9 Şubat 2016
Burada, uyanık domuzlarda, istirahatte ve kademeli koşu bandı egzersizi sırasında kardiyopulmoner fonksiyonu değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz. Kronik enstrümantasyon, kardiyodepresif anestezik ajanlardan etkilenmeden tekrarlanan hemodinamik ölçümlere izin verir.
Bu cerrahinin genel amacı, kardiyovasküler hastalığı olan ve olmayan uyanık hayvanlarda kardiyopulmoner stres testi sırasında hemodinamik ölçümlere izin vermek için hayvanları kronik olarak alet etmektir. Bu yöntem, metabolik sendromun sol ventrikül fonksiyonunu nasıl etkilediği ve perfüzyonun korunmuş ejeksiyon fraksiyonu ile kalp yetmezliği gelişimine nasıl katkıda bulunduğu gibi kardiyovasküler alandaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin iki önemli avantajı, hemodinamik ölçümlerin ve kan örneklerinin uyanık hayvanlardan elde edilmesi ve tekniğin istirahatte ve egzersiz gibi kardiyovasküler stres sırasında yapılabilmesidir.
Bu tekniğin etkileri, pulmoner mikrovasküler fonksiyonun yanı sıra sağ ventrikül fonksiyonu ve perfüzyonun hastalığın ortaya çıkmasından sonra iyi tanımlanmış aşamalarda ölçülebilmesi nedeniyle pulmoner hipertansiyonun erken teşhisine kadar uzanabilir. Bu tekniğin görsel olarak gösterilmesi esastır. Bu damarın vazospazmı nedeniyle bir koroner arterin etrafına bir akış probunun nasıl yerleştirileceğini öğrenmek zordur.
Ayrıca, bu damarın torakotomiye göre konumu nedeniyle akım probunun aort etrafına yerleştirilmesi zordur. Prosedürü göstermek, laboratuvarımızdan bir teknisyen olan Annemarie Verzijl olacaktır. Hayvanı ameliyata hazırladıktan sonra, deride bir kesi yapın, kürek kemiğinin sol alt açısına bir santimetre kaudal başlayın ve sol koltuk altına doğru aşağı doğru kesin.
Kesi işleminden sonra, derideki kan damarlarını koterize etmek için diatermi kullanın. Daha sonra, diaterminin kesme yöntemini kullanarak, serratus kası ve pektoralis majör kasını kesin. Kas tabakasındaki kan damarlarını koterize etmek için diatermi kullanmaya devam edin.
Şimdi, künt diseksiyon kullanarak, 4. sol interkostal boşluğun interkostal kasını dikkatlice bölün. Bunu bir sivrisinek kelepçesi kullanarak bitirin. Daha sonra viseral ve parietal plevra ile kaplı olan sol akciğerin kostal yüzeyini ortaya çıkarın.
Daha sonra, plevranın her iki katmanını dikkatlice delerek ve yırtarak plevral boşluğa girin. Yaranın ve kaburgaların kenarlarını ayırarak ve ardından dokuları zorla iterek torasik bir ekartör ile maruziyeti iyileştirin. Kalbi ve büyük damarları ortaya çıkarmak için sol akciğeri kaudal olarak itin ve ıslak gazlı bezle yerine sıkıştırın.
Ameliyatın bu kısmına, inen torasik aortu çevreleyen yaklaşık 2 santimetre karelik bağ dokusunu çıkarmak için künt bir diseksiyonla başlayın. Daha sonra, emilmeyen USP 3-0 örgülü ipek sütür kullanarak aort duvarına üç dikişli bir çanta ipi sütür yerleştirin. Daha sonra paslanmaz çelik, 16 gauge bir iğne ile dikişten aort damar duvarına nüfuz edin.
İğneyi takiben, sıvı dolu kateterin ucunu aort içine yerleştirin. Ardından çanta ipi dikişini sıkıca birlikte çekin ve bağlayın. Kateteri sabitlemek için, fazla sütürü kateterin etrafına halkanın üzerine üç kez sarın, bağlayın ve yerleştirme yerine yaklaşık 1 santimetre kraniyal yeni bir dikiş ekleyin.
Şimdi sıvı dolu kateteri bir bilgisayara bağlı kalibre edilmiş basınç dönüştürücüsüne bağlayın. Bu nedenle, sonraki adımlar sırasında ortalama arteriyel basıncı izleyin. Daha sonra, frenik sinire zarar vermeden, perikardları çapraz bir kesim ile açın.
Kesiğin altında, pulmoner arteri tanımlayarak ve kaudal olarak hafifçe çekerek çıkan aort ve aort arkını bir Farabeuf ekartörü ile ortaya çıkarın. Aort açıktayken, Metzenbaum makası kullanarak çıkan aort ile pulmoner arter arasındaki bağ dokusunda 1 santimetrelik bir kesi yapın. Şimdi akış probunu takın.
Önce bir dikiş ucu kullanarak lastik bandı damarın etrafına sokun. İkinci olarak, akış probu ölçüm cihazını lastik banda takın. Üçüncü olarak, akış probunu bilgisayara bağlayın ve dördüncü olarak, probun doğru şekilde yerleştirildiğini doğrulamak için kardiyak çıkış sinyalini kontrol edin.
Bir sonraki adım, sol ön inen koroner arterin proksimal kısmını ortaya çıkarmak ve incelemektir. İlk olarak, dokuyu forseps ile kaldırın. Ve sonra, Metzenbaum makas kullanarak, dokuda küçük bir kesim yapın.
Ardından, pamuklu bir bez kullanarak arterdeki dokuları dikkatlice uzaklaştırın. Ve koroner arterin tamamen kesildiğinden emin olmak için, altından küçük, düz açılı bir sivrisinek kelepçesi geçirin. Koroner arterin vazospazmı meydana geldiğinde, damarı gevşetmek için% 10 lidokan püskürtün.
Aynı tekniği kullanarak, pulmoner arter, sağ ventrikül, sol ventrikül ve sol atriyuma sıvı dolu kateterler yerleştirin. Tüm kateterler artık bilgisayara bağlı olmalıdır. Daha sonra koroner venöz katetere bağlı bir dikiş ile anterior interventriküler koroner vene paralel bir dikiş atın.
Dikişin ardından, koroner venöz kateterin 20 gauge iğnesi ile damarı delin ve kateterin kanülünü intravenöz olarak yerleştirin. Ardından kateteri mevcut dikişle sabitleyin. İğneyi çıkarın ve uzatma hattına bağlayın.
Şimdi daha önce diseke edilmiş sol ön inen koroner arterin etrafına bir koroner akış probu yerleştirin. Prob yerleştirildikten sonra, akış probunun doğru yerleştirildiğini doğrulamak için bilgisayardaki koroner akış sinyalini kontrol edin. Koroner akış sinyalinin şekli burada gösterilene benzer olmalıdır.
Ameliyatın bu aşamasına 1,5 santimetrelik bir kesi yaparak, yaklaşık 8 santimetre kaudal ve ilk kesiye paralel olarak başlayın. Daha sonra büyük, kavisli bir sivrisinek kelepçesi kullanarak, plevral boşluktan drenajı deri altından 6. interkostal boşluktan bu insizyona yönlendirin. Göğüs kafesinde kalan sıvıyı çıkarmak için tahliyeyi emme cihazına bağlayın.
Ardından, akış problarını 3. sol interkostal boşluktan ve kaburganın üzerindeki kastan ayrı ayrı tünellemek için büyük, kavisli bir sivrisinek kelepçesi kullanın. Sıvı dolu kateterleri 3. veya 5. sol interkostal boşluktan tünelleyin. İlk olarak, sıvı dolu kateterleri sıkıştırın.
Ardından, delme alanını en aza indirmek için üç vanayı çıkarın. Üçüncüsü, interkostal kası delin. Şimdi, akış problarını ve sıvı dolu kateterleri emilmeyen USP 2-0 örgülü ipek ile sabitleyin.
İnterkostal kas üzerinde bir çanta ipi sütürü kullanın. Bu sutre aynı zamanda negatif intratorasik basıncı eski haline getirdikten sonra hava sızıntısını da önleyecektir. Daha sonra, deride yaklaşık 2 santimetre sola ve vertebral kolona paralel olarak üç kesi yapın.
Bu üç kesiyi 3 santimetre uzunluğunda ve birbirinden 3 santimetre aralıklarla yapın. Şimdi sol latissimus dorsi kasının altından rostral insizyon bölgesinden sırttaki insizyonlara kadar bir trokar delin. Daha sonra trokarı kullanarak akış problarını ve sıvı kateterlerini arkaya doğru tünelleyin.
Tünel açma işlemi tamamlandıktan sonra, sıvı dolu kateterlerin üzerine vanalar yerleştirin ve kelepçeyi çıkarın. Pıhtıları ve hava kabarcıklarını gidermek için biraz kan çekin. Daha sonra sıvı dolu kateterleri mililitre başına 1.000 birim heparin ile doldurun ve koroner venöz kateterleri mililitre başına 5.000 birim heparin ile doldurun.
4. interkostal boşluğun kaburgalarını iki ayrı bölgede bir araya getirerek toraksı kapatın. Emilmeyen USP 6 örgülü polyester kullanın. Daha sonra serratus kasını ve pektoralis majör kasını koşu dikişi ile kapatın.
Emilmeyen USP 2-0 örgülü ipek kullanılarak akan subkutiküler sütür ile cildi kapatın. Daha sonra kateterler arasındaki dorsal taraftaki kesileri kontrol edin. İlk olarak, kesiği kapatmak için doğrudan cilde bir düğüm atın.
Daha sonra kateterleri deriden yaklaşık 1 santimetre uzakta başka bir düğümle dikişe sabitleyin. Akış probu telinin sütür tarafından kesilmemesi için akış problarını poliglaktin sütür ile dikin. Ardından, plevral boşlukta negatif basıncı eski haline getirmek için insizyonun kraniyal tarafına basınç uygularken dreni dikkatlice çıkarın.
Şimdi kesiyi bir çanta ipi dikişle kapatarak ve yarayı vazelin ile kapatarak ameliyatı tamamlayın. Hayvanın nasıl kurtarılacağına ve koşu bandı deneyinin nasıl yapılacağına ilişkin metin protokolünü izleyin. Saatte 5 kilometreye kadar hareket etmek için domuz egzersizi yapmak, kalp debisinin iki katına çıkmasına neden oldu.
Vücut oksijen tüketiminde üç katına çıktığı gözlendi. Bunun nedeni, hemoglobin konsantrasyonundaki bir artış ve vücut oksijen ekstraksiyonundaki bir artış ile birlikte kardiyak debideki artıştı. Bu, esas olarak, inme hacminde küçük bir artış ile kalp atış hızında bir artışla gerçekleştirildi.
İnme hacmindeki artış, sol ventrikül basıncının 1. türevinin maksimumundaki bir artışla birlikte sol ventrikülün gevşeme hızının artması ve sol ventrikülün doldurma basıncı olan sol atriyal basınçta bir artışla kanıtlandığı gibi sol ventrikül kontraktilitesindeki bir artış ile kolaylaştırılmıştır. Sistemik vazodilatasyon, sistemik vasküler iletkenlikte bir artış ve sistemik vasküler dirençte bir azalma ile kanıtlandığı gibi meydana geldi. Bu, kardiyak debideki artışı neredeyse tamamen karşıladı, böylece ortalama aort basıncı sadece biraz arttı.
Diğer birkaç parametrenin daha fazla yorumu metin protokolünde verilmiştir. Bu videoyu izledikten sonra, sonraki kardiyovasküler deneylerde hemodinamik ölçümler yapmak için hayvanları kronik olarak nasıl alet edeceğinizi iyi anlamış olmalısınız.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, uyanık domuzlarda hem dinlenme halindeyken hem de kademeli koşu bandı egzersizi sırasında kardiyopulmoner fonksiyonların değerlendirilmesine yönelik bir protokol sunmaktadır. Bu yöntem, anestezi ilaçlarının etkisi olmadan tekrarlayan hemodinamik ölçümler yapılmasına olanak tanır.
Domuzlarda uygulanan kronik enstrümantasyon, uyanık hayvanlarda tekrarlanan hemodinamik ölçümlere olanak tanıyarak, hafif kardiyovasküler değişiklikleri maskeleyen anestetik karıştırıcı faktörleri ortadan kaldırır. Bu yaklaşım, dinlenme ve egzersiz stresi sırasında seri veriler sağlayarak, metabolik sendrom ve korunmuş ejeksiyon fraksiyonlu kalp yetersizliğinin preklinik değerlendirmesini destekler. Yöntem, boylamsal kardiyovasküler çalışmalarda istatistiksel gücü artırır ve hayvan kullanımını azaltır.
Bu yöntem, özellikle kardiyovasküler ve metabolik hastalık programları için, hedef doğrulamadan preklinik güvenlik değerlendirmesine kadar uzanan keşif sürecine uygundur.