Name: Farelerde Trakea hızlı intübasyon için geliştirilmiş bir yöntem (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-02-22T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 46 s
Description: Öğrenin farelerde trakeal intübasyon yöntemiyle akciğer hasarı ve fibrozis araştırmaları için bleomisin uygulamasını. Bu teknik yüksek tekrarlanabilirlik, kolay öğrenme ve özel ekipman gerektirmeme avantajları sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar trikrom boyama ve analizi ile yardım için Washington Üniversitesi Histoloji Brian Johnson ve Görüntüleme Çekirdek teşekkür ederiz. Bu çalışma NIH hibe HL098067 ve HL089455 tarafından desteklenmiştir.

Washington ve Cedars-Sinai Tıp Merkezi Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komiteleri (IACUC) bu çalışmalar için gerekli hayvan çalışmaları onayladı. 1. Hazırlık <ol><li> Künt uç forseps ve basacağı yoluyla otoklav hem sterilize. </li><li> biyolojik güvenlik kabini kullanarak, liyofilize toz PBS içinde BLM bir çalışma stok hazırlamak. Karıştırma daha emin olmak için 35 kHz&#39;de 10 dakika süre ile çözelti sonikasyon. Not: ul 30 ile 45 toplam hacmi oldukça büyük hacimli pipet düşük ucunda varyasyon ve boğulma önlemek için tavsiye edilir. </li><li> Yaklaşık 1 prosedürü kendisi için m 2, yanı sıra işlem öncesi ve sonrası her iki kafesleri için belirlenen yerleri içeren temiz bir çalışma alanı hazırlayın. </li><li> taban ve Underl genelinde laboratuvar bant 2 ya da 3 şerit koyarak hemen araştırmacı önünde tezgah prosedür kurulu tabanını Fixtezgah ying. Bir tahta oluşturma konusunda daha fazla özellikleri için Bkz: Şekil 1. </li><li> prosedür kurulu iki konumlandırma vida arasındaki büyüklük 4.0 dikiş ipliğinin tek uzunluğunu kravat. </li><li> kaldırılması ve üç 1 ml&#39;lik şırınga pistonu atarak ve hava geçirmez bir mühür formu her varil üst içine PBS 60 ul yatırarak derme çatma bir spirometre oluşturun. gevşek şırınga birine kateter göbeğini Güvenli ve yönetim kurulu bir tarafa koyun. </li><li> 1 ml şırınganın içine havanın aspire 300 ul ve yönetim kurulu bir tarafa koyun. </li><li> bir tarafa bant uzunluğu ve yerinde yaklaşık 6 inç ek bir parça kesin. Bu aşamada 2.4 kuruluna hayvan sabitlemek için kullanılır. </li><li> Bir izofluran odasını kurmak. Pozlama odasına ve boşluk vakum hem de uygun portlara O 2, izofluran ve vakum takın. Alternatif olarak, anestezik yönetmek bir izofluran uyumlu biyolojikgüvenlik kabini. </li></ol> 2. Entübasyon <ol><li> o bilincini kaybeder ve solunum uygun bir orana yavaşlatır kadar odasında izofluran ile fare anestezisi. Tipik bir pozlama 3-4 dakika süreyle% 4 izofluran ve% 2 O 2 içerir ve ideal bir sonuç sedasyon 2 ila 2,5 dk. Bu 1 nefes her 2 sn bir solunum oranına karşı gelmektedir. </li><li> bir tarafa bir pipet ve yerine BLM 30 ve 45 ul arasında ayarlamak için sedasyon, aspirat için beklerken. </li><li> Hazır olduğunda, işlem platformu konumlandırma vida bağlı akıştan üst kesici dişlerin tarafından sedasyon fare askıya. Hayvanın sırtı platformu yüzeye karşı düz durduğundan emin olun. </li><li> havalandırma kısıtlamak için dikkatli olmak, sadece diyafram üstünde, gevşek göğüs boşluğunun alt (kaudal) kısmı boyunca bir parça bant yerleştirin. Yerleşim proc sırasında düzgün hizalama korumak için sıkı yeterli olmalıdıredure, ancak solunumu kısıtlar o kadar sıkı değil. </li><li> 80 ile% ve% 100 yoğunluğuna aydınlatıcı açın ve solar plexus yakın cilt yüzeyinden 1 2 cm, böylece deveboynu yönlendirmek. Periyodik olarak fare zarar vermez emin olmak için ısı deveboynu ucu kontrol edin. </li><li> platformun arkasında duran, dil bulmak için steril, künt uç forseps kullanabilir. Alt kesici dişler, yavaşça kavrama önlemek ve ağız boşluğunun dışında dilini çekmek için dikkatli olmak. </li><li> Kalan elinizi kullanarak, basacağı yerleştirin ve ağız boşluğunun zemin karşı dilini düzleştirmek için kullanabilirsiniz. forseps bırakın, ancak sonraki iki aşama için yerinde basacağı bırakın. </li><li> trakea o Ana kök bronşların seviyesine ulaşıncaya kadar güneş pleksus seviyesinden proksimal deveboynu rehberlik ederek görünür böylece ışığı yönlendirmek. Not: trakea kolayca solunum aksiyonu ile ayırt edilebilir, WHIch şiddeti dalgalanmaya yayılan ışığı neden olur. Doğru yerleştirilmiş, bu yapının ağız boşluğunda kendisi minimal ortam ışığı ile ışık merkezi bir pim gibi eksenel düzlemde ayırt olacaktır. </li><li> Açı düz lümenine, damlacık içeren ekli şırınga ile, trakea doğal yolu izler ve 22-G kateter ucu düşürmek, böylece şırınga. PBS kabarcık yükselişi ve başarılı yerleştirme üzerine her nefeste düşmeye başlayacaktır. Not: Bu eylem, derin sedasyon sonucunda birkaç saniye kadar gecikebilir. </li><li> ek 5 mm kateter besleyin. dil çıkarın depressor. </li><li> yavaşça şırınga kaldırmak, ters el şırınga Shift ve göbek sürükleyici. </li><li> Kateter hub iç merkezi haline BLM 30 ve 45 ul arasındaki mevduat, ikinci şırınga takın ve göbek içine hava 300 ul dağıtmak. </li><li> ikinci değiştirinİlk PBS balonu içeren şırınga. kabarcık yükselişi ve işlemi başarıyla gerçekleştirildi olup olmadığını düşmeye devam edecektir. </li></ol> 3. Post-prosedürel Bakımı <ol><li> kateter ve bandı çıkarın ve bilinci yerine gelene kadar bir kuru ılık bir yerde hayvan yerleştirin - tipik birkaç dakika içinde. </li></ol>

<ol><li>Hyde, D. M., Hamid, Q., Irvin, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy%2C+pathology%2C+and+physiology+of+the+tracheobronchial+tree%3A+emphasis+on+the+distal+airways%5BTitle%5D)+AND+%22J+Allergy+Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Anatomy, pathology, and physiology of the tracheobronchial tree: emphasis on the distal airways.</a> J Allergy Clin Immunol. 124, S72-S77 (2009).</li>
<li>Rosenthal, N., Brown, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+ascending%3A+perspectives+for+human-disease+models%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The mouse ascending: perspectives for human-disease models.</a> Nat Cell Biol. 9, 993-999 (2007).</li>
<li>Peters, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+as+a+model+for+human+biology%3A+a+resource+guide+for+complex+trait+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">The mouse as a model for human biology: a resource guide for complex trait analysis.</a> Nat Rev Genet. 8, 58-69 (2007).</li>
<li>Baron, R. M., Choi, A. J., Owen, C. A., Choi, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+manipulated+mouse+models+of+lung+disease%3A+potential+and+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Genetically manipulated mouse models of lung disease: potential and pitfalls.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 302, 485-497 (2012).</li>
<li>Sharma, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+respiratory+distress+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Clin+Evid%22%5BJournal%5D)">Acute respiratory distress syndrome.</a> BMJ Clin Evid. 2010, (2010).</li>
<li>Saguil, A., Fargo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+respiratory+distress+syndrome%3A+diagnosis+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Fam+Physician%22%5BJournal%5D)">Acute respiratory distress syndrome: diagnosis and management.</a> Am Fam Physician. 85, 352-358 (2012).</li>
<li>Wilson, M. S., Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+fibrosis%3A+pathogenesis%2C+etiology+and+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Pulmonary fibrosis: pathogenesis, etiology and regulation.</a> Mucosal Immunol. 2, 103-121 (2009).</li>
<li>Wuyts, W. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathogenesis+of+pulmonary+fibrosis%3A+a+moving+target%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">The pathogenesis of pulmonary fibrosis: a moving target.</a> Eur Respir J. 41, 1207-1218 (2013).</li>
<li>Mouratis, M. A., Aidinis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+pulmonary+fibrosis+with+bleomycin%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Pulm+Med%22%5BJournal%5D)">Modeling pulmonary fibrosis with bleomycin.</a> Curr Opin Pulm Med. 17, 355-361 (2011).</li>
<li>Moeller, A., Ask, K., Warburton, D., Gauldie, J., Kolb, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+bleomycin+animal+model%3A+a+useful+tool+to+investigate+treatment+options+for+idiopathic+pulmonary+fibrosis%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The bleomycin animal model: a useful tool to investigate treatment options for idiopathic pulmonary fibrosis?</a> Int J Biochem Cell Biol. 40, 362-382 (2008).</li>
<li>Myllärniemi, M., Kaarteenaho, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+treatment+of+idiopathic+pulmonary+fibrosis+-+preclinical+and+clinical+studies+of+pirfenidone%2C+nintedanib%2C+and+N-acetylcysteine%5BTitle%5D)+AND+%22European+Clinical+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">Pharmacological treatment of idiopathic pulmonary fibrosis - preclinical and clinical studies of pirfenidone, nintedanib, and N-acetylcysteine.</a> European Clinical Respiratory Journal. 2, (2015).</li>
<li>Reinert, T., Baldotto, C. S. dR., Nunes, F. A. P., Scheliga, A. A. dS. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bleomycin-Induced+Lung+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Bleomycin-Induced Lung Injury.</a> Journal of Cancer Research. 2013, 1-9 (2013).</li>
<li>Lakatos, H. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oropharyngeal+aspiration+of+a+silica+suspension+produces+a+superior+model+of+silicosis+in+the+mouse+when+compared+to+intratracheal+instillation%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Lung+Res%22%5BJournal%5D)">Oropharyngeal aspiration of a silica suspension produces a superior model of silicosis in the mouse when compared to intratracheal instillation.</a> Exp Lung Res. 32, 181-199 (2006).</li>
<li>Helms, M. N., Torres-Gonzalez, E., Goodson, P., Rojas, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+tracheal+instillation+of+solutes+into+mouse+lung%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Direct tracheal instillation of solutes into mouse lung.</a> J Vis Exp. , (2010).</li>
<li>Osier, M., Oberdorster, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intratracheal+inhalation+vs+intratracheal+instillation%3A+differences+in+particle+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Fundam+Appl+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Intratracheal inhalation vs intratracheal instillation: differences in particle effects.</a> Fundam Appl Toxicol. 40, 220-227 (1997).</li>
<li>Driscoll, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intratracheal+instillation+as+an+exposure+technique+for+the+evaluation+of+respiratory+tract+toxicity%3A+Uses+and+Limitations%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Sci%22%5BJournal%5D)">Intratracheal instillation as an exposure technique for the evaluation of respiratory tract toxicity: Uses and Limitations.</a> Toxicol Sci. 55, 24-35 (2000).</li>
<li>MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+simple+method+of+mouse+lung+intubation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">An improved simple method of mouse lung intubation.</a> J Appl Physiol (1985). 106, 984-987 (1985).</li>
<li>Spoelstra, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+and+simple+method+for+endotracheal+intubation+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">A novel and simple method for endotracheal intubation of mice.</a> Lab Anim. 41, 128-135 (2007).</li>
<li>Cai, Y., Kimura, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+intratracheal+intubation+to+study+the+pathology+and+physiology+of+mouse+lung%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Noninvasive intratracheal intubation to study the pathology and physiology of mouse lung.</a> J Vis Exp. , e50601(2013).</li>
<li>Starcher, B., WIlliams, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+intratracheal+instillation+of+endotoxin+into+the+lungs+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">A method for intratracheal instillation of endotoxin into the lungs of mice.</a> Lab Anim. 23, 234-240 (1989).</li>
<li>Daubeuf, F., Frossard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+bronchoalveolar+lavage+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Performing bronchoalveolar lavage in the mouse.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 2, 167-175 (2012).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Severe+lung+fibrosis+requires+an+invasive+fibroblast+phenotype+regulated+by+hyaluronan+and+CD44%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Severe lung fibrosis requires an invasive fibroblast phenotype regulated by hyaluronan and CD44.</a> J Exp Med. 208, 1459-1471 (2011).</li>
<li>Grazioli, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CYR61+%28CCN1%29+overexpression+induces+lung+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">CYR61 (CCN1) overexpression induces lung injury in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 308, L759-L765 (2015).</li>
<li>Redente, E. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+necrosis+factor-alpha+accelerates+the+resolution+of+established+pulmonary+fibrosis+in+mice+by+targeting+profibrotic+lung+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Tumor necrosis factor-alpha accelerates the resolution of established pulmonary fibrosis in mice by targeting profibrotic lung macrophages.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 50, 825-837 (2014).</li>
<li>Lawrenz, M. B., Fodah, R. A., Gutierrez, M. G., Warawa, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intubation-mediated+intratracheal+%28IMIT%29+instillation%3A+a+noninvasive%2C+lung-specific+delivery+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Intubation-mediated intratracheal (IMIT) instillation: a noninvasive, lung-specific delivery system.</a> J Vis Exp. , e52261(2014).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Aerosol haline getirme sınırlı olması nedeniyle reaktif temin edilebilirliği, emniyeti ve maliyet için pratik örneklerde, doğrudan nefes borusu idaresi akciğerlere dışsal ajanların uygulanması için üstün bir yöntemdir 16 Transtrakeal instilasyon yaygın Bunu gerçekleştirmek için kullanılmaktadır.; Ancak, tüm cerrahi müdahale ile olduğu gibi, o da onunla prosedürün kendisinden kaynaklanan komplikasyonlar için potansiyel taşır ve mutlaka ajan telkin ediliyor. 13 Bu nedenlerden dolay...

Bazı anatomik ve fizyolojik farklılıklar olmasına rağmen, 1 fare modelleri hayvancılık açısından bakıldığında, insan biyolojisi ve hastalık patogenezi. 2 modelleme için çok değerli, fareler, kullanımı kolay olan, düşük üreme zamanı, hızlandırılmış ömrü var ve nispeten ucuzdur devam eve. Farklı genetik suşları ve stratejiler (örn., Koşullu knock-out raportör fareler, soy izleme yaklaşımlar, vs.), ve bunun yanı sıra reaktifler geniş (örn., Antikorlar, rekombinant proteinler, inhibitörlerin geliştirilmesi ile, vb), fareler, insan homeostasis ve hastalık süreçlerini ortaya çıkarmak için önemli bir örnek omurgalı organizma haline gelmiştir. 3 Fareler insanlarda 4 ALİ travma, yaralanma veya sepsis neden olabilir. Akut akciğer hasarı (ALI) ve pulmoner fibrozis dahil olmak üzere akciğer koşulları, çalışmak için özellikle değerli olmuştur ve epitel ile karakterizedir veendotel sızıntı (yani., ödem), enflamasyon ve oluşmakta olan fibroz. Birçok hastada, ALI genellikle solunum yetmezliği nedeni ile fibroz ve ölümle sonuçlanan onun ağır formu, akut solunum sıkıntısı sendromu (ARDS), ilerler. 5,6 pulmoner fibrozis ekstraselüler matriksin aşırı birikmesi ile karakterize ilerleyici, ölümcül patolojidir en önemlisi. Ben engelli akciğer fonksiyonu yol açan kolajen bleomisin (BLM) 7,8 Yönetim yazın deney hayvanlarında ALI ve fibroz uyarmak için en yaygın kullanılan ve en iyi karakterize modeldir. 9 kemirgenlerde pulmoner fibrozis BLM kaynaklı olsa da yapar tamamen insan fibrotik fenotipleri, bu model ile 10 fare çalışmaları başlangıcı ve hastalığın ilerlemesini etkileyen birçok önemli faktörlerden keşfine yol açmıştır özetlemek değil. 11 BLM kaynaklı fibrogenezisin arkasında kesin mekanizması (ler) bilinmemekle birlikte, başlangıç ​​hasarınıniletken hava yolları ve alveolleri ve özellikle de tip 1 pnömositler döşeyen epitel hücrelerinde kontak bağımlı DNA zincir kırıkları kaynaklandığı düşünülmektedir. 12 BLM ve pulmoner epitel arasında doğrudan temas ihtiyacı sağlam bir dağıtım yolunun önemini vurgulamaktadır ve bu endişeleri de rekombinant proteinlerin, antikorların, siRNA, virüs, bakteri, partikül, ve daha fazlasını içeren distal hava hedeflenen tedavilerin geniş bir yelpazede, germane vardır. Orofaringeal aspirasyon (OPA), yaygın olarak, bu amaçla 13 kullanılmaktadır, ancak OPA önemli bir eksiklik teslim maddenin bir bölümü bu şekilde uygulanan dozun belirginsizlik yol mide bağırsak Yutulan edilebilir olmasıdır. Yaygın olarak kullanılan bir yaklaşım, doğrudan solunum yollarına bir ajanın trakea ve damlatma maruz güçlü anestezi altında trakeostomi gerektirir transtrakeal damlatma vardır. 14 Ancak, sadece bu tür olabilirBir prosedür nedeniyle invaziv olması istenmeyen olabilir, ama o da zaman tüketen bir eğitim adil biraz gerektirir ve içine ajanlar direkt uygulanmasını içerir. 15,16 Çeşitli protokoller geliştirilmiştir solunum yolu güçlü bir yaralanmaya neden cerrahi müdahaleye gerek kalmadan trakea, 16,17,18,19,20 ancak bu yöntemler geniş bir alanını içermektedir kurtarma süreleri güçlü anestezik neden, pahalı ekipman kullanımı (yani., otoskop / laringoskop, ticari olarak mevcut prosedür panoları, fiber-optik doz ile ilgili olarak tel ve benzeri), ağız boşluğu içinde manipülasyon aşırı ve belirsizlik. Bu çalışma, bir araştırmacının hızla ucuz ve güvenilir bir şekilde çevre dokulara bakiye hasar sınırlı risk ile murin akciğer içine bir reaktif aşılamak sağlar entübasyon yoluyla uygulama nispeten kolay bir yöntem tarif etmektedir.

<table><tbody><tr><td>Enjeksiyon için Bleomisin, 30 birim / flakon</td><td>APP Pharmaceuticals, LLC</td><td>103720</td><td>En iyi sonuçlar için, BLM PBS'de askıya alınmalı, aliquoted edilmeli ve tek kullanımlık liyofilize alikotlar olarak saklanmalıdır</td></tr><tr><td>Künt Uçlu Forseps</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dil Bastırıcı (yani bükülmüş Valleylab Blade Elektrot, 2.4 ")&nbsp;</td><td>Covidien</td><td>E1551G</td><td>Kullanmadan önce bıçak ucundan 1,5 cm&nbsp; 45 derecelik bir bükülme oluşturun. Benzer boyutlardaki herhangi bir metal aletten uygun bir bastırıcı da oluşturulabilir.</td></tr><tr><td>Exel Safelet Kateter 22G X 1"Exel</td> <td>International</td><td>26746</td><td></td></tr><tr><td>1 ml Kayar Uçlu Tek Kullanımlık Tüberkülin Şırınga (200/sp, 1600/ca)</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>0,2 ml Pipetleyici ve Filtre Uçları</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fiber-Lite Aydınlatıcı. Model 181-1: Model 180, Standart Çift Deveboynu aydınlatıcı</td><td>Dolan Jenner Industries, Inc.</td> ile eşleştirildi.<td>181-1</td><td>Düşük çıkışlı LED aydınlatıcılar, trakeayı yeterince aydınlatamadıkları için önerilmez.</td></tr><tr><td>Entübasyon Kurulu</td><td></td><td></td><td>Şema 1'e bakınız.</td></tr><tr><td>Renkli Etiket Bandı: 0.5&nbsp; içinde. Geniş</td><td>Fisherbrand</td><td>15-901-15A</td><td></td></tr><tr><td>Oksijen&nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fosfat Tamponlu Salin, 1X</td><td>Corning</td><td>21-040-CV</td><td>Ürün steril olmalıdır</td></tr><tr><td>Steril Olmayan İpek Siyah Örgülü Sütür Makarası, 91.4 m, Boyut 4-0</td><td>Harvard Aparatı</td><td>517698</td><td></td></tr><tr><td>Masa Üstü Anestezi Makinesi İzofluran</td><td>Yayla Tıbbi Ekipmanları</td><td></td><td>http://www.highlandmedical.net/</td></tr> <tr><td>Slide Top İndüksiyon Fare İzofluran Odası</td><td>MIP / Anestezi Teknolojileri</td><td>AS-01-0530-SM</td><td></td></tr><tr><td>FORANE (izofluran, USP) İnhalasyon İçin Sıvı 100 mL&nbsp;</td><td>Baxter</td><td>1001936040</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; Nanozoomer Dijital Patoloji sistemi</td><td>Hamamatsu</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IgM ELISA Kantifikasyon Kiti&nbsp;</td><td>Bethyl Laboratuvarları</td><td>E90-101</td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde trakea hızlı intübasyon için geliştirilmiş bir yöntem

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

Bazı anatomik ve fizyolojik farklılıklara rağmen, fare modelleri insan akciğer hastalığını incelemek için önemli bir araç olmaya devam ediyor. Bleomisin toksisitesi, hem akut akciğer hasarını hem de fibrozu incelemek için yaygın olarak kullanılan bir modeldir ve bleomisin (ve diğer toksik ajanlar) akciğerlere uygulamak için birçok yöntem geliştirilmiştir. Bununla birlikte, transtrakeal damlatma gibi bu yaklaşımların çoğunun, güçlü anestezikler ve sağkalım cerrahisi ihtiyacı da dahil olmak üzere doğal dezavantajları vardır. Bu makale, hafif inhale anestezi, trakeanın görselleştirilmesi ve maruziyeti doğrulamak için vekil spirometre kullanımını içeren hızlı, tekrarlanabilir bir intratrakeal entübasyon yöntemini bildirmektedir. Kavramın bir kanıtı olarak, 8-12 haftalık C57BL / 6 farelerine 2.0 U / kg bleomisin veya eşdeğer bir hacimde PBS uygulandı ve hem hasar hem de fibrotik uç noktalar maruziyet sonrası ölçüldü. Bu prosedür, araştırmacıların büyük bir fare kohortunu nispeten kısa bir süre içinde, çok az masrafla ve minimum işlem sonrası bakımla tedavi etmelerini sağlar.

Entübe farenin kilo kaybı ve sıkıntı için günlük olarak izlenmiş ve% 2.5 2,2,2-tribromoetanol intraperitonal enjeksiyon yoluyla 4, 10 ya da 17 gün sonra feda edilmiştir. Bronkoalveoler lavaj (BAL) PBS üç yıkamadan içinde toplandı 21 başka bir yerde tarif edildiği gibi ve sağ akciğer,% 10 formalin sabit parafine gömülü ve Washington Histoloji ve Görüntüleme Çekirdek 22 Üniversitesi tarafından Masson trikrom ile boyandı. <p class="jove_content" f...

Bu makalede, entübasyon yoluyla fare trakea içine doğrudan bleomisin yönetmek için hızlı ve basit bir yöntem sunar. Bu yöntemin en önemli avantajları usta son derece tekrarlanabilir kolay ve özel ekipman ya da uzun iyileşme süreleri gerektirmez vardır.

Farelerde Trakea hızlı intübasyon için geliştirilmiş bir yöntem

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

Bu prosedürün genel amacı, intubasyon yoluyla murine akciğerlerine reaktiflerin hızlı, kolay ve güvenilir bir şekilde uygulanmasını sağlamaktır. Yöntem ayrıca çevredeki dokularda kalıcı hasar riskini sınırlandırır ve düşük maliyetlidir. Bu yöntem, temel akciğer biyolojisi ve hastalık mekanizmaları alanlarındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir.Akut akciğer hasarı ve fibrogenez gibi. Bu tekniğin temel avantajları, yüksek tekrarlanabilirliğe sahip olması, kolayca öğrenilmesi, özel ekipman gerektirmemesi veya uzun iyileşme sürelerine ihtiyaç duymamasıdır. İşlem sterilize edilmiş aletler kullanılarak gerçekleştirilmelidir.Hem küt uçlu penseti hem de depresörü otoklavlayın. Sterilize edilmiş bir kabin içinde, entübasyon yoluyla uygulanacak reaktifin çalışma stokunu hazırlayın. 30 ile 45 µL arasında bir bolus hacmi önerilir.Homojen bir karışım sağlamak için çözeltiyi 35 kilohertz'de 10 dakika boyunca sonikasyona tabi tutun. Şimdi, çalışma alanını hazırlayın. Çalışma alanı için en az bir metrekarelik bir alan belirleyin.Ayrıca, prosedürden önce ve sonra hayvanlar için ayrı yerler hazırlayın. Şimdi, bir prosedür tahtası hazırlayın. Bu özelleştirilmiş model, bir alüminyum levhadan kesilmiştir ve bir T braketi ile güçlendirilmiştir.Benzer ticari levhalar da mevcuttur. Birkaç parça bant kullanarak, işlem levhasının tabanını, deney yapan kişinin tam karşısında olacak şekilde tezgaha sabitleyin. Ardından, işlem levhasının iki konumlandırma vidası arasına 4.0 dikiş malzemesinden bir parça bağlayın.Ardından, bir spirometre oluşturun. Üç adet bir mililitrelik şırınganın pistonlarını çıkarın. Daha sonra her bir şırınga gövdesinin üst kısmına 60 µL'ye kadar PBS doldurun.Bu üç şırıngadan birini bir kateterin göbeğine gevşekçe sabitleyin. Kullanım sırasında, trakeadan çıkan hava, şırınga gövdesindeki PBS'nin yükselip alçalmasına neden olacaktır. Bunu prosedür panosunun yanına yerleştirin.Yedek olarak kullanılmak üzere diğer iki ek şırıngayı erişebileceğiniz bir yere yerleştirin. Ardından, dördüncü bir şırıngaya 300 µL hava çekin ve şırıngayı tahtanın bir yanına koyun. Ayrıca, hayvanı tahtaya sabitlemek için birkaç adet altı inç uzunluğunda bant hazırlayın.Ardından, gerekliyse bir izofluran kamerası hazırlayın. Oksijen, izofluran ve vakum hatlarını kameradaki uygun portlara ve tahliye vakumuna bağlayın. Fareyi anestezi ederek başlayın.Hayvanın yaşı, ağırlığı ve sağlık durumu gibi faktörlerin anesteziklere verilen yanıtı değiştirebilmesi nedeniyle, her laboratuvar izofluran maruziyetini kendi ihtiyaçlarına göre optimize etmelidir. Beklerken, reaktif bolusunu bir pipet ucuna yükleyin ve kenara ayırın. Fare sedasyon altına girdiğinde, hayvanın sırtı platform yüzeyine düz bir şekilde yaslanacak şekilde, üst kesici dişlerinden tutarak prosedür platformundaki ipten asın.Şimdi, ventilasyonu kısıtlamamaya dikkat ederek, hayvanın işlem sırasında hizalı kalmasını sağlamak için toraks boşluğunun alt kısmını, diyaframın hemen üzerinden platforma gevşekçe bantlayın. Ardından, kuğu boyunlu aydınlatıcıyı %80 ila %100 arasına ayarlayın. Işığı solar pleksus yakınındaki deri yüzeyinden bir ila iki santimetre uzağa konumlandırın ve deriyi aşırı ısıtmadığını düzenli olarak kontrol edin. Platformun arkasından, dili bulmak için küt uçlu forseps kullanın.Ardından alt kesici dişlere çarpmamaya dikkat ederek, dili nazikçe kavrayın ve ağız boşluğundan dışarı çekin. Dili sabit tutarken, baskılaçla düzleştirin ve pensetin bırakmasına izin verin. Şimdi, trakeyeyi aydınlatmak için gooseneck'i yaklaşık olarak solar pleksustan ana bronşlara kadar yönlendirin.Trakea, trakeadan çıkan ışığın yoğunluğunda dalgalanmalara neden olan solunum hareketi ile de kolayca ayırt edilebilir. Doğru şekilde konumlandırıldığında, oral kavitenin kendisinde minimum ortam ışığı varken trakea, merkezi bir ışık pini olarak görülebilir. Trakea görünümü ideal hale gelene kadar kateter oral kaviteye sokulmamalıdır.Işık kaynağı veya baskılayıcı (depresör) manipülasyonu ile trake göçüsü sağlanamamaktadır. Araştırmacılar dili serbest bırakmalı ve prosedürü yeniden denemelidir. Ardından, şırıngayı trakeanın doğal yolunu takip edecek şekilde açılandırın.Ardından, PBS içeren şırınganın bağlı olduğu 22 gauge kateter ucunu doğrudan lümene indirin. Şimdi, kateteri beş milimetre daha içeri sürün ve dil basacağını çıkarın. Doğru yerleştirildiğinde, şırınga gövdesindeki PBS kabarcığı her nefesle birlikte yükselip alçalmaya başlayacaktır.Hem derin hem de hafif sedasyonun solunum frekansını değiştirebileceği göz önünde bulundurularak, bu göstergenin aranmasında sabırlı olunmalıdır. Ardından şırıngayı baskın olmayan ele alın. Kanül göbeğini kavrayarak, kateteri yerinde bırakacak şekilde şırıngayı nazikçe çıkarın.Hazırlanan reaktif bolusunu hakim el ile doğrudan kateter göbeğinin merkezine yerleştirin. Ardından, 300 µL hava içeren ikinci şırıngayı takın ve havayı göbeğe püskürtün. Bu işlem, bolusun akciğerlere iyi dağılmasını sağlayacaktır.Şimdi, şırıngayı çıkarın ve yerine PBS kabarcığı içeren bir şırınga yerleştirin. Prosedür başarıyla gerçekleştirildiyse, kabarcık yükselmeye ve alçalmaya devam edecektir. Şimdi, kateteri ve bandı çıkarın.Ardından hayvanı, bilinci yerine gelene kadar kuru ve sıcak bir yere yerleştirin. Bu genellikle birkaç dakika içinde gerçekleşir. Entübe edilen fareler, kilo kaybı açısından günlük olarak izlendi.Fareler, intratrakeal bleomisin intübasyonundan sonraki dördüncü, 10. ve 17. günlerde toplandı. Bu akciğerlerden bronkoalveoler lavaj toplandı ve analiz edildi. Yükselmiş IgM seviyeleri, epitel ve/veya endotel bariyer disfonksiyonuna işaret eden, akciğer geçirgenliğinde zamana bağlı anlamlı bir artış olduğunu göstermiştir.Sağ akciğerler fikse edildi ve Masson trikrom ile boyandı. Toplam kolajen içeriğinin iyi bilinen bir belirteci olan fibrojenik yanıt kantifiye edildi. Histolojik kesitler, tedaviye bağlı olarak pulmoner interstisyumda kalınlaşma ve fibrotik lezyonlarda artış olduğunu kanıtladı.Bu teknik bir kez kavrandıktan sonra, doğru şekilde uygulandığı takdirde bir dakikanın altında tamamlanabilir. Bu işlemi gerçekleştirirken, trakeayı çevreleyen yumuşak dokuların manipülasyonunun gerekli olmadığını veya önerilmediğini hatırlamak önemlidir. Aksi takdirde, hem hayvanın sağlığı hem de deneyin bütünlüğü tehlikeye girebilir.

an-improved-method-for-rapid-intubation-of-the-trachea-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Kemirgen solunum fizyolojisi ve solunum yolu inflamatuar hücrelerin örnekleme tekrarlanan ölçümler arzu edilir, ancak genellikle mümkün değildir. Burada sözlü havayolu inflamatuar hücrelerin havayolu hiperreaktivite ve örnekleme tekrarlanan ölçümler izin verir fareler Entübasyon için tekrarlanabilir bir yöntem açıklanmaktadır.

Havayolu Direnci Ölçümleri ve Fare Bronkoalveolar Lavaj Sıvısı Örnekleme için, geri dönüşümlü, Non-invaziv Yöntemi

Biz 2.0 mm spekulum ile bir otoskop kullanarak direkt laringoskopi yoluyla farelerde entübasyon için, basit, güvenilir ve nispeten ucuz bir yöntem geliştirdik. Bu teknik, atravmatik ve kronik deneylerde tekrarlanan ölçümler için de kullanılabilir. Biz üstün trakeostomi veya daha önce cerrahi dışı teknikler bildirdi bulabilirsiniz.

Farelerde Endotrakeal Entübasyon<em&gt; Via</emBir Otoskop Kullanma&gt; Doğrudan Larengoskopi

Bu yazıda akciğer fonksiyonu ölçümleri veya fareler kurtarmak için ve daha sonraki dönemlerde de incelenebilir sağlar pulmoner instilasyon için fare entübasyon bir striaghforward ve etkili bir yöntem açıklanır. Işlem doğrudan soluk borusu yanması pahalı olmayan bir fiber optik ışık kaynağı içerir.

Fare Akciğer Entübasyonun Basit Bir Yöntem

Insanlarda akciğer hastalıklarının durumunu taklit eden bir modelinin kullanılması, belirli bir hastalığın patofizyolojisi ve / veya etyolojisinin araştırılması için ve terapötik müdahale geliştirmek için çok önemlidir. Burada doğrudan fare akciğerlere eksojen malzemeleri teslim noninvazif bir entübasyon yöntemi sunulmuştur.

Noninvaziv Entübasyon Fare Akciğer Patolojisi ve Fizyolojisi Eğitim için

Burada, transvers aort daralma (TAC) lateral Torakotomi ile bir protokol mevcut. Bu teknik basınç aşırı yük ve kalp yetmezliği standart TAC laboratuvar ayarları kullanan farelerde benzetimini yapmak için amaçlayan bir minimal invaziv, kapalı göğüs cerrahi işlemdir.

Transvers aort daralma farelerde ikna etmek için kapalı-göğüs manken

Bu makalenin amacı, laboratuvar faresinin entübasyonunun rafine bir yöntemini açıklamaktır. Yöntem noninvaziv ve bu nedenle, solunum fonksiyonu ve / veya akciğer içine tedavilerin indaşseri izleme gerektiren çalışmalar için idealdir.

Farelerde Tekrarlanan Orotracheal Entübasyon

Yetişkin farenin beyin ata tarafından beyin atmasını ortaya çıkarmak için bir protokol sunuyoruz. Minyatür mikroskoplu gradyan-kırılma indeksi lens kullanılarak, in vivo zeytin nöral somata aktivitesini incelemek için kalsiyum görüntüleme kullanılabilir.

In vivo Fare Kalitesiz Zeytinde Kalsiyum Görüntüleme

Ventilasyonu korurken ve hipoksiden kaçınırken sol akciğer iskemisi reperfüzyonu (IR) hasarı oluşturmak için bir fare cerrahi modeli.

Orotrakeal Entübasyon ve Ventilasyonlu Akciğer İskemisi Reperfüzyon Cerrahisinin Bir Fare Modeli

Burada, noninvaziv orofaringeal endotrakeal entübasyon yoluyla intratrakeal lipopolisakkarit (LPS) doğumu için bir protokol öneriyoruz. Bu yöntem, hayvan için cerrahi prosedürün travmasını en aza indirir ve LPS'yi trakeaya ve daha sonra akciğerlere doğru bir şekilde iletir.

Farelerde Noninvaziv İntratrakeal Lipopolisakkarit Damlatma

Burada, invaziv ventilasyon ve torasik organların in vivo sıçan modellerinde maruziyeti gerektiren sağkalım dışı uygulamaların hassasiyetini ve tekrarlanabilirliğini artırmayı amaçlayan, sıçanlarda trakeotomi yoluyla endotrakeal entübasyon ve ardından torakotomi için standart bir prosedür sunuyoruz.

Hayatta kalamayan uygulamalar için sıçanlarda trakeotomi ile endotrakeal entübasyon ve ardından torakotomi

Bu protokol, bir farenin en uygun şekilde konumlandırılmasının ve kamera tabanlı bir otoskopun transoral olarak yerleştirilmesinin glotisin görselleştirilmesini, minimal doku travması ile hızlı entübasyonu ve akciğerlere tutarlı sıvı verilmesini nasıl sağladığını gösterir.

Fare Akciğerine Sıvı İletimi için Geliştirilmiş Metodoloji: Tüketici Otoskopu Kullanılarak Entübasyon

Öğrenin farelerde trakeal intübasyon yöntemiyle akciğer hasarı ve fibrozis araştırmaları için bleomisin uygulamasını. Bu teknik yüksek tekrarlanabilirlik, kolay öğrenme ve özel ekipman gerektirmeme avantajları sunar.

Farelerde Trakea hızlı intübasyon için geliştirilmiş bir yöntem

Daha fazla video keşfet