Bir Yenidoğan Fare Omurilik Sıkıştırma Yaralanması Modeli

Bu prosedürün genel amacı, yenidoğan bir farede tekrarlanabilir bir omurilik kompresyon yaralanması gerçekleştirmektir. Bu, önce farenin derin anestezi uygulanmasıyla elde edilir. Daha sonra omuriliği ortaya çıkarmak için dorsal laminektomi yapın.

Ve son olarak kompresyon yaralanması yaparak. Yakın zamanda omurilik yaralanması için bir yenidoğan fare modeli oluşturduk ve yenidoğan farelerinin şaşırtıcı derecede adaptif plastisite sergilediğini gösterdik. İyileşmenin altında yatan bu mekanizmayı incelemek, omurilik yaralanmasının tedavisinde kullanılabilecek önemli bilgiler sağlayabilir.

Bu videoda, bir günlük bir farede omurilik kompresyon yaralanmasının nasıl gerçekleştirileceğini göstereceğiz. Bu cerrahi prosedür, anestezi, laminektomi ve iki klips tahrikli epidural kompresyon içerir. Ameliyat için hazırlanıyor.

Ameliyat stereo mikroskop altında yapılır. Mikroskobun altına bir ısıtma pedi yerleştirin. Ameliyat sırasında ani ölümleri önlemek için yavruyu sıcak tutmak çok önemlidir.

Isıtma pedinin üzerine cerrahi bir battaniye veya büyük bir temiz yumuşak laboratuvar kağıdı yerleştirin. Cerrahi öncesi analjezi için, steril PBS ile seyreltilmiş lokal anestezik, Marcaine ile doldurulmuş, mililitre başına 2.5 miligramlık bir nihai konsantrasyona kadar 0.3 mililitre 30 gauge bir insülin şırıngası hazırlayın. Cilt kesisi, kas çıkarma ve laminektomi için mikro bıçak, ince forseps ve ince iridektomi makası kullanın.

Burada dişleri oluşturmak için uçlarından büktüğümüz forsepsleri de kullandığımızı unutmayın. Bunlar, piyasada bulunan dişli forsepslerden daha iyi çalışır çünkü dişlerin çok küçük olması gerekir. Omurilik sıkışması için, daha sonra anlatacağımız özel olarak modifiye edilmiş bir Yaşargil Geçici Anevrizma Miniclip kullanın.

Klipsin tamamen kapanmasını önlemek için bir durdurucu ve klipsi yerleştirmek için bir klips aplikatörü yapmak için küçük bir uzunlukta plastik kılcal boru da gereklidir. Dikiş atmak için, ipliği kesmek için bir iğne tutucu ve küçük bir makas kullanın. Ağrı tedavisi için, Temgesic'i steril PBS'de mililitre başına 0.03 miligrama seyreltin.

Omurilik yaralanması, Yaşargil Geçici Anevrizma Miniclip kullanılarak klips tahrikli bir kompresyon içerir. Kullanmadan önce, bıçakların kalınlığı bir bileme taşı kullanılarak 150 mikrometreye kadar kesilerek klipsin mekanik olarak değiştirilmesi gerekir. Ameliyattan hemen önce, kısa bir plastik boru şeridi kesin ve klips bıçaklarından birinin üzerine yerleştirin.

Boru, klipsin tamamen kapanmasını önlemek için bir durdurucu görevi görür. Anestezi ve analjezi. Gaz anestezisi için bir oksijen tankına bağlı bir supran buharlaştırıcı kullanıyoruz.

İzofluran, saf oksijende buharlaştırılan anesteziktir. İzofluran, Oksijen karışımını fareye dağıtmak için yenidoğanlara uyarlanmış bir burun maskesi yapmanız gerekir. Yenidoğan fareleri o kadar küçüktür ki, maske, buharlaştırıcının çıkışına bağlı plastik boru için giriş görevi gören bir şırınganın ucundan yapılabilir.

Maskenin yan tarafında, düzenlenmiş bir vakum pompasında, bir toplama ünitesiyle veya sadece bir davlumbazda biten bir tahliye tüpünü bağlamak için küçük bir delik açın. 150 x 25 mililitrelik plastik petri kabı kullanarak bir anestezi taşma odası yapın. Bir tarafta, farenin başı için yeterince büyük bir delik açın.

Karşı tarafta, plastik borunun çapında iki küçük delik açın. Son olarak, tabağın üstüne diğerlerinden daha küçük bir tahliye deliği açın. 250 mikrolitrelik bir pipet ucunun ucunu kesin ve bu son deliğe sokun.

Pipet ucu, hafif bir negatif basınç için ayarlanmış bir vakum cihazına bağlı tahliye tüpü için bir konektör görevi görür. Hamuru kullanarak, maskeyi farenin kafası için deliğin hemen içine sabitleyin. Bant veya hamuru kullanarak, plastik boruyu odanın tavanına sabitleyin ve tüplerin uygun deliklere iyi yerleştirildiğinden emin olun.

Odayı mikroskop altında cerrahi battaniyenin üzerine yerleştirin. Tüm sistem bu şemada temsil edilmektedir. Buharlaştırıcının çıkışına üç bir musluk yerleştirilmiştir.

Burada, uyku odasına giden yol serbesttir, maskeye giden yol tıkalıdır ve fare, sedasyonu başlatmak için uyku odasına yerleştirilebilir. Üç vanayı sağa çevirmek, gazın maskeye akmasına izin verir ve uyku odasına giden yolu tıkar. Bu konfigürasyonda, fare maskeye aktarılabilir.

Gaz sızıntısı, taşma odasından vakumla giderilir. Deriden görülebilen beyaz renkle kanıtlandığı gibi, yakın zamanda süt içen bir fare yavrusu seçin. Yavruyu uyku odasına yerleştirin ve hızlı bir sedasyon elde etmek için% 4'te buharlaştırılmış İzofluran verin.

Yavruyu maskeye aktarın. Anestezik gaza yeterli maruz kalmayı sağlamak için farenin burnunu dikkatlice maskenin içine iyice yerleştirin. Gazı maskeye doğru yönlendirmek için üç vanayı çevirin.

İstenilen ameliyat bölgesinde deri altına, mililitre başına 2.5 miligramda 50 mikrolitre Marcaine enjekte edin. Çok derin enjekte etmemeye dikkat edin, çünkü kan damarları kolayca vurulabilir ve Marcaine'in bir kaba sokulması öldürücüdür. Fazla Marcane'i küçük bir steril kompres ile silin.

Dorsal laminektomi. İzofluran konsantrasyonunu yüzde bir ila ikiye düşürün. Birkaç dakika sonra, cildi bir mikro bıçakla delin ve cildi rostral kaudal yönde nazikçe çekerek sekiz ila dokuz milimetrelik bir aktarım açıklığı açın.

Bir transfer açıklığı çok daha uygundur ve laminektomiyi gerçekleştirmek için daha iyi yanal erişim sağlar. İnsizyona deri altından rostral ve kaudal süngerimsi parçalar yerleştirerek deri kesisinin kenarlarını alttaki dokudan geri çekin. Omurgayı ortaya çıkarmak için prevertebral kasları ince bir makasla kesin.

Yenidoğanda, omurga sürecinin tam olarak gelişmediğini unutmayın. Orta çizgiyi belirleyin ve laminayı ince makasla enine kesin. Çok derin kesmemeye dikkat edin, çünkü bu potansiyel olarak duraya ve hatta omuriliğe zarar verebilir.

Lamina ve dura arasına ince bir forseps bıçağını dikkatlice yerleştirin. Forsepsleri kapatarak laminayı tutun ve ayrılana kadar dikkatlice kaldırın ve durayı sağlam bırakın. Bir ila iki segmentli laminektomi elde etmek için adımı iki ila üç kez tekrarlayın.

Küçük süngerimsi parçalar kullanarak kanamayı kontrol edin. İnce forsepsleri rongeur olarak kullanarak, modifiye anevrizma mini klipsini vertebral kanal içine yerleştirmek için yeterli alan kazanmak için faset eklemlerinin parçalarını bilateral olarak çıkarın. Bu adım genellikle küçük süngerimsi parçalar kullanılarak kontrol edilebilen kanama ile sonuçlanır.

Görünürlüğü artırmak için bazen 37 santigrat derece ılık steril PBS ile durulamak bir avantajdır. Omurilik kompresyon yaralanmasının oluşturulması. Klipsi açın ve bıçakları omuriliğin her iki tarafına, faset eklemleri ile kordon arasındaki boşluklara yerleştirin.

Bıçakların omuriliğin ventral kısmını kapsayacak kadar derine yerleştirildiğinden emin olun. Klipsin geriye doğru kaymasını önlemek için aplikatörü yerinde tutarken klipsi hızla kapatın. 15 saniye sonra klipsi hızla serbest bırakın.

Yarayı süngerimsi kullanarak temizleyin. Simetrik sıkıştırma elde etmek için bıçakları ters çevirin ve ters yönde 15 saniye boyunca ikinci bir sıkıştırma gerçekleştirin. Dikiş. Ameliyatın başlangıcında cilt altına yerleştirilen süngerimsi statin parçalarını çıkarın ve cildi 6.0 dikişle kapatın.

Mililitre başına 0.03 miligramda 0.05 mililitre, Temjezik enjekte edin. 30 gauge insülin şırıngası ile deri altına ve yavruyu birkaç saat boyunca 30 santigrat derecede sıcaklık kontrollü bir ortama yerleştirin. İlk gece boyunca ameliyat edilen yavruya karşı agresif anne davranışını azaltmak için, ameliyattan sonra, kilogram başına sekiz gramda intraperitoneal enjeksiyon için mililitre başına 0.1 miligrama kadar temiz PBS'de seyreltilmiş bir Diazepam çözeltisi hazırlayın. Sonuç -ları.

Bu grafikte gösterildiği gibi, omurilik kompresyonundan altı saat sonra, daha düşük torasik seviyelerde, yaralı farelerin arka ayakları felç olurken, ön ayaklar felç olmaz. Sadece laminektomi uygulanan sahte kontrol hayvanları söz konusu olduğunda, hem arka ayaklar hem de ön ayaklar oldukça hareketlidir. Omuriliğin bölümü, yaralanma görüntüsünde kalan kanı gösterir.

Ek olarak, doku yarı saydamdır, bu da doku kaybını düşündürür, bu da genellikle birkaç gün sonra bir boşluk oluşumuna yol açar. Son. Bu videodan sonra, yenidoğan bir farede omurilik kompresyon yaralanmasının nasıl oluşturulacağını iyi anlamış olmalısınız. Yenidoğan fareleri kullanmanın avantajı, yetişkin farelerde kullanılamayan adaptif plastisiteyi ele almak için özel yöntemler kullanabilmemizdir.

Ek olarak, model, kök hücre nakli gibi terapötik yaklaşımları test etmek için bir platform sağlar.