16 Şubat 2016
Bu yöntem, deneysel olarak indüklenen miyokard iskemisi olan farelerde kardiyak morfolojiyi, fonksiyonu, perfüzyonu, metabolizmayı ve iyotlu kontrast madde ile canlılığı değerlendirmek için Kuantum Mikro Bilgisayarlı Tomografi (MikroBT) kullanımını ana hatlarıyla belirtir. Teknik, insan kalbi hastalığının çeşitli hayvan modellerinin tahribatsız, yüksek verimli uzunlamasına in vivo görüntülenmesi için uygulanabilir.
Bu prosedürün genel amacı, bir fare kardiyak iskemi modelinde global ve bölgesel miyokardiyal fonksiyonları değerlendirmek için intrinsik kardiyo solunum kapılarının görüntülenmesinde yüksek hızlı mikro bilgisayarlı tomografinin kullanımını göstermektir. Bu yöntem, kardiyak patofizyolojideki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir, örneğin patoloji veya malfa tedavilerinin küresel ve bölgesel miyokardiyal fonksiyon üzerindeki etkileri nelerdir? Bu tekniğin en büyük avantajı, uzman olmayan kişiler tarafından kolayca gerçekleştirilen en önemli kardiyak parametrelerin hızlı, uzunlamasına, non-invaziv bir değerlendirmesini sağlamasıdır.
Bu tekniğin etkileri kardiyovasküler hastalıkların tedavisine kadar uzanır. AS, kardiyak hastalık gelişimi hakkında ileri düzeyde bilgi edinmek için klinik öncesi bir araç olarak kullanılabilir. Prosedürü gösterenler, bir teknisyen olan Nicole van Vliet'in yanı sıra doktora sonrası Elza van Deel ve laboratuvarımızdan başka bir teknisyen olan Yanto Ridwan olacak.
12 haftalık bir farenin derisinde ikinci ve üçüncü kaburgalar arasında küçük bir kesi yaparak başlayın. Daha sonra küçük kancalar kullanarak, interkostal kasları ortaya çıkarmak için göğüs kaslarını bir kenara çekin. Ardından, akciğerlere zarar vermeden üçüncü interkostal kası dikkatlice kesmek için kavisli iki milimetre bıçaklı yaylı makas kullanın.
Daha sonra forseps kullanarak perikardımı yırtın ve akciğerleri bir kenara itmek için bir parça ıslak gazlı bez kullanın. Kancaları, sol ventrikül serbest duvarının büyük bir kısmı ve sol atriyumun bir kısmı görünecek şekilde göğüs kafesinin iç kısmına doğru yeniden konumlandırın. Daha sonra sol koroner arteri bulmak için atriyumu kullanarak, sol koroner arterin altına yedi sıfır ipek cerrahi sütür yerleştirin ve enfarktüs boyutunu standardize etmek için sütürü sol atriyumun kenarının iki milimetre altına düğümleyin.
Sol ventrikül serbest duvarının soluklaşmasıyla enfarktüs indüksiyonunun başarısını görsel olarak doğruladıktan sonra, akciğeri dikkatlice yeniden şişirin ve göğsü altı sıfır ipek cerrahi sütür ile sıkıca kapatın. Yarayı tuzlu suyla temizleyin ve cildi kapatmak için daha fazla ipek dikiş kullanın, ardından iyileşmeyi teşvik etmek ve enfeksiyonu önlemek için yara spreyi uygulayın. Ardından, fareyi tamamen iyileşene kadar bir ısıtma yastığı üzerindeki bir kafese yerleştirin.
Ameliyattan üç ila dört saat sonra, mikroCT tarayıcıyı açın, mikroCT kontrol yazılımını açın ve röntgen tüpünü ısıtın. Daha sonra, bir iyodinat kontrast madde kabının kauçuk flakon tıpasına% 70 alkol uygulayın ve hayvanın vücut ağırlığının gramı başına beş ila 10 mikrolitre ajan çekmek için düşük ölü alan şırıngası kullanın. Hava kabarcıklarını temizledikten sonra, anestezi uygulanmış farenin kuyruğunu %70 alkolle temizleyin ve kuyruk damarlarını ısıtın.
Kontrast maddeyi yanal bir kuyruk damarına enjekte edin. Kontrol yazılımında canlı mod düğmesi göründüğünde, x-ışını tüpü hazırdır. Küçük delikli kapağı ve küçük hayvan yatağını yerleştirin.
Veritabanı penceresinde yeni veritabanı düğmesini tıklatın ve yeni veritabanı için bir ad girin. İletişim kutusu göründüğünde, gözat düğmesine tıklayın ve veritabanının kaydedileceği sürücüye gidin. Ardından Tamam'a tıklayın ve veritabanı penceresinde yeni veritabanını gözlemleyin.
Tarama koşullarını ayarlamak için uygun parametreleri seçin. Şimdi enjekte edilmiş, anestezi uygulanmış fareyi tarayıcıdaki hayvan yatağına yerleştirin ve güvenlik kilidini devreye sokmak için alet kapısını sağa kaydırın. Konuyu gerçek zamanlı olarak görüntülemek ve X yakalama penceresini ve hayvanı gözlemlemek için canlı mod düğmesine tıklayın.
Sahne Z ekseni kontrolü ileri geri düğmelerine basıldığında, fare göğsü görüş alanına girene kadar hayvan yatağını hareket ettirin. Ardından, hayvanı mavi sınırlayıcı kutunun içine yerleştirmek için hayvan yatağı kontrolü sol ve sağ oklarını kullanın. Kontrol yazılımı penceresindeki döndürme kontrolü açılır listesinden 90'ı seçin ve hayvanın X yakalama penceresinin mavi sınırlayıcı kutusu içinde kaldığından emin olarak portalı döndürmek için ayar düğmesine tıklayın.
X yakalama penceresinde, ilgilendiğiniz kardiyo-solunum bölgesini yeniden boyutlandırmak için fareye sol tıklayın. Kardiyo-solunum izlerinin senkronizasyon görünümünde net bir şekilde görülebilmesi için kenarları sürükleyin. Ana konuma basın ve kardiyorespiratuar için ilgilenilen bölgeyi yeniden boyutlandırın.
İlgilenilen bölgenin tüm portal pozisyonlarında diyaframı ve kalbin apikal kısmını kapladığından emin olun. Ardından, kardiyorespiratuar izlerin hala net bir şekilde görülebildiğinden emin olmak için portalı 90 derece döndürün. Hayvan pozisyondayken, alımı başlatmak için CT tarama düğmesine tıklayın.
CT taraması onay mesajı görünecektir. Evet'i tıklayın. Kırmızı x-ışını enerji göstergesi cihazı açacak ve tarama başlayacaktır.
Taramanın sonunda, 2D görüntüleyici yazılımındaki rekonstrüksiyonların transaksiyel, koronal ve sagital görünümlerini gözlemleyin. Son olarak, hayvanı tarayıcıdan çıkarın ve tamamen iyileşene kadar izleyin. Burada, miyokard enfarktüsü olan bir fare kalbinin temsili kan havuzu kısa aksiyel diyastol sonu ve sistolik sonu kesitleri gösterilmiştir.
Bu görüntülerde, miyokard enfarktüsü olmayan bir fare kalbinin kısa aksiyel diyastol sonu ve sistolik sonu kesitleri, çok az arka plan gürültüsü ile mükemmel bir sol ventrikül boşluğu tanımlaması sergiler. Miyokard enfarktüsüne karşılık gelen kontrast seyreklik alanlarının, sol ön inen koroner arter ligasyonuna maruz kalan fare kalbinin kısa eksenel görüntülerinde nasıl iyi bir şekilde sınırlandırıldığına dikkat edin. Ama sahte olarak işletilen hayvanda değil.
17 segmentli Amerikan Kalp Derneği Modeline göre, sol ventrikül bazal, orta kavite ve apikal kısa aksiyel bölümlere ayrılabilir. Bu temsili, çevresel polar grafik, miyokard enfarktüsü faresindeki orta ön, orta inferolateral, orta anterolateral, apikal anterior ve apikal lateral segmentlerde, sahte ameliyatlı hayvana kıyasla farklı bir bolluk gösterir. Bir kez ustalaştıktan sonra, miyokard enfarktüsünün indüksiyonu 45 dakika içinde tamamlanabilirken, sonraki mikroBT görüntüleme dört saat gerektirir.
Bu prosedürü denerken, kardiyak fonksiyonel performansın anestezinin türüne ve derecesine bağlı olduğunu hatırlamak önemlidir. Bu nedenle, doğru ölçümler için kalp atış hızı, görüntü elde etme sırasında mümkün olduğunca fizyolojik tutulmalıdır. Geliştirildikten sonra bu teknik, farmakoloji alanındaki araştırmacıların farelerde müdahale stratejilerini keşfetmelerinin ve seviye tedavi stratejilerinin hastalığın ilerlemesi üzerindeki etkisini analiz etmelerinin yolunu açtı.
Bu videoyu izledikten sonra, miyokard enfarktüsü ameliyatı hakkında iyi bir anlayışa sahip olmalı ve yüksek hızlı mikroBT sistemini iyot bazlı kan havuzu kontrast maddesi ile birlikte nasıl kullanacağınızı bilmelisiniz. İzofluran ile çalışmanın tehlikeli olabileceğini ve bu prosedürü gerçekleştirirken her zaman iyi havalandırma gibi önlemlerin alınması gerektiğini unutmayın.
Bu yöntem, deneysel olarak indüklenen miyokard iskemisi olan farelerde iyodine karşıt madde kullanarak kalp morfolojisi, fonksiyon, perfüzyon, metabolizma ve canlılığı değerlendirmek için Kuantum Mikro Bilgisayarlı Tomografi (MicroCT) kullanımını ana hatlarıyla belirtir. Teknik, kritik kalp parametrelerinin hızlı, boylamsal, invaziv olmayan bir değerlendirmesini sağlar.
This method enables rapid, longitudinal, non-invasive assessment of cardiac structure and function in preclinical models, supporting early target validation and mechanistic de-risking in cardiovascular drug discovery. By providing quantitative 3D anatomical and functional data, it enhances predictive confidence in lead identification and preclinical progression decisions. The technique reduces reliance on terminal endpoints and supports scalable, reproducible workflows for cross-functional R&D teams.
The method integrates into the discovery continuum from target validation through lead identification to preclinical efficacy testing, enabling iterative assessment of cardiac safety and efficacy signals.