Name: Hazırlık ve Test zehirlilik için hızlı değerlendirme İçme Suyu Örnekleri için RTgill-W1 Hücreleri ile akışkan bioçipler Empedans tabanlı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-07T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 19 s
Description: Öğrenin, gökkuşağı alabalığı solungacı hücreleriyle hazırlanan akışkan bioçipler kullanarak empedans tabanlı biyosensörle içme suyu toksisitesini hızlıca değerlendirme yöntemini.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, ABD Ordusu Tıbbi Araştırma ve Malzeme Komutanlığı ve Küçük İşletme İnovasyon Araştırması ve Küçük İşletme Teknoloji Transferi programı tarafından desteklenmiştir; Sözleşme No. W81XWH-13-C-0093. Fraser Üniversitesi'nden Dr. Lucy Lee'ye RTgill-W1 hücre kültürü danışmanımız olduğu için teşekkür etmek ve Waterloo Üniversitesi'nden Dr. Niels Bols'a RTgill-W1cell serisinin geliştirilmesi için teşekkür etmek istiyoruz.

Test malzemelerinin hazırlanması 1. Not: test biyoçipler hazırlamak için, RTgill-W1 çeşitli hücre Birleşik kaplardan hazır olması gerekir. 16 biochip numaralı seribaşı olması için gerekli şişeler sayısının iyi bir tahmini bir konfluent T175 şişesi olduğunu. <ol><li> aseptik teknik kullanılarak bir sınıf II biyolojik güvenlik kabininde (biohood) aşağıdaki adımları uygulayın. biohood ve kaputun yerleştirilen herhangi bir malzeme dezenfekte edilmesi için% 70 etanol kullanımı. <ol><li> fibronektin, 1 mg tüp çözdürme ve 10 ug / ml&#39;lik bir konsantrasyonda steril L-15 ortamı, 100 ml seyreltilmesiyle akışkan bioçipler için fibronektin substratı hazırlayın. -20 ° C&#39;de steril 50 ml konik propilen tüplerinde 40 ml alikotları dondurun. bioçipler ekim öncesinde oda sıcaklığı birkaç saat çözülme. çözülmüş bir kez dondurursam yok. </li><li> Fetal sığır serumu 50 mi, 200 5 mi mM L-alanil-L-glutamin destek eklenerek hücre kültürü ortamı hazırlamakmana tamamlayıcı ve L-15 ortamı 500 ml penisilin / streptomisin solüsyonu (5 mi 10.000 birim penisilin / ml, 10,000 ug streptomisin / ml) hazır. Bu% 9 serum içeren hücre kültür ortamının 560 ml verecektir. Buzdolabında. Not: Bu kültür şişeleri ve bioçipler için kullanılan tam hücre kültür ortamı olacaktır. </li></ol></li><li> Pudralı Medya Flakon <ol><li> vaktinden otomatik toz dağıtıcı kullanılarak L-15ex tozu ± 0.5% 60 mg içeren 0.1 dram ek-kapaklı küçük şişelerden hazırlayın. recloseable metalize poli torbalarda (50 miktarlarda) toz dağıtılmıştır tarih ve buzdolabına şişeleri ile şişeleri etiketlemek; her biri, üç, 1 g silis jeli kuruma paketleri. Not: L-15ex toz medya şişeler yapılmış ve test öncesinde en fazla 9 ay süreyle saklanabilir. </li></ol></li><li> iyonu giderilmiş (Di) su ile çamaşır suyu seyrelterek 100 mi% 20 ağartıcı içeren bir çözelti yapmak. çamaşır suyu çözeltisi 5 ml her bi için gerekli olacağını Tahminochip. </li><li> (Her Biochip için 2 bölüm numaralı seribaşı olan) Otoklavlanabilir biyouyumlu boru 27 mm bölümlerini keserek biyoçip boru derlemeleri yapmak ve polikarbonat kayma luer parçaları ile tüpün her iki ucu uygun. 134 ° C&#39;de 8 dakika süreyle bir otoklav çantası ve otoklavda boru takımlarını yerleştirin. aynı ayarlarla ayrı bir çanta içinde de otoklav biyoçip bujileri (Biochip başına 2). </li><li> ° at121 30 dakika süreyle otoklavlanmaktadır saf su. Not: Bu su tohumlama sonra biyoçipler yıkamak için kullanılır. 10 ml her biochip için gerekli olacağını tahmin ediyoruz. Not: Her biyoçip kanalı gerçek hacmi 2 mi, ancak steril su 5 mi ağartma çözeltisinin ayrılmasından sonra, her bir kanal yoluyla durulanır. </li><li> biyouyumlu boru 27 mm bölümleri kesme ve boru her iki ucunda erkek kayma luer parçaları takarak şırınga enjeksiyon tüp meclisleri olun. 134 &amp; 8 dakika süreyle bir kağıt ısı mühür sterilizasyon kese ve otoklavda boru takımlarını yerleştirin# 176; C. </li></ol> 2. Akışkan Biochip Tohum Prosedürü Not: biochip veya medya aseptik teknik kullanılarak bir sınıf II biyolojik güvenlik kabininde işlenen tüm prosedürleri uygulayın. <ol><li> önce planlanan tohumlama yirmi dört saat, üretici biohood ambalaj ve sterilize plastik alet durumlarda yerden bioçipler kaldırın. </li><li> aşağıdaki gibi% 20 çamaşır suyu ile sterilize biyoçipler Not: Tarihsel olarak, bu ağartıcı prosedürü üretici tarafından yapılan bioçipler plazma sterilizasyon etkili olmadığını durumunda, uzun süreli depolama sırasında bioçipler mantar büyümesini önlemiştir. <ol><li> 20 ml&#39;lik bir şırınga, enjeksiyon boru steril bir şırınga düzeneği bağlanır ve biohood çalışan kullanılarak Biochip her kanal içine% 20 çamaşır suyu solüsyonu 2 ml enjekte edilir. biochip çamaşır suyu çözeltisi ile 1 saat bekletin. </li><li> Bir saat, vakum asp sonravakum emme boru bağlı bir steril erkek kayma Luer derleme kullanarak her iki kanaldan çamaşır suyu kızgın. bioçipler durulama sırasında bir drenaj olarak biyoçip boru montajları birini kullanın. </li><li> steril şırınga enjeksiyonu düzeneğine bağlı bir steril 20 ml şırınga kullanarak, fazla su biohood bir kap içine akmasına izin vermek için, steril su, 5 ml çip her kanalı yıkayın. O zaman sadece çamaşır suyu için açıklanan ve plastik alet durumlarda geri bioçipler yerleştirin ve ertesi gün hücreleri ile seribaşı kadar biohood bırakın kapalı su vakum aspirasyon. </li></ol></li><li> , Biyoçipler ekim Biochip her kanalı içine 10 ug / ml fibronektin 2 ml solüsyon enjekte etmek için Altmış dakika önce. 60 dakika boyunca biohood biyoçipler bırakın ve (aşama 2.2.3 tarif edildiği gibi) daha sonra hücreler ile Bioçip ekim önce fibronektin aspire vakum. bakın (steril biochip boru meclislerinin iki bölümden yerleştirinbioçipler limanlarında bölüm 1.4). </li><li> Amerikan Tipi Kültür Koleksiyonu (ATCC) ürün tanımı tabaka 16 ana hatları çizilen prosedürler kullanılarak her 16 bioçipler için bir birleşik RTgill-W1 T175 şişesi tripsinize. <ol><li> hücrelerinin birbirine karışan balonuna (ler) den medyaya kapalı aspire. </li><li> PBS 15 ml hücre tabakası durulayın ve sonra aspire. </li><li> Her bir T175 şişesi içinde hücre tabakası tripsin / EDTA 6 ml ilave edilir ve hücreler, 5 dakika boyunca trypsinize sağlar. </li><li> tripsinizasyon durdurmak için her bir şişeye tam l-15 hücre kültür ortamı 15 ml ekleyin. </li><li> steril tek bir kap içinde hücre süspansiyonları birleştirin. Not: Konteyner boyut bioçipler sayısı numaralı seribaşı olan bağımlı 150-500 ml arasında değişebilir. Hücre süspansiyonunun 5 mi Biochip başına gerekli olacağını tahmin. </li></ol></li><li> hücre süspansiyonu ± 1 ml alın ve sayım için mikrosantrifüj tüpü içine yerleştirin. 10X amaç, ticari bir aydınlık mikroskop kullanarakziyaretinde bir hemositometre bir hücre 10 ul bir kısım sayısı ve 2.5 x 10 5 hücre / ml&#39;lik bir hücre süspansiyonu elde etmek için gerekli olan tam bir L-15 hücre kültür ortamı hacmi hesaplamak. Not: hücre süspansiyonu kullanılarak kültürü devam etmek için matara tohum ise, bunu yapmak için noktası olacaktır. tam L-15 hücre kültür ortamı kullanılarak hücre süspansiyonu konsantrasyonunu ayarlayın. </li><li> Biochip her kanalın dış bağlantı noktasına hücre süspansiyonu, 2.5 ml enjekte steril şırınga enjeksiyonu boru montaj (bölüm 1.6) için syringeattached steril 20 ml kullanılarak (yani, bağlı tüp olmayan bağlantı noktaları), biohood bir atık kabına borudan dışarı akmasına ilave hücre süspansiyonu bir tanır. Not: Bu tüm kanal ve bağlı boru hücre süspansiyonu dolu olacak sağlayacaktır. <ol><li> Luer fitti hortum serbest ucunu takarak her biyoçip kanalı için kapalı bir döngü oluşturunHer kanal için dış liman içine ng. </li><li> % 70 etanol ile ıslatılmış kağıt havlu ile kapalı döngüler kapalı herhangi bir aşırı medya silin ve bir 20 ° C inkübatör geri plastik kutu biochipler yerleştirin. Her Biochip benzersiz bir tanımlayıcı numarasını ver. </li></ol></li><li> Gün 4 ve Gün 7&#39;de 20 ° C inkübatör biyoçipler çıkarın ve ısı-dengeli tam l-15 hücre kültür ortamı ile bioçipler tüm ortam doldurmak. Kullanım dışında adım 2.6 sadece L-15 hücre kültür ortamı yerine (hiçbir hücre süspansiyonu) aynı prosedürü takip edin. gün 4 beslenme sonrası 20 ° C inkübatör biochipler geri yerleştirin. <ol><li> gün 7 beslenmesi sonra kaldırmak ve cips Hortumları atmak ve bioçipler otoklava boşaltma vidasını takın. </li><li> Test için kullanılan kadar 6 ° C inkübatör bir kutu biochipler yerleştirin. cips kadar 9 ay boyunca buzdolabında sıcaklıklarda saklanabilir ve hala test i için geçerli olan: Notn ECIS okuyucular. </li></ol></li></ol> Bioçipler 3. ECIS Testi <ol><li> kullanıyorsanız Test kimyasalları hazırlayın. (Bkz Brennan ve ark., Test kimyasal hazırlanması 2012 7). </li><li> taşıma çantası gelen ECIS okuyucu ve test malzemeleri çıkarın. 6 ° C inkübatör hazırlanmış bir Bioçip kaldırın. Bir kağıt havlu üzerine Bioçip yerleştirin. ECIS okuyucu açın. </li><li> 10 ml şırınga kullanarak, etiketli 0.5 ons şeffaf plastik kontrol kavanozun içine kontrol su 10 ml ve etiketli 0.5 ons şeffaf plastik testi kavanozun içine test örneği 10 ml dağıtmak. Not: 1) Doğru bir ölçüm için kabarcıklarını çıkarmak için emin olun. 2) şırıngalar ve kavanozlar renk kodludur; test için kontrol ve kırmızı mavi. </li><li> folyo çanta iki toz medya şişeleri çıkarın. Açık toz ortam flakon on (gerekirse kullanımı amaçlı bir araç) içine, tüm ampulün bırakarak, kontrol, su ile kavanoz içine bir şişenin bütün muhtevası, dökünçözüm de. Test kavanoz ile bu işlemi tekrarlayın. Kapak toz eritilir sağlamak için kavanoz sallayın. </li><li> Her iki kontrol (mavi şırınga) ya da test (kırmızı şırınga) ilgili ampuller gelen çözeltiler 9 ml sahip renkli 10 mi şırınga her doldurun. şırınga hava kabarcıklarını çıkarın. </li><li> Biochip limanlarından tapaları çıkartın ve drenaj takın. </li><li> ECIS okuyucu çıkarılabilir plastik tepsi içine Bioçip yerleştirin ve kapağını kapatın. </li><li> Dış biyoçip portlarına dolu şırınga takın ve şırınga pistonu takın. </li><li> Ana ekrandan, &quot;NEXT&quot; seçeneğini ön testi başlatmak için. Not: Okuyucu yazılım empedanslarından kontrol edecektir. Empedansları kullanıcı (genellikle arasında 1000 ve 3000 ohm) ekranı kaydeder tarafından belirlenen aralıkta ise Şekil 3&#39;te gösterilen ve &quot;Next&quot; seçmesini talimat ve yazılım) 3.10 adıma geçin gibi &quot;Kartuş Geçti&quot;. Empedanslar dahilinde değilseçünkü kusurlu Biochip ya da (genellikle nedeniyle elektrot hiza) okuyucuya Biochip hatalı bağlantı seti aralığı, ardından ekran kaydedecektir &quot;Kartuş Başarısız&quot; ve kullanıcı ya &quot;Abort&quot; seçeneğine sahip ya da olacak testi &quot;doğrulama&quot;. <ol><li> ) 3,9 adıma geri dönmek için &quot;Kes&quot; i seçin. &quot;Doğrulama&quot; seçeneğini bir &quot;Kartuş Geçti&quot; mesajı alan ve &quot;İleri&quot; seçtikten sonra) 3.10 adıma geçin. Not: Bioçip çıkarmak ve görsel kusurları ya da bir mesaj, yeni bir Biochip devam etmeden önce alınan &quot;Kartuş başarısız&quot; eğer sızıntı olup olmadığını kontrol edin en iyisidir. </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/53555/53555fig3.jpg" /> Şekil 3:. Kabul edilebilir Empedans Okumalar bir Biochip ve ECIS Okuyucu Screenshot ekran görüntüsü 4 co her ohm ilk empedans okumaları gösterirntrol elektrotlar (CE) ve akışkan Biochip içinde 4 test örneği elektrotlar (SE). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53555/53555fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <ol start="10"><li> okuyucu tarafından istendiğinde, yumuşak bir klavye kullanarak örnek bilgileri girin ve bittiğinde sonra &quot;Kabul&quot; seçeneğini seçin. Not: ECIS okuyucu yazılım otomatik olarak tarih, saat ve kullanıcı tarafından girilen diğer bilgilerin her veri kümesi damga; biochip numarası, kimyasal ve konsantrasyon türü olarak. empedans iki veri dk eklenen Biochip tahsil edilecektir ve bir ekran zamanlayıcı geri sayım süreyi. </li><li> kırmızı bir kutu içinde yanıp ekrandaki talimatları tarafından istendiğinde iki dakika sonra, &quot;NEXT&quot; çarptı. &quot;Şimdi örnekleri enjekte&quot; için yanıp sönen yeşil kutu tarafından istendiğinde, biyoçip chann içine aynı anda bağlı şırınga gelen denetim ve test ortamı enjekteels. Bittiğinde bioçipler üzerinde yerinde şırınga bırakın. Not: Empedans değerleri 60 dakika kez dakikası tahsil edilecektir. ECIS okuyucu yazılım tedavi kanal testin başlamasından sonra 10 ile 60 dakika arasında herhangi bir noktada kontrol kanalı istatistiksel olarak farklı olduğunu belirlerse, ardından ekrandaki görüntü örneği &quot;Kirli&quot; olduğunu gösterir. Tedavi kontrol kanalı farklı değilse, o zaman ekranı test çalışmasının sonunda &quot;Tespit Kontaminasyon&quot; gösterecektir. </li><li> kirlenmiş veya değil olarak kayıt test sonuçları her bir örnek için kirlenmiş. </li><li> Test çalışmasının sonunda, kaldırmak ve Bioçip atın. Durulayın ve testler sırasında Bioçip ev sahipliği şırıngalar, deney şişeleri ve çıkarılabilir plastik tepsi hava kurutun. Not: ECIS okuyucu operasyonel yazılım için yerleşik depolama 4 GB, kontrol modelleri ve test dosyaları bir test çalışmasından kaynaklanan. Bu, birkaç th sağlarousand deney dosyaları okuyucuya saklanır. Dosyalar USB atlama sürücü ile alınır ve istenirse araştırma amaçlı daha fazla analiz için bir bilgisayara aktarılabilir. </li></ol>

<ol><li>Pancrazio, J. J., Whelan, J. P., Borkholder, D. A., Ma, A., Stenger, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+application+of+cell-based+biosensors%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Development and application of cell-based biosensors.</a> Ann. Biomed. Eng. 27, 697-711 (1999).</li>
<li>States, S., Scheuring, M., Kuchta, J., Newberry, J., Casson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utility-based+analytical+methods+to+ensure+public+water+supply+security%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Water+Works+Assoc%22%5BJournal%5D)">Utility-based analytical methods to ensure public water supply security.</a> J. Am. Water Works Assoc. 95, 103-115 (2003).</li>
<li>Kelly, T., Baxter, W., McCauley, M., Koglin, E. Testing of Screening Technologies for Detection of Toxic Industrial Chemicals in All Hazards Receipt Facilities. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKelly%2C+T+%22EPA%2F600%2FR-08%2F034%22">EPA/600/R-08/034</a>. , Washington, DC. 1-25 (2008).</li>
<li>van der Schalie, W. H., James, R. R., Gargan, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selection+of+a+battery+of+rapid+toxicity+sensors+for+drinking+water+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens.+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">Selection of a battery of rapid toxicity sensors for drinking water evaluation.</a> Biosens. Bioelectron. 22, 18-27 (2006).</li>
<li>Iuga, A., Lerner, E., Shedd, T. R., van der Schalie, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+responses+of+a+melanophore+cell+line+to+chemical+contaminants+in+water%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Rapid responses of a melanophore cell line to chemical contaminants in water.</a> J. Appl. Toxicol. 29, 346-349 (2009).</li>
<li>Curtis, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suitability+of+invertebrate+and+vertebrate+cells+in+a+portable+impedance-based+toxicity+sensor%3A+temperature+mediated+impacts+on+long-term+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+In+Vitro%22%5BJournal%5D)">Suitability of invertebrate and vertebrate cells in a portable impedance-based toxicity sensor: temperature mediated impacts on long-term survival.</a> Toxicol In Vitro. 27, 2016-2066 (2013).</li>
<li>Brennan, L. M., Widder, M. W., Lee, L. E. J., van der Schalie, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+storage+and+impedence-based+water+toxicity+testing+capabilities+of+fluidic+biochips+seeded+with+RTgill-W1+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+In+Vitro%22%5BJournal%5D)">Long-term storage and impedence-based water toxicity testing capabilities of fluidic biochips seeded with RTgill-W1 cells.</a> Toxicol In Vitro. 26, 736-745 (2012).</li>
<li>Widder, M. W., Brennan, L. M., Hanft, E. A., Schrock, M. E., James, R. R., van der Schalie, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+and+refinement+of+a+field-portable+drinking+water+toxicity+sensor+and+a+fluidic+biochip%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Evaluation and refinement of a field-portable drinking water toxicity sensor and a fluidic biochip.</a> J. Appl. Toxicol. , (2014).</li>
<li>O'Shaughnessy, T. J., Gray, S. A., Pancrazio, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cultured+neuronal+networks+as+environmental+biosensors%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.Toxicol%22%5BJournal%5D)">Cultured neuronal networks as environmental biosensors.</a> J. Appl.Toxicol. 24, 379-385 (2004).</li>
<li>Eltzov, E., Marks, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-cell+aquatic+biosensors%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Bioanal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Whole-cell aquatic biosensors.</a> Anal. Bioanal. Chem. 400, 895-913 (2011).</li>
<li>Giaever, I., Keese, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+morphological+biosensor+for+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A morphological biosensor for mammalian cells.</a> Nature. 366, 591-592 (1993).</li>
<li>Curtis, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+portable+cell-based+impedance+sensor+for+toxicity+testing+of+drinking+water%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">A portable cell-based impedance sensor for toxicity testing of drinking water.</a> Lab on a Chip. 9, 2176-2183 (2009).</li>
<li>Xiao, C., Luong, J. H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cytotoxicity+by+emerging+impedance+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+.Appl.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Assessment of cytotoxicity by emerging impedance spectroscopy.</a> Toxicol. .Appl. Pharmacol. 206 (2), 102-112 (2005).</li>
<li>Xing, J. Z., Zhu, L., Gabos, S., Xie, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microelectronic+cell+sensor+assay+for+detection+of+cytotoxicity+and+prediction+of+acute+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+In+Vitro%22%5BJournal%5D)">Microelectronic cell sensor assay for detection of cytotoxicity and prediction of acute toxicity.</a> Toxicol. In Vitro. 20, 995-1004 (2006).</li>
<li>Lee, L. E. J., Dayeh, V. R., Schirmer, K., Bols, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+and+potential+uses+of+fish+gill+cell+lines%3A+examples+with+RTgill-W1%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cell.+Develop.+Biol.-+Animal%22%5BJournal%5D)">Applications and potential uses of fish gill cell lines: examples with RTgill-W1.</a> In Vitro Cell. Develop. Biol.- Animal. 45, 127-134 (2009).</li>
<li>RT-gill-W1 (ATCC CRL-2523) Culture Method. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22American+Type+Culture+Collection+%28ATCC%29%22">American Type Culture Collection (ATCC)</a>. , Manassas, VA. Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.atcc.org/ATCCAdvancedCatalogSearch/ProductDetails/tabid/452/Default.aspx? ATCCNum=CRL-2523&Template=cellBiology#aPropba73c">https://www.atcc.org/ATCCAdvancedCatalogSearch/ProductDetails/tabid/452/Default.aspx? ATCCNum=CRL-2523&Template=cellBiology#aPropba73c</a> (2015).</li>
</ol>

Görüşler, yorumlar, sonuçlar ve tavsiyeler yazarlara aittir ve ABD Ordusu tarafından mutlaka onaylanmamıştır. Bu raporda ticari kuruluşlara veya ticari isimlere yapılan atıflar, bu kuruluşların ürün veya hizmetlerinin resmi bir Ordu Bakanlığı tarafından onaylandığı veya onaylandığı anlamına gelmez. Her ikisi de ABD Ordusu Çevre Sağlığı Araştırma Merkezi'nden yazarlar Linda M. Brennan ve Mark W. Widder, rekabet eden hiçbir mali çıkarları olmadığını beyan ediyorlar. Michael Mayo, Michael McAleer ve Alex Greis, bu Makalede kullanılan tek kullanımlık biyoçipleri ve aletleri üreten Nanohmics'in çalışanlarıdır.10251980

ECIS teknolojisi laboratuvar ortamında iyi bir performans ve insan sağlığı ile ilgili olan konsantrasyonlarda potansiyel su kirleticileri tespit etmeyi başardı. Teknolojinin taşınabilirlik ve paketleme alanı kullanımına da elverişli hale getirir. 1) kültür, tohumlama sırasında aseptik koşullarda koruyun ve bioçipler beslenmesi, 2) RTgill-W1 hücreleri beri test için hazır olana kadar buzdolabında koşullarda seribaşı bioçipler tutun aşağıdaki gibidir: teknolojinin başarısı için protokol kritik adımlar çok uzun da 25 ° C nin üzerindeki sıcaklıklara maruz sonra yaşayamaz, 3) doğru bir toz halinde ortam şişeler L-15ex ağırlığında ve doğru bir değişiklik neden olabilir yanlış pozitif üretilmesi önlemek için, su numuneleri ölçmek medya ziyade örnek toksisite osmolalitesi, 4) testleri çalıştırmak için ECIS ekranda kullanıcı yönergeleri izleyin. okuyucu yazılım bi eğer kullanıcıyı uyarırbiyoçip ilk okuyucuya takıldığında ochip (ilk empedans okumaları göre) test için kabul edilemez. empedans düzeyleri test için kabul edilemez ise, yazılım, yeni bir biyoçip kullanılıncaya kadar kullanıcı testi ile devam etmek izin vermez. kabul edilemez empedans okumaları için nedenleri yüzünden ECIS okuyucu pimleri veya Biochip yapıştırma kenarlarından biri boyunca sıvı kaçağı ile biyoçip elektrotlar hafif bir hiza genellikle bulunmaktadır. ECIS sensör sadece içme suyu ile test ve yüzey suyu ile olmuştur çünkü bu teknoloji için bazı sınırlar vardır. Biochip Hangi RTgill-W1 hücreleri (süre sıcaklığına bağlı olarak saatlerden günlere kadar olabilir, uzun süreli dönemler için daha 25 ° C&#39;nin üzerinde dondurma ya sıcaklıklara uyum olabilir. Biochipler bir sıcaklık aralığı içinde iyi işlev soğutulmuş arasında oda sıcaklığı 7. Onlar hemen r olduktan sonra, ancak, hemen kullanıma hazırsoğuk depodan emoved. Taşınabilir soğuk saklama kapları, şu anda sıcaklığa duyarlı malzemeleri için alanında Ordu personeli tarafından kullanılmaktadır. Bu aynı kaplar numaralı seribaşı biyoçip taşınması için de kullanılabilir. Bu teknolojinin bir başka sınırlama, bir geniş bantlı toksisite sensörü olsa bile hiç değilse, bu gibi bir böcek ilacı gibi kolinesteraz önleyici bileşikler ile, iyi yanıt olmasıdır. Bu özellik, boşluğu doldurmak için ECIS sensörü toksisite testinin daha geniş bir kullanıcıya sağlamak için su numuneleri test edilirken bir ticari olarak temin edilebilir, hızlı pestisit deney tahlili ile bağlantılı olarak kullanılmak üzere tasarlanmıştır. Kit 30 dakika içinde organofosfat ve karbamat pestisitler algılamak için tasarlanmış hızlı bir enzimatik bir testtir. Şu anda algılamak için askeri koruyucu hekimlik personel tarafından kullanılan alan su test sistemi, arsen - ECIS sensörü wqas-PM (Önleyici Tıp Su Kalitesi Analiz Sistemi) tamamlarBir içme suyu numunesinde ic, kurşun ya da siyanür. ECIS sensörü kirletici ne tespit olmaz, ancak bazı metaller veya organik bileşikler, bu ise, bu su, insan tüketimi için uygun olmayabilir belirten gösterir. ECIS test sonuçları bir saat içinde mevcuttur. Pozitif test sonucu varsa su numuneleri daha sonra kirletici tanımlanması için daha fazla analiz için gönderilebilir. Yukarıda tarif edildiği gibi, ECIS okuyucu kirletici saptanması geniş spektrumlu bir kapak için ayrı bir enzimatik ACE kiti içeren bir sistemin bir parçası olarak tasarlanmıştır. Bu okuyucuların her ikisi de askerler tarafından saha kullanımı için alan taşıma için sağlam bir durumda paketlenmiş ediliyor.

Genel amaç ECIS biyosensör hücre ekim, depolanması ve akışkan bioçipler test edilmesi için bir yöntem geliştirmektir. Bu biyosensör geliştirilmesi için hedef askerler tarafından kullanılan içme suyu kaynaklarının olası kontaminasyonu tespit olabilecek bir alan taşınabilir aygıt için ABD Ordusu özelliklerini karşılamak üzere idi. toksisite sensörü gereksinimleri cihaz alan taşınabilir olması o, insan sağlığı ile ilgili konsantrasyonlarda (bir saat içinde) hızla toksik endüstriyel bileşiklerin geniş bir yelpazede algılayabilir ve biyolojik bileşenlerin bir raf ömrüne sahip olacağını vardı en az dokuz ay. bozulabilen parçalar kabul edilebilir soğutma, ancak, dondurma değil. Tarihsel olarak, (örneğin, antikorlar, enzimler ya da nükleik asitler gibi) bunların biyolojik bir bileşeniyle alanı içme suyu testi teknolojileri analit özgü 1-3 olmuştur. biyosensörler bu tür dezavantajı onl olmasıdırY aynı anda kimyasal bir tür algılar. birden fazla kimyasal mevcut olduğu şüphesi varsa çoklu sensör ihtiyaç vardır. Belirli bir sensör testi repertuarında değilse, suda kimyasal kirleticiler kolayca algılanmayan gidebiliriz. Geniş tabanlı toksisite sensörler, diğer taraftan, bu teknoloji boşluğu doldurmak için potansiyele sahiptir. Bunlar genellikle onlara 4-8 bir hücresel bileşeni var. Geniş tabanlı toksisite biyosensörler avantajları, zaman 5,9,10 nispeten kısa bir süre içinde karışımlar ve bilinmeyenler de dahil olmak üzere kimyasal kirleticilerin, geniş bir yelpazeye varlığını tespit edebilen vardır. Aynı zamanda elektrik hücre alt-tabaka empedansını algılayarak, (ECIS) olarak da bilinir olası toksisite sensörü, hücre tek katmanlarının elektrik empedansının ölçümü ile konsepti ilk olarak Giaever ve Keese 11 tarafından tarif edilmiştir. Son yirmi yılda hücre viab hassas bir göstergesi olduğu gösterilmiştirility ve sitotoksisite. Temel olarak, bioçipler elektrotlar yapıştırılır hücre tekli-tabakası, yüksek frekanslı ve düşük voltaj ve akımı alternatif akım sinyaline maruz kalmaktadır. hücreler sık ​​tek tabaka elektron akışını engeller. Hücre mono tabakasının bütünlüğünün (örneğin, bir toksik kimyasal ilave edilir olduğu gibi) bozulduğunda ECIS sensörü elektrik empedans değişikliği kaydeder 11-14. Şekil 1 Biochip hücre tek tabaka ile ilgili olarak ECIS ilkesini göstermektedir . <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/53555/53555fig1.jpg" /> Şekil 1:.. Basitleştirilmiş ECIS okuyucu elektrik şematik bir biochip üzerindeki bir hücre tek tabaka ECIS İllüstrasyon prensibi <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53555/53555fig1large.jpg" target="_blank">bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> burada, 12 tarif edilen ECIS sensor teknolojisi kullanılmıştır. Onlar sık ortam değişiklikleri gerekli sınırlı bir raf ömrüne sahip ve yapay CO2 çevre ve 37 ° C inkübasyon sıcaklığı gereklidir, çünkü bu hücreler, bununla birlikte, saha kullanım için pratik değildir edildi. Bu gökkuşağı alabalığı solungaç epitel hücreleri (RTgill B-1 hücreleri) elde edilen ticari olarak temin edilebilen hücre hattı, ortam CO2 oda sıcaklığında test keşfedilmiştir, bioçipler bir konfluent tek tabaka oluşturulmuştur, soğutulmuş sıcaklıklarda muhafaza edilebilir ve İnsan sağlığı 12 ilgili konsantrasyonlarda kimyasal bir geniş spektrumlu bir hızlı tepki (1 saat ya da daha az) vardı. Toksikoloji RTgill-W1 hücrelerinin Uygulamaları, hem de temel araştırmalar olduğu gibi, Lee ve ark tarafından gözden geçirilir. 15 Tohumlama, depolama ve ihtiva eden akışkan bioçipler test yöntemleriBir ECIS biyosensöründeki akışkan biochipler üzerinde RTgill-W1 hücrelerinin mono tabakaları burada açıklanmaktadır. akışkan biochip bir buzdolabında durumda en fazla 9 ay süreyle saklanabilir ve ayrı ayrı sevk edilir, içme suyu SUPPLIES.THE eşlik ECIS okuyucular, ya da test ünitelerinin test edilmesi için, soğuk bir saklama kabı olarak sevk edilebilir. biochip onlara iki bileşeni vardır; iki ayrı sıvı kanalları ve empedans algılama kanal başına dört elektrot pedleri içeren bir alt elektronik tabaka ile bir üst polikarbonat tabaka. ped başına 10 çalışma elektrotlar vardır; Her bir elektrod çapı 250 mm. monte biochip ECIS test ünitesi takıldığında empedans okumaları elde etmek için altın elektrot bağlantıları var. Iki kapalı akışkan U-şekilli kanalların her biri. RTgill-W1 hücre süspansiyonu 2 ml sahip 2, tek bir algılama elektrodu bir konfluent hücreler büyütme ile ECIS okuyucu bir akışkan Bioçip göstermektedir olacaktır. Şekil 2:.. ECIS Reader akışkan Biochip Büyütülmüş alan tek algılama elektrot üzerinde RTgill-W1 hücrelerinin konfluent tek tabaka gösteren <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53555/53555fig2large.jpg" target="_blank">bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a>

<table><tbody><tr><td>Fetal sığır serumu</td><td>Life Technologies, Inc. www.lifetechnologies.com</td><td>16000-085</td><td>Mağaza @ -20 ° C. Kullanmadan önce @ oda sıcaklığında çözdürün. Tam L-15 hücre kültürü ortamı için bileşen (% 10).</td></tr><tr><td>Fibronektin, sığır plazması</td><td>EMD Millipore Corp.&nbsp; &nbsp; www.emdmillipore.com&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>341631-1 mg</td><td>@ -20 °C saklayın. Kullanmadan önce @ oda sıcaklığında çözdürün. 10 & # 956 konsantrasyon için L-15 ortamı ile karıştırın; g/ml ve donma @ -20 &derece; Alikotlarda C. Biyoçipler için substrat olarak kullanın.</td></tr><tr><td>L-glutamin içermeyen L-15 ortamı</td><td>&nbsp; www.lonzabioscience.com</td><td>12-700F</td><td>Hücre kültürü ve biyoçip besleme için bazal ortam. 6 >C'de saklayın.</td></tr><tr><td>L-15ex fenol kırmızısı US</td><td>Biological&nbsp ile toz haline getirilmiş ortam; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; www.usbio.net</td><td>L1501</td><td>Besiyeri, 0.1 dram şişelerde 60 mg alikotlarda tartılır ve 6 ° C'de saklanır; Kurutucu ambalajlı folyo torbalarda C. Dokuz ay raf ömrü. Biyoçiplerde test etmek için 10 ml su numunesi ile karıştırılır.</td></tr><tr><td>PBS, Ca2+ veya Mg2+</td><td>Lonza&nbsp; www.lonzabioscience.com</td><td>17-516F</td><td>olmadan Oda sıcaklığında saklayın. Hücre kültürü şişelerini tripsile yaparken ortamı durulamak için kullanılır. &nbsp;</td></tr><tr><td>Tripsin, EDTA</td><td>Lonza&nbsp; www.lonzabioscience.com</td><td>CC-5012</td><td>@ -20 ° C'yi saklayın. Oda sıcaklığında çözdürün ve hücre kültürü şişelerini tripsinize etmek için kullanın.</td></tr><tr><td>T175 kültür şişeleri</td><td>Fisher Scientific www.fishersci.com</td><td>12-565-30</td><td>RTgill-W1 hücrelerini kültürlemek için kullanılır.</td></tr><tr><td>Çamaşır</td><td>suyu kloroks&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; </td><td></td> www.chlorox.com <td>ECIS talaşlarını temizlemek için millique veya damıtılmış su ile% 20'ye kadar seyreltilir. Herhangi bir ev tipi çamaşır suyu kabul edilebilir.</td></tr><tr><td>%70 etil alkol</td><td></td><td></td><td>Biyodavut yüzeylerini ve biyokaburga yerleştirilen her türlü malzemeyi dezenfekte etmek için kullanılır.</td></tr><tr><td>Gökkuşağı alabalığı solungaç hücreleri (RTgill-W1)&nbsp;</td><td>Amerikan Tipi Doku Kültürü Koleksiyonu&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; www.atcc.org</td><td>CRL-2523</td><td>Kültürlenmiş ve biyosensör için kullanılan hücreler (biyoçiplerin tohumlanması).</td></tr><tr><td>GlutaMAX-1 Takviye Edici Gıda, 200 mM Takviye Edici Gıda</td><td>&nbsp; www.lonzabioscience.com</td><td>35050-061</td><td>Oda sıcaklığında muhafaza ediniz. Tam L-15 hücre kültürü ortamı için bileşen (% 1).</td></tr><tr><td>Penn/Strep Stok 10K/10K</td><td>Lonza&nbsp; www.lonzabioscience.com</td><td>17-602E</td><td>Mağaza @ -20 derece; C. Kullanmadan önce @ oda sıcaklığında çözdürün. Tam L-15 hücre kültürü ortamı için bileşen (% 1).</td></tr><tr><td>Pharmed BPT boru</td><td>U.S. Plastic Corp.&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; www.usplastic.com</td><td>57317</td><td>27 mm'lik kesitler halinde kesilmiş ve otoklavlanmıştır. Biyoçipleri hücrelerle tohumlamak için ve ortam değişiklikleri arasında kapalı bir döngü olarak kullanılır.</td></tr><tr><td>Pharmed boru montajları için polikarbonat luer bağlantı parçaları</td><td>Value Plastics&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td><td>MTLS210-9</td><td>Bichips'e yerleştirmek için kesilmiş Pharmed borunun her iki ucuna sabitlenmiştir.</td></tr><tr><td>20 ml şırınga, kayar uçlu</td><td>VWR Scientific&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; us.vwr.com</td><td>BD302831</td><td>ECIS çiplerinin tohumlanması ve cipslerin beslenmesi için hücre süspansiyonu enjeksiyonu için kullanılır.</td></tr><tr><td>0.1 dram geçmeli kapaklı polipropilen mikrovials</td><td>Şişeler Kavanozlar ve Tüpler, Inc.&nbsp; &nbsp; www.bottlesjarsandtubes.com</td><td>30600</td><td>60 mg L-15ex toz ortam alikotlarını saklamak için kullanılır.</td></tr><tr><td>60 mil Lexan akışkan ECIS biyoçipleri</td><td>Nanohmics, Inc.&nbsp; &nbsp; &nbsp; </td><td></td> www.nanohmics.com <td>Nanohmics, Inc. tarafından özel olarak üretilen RTgill-W1 hücreleri biyoçiplere enjekte edilecek ve tohumlanmış çipler test için ECIS okuyucusuna yerleştirilecektir.</td></tr><tr><td>Otoklavlanabilir Plastik Alet Kutusu 17 1/2 "x 7 3/4" x 2 3/8 "</td><td>Medi-Dose EPS&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; medidose.com</td><td>IB701</td><td>Aşağıdakileri saklamak için kullanılır; otoklavlanmış tıkaçlar, temizlenmiş biyoçipler, tohumlanmış biyoçipler.</td></tr><tr><td>Kağıt ısıyla yapıştırma sterilizasyon torbaları, 7 & frac12; &rdquo; x 13 inç</td><td>Kardinal Sağlık&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; www.cardinalhealth.com</td><td>90713</td><td>Boru ve bağlantı parçalarının ve tapaların otoklavlanması için kullanılır.</td></tr><tr><td>Quantos otomatik toz dağıtıcı</td><td>Mettler Toledo&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; www.mt.com</td><td>QB5</td><td>60 mg alikot toz L-15ex'in 0.1 dram şişelerine otomatik dağıtımı.</td></tr><tr><td>ECIS okuyucu</td><td>Nanohmics, Inc.&nbsp; &nbsp; &nbsp; </td><td></td> www.nanohmics.com <td>Nanohmics, Inc. tarafından özel olarak üretilmiştir. Tohumlanmış biyoçip, su toksisitesi testi yapmak için okuyucuya yerleştirilir.</td></tr><tr><td>3 x 5 metalize 2,5 mil polipropilen tekrar kapatılabilir torbalar</td><td>Uline&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; www.uline.com</td><td>S-16893</td><td>Hem tohumlanmış biyoçipler hem de toz haline getirilmiş L-15ex ortam şişeleri için paketleme ve depolama.</td></tr><tr><td>Leatherman fışkırtma ps4</td><td>Amazon&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; </td><td></td> www.Amazon.com <td>Toz haline getirilmiş ortam şişelerini açmak için kullanılır.</td></tr><tr><td>1 g silika jel kurutucu paketleri&nbsp;</td><td>Uline&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; www.uline.com</td><td>S-3902</td><td>Tozun nem almasını önlemek için L-15ex toz ortam şişeleri ile polipropilen torbalara koyun.</td></tr><tr><td>Steril 250 veya 500 ml Nalgene şişeleri</td><td>Fisher Scientific www.fishersci.com</td><td>09-740-25C veya E</td><td>ECIS çiplerini biyodavutta tohumlamak için hücre süspansiyonlarını tutun.</td></tr><tr><td>Biyoçipler için fişler</td><td>Nanohmics, Inc.&nbsp; &nbsp; &nbsp; </td><td></td> www.nanohmics.com <td>Nanohmics, Inc. tarafından özel olarak üretilmiştir. 6 ° C'de depolamadan önce biyoçipler üzerindeki bağlantı noktalarını kapatmak için kullanılır.</td></tr><tr><td>ECIS biyoçipleri için drenajlar</td><td>Nanohmics, Inc.&nbsp; &nbsp; &nbsp; </td><td></td> www.nanohmics.com <td>Nanohmics, Inc. tarafından özel olarak üretilmiştir. ECIS okuyucusuna yerleştirilmeden önce biyoçipler üzerindeki 2 iç porta yerleştirilir. Test enjeksiyonları sırasında fazla ortamın kanallardan boşaltılmasına izin verir.</td></tr><tr><td>Hemositometre</td><td>Fisher Scientific www.fishersci.com</td><td>S17040</td><td>Biyoçiplere enjeksiyon için hücre süspansiyonunu ayarlamadan önce hücreleri saymak için gereklidir.</td></tr><tr><td>10X objektifli parlak alan mikroskobu</td><td>Leitz Labovert</td><td></td><td>Herhangi bir parlak alan mikroskobu kabul edilebilir.</td></tr><tr><td>Sınıf II biyolojik güvenlik kabini</td><td></td><td></td><td>: Hücre kültürünün steril koşullar altında gerçekleştirilebildiği herhangi bir sınıf II biyolojik güvenlik kabini kabul edilebilir.</td></tr><tr><td>Mikrosantrifüj tüpleri, 0.6 ml</td><td>Fisher Scientific www.fishersci.com</td><td>02-681-311</td><td>Hücreleri saymadan önce 1 ml hücre süspansiyonu tutar.</td></tr><tr><td>Slip 10 cc kırmızı şırınga</td><td>Prosedür Ürünleri, Inc.&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; www.procedureproducts.com</td><td>S/49S 30-R</td><td>, 9 ml test suyu numunesini çeker ve numuneyi biyoçipe enjekte etmek için kullanılır.</td></tr><tr><td>Slip 10 cc mavi şırınga</td><td>Prosedür Ürünleri, Inc.&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; www.procedureproducts.com</td><td>S/49S 30-B</td><td>: 9 ml kontrol suyu örneğini çeker ve örneği biyoçipe enjekte etmek için kullanılır.</td></tr><tr><td>&frac12; oz. Şeffaf PET Plastik Kavanoz w / Beyaz Nervürlü Astarlı Kapaklar</td><td>SKS Şişe & Ambalaj A.Ş. &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; www.sks-bottle.com</td><td>0605-30</td><td>Test için L-15ex tozu ve 10 ml su numunesini karıştırmak için kullanılan numune şişeleri.</td></tr><tr><td>50 ml steril konik polipropilen santrifüj tüpleri</td><td>Fisher Scientific&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; www.fishersci.com</td><td>12-565-269</td><td>10 &# 956'lık 40 ml alikot tutmak için kullanılır; -20 ° C'de g / ml fibronektin.</td></tr><tr><td>NIDS ACE Asetilkolinesteraz İnhibitörü Tespit Testi</td><td>ANP Technologies, Inc. www.anptinc.com</td><td>ACE-400</td><td>Sensörü, içme suyundaki pestisitlerin hızlı tespiti için tasarlanmıştır</td></tr></tbody></table>

hazırlık ve test zehirlilik için hızlı değerlendirme İçme suyu Örnekleri için rtgill-w1 hücreleri ile akışkan bioçipler empedans tabanlı

Preparation and Testing of Impedance-based Fluidic Biochips with RTgill-W1 Cells for Rapid Evaluation of Drinking Water Samples for Toxicity

Bu el yazması, sahada taşınabilir su toksisitesi sensöründe kullanılmak üzere Gökkuşağı alabalığı solungaç epitel (RTgill-W1) hücreleriyle akışkan biyoçiplerin nasıl hazırlanacağını açıklamaktadır. Biyoçiplerin içine yerleştirilmiş algılama elektrotları üzerinde bir RTgill-W1 hücresi tek tabakası oluşur. Biyoçipler daha sonra içme suyunun hızlı toksisite testi için tasarlanmış bir saha taşınabilir elektrikli hücre-substrat empedans algılama (ECIS) cihazında test etmek için kullanılır. El yazması ayrıca hazırlanan biyoçipler kullanılarak bir toksisite testinin nasıl yapılacağını açıklamaktadır. Bir kontrol suyu numunesi ve test suyu numunesi, önceden ölçülmüş toz ortam ile karıştırılır ve biyoçipin ayrı kanallarına enjekte edilir. Biyoçip kanallarının her birindeki algılama elektrotlarından gelen empedans okumaları, otomatik bir istatistiksel yazılım programı tarafından ölçülür ve karşılaştırılır. ECIS cihazındaki ekran, numune enjeksiyonundan sonraki bir saat içinde "Kontaminasyon Tespit Edildi" veya "Kontaminasyon Tespit Edilmedi" mesajını gösterecektir. Avantajları, kullanım kolaylığı ve insan sağlığı endişeleriyle ilgili konsantrasyonlarda geniş bir inorganik ve organik kimyasal yelpazesine hızlı yanıt vermenin yanı sıra, depolanan biyoçiplerin test için hazır durumda uzun vadeli stabilitesidir. Sınırlamalar, biyoçiplerin soğuk depolanması gerekliliği ve kolinesteraz inhibe edici pestisitlere karşı sınırlı hassasiyettir. Bu toksisite dedektörünün uygulamaları, Ordu Önleyici Tıp personeli tarafından içme suyu kaynaklarının hızlı bir şekilde sahada taşınabilir olarak test edilmesi veya belediye su arıtma tesislerinde kullanım içindir.

Bu yazıda anlatılan ECIS teknolojisi, ABD Çevre Koruma Ajansı (USEPA) Teknoloji Test ve Değerlendirme Programı (TTEP) -sponsored test uygulandı. On üç kimyasal içme suyu olası kirletici olabilir toksik endüstriyel bileşiklerin geniş bir yelpazede temsilcileri olarak performansı test edilmiştir. Test sırasında, 13 9 insan sağlığı ile ilgili olan konsantrasyonlarda bir saat içinde ECIS tarafından tespit edildi 8. Tablo 1, bu kirletici test sonuçlarını göstermektedir. Şekil 4 bir &quot;Kirli&quot; sonucu üzerinde nasıl görüneceği için temsili niteliktedir ECIS okuyucu ekranı. Çoğunlukla, hücresel empedanslar kontrollere kıyasla kirlenmiş numuneler için azalmıştır. Zaman zaman, bazı bileşikler empedansında bir artışa neden olabilir. Ayrıca Tablo 1&#39;de özetlenmiştir </strong&gt; Temiz su testidir. Kırk temiz su numuneleri çalıştırmak ve herhangi bir kontaminasyon örneklerinin hiçbirinde tespit edildi &quot;Hayır kontaminasyon Algılanan&quot; temsili bir ekran çekim için (Şekil 5). <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/53555/53555fig4.jpg" /> Şekil 4: &quot;Kirli&quot; Su Numune ECIS Okuyucu Ekran kirlenmiş bir su örneğinden normalize empedans grafik ve sonuçların bir örneği.. Mavi çizgiler kontrol elektrotların her normalize empedans temsil eder; Kırmızı çizgiler deney numunesi elektrotların her normalleştirilmiş empedansları temsil etmektedir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53555/53555fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/53555/53555fig5.jpg" /> Şekil 5: &quot;Hiçbir kontaminasyon algılandı&quot; Su Numune ECIS Okuyucu Ekran kirlenmiş olmayan bir su örneğinden normalize empedans grafik ve sonuçların bir örneği.. Mavi çizgiler kontrol elektrotların her normalize empedans temsil eder; Kırmızı çizgiler deney numunesi elektrotların her normalleştirilmiş empedansları temsil etmektedir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53555/53555fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Kategori </td><td> kirletici madde </td><td colspan="3"> Konsantrasyon test edilmiştir (mg / L) 1 </td><td colspan="2"> Algılandı ≤1 saat n = 4/4 cips </td></tr><tr><td rowspan="8"> Pestisitler </td><td> aldicarb </td><td colspan="3"> 0.17 </td><td colspan="2"> hayır </td></tr><tr><td> arsen<html> ic (sodyum arsenit) </td><td colspan="3"> 4,5 </td><td colspan="2"> Evet </td></tr><tr><td> Azite (sodyum azit) </td><td colspan="3"> 46.7 </td><td colspan="2"> Evet </td></tr><tr><td> fenamifos </td><td colspan="3"> 0.56 </td><td colspan="2"> hayır </td></tr><tr><td> Methamidophos </td><td colspan="3"> 1.4 </td><td colspan="2"> hayır </td></tr><tr><td> metil parathion </td><td colspan="3"> 33.6 </td><td colspan="2"> Evet </td></tr><tr><td> Parakuat (diklorür) </td><td colspan="3"> 4.6 </td><td colspan="2"> hayır </td></tr><tr><td> Pentachlorophenate (sodyum) </td><td colspan="3"> 71.9 </td><td colspan="2"> Evet </td></tr><tr><td rowspan="5"> Endüstriyel Kimyasallar </td><td> Amonyak </td><td colspan="3"> 924 </td><td colspan="2"> Evet </td></tr><tr><td> Bakır (bakır-II sülfat) </td><td colspan="3"> 103 </td><td colspan="2"> Evet </td></tr><tr><td> Siyanür (sodyum) </td>3 &quot;&gt; 14 </td><td colspan="2"> Evet </td></tr><tr><td> Merkür (klorür) </td><td colspan="3"> 24.7 </td><td colspan="2"> Evet </td></tr><tr><td> tolüen </td><td colspan="3"> 444 </td><td colspan="2"> Evet </td></tr><tr><td> Temiz Su 2 </td><td> hiçbiri </td><td colspan="3"> NA </td><td colspan="2"> hayır </td></tr><tr><td colspan="7"> Test 1 konsantrasyonları ve ark Widder tarafından el yazması aynıdır. (2014). </td></tr><tr><td colspan="7"> 2 40 temiz su numuneleri hiçbir kirlenme ile çalışıldı. </td></tr></tbody></table> Tablo 1: ECIS tarafından Algılanan Su Örnekleri Bulaşanlar.

Bu el yazması, bir saha taşınabilir elektrikli hücre-substrat empedans sensöründe kullanılmak üzere Gökkuşağı alabalığı solungaç epitel hücreleri ile akışkan biyoçiplerin nasıl hazırlanacağını açıklamaktadır. Sensörle hızlı bir içme suyu toksisitesi testi yapmak için protokol de açıklanmıştır.

Hazırlık ve Test zehirlilik için hızlı değerlendirme İçme Suyu Örnekleri için RTgill-W1 Hücreleri ile akışkan bioçipler Empedans tabanlı

This manuscript describes how to prepare fluidic biochips with Rainbow trout gill epithelial (RTgill-W1) cells for use in a field portable water toxicity ...

Bu prosedürün genel amacı, içme suyu örneklerinin toksisitesini değerlendirmek için bir biyosensörün nasıl kullanılacağını göstermektir. Bu, gökkuşağı alabalığı solungaç hücrelerinden oluşan bir monolayer içeren biyochipler oluşturarak ve ardından bunları empedans tabanlı bir biyosensörün parçası olarak kullanarak gerçekleştirilir. Bu prosedür, içme suyu kaynaklarındaki kimyasal toksisitenin, insan sağlığı açısından ilgili seviyelerde hızlı bir şekilde tespit edilmesini sağlayan bir yöntem sunar.Bu tekniğin temel avantajları, biyochiplerin saha koşulları altında kullanılabilmesi, hücrelerin herhangi bir bakım veya koruma gerektirmeden dokuz aya kadar soğukta saklanabilmesi ve soğutucudan çıkarıldıktan sonra herhangi bir anda test için hazır durumda olmalarıdır. Bu prosedürü, laboratuvarımızdan lisans öğrencisi Jordan McNairn uygulamalı olarak gösterecektir. Hücre ekiminden bir gün önce, biyochipleri paketlerinden çıkarın ve sterilize edilmiş plastik alet kutularına yerleştirin.Hortum düzeneklerinden birini şırıngaya takın ve 20 ml'lik bir şırıngaya %20'lik çamaşır suyu çözeltisi çekin. Çözeltinin iki mililitresini biyochip'in her bir kanalına enjekte edin. İşlem tamamlandığında, biyochip'lerin çamaşır suyu çözeltisi ile bir saat boyunca bekletilmesini sağlayın.Bir saat sonra, her iki kanaldaki çamaşır suyu çözeltisini aspire etmek için vakum hattına bağlı erkek slip luer düzeneğine sahip steril bir mililitrelik şırınga kullanın. Biyochipten çamaşır suyunu aspire ettikten sonra, biyochipleri durularken tahliye hattı olarak kullanmak üzere her iki ucunda erkek slip luer bulunan steril bir tüp düzeneğini biyochipe takın. Ardından, 20 mililitrelik bir şırıngaya steril su çekin ve çipin her bir kanalını beş mililitre su ile yıkayın.Suyu daha önce yapıldığı gibi vakumla aspire edin. Ve biyochipleri plastik cihaz kutularına geri yerleştirin. Biyochipleri ertesi güne kadar biyogüvenlik kabini içerisinde bırakın.Biyoyongaların ekimi yapılmadan bir saat önce, biyoyonganın her bir kanalına iki mililitre 10 µg/mL fibronectin çözeltisi enjekte edin. Biyoyongaları biyogüvenlik kabininde 60 dakika boyunca inkübe edin ve ardından fibronectin çözeltisini vakumla aspire edin. Son olarak, biyoyonga portlarına iki adet steril biyoyonga tüp düzeneği yerleştirin ve hücreler ekime hazır olana kadar biyoyongaları kenara ayırın.İnkübatörden, gökkuşağı alabalığı solungaç epitel hücreleri içeren konfluen bir T-175 flask çıkarın ve biyogüvenlik kabinine yerleştirin. Bir konfluen T-175 flask, yaklaşık 16 biyochip'e ekim yapmak için yeterli olacaktır. Hücrelerin üzerindeki medyumu aspire ederek uzaklaştırın.Bunları PBS ile durulayın ve PBS'yi aspire ederek uzaklaştırın. Ardından, hücre tabakasına altı mililitre Trypsin-EDTA çözeltisi ekleyin. Balonu oda sıcaklığında yaklaşık beş dakika inkübe edin.Ardından, tripsini etkisiz hale getirmek için her bir flaska 15 mililitre tamamlanmış L-15 hücre kültür medyumu ekleyin. Hücre süspansiyonundan küçük bir alikot alın ve hücre konsantrasyonunu ölçmek için bir hemositometre kullanın. Hücreleri, 10x objektif donanımlı bir aydınlık alan mikroskobu kullanarak inceleyin.Ardından, güncel hücre konsantrasyonunu hesaplayın ve hücre süspansiyonunu mililitre başına çeyrek milyon hücre konsantrasyonuna ayarlayın. Daha sonra, biyoçipin her kanalının dış portuna 2,5 mililitre hücre süspansiyonu enjekte etmek için steril 20 mililitrelik bir şırınga kullanın. Fazla hücre süspansiyonunun tüplerden bir atık konteynerine akmasına izin verin.Ardından, hortumun luer bağlantılı boş ucunu her bir kanalın dış portuna takarak her bir biyochip kanalı için kapalı bir döngü oluşturun. Daha sonra, bir kağıt havluyu %70 ethanol ile nemlendirin ve kapalı döngüler üzerindeki fazla medyayı silmek için kullanın. Son olarak, biyochipleri tekrar plastik bir kutuya yerleştirin.Dördüncü ve yedinci günlerde, biyochipleri inkübatörden çıkarın. Biyochipteki medyayı, sıcaklığı dengelenmiş tam L-15 hücre kültürü medyası ile değiştirin. Yedinci gün beslemesinden sonra, hortumları chiplerden çıkarıp atın ve biyochiplere otoklav tahliye tapalarını takın.Biyochipleri, test için kullanılana kadar altı derece Celsius'luk bir inkübatördeki kutuya yerleştirin. ECIS test okuyucuyu ve sarf malzemelerini taşıma çantasından çıkarın ve ardından okuyucuyu açın. Ayrıca, hazırlanan biyochiplerden birini altı derece Celsius'luk inkübatörden çıkarıp bir kağıt havlu üzerine yerleştirin.10 mililitrelik bir şırınga kullanarak, etiketlenmiş 0,5 onsluk şeffaf plastik kontrol kavanozuna 10 mililitre kontrol suyu boşaltın. Doğru bir ölçüm için kabarcıkları giderdiğinizden emin olun. Ardından, ayrı bir şırınga kullanarak 0,5 onsluk şeffaf plastik test kavanozuna 10 mililitre test örneği boşaltın.Ardından, iki adet toz besiyeri flakonu çıkarın. Toz besiyeri flakonlarından birini açın ve bir flakonun tüm içeriğini, flakonun kendisini de çözeltinin içine düşürecek şekilde, kontrol suyu içeren kavanoza boşaltın. Bu işlemi test kavanozuyla da tekrarlayın.Ardından, tozun tamamen çözündüğünden emin olmak için kavanozların kapağını kapatın ve çalkalayın. Mavi 10 mililitrelik şırıngayı, kontrol çözeltisinin ilgili şişesinden dokuz mililitre ile; kırmızı 10 mililitrelik şırıngayı ise test çözeltisinin ilgili şişesinden dokuz mililitre ile doldurun.Şırıngalardaki mevcut hava kabarcıklarını giderin. Ardından, biyochip portlarındaki tapaları çıkarın ve tahliye düzeneğini takın. Biyochipi ECIS okuyucusundaki çıkarılabilir plastik tepsiye yerleştirin, kapağı kapatın ve ardından doldurulmuş şırıngaları dış biyochip portlarına bağlayın.Son olarak, şırınga pistonlarını takın. Okuyucunun ana ekranından, ön testi başlatmak için İleri'yi seçin. Yazılım daha sonra başlangıç empedanslarını kontrol edecektir.Empedanslar belirlenen aralıkta ise ekranda "Kartuş geçti" (Cartridge passed) yazısı görünecek ve kullanıcıdan "İleri" (Next) seçeneğini seçmesi istenecektir. Ardından, yumuşak klavye kullanılarak örnek bilgileri girilmeli ve işlem tamamlandığında "Kabul Et" (Accept) seçilmelidir. Bu noktada, yerleştirilen biyochip'ten iki dakikalık empedans verisi toplanacak ve ekrandaki bir zamanlayıcı geri sayım yapacaktır.İki dakika sonra, Next'e tıklayın. Yanıp sönen yeşil bir kutu ile "Inject samples now" (örnekleri şimdi enjekte edin) uyarısı göründüğünde, kontrol ve test ortamlarını ekli şırıngalardan aynı anda biyochip kanallarına enjekte edin. İşlem bittiğinde şırıngaları biyochipler üzerinde bırakın.Eğer ECIS okuyucu yazılımı, test sırasında herhangi bir noktada işlem kanalının kontrol kanalından istatistiksel olarak farklı olduğunu belirlerse, ekran görüntüsü numunenin kontamine olduğunu belirtecektir. Aksi takdirde, izleme süresinin sonunda herhangi bir kontaminasyon tespit edilmediğini belirtecektir. Her bir numune için test sonuçlarını "Kontamine" veya "Kontamine değil" olarak kaydedin.Test çalışmasının sonunda biyochipi çıkarın ve atın. Şırıngaları, test tüplerini ve testler sırasında biyochipin yerleştirildiği çıkarılabilir plastik tepsiyi durulayıp havayla kurutun. İçme suyunun olası kirleticileri olabilecek geniş bir toksik endüstriyel bileşik yelpazesinin temsilcileri olarak, burada gösterilen 13 kimyasal test edilmek üzere seçilmiştir.Testler sırasında, 13 örneğin dokuzu, insan sağlığıyla ilgili konsantrasyonlarda bir saat içinde elektrikli hücre altlığı empedans algılaması ile tespit edilmiştir. Elektrikli hücre altlığı empedans algılama testi sonucunda görülecek tipik çıktılar burada gösterilmiştir. Kontamine olmuş örnekler, kontrol olan temiz su örnekleriyle karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha düşük empedans seviyelerine sahiptir.Bu videoyu izledikten sonra, gökkuşağı alabalığı solungaç epitel hücrelerinden oluşan bir monokatman ile biyochip'in nasıl hazırlanacağı ve bu biyochip'in daha sonra içme suyu toksisitesinin değerlendirilmesi için empedans tabanlı bir toksisite testinde nasıl kullanılacağı konusunda iyi bir anlayış kazanmış olmalısınız. Bu prosedürü uygularken, biyochip'lerin hazırlanması sırasında aseptik çalışmaya özen göstermek ve biyochip'leri kullanılana kadar soğutucuda saklamak önemlidir. Her bir biyochip yalnızca bir kez kullanılabilir ve ardından imha edilmelidir.Uzmanlaşıldığında, biyochip hazırlığı yaklaşık 10 dakikada tamamlanabilir. Chipler toplu halde hazırlandığı için bu süre tahmini bir değerdir. Numune hazırlığı da dahil olmak üzere numune empedans testi, uygun şekilde gerçekleştirildiğinde yaklaşık 1 saat 10 dakika sürer.Bu prosedürün ardından, şüphelenilen kimyasal veya kimyasalları tanımlamak amacıyla, kontamine sonuç veren bir numune üzerinde analitik kimya gibi diğer yöntemler uygulanabilir. Bu tekniğin geliştirilmesi, su toksisite algılamasıyla ilgilenen araştırmacıların, gökkuşağı alabalığı solungaç epitel hücrelerini ve empedans algılamasını kullanan teknolojiden yararlanmasının önünü açmaktadır. Bu teknikleri faydalı bulmanızı umuyor ve bu yeni yeteneklerin kolaylaştırabileceği gelecekteki yenilikleri heyecanla bekliyoruz.Teşekkür ederiz, iyi günler dileriz.

preparation-testing-impedance-based-fluidic-biochips-with-rtgill-w1

Research

JoVE Journal

Environment

Çevre

Bu videoda, bir hücresel empedans testi aracılığıyla yapışık hücrelerin çoğalması da dahil olmak üzere hücresel olayların gerçek zamanlı izleme sürecini gösteriyoruz. Burada, yapışık hücreler, elektrotlar arasındaki akım akışını kısıtlayan ve empedansı artıran yalıtkan görevi görür.

Hücresel süreçlerin gerçek zamanlı olarak izlenmesi için hücresel empedans tabanlı analiz

Bu yazıda tek bir hücre analizi için bir mikroakışkan çip sunuyoruz. Bu sağlar: hücre içi proteinler, enzimler, kofaktörler, ve floresan deneyleri veya bağışıklık aracılığıyla ikinci haberciler miktar.

Tek Hücrelerinin yönlü Kimyasal Analiz için mikroakışkan Chip

Arıtılmış atık su ve yüzey (alıcı) suyu dahil olmak üzere su örneklerinin organik ekstraktlarında endokrin aktiviteyi taramak için bir protokol, ticari olarak temin edilebilen bölme tutuklu ("dondur ve çözdür") in vitro transaktivasyon biyotahlilleri kullanılarak uyarlanmıştır.

Su Kullanımı Endokrin Aktivitesi Tarama Piyasada satılan<em&gt; İn Vitro</em&gt; Transaktivasyon biyolojik tayinler

Bir mikrosıvısal Biyoalgılayıcı platform tasarlanmıştır ve çeşitli analitlerin hızlı ve hassas miktar için düşük maliyetli kuru film fotorezist teknolojisi kullanılarak imal edilmiştir. Bu tek kullanımlık sistem-küçük parça-immobilize enzim bağlı deneyleri elektrokimyasal göstergesi için stop-akış tekniği yoluyla sağlar.

Kuru zar elektrokimyasal mikrosıvısal Biyoalgılayıcı fotorezist tabanlı Platform: Cihaz imalat, On-chip tahlil hazırlama ve sistemin çalışması

Bu iletişim kuralı ticari dizilmiş altın microelectrodes ofmicrochip tabanlı yüksek çalışan maliyeti deneyleri tasarruf amaçlı bir hücre etiket ücretsiz analyzer için donatılmış yeniden oluşturmak için genel bir strateji açıklar. Rejenerasyon işlemi tripsin sindirim, etanol ve su ve mikroçip tekrarlanan kullanımı sağlar bir iplik adım ile durulama içerir.

Rejenerasyon için gerçek zamanlı hücre Analyzer donatılmış dizilmiş altın Microelectrodes

Bu yayın entegre elektrotlar transendothelial elektrik direniş (AYLARININ) doğrudan miktar için bir organ-on-chip cihazı imalatı açıklar. Doğrulama, kan - beyin bariyerini bu mikrosıvısal cihazın içinde taklit ve bariyer fonksiyonu izlenir. Elektrot entegrasyon ve doğrudan AYLARININ miktar için sunulan yöntemleri genel olarak geçerlidir.

İmalat ve Organ-on-chip sistemin doğrudan Transendothelial elektrik direncini ölçmek için entegre elektrotlar ile doğrulama

Elektrowetting tabanlı dijital mikroakışkan, manipülasyonunu kolaylaştırmak için mikrolitre hacimli damlacıkların görünür temas açısında voltaj güdümlü bir değişiklik kullanan bir tekniktir. Bunu fonksiyonel manyetik boncuklarla birleştirmek, enzime bağlı İmmünosorbent Test (ELISA) kullanılarak numune hazırlama ve patojenlerin tanımlanması için birden fazla laboratuvar ünitesi operasyonunun entegrasyonunu sağlar.

Otomatik Enzimbağlantılı İmmünosorbent Assay için Elektrowetting tabanlı Dijital Mikroakışkanplatformu

1500 kültür ünitesi, bir dizi gelişmiş peristaltik pompa ve yerinde karıştırma modülünden oluşan karmaşık yaşam makineleri üzerinde yüksek verimli çalışmalar için mikroakışkan bir sistem sunuyoruz. Mikroakışkan çip, vivodaki son derece karmaşık ve dinamik mikro çevresel koşulların analizini sağlar.

Yüksek Verimli Mikroakışkan Cihaz Kullanarak Dinamik ÇevreSel Koşulların Üretilmesi

İnvaziv hücre alt popülasyonlarını gerçek zamanlı olarak tespit etmek ve yakalamak için bir yaklaşım açıklıyoruz. Deneysel tasarım, hücrelerin elektrik empedansındaki değişiklikleri izleyerek Gerçek Zamanlı Hücresel Analiz kullanır. Kompleks dokulardaki invaziv kanser, immün, endotel veya stromal hücreler yakalanabilir ve ko-kültürlerin etkisi değerlendirilebilir.

Ko-kültürlerden İnvaziv Hücre Alt Popülasyonlarının Gerçek Zamanlı Tespiti ve Yakalanması

Aşağıdaki çalışma, gerçek zamanlı, yüksek verimli bir tarama tekniği olan elektrik hücresi-substrat empedans algılamasını (ECIS) kullanan seçilmiş bir metal-organik çerçevenin toksikolojik profilini değerlendirmektedir.

Metal-Organik Çerçeve Toksikolojik Profillerinin Gerçek Zamanlı Değerlendirilmesi için Elektrik Hücresi-Substrat Algılama

Ayrıntılı protokolümüz, insan bağırsak mukozasını 3D yapılar ve çeşitli hücre tipleri ile simüle eden, mikrobiyal kolonizasyona yanıt olarak bağışıklık tepkilerinin ve hücresel fonksiyonların derinlemesine analizini sağlayan gelişmiş çip üzerinde bağırsak modelinin oluşturulmasını ve kullanımını özetlemektedir.

Bağırsak mukozal bağışıklık tepkilerini analiz etmek için immünokompetan çip üzerinde bağırsak modeli

Öğrenin, gökkuşağı alabalığı solungacı hücreleriyle hazırlanan akışkan bioçipler kullanarak empedans tabanlı biyosensörle içme suyu toksisitesini hızlıca değerlendirme yöntemini.

Hazırlık ve Test zehirlilik için hızlı değerlendirme İçme Suyu Örnekleri için RTgill-W1 Hücreleri ile akışkan bioçipler Empedans tabanlı (Video) | JoVE Journal

Hazırlık ve Test zehirlilik için hızlı değerlendirme İçme Suyu Örnekleri için RTgill-W1 Hücreleri ile akışkan bioçipler Empedans tabanlı

Daha fazla video keşfet