Photoconvertible PSmOrange Sistemi kullanılarak GFP transgenik zebrafish hücreleri izleme

PSmOrange Fotoğraf Dönüştürme Teknolojisinin genel amacı, embriyonik gelişim ve hastalık sırasında canlı hayvandaki hücreleri izlemektir. Bu yöntem, doku ve organlara dönüşen hücrelerin kökenini ortaya çıkarmak gibi gelişim biyolojisindeki temel soruları cevaplayabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, GFP transgenik arka planlarında uygulanabilmesidir.

Bu yöntem aynı zamanda rejenerasyon, tümör ilerlemesi ve invazyonu gibi farklı araştırma alanlarında da uygulanabilir. Metin protokolüne göre PSmOrange ve GFP eksprese eden embriyoları oluşturup gömdükten sonra, embriyoyu konfokal mikroskobun altına yerleştirin ve fotokonvertör için bir alanı belirlemek üzere numuneyi taramak için 20x hava objektifi ve 488 ve 561 nanometre lazerleri kullanın. Fotokonversiyondan önce PSmOrange proteinini tespit etmek için, objektifin üzerindeki odak düzleminde ölçülen 0,74 miliwatt güçte 561 nanometre lazeri kullanın ve lazer gücünü gerektiği gibi ayarlayın.