Nucleolar Kromatin Teşkilatı dayanarak Fare Antral OOSİT İzolasyonu ve Karakterizasyonu

Bu prosedürün genel amacı, fare antral oositlerini, ileriye dönük bir embriyonik gelişimi tam olarak sürdürme yeteneklerine göre, kromatin organizasyonlarına dayalı olarak karakterize etmek için gerekli tüm adımları detaylandırmaktır. Bu yöntem, memeli yumurtalığının antral bölmesinde bulunan iki farklı antral ooyctes türünün, SN, etrafı çevrili nükleol ve NSN, etrafı çevrilmemiş nükleolün nasıl ayırt edileceği ve izole edileceği gibi gelişimsel biyoloji alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Yumurtalıkları toplamak için, üç ila altı haftalık dişi farelere 2.5 uluslararası birim hamile kısrak serumu gonadotropin enjekte ederek başlayın.

İki gün sonra, hasattan yaklaşık bir saat önce, bir steril Petri kabını M2 ortamı ile doldurun ve her damlayı 1,5 mililitre mineral yağ ile kaplayan ikinci bir Petri kabına birkaç 20 mikrilitre damla M2 ortamı ekleyin. Ardından, ortamın dengelenmesini sağlamak için tüm Petri kaplarını 37 santigrat derece,% 5 karbondioksit inkübatörüne aktarın. Daha sonra, karın duvarını kaplayan deride bir kesi yapmak için steril diseksiyon makası kullanın, ardından ilk hormon enjekte edilen farenin peritonunda bir kesi yapın.