımını alıcı elle çok zaman olurdu yüzme değişkenler miktarının, verileri ele geçirdi. Prosedür böyle basit değişiklikler gerektirecektir Kurbağa ve sucul omurgasızlar gibi diğer canlılar için özelleştirme, bir balığın davranışlarını yüzme vurgulanan rağmen. Ne davranışsal endpoin bağlıts deneysel tasarım ve kamera sistemleri hemen hemen her piyasada mevcut izleme yazılım paketi ile kullanılmak üzere geliştirilmiş olabilir, ele alınmaktadır. yöntem çözünmüş bakır kullanılarak ortaya, ama diğer sulu kirletici veya sıcaklık veya oksijen içeriği gibi özelliklere uygulanabilir olduğu. Bu yazıda geliştirilen ve sunulan protokoller kayıt cihazı gibi basit bir dijital video kamera kullandı. Dijital dosyaları kolayca bir bilgisayara aktarılır ve hareket analiz yazılımı olarak yüklenir. yöntemler sürekli değiştirilmiş ve miktar süreci hızlandırmaya yönelik rafine ediliyor. Video kalitesi izleme için her balık tanımlamak için analiz yazılımı için sırayla yüksek çözünürlükle olması zorunludur. veri dosyalarını işlemek için çalışırken balık ile kontrast olmayan herhangi bir arka plan sorunlara neden olur. İki boyutlu bir video izleme ile diğer ortak sorunu tanımlayan bireyler olduğunuyüzme yolları geçerken. Bu yol geçişi sırasında her balık belirlenmesi ve yazılım içindeki yol parçalarını birbirine bağlayan el düzeltilebilir. Seçenek olarak ise, toplam etkinlik, bir grup ortalaması olarak, her çoğaltma bölmesinden belirlenebilir. bir balık içeren her biri ile birkaç ayrı odaları tek tek balık hareketlerini hesaplamak için aynı görüş alanında filme olabilir. Şu anda biz yüksek çözünürlüklü dijital video kayıt cihazı (HD-DVR) bağlı kalma odaları üzerinde havai güvenlik kameraları bir dizi kullanarak yükselttiniz. Ancak, yüksek tanımlı MPEG-4 video kaydedebilirsiniz herhangi bir kamera sisteminin kullanımı çalışacaktır. HD-DVR belirli bir zamanda kayıt ayarlanır ve 7 güne kadar programlanabilir. yaklaşım otomatik Bu hands-off balık davranışları tehlikeye atabilecek dış bozuklukları en aza indirerek tutarlılığı korumak için aynı anda birkaç video yakalama sağlar. HD-DVR sistems bir iç ağa bağlı, dosyaların aktarılması oldukça basittir. Otomatik kamera sistemi yüzme davranışını ölçülmesi için bir çok gelişmiş teknik olmasına rağmen, yine de toksisite testleri sırasında davranışsal bozukluk belgelenmesi için ek destek bilgileri sunmak için görsel incelemelerde bulunmak amacıyla faydalıdır. 1960&#39;ların başında 19,20,21 kadar uzanan metallere maruz kalma sonucu literatür belgeleyen değişmiş balık davranışlarının uzun bir geçmişi vardır. Bakır gibi Bluegill 22 hipoaktivite olarak aktivite düzeyleri değişikliklere neden olduğu gösterilmiştir (Lepomis macrochirus rafinesque) ve lokomotor değişiklikler ve alabalığı 23 beslenme aktivitesi (Salvelinus fontinalis). En azından bazı yavru balık algılamak ve predatör önlemek ve bakır kaynaklı kimyasal-duyusal yoksunluk tespit alarm kimyasallar 24,25,26 ilgili davranışları etkileyebilir için koku alma duygusu güveniyor </sup&gt;. Koku epiteli nedeniyle böylece oryantasyon bozukluğu, davranış kaçınma, azaltılmış beslenme ve olfaction 27 tarafından yönlendirilir başka davranışlar neden olabilir duyusal mekanizmaların etkileyen bakır maruz kalma hasar görmüştür. Bunlar değişmiş davranışlar poz sırasında gözlemlenen ne ile uyumlu idi. beyaz mersin yüzme davranışı büyük ölçüde Bu sonuçlar davranış bakır öldürücü olmayan konsantrasyonlarında etkilenir ve toksik stresin bir göstergesi olarak nasıl kullanılabileceğini göstermek .. sulu bakır konsantrasyonlarına öldürücü pozlama sırasında etkilendi. Video tabanlı analiz yüzme davranışı miktarının etkili olduğunu kanıtladı ve aynı zamanda bakır maruz mersin balığı üzerinde ciddi etkileri kalitatif görsel belgeler olarak görev yaptı. analiz yazılımı da diğer çeşitli davranışsal uç noktaları miktarının yeteneğine sahiptir. Listesi için Tablo 1&#39;e bakınız. poz sistemi her bir son nokta için değiştirilebilirGerçek zamanlı mod ve endişe, çeşitli kirletici maddelere maruz kalma ile bağlantılı davranış farklılıkları ölçmek için kullanılabilir. Sudaki toksikolojik araştırmalarda davranış uç noktaları kullanımı giderek istihdam ve adaptif davranış fonksiyon çevre yaralanma 9 belirlenmesinde çok önemlidir, çünkü kirleticilerin etkilerini değerlendirirken dikkate alınmalıdır. Balık davranışına çevresel kirletici etkileri genellikle sübjektif ve standart yöntemlerle yokluğunda öldürücü olmayan bitiş noktaları ile uğraşırken özellikle zorlu olduğunu .. titizlikle izlenebilir bu yöntemleri kullanarak sayısal olarak yüzme etkinliği, organizmaya az stres ile tahribatsız ve tekrarlanabilir. Davranışı Yüzme standart toksisite testlerinin 5 hassasiyetini genişletmek için deney protokolleri dahil edilmelidir öldürücü toksisite geçerli ve tutarlı endeksidir.

kirletici poz davranışını nasıl etkilediğini anlamak bazen çok zor ve subjektiftir. Davranış genellikle santral sinir sistemi üzerinden çalışacak ve hayatta büyümek ve üreme bir organizma sağlayacak açık, gözlemlenebilir, tüm vücut bir dizi etkinlik olarak tanımlanmaktadır. Hayatta kalma 1 ile karşılaştırıldığında nedeniyle zehiri maruz kalma davranış değişiklikleri, çevresel stres, genellikle 10-100 arası kat daha hassas en hassas göstergelerinden birisidir. Bu çalışmaların büyük çoğunluğu faaliyeti, havalandırma, yüzme ve balık 2,3,4 davranışını yiyecek arama incelenir. Yüzme etkinliği toksisite testleri 5 bir kirletici karşılık olarak bir davranış değişikliği belirlenmesinde en sık kullanılan subletal uç noktasıdır. Yüzme değişkenleri sıklığı ve seyahat hareket, hız ve mesafe süresini, sıklığını ve dönüşlerin açısını, konumunu su kolonu ve yüzme desen içerir. Yüzme aktivitediryüzme davranışı etkili bir önlem Sucul Toksikoloji kitap Temelleri Rand 6 ile Bölüm 9&#39;da önerilen kriterlere göre bir zehiri duyarlılığın değerlendirilmesi. Bu yazıda erken gelişmenin çeşitli aşamalarında erken yaşam evresi beyaz mersin bakır toksisitesi (Acipenser transmontanus) Su sadece yüzme davranışı değerlendirilmiştir mersin göre maruziyet nasıl bir örnek olarak bir toksikolojik çalışma sunar ve yüzme ölçülmesine yönelik yöntemler göstermektedir davranış. Daha önceki çalışmalarda, advers davranışsal tepkileri bakır akut ve kronik maruziyetin ilk birkaç gün boyunca erken başlangıçlı belirgindi ve maruz kalma süresi ve konsantrasyon 7,8,9 üzerinde giderek daha şiddetli hale geldi. büyüklüğü ve bu davranışsal tepkilerin başlama zamanlaması uzun süreli sağkalım sınırlandırmak için yeterli muhtemeldir ve bu nedenle recrui için sonuçlar göz önüne alındığında endişe vardırtment hatası 10. doğru, metal maruziyeti yöntemler ve prosedürler bu duyarlılığın önemini yorumlamak için bakır konsantrasyonları göre davranışsal bozuklukların zaman sürecini ve kapsamını ölçülmesi için geliştirilmiştir. davranışsal fonksiyon ve gelişimi için test protokolleri poz odalarında mersin balığı havai video örnekleri analiz edilerek kuruldu. video örnekleri maruziyet süresi boyunca bakır tedaviler arasında gelişimi ve işlevi niteliksel bir değerlendirme sağladı. Davranış ve barınak arayan faaliyeti gerçekleştirmek üzere ve koordinasyon, denge ve solunum yüzme, barınak arayışı, uyuşukluk etkileyen düşüklüğü zamansal dizisi karakterize etmek zamanı belirlemek için sulu bakır konsantrasyonları maruz sırasında değerlendirildi. Buna ek olarak, video kayıtları kantitatif belgeleyen kendiliğinden yüzme ACTi amacıyla çoğaltma her birinden alt örnekler mersin yapılmıştırvity. Bu bitiş noktaları süresi tedbirleri dahil veya zaman hız ve mesafe piyasada bulunan bir dijital görüntü analiz yazılımı paketi kullanarak 5,11 gitti, yüzme hareketli geçirdi. Bu yazılım bir görüş alanı içindeki her görüntünün ana hatlarını belirler ve bundan, her resim için merkezini tanımlar. Yazılım sonra hareketin yolları belirlemek için çerçeve arkaya bir çerçeve içinde her centroid konumunu izleyebilirsiniz. Hayvan Refahı Yasası düzenlemelerine (9 CFR) Final Kuralları geçerli tüm bölümleri ile kültür ve deney sırasında test organizmalarının insani tedavisi için tüm kurumsal kurallarına uyulması Bu çalışma. Çalışmanın sona ermesi üzerine, bütün balık US Geological Survey için Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu, Columbia Çevre Araştırma Merkezi tarafından onaylanmış uygun kurallarına göre ötenazi uygulandı.

<table><tbody><tr><td>bakır II sülfat pentahidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td>kirletici endişe</td></tr><tr><td>şırınga dağıtıcısı</td><td>Hamilton MicroLab 600 Serisi</td><td></td><td>kimyasalı çivilemek için aparat</td></tr><tr><td>Stok çözeltisini tutmak için</td><td>2 L hacimsel şişe</td><td></td><td></td> kabı</tr><tr><td>24-1.5 L cam kavanoz</td><td></td><td></td><td>test odası 2 dph mersin balığı</td></tr><tr><td>video kamera</td><td>Sony Handycam HDR-CX550V</td><td></td><td></td></tr><tr><td>dijital izleme yazılımı</td><td>Noldus Ethovision</td><td></td><td></td></tr><tr><td>3-17" düz ekran monitörler</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>24 gözetleme kameraları</td><td>Model CL101</td><td></td><td></td></tr><tr><td>3-16 kanallı dijital kayıt cihazları</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DO metre</td><td>YSI</td><td></td><td></td></tr><tr><td>pH metre</td><td>Orion 940</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ph probu</td><td>Orion&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>amonyak metre</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>amonyak probu</td><td>Orion</td><td></td><td></td></tr><tr><td>soğutucu ünitesi</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>devridaim su pompası</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

bilgisayar destekli video ve dijital görüntü analizi sulu bakır akut maruz cevabı balık yüzme davranışı nicel

Quantifying Fish Swimming Behavior in Response to Acute Exposure of Aqueous Copper Using Computer Assisted Video and Digital Image Analysis

Sucul organizmaların çevresel kirleticilere verdiği davranışsal tepkiler, hayatta kalma, büyüme veya üreme gibi diğer etkilerin öncüsü olabilir. Bununla birlikte, bu tepkiler ince olabilir ve ölçüm zor olabilir. Bakır maruziyetli genç beyaz mersin balığı (Acipenser transmontanus) kullanan bu makale, bilgisayar destekli video ve dijital görüntü analizi kullanarak davranışsal tepkileri ölçmek için kullanılan teknikleri göstermektedir. Önceki çalışmalarda, bakıra akut ve kronik maruziyetler sırasında erken yaşam evresi beyaz mersin balığı arasında yüzme davranışında ciddi bozulmalar gözlenmiştir. Mersin balığı davranışı hızla bozuldu ve balıklar akıntıya karşı süpürüleceği veya avcılar tarafından kolayca yakalanacağı için tarlada hayatta kalmanın tehlikeye gireceği ölçüde. Bu araştırmanın amaçları, erken yaşam evresi gelişimi sırasında etki süresini belirlemek için bir dizi akut bakır maruziyeti sırasında yüzme aktivitesini ölçmek için protokolleri göstermek ve bu savunmasız erken yaşam evresi balıklarının hayatta kalmasına ilişkin bu tepkilerin önemini anlamaktı. Ölüm oranının bir zaman sürekliliği içinde olmasıyla, bakırın yüzme yeteneğini ilk kez ne zaman etkilediğini belirlemek, popülasyon düzeyindeki etkilerin etkilerini anlamamıza yardımcı olur. Kullanılan teknikler, diğer organizmalar ve stres faktörleri ile deneysel tasarımlara kolayca uyarlanabilir.

El ile işleme görsel gözlemsel veriler 2 gün sonrası ambar (DPH) mersin (Şekil 2) ile başlatılan maruz kalma sadece 72 saat sonra artan bakır konsantrasyonu artmış yüzde anormallik saptandı. video örnekleri mersin balığı yüzme davranışları üzerindeki bakır maruz aşırı etkisi (Video 2) belgelenen ve bunun sonucunda davranış bozukluğu tanımlanmasında destekli. Bir başka örnekte, 30 DPH de mersin mortalite ancak göre 40.3 ug / L arasında 96 saat ortalama letal etki konsantrasyonu (LC50) bakır maruz duyarlı olduğunu kanıtladı. Ancak, denge ve immobilizasyon kaybı sublethal davranış uç noktaları mortalite ile birlikte dahil edildiğinde 2.4 ile 5.0 ug / L arasında değişen tahmini 96 saat medyan etki konsantrasyonu (EC50) ile duyarlılık artar. Kaydedilen davranışsal anormallikler Video belgeleri bu öldürücü etkileri yakalanır ve daha doğrulanmış insan gözlemlermaruz kalma sırasında. yüzme aktivitesini analiz ederken dijital izleme yazılımı kullanımı önemli ölçüde sonrası işlem süresi azalır. Balık yüzme hızı, zaman hareketli geçirdi ve mesafe tüm önemli ölçüde artan bakır konsantrasyonu ile (Şekil 3) azalmıştır seyahat. Yüzme yolları da artan bakır konsantrasyonu (Şekil 4) ile indirgendi. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/53477/53477fig1.jpg" /> Şekil 1:.. Test stok solüsyonu konsantrasyonu hedef konsantrasyonuna dayalı bir tablo şablonunu kullanarak tespit edildi dilütör toksisite testleri için kimyasal stok hazırlama belirlemek için kullanılan bir tablo şablonunun Bilgisayar ekran <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53477/53477fig1large.jpg" target="_blank">bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> Şekil 2:. Diluter kurulumu ve deneysel tasarım beyaz mersin çeşitli yaşam evreleri bakır maruz bırakıldı. pozlama için kullanılan eriyik boyutu balık büyüklüğüne göre seçildi. (A) Erken yaşam evresi mersin balığı büyük dilütör kurulumu kullanarak maruz bırakıldı, küçük bir dilütör kurulum ve (b) eski yaşam evresi mersin balığı kullanılarak maruz bırakıldı. <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/53477/53477fig3.jpg" /> Şekil 3: (30 gün sonrası ambar [DPH] balık ile başlayan) bir erken yaşam evresi beyaz mersin (Acipenser transmontanus) 72 saat bakır maruz itibaren yüzme davranış sonuçları. Beyaz mersin DPH 30 arasında hareket Yüzme aktivitesi bitiş noktaları (a) süresi; (B) yüzme hızı; ve (c </taşınır strong&gt;) mesafe 96 saat süreyle maruz beyaz mersin arasında bakır konsantrasyonu artan düşmüştür. Asterisk kontrolünden anlamlı bir farkı belirtir, Hata çubukları, standart sapmayı temsil ederler. <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/53477/53477fig4.jpg" /> Şekil 4:. Erken yaşam evresi beyaz mersin (Acipenser transmontanus) 96 saat bakır maruz sonuçları bir 72 saat sonra denge ve immobilizasyon kaybı sergileyen 2 DPH beyaz mersinbalığı Yaşayan (2 gün sonrası ambar [DPH] balık ile başlayan) bakır konsantrasyonu artan 96 saat maruz kalma. Asterisk kontrolünden anlamlı bir farkı belirtir, Hata çubukları, standart sapmayı temsil ederler. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/53477/53477fig5.jpg" /> Şekil 5: Erken yaşam evresi beyaz mersin Örnek yüzme yol sonuçları (Acipenser Transmontanus) 96 saat bakır poz (30 gün sonrası ambar [DPH] balık) ile bakıyordu. mersin Yüzme yolları (n = 5 balık) ve (b) yüksek tedaviden (50 (a) kontrol tekrarında dijital izleme yazılımı kullanılarak sayısallaştırılmış 96 saat maruz bırakıldıktan sonra ug / L), tekrarlanan (n = 3 balık). Bazı balık inaktif çünkü odasında balık mevcut sayısını temsil etmiyor yüzme yolları sayısını not edin. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53477/53477fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <table fo:keep-together.within-page="1"><tbody><tr><td> ölçülebilir Parametre </td><td> gözlemsel Parametreler </td></tr><tr><td> hız </td><td> Uyuşukluk / Hiperaktivite </td></tr><tr><td> Mesafe taşındı </td><td> Denge kaybı </td></tr><tr><td> zaman süresi alanında geçen </td><td> Spazmlar / titreme / başaşağı </td></tr><tr><td> Seçilen bölgeler arasındaki kere organizma hareket Zone geçiş sayısı </td><td> su sütununda pozisyonu </td></tr><tr><td> başlığı ilgi noktasına doğru hayvanın yolunun sapmasını noktası hesaplar </td><td> Solunum (hızlı / yavaş) </td></tr><tr><td> Başlık seçilen vücut noktasının başlığını hesaplar </td><td> renklendirme </td></tr><tr><td> İki örnek arasındaki kısımdaki açı farkını açmak </td><td> gizleme </td></tr><tr><td> Açısal hız hesaplanan örnek aralığına göre dönüş açısını bölerek </td><td></td></tr><tr><td> taşındı mesafeye göre dönüş açısını bölerek Menderes hesaplanır. farklı hızlarda hareket eden hayvanlarda dönüm karşılaştırmak için kullanılır </td><td></td></tr><tr><td> Zaman hareketli geçirdi </td><td></td></tr><tr><td> Hareketlilik bile yüzde ise, tam alan hayvan değişiyor olarak algılanan süreyi devlet hesaplarer noktası aynı kalır </td><td></td></tr><tr><td> Seçilen vücut noktası 360 ° kümülatif dönüş açısına sahip olduğunda rotasyon-bir dönüş tamamlanır. göz ardı edilir eşikten az zıt yönde döner. </td><td></td></tr><tr><td> Hareketlilik merkez noktası aynı kalsa bile, tespit edilen hayvanın tam alan için hareketlilik yüzdesini sürekli hesaplar. </td><td></td></tr><tr><td> arasındaki mesafe tüm aktörlerin ve seçilen alıcıları arasındaki mesafeyi konular hesaplar </td><td></td></tr><tr><td> aktör veya alıcı yakınlık değildir süreyi Yakınlık-hesaplar </td><td></td></tr><tr><td> Nispi hareket </td><td></td></tr><tr><td> aralarındaki mesafeye göre ağırlıklı net ağırlıklı hareket-(pozitif) için aktör hareketi ve gelen (negatif) alıcı, </td><td></td></tr><tr><td> Ağırlıklı hareket dan-MOVEME<html> aralarındaki mesafeye göre ağırlıklı alıcıdan aktör, bir nt. </td><td></td></tr><tr><td> aralarındaki mesafeye göre ağırlıklı alıcıya aktör hareketi to Ağırlıklı hareket, </td><td></td></tr><tr><td> İki Deneme Kontrol elemanlarının olaylar, ya da bir eleman içinde arasındaki Deneme kontrolü devlet dönemi </td><td></td></tr><tr><td> Bir elemanın içinde bir olay Deneme Kontrol tanımlanan aldığınız Deneme kontrol olay anı oluşur. </td><td></td></tr></tbody></table> Tablo 1:. Dijital izleme yazılımı aracılığıyla sayısal Davranış uç noktaları Bu bitiş noktaları bireyler veya gruplar üzerinde kullanılan ve aynı zamanda pozlama sırasında davranışsal bozukluk görsel gözlem kontroller için bir liste olarak hizmet edilebilir. <img alt="Video 1" src="/files/ftp_upload/53477/53477movie1.jpg" /> &quot;/www.jove.com/files/ftp_upload/53477/53477video1.avi&gt; Video 1:. Etkilenen beyaz mersin tarafından sergilenen anormal davranış Görsel tanımı günlük gözlem kontrol listesi anormallikleri belgelemek için kullanılan (Sağ indirmek için tıklayın). denge ve immobilizasyon kaybı maruz. Calfee ark Modifiye gözlenen en yaygın anormallikler vardı. 7 <img alt="Video 2" src="/files/ftp_upload/53477/53477movie2.jpg" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53477/53477video2.avi">Video 2: Beyaz mersin balığı yüzme davranış örneği vurgulayarak Görsel belgeler. (Sağ indirmek için tıklayın)</a> Beyaz mersin balığı yüzme etkinliği büyük ölçüde artan bakır konsantrasyonuna maruz kalma ile indirgendi. Bu video tasvir mersin Bir kontrol olarak, orta düşük, ve 96 saat sulu bir bakır sonunda yüksek bir tedavi olduğumaruz kalma. Beyaz mersin balığı hala hayatta olmasına rağmen balık büyük kontrollerle karşılaştırıldığında tedavilerde engelli edildi belirgindir. Calfee ve ark Modifiye. 7

Balık davranışları üzerindeki çevresel kirleticilerin etkilerini ölçülmesi genellikle sübjektif ve öldürücü bitiş noktaları ile uğraşırken özellikle zorlu olduğunu. Biz sırasında ve bakır çeşitli konsantrasyonlarda 96 saat akut maruz kalma sonrası erken yaşam evresi beyaz mersin (Acipenser transmontanus) yüzme davranışlarını ölçmek için video teknolojisi de dahil olmak üzere yöntemler açıklanmaktadır.

Bilgisayar Destekli Video ve Dijital Görüntü Analizi Sulu Bakır Akut Maruz Cevabı Balık Yüzme Davranışı nicel

Behavioral responses of aquatic organisms to environmental contaminants can be precursors of other effects such as survival, growth, or reproduction.  ...

Bu prosedürün genel amacı, beyaz sturgeonların sulu bakırın subletal maruziyetine karşı davranışsal yanıtlarının nasıl nicelleştirileceğini göstermektir. Bu yöntem, kirleticilere subletal maruziyetin balıkların yüzme davranışlarını nasıl etkilediği gibi ekotoksikoloji alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu yöntem, beyaz sturgeonların korunması için önemli bilgiler sağlayabilir.Bu yöntem ayrıca diğer balık türlerine, amfibilere ve omurgasızlara da kolaylıkla uygulanabilir. Bu tekniğin temel avantajı, yanıtın oldukça hassas olması, toksisiteye dair erken bir gösterge sağlaması ve organizma sağkalımıyla ilişkili olmasıdır. Başlangıçta, kişi davranışsal ölçümler yapma konusunda deneyimsizse bu yöntem zorlayıcı olabilir.Protokolü, ortak yazarım Holly Puglis uygulamalı olarak gösterecektir. İlk olarak, iki litre sulu reaktif düzeyinde bakır(II) sülfat pentahidrat hazırlayın. Ardından, seyreltici sistemi ve maruziyet tanklarını dengeleyin.Otomatik şırınga dağıtıcının emiş borusunu stok çözelti balonuna yerleştirin. Ardından, otomatik pompa ekleme hacmini bir mililitreye ayarlayın ve seyrelticiyi çalıştırın. Sistem, beş farklı konsantrasyondan oluşan %50'lik bir seyreltme serisi ve bir kontrol hazırlar.Bu çözeltiler, dört yollu bir ayırıcı aracılığıyla dört tekrarlı maruziyet odasına iletilir. Ardından, su banyosunu 15 °C'de tutacak şekilde ayarlanan soğutucunun pompasını çalıştırın. Şimdi, seyrelticinin otomatik zamanlayıcısını kullanarak, bunu her 30 dakikada bir döngü yapacak şekilde ayarlayın.Tanklardaki su seviyesi, bir tahliye borusuyla (stand pipe drain) korunur. Yan tarafa dört santimetrelik bir delik açarak ve bu deliği 30 mikron paslanmaz çelik tel örgü ile kapatarak maruziyet kameralarını hazırlayın. 10 gram balık başına en az bir litre su kapasitesine sahip maruziyet kameraları seçtiğinizden emin olun.Örneğin, 89 günlük bir beyaz sturgeon yaklaşık 373 miligram ağırlığındadır ve bu nedenle 28 santimetreye 13,5 santimetreye 25 santimetrelik kare bir bölmede test edilebilir. Deneyin başlangıcında, orta noktasında ve sonunda, kimyasal analiz için 24 mililitrelik test çözeltisi alt örnekleri toplayın. Plastik şırıngalara bağlı emici pipetler kullanın.Sipir pipeti 0,45 µm polietersulfon filtre ile değiştirin ve filtreden 4 mL test suyu geçirin. Bu suyu atın. Ardından, geri kalan 20 mL suyu asitle temizlenmiş bir polietilen şişeye filtreleyin.Numuneyi, hacimce %1 olacak şekilde 16 molar nitrik asit ile asitlendirin. Bu numuneler üç aya kadar saklanabilir. Test maruziyetleri onaylandıktan sonra, her bir tekrarlı test haznesine, hazne litresi başına yaklaşık 172 miligram balık düşecek şekilde üç adet mersin balığı yerleştirin.Sturgeonları aşındırıcı olmayan bir ağ ile toplayın ve küçük bir kovaya aktarın. Toplamda, altı test çözeltisinden veri toplamak için 144 balığa ihtiyaç vardır. 96 saatlik maruziyet süresince balıkları beslemeyin.Ölümleri ve anormal davranışları puanlamak için tutarlı günlük gözlemler yapılmalıdır. Bunun için günün en uygun zamanı sabah saatleridir ve ideal olarak gözlemci, test koşullarını bilmemelidir. Denge kaybı, balıkların su sütunu içinde dik konumunu koruyamaması olarak tanımlanır.Hareketsizlik, balıkların dürtülmedikçe hareket edememesi veya yüzememesi şeklinde tanımlanır. Ayrıca letarji, hiperaktivite, solunumda artış veya azalışlar, renk değişimleri, titremeler, spazmlar, şişkin karınlar, su sütunundaki konum ve diğer tüm olağandışı yüzme modelleri gibi diğer anormallikler de kaydedilmelidir. Ölü balıklar her zaman derhal uzaklaştırılmalıdır.Her gün, el tipi bir ölçüm cihazı ile iki su örneğinin çözünmüş oksijen seviyelerini de ölçün. 96 saatlik maruz bırakma süresinin sonunda, yüzme davranışı analizi için videolar çekin. Test arenasını bir maruz bırakma tankının içine yerleştirin.Balıkların serbestçe yüzebilmesi için yeterince büyük bir test alanı seçtiğinizden emin olun. Her bir test alanının tam üzerine, bir tripod yardımıyla el kamerası yerleştirin. Ardından, işlem görmüş balıklar arasından rastgele en fazla üç sağ kalan birey seçin.Küçük bir ağ kullanarak üç tanesini test arenasına aktarın. Balıkların arenaya alışması için yaklaşık 30 dakika bekleyin. Balıklar alışırken görüntüyü odaklayın, hareketli suyun neden olduğu parlama bozulmalarını en aza indirin ve balıkların arka plana karşı kontrastını maksimize ederek, balıkların görünürlüğünün kapanmayacağı şekilde görünümü ayarlayın.Balık adapte olduktan sonra kayda başlayın ve iki dakikalık video verisi toplayın. Videoyu çektikten sonra balığı itlaf edin ve uygun şekilde bertaraf edin. Video dosyalarını dijital analiz yazılımının gerektirdiği formata dönüştürdükten sonra, takip yazılımını açın ve ana ekrandaki yeni bir deney oluşturma seçeneği altında yeni varsayılan deneyi seçin.İstenen bilgileri doldurun ve tamam'a basın. Ardından, kurulum altındaki deney ayarları seçeneğine gidin ve video kaynağı altından video dosyasını seçin. Arena sayısını bir olarak ayarlayın.Arena başına denek sayısını üç olarak ayarlayın. Ardından, izlenen özellikler altından merkez nokta tespitini seçin ve istediğiniz birimleri belirleyin. Şimdi, kurulum altında deney listesi seçeneğini seçin ve ekranın üst kısmındaki videoları ekle düğmesine tıklayın.İletişim kutusundan alfabetik sırayı seçin. Gözat'a tıklayın. Videoların bulunduğu klasöre gidin, ilgili dosyaları vurgulayın ve aç'a tıklayın.Video dosyaları seçildikten sonra, yazılımda deneyin kapsamını tanımlama işlemine geçin. Öncelikle, ekranın üst kısmındaki değişken ekle butonuna tıklayın ve etiket kutusuna konsantrasyon yazın. Açıklama kutusuna ise mikrogram/litre cinsinden bakır konsantrasyonu girin.Ardından, tür için açılır listeden sayısal seçeneğini belirleyin. Ön tanımlı değerler kutusuna tıklayın ve iletişim kutusundan bireysel değerleri tanımla seçeneğini seçin. Her sayı eklemede ekle butonuna tıklayarak deneyde kullanılan konsantrasyonları girin.Ardından, diğer değerlere izin ver seçeneğindeki işareti kaldırın ve tamam'a tıklayın. Kapsam kutusundaki açılır menüden deneme seçeneğini belirleyin. Sağlanan kutucuklara her bir deneme için uygun konsantrasyonu girin.Ekranın üst kısmındaki değişken ekle seçeneğine tıklayın. Etiket kutusuna replicate yazın. Açıklama kutusuna replicate number yazın.Tür için açılır listeden numerical seçeneğini seçin. Ardından, pre-defined values kutusuna tıklayın ve diyalog kutusundan define individual values seçeneğini seçin. Bir, iki, üç ve dört değerlerini girin ve allow other values seçeneğinin işaretini kaldırın.Ardından, tamam'a tıklayın. Şimdi, kapsam kutusundaki açılır menüden deneme seçeneğini belirleyin. Her deneme için uygun tekrar sayısını girin.Sıradaki görev arena alanlarını kurmaktır. Kurulum sekmesi altındaki arena ayarlarını seçmekle başlayın ve ilk ayarı "deneme bir" olarak adlandırın. Diyalog kutusundan arka plan görüntüsünü al seçeneğini belirleyin ve gözat düğmesine tıklayın.Birinci deneme için video dosyasını bulun ve aç'a tıklayın. Video göründükten sonra, arka plan görüntüsünü yakala iletişim kutusundaki yakala seçeneğine tıklayın. Ardından, ekranın üst kısmındaki arena ayarları altında bulunan beyaz daire simgesine tıklayın ve ortaya çıkan daireyi yüzme alanını çevreleyecek şekilde ayarlayın.Ardından, arena ayarları altındaki kalibrasyon ölçeği simgesine tıklayın. Arena alanını seçmek için tıklayıp basılı tutarak sürükleme hareketini kullanın. Şimdi, kalibrasyon mesafesindeki gerçek dünya mesafesi kutusuna 10,5 değerini girin.Ardından, tamam'a tıklayın. Gerektiğinde, kalibrasyon çizgisini dairesel arenanın tüm çapını kapsayacak şekilde ayarlayın. Arena ayarları kutusundaki arena ayarlarını doğrula seçeneğine tıklayın ve doğrulanmayan ayarlardaki sorunları giderin.Şimdi, her deneme için tüm arenalar tanımlanana kadar bu işlemi tekrarlayın. Ardından, balık tespit parametrelerini ayarlayın. Öncelikle, ekranın solundaki deney keşif araç çubuğunda bulunan kurulum seçeneği altından tespit ayarlarını seçin.Ardından, tespit ayarları bir iletişim kutusundaki yöntem altındaki açılır menüden dinamik çıkarma işlemini seçin. Ayrıca, iletişim kutusundaki denek tanımlama kısmından her bir denek için bir dolgu rengi seçin. Sonra, video seç kısmına tıklayın ve birinci deneme için olan videoyu bulun.Algılama ayarları bir diyaloğunda, video altındaki örnekleme hızı kutusuna 5.9941 değerini girin. Aynı kutuda, algılama altındaki referans görüntü seçeneği için ayarları tıklayın. Ardından, referans görüntü diyalog kutusundaki öğrenmeyi başlat C seçeneğine tıklayın.Referans görüntü iletişim kutusundaki görüntü hayvanlar olmadan göründüğünde, iletişim kutusundaki görüntüleme ayarları altındaki dinamik referans görüntüyü kullan seçeneğine tıklayın ve bu iletişim kutusunu kapatın. Şimdi, tespit ayarları iletişim kutusundaki tespit altındaki konu için açılır menüden daha koyu seçeneğini belirleyin. Tespit altındaki koyu kontrast için küçük sayıyı 33, büyük sayıyı ise 153 olarak ayarlayın.Ardından, sağ alt köşedeki değişiklikleri kaydet seçeneğine tıklayın. Şimdi, yazılımın gölgeler veya kalıntılar yerine hayvanları başarıyla takip ettiğini doğrulayın. Oynatma kontrol iletişim kutusundaki oynat düğmesine tıklayın ve gerektiği şekilde koyu kontrast değerlerini ayarlayın.Yapılan tüm ayarları kaydettiğinizden emin olun. Yazılım şu anda videodan veri toplayacak şekilde ayarlanmıştır, bu nedenle bir sonraki görev her denemede balığı takip etmektir. İlk olarak, ekranın solundaki deney gezgini araç çubuğunda yer alan kurulum seçeneği altından veri toplama (acquisition) işlemini seçin.Ardından, veri toplama ayarları iletişim kutusunda "track next planned trial" seçeneğine tıklayın ve doğru deneme, video ile arena ayarlarının tamamının veri toplama ayarları iletişim kutusundaki ayarlar altında görüntülendiğini onaylayın. Daha sonra, veri toplama kontrol iletişim kutusunda "detection determines speed" seçeneğini işaretleyin. Veri toplama işlemini başlatmak için beyaz bir kare içine alınmış yeşil daireli düğmeye tıklayın.Tüm denemeler takip edilene kadar bu işlemi tekrarlayın. Artık, takip edilen nesneler olan balıklar analiz edilebilir. İlk olarak, ekranın solundaki deney gezgini araç çubuğunda yer alan analiz seçeneğinin altındaki veri profilleri'ne tıklayın.Ardından, bileşenler araç çubuğundaki yuvalama (nesting) seçeneği altından zamanı seçin. Zaman iletişim kutusundaki iz zaman aralığını seçin ayarı altında, "to" değerini iki dakika olarak ayarlayın ve tamam'a tıklayın. Daha sonra, ekranın sağ tarafındaki veri profilleri alanında, yuvalama kutusunu başlangıç kutusu ile sonuç 1 kutusu arasına sürükleyin.Ekranın solundaki deney gezgini araç çubuğunda, analiz seçeneğinin altına bakın ve analiz profiline tıklayın. Ardından, bağımlı değişkenler araç çubuğunda, mesafe ve zaman başlığı altında hıza tıklayın. Ekle'ye tıklayın ve bağımlı değişkenler araç çubuğunda, mesafe ve zaman başlığı altında kat edilen mesafeye tıklayın.Ardından, kat edilen mesafe (distance moved) diyalog kutusunda ekle (add) seçeneğine tıklayın ve bağımlı değişkenler araç çubuğundaki bireysel davranış (individual behavior) başlığı altında hareket (movement) seçeneğine tıklayın. Hareket diyalog kutusunda, aykırı değer filtresi (outlier filter) başlığı altına bakın ve ortalama alma aralığını bir olarak ayarlayın. Daha sonra, eşik (threshold) başlığı altında, başlangıç hızını 2,00 ve duruş hızını 1,75 olarak ayarlayın.İstatistikleri hesapla başlığı altında, hem hareketli hem de hareketsiz seçeneklerinin kutucuklarını işaretleyin. Ardından ekle'ye tıklayın ve ekranın solundaki deney gezgini araç çubuğunda bulunan sonuçlar seçeneğinin altından analiz çıktısına tıklayın. Şimdi, hesapla'ya tıklayın.Bağımlı değişkenler hesaplandıktan sonra ekranın üst kısmındaki dışa aktar (export) seçeneğine tıklayın. Analiz çıktısını dışa aktarma iletişim kutusundan hedef klasörü seçin ve dosya türü açılır menüsünden Excel'i seçin. Ardından, tamam (okay) düğmesine tıklayın.Son olarak, ekranın üst kısmındaki dosya sekmesi altında deneyi kaydet seçeneğine tıklayın. Dijital takip yazılımını kapatın. Verileri bir hesap tablosu dosyasına aktarın ve ticari bir istatistiksel analiz yazılım paketi kullanarak analiz edin.Çeşitli bakır konsantrasyonlarına sadece 72 saatlik maruziyetten sonra, yumurtadan çıkışının üzerinden iki gün geçmiş olan mersin balıklarında birçok gözlemlenebilir anomali görüldü. Yüzme davranışı üzerinde belirgin bir etki vardı. Video verileri, bu davranışsal bozulmanın tanımlanmasına yardımcı oldu.Yapılan diğer testlerde, yumurtadan çıktıktan sonraki 30. gündeki mersin balıklarının 96 saatlik bakır maruziyetine duyarlı olduğu kanıtlanmıştır. Yüzme hızı, hareket halinde geçirilen süre ve kat edilen mesafe, bakır konsantrasyonlarının artışıyla birlikte anlamlı şekilde azalmıştır. Yüzme yolları da bakır konsantrasyonlarının artışıyla birlikte kısalmıştır.Bu videoyu izledikten sonra, bir toksisite testinde davranışların nasıl nicelleştirileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. Bu teknik, çevre yöneticilerine çevresel hasarı belgelemek ve restorasyona rehberlik etmek için davranışsal olarak tanımlanmış kriterleri kullanma imkanı sağlayabilir. Bu prosedürü gerçekleştirirken, davranışsal gözlemleri kaydederken tutarlı olmayı hatırlamak önemlidir.Kirletici maruziyetinin sağkalım üzerindeki uzun vadeli etkilerine dair ek soruları yanıtlamak amacıyla, beslenme ve agresyon gibi diğer davranışlar bu prosedür izlenerek nicelleştirilebilir.

quantifying-fish-swimming-behavior-response-to-acute-exposure-aqueous

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Görsel-Motor Yanıt hafif artışlarla ve azaltır yanıt larva zebrafish motor çıkışını ölçmek için geliştirdi. Biz de dahil olmak üzere başka bir görme testi optokinetik refleks tarafından test edildiğinde tamamen kör olduğu düşünülüyordu optokinetik yanıt (NRC) mutantlar, hiçbir zebrafish vizyon mutant inceledi.

Işık Parlaklıkları değişiklikler Zebra balığı, Duyarlılık Tedbir Davranış Testi

Balık çoğunluğunun yaşamlarını yüzme esas alınır. Bu protokol bir dizi bireysel ve okullaşma balık için kullanılabilir modları yüzme yakalama teknikleri açıklar ve yüzme fizyolojisi ve davranışları ile ilgili ölçümler şunlardır.

Balıklar yüzme Performans Değerlendirme

Burada immün-modülatör biyoaktif bileflikler tanımlanmasını amaçlayan bir roman yüksek içeriği kimyasal yolla oluşan inflamasyon testi açıklar. Biz başarıyla inflamatuvar yanıt olarak daha fazla veri işleme, analiz, madencilik ve depolama otomatik ölçümü sağlayan özel geliştirilmiş yazılım komut ile otomatik mikroskopi birleştirdik.

Kolaylaştırılması İlaç Keşfi: Zebra balığı An Otomatik Yüksek içeriği Enflamasyon Assay

Video, zebra balığı larvalarının kaçınma ve timotaksis testini anlatıyor. Video, zebra balığı larvalarının görsel caydırıcı uyarana yanıt olarak davranışlarını inceler.

Zebra Balığı Kaçınma ve Timotaksis Deneyi: Caydırıcı Görsel Uyarana Yanıt Olarak Larva Davranışını İncelemek İçin Yüksek Verimli Bir Yöntem

Bu serbest zaman uyumlu bir duyusal içinde özel olarak tasarlanmış bir akvaryum tank içinde hem doğru ve güvenilir bir hayvanın elektrik organı deşarj zamanlaması, vücut konumu ve duruşu ölçülerek, uzun bir süre boyunca zayıf elektrik balık yüzme spontan davranışını incelemek için teknikler bir dizi tanımlamak izolasyon odası.

Serbestçe Yüzme Zayıf Elektrik Balık Uzun vadeli Davranış Takip

Zebra balığı, kas fonksiyonlarını ve hastalıklarını incelemek için mükemmel bir modeldir. Erken embriyogenez sırasında zebra balığı düzenli kas kasılmalarına başlar ve ritmik yüzme davranışı üretir ve bu da kas bozulduğunda değişir. Burada, yüzme performansını kas fonksiyonunun bir ölçüsü olarak incelemek için dokunma ile uyarılmış bir tepki ve hareket testini açıklıyoruz.

Dokunmatik uyarılmış Yanıt ve Hareket Deneyleri kullanarak Zebra balığı kas Performans ve fonksiyonunu değerlendirmek için

Bu çalışmada, akut, kronik ve multigenerational bir bioassay turkuaz killifish Nothobranchius furzeritek ve kombine stresler etkilerini çalışmaya açıklar. Bu iletişim kuralı hayat-Tarih özellikleri (ölüm, büyüme, verimlilik, ağırlık) ve kritik termal maksimum çalışma için tasarlanmıştır.

Akut ve kronik Ecotoxicity test turkuaz Killifish Nothobranchius furzeri için iletişim kuralı

Burada, larva zebra balığı ve koca kafa minnow lokomotor aktivite ve bir otomatik izleme yazılımı kullanarak photomotor yanıt (PMR) incelemek için bir protokol mevcut. Ortak toksikoloji biyoanalizler dahil, bu davranışların analizleri kimyasal bioactivity incelemek için bir tanı aracı sağlarlar. Bu iletişim kuralı kafein, modeli neurostimulant kullanılarak açıklanmıştır.

Davranışsal yanıt profilleri larva balık incelenmesi için deneysel protokol: nöro-uyarıcı kafein uygulamaya

Burada, davranışları ve hayati bir mechanosensory sistem boyama yöntemleri için yüksek üretilen iş çalışma Meksika cavefish bir dizi mevcut. Bu yöntemler davranışları çalışmaları için pratik ve düşük maliyetli bir yöntem sağlayan ücretsiz yazılım ve özel komut dosyalarını kullanın.

Davranışsal izleme ve Meksika Cavefish Neuromast görüntüleme

Omurilik yaralanmasından sonra fonksiyonel iyileşme yeteneğine sahip olan yetişkin zebra balığı, doğuştan gelen nöral rejenerasyon mekanizmalarını aydınlatmak için önde gelen bir model sistemidir. Burada, yüzme dayanıklılığını ve yüzme davranışı testlerini omurilik rejenerasyonunun fonksiyonel okumaları olarak tanımlıyoruz.

Yetişkin Zebra Balıklarında Yüzme Dayanıklılığı ve Yüzme Davranışının Değerlendirilmesi

Çok odalı sosyal tercih görevleri, kemirgenlerden zebra balıklarına uyarlanmış ve model organizmalarda sosyal davranışın incelenmesini kolaylaştırmıştır. Bu protokol, web kameraları ve açık kaynak yazılımları kullanarak zebrafishin sosyal tercihlerini ölçmek için düşük maliyetli 3 odalı açık tank görevini doğrularak lisans araştırma ve öğretimine erişilebilir hale getirir.

Zebrabalıkta (Danio rerio) 3 odalı açık tankta serbest yüzme görevi kullanılarak sosyal tercihi incelemek için düşük maliyetli alternatif

Öğrenin beyaz mersin balığında bakır maruziyetine bağlı yüzme davranışlarını video analiziyle nicel olarak değerlendirme yöntemini. Bu hassas protokol, ekotoksikoloji ve su yaşamı koruma çalışmaları için erken toksisite belirtilerini objektif şekilde tespit eder.

Bilgisayar Destekli Video ve Dijital Görüntü Analizi Sulu Bakır Akut Maruz Cevabı Balık Yüzme Davranışı nicel

Daha fazla video keşfet