Name: Tükürük hipofonksiyonunun bir Sıçan Modelinde Retroductal Submandibuler Bezi damlatma ve yerelleştirilmiş fraksiyonlara Işınlama (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-04-24T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 44 s
Description: Keşfedin sıçan submandibular bezlerine retroduktal ilaç uygulama yöntemini; radyasyon sonrası tükürük bezi disfonksiyonunu tedavi etmek için yerel uygulama sağlar. Bu teknik hedef doku dışı yan etkileri azaltarak terapötik etkinliği artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Radyasyon dozu ölçümlerindeki yardımı için Dr. John Chang'a (Radyasyon Onkolojisi, LSU Sağlık Bilimleri Merkezi) teşekkür ederiz. Çalışma, Amerikan Kanser Derneği (Hibe numarası: 116945-RSG-09-038-01-CCE), Ulusal Sağlık Enstitüsü (Hibe numarası: R21CA173162) ve Feist-Weiller Kanser Merkezi tarafından desteklenmiştir.

Tüm işlemler LSU Sağlık, Shreveport, Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmış ve bakım ve laboratuvar hayvanlarının kullanımı için NIH kurallarına uygun olarak idi. Sıçan Submandibuler Tükürük Bezlerinin 1. kanülasyonu <ol><li> Şırınga-Boru Meclisi Hazırlanması <ol><li> bir neşter ile PE10 polietilen boru 10 cm uzunluğunda kesilir. işaret parmağı ve başparmak arasında boru iki ucunu tutun. nazik bir alev üzerinde boru orta bölümünü ısıtın ve yavaşça her iki tarafı çekerek uzunluğunu iki katına yumuşatılmış boru germek. </li><li> Konik bir ucu ile, her 2 - kanüller için 45 o lik bir açıda bir neşter ile orta hortumu kesilir. 0.5 cc İnsülin şırınga 29 G iğne üzerine takarak kanül olmayan konik ucunu genişletin. </li><li> kanül çıkarın ve enjektöre tuzlu su çözeltisi 220 ul çizin. Hava kabarcıklarını çıkarmak için hafifçe vurun. cannul Fitiğne üzerinde ve havayı dışarı atmak ve kanül yoluyla çözümün serbest akışını sağlamak için şırınga pistonu itin. 200 ul ses seviyesini ayarlayın. </li></ol></li><li> Submandibular Bez Duct içi Ağız kanülasyonu NOT: Otoklav araçlar prosedür öncesi ve sıcak bir boncuk sterilizatör prosedürlere arasında sterilize. <ol><li> Sprague Dawley sıçan tartılır ve bir hipodermik şırınga hesaplanan ketamin hacmi (42 mg / kg) / ksilazin (8 mg / kg) / asepromazin (1.4 mg / kg) karışımı dağıtın. </li><li> işaret parmağı ve bir elin başparmak arasındaki kuyruk tabanı tutup onu kavramak vücut üzerinde diğer yandan kaydırarak hayvan dizginlemek. Başparmak ve kalan parmakları ile gövde tutarken baş tarafı boyunca indeksi ve orta parmaklarınızı dinlenmek. </li><li> arka bacak kas anestezik enjekte edilir. ayak tutam ve palpebral refleks anestezi derinliği onaylayın. kuruluk süre önlemek için göz yağ sürünhayvan anestezi altında olduğunu. </li><li> Özel tasarlanmış bir platform (Şekil 1) hayvan koyun ve çapraz çubuk üst kesici dişlerin meşgul. alt ön dişlerin etrafına bir lastik bant döngü ve platform için demirleme ile alt çene aşağı çekin. </li><li> dil aracılığıyla steril dikiş geçmek ve ağız tabanını yükseltmek için yukarı kaldırın. Bir hemostatla sütürler Kelepçe ve çapraz çubuk üzerine geçirin. </li><li> Bir özel inşa edilmiş yanak yayıcı (Şekil 1) ile yanakları genişletin ve bir mikroskop altında ağız katta dilaltı papilla bulun. </li><li> hassas bir forseps kullanarak önceden PI10 boru konik ucunu tutun. Yavaşça dilaltı papilla üzerinde duktal deliğinin içine kanül ucu manipüle. o 3 geçirilerek kanül yerleştirme onaylamak - kanal içine 5 mm; herhangi bir engel olmadan geçer emin olun. </li></ol></li><li> Submandibuler Bezi Instillation <ol><li> Boynun ense deri altına atropin (0.5 mg / kg) enjekte edilir, ve tükürük salgılarında azaltılması için 10 dakika bekleyin. </li><li> siyanoakrilat (yapıştırıcı) bir damla kanal ağzına kanül Güvenli ve kurumasını bekleyin. yavaş 50 ml / dk&#39;lık bir oranda şırınga pistonunun basarak bezi (200 ul / bezi) &#39;de çözelti aşılamak. </li><li> Bir hemostatla boru Crush ve dikkatle şırınga çıkarın. Hayvan bilinç kavuşur kadar 60 dakika - 30 kanalda boru saklayın. dilini tutan dikiş çıkarın. </li><li> Ayrı bir kafesine hayvan aktarın ve kurtarma sırasında sıcak tutmak için bir ısı lambası kullanın. sternal recumbence korumak için kendine geldi kadar sahipsiz hayvan bırakmayın. </li><li> Hayvan tamamen ayaktan sonra, yiyecek ve su sınırsız erişim ile vivari adresinden ev. </li></ol></li></ol> 2. Lokalize fraksiyonlara IşınlamaTükürük Bezlerinin <ol><li> daha önce tarif edildiği gibi bir hayvan dizginlemek ve arka bacak kas içine ketamin (33 mg / kg) / ksilazin (6 mg / kg) / asepromazin (1 mg / kg) karışımı ile anestezi. anestezi derinliği onaylayın ve gözlere gres sürülmesi. </li><li> lineer hızlandırıcı masa üzerine hayvan sırtüstü yerleştirin ve kafa eğerek boynunu uzatmak. sternum üstüne mandibula alt sınırından bölgeyi kapsayacak şekilde radyasyon alanı (3 cm yarık genişliği) .birleştirecek. </li><li> bölge üzerinde 1 cm&#39;lik bir doku eşdeğer bolus yerleştirin ve radyasyon kaynağı ve 100 cm bolus tepesi arasındaki mesafeyi ayarlamak. </li><li> Bir lineer hızlandırıcı bir 6 MV foton ışını kullanarak hayvan (2.5 Gy) ışın tedavisi. pozlama süresini dikte edecek yüzeyi bolus radyasyon kaynağından oranı, alan büyüklüğü ve mesafesini Doz. ayarlamak akım hayvanlar, ~ 1 Gy / dak doz oranında ışınlanmıştır. </li><li> pozlama tekrarlayın; Toplam 8 2.5 Gy / güngün; 4 gün / arasında 2 gün ara ile bir hafta. kurtarma sırasında hayvan sıcak tutun. tamamen ayaktan sonra vivari hayvan aktarın. </li><li> Bezi fonksiyon 14 ölçmek için radyasyon sonrası uyarılan submandibuler bez tükürük 8 hafta toplayın. Soğuk% 4 paraformaldehid / fosfat tamponlu tuzlu su, pH 7.2, kardiyak perfüzyon ile anestezi altında hayvanlara öldürülür. Histolojik ve immünohistokimyasal 14 analizleri için submandibuler bezleri kökünü kazımak. </li></ol>

<ol><li>Delporte, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+fluid+secretion+after+adenoviral-mediated+transfer+of+the+aquaporin-1+cDNA+to+irradiated+rat+salivary+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Increased fluid secretion after adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA to irradiated rat salivary glands.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 94 (7), 3268-3273 (1997).</li>
<li>Chambers, M. S., Rosenthal, D. I., Weber, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiation-induced+xerostomia%5BTitle%5D)+AND+%22Head+Neck%22%5BJournal%5D)">Radiation-induced xerostomia.</a> Head Neck. 29 (1), 58-63 (2007).</li>
<li>Sciubba, J. J., Goldenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oral+complications+of+radiotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Oncol%22%5BJournal%5D)">Oral complications of radiotherapy.</a> Lancet Oncol. 7 (2), 175-183 (2006).</li>
<li>Rodrigues, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+prospective+study+of+salivary+gland+function+in+lymphoma+patients+receiving+head+and+neck+irradiation%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Radiat+Oncol+Biol+Phys%22%5BJournal%5D)">A prospective study of salivary gland function in lymphoma patients receiving head and neck irradiation.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 75 (4), 1079-1083 (2009).</li>
<li>Coracin, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Major+salivary+gland+damage+in+allogeneic+hematopoietic+progenitor+cell+transplantation+assessed+by+scintigraphic+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Marrow+Transplant%22%5BJournal%5D)">Major salivary gland damage in allogeneic hematopoietic progenitor cell transplantation assessed by scintigraphic methods.</a> Bone Marrow Transplant. 37 (10), 955-959 (2006).</li>
<li>Jensen, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+salivary+gland+hypofunction+and+xerostomia+induced+by+cancer+therapies%3A+management+strategies+and+economic+impact%5BTitle%5D)+AND+%22Support+Care+Cancer%22%5BJournal%5D)">A systematic review of salivary gland hypofunction and xerostomia induced by cancer therapies: management strategies and economic impact.</a> Support Care Cancer. 18 (8), 1061-1079 (2010).</li>
<li>de Castro, G. Jr, Federico, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation%2C+prevention+and+management+of+radiotherapy-induced+xerostomia+in+head+and+neck+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Evaluation, prevention and management of radiotherapy-induced xerostomia in head and neck cancer patients.</a> Curr Opin Oncol. 18 (3), 266-270 (2006).</li>
<li>Epperly, M. W., Carpenter, M., Agarwal, A., Mitra, P., Nie, S., Greenberger, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoral+manganese+superoxide+dismutase-plasmid%2Fliposome+%28MnSOD-PL%29+radioprotective+gene+therapy+decreases+ionizing+irradiation-induced+murine+mucosal+cell+cycling+and+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vivo%22%5BJournal%5D)">Intraoral manganese superoxide dismutase-plasmid/liposome (MnSOD-PL) radioprotective gene therapy decreases ionizing irradiation-induced murine mucosal cell cycling and apoptosis.</a> In Vivo. 18 (4), 401-410 (2004).</li>
<li>Cotrim, A. P., Sowers, A., Mitchell, J. B., Baum, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+irradiation-induced+salivary+hypofunction+by+microvessel+protection+in+mouse+salivary+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Prevention of irradiation-induced salivary hypofunction by microvessel protection in mouse salivary glands.</a> Mol Ther. 15 (12), 2101-2106 (2007).</li>
<li>Zheng, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+radiation-induced+salivary+hypofunction+following+hKGF+gene+delivery+to+murine+submandibular+glands%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Prevention of radiation-induced salivary hypofunction following hKGF gene delivery to murine submandibular glands.</a> Clin Cancer Res. 17 (9), 2842-2851 (2011).</li>
<li>Palaniyandi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenoviral+delivery+of+Tousled+kinase+for+the+protection+salivary+glands+against+ionizing+radiation+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Adenoviral delivery of Tousled kinase for the protection salivary glands against ionizing radiation damage.</a> Gene Ther. 18 (3), 275-282 (2011).</li>
<li>Baum, B. J., Voutetakis, A., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salivary+glands%3A+novel+target+sites+for+gene+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Salivary glands: novel target sites for gene therapeutics.</a> Trends Mol Med. 10 (12), 585-590 (2004).</li>
<li>Limesand, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin-like+growth+factor-1+preserves+salivary+gland+function+after+fractionated+radiation%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Radiat+Oncol+Biol+Phys%22%5BJournal%5D)">Insulin-like growth factor-1 preserves salivary gland function after fractionated radiation.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 78 (2), 579-586 (2010).</li>
<li>Timiri Shanmugam, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recombinant+AAV9-TLK1B+administration+ameliorates+fractionated+radiation-induced+xerostomia%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Recombinant AAV9-TLK1B administration ameliorates fractionated radiation-induced xerostomia.</a> Hum Gene Ther. 24 (6), 604-612 (2013).</li>
<li>Coppes, R. P., Vissink, A., Konings, A. W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+radiosensitivity+of+rat+parotid+and+submandibular+glands+after+different+radiation+schedules%5BTitle%5D)+AND+%22Radiother+Oncol%22%5BJournal%5D)">Comparison of radiosensitivity of rat parotid and submandibular glands after different radiation schedules.</a> Radiother Oncol. 63 (3), 321-328 (2002).</li>
<li>Sunavala-Dossabhoy, G., Palaniyandi, S., Richardson, C., De Benedetti, A., Schrott, L., Caldito, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TAT-mediated+delivery+of+Tousled+protein+to+salivary+glands+protects+against+radiation-induced+hypofunction%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Radiat+Oncol+Biol+Phys%22%5BJournal%5D)">TAT-mediated delivery of Tousled protein to salivary glands protects against radiation-induced hypofunction.</a> Int J Radiat Oncol Biol Phys. 84 (1), 257-265 (2012).</li>
<li>Baum, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+of+the+AQP1+cDNA+for+the+correction+of+radiation-induced+salivary+hypofunction%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Transfer of the AQP1 cDNA for the correction of radiation-induced salivary hypofunction.</a> Biochim Biophys Acta. 1758 (8), 1071-1077 (2006).</li>
<li>Tran, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paracrine+effects+of+bone+marrow+soup+restore+organ+function%2C+regeneration%2C+and+repair+in+salivary+glands+damaged+by+irradiation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Paracrine effects of bone marrow soup restore organ function, regeneration, and repair in salivary glands damaged by irradiation.</a> PLoS One. 8 (4), e61632(2013).</li>
<li>Nanduri, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salisphere+derived+c-Kit%2B+cell+transplantation+restores+tissue+homeostasis+in+irradiated+salivary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Radiother+Oncol%22%5BJournal%5D)">Salisphere derived c-Kit+ cell transplantation restores tissue homeostasis in irradiated salivary gland.</a> Radiother Oncol. 108 (3), 458-463 (2013).</li>
<li>Arany, S., Benoit, D. S., Dewhurst, S., Ovitt, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoparticle-mediated+gene+silencing+confers+radioprotection+to+salivary+glands+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Nanoparticle-mediated gene silencing confers radioprotection to salivary glands in vivo.</a> Mol Ther. 21 (6), 1182-1194 (2013).</li>
<li>Voutetakis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reengineered+salivary+glands+are+stable+endogenous+bioreactors+for+systemic+gene+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Reengineered salivary glands are stable endogenous bioreactors for systemic gene therapeutics.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (9), 3053-3058 (2004).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Tükürük bezleri sık sık baş boyun kanseri, boyun düğüm seçmeli ablasyon veya bölgesel hematolojik maligniteler için radyoterapi uygulanan hastalarda doku iyileşme eşiğin ötesinde radyasyon dozları alırsınız. bezinin sıvı salgılayan asinüs hücrelerinde terminal olarak farklılaşmış olsa da, paradoksal radyasyona hassas olan. salgı işlevi kronik düşük tükürük çıktı radyasyon ve geri dönüşümsüz bezi hasarı sonuçlarının ilk hafta içinde düşer. yoksul bezi fonksiyon ve ensues ağız kuruluğu ile mücadele etmek için, koruma ya d...

Sağlıklı dokularda kollateral yok kanser tedavilerinin zararlı yan etkilerin bir dizi oluşturur. radyasyon alanları ile yalan önemli tükürük bezlerinin bir kısmı veya tamamı kaçınılmaz imha edilir. Bu nedenle, kemik iliği transplantasyonu öncesinde baş ve boyun kanseri, servikal lenfoma, ya da tam vücut radyasyonu için radyoterapi uygulanan hastaların çoğunda radyasyon, tükürük bezi hipofonksiyon 2-6 en yaygın ve inatçı olumsuz etkileri birini çeker. tükürük bezlerinin sıvı üreten asiner hücreleri radyasyona akut duyarlıdır. tükürük bezlerinin hasar tükürük akışı gibi tükürük hipofonksiyonu ifade edilen bir durumun ciddi azalmasını neden olur. Tükürük akışındaki azalma kronik gibi çiğneme, yutma, konuşma ve tat, ama şiddetli ağrı, mukozal yırtık, yutma güçlüğü, fırsatçı enfeksiyonların hastalıklı sekel gibi temel sözlü faaliyetlerini bozar ve diş çürükleri bir kötüleşirHastanın refahı ve fonksiyon 2,3. radyoterapi ile ilişkili tükürük hücre kaybı geri döndürülemez olduğundan, ağız kuruluğu hiçbir düzeltici bir tedavisi yoktur. Yapay tükürük ikame ve prosecretory ilaçlarla belirtileri yatıştırılması odaklanan güncel tedavi uzun süreli rahatlama 6 etkisizdir. Geliştirilmiş Radyasyon uygulama teknikleri durumun şiddetini azaltma yardımcı olmasına rağmen, normal doku toksisitesi ve komplikasyonları, kanser tedavisinde 6,7 sınırlayıcı bir faktördür kalır. radyoterapi ile ilişkili komplikasyonları önlemek için önleyici tedbirler, bu nedenle norm haline gelmektedir. DNA onarımı serbest oksijen radikallerinin, bakıcı hücreleri oluşumunu temizlemek ya da geliştirmek Radyo koruyucu maddeler tükürük hipofonksiyona 8-11 önlemek için araştırılmaktadır. ekzokrin tükürük bezlerinin salgıları ana boşaltım kanalları yoluyla ağzına süzün. th Intra-Oral kanülasyonkontrast maddelerin enjeksiyonu için e boşaltım kanalları ayaktan prosedür olarak rutin olarak yapılır. Benzer bir yaklaşım kullanarak, tükürük bezleri doğrudan lokalize tedavi 12 hedeflenebilir. Dışında sistemik yan etki riskini azaltarak, retroductal bezi damlatma faydaları ekledi. duktal ağacının etrafında tükürük hücrelerin tek tabakalı düzenlemesi tüm tükürük epitel hücreleri hedef sağlar, ve bir engel olarak bezi eylemlerinin lifli kapsülleme istenmeyen terapötik yayılmasını azaltmak için. Özünde, tükürük bezleri gibi radyasyona bağlı tükürük hipofonksiyon olarak bezi rahatsızlıkları hedeflenen tedavi için optimal uygundur. haftalık bir süre için - (2.5 Gy / fraksiyon / gün, haftada beş gün 1.8), kanser tedavisi için geleneksel radyasyon küçük dozlarda verilir. Bu nedenle, deneysel modellerde uzun süren radyasyon düzeni karşı etkinliğini gösteren bir radyo-koruyucu tedavi daha klinik bir etkiye sahiptir. Comprofraksiyonlara radyasyondan sonra mised tükürük fonksiyonu küçük hayvanlar kaydedildi, ancak radyasyon kaynağı, doz fraksiyonu ve kullanılan protokoller çeşitli 9,10,13 vardır edilmiştir. Bu rapor retroductal teslimat ve hasta ilgili radyasyon kaynağı ve doz fraksiyonu kullanarak sıçan submandibuler bezleri lokalize radyasyon yöntemlerini belirler.

<table><tbody><tr><td>Intramedic Polietilen boru (PE10)</td><td>Becton Dickson</td><td>427401</td><td></td></tr><tr><td>1/2 cc İnsülin Şırınga U-100</td><td>Becton Dickson</td><td>309306</td><td></td></tr><tr><td>Yapay Gözyaşları</td><td>Miller Vet Supply&nbsp;</td><td>5098-9840-64</td><td></td></tr><tr><td>Sıcak Boncuk Sterilizatörü</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>Perma-El ipek sütür</td><td>Ethicon</td><td>K833H</td><td></td></tr><tr><td>Graefe forsep</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11051-10</td><td></td></tr><tr><td>Olympus SZX16 Stereo Mikroskop</td><td>Hunt Optik ve Görüntüleme</td><td></td><td></td></tr><tr><td>6 MV Lineer Hızlandırıcı</td><td>Elekta</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bolus - Derisiz&nbsp;</td><td>Civco</td><td>MTCB410</td><td></td></tr><tr><td>Isı Lambası</td><td>Braintree Scientific</td><td>HL-1&nbsp; 110V</td><td></td></tr></tbody></table>

tükürük hipofonksiyonunun bir sıçan modelinde retroductal submandibuler bezi damlatma ve yerelleştirilmiş fraksiyonlara işınlama

Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction

Radyasyon portalları içinde yer alan normal dokular yanlışlıkla zarar görür. Tükürük bezleri genellikle baş ve boyun radyoterapisi sırasında yaralanır. Onarılamaz hücre hasarı, temel ağız aktivitelerini bozan kronik bir tükürük fonksiyonu kaybına neden olur ve ağız enfeksiyonları ve diş çürüğü riskini artırır. Tükürük hipofonksiyonu ve komplikasyonları hastanın konforunu ciddi şekilde etkiler. Durumun mevcut semptomatik yönetimi etkisizdir ve durumu hafifletmek için daha yeni tedavilere ihtiyaç vardır. 
Tükürük bezleri, salgılarını boşaltım kanalları yoluyla ağza atan ekzokrin bezlerdir. Bu kanalların kanülasyonu, bezlere doğrudan erişim sağlar. Bir kontrast maddenin majör tükürük bezlerine retroductal olarak verilmesi, tanısal görüntüleme için rutin bir ayaktan tedavi prosedürüdür. Benzer bir prosedür kullanarak, bezlerin lokalize tedavisi mümkündür. Bununla birlikte, bu tekniğin küçük hayvanlarla yapılan klinik öncesi çalışmalarda uygulanması benzersiz zorluklar doğurmaktadır. Bu çalışmada, Dr. Bruce Baum'un laboratuvarında (NIH)1 rafine edilen bir prosedür olan sıçan submandibular bezlerinde retroductal uygulama tekniğini tanımladık ve lokal bez ışınlaması için bir prosedür ortaya koyduk.

minimal invaziv sialografi tekniklerle, büyük tükürük bezlerinin lokal tedavi uygulanabilir. Sıçan submandibular tükürük bezlerinde Retroductal yönetim Wharton kanallarının ağız içi kanülasyon (Şekil 2) tarafından denendi. ağız katta bulunan dil-altı papilla açık Wharton tükürük kanalları, ancak orifisleri kolayca görünür değildir. Kateterin takıldığı, bu nedenle, yumuşak tarama yapıldı. kanül yerleştirerek şanssız kanama veya kanal perforasyonu önlemek için, hiçbir kuvv...

Tükürük bezi hipofonksiyonu, baş ve boyun radyoterapisinin önemli bir yan etkisi hastanın yaşam kalitesini düşürür. Hayvan modellerinde yeni tedavilerin etkinliğinin gösterilmesi, klinik geçişten önce bir ön koşuldur. Bu protokol, sıçan submandibular bezlerinin retroduktal uygulamasını ve lokal ışınlamasını tanımlar.

Tükürük hipofonksiyonunun bir Sıçan Modelinde Retroductal Submandibuler Bezi damlatma ve yerelleştirilmiş fraksiyonlara Işınlama

Normal tissues that lie within the portals of radiation are inadvertently damaged. Salivary glands are often injured during head and neck radiotherapy. ...

Bu prosedürün genel amacı, tükürük bezi disfonksiyonuyla mücadeledeki etkinliklerini değerlendirmek amacıyla submandibuler bezlere retrodüktal yolla terapötik ajanlar uygulamaktır. Bu yöntem, radyasyona karşı hangi tedavilerin tükürük bezi fonksiyonunu koruyabileceği veya yeniden restore edebileceği gibi tükürük bezi bozuklukları alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, tükürük bezlerinin lokal olarak tedavi edilebilmesi ve böylece hedef dışı dokularda yan etki riskinin azaltılmasıdır.Genellikle bu yöntemde yeni olan kişiler, kanal açıklıkları görünür olmadığı ve kanülün kanal içine körleme bir şekilde yönlendirilmesi gerektiği için zorlanırlar. İşleme başlamadan önce, bir skalpel ile on santimetre uzunluğunda PE 10 polietilen tüp kesin, ardından tüpün her iki ucunu her iki elin işaret parmağı ve başparmağı arasında tutun ve tüpün orta kısmını hafif bir alev üzerinde ısıtarak, yumuşayan tüpü uzunluğunun iki katına çıkaracak şekilde her iki tarafı dikkatlice çekin. Daha sonra, her biri konik uca sahip iki kanül elde etmek için tüpü ortadan 45 derecelik bir açıyla skalpel kullanarak kesin.Kanüllerden birinin konik olmayan ucunu 0,5cc insülin şırıngasının 29 gauge iğnesinin üzerine gerdirerek geçirin. Ardından kanülü çıkarın ve şırıngaya 220 µL salin solüsyonu çekin. Hava kabarcıklarını gidermek için şırınga gövdesine hafifçe vurun ve kanülü iğneye yeniden takın.Kanüldeki havayı tahliye etmek ve solüsyonun tüpler boyunca serbestçe akışını sağlamak için pistonu aşağı bastırın ve şırıngadaki serum fizyolojik hacmini 200 microliters olarak ayarlayın. Şimdi, ayak parmağı sıkıştırma ve palpebilir refleks ile sıçanın sedasyon seviyesinin uygunluğunu doğrulayın ve açıkta kalan korneaların üzerine göz kayganlaştırıcı uygulayın. Hayvanı özel olarak tasarlanmış bir sabitleme platformuna yerleştirin ve üst kesici dişleri enine çubuğa geçirin.Çeneyi aşağı çekmek için alt kesici dişlerin etrafına bir paket lastiği dolayın ve bunu platforma sabitleyin. Ardından, ağız tabanını yükseltmek için dille steril bir sütür geçirin ve dili yukarı kaldırın.Ardından, süturları sıkıştırmak için bir hemostat kullanın ve hemostatı transvers barın üzerinden geçirin. Sonra, yanakları genişletmek için özel yapım bir yanak ayırıcı ve ağız tabanındaki sublingual papillaları belirlemek için bir diseksiyon mikroskobu kullanın. Hassas pensler yardımıyla, önceden hazırlanmış PE 10 tüpünün konik ucunu kavrayın ve kanülün ucunu sublingual papilla üzerindeki kanal ağzına nazikçe yerleştirin.Ardından, kanülün herhangi bir engelle karşılaşmadan kanal boyunca ilerlediğinden emin olarak kanülü kanala üç ila beş milimetre derinliğinde yerleştirin. Salin uygulamadan önce, hayvanın ensesine deri altına atropin enjekte edin. Enjeksiyondan on dakika sonra kanülü bir damla siyanoakrilat ile kanal ağzına sabitleyin.Yapıştırıcı kuruduktan sonra, bezin içine 200 µL salin solüsyonu verilene kadar şırınga pistonunu dakikada 50 µL hızla yavaşça bastırın. Enjeksiyon sırasında geri basınçla karşılaşırsanız işlemi durdurun, tüpü geri çekin ve ardından yeni bir kanül ile tekrar kanülasyon yapın. Daha sonra tüpü bir hemostata ile klempleyerek şırıngayı dikkatlice çıkarın.Hayvan bilincini geri kazanana kadar tüpleri 30 ila 60 dakika boyunca kanal içinde bırakın. Ardından dili tutan sütürü çıkarın ve hayvan tamamen iyileşene kadar ısı lambası altında ayrı bir kafese aktarın. Submandibular beze üzerine lokal fraksiyone ışınlama uygulamak için.Sırtüstü pozisyondaki anestezi altındaki sıçanın, mandibulanın alt sınırından sternumun üst kısmına kadar olan alanı kapsayan üç santimetrelik bir radyasyon alanı yarığı oluşturun. Bölgenin üzerine bir santimetrelik doku eşdeğeri bolus yerleştirdikten sonra, lineer hızlandırıcıda altı megavolt foton demeti kullanarak radyasyon kaynağı ile bolusun üst kısmı arasındaki mesafeyi 100 santimetreye ayarlayın.Hayvana, uygun maruziyet süresi boyunca 2.5 gray ışınlama yapın. Radyasyon maruziyet süresinin sonunda, hayvanı az önce gösterildiği gibi iyileşme sürecinde ısıtın. İlk deneyler sırasında, kanülün doğru yerleşimi, bezin hematoksilin veya trypan blue çözeltisi ile infüze edilmesi ve ötanize edilen hayvanlarda bez boyamasının değerlendirilmesi yoluyla doğrulanmıştır.Submandibular bezler, boyna uygulanan kolonlanmış radyasyon ile seçici olarak ışınlanabildikleri için çalışılmıştır; böylece hayvanın sağlığını ve deneysel sonucu etkileyebilecek ciddi oral hedef dışı etkilerden kaçınılabilmektedir. Bu fraksiyone radyasyon şemasının radyasyondan sekiz hafta sonraki tükürük akışı üzerindeki etkilerinin analizi, günlük 2.5 grey artışlarla maruz kalmanın tükürük akışını hızla azalttığını göstermektedir. Işınlanan hayvanlarda, ışınlanmayan hayvanlara kıyasla tükürük çıktısında 10 katlık bir azalma görülmektedir.Bu teknik bir kez kavrandığında, doğru şekilde uygulandığı takdirde birkaç dakika içinde tamamlanabilir. Bu prosedür uygulanırken, kanülün tükürük bezi boşaltım kanalına engelsiz bir şekilde girmesini sağlamanın önemli olduğunu unutmamak gerekir. Geliştirilmesinin ardından bu teknik, tükürük bezi bozuklukları alanındaki araştırmacıların, radyasyona bağlı ve otoimmün tükürük bezi rahatsızlıklarına yönelik tedavileri keşfetmelerine ön ayak olmuştur.Bu videoyu izledikten sonra, sıçan submandibüler bezinde retroduktal kurulumun nasıl gerçekleştirileceği ve radyasyon toksisitesini azaltmanın terapötik etkinliğini değerlendirmek için bezlerin lokal olarak nasıl ışınlanacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. Gen ve protein terapötikleriyle çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve bu prosedürü gerçekleştirirken iğne batmalarından kaçınmak ve biyolojik ajanların ciltle temasını en aza indirmek gibi önlemlerin her zaman alınması gerektiğini unutmayın.

retroductal-submandibular-gland-instillation-localized-fractionated

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Wharton kanalı üzerinden fare submandibular tükürük bezi kanülasyonu için bir protokol açıklanmıştır. Bu deneme için, tripan mavi çözümü, bu tekniği etkin bir şekilde hedeflenen bezine infüzyonları dağıtımını nasıl göstermek için, bu yeni yaklaşımın güvenilirliğini ve tükürük bezlerinin rejenerasyonu için potansiyel bir klinik ilaç / hücre tedavisi olarak önermek için bir boyacı olarak kullanılır.

Wharton Kanalı üzerinden Fare Submandibular Tükürük Bezi kanülasyonu

Botulinum toksini, sialore tedavisi için tükürük bezlerine enjekte edilir. Hem parotis hem de submandibular bezlere ultrason eşliğinde botulinum toksin enjeksiyonu, sürekli bir etkinlik ve ciddi yan etkilerin olmadığını göstermektedir.

Botulinum Toksin-A Enjeksiyonları Ultrason eşliğinde: Sialore Tedavisi A Yöntemi

Tükürük bezi hypofunction otoimmün hastalığı ve radyasyon terapisi sık bir sonucudur. Bu hastalıkların fare modellerinde Tükürük bezi ile tekrarlanabilir değerlendirilmesi teknik bir sorundur. Burada, tükürük üretim farelerde doğru ve tekrarlanabilir ölçüm için basit bir yöntem açıklanmıştır.

Tükürük bezi işlevi farelerde ölçülmesi için bir yöntem

Biz cerrahi olarak ortaya çıkarmak ve fare submandibular Tükürük bezi dik intravital mikroskobu kullanılarak intravital görüntüleme için stabilize etmek için bir protokol tanımlamak. Bu iletişim kuralı diğer ekzokrin bezleri için baş ve boyun bölgesinin fareler ve diğer küçük kemirgen kolayca uyarlanabilir.

Dik Intravital mikroskopi için fare Submandibular Tükürük bezi hazırlanması

Anlayış Tükürük bezi Biyoloji ve roman therapeutics gelişimi için yerel ilaç dağıtım submandibular bezleri için ilgilendirir. Biz teslim doğruluk ve deneysel tekrarlanabilirlik artırmak için tasarlanmış bir güncel ve ayrıntılı retroductal enjeksiyon Protokolü mevcut. Burada sunulan polimer nano tanecikleri teslimini uygulamasıdır.

Fare Submandibular bezi Retroductal nanopartikül enjeksiyon

Biz tükürük toplama, fare trakeostomi ve üç büyük tükürük bezleri yalıtımı da dahil olmak üzere performans detaylı bir yaklaşım sunuyoruz.

Fare tükürük işlevsel değerlendirme Pilokarpin stimülasyon aşağıdaki yolu ile radyasyon şeker

Morfoloji ve tükürük bezlerinin fonksiyonel belirteçleri görselleştirmek için üç boyutlu organotypic kültürler kullanarak radyasyon aşağıdaki doku hasarı mekanizmaları yeni anlayış sağlayabilir. Burada açıklanan bölüm, kültür, ışınlama, leke ve görüntü 50 – 90 μm kalınlığında tükürük bezi bölümleri önce ve iyonlaştırıcı radyasyon maruz aşağıdaki bir protokoldür.

Submandibular ve parotis tükürük bezlerinden Organotipik kültürlerin radyasyon tedavisi anahtar In vivo özellikleri

Tükürük bezleri, özellikle gen transferi ile aşılama alanında gen tedavisi için doku hedef bölgesi olarak önerilmiştir. Retrograd parotis infüzyonu kullanarak insan olmayan bir primat modelinde gen iletimi gösteriyoruz.

Vektörlü Gen Teslimatı için İnsan Olmayan Bir Primatta Stensen Kanalı aracılığıyla Retrograd Parotid Bezi İnfüzyonu

İmmünofloresan görüntüleme, karmaşık, zamana bağlı biyolojik süreçleri zaman içinde tek bir anlık görüntüde gözlemleme yeteneği ile sınırlıdır. Bu çalışma, hassas kesilmiş fare submandibular bez dilimleri üzerinde yürütülen canlı görüntüleme yaklaşımını özetlemektedir. Bu yaklaşım, homeostaz ve rejenerasyon ve onarım süreçleri sırasında hücre-hücre etkileşimlerinin gerçek zamanlı olarak gözlemlenmesine izin verir.

Tükürük bezindeki hücre-hücre etkileşimlerinin ex vivo canlı hücre görüntüleme ile sorgulanması

Bu protokol, labial tükürük bezi biyopsisinde dudak fiksasyon cihazının kullanım yöntemini ve bunun avantajlarını açıklar.

Sjögren hastalığı için labial tükürük bezi biyopsisini kolaylaştıran bir dudak fiksasyon cihazı

Keşfedin sıçan submandibular bezlerine retroduktal ilaç uygulama yöntemini; radyasyon sonrası tükürük bezi disfonksiyonunu tedavi etmek için yerel uygulama sağlar. Bu teknik hedef doku dışı yan etkileri azaltarak terapötik etkinliği artırır.

Tükürük hipofonksiyonunun bir Sıçan Modelinde Retroductal Submandibuler Bezi damlatma ve yerelleştirilmiş fraksiyonlara Işınlama (Video) | JoVE Journal

Tükürük hipofonksiyonunun bir Sıçan Modelinde Retroductal Submandibuler Bezi damlatma ve yerelleştirilmiş fraksiyonlara Işınlama

Daha fazla video keşfet