4 Şubat 2016
Burada, sıçanlarda Pavlovian koşullu yaklaşım davranışını ortaya çıkarmak için bir protokol sunuyoruz. Bu prosedür, ödülle ilgili ipuçlarına yaklaşma ve teşvik belirginliği atfetme eğilimindeki bireysel farklılıkları ölçmek ve bağımlılık savunmasızlığını araştırmak için kullanılabilir.
Bu prosedürün genel amacı, sıçanlarda Pavlovyen koşullu yaklaşım davranışını ortaya çıkarmaktır. Bu prosedür, davranışsal sinirbilim alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir, örneğin bazı bireylerin neden ödül ipuçlarını takip etme cazibesine direnebildiği, diğerlerinin ise bunu yapamadığı gibi. Bu prosedürün temel avantajı, ipuçlarının teşvik edici motivasyon değerini, tahmin değerlerinden ayrı olarak ölçmemize izin vermesidir.
Bu prosedürü göstermek, laboratuvarımdan bir sinirbilim yüksek lisans öğrencisi olan Christopher Fitzpatrick olacak. Bu protokol, ortam gürültüsünü sağlamak için havalandırma fanlarına sahip ses azaltıcı kabinlerde ticari işlevsel koşullandırma odalarını kullanır. Her haznenin içinde, kafa girişleri için bir kızılötesi sensörlü bir pelet magazini donatın.
Her odanın ön duvarına, yerden üç santimetre yüksekte yerleştirin ve 45 miligram muz aromalı gıda peletleri vermek için bir dağıtıcı takın. Ardından, dengeli bir şekilde, geri çekilebilir bir kolu prizin her iki yanına yaklaşık 2,5 santimetre ve zeminden yaklaşık 3 santimetre yükseğe yerleştirin. Kol, daha çekici hale getirmek için bir LED işaret ışığına sahip olmalıdır.
Kolu kalibre etmek için üzerine 10 gramlık bir ağırlık koyun ve ağırlık kolu aşağı itene kadar kalibrasyon vidasını ayarlayın. Ardından, haznenin üzerindeki haznenin çatısına kırmızı bir ışık takın. Bu, ışıklı kolun göze çarpmasını artıracaktır.
Böylece oda hazırlıkları tamamlanmış olur. 250 ila 300 gram arasında olan yetişkin erkek Sprague Dawley fareleri sipariş edin ve varışta onları eşleştirin. Fareleri alışmak için konut kolonisinde en az iki gün boyunca rahatsız edilmeden bırakın.
Koloni 12 saatlik bir aydınlık-karanlık döngüsünde tutulmalı ve sıçanların yiyecek ve suya ad libitum erişimi olmalıdır. İlk alışma döneminden sonra, her bir fareyi birkaç gün boyunca günde en az bir dakika idare edin. Ön eğitimden önceki iki günde, her fareye günde 15 muz aromalı pelet verin.
Bu peletleri ev kafesinin ayrı taraflarına eşit olarak bölün. Bu protokol için bir ön eğitim programı oluşturun. Programlama MEDState Notasyonunda yapılır.
Kılavuz çevrimiçi olarak mevcuttur. Programın başlamasından beş dakika sonra değişken zamanlı 30 saniyelik bir programda 50 gıda peleti vermek için bir program yazın. Aralık ortalama 30 saniyedir, ancak sıfır ile 60 saniye arasında rastgele değişir.
Bu süre zarfında, kırmızı ev ışığı açık olmalı, ancak geri çekilebilir kol program süresince geri çekili kalmalıdır. PCA eğitiminden bir gün önce ışık döngüsü sırasında ön eğitimi yapın. Her fareyi bir ameliyat odasına yerleştirin.
Oda kapısını kapatın ve kilitleyin. Ses azaltıcı kabin kapağını kapatın ve programı hemen çalıştırın. Program tamamlanır tamamlanmaz, fareleri odalardan çıkarın.
Tüketilen pelet sayısını kaydedin. Tüm peletleri tüketmeyen herhangi bir sıçan, daha fazla testten çıkarılmalıdır. Yazılımda, programın başlamasından bir dakika sonra başlayarak yaklaşık 40 dakika boyunca 25 deneme çalıştırmak için bir eğitim programı yazın.
Her deneme sırasında, kolun yanmasını ve sekiz saniye boyunca haznenin içine uzatmasını sağlayın. İç kırmızı ışık her zaman açıktır. Kol geri çekildiğinde, farenin tepkisinden bağımsız olarak bir yiyecek peleti dağıtın.
Her denemeyi değişken zamanlı 90 saniyelik bir programa göre ayırın. Aralık ortalama 90 saniyedir, ancak 30 ila 150 saniye arasında rastgele değişir. PCA programını, ön eğitimin çalıştırıldığı gibi çalıştırın.
Fareleri çıkardıktan sonra, tüketilen pelet sayısını kaydedin ve tüm peletleri tüketmeyen fareleri hariç tutun. Şimdi, program tarafından toplanan verileri kullanarak PCA indeks puanlarını hesaplayın. Erkek sıçanlara beş PCA eğitim seansı uygulandı ve bu süre zarfında dergi girişlerinin ve kol preslerinin sayısı, gecikmesi ve olasılığı kaydedildi.
Her bir günlük PCA eğitim oturumu için bu değişkenlerden PCA indeks skorları hesaplandı. Son iki eğitim seansından elde edilen PCA indeks skorları, sıçanları işaret izleyiciler, hedef izleyiciler veya bir ara fenotipe sahip olarak kategorize etmek için kullanıldı. İşaret izleyicileri öncelikle davranışlarını ödülle ilgili kol işaretine yaklaştı ve yönlendirdi.
PCA indeksinde puanları 5 ile 1 arasında değişmektedir. Buna karşılık, hedef izleyicileri öncelikle davranışlarını ödül dağıtımının kaynağı olan pelet dergisine yaklaştı ve yönlendirdi. PCA indeksinde puanları 5 ile 1 arasında değişmektedir.
Ara fenotip her iki davranışı da önyargılı değildir. Bu videoyu izledikten sonra, sıçanlarda Pavlovian koşullu yaklaşımın nasıl ortaya çıkarılacağını iyi anlamış olmalısınız.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu protokol, sıçanlarda Pavlovyen koşullu yaklaşma davranışını ortaya çıkararak araştırmacıların ödülle ilişkili ipuçlarına yaklaşma eğilimindeki bireysel farklılıkları ölçmelerine olanak tanır. Bağımlılık yatkınlığı ve ipuçlarının motivasyonel değeri hakkında bilgiler sağlar.
Sıçanlarda Pavlovyen koşullu yaklaşım (PCA) eğitimi, biyofarma ekiplerinin ödülle ilişkili ipuçlarının motivasyonel özelliklerini analiz etmelerine olanak tanıyarak nöropsikiyatrik ve bağımlılık araştırmalarında mekanistik risk azaltmaya destek sağlar. İpucu güdümlü davranışlardaki bireysel farklılıkları nicelleştiren PCA, hedef doğrulaması ve translasyonel model seçimi için öngörücü güvenilirlik sunar. Bu yaklaşım, MSS ve davranış bozuklukları programları için erken keşif kararlarını ve portföy önceliklendirmesini bilgilendirir.
PCA eğitimi, hipotez odaklı davranışsal araştırmalar ile translasyonel model geliştirme arasında bir köprü kurarak, erken keşif ile preklinik doğrulama arasındaki ara yüzle konumlandırılmıştır.