Name: Retina Hastalıkları Değerlendirilmesi Nicel Otofloresans (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 22 s
Description: Öğrenin nicel otofloresans görüntüleme yöntemiyle retina pigment epitelinde lipofuscin düzeylerini değerlendirmeyi. Bu teknik, yaşla ilişkili makula dejenerasyonu ve retina hastalıklarının araştırılmasında tekrarlanabilir sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz işbirlikçileri, Francois Delori, Tomas Burke ve Tobias Duncker teşekkür etmek istiyorum. Araştırma Destek: NIH / NEI R01 EY015520 (RTS, JPG), ve Research sınırsız fonlar Körlük (GZT) Önlemek için.

Etik Beyanı: Bu çalışmalarda kayıtlı tüm hastalar Tıp New York Üniversitesi Okulu&#39;nda onaylanan kurumsal inceleme kurulu gözetim uyarınca bu yüzden yapılmıştır. 1. Hasta Seçimi ve Görüntüleme için ilk hazırlık Not: Aşağıdaki malzemeler gereklidir:% 0.5 tropikamid oftalmik solüsyon,% 2.5 fenilefrin oftalmik solüsyon, cSLO spektral domain optik koherens tomografi (SD-OCT) ve iç floresan referans ile donatılmıştır. <ol><li> görüntüleme önce, uygun bir şekilde, üretici talimatlarına uygun olarak veri toplama için cSLO ayarlayın. </li><li> cSLO bir iç floresan referansı monte edin. Not: üreticiden satın gibi iç floresan referans, bir metal halkaya yer almaktadır ve kamera lensi arkasında yerleştirilir. Başka bir üretici bir cSLO kullanılırsa, anlatılan daha başka bir konfigürasyon olabilirBu protokol. <ol><li> , CSLO içine referans eklemek çıkarmak için merceği büküm için, makinenin metal halka sökün ve referans içeren yeni metal halka ile değiştirin. Not: lazer gücü ve detektör duyarlılığı / kazanç varyasyonu için düzeltme sağlar iç floresan referans QAF tekniği için gereklidir. </li></ol></li><li> görüntüleme için işe hastalar rutin dilate göz muayenesi ve geçmiş göz tarih ve göz bulguları ile ortaya çıkabilir altta yatan tıbbi durumlar ile ilgili temel bilgileri elde var. </li><li> % 0.5 tropikamid ve% 2.5 fenilefrin ile öğrencileri dilate. KRİTİK ADIM: en az 6 mm pupili genişletmek. Not: Bu ışığın kesintisiz geçişi için gerekli ve böylece fundus optimal görselleştirme ve ölçüm içindir. </li><li> görüntüleme öncesinde, çene çenelik dayayarak, cSLO düzgün hastayı konumlandırmak, alın forehea karşı yerleştirilird dinlenme ve yanal canthi düzgün göstergeleri ile uyumlu. </li></ol> Göz Fundus 2. Baseline Görüntüleme <ol><li> İlk olarak, görüntü kaba odak makula üzerinde kamera merkezileştirme ve elde etmek için yakın kızılötesi yansıma (IR) ışık (820 nm dalga boyu) ile fundus. <ol><li> Hasta düzgün yerleştirilmiş olan IR görüntüleme modu için kontrol panelindeki donanım ayarını değiştirmek, fundus pozisyon kamera tam odak ve bir görüntü almak elle kadar </li><li> Altta yatan hastalığın maküler değerlendirmek için IR görüntüleme ile birlikte spektral domain optik koherens tomografi (SD-OCT) kullanan kontrol paneline &quot;IR-Ekim&quot;, ayarı ayarlayın. </li><li> görüntüleme penceresi mevcut kılavuzlar fundus IR görüntü OCT yönlendirmek doğru kullanın. Optimal SD-OCT kalitesi elde Ekim görüntünün görüntüleme penceresinin üst üçte birinde olacak şekilde kamerayı konumlandırın. en az bir yatay çizgi sc Edinmefovea aracılığıyla ve tüm görüntüleme alanını kapsayan. </li></ol></li></ol> 3. Kaf Görüntüleme kurma <ol><li> &quot;Yüksek hızlı&quot; görüntü elde etme kullanın. Not: Bu ayar sayesinde hasta hareketi ve iris veya göz kapaklarının ışığın ortaya çıkan tıkanıklık sinyal kaybı riskini azaltır hızlı görüntü elde etmek için izin verir. </li><li> kare &quot;9 ortalama&quot; kullanın. Not: Bu ayar sonradan olabilir 9 görüntü kareleri, hızlı, sıralı yakalama sağlar (aşağıya bakınız) gürültü ve paraziti azaltmak için &quot;ortalama&quot;. </li><li> &quot;30 x 30 derece&quot; alanını kullanın. Not: Bu görüntü alımı sırasında yakalanan retina alanının dereceye karşılık gelir. </li><li> Bu ilk başta endişe verici olabilir gibi görüntüleme öncesinde, mavi ışık ile ilgili hastayı uyarmak. </li><li> AF modunu açın ve ekran maksimum fundus AF (taraf ve görüntünün köşelerinde minimal koyulaşması) ile &quot;dolu&quot; şekilde kamera ekseni hizalayın. <ol><li> Hastalar h EğerParlak mavi ışık tolere ave zorluk, daha uzağa göz kamera ile görüntüleme başlatın ve sonra fundus tam görünümünde olduğu kadar hastanın doğru yavaşça kamera getirmek. KRİTİK ADIM: Işık engellendiğinde giren veya göz çıktıktan, sinyal neden olur azalmıştır. Lokalize düşüş bir görüntü yan veya köşe asimetrik koyulaşması olarak görülebilir. göz hareketleri yalnız ışık geçişini engellemeye zaman sinyal Genelleştirilmiş kaybı görülür. </li></ol></li><li> AF sinyal alanı boyunca en yüksek seviyede olacak şekilde kamerayı aynı hizaya getirin. ancak onlar kabaca korelasyon, maksimum sinyal ziyade keskin görüntü için hedefleyin. elle veya oftalmoskop kamerayı joystick ile yeniden konumlandırmak için cSLO hareket ettirerek kamera odağı ayarlayın. </li><li> fundus AF kolayca görülebilir şekilde hassasiyet / kazanç ayarlayın, ancak aşırı doygunluk kaçının. görüntü alımı sırasında, iç referans ya görünür renkli piksel (üst kısmında bulunangörüntü) ya da fundus sinyalinin doygunluk aşırı ve dolayısıyla kaybı gösterir. </li></ol> 4. Görüntü Alma Not: KRİTİK ADIM: görüntü alımı amaç bir oturum içinde görüntüler arasında değişkenlik kontrol etmek için seans başına 2 yüksek kalite 9-kare görüntü yığınları elde etmek olmalıdır. Hastayı ve kamerayı yeniden konumlandırmak sonra, değişkenliği ikinci değerlendirmek için iki görüntü oturumu ve kontrolünü sağlamak. Tüm görüntüler sonuçta iç referans (aşağıda tarif edilmiştir) kalibre edilir. <ol><li> Sadece duyusal retinanın 9 rodopsin ışığın emilimini en aza indirmek için &quot;ağartma&quot; (AF ışık retinanın tam maruz kalma) en az 20 saniye sonra görüntü kazanır. <ol><li> Kamera hizalama, odak ve hassasiyetini optimize etmek için bu süreyi kullanın. </li></ol></li><li> taze gözyaşı filmi sinyal kalitesini artırır her görüntü alımı öncesinde yanıp konuları var. </li><li> edinimi düzlemde göz kapaklarını kaçının. Not: daha zorlu hastalar için el açık göz kapaklarının yararlı olabilir. Yazarlar asistan bu görevi yerine öneririz. </li><li> o ışık azalmış sinyal sonuçlanan iris ile tıkalı olmadığından emin olmak için her görüntü alımı öncesinde hizalama Optimize. Not: As, en azından küçük bir hareket çok yaygındır, yazarlar her görüntü alımı öncesinde gerekli ince yeniden düzenlenmesi önerilmektedir. Rehberlik ve görüntüleme azalma hareketini yardımcı olur hastayı teşvik etmek. Operatör oyalama en aza indirecek şekilde yazarlar da &quot;satın alma düğmesi&quot; olarak makinenin ayak pedalı kullanmanızı öneririz. </li><li> sinyal-gürültü oranını artırmak için 9 kare yığının &quot;ortalama&quot; bilgisayar post-görüntü işleme gerçekleştirin. ortalamasını hesaplamak seçeneğini seçerek cSLO yazılımını kullanarak bir yığın ortalamasını hesaplayın. Not: Bazı kareler optimum kalitede olmayan yığınları olabilir (yani, lokalize veya yaygın si azalmıştırOptimal kareye kadar gnal göreceli), bu nedenle dikkatli bir şekilde her yığını incelemek ve ortalama hesaplama önce optimal çerçeveleri kaldırın. Not: olarak kabul edilebilir bir sinyal-gürültü oranına sahip ortalama görüntüler en aşağı 3 çerçeve arasında işlenebilir. taraf ve her görüntünün köşeleri cSLO kendi içinde sınırlamaları nedeniyle santral 20 derece daha düşük sinyal için normaldir. <ol><li> Yazılım operatörü gri düzeylerini normale isteyip istemediğinizi sorarsa, &quot;Hayır&quot; ı seçin 0 ile 255 arasında (yani, histogram germek). Bu analiz için değişmeden gri düzeylerini korumaktadır. </li></ol></li></ol> 5. Görüntü Analizi <ol><li> Daha önce Kaf tekniği için geliştirilmiş görüntü analiz yazılımı kullanarak tarif edildiği gibi AF görüntüleri analiz (Igor; 9). Bu yazılımı kullanarak tipik bir görüntü analizinin kısa bir açıklaması aşağıda yer almaktadır. <ol><li> ihraç Igor içinde Kaf program ve (.bmp formatında) ithalat görüntüleri yüklemekpiksel en boy oranı 768 x 768 (varsayılan çıkış parametresi) ile cSLO yazılımı. </li><li> Açılır menüde görüntüyü seçin ve analizi başlatmak. </li><li> &quot;Crosshair&#39;i&quot; foveayı ve &quot;dirsek&quot; optik diski (bu göstergeler İB&#39;leri ölçek ve konumlandırmak için kullanılır) dayanması örten şekilde resmin üzerine kalibrasyon göstergelerini yerleştirin. Doğru bir şekilde yerleştirildiğinde, kullanım yazılımı daha sonra foveayı çevreleyen çevresel ROI (bkz Şekil 1, 2) ile görüntüyü doldurmak istemleri. </li><li> iç floresan referans bulunanların seviyelere her görüntünün genel gri düzeyleri kalibre Igor seçeneği seçin. Not: Bu adım her görüntünün elektronik sıfır düzeyine ve her makinenin dahili referans kalibrasyon faktörü yanı sıra yaş, kırılma ve kornea eğrilik dahil hasta ile ilgili faktörler de dahil olmak üzere makine-ilişkili faktörler, kalibrasyonu için izin verir. Not: analiz yazılımı daha sonra sabit r görüntülerElde edilen görüntü ve QAF değerine egions her bölgede gösterilmiştir. Kaf değerleri otomatik olarak ayrı bir pencerede bir tablo biçiminde girilir. &quot; </li><li> komut istemleri dahilinde seçeneği seçerek Kaf &quot;ısı haritaları&quot; oluşturun. Tüm resimler ve veriler uygun seçenekleri seçerek bir excel elektronik tablodaki IGOR yazılım ihraç edilebilir. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Strauss, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+retinal+pigment+epithelium+in+visual+function%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+reviews%22%5BJournal%5D)">The retinal pigment epithelium in visual function.</a> Physiological reviews. 85, 845-881 (2005).</li>
<li>Ach, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+autofluorescence+and+cell+density+maps+of+the+human+retinal+pigment+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Quantitative autofluorescence and cell density maps of the human retinal pigment epithelium.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 55, 4832-4841 (2014).</li>
<li>Ach, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipofuscin+redistribution+and+loss+accompanied+by+cytoskeletal+stress+in+retinal+pigment+epithelium+of+eyes+with+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Lipofuscin redistribution and loss accompanied by cytoskeletal stress in retinal pigment epithelium of eyes with age-related macular degeneration.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 56, 3242-3252 (2015).</li>
<li>Schmitz-Valckenberg, S., Jorzik, J., Unnebrink, K., Holz, F. G., Group, F. A. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+digital+scanning+laser+ophthalmoscopy+fundus+autofluorescence+images+of+geographic+atrophy+in+advanced+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Graefe%27s+archive+for+clinical+and+experimental+ophthalmology+%3D+Albrecht+von+Graefes+Archiv+fur+klinische+und+experimentelle+Ophthalmologie%22%5BJournal%5D)">Analysis of digital scanning laser ophthalmoscopy fundus autofluorescence images of geographic atrophy in advanced age-related macular degeneration.</a> Graefe's archive for clinical and experimental ophthalmology = Albrecht von Graefes Archiv fur klinische und experimentelle Ophthalmologie. 240, 73-78 (2002).</li>
<li>Weng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+the+function+of+Rim+protein+in+photoreceptors+and+etiology+of+Stargardt%27s+disease+from+the+phenotype+in+abcr+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Insights into the function of Rim protein in photoreceptors and etiology of Stargardt's disease from the phenotype in abcr knockout mice.</a> Cell. 98, 13-23 (1999).</li>
<li>Holz, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+lysosomal+degradative+functions+in+RPE+cells+by+a+retinoid+component+of+lipofuscin%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Inhibition of lysosomal degradative functions in RPE cells by a retinoid component of lipofuscin.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 40, 737-743 (1999).</li>
<li>Sparrow, J. R., Nakanishi, K., Parish, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lipofuscin+fluorophore+A2E+mediates+blue+light-induced+damage+to+retinal+pigmented+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">The lipofuscin fluorophore A2E mediates blue light-induced damage to retinal pigmented epithelial cells.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 41, 1981-1989 (2000).</li>
<li>Smith, R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipofuscin+and+autofluorescence+metrics+in+progressive+STGD%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Lipofuscin and autofluorescence metrics in progressive STGD.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 50, 3907-3914 (2009).</li>
<li>Delori, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+measurements+of+autofluorescence+with+the+scanning+laser+ophthalmoscope%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Quantitative measurements of autofluorescence with the scanning laser ophthalmoscope.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 52, 9379-9390 (2011).</li>
<li>Burke, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+recessive+Stargardt+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in recessive Stargardt disease.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 55, 2841-2852 (2014).</li>
<li>Duncker, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+and+optical+coherence+tomography+in+best+vitelliform+macular+dystrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence and optical coherence tomography in best vitelliform macular dystrophy.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 55, 1471-1482 (2014).</li>
<li>Duncker, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+distinguishes+ABCA4-associated+and+non-ABCA4-associated+bull%27s-eye+maculopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence distinguishes ABCA4-associated and non-ABCA4-associated bull's-eye maculopathy.</a> Ophthalmology. 122, 345-355 (2015).</li>
<li>Greenberg, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+healthy+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in healthy eyes.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 54, 5684-5693 (2013).</li>
<li>Delori, F. C., Goger, D. G., Dorey, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+accumulation+and+spatial+distribution+of+lipofuscin+in+RPE+of+normal+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Age-related accumulation and spatial distribution of lipofuscin in RPE of normal subjects.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 42, 1855-1866 (2001).</li>
<li>Sparrow, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+mice%3A+correlation+with+HPLC+quantitation+of+RPE+lipofuscin+and+measurement+of+retina+outer+nuclear+layer+thickness%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+ophthalmology+%26+visual+science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in mice: correlation with HPLC quantitation of RPE lipofuscin and measurement of retina outer nuclear layer thickness.</a> Investigative ophthalmology & visual science. 54, 2812-2820 (2013).</li>
<li>Delori, F. C., Webb, R. H., Sliney, D. H. American National Standards Institute. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maximum+permissible+exposures+for+ocular+safety+%28ANSI+2000%29%2C+with+emphasis+on+ophthalmic+devices%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Optical+Society+of+America.+A%2C+Optics%2C+image+science%2C+and+vision%22%5BJournal%5D)">Maximum permissible exposures for ocular safety (ANSI 2000), with emphasis on ophthalmic devices.</a> Journal of the Optical Society of America. A, Optics, image science, and vision. 24, 1250-1265 (2007).</li>
</ol>

STA: açıklama yok, JPG: açıklama yok, RTS: danışman, Ocata Therapeutics.

Anormal RPE lipofusin dağılımı, artmış ya da azalmış olup, retina hastalığı duyarlı bir göstergesidir ve genellikle duyu retina fonksiyonunun kaybı ile ilişkilidir. Burada, RPE lipofusin değerlendirilmesi için Kaf uygulanmasını açıklar. Bir iç floresan referans Ortaklığımızın standart görüntüleme tekniği yanında değişken lazer güç ve dedektör hassasiyeti 9 düzeltmek için AF seviyelerinin güvenilir kantitatif için izin verir. Bu yöntem, ilaç veya gen tedavisi gibi tıbbi müdahaleler etkinliğini değerlendirirken...

Retina pigment epiteli (RPE) sayısız süreçleri 1 ile duyusal retinanın işlevini destekler. Yaşa bağlı makula dejenerasyonu (YBMD) sanayileşmiş ülkelerde tedavi edilemez körlüğün en önemli nedenidir ve pigment kaybı, fonksiyon ve atrofi kaybı dahil RPE değişiklikleri ile karakterizedir. AMD ve normal yaşlanma, RPE lipofusin granül olarak anılacaktır fagosite fotoreseptör parçalarını içeren floresan, lizozom türevi organeller birikir. RPE lipofusin birikimi oksidatif disfonksiyonu 1 belirtmek için düşünülmüştür, ancak son çalışmalar RPE morfolojisi yüksek lipofusin seviyeleri 2 ile yaşlı gözlerde normal kaldığını göstermiştir. AMD ve AMD ilerlemesi Ancak, lipofusin dağılımı anormal desenler, lipofusin özellikle kaybına, belgelenen belirteçler, histolojik ve klinik 3,4 hem de arızalı süreçRPE lipofusin şarkı da belli kalıtsal retina dejenerasyonlar meydana geldiği görülmüştür. Stargardt hastalığı (STGH) muzdarip hastalar sonunda AMD 5 görülene benzer görme kaybına geliştirilmesi, genç yaşta RPE lipofusin birikir. Bu bulgular lipofusin birikimi kendisi toksik ve RPE disfonksiyonu 6,7 sürebileceği ileri sürdü. Ancak, zaman içinde STGH olan kişilerde ayrıntılı görüntüleme çalışması, odak lipofusin birikimi 8 sonraki RPE kaybına yol teyit etmedi. lipofusin anormallikler retina dejenerasyonlar için belirteçler olmasına rağmen Dolayısıyla, lipofusin doğrudan toksisitesi için bir rol kanıtlanmamış kalır. RPE retinanın en arka hücre tabakası, ancak oküler fundus floresan sinyal çoğunluğunu oluşturur. RPE türetilen üretimi ve otofloresansı (AF) tespit vi sağlar konfokal tarama laser oftalmoskopi (cSLO) kullanılarak yapılabilirfundus AF mekansal dağılımı sualization. Bazı retina dejenerasyonlar bu durumların tanı ve takibinde ayırt edici fundus AF desenleri, ve AF görüntüleme yardımcıları göstermektedir. Standart AF görüntüleme klinik olarak önemli olmasına rağmen, kantitatif AF (Kaf) RPE sağlığını değerlendirmek önemli bir araç haline gelmiştir. Biz ve diğerleri güvenilir belirli retina yerlerde 9 at Kaf düzeylerini belirlemek için standart bir yaklaşım geliştirdik. Kaf potansiyel tanı uygulamaları ve retina durumlarının izlenmesini sahiptir ve aynı zamanda prognoz ve risk fayda olabilir. Buna ek olarak, QAF tanısal özellikleri, belirli retina bozukluklarının 10-12 için tarif edilmiştir. Burada, sağlıklı ve hastalıklı gözlerde değerlendirilmesinde uygulanması bir görsel gösteri eşliğinde bizim teknik gerçekleştirmek için adım adım ayrıntıları.

<table><tbody><tr><td>Spectralis HRA + OCT</td><td>Heidelberg Mühendislik</td><td></td><td></td></tr><tr><td>%0,5 tropikamid oftalmik çözelti</td><td></td><td></td><td>Herhangi bir marka kullanılabilir</td></tr><tr><td>%2,5 fenilefrin oftalmik solüsyon</td><td></td><td></td> Herhangi <td>bir marka kullanılabilir</td></tr><tr><td>Dahili floresan referansı</td><td>Heidelberg Engineering</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IGOR Pro yazılımı</td><td>WaveMetrics</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

retina hastalıkları değerlendirilmesi nicel otofloresans

Quantitative Fundus Autofluorescence for the Evaluation of Retinal Diseases

Retina pigment epiteli (RPE), üstteki duyusal retina ile yan yanadır ve görsel sistemin işlevini destekler. RPE tarafından gerçekleştirilen görevler arasında fagositoz ve lizozomdan türetilmiş organeller yoluyla dış fotoreseptör segmentlerinin işlenmesi yer alır. Depolanan ve lipofusin granülleri olarak adlandırılan bu bozunma ürünleri, kısmen, konfokal taramalı lazer oftalmoskopi (cSLO) ile fundus otofloresan olarak klinik olarak tespit edilebilen geniş floresan absorpsiyon ve emisyon spektrumlarına sahip bisretinoidlerden oluşur. Lipofuscin birikimi artan yaşla ilişkilidir, ancak retinanın hem edinsel hem de kalıtsal dejeneratif hastalıklarında çeşitli paternlerde bulunur. Bu nedenle, birikim paternini incelemek ve bu paternleri üstteki duyusal retinadaki değişikliklerle ilişkilendirmek, retina hastalığının patofizyolojisini ve ilerlemesini anlamak için çok önemlidir. Burada, hem sağlıklı hem de hastalıklı gözlerde RPE lipofuscin seviyesini ölçmek için laboratuvarımız ve cSLO kullanan diğerleri tarafından kullanılan bir tekniği açıklıyoruz.

Bu teknik, her iki sağlıklı 13 ve hastalık durumlarında 10-12&#39;de QAF incelemek için kullanılmıştır. Sağlıklı gözlerde (Şekil 1), RPE yayılan AF fundus (Şekil 1A) boyunca nispeten eşit olarak dağıtılır. Azaltılmış yoğunluğu nedeniyle maküler pigment ışığın bloke santral makula bölgesinde görülen ve iki tarafın ve görüntünün köşelerinde nedeniyle göz ve kamera optik etmektir. Gemiler koyu görünür ve iyi edinilen görüntülerde net b...

Retina pigment epiteli (RPE), lipofusin olarak biriken görsel döngü yan ürünlerini geri dönüştürerek duyusal retinayı destekler. Bu ürünler otofloresandır ve in vivo olarak kalitatif olarak görüntülenebilir. Burada, konfokal taramalı lazer oftalmoskopi kullanarak RPE lipofuscinini kantitatif olarak görüntülemek için bir yöntem açıklıyoruz.

Retina Hastalıkları Değerlendirilmesi Nicel Otofloresans

The retinal pigment epithelium (RPE) is juxtaposed to the overlying sensory retina, and supports the function of the visual system. Among the tasks ...

Kantitatif otofloresansın veya qAF'nin genel amacı, hem sağlıklı hem de hastalıklı gözlerde retinanın destek hücreleri olan retinal pigment epitelyumundaki (RPE) lipofuscin toplam seviyesini değerlendirmektir. Bu teknik, retinal pigment epitelyumunun sağlığının yaşa bağlı makula dejenerasyonu (AMD) gelişimiyle nasıl etkileşime girdiği gibi retinal hücre biyolojisindeki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, fundustaki lipofuscin otofloresansının mutlak seviyelerinin belirlenmesine olanak tanımasıdır; bu sayede hastalar arasında, hasta görüntüleme seansları arasında ve geniş çalışma popülasyonlarında kantitatif ve tekrarlanabilir takip yapılabilmektedir.Görüntüleme öncesinde, veri toplama için konfokal taramalı lazer oftalmoskopiyi (CSLO) üretici talimatlarına uygun olarak ayarlayın. Üreticiden satın alınan dahili floresan referansı yerleştirmek için, lensi çevirerek çıkarın, cihazın metal halkasını sökün ve referansı içeren yeni metal halka ile değiştirin. Işığın kesintisiz geçişi için pupillaların en az 6mm genişliğe dilate edilmesi esastır.%0,5 tropicamide ve %2,5 phenylephrine ile hastanın pupillalarını en az 6 mm genişletin; bu, fundus'un görülmesi ve ölçülmesi için ışığın kesintisiz geçişi açısından gereklidir. Hastayı; çenesi çene desteğine dayanacak, alnı alın desteğine yerleşecek ve lateral kanti her iki yanındaki göstergelerle uygun şekilde hizalanacak şekilde CSLO üzerine yerleştirin. Bazal görüntüleri elde etmek için, kamerayı makula üzerine merkezlemek ve kaba odaklama yapmak amacıyla önce fundus'u yakın kızılötesi yansıma veya IR ışığı ile görüntüleyin.Hasta uygun şekilde konumlandırıldıktan sonra, kontrol panelindeki donanım ayarını IR görüntüleme moduna getirin, fundus tam odaklanana kadar kamerayı manuel olarak konumlandırın ve görüntü alın. Makulayı altta yatan hastalıklar açısından değerlendirmek için, IR görüntüleme ile birlikte spektral alan optik koherens tomografi (SDOCT) kullanan IROCT ayarına geçiş yapın. OCT'yi fundusun IR görüntüsüne doğru şekilde yönlendirmek için görüntüleme penceresinde bulunan kılavuzları kullanın.Optimal SDOCT kalitesini elde etmek için kamerayı, OCT görüntüsü görüntüleme penceresinin üst üçte birlik kısmında olacak şekilde konumlandırın. Foveadan geçen ve tüm görüntüleme alanını kapsayan en az bir yatay hat taraması gerçekleştirin. qAF görüntülemesini kurmak için, hastanın hareketinden kaynaklanan sinyal kaybı ile iris veya göz kapaklarının ışığı engelleme riskini azaltan yüksek hızlı görüntü elde etme yöntemini kullanın.Gürültüyü ve artefaktları azaltmak için hızlı ve ardışık olarak dokuz görüntü çerçevesi yakalayıp ardından bunların ortalamasını alan 9 çerçeve ortalamasını (Mean of 9 frames) kullanın. Görüntü alımı sırasında yakalanan retinal alanın derecelerini ifade eden 30 x 30 derecelik bir alan seçin. Hastayı mavi ışık hakkında uyardıktan sonra AF modunu açın ve kamera eksenini, ekranın fundus AF ile maksimum düzeyde dolacağı, görüntünün yanlarının ve köşelerinin minimum düzeyde karardığı şekilde hizalayın.Hastalar parlak mavi ışığa tolerans göstermekte zorlanırlarsa, görüntülemeye başlamak için kamerayı gözden daha uzağa taşıyın ve fundus tamamen görünene kadar kamerayı yavaşça hastaya yaklaştırın. En net görüntüyü elde etmek yerine, AF sinyalinin tüm alan boyunca en yüksek seviyede olmasını sağlayacak şekilde CSLO'yu hareket ettirerek kamerayı manuel olarak veya oftalmoskop joystick'i ile hizalayın. Görüntü edinimi sırasında, dahili referansta veya fundusta görülen renkli pikseller aşırı doygunluğa ve dolayısıyla sinyal kaybına işaret eder.Görüntüleme sırasında duyusal retinadaki rhodopsin tarafından ışık emilimini en aza indirmek için retinayı en az 20 saniye boyunca AF ışığına tamamen maruz bırakın. Bu süreyi kamera hizalamasını, odağı ve hassasiyeti optimize etmek için kullanın. Taze bir gözyaşı filmi sinyal kalitesini artırdığından, her görüntü alımı öncesinde deneklerin gözlerini kırpmalarını sağlayın.Görüntüleme düzleminde göz kapaklarından kaçının ve görüntüyü alın. Veri analizi için her görüntüleme oturumu başına en az iki yüksek kaliteli görüntü oluşturmak önemlidir. Sinyal-gürültü oranını artırmak için dokuz karelik yığının ortalamasını hesaplamak üzere CSLO yazılımını kullanarak görüntü sonrası işlemeyi gerçekleştirin.Görüntü analizini metin protokolüne göre gerçekleştirin. Burada gösterildiği gibi, sağlıklı gözlerde, RPE'den yayılan AF fundus boyunca nispeten homojen olarak dağılır. Maküler pigmentin ışığı engellemesi nedeniyle merkezi maküler bölgede; göz ve kamera optikleri nedeniyle ise kenarlarda ve köşelerde azalmış yoğunluk görülür.Damarlar koyu renkli ve net odaklı olmalıdır. Bu şekil, bu şekildeki qAF seviyelerinin karşılık gelen ısı haritası sunumunu temsil etmektedir. Daha soğuk renkler daha düşük AF yoğunluğundaki alanlara, daha sıcak renkler ise daha yüksek AF yoğunluğundaki alanlara karşılık gelir.Maksimum yoğunluk genellikle ikinci konsantrik sekiz segmentli halkada görülür ve bu bölgedeki ortalama yoğunluklar çoğu veri analizi için kullanılır. Burada, AMD'nin ileri bir formu olan coğrafik atrofiyle seyreden AMD'li bir gözün temsilci bir analizi gösterilmektedir. AMD'nin bu formu, belirgin şekilde azalmış veya yok olmuş AF ile kanıtlanan lokalize RPE kaybı bölgeleriyle sonuçlanır ve progresif merkezi görme kaybına neden olur.Bu prosedürü uygularken, veri kalitesini maksimize etmek için aday hastaların dikkatle seçilmesi ve yüksek kaliteli görüntülerin tekrarlanabilir şekilde elde edilmesi gerektiğini hatırlamak önemlidir. Bu prosedürün kullanımı, retinal dejenerasyonların ilerlemesini belirlemek amacıyla retinal sağlığın boylamsal takibine olanak tanıyabilir. Geliştirilmesinin ardından bu teknik, oftalmoloji alanındaki araştırmacıların retinal dejenerasyonları takip etmelerinin ve analiz etmelerinin yolunu açmıştır.Bu videoyu izledikten sonra, retinal dejenerasyonu olan hastalarınızı değerlendirmek için kantitatif otofloresan yönteminin nasıl kullanılacağına dair iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. İzlediğiniz için teşekkürler, deneylerinizde başarılar dileriz.

quantitative-fundus-autofluorescence-for-evaluation-retinal

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Retina görüntü analizi microdolaşim görselleştirmek için dikkat çekmeyen bir işlemdir. Kardiyovasküler risk faktörlerinin etkisi retinal damar kalibre değişikliklere neden olabilir. Prosedürler kalibre açıklanan geminin hesaplamak için fundus görüntüleri ve adımları elde etmek.

Bir Uygun Aracı Olarak Fundus Fotoğraf Epidemiyolojik Çalışmaların Kardiyovasküler Hastalıklar Risk Faktörleri için Mikrovasküler Cevapları Eğitim için

Retina önemli benzerlikler beyinle paylaşır ve böylece damarlara ve beyinde nöronal yapısında olmayan invaziv çalışmaya benzersiz bir pencereyi temsil eder. Bu iletişim kuralı demans retina görüntüleme teknikleri kullanarak çalışma yöntemi açıklanır. Bu yöntem potansiyel olarak demans tanı ve risk değerlendirmesine yardımcı olabilir.

Demans çalışması için retina Imaging'i kullanma

İzole kontrol görsel uyarılmış potansiyel (icVEP) yöntemi başlangıçta glokom da zarar gören magnocellular ON yolu değerlendirmek için burada uygulanır. Çalışma güvenilir sonuçlar elde etmek için icVEP kullanarak standart operatif prosedürleri gösterir. Bu glokom erken teşhisi için yararlı bir objektif tanılama teknolojisi olarak hizmet olduğu kanıtlanmıştır.

İzole-Check Görsel Uyarılmış Potansiyele Göre Hastalarda Erken Evre Açık Açılı Glokomun Değerlendirilmesi

Bu yazıda, araştırmacının göz içi üveitinin fare modelini oluşturmasını sağlayan bir protokol sunuyoruz. Daha yaygın olarak deneysel otoimmün üveit (EAU) olarak adlandırılan bu yerleşik model, insan hastalığının birçok yönünü yakalar. Burada, birkaç okuma kullanarak hastalığın ilerlemesinin nasıl indükleneceğini ve izleneceğini açıklayacağız.

Deneysel Otoimmün Üveit: Göz İçi İnflamatuar Bir Fare Modeli

Diyabetik retinopati körlüğün önde gelen nedenlerinden biridir. Histoloji, kan-retinal bariyer parçalanma testi ve floresan anjiyografi, retinanın patofizyolojisini anlamak için değerli tekniklerdir ve bu da diyabetik retinopatiye karşı etkili ilaç taramasını daha da artırabilir.

Sıçan Modelinde Retinal Patofizyolojik Değerlendirme

Fare modelleri, retinal pigmentli epitelin (RPE) biyolojisini araştırmak için yararlı araçlar olabilir. Farelerin bir dizi RPE patolojisi geliştirebileceği tespit edilmiştir. Burada, ışık, iletim elektronu ve konfokal mikroskopi kullanarak farelerde RPE patolojilerini aydınlatmak ve ölçmek için bir fenotipleme protokolü tarif ediyoruz.

Yaşa Bağlı Makula Dejenerasyonunun Fare Modellerinde Retinal Pigmentli Epitel Patolojilerini Değerlendirme ve Ölçme Protokolü

Bu araştırma, fundus boyunca değişen otofloresan seviyelerini hesaba katarken, bireysel ilgi bölgelerinden (örneğin, yaşa bağlı makula dejenerasyonunda [AMD] drusen ve subretinal drusenoid birikintileri) otofloresan seviyelerini belirlemek ve karşılaştırmak için bir iş akışını açıklamaktadır.

Fundus Otofloresansında Yaşa Bağlı Makula Dejenerasyonu Lezyonuna Özgü Varyasyonları Kantitatif Olarak Belirlemek İçin Bir İş Akışı

Laboratuvar tahlilleri, yaşa bağlı makula dejenerasyonunun (AMD) uzunlamasına optik koherens tomografi (OCT) tabanlı multimodal görüntülemesinden prognostik değerden yararlanabilir. AMD'li ve AMD'siz insan donör gözleri, doku kesitlemeden önce OCT, renk, yakın kızılötesi yansıma taramalı lazer oftalmoskopi ve otofloresan kullanılarak iki uyarma dalga boyunda görüntülenir.

Ex Vivo Yaşa Bağlı Makula Dejenerasyonu Araştırmaları için İnsan Donör Gözlerinin OCT Tabanlı Multimodal Görüntülemesi

Parkinson hastalığı yol açan genlerde mutasyon taşıyan hastaların Fibroblastlar kolay erişilebilir bir...

Parkinson Hastalığı Alanında Mitokondriyal Fenotiplerinin İzleme İlköğretim İnsan Fibroblast Kullanımı

Burada, metal bir epiretinal yapışma ve retinal protezin hemen bitişiğindeki oküler dokuyu görselleştirmek için histolojik teknikleri açıklıyoruz.

Lokalize Histopatolojik Analiz için bir Retina Protez ile implant İşleme Teknikleri Gözler için: Bölüm Retina Tacks ile 2 Epiretinal İmplantlar

Öğrenin nicel otofloresans görüntüleme yöntemiyle retina pigment epitelinde lipofuscin düzeylerini değerlendirmeyi. Bu teknik, yaşla ilişkili makula dejenerasyonu ve retina hastalıklarının araştırılmasında tekrarlanabilir sonuçlar sağlar.

Retina Hastalıkları Değerlendirilmesi Nicel Otofloresans

Daha fazla video keşfet