Tükürük hipofonksiyonunun bir Sıçan Modelinde Retroductal Submandibuler Bezi damlatma ve yerelleştirilmiş fraksiyonlara Işınlama

Tükürük bezi hipofonksiyonu, baş ve boyun radyoterapisinin önemli bir yan etkisi hastanın yaşam kalitesini düşürür. Hayvan modellerinde yeni tedavilerin etkinliğinin gösterilmesi, klinik geçişten önce bir ön koşuldur. Bu protokol, sıçan submandibular bezlerinin retroduktal uygulamasını ve lokal ışınlamasını tanımlar.

Bu prosedürün genel amacı, tükürük disfonksiyonu ile mücadeledeki etkinliklerini değerlendirmek için submandibular bezlere terapötiklerin retroductal olarak uygulanmasıdır. Bu yöntem, tükürük bezi bozuklukları alanında, hangi tedavilerin radyasyona karşı koruyabileceği veya tükürük bezi fonksiyonunu eski haline getirebileceği gibi temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, tükürük bezlerinin lokal olarak tedavi edilebilmesi ve böylece hedef olmayan doku yan etkileri riskini azaltmasıdır.

Genel olarak, bu yönteme yeni başlayan kişiler, kanal açıklıkları görünmediğinden ve kanülün kanala kör bir şekilde manipüle edilmesi gerektiğinden mücadele edeceklerdir. Prosedüre başlamadan önce, bir scalpal ile on santimetre uzunluğunda bir PE 10 polietilen boru kesin, daha sonra borunun her iki ucunu her iki elin işaret parmağı ve başparmağı arasında kavrayın ve borunun orta kısmını hafif bir alevin üzerinde ısıtın, yumuşatılmış boruyu uzunluğunu iki katına çıkarmak için her iki tarafı dikkatlice çekin. Daha sonra, her biri konik uçlu iki kanül elde etmek için boruyu ortada 45 derecelik bir açıyla kesmek için bir neşter kullanın.

Kanüllerden birinin konik olmayan ucunu 0,5 cc insülin şırıngasının 29 gauge iğnesinin üzerine gerin. Ardından kanülü çıkarın ve şırıngaya 220 mikrolitre salin solüsyonu çekin. Hava kabarcıklarını çıkarmak için şırınga miline dokunun ve kanülü iğnenin üzerine yeniden takın.

Kanüldeki havayı dışarı atmak ve borudan serbest bir çözelti akışı sağlamak için pistona bastırın ve şırıngadaki salin hacmini 200 mikrolitreye ayarlayın. Şimdi, sıçanın uygun sedasyon seviyesini ayak parmağı çimdikleme ve palpe edilebilir refleks ile onaylayın ve açıkta kalan korneaların üzerine göz kayganlaştırıcı uygulayın. Amimal'i özel olarak tasarlanmış bir sınırlama platformuna yerleştirin ve üst kesici dişleri enine çubuğa geçirin.

Çeneyi aşağı çekmek için alt kesici dişlerin etrafına bir lastik bant sarın. Platforma sabitlemek. Daha sonra dilden steril bir dikiş geçirin ve ağız tabanını yükseltmek için yukarı kaldırın.

Daha sonra dikişleri klemplemek için bir hemostat kullanın ve hemostatı enine çubuğun üzerinden geçirin. Daha sonra, yanakları genişletmek için özel yapım bir yanak yayıcı ve dil altı papillerini ağız tabanında bulmak için bir diseksiyon mikroskobu kullanın. Hassas forseler kullanarak, önceden şekillendirilmiş PE 10 borusunun konik ucunu kavrayın ve kanülün ucunu dil altı papilla üzerindeki duktal deliğe nazikçe manipüle edin.

Daha sonra kanülü kanala üç ila beş milimetre geçirin ve kanülün kanaldan tıkanıklık olmadan geçtiğinden emin olun. Salini damlatmadan önce, atrofini hayvanın boynunun tırnağına deri altından enjekte edin. Enjeksiyondan on dakika sonra, kanülü bir damla siyanoakrilat ile kanal deliğine sabitleyin.

Tutkal kuruduktan sonra, şırınga pistonunu dakikada 50 mikrolitre olarak yavaşça bastırın, ta ki 200 mikrolitre salin çözeltisi beze damlatılıncaya kadar. Damlatma sırasında geri basınçla karşılaşırsanız, boruyu durdurun ve ardından geri çekin, ardından yeni bir kanül ile yeniden kanüle edin. Ardından hortumu bir hemostat ile sıkıştırın ve şırıngayı dikkatlice çıkarın.

Hayvan bilincini geri kazanana kadar boruyu 30 ila 60 dakika kanalda bırakın. Daha sonra dili tutan dikişi çıkarın ve hayvanı tamamen iyileşene kadar bir ısı lambası altında ayrı bir kafese aktarın. Submandibular beze lokal olarak fraksiyone ışınlama uygulamak.

Sırtüstü pozisyonda anestezi uygulanmış sıçanın sternumunun tepesine kadar olan alanı manibalın alt sınırından kapsayan üç santimetrelik bir radyasyon alanı yarığı sütunlayın. Bölge üzerine bir santimetre doku eşdeğer bolus yerleştirdikten sonra. Doğrusal hızlandırıcı üzerinde altı megavoltluk bir foton ışını kullanarak radyasyon kaynağı ile bolusun tepesi arasındaki mesafeyi 100 santimeye ayarlayın.

Uygun maruz kalma süresi için hayvanı 2,5 gri ile ışınlayın. Radyasyona maruz kalma süresinin sonunda, az önce gösterildiği gibi iyileşme sırasında hayvanı ısıtın. İlk deneyler sırasında, kanülün uygun şekilde yerleştirilmesi, bezin hematoksilen veya tryplan mavi çözeltisi ile infüze edilmesi ve ötenazi yapılmış hayvanlarda bez lekelenmesinin değerlendirilmesiyle doğrulandı.

Submandibular bezler, hayvan sağlığını ve deneysel sonuçları etkileyebilecek ciddi oral hedef dışı etkilerden kaçınarak, boyuna sütunlu radyasyonla seçici olarak ışınlanabildikleri için incelenmiştir. Bu fraksiyone radyasyon şemasının radyasyondan sekiz hafta sonra tükürük akışı üzerindeki etkilerinin analizi, günlük 2.5 gri artışlara maruz kalmanın tükürük akışını hızla azalttığını göstermektedir. Işınlanmış hayvanlarda tükürük çıkışında ışınlanmamış hayvanlara kıyasla 10 kat azalma.

Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa birkaç dakika içinde tamamlanabilir. Bu işlemi denerken, kanülün tükürük bezinin boşaltım kanalına sınırsız geçişini sağlamayı unutmamak önemlidir. Geliştirildikten sonra, bu teknik, tükürük bezi bozuklukları alanındaki araştırmacıların radyasyon ve otoimmün tükürük bezi rahatsızlıklarına yönelik tedavileri keşfetmelerinin yolunu açtı.

Bu videoyu izledikten sonra, sıçanın submandibular bezinde retroduktal kurulumun nasıl gerçekleştirileceğini ve radyasyon toksisitesinin iyileştirilmesinin terapötik etkinliğini değerlendirmek için bezleri lokal olarak ışınlamayı iyi anlamalısınız. Gen ve protein terapötikleriyle çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve bu işlemi gerçekleştirirken iğne batmasından kaçınmak ve biyolojik ajanlara cilt maruziyetini en aza indirmek gibi önlemlerin alınması gerektiğini unutmayın.