Name: Fare Ultrasonik seslenmelere kayıt Sosyal İletişim değerlendirin (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-06-05T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 28 s
Description: Öğrenin fare ultrasonik seslenmelerini kaydetme ve analiz etme yöntemini, sosyal iletişim ve nöropsikiyatrik bozukluklardaki genetik etkileri araştırmak için. Bu protokol, mouseTube veritabanıyla veri paylaşımını kolaylaştırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Fondation de France tarafından; ANR FLEXNEURIM [ANR09BLAN034003] tarafından; ANR [ANR- 08-MNPS-037-01-SynGen] tarafından; Neuron-ERANET (EUHF-AUTISM) tarafından; Fondation Orange tarafından; Fondation FondaMentale tarafından; Fondation de France tarafından; Fondation Bettencourt-Schueller tarafından desteklenmiştir. Bu makaleye yol açan araştırma, kaynaklarını Avrupa Birliği'nin Yedinci Çerçeve Programı'ndan (FP7/2007-2013) sağlanan mali katkı ve EFPIA şirketlerinin ayni katkısından oluşan 115300 sayılı hibe sözleşmesi kapsamındaki Yenilikçi Tıp Girişimi Ortak Girişimi'nden de destek almıştır. Julie Lévi-Strauss'a el yazması hakkındaki yararlı yorumları için ve yorumları el yazmasını gözle görülür şekilde geliştiren altı isimsiz eleştirmene teşekkür ederiz.

<ol><li>American Psychiatric Association. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Diagnostic+and+Statistical+Manual+of+Mental+Disorders%2C%0A++Fifth+Edition+%28DSM-V%29%22">Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders,
 Fifth Edition (DSM-V)</a>. , (2013).</li>
<li>Ey, E., Leblond, C. S., Bourgeron, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+Profiles+of+Mouse+Models+for+Autism+Spectrum+Disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Autism+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral Profiles of Mouse Models for Autism Spectrum Disorders.</a> Autism Res. 4 (1), 5-16 (2011).</li>
<li>Bourgeron, T., Jamain, S., Granon, S. Animal Models of Autism - Proposed Behavioral Paradigms and Biological Studies. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBourgeron%2C+T+%22Contemporary+Clinical+Neuroscience%3A+Transgenic+and+Knockout+Models+of+Neuropsychiatric+Disorders%22">Contemporary Clinical Neuroscience: Transgenic and Knockout Models of Neuropsychiatric Disorders</a>. , 151-174 (2006).</li>
<li>Scattoni, M. L., Crawley, J., Ricceri, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizations%3A+A+tool+for+behavioural+phenotyping+of+mouse+models+of+neurodevelopmental+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizations: A tool for behavioural phenotyping of mouse models of neurodevelopmental disorders.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 33 (4), 508-515 (2009).</li>
<li>Portfors, C. V., Perkel, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ultrasonic+vocalizations+in+mouse+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Cur.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">The role of ultrasonic vocalizations in mouse communication.</a> Cur. Opin. Neurobiol. 28, 115-120 (2014).</li>
<li>Arriaga, G., Zhou, E. P., Jarvis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+mice%2C+birds%2C+and+men%3A+the+mouse+ultrasonic+song+system+has+some+features+similar+to+humans+and+song-learning+birds%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Of mice, birds, and men: the mouse ultrasonic song system has some features similar to humans and song-learning birds.</a> PLOS ONE. 7, e46610(2012).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Schreiweis, C., Minge, C., Pääbo, S., Fischer, J., Enard, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+humanized+version+of+Foxp2+does+not+affect+ultrasonic+vocalization+in+adult+mice%3A+Ultrasonic+vocalization+of+%26%2334%3Bhumanized%26%2334%3B+FoxP2+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">A humanized version of Foxp2 does not affect ultrasonic vocalization in adult mice: Ultrasonic vocalization of &#34;humanized&#34; FoxP2 mice.</a> Genes Brain Behav. , (2015).</li>
<li>Portfors, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Types+and+functions+of+ultrasonic+vocalizations+in+laboratory+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Assoc.+Lab.+Anim.+Sci%22%5BJournal%5D)">Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice.</a> J. Am. Assoc. Lab. Anim. Sci. 46, 28-34 (2007).</li>
<li>Panksepp, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affiliative+Behavior%2C+Ultrasonic+Communication+and+Social+Reward+Are+Influenced+by+Genetic+Variation+in+Adolescent+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Affiliative Behavior, Ultrasonic Communication and Social Reward Are Influenced by Genetic Variation in Adolescent Mice.</a> PLOS ONE. 2, (2007).</li>
<li>Zippelius, H. -M., Schleidt, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultraschall-Laute+bei+jungen+M%C3%A4usen%5BTitle%5D)+AND+%22Naturwissenschaften%22%5BJournal%5D)">Ultraschall-Laute bei jungen Mäusen.</a> Naturwissenschaften. 43, 502(1956).</li>
<li>Whitney, G., Coble, J. R., Stockton, M. D., Tilson, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+emissions%3A+do+they+facilitate+courtship+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic emissions: do they facilitate courtship of mice.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 84, 445-452 (1973).</li>
<li>Holy, T. E., Guo, Z. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+songs+of+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Biol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic songs of male mice.</a> PLOS Biol. 3, 2177-2186 (2005).</li>
<li>Maggio, J. C., Whitney, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+vocalizing+by+adult+female+mice+%28Mus+musculus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic vocalizing by adult female mice (Mus musculus).</a> J. Comp. Psychol. 99, 420-436 (1985).</li>
<li>Chabout, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+Male+Mice+Emit+Context-Specific+Ultrasonic+Vocalizations+That+Are+Modulated+by+Prior+Isolation+or+Group+Rearing+Environment%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Adult Male Mice Emit Context-Specific Ultrasonic Vocalizations That Are Modulated by Prior Isolation or Group Rearing Environment.</a> PLOS ONE. 7 (1), e29401(2012).</li>
<li>Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+respond+to+male+ultrasonic+%22songs%22+with+approach+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Lett%22%5BJournal%5D)">Female mice respond to male ultrasonic "songs" with approach behaviour.</a> Biol. Lett. 5, 589-592 (2009).</li>
<li>Wöhr, M., Moles, A., Schwarting, R. K. W., D'Amato, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+social+exploratory+activation+in+male+-opioid+receptor+KO+mice+in+response+to+playback+of+female+ultrasonic+vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22Soc.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Lack of social exploratory activation in male -opioid receptor KO mice in response to playback of female ultrasonic vocalizations.</a> Soc. Neurosci. 6, 76-87 (2011).</li>
<li>Granon, S., Faure, P., Changeux, J. -P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Executive+and+social+behaviors+under+nicotinic+receptor+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Nat.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Executive and social behaviors under nicotinic receptor regulation.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. 100 (16), 9596-9601 (2003).</li>
<li>Schmeisser, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autistic-like+behaviours+and+hyperactivity+in+mice+lacking+ProSAP1%2FShank2%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Autistic-like behaviours and hyperactivity in mice lacking ProSAP1/Shank2.</a> Nature. 486 (7402), 256-260 (2012).</li>
<li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Absence+of+Deficits+in+Social+Behaviors+and+Ultrasonic+Vocalizations+in+Later+Generations+of+Mice+Lacking+Neuroligin4%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Absence of Deficits in Social Behaviors and Ultrasonic Vocalizations in Later Generations of Mice Lacking Neuroligin4.</a> Genes Brain Behav. 11, 928-941 (2012).</li>
<li>Chadman, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimal+Aberrant+Behavioral+Phenotypes+of+Neuroligin-3+R451C+Knockin+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Autism+Res%22%5BJournal%5D)">Minimal Aberrant Behavioral Phenotypes of Neuroligin-3 R451C Knockin Mice.</a> Autism Res. 1, 147-158 (2008).</li>
<li>Scattoni, M. L., Gandhy, S. U., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+Repertoire+of+Vocalizations+in+the+BTBR+T+plus+tf%2FJ+Mouse+Model+of+Autism%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Unusual Repertoire of Vocalizations in the BTBR T plus tf/J Mouse Model of Autism.</a> PLOS ONE. 3, (2008).</li>
<li>De Chaumont, F., Coura, R. D. -S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computerized+video+analysis+of+social+interactions+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Methods%22%5BJournal%5D)">Computerized video analysis of social interactions in mice.</a> Nat. Methods. 9, 410-417 (2012).</li>
<li>Leblond, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+and+Functional+Analyses+of+SHANK2+Mutations+Suggest+a+Multiple+Hit+Model+of+Autism+Spectrum+Disorders%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Genet%22%5BJournal%5D)">Genetic and Functional Analyses of SHANK2 Mutations Suggest a Multiple Hit Model of Autism Spectrum Disorders.</a> PLOS Genet. 8 (2), e1002521(2012).</li>
<li>Berkel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutations+in+the+SHANK2+synaptic+scaffolding+gene+in+autism+spectrum+disorder+and+mental+retardation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Genet%22%5BJournal%5D)">Mutations in the SHANK2 synaptic scaffolding gene in autism spectrum disorder and mental retardation.</a> Nat. Genet. 42, 489-491 (2010).</li>
<li>Pinto, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+impact+of+global+rare+copy+number+variation+in+autism+spectrum+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Functional impact of global rare copy number variation in autism spectrum disorders.</a> Nature. 466, 368-372 (2010).</li>
<li>Ey, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+autism+ProSAP1%2FShank2+mouse+model+displays+quantitative+and+structural+abnormalities+in+ultrasonic+vocalisations%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The autism ProSAP1/Shank2 mouse model displays quantitative and structural abnormalities in ultrasonic vocalisations.</a> Behav. Brain Res. 256, 677-689 (2013).</li>
<li>Scattoni, M. L., Ricceri, L., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unusual+repertoire+of+vocalizations+in+adult+BTBR+T+plus+tf%2FJ+mice+during+three+types+of+social+encounters%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Unusual repertoire of vocalizations in adult BTBR T plus tf/J mice during three types of social encounters.</a> Genes Brain Behav. 10, 44-56 (2010).</li>
<li>Zorrilla, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiparous+species+present+problems+%28and+possibilities%29+to+developmentalists%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Multiparous species present problems (and possibilities) to developmentalists.</a> Dev. Psychobiol. 30 (2), 141-150 (1997).</li>
<li>Lazic, S. E., Essioux, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+basic+and+translational+science+by+accounting+for+litter-to-litter+variation+in+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Improving basic and translational science by accounting for litter-to-litter variation in animal models.</a> BMC Neurosci. 14 (1), 37(2013).</li>
<li>Hoffmann, F., Musolf, K., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Freezing+urine+reduces+its+efficacy+for+eliciting+ultrasonic+vocalizations+from+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Freezing urine reduces its efficacy for eliciting ultrasonic vocalizations from male mice.</a> Physiol. Behav. 96, 602-605 (2009).</li>
<li>Neunuebel, J. P., Taylor, A. L., Arthur, B. J., Egnor, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+mice+ultrasonically+interact+with+males+during+courtship+displays%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Female mice ultrasonically interact with males during courtship displays.</a> eLife. 4, (2015).</li>
<li>Burkett, Z. D., Day, N. F., Peñagarikano, O., Geschwind, D. H., White, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VoICE%3A+A+semi-automated+pipeline+for+standardizing+vocal+analysis+across+models%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Rep%22%5BJournal%5D)">VoICE: A semi-automated pipeline for standardizing vocal analysis across models.</a> Sci. Rep. 5, 10237(2015).</li>
<li>Weissgerber, T. L., Milic, N. M., Winham, S. J., Garovic, V. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+Bar+and+Line+Graphs%3A+Time+for+a+New+Data+Presentation+Paradigm%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Biol%22%5BJournal%5D)">Beyond Bar and Line Graphs: Time for a New Data Presentation Paradigm.</a> PLOS Biol. 13 (4), e1002128(2015).</li>
<li>Jamain, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+social+interaction+and+ultrasonic+communication+in+a+mouse+model+of+monogenic+heritable+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Nat.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Reduced social interaction and ultrasonic communication in a mouse model of monogenic heritable autism.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. U. S. A. 105, 1710-1715 (2008).</li>
<li>Won, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autistic-like+social+behaviour+in+Shank2-mutant+mice+improved+by+restoring+NMDA+receptor+function%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Autistic-like social behaviour in Shank2-mutant mice improved by restoring NMDA receptor function.</a> Nature. 486, 261-265 (2012).</li>
<li>Ferhat, A. -T., Le Sourd, A. -M., de Chaumont, F., Olivo-Marin, J. -C., Bourgeron, T., Ey, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+Communication+in+Mice+-+Are+There+Optimal+Cage+Conditions%3F%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+ONE%22%5BJournal%5D)">Social Communication in Mice - Are There Optimal Cage Conditions?</a> PLOS ONE. 10 (3), e0121802(2015).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Burada sunulan protokol laboratuvarda fare ultrasonik seslenmelere toplamak için standardize ve güvenilir yollar sağlar. Bunlar çok kısıtlı durumlar standardizasyon avantajı sunuyoruz. Bu suşlar 18,19,26,27 olan ırkları veya genotipleri karşılaştırma başarı ile kullanılmaktadır. Örnek sonuçlar de görüldüğü gibi, bu yöntemler, Shank2, otizm spektrum bozukluğu ile bağlantılı bir genin mutasyona uğramış farelerde atipik sosyal iletişim tanımlanmasına izin verir. Laboratuarlar farklı bağlamlarda arasında, hatta aralarında fare suşları arasındaki karşılaştırmalar, mouseTube veritabanı üzerinde büyük veri kümelerinin kullanılabilirliği ile tetiklenir. Bu araç çok değişkenli analizler izin vererek fare ultrasonik sesler çıkarma çalışmaları artırmak gerekir. genetik c modelleme çalışmaların çoğunda yapıldığı gibi burada açıklanan protokoller, bir suş içinde farklı genotipleri fareler test etmek için optimize edilmiştirnöropsikiyatrik bozukluklar ontribution. Deneysel olarak mümkün olan en iyi kontrol bilgisi için her bir çalışma tasarımı önerilmektedir. Nitekim, çöp etkileri maskelemek veya yapay genetik etkiler 28,29 şişirmek olabilir. Her genotip için yavru kontroller için tavsiye edilir. Bir çöp içinde mutant ve kontrol fareleri doğru eşleme sağlayacak beri Islahı heterozigot anne nedenle tercih edilmelidir. Bu iki günde kayıtları boyunca bireyleri izlemek için (genotip kör) tüm yavruların işaretleme pençe dövme haklı. Genotiplendirme kuyruk numune alarak, sütten yapılır. P2 yavru izolasyon çağrıları üzerine kayıt yaparken, biz bu operasyon ek manipülasyon ve bir kayıt oturumu zaman çok yakın stres içerdiğinden, yavrular zaten kuyruk örnekleri alarak tavsiye etmem. Burada önerilen protokoller emi açık kimlik izin vermez yetişkinlerde ultrasonik seslenmelere ortaya çıkarmak içinseslerin tter. Biz test hayvanının motivasyonunu manipüle açıklıyor. Nitekim, deney fareleri izole edilir ve yeni köşe ve deney hayvanları eşcinsel etkileşimler sırasında deney kafesine uzun süre alışabilir. kadın-erkek etkileşimleri tanıtıldı kadın izole değildir ve test erkek motivasyon bu cinsel bağlamda yüksek olabilir çünkü kısa süre alıştırır. motivasyon bu manipülasyonlar seslenmelere ve tanıtılan bir yayan Test fare olasılığını maksimize edilmelidir. Cinsel bağlamda erkek ultrasonik seslenmelere kaydetmek için, bir kızgınlık kadın taze (yani, dondurulmuş değil) idrar ile basit pamuklu çubukla da kafeste 30 sokulabilir. Bu yöntem% 100 kesin test erkek ultrasonik seslerin atanmasına olanak verir ancak bu seslerin emisyon gerçek toplumsal bağlam hakkında herhangi bir özel bilgi toplama önler. Bu nedenle, tercih Protocol (serbestçe hareket eden kızışma kadın ile) burada açıklanan. Biz de bir mutant suşu fareleri test ederken her zaman aynı soydan tanıtıldı fareler kullanmak ve vokal farelerin bir çift olarak verileri analiz etmek önerilir. Bir son çalışmada yayıcı 31 lokalize nirengi kullanımını teşvik etmektedir. Bu çalışmada, dişiler de bir erkek ile karşılaştığında sırasında ultrasonik seslenmelere yayarlar bulundu. Bu da kayıt seansından önce en az iki hafta içinde izole edilmiştir gerçeği ile açıklanabilir. video kayıtları düzgün senkronize edilir, bu çalışmada önerilen nirengi kullanımının genelleştirilmesi yine çoğu durumda seslerin yayıcı belirlenmesini izin vermelidir. gelişimi sırasında kaydedilen yavrular izolasyon aramalar yatak arka plan gürültü ile rahatsız değil. Genellikle otomatik analiz ana değişkenleri ayıklamak için çok iyi çalışıyor. Buna karşılık, yetişkinlerin kaydedilen seslerin d vardıryatak hareket hayvanlardan arka plan gürültü isturbed. Otomatik analiz başarısız olabilir, ve bu nedenle de manuel analizi kullanılmalıdır. Bununla birlikte, deney kafesine yatak ekleme (fareler sevmiyorum) çıplak toprak daha hayvanlar için daha az stresli olan koşulları sağlamak gerekir. Toplumda daha fazla çaba, çeşitli koşullar altında bile bu ima arka plan gürültülerini ultrasonik seslerin otomatik algılama geliştirmeye yoğunlaşmıştır. Örneğin, ses yazılımı manuel arka plan gürültüsü 32 yokluğu nedeniyle seçilmiştir olan seslenmelere analiz etmeyi sağlar. Bu yazılım, akustik değişkenlerin çıkarma otomatik ama ilk manuel seçim ihtiyacı vardır. Bireyler arası değişkenliği farelerin ses davranışı çok önemli olduğu unutulmamalıdır. Örneğin, bir kızgınlık kadın varlığında yetişkin erkeklerin çağrı oranı çok (Şekil 1) dağıtılır. Biz suDeneysel bağlamda ilgili değişkenliği sınırlamak için zaten ultrasonik seslenmelere ortaya çıkarmak için bu standart protokolleri ggest. Yine de, biz en önemlisi küçük boyutu 33 örneklerinde bireysel noktaları veri ortalama ve SEM sadece sunulmasının önemini işaret etmek istiyorum, ama istiyorum. temsili veri toplamak için her grup / genotip en az 12 bireyleri kayıt - eğer gerekli değildir - o da çok uygundur. Birçok durumda, bireyler arası değişkenlik (genellikle olamaz) gizli olmamalı ve bu bireyleri çalışılan genetik mutasyonu taşıyan ancak herhangi bir atipik fenotip görüntülenmiyor tanımlamak için yüksek öneme sahip olabilir. Bu tür bireyler, genetik bozuklukların tedavileri için yeni yollar açabilir tazminatlar, ilgili ipuçları sağlayabilir. nöropsikiyatrik bozukluklar, vokal davranış ve sosyal kişiler için fare modellerinin en davranışsal karakterizasyonları düşünün vardıred dışında (örneğin, 19,27,34,35). Son analiz yöntemleri artık (örneğin MiceProfiler kullanarak) bir etkileşimin 36, yanı sıra ses kayıtları verilerle bu analizi birleştirmek imkanı sırasında sosyal etkinlikler ve olaylar dizilerin yarı otomatik detaylı karakterizasyonu sağlar. Bu yöntemin en önemli avantajı daha doğrusu toplumsal iletişimin yönlerinin etkilenen olduğunu belirlemek için, ASD fare modellerinde sosyal iletişimin kapsamlı bir görünümünü sağlamaktır. Mevcut protokol senkronizasyon hala manuel ama bu ses kayıt yazılımı aracılığıyla video kayıt tetikleyerek geliştirilebilir. analizler Bu tip nöropsikiyatrik bozuklukların fare modellerinde sosyal iletişim açıklarının daha kapsamlı bir görünüm sağlamak için standart haline gelmelidir. Buna ek olarak, şu ana kadar, vokal sinyaller çoğunlukla yayıcı tarafından analiz edilir (yani, testler vo emisyonunu lehine inşa edilirTest fare tarafından cal sinyaller, mevcut protokollerde olduğu gibi). Odak şimdi de daha iyi bu akustik sinyaller fonksiyonlarını belirlemek için, bu sinyallerin alıcı üzerinde ayarlanması gerekir. Bu, ya da yeni protokoller kurarak oynatma deneyleri 16 kullanılarak, aynı zamanda (örneğin MiceProfiler kullanarak) erişkinlerde mevcut protokollerde yeni köşe farelerin davranışlarını 36 değerlendirilerek yapılmalıdır. Nitekim, mevcut protokoller farelerde seslendirme emisyon tam etolojik koşullarını yansıtmak olmayabilir çok kısıtlı durumlar sağlar. ultrasonik seslerin spontan emisyon farelerin spontan vokal davranışı üzerinde daha fazla ışık tutacak sürekli ses ve video kayıtları kullanılarak daha iyi karakterize edilmesi gerekecektir.

Nöropsikiyatrik bozukluğu olan hastalar genellikle sosyal iletişim açıkları görüntüler (örneğin, otizm spektrum bozuklukları, şizofreni, ya da Alzheimer hastalığı olan hastalar) 1. Genetiği fareler daha sık olan mühendislik bu hastalıkların 2 genetik nedenlerini modellemek için kullanılır. Bu fare modellerinde sosyal iletişim okuyan atipik sosyal işlev bozukluklarının yol açan genetik mutasyon mekanizmalarının anlaşılması ve yeni tedaviler test etmek için yüksek ilgi çekicidir. fareler sosyal hayvanlardır ve kokusal, dokunsal, görsel ve akustik sinyalleri kullanarak birbirleri ile iletişim kurduğundan, sosyal iletişimi değerlendirmek için uygun modellerdir. Fare ultrasonik sesler çıkarma şimdi, şu anda en son çalışmalar Argu bile, vokal iletişim açıkları 3,4 (ama yine de 5,6 tartışılan bu türün vokal öğrenme varlığının genetik temellerini modellemek için bir vekil olarak kullanılırvokal öğrenme 7) yokluğunda e. Laboratuvar fareleri (referans gözden 8) eşcinsel sosyal etkileşimlerde, kadın-erkek sosyo-seksüel etkileşimlerde, anne-bebek ilişkileri ultrasonik seslenmelere yayan bulunmuştur ve çocuk-çocuk sosyal etkileşimler 9. Baraj ve littermates 10 izole fare yavrular yaşamın ilk iki haftasında izolasyon çağrıları yayarlar. Erkekler ne zaman 11,12 (onu veya idrar ipuçları) bir kızışma kadın varlığında ultrasonik seslenmelere yayarlar. Aynı cinsten 13,14 bilinmeyen bir conspecific ile etkileşim halindeyken erkek ve dişileri ultrasonik seslendirme yayarlar. organizasyon ve bu seslerin fonksiyonları tamamen açık değildir ve daha fazla araştırma gerekiyor. Fonksiyonel açıdan geçerli bilgi yavru izolasyon aramaları, yetişkin erkek vocalizat doğru yetişkin kadın yakınlığı kolaylaştırılması işitme annelerinde alma davranışı ortaya çıkarma ile sınırlıdıriyonları 15 ve yetişkin dişi seslenmelere 16 işitme yetişkin erkeklerin artan keşif davranışı. nöropsikiyatrik bozuklukların fare modellerinde vokal iletişim anormallikleri karakterize deneysel koşullar önemli bir katkı ekarte etmek için standardize koşullarda yapılmalıdır. eşzamanlı sosyal etkileşimler ve çeşitli genetik modeller nörobiyolojik çalışmaların değerlendirilmesi ile birlikte bu tür nitelendirmeler, fare ultrasonik iletişimin farklı yönlerine genetik katkısı bilgimizi geliştirmek gerekir. Bir uzun vadede, insanlarda sosyal iletişimin bazı nörobiyolojik temeller üzerine daha fazla ışık vermelidir. Biz şu anda güvenilir gelişimi sırasında ve laboratuvarda hem erkek hem de dişi fareler için yetişkinlikte ultrasonik seslenmelere ortaya çıkarmak için basit protokolleri sağlamayı amaçlıyor. Bu tür protokoller daha güvenilir Ultr karşılaştırmak için kayıtların standardizasyon kolaylaştırmak gerekirsuşları ve laboratuarlar arasındaki Asonic seslendirme emisyonları. Ayrıca fare ultrasonik sesler çıkarma kayıtları ile önceden deneyime sahip laboratuvarlarda tür kayıtların kurulmasını kolaylaştıracaktır. Biz de sosyal bozukluklar yanı sıra ultrasonik seslerin emisyon bağlamına önemli bilgileri elde etmek için, erişkin farelerde sosyal etkileşimler sırasında eş zamanlı olarak toplanan detaylı davranışsal verilerle ultrasonik sesler çıkarma verileri birleştirmek için geçerli olasılığını vurgulayın. Bu tür analizler organizasyon ve fare ultrasonik seslerin fonksiyonları üzerinde yeni bir ışık tutacaktır. Son olarak, biz de mouseTube veritabanı (http://mousetube.pasteur.fr) üzerinde tüm bilim camiası ile ultrasonik seslendirme kayıtları paylaşmak imkanı duyururlar. ses kayıt verilerine açık erişim bilim adamları, diğer labo kaydedilen ultrasonik sesler çıkarma ile kendi verilerini karşılaştırmak için izin vererek fare ultrasonik iletişim bilgilerini artırmak gerekir(Benzer veya farklı suşlar / protokolleri ile) ratories ve / veya farklı koşullar altında kaydedilen dosyaları ile analiz yöntemlerinin meydan.

<table><tbody><tr><td>İğneler 0,3 mm x 13 mm [30&nbsp; G 1/2"]</td><td>BD Microlance</td><td>304000-yeşil</td><td></td></tr> <tr><td>dövme macunu</td><td>Ketchum Manufacturing Inc., Ottawa, Kanada</td><td>329AA-termometre</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Fisherbrand, Waltham, ABD</td><td>4126 (W255NA)</td><td>-</td></tr><tr><td>kendi kendine yapılan ses geçirmez oda (yavrular)</td><td>Institut Pasteur,</td> <td>Paris-akustik</td> <td>köpük + pleksiglas; iç boyutlar (G x Y x D): 32 cm x 33 cm x 32 cm</td></tr><tr><td>küçük yüzeyli termister + tek problu termokupl</td><td>Harvard Apparatus</td><td>599814 + 601956</td><td></td></tr> <tr><td>kokusuz kalem</td><td>Örneğin: Su ile yapılan Giotto</td><td></td> <td>mürekkebi, yıkanabilir: bu kalemler bebekler için tasarlanmıştır</td></tr><tr><td>Mutlak etanol (% 100)</td> <td>Sigma Aldrich, &nbsp; Saint-Quentin Fallavier, Fransa</td><td>24103</td><td>seyreltilmiş 1/10</td></tr><tr><td>Kondenser ultrason mikrofonu Avisoft-Bioacoustics CM16/CMPA</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Almanya</td><td>#40011</td><td>Avisoft şirketi tarafından sağlanan uzatma kablolarıyla donatılmıştır</td></tr><tr><td>Ultrasound Gate 416H</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Almanya</td><td>#34163</td><td>ses kartı</td></tr><tr><td>Avisoft Recorder USGH</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Almanya</td><td>#10301; Windows</td><td>Vista, 7 ve 8 için</td>#10302 kayıt yazılımı</tr><tr><td>Avisoft SASLab Pro</td><td>Avisoft Bioacoustics, Berlin, Almanya</td><td>#10101, 10111; #10102, 10112; &nbsp;</td><td>Windows 10, 8.1, 8, 7 veya Vista, Boot Camp, Parallels veya benzeri sanallaştırma yazılımı çalıştıran Intel tabanlı Apple Macintosh dahil.</td></tr><tr><td>Boot Camp çalıştıran dizüstü bilgisayar veya Apple Macintosh</td> <td>-</td><td></td> <td>Windows 10, 8.1, 8, 7 veya Vista çalıştıran; Apple Macintosh için Boot Camp, bellek kısıtlamaları nedeniyle Parallels gibi sanallaştırma yazılımlarına tercih edilir</td></tr><tr><td>Plastik alıcı (PUP kayıtları)</td><td>Lock & Kilit, Chatswood, ABD</td><td>HPL932D</td><td>Kilit & Kilit İstiflenebilir Hava Geçirmez Konteyner Yuvarlak 700&nbsp; Ml; kapaksız kullanım; Boyutlar: 9&nbsp; cm çap, 10 cm yükseklik</td></tr><tr><td>PBS 1x (pH = 7.4)</td><td>Gibco (Yaşam Teknolojileri)</td><td>10010-023-slides</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Menzel-Gl&auml; ser, Thermo Scientific</td><td>J1800AMNZ</td><td>Superfrost Plus</td></tr><tr><td>Mayıs-Gr&uuml; nwald çözeltisi 500 ml</td><td>RAL R&eacute; actifs, Martillac, Fransa</td><td>320070-0500-Giemsa</td><td></td></tr> <tr><td>R 500 ml</td><td>RAL R&eacute; actifs, Martillac, Fransa</td><td>720-1107</td> fosfat <td>tampon çözeltisinde 1/20 seyreltilmiş</td></tr><tr><td>fosfat tampon çözeltisi (kendi kendine yapılan)</td> <td>-</td><td></td> <td>pH = 7, 0.1 M: 39 ml NaH < alt > 2 < / alt >PO < alt > 4< / alt> 0.2 M + 61 ml Na < alt > 2 < / alt >HPO< alt >4< / alt> 0.2 M + 100 nbsp; ml H2O (son hacim: 200&nbsp; ml)</td></tr><tr><td>test kafesi</td><td>Institut Pasteur,</td> <td>Paris-50</td><td>&nbsp; x&nbsp; 25&nbşk; cm, 30&nbsp; cm yükseklik; Pleksiglas</td></tr><tr><td>kendi kendine yapılan ses geçirmez oda (yetişkin kayıtları)</td><td>Institut Pasteur,</td> <td>Paris-akustik</td> <td>köpük + PVC; iç boyutlar (G x Y x D): 66 cm x 90 cm x 46 cm</td></tr><tr><td>video kamera</td><td>Noldus Bilgi Teknolojileri, Wageningen, Hollanda'nın</td><td></td> <td>yüksek çözünürlüklü CamTech Süper Yüksek Çözünürlüklü video kamerası; 25 fps&nbsp;</td></tr><tr><td>EthoVision XT</td><td>Noldus Information Technology, Wageningen, Hollanda</td><td>http://www.noldus.com/animal-behavior-research/products/ethovision-xt</td><td>video toplama yazılımı</td></tr><tr><td>ICY platformundan Mice Profiler Tracker eklentisi</td><td>Bio Image Analysis, Institut Pasteur, Paris</td><td>http://icy.bioimageanalysis.org/plugin/Mice_Profiler_Tracker</td><td>sosyal etkileşimler sırasındaki davranışsal olayları analiz etmek için izleme yazılımı</td></tr></tbody></table>

fare ultrasonik seslenmelere kayıt sosyal İletişim değerlendirin

Recording Mouse Ultrasonic Vocalizations to Evaluate Social Communication

Fareler, gelişim boyunca ve yetişkinlikte farklı bağlamlarda ultrasonik seslendirmeler yayarlar. Bu vokal sinyaller şu anda vokal iletişim eksikliklerinin genetik temellerini modellemek için vekil olarak kullanılmaktadır. Otizm spektrum bozuklukları gibi nöropsikiyatrik bozukluklarla ilişkili genlerde mutasyon taşıyan fare modellerinin vokal davranışlarının karakterize edilmesi, sosyal iletişim eksikliklerine yol açan mekanizmaların anlaşılmasına yardımcı olacaktır. Burada, yavrularda ve yetişkin farelerde ultrasonik seslendirmeleri güvenilir bir şekilde ortaya çıkarmak için protokoller sunuyoruz. Bu standardizasyon, deneysel ortamlar nedeniyle çalışmalar arası değişkenliği azaltmaya yardımcı olacaktır. Yavru izolasyon çağrıları, barajdan ve yavrulardan izole edilen bireysel yavrulardan gelişim boyunca kaydedilir. Yetişkinlikte, seslendirmeler, sosyal olarak motive olmuş erkekleri veya kadınları bilinmeyen bir aynı cinsiyetten türdeşliğe maruz bırakarak aynı cinsiyetten etkileşimler sırasında (cinsel bir bileşen olmadan) kaydedilir. Ayrıca, kızgın bir kadına maruz kalan yetişkin erkeklerin seslendirmelerini kaydetmek için bir protokol de sağlıyoruz. Bu bağlamda, etkileşimde cinsel bir bileşen vardır. Bu protokoller, laboratuvar farelerinde büyük miktarda ultrasonik seslendirme ortaya çıkarmak için oluşturulmuştur. Bununla birlikte, farelerin vokal davranışındaki, minimum sayıda bireyin (her durumda en az 12) kaydedilmesiyle dikkate alınması gereken önemli bireyler arası değişkenliğe dikkat çekiyoruz. Ultrasonik seslendirmelerin bu kayıtları, çağrı oranını, ses repertuarını ve çağrıların akustik yapısını değerlendirmek için kullanılır. Veriler, farelerde sosyal iletişim hakkında daha eksiksiz bir görünüm sağlamak için senkron video kayıtlarının analizi ile birleştirilir. Bu protokoller, otizm spektrum bozuklukları ile ilişkili bir gen olan ProSAP1 / Shank2'den yoksun farelerde vokal iletişim eksikliklerini karakterize etmek için kullanılır. Bu tür verilerin değişimini desteklemek için geliştirilen mouseTube veritabanında daha fazla ultrasonik seslendirme kaydı da bulunabilir.

Mevcut protokolleri ile, biz ProSAP1 / Shank2, otizm spektrum bozukluğu (ASD) 23-25 ​​ile bağlantılı bir genin eksik farelerin vokal davranışları karakterize edilmiştir. ASD sosyal iletişimdeki açıkları ve kalıplaşmış davranışlar 1 ile karakterizedir. Bizim Shank2 - / - fareler hiperaktivite, artan kaygı ve atipik sesli iletişimi 18,26 sergiledi. . Fareler vahşi tip litermatlarında tipik ters U-şekilli bir eğri ile karşılaştırıldığında yavru yalıtım aramaların emisyon oranı, tipik olmayan bir gelişim profili ortaya Shank2 - - / - Gerçekten, Shank2 not / - fareler artmış arama oranı gösterildi ve P4 kendi yabani tip littermates (Şekil 2) ile karşılaştırıldığında P6 çağrı oranı azalmıştır. / - - Compariso içinde kadın Biz de bir Shank2 içeren kadın etkileşimlerde bir azalma çağrı oranı gözlenenn, bir vahşi tip yavru (Şekil 2) ilgili etkileşimler ile. Biz 5 farklı çağrı kategorilerinin repertuar incelenmiştir. Ve yetişkinler (Şekil 3) (burada örnek P2, P6 ve P10 için) yavrular arasında farklı olduğu ortaya çıktı. Genotip ilgili farklılıklar çoğunlukla yetişkinlikte önemli bulunmuştur. / - - Yetişkin Shank2 içeren sosyal etkileşimler sırasında C57BL / 6N dişi ile erkek ya da kadın, daha kısa çağrılar ve yapılandırılmamış aramalar onların yabani tip yavruları (Şekil 3D ve E) içeren etkileşimler ile karşılaştırıldığında kaydedildi. Shank2 + / + kadın (Şekil 3E) içeren etkileşimler ile karşılaştırıldığında kadın - / - daha az karmaşık aramalar ve frekans aramaları da yetişkin Shank2 içeren C57BL / 6N dişi ile etkileşim sırasında kaydedildi atlar. Son olarak, biz de el akustik değişkenler ölçülür. anlamlı genotip ilgili bir farklılık du yoktuhalka geliştirme. Buna karşılık, yetişkin Shank2 içeren etkileşimler sırasında kaydedilen çağrıların süresi - / - kadın kendi yabani tip yavruları (Şekil 4A) içeren etkileşimler sırasında kaydedilen daha kısaydı. Biz de ultrasonik seslerin tepe frekans önemli genotip ilgili fark 26 olmadan yavru gelişimi sırasında arttığını vurguladı. Shank2 ilgili etkileşimler sırasında - / - Bir C57BL / 6N dişi ile erkek veya dişi, ultrasonik vokalizasyon yabani tip yavruları (Şekil 4B) içeren etkileşimler sırasında kaydedilen aramalar ile karşılaştırıldığında daha düşük bir pik yaygındır. Buna ek olarak, mevcut protokol aynı zamanda MiceProfiler (ICY yazılımı, Institut Geçmişten çıkarılan davranışsal verilere ses kayıtları verileri birleştirerek ultrasonik seslerin emisyon bağlamını incelemek için izineur, Paris). hayvanlar temas ve yeni gelenlerin ano-genital bölgesini koklama daha spesifik işgalci içinde bulunduğumuz zaman Örneğin, kadın-erkek etkileşimleri, en ultrasonik sesler çıkarma yayılan edildi ya da en azından oturan yeni umut vaat arkasında olmak. Yolcu yeni comer (Şekil 5, üst panel) yaklaştı Fareler birçok ultrasonik seslenmelere yayılan. - / - Farelerde oturan bir yabani tip fare iken daha (yeni-gelenin ano-genital bölgeyi koklama, örneğin) yeni-comer ile fiziksel temas vardı yolcu Shank2 daha az seslerin kaydedildi. Bir vahşi tip fare iken daha fare - / - yeni-comer arkasında oturan bir Shank2 iken daha az seslerin tetiklenir bulundu. Daha seslerin de yeni köşe yolcu fare görme alanında iken kaydedildi edildi ve daha çok mutantlar daha vahşi türleri (Şekil 5, alt panel). keep-together.within sayfa = &quot;1&quot;&gt;: fo s = &quot;jove_content&quot; <img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/53871/53871fig2.jpg" /> Şekil 2:. Gelişimi sırasında ve yetişkin erkek ve kadın Shank2 ultrasonik seslerin Emisyon oranı - / - fareler ve yabani tip littermates yavruların oranı Çağrı (her iki günde P2 P12, n = 18-19 Shank2 + / +, n = 15-16 Shank2 - / - erkek estrus dişi etkileşimleri sırasında) ve yetişkinler (n = 15 Shank2 + / +, n = 16 Shank2 - / -) ve dişi-erkek etkileşimler (n = 15 Shank2 + / +, n = 13 Shank2 - / -), vahşi tip farelerden (sol panel) ve Shank2 olarak - / - fareler (sağ panel). Veriler olarak ortalama sunulmaktadır +/- SEM ve bireysel noktaları (Wilcoxon testleri olmayan eşleştirilmiş: * p &lt;0.05, ** p &lt;0.01, *** p &lt;0.001).ge.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız. <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/53871/53871fig3.jpg" /> Şekil 3:. Shank2 bölgesinin Ses repertuarı - / - P2 yavrular tarafından yayılan beş farklı çağrı türleri fare ve vahşi tipli litermatlarının Oranları (A, n = 20 Shank2 + / +, n = 18 Shank2 - / -), P6 yavrular (B; n = 19 Shank2 + / +, n = 18 Shank2 - / -), P10 yavrular (° C; n = 20 Shank2 + / +, n = 18 Shank2 - / -), bir kızışma dişi yetişkin erkek (D n = 16 Shank2 + / +, n = 16 Shank2 - / - bir dişi (E) ve yetişkin dişi n = 15 Shank2 + / +, n = 13 Shank2 </em&gt; - / -), vahşi tip farelerden (sol panel) ve Shank2 olarak - / - fareler (sağ paneller). Veriler olarak ortalama sunulmaktadır +/- SEM ve bireysel noktaları (ki-kare testleri: * p &lt;0.05, ** p &lt;0.01, *** p &lt;0.001). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/53871/53871fig4.jpg" /> Şekil 4:. Shank2 ultrasonik vokalizasyon elde akustik değişkenleri - / - bütün arama türleri fare ve vahşi tipli litermatlarının (a) etki süresi (n = P2 yavruların 20 Shank2 + / +, n = 18 Shank2 yayılan eleştirilmiştir - / - ), P6 yavrular (n = 19 Shank2 + / +, n = 18 Shank2 - / -), P10 yavrular (n = 20 Shank2 + / + </syukarı&gt; n = 18 Shank2 - / -), yetişkin bir kızgınlık kadın ile erkek (n = 16 Shank2 + / +, n = 16 Shank2 - / - başka bir kadın ile) ve yetişkin kadın (n = 15 Shank2 + / +, n = 13 Shank2 - vahşi tip farelerde) (sol panel) ve Shank2 - - / / - fareler (sağ panel). Tüm arama türlerinde ölçülen (B) Maksimum pik frekansı başka bir kadın (aynı Ns yukarıdaki gibi) ile bir kızgınlık kadın ve yetişkin dişi ile P2 yavruların, P6 yavruların, P10 yavruların, yetişkin erkeklerde şaşırmış. Veriler olarak ortalama sunulmaktadır +/- SEM ve bireysel noktaları (Wilcoxon testleri olmayan eşleştirilmiş: * p &lt;0.05, ** p &lt;0.01, *** p &lt;0.001). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/53871/53871fig5.jpg" /> Şekil 5: Bağlam. karıştığı çiftleri yaydığı ultrasonik seslerin dişi-dişi yetişkin sosyal etkileşim fare ultrasonik seslerin emisyon s oranı bir Shank2 + / + bir C57BL / 6N fare (n = 16, A) ve Shank2 içeren çiftleri ile - / - ile bir C57BL / 6N fare (n = 13, B) davranışsal olaylar aşağıdaki türleri sırasında (kırmızı: yolcu, yeşil: yeni köşe): sosyal temas, oro-ağız teması, yolcu fareden alınan ano-genital koklama, anomali yeni köşe fare koklama genital, işgalci ve yeni-comer, yolcu arkasında yeni umut vaat, işgalci hareketsizlik, yeni gelenin hareketsizlik, yaklaşımın arkasındaki yolcu yeni umut vaat gelen yeni umut vaat gelen yaklaşım kaçmak &amp; yolcu yeni gelenin vizyonu alanında işgalci, işgalci görüş alanında yeni-comer, yeni umut vaat ardından işgalci, yaklaşımı kaçmak ve işgalci, yaklaşımı kaçmak ve yeni-comer kaçmak. Veri preddetmiş olarak ortalama +/- SEM ve bireysel noktaları (non-eşleştirilmiş Wilcoxon testleri: * p &lt;0.05, ** p &lt;0.01). Basılmamış veriler. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53871/53871fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> çağrı türleri </td><td> Açıklama </td></tr><tr><td> kısa </td><td> süresi ≤5 msn ve frekans aralığı ≤6.25 kHz </td></tr><tr><td> kolay </td><td> frekans aralığı&gt; 6.25 kHz ile sadece bir yönde (yukarı veya aşağı) içinde süresi&gt; 5 msn ve frekans aralığı ≤6.25 kHz (düz) veya frekans modülasyonu </td></tr><tr><td> kompleks </td><td> Frekans, birden fazla yönde ve frekans aralığı&gt; 6.25 kHz modülasyon (modüle), ya da bir ya da daha çok ilave frekans c dahilomponent (harmonik veya non-lineer olaylar, ancak hiçbir doygunluk) ama frekans aralığının üzerinde hiçbir kısıtlama (kompleks) </td></tr><tr><td> frekans atlar </td><td> ardışık frekans bileşenleri arasındaki zaman boşluğu olmadan sıklığında bir sıçrama (bir frekans atlama) veya daha fazla atlar (frekans atlar, diğerleri) dahil (karışık) ya da saf ses çağrısı içinde herhangi bir gürültülü bir parçası olmadan </td></tr><tr><td> yapılandırılmamış </td><td> Hiçbir saf ses bileşeni tanımlanabilir; &quot;Gürültülü&quot; çağrıları </td></tr></tbody></table> Tablo 1:. Fare ultrasonik seslerin beş tür özellikleri fare ultrasonik sesler çıkarma içinde 5 farklı arama türlerini belirlemek için kullanılan süre, frekans aralığı, frekans modülasyon ve frekans atlar kriterleri örnekleri.

Fare ultrasonik seslendirmeleri, nöropsikiyatrik bozukluklar için fare modellerinde sesli iletişim eksikliklerinin genetik temellerini modellemek için vekil olarak kullanılır. Mevcut protokol, yavrulardan (gelişim boyunca) ve yetişkin farelerden (aynı cinsiyetten etkileşimler, erkek-kızgınlık dişi etkileşimleri) ultrasonik seslendirmeleri güvenilir bir şekilde ortaya çıkaran üç deneysel bağlamı açıklamaktadır.

Fare Ultrasonik seslenmelere kayıt Sosyal İletişim değerlendirin

Mice emit ultrasonic vocalizations in different contexts throughout development and in adulthood. These vocal signals are now currently used as proxies ...

Bu protokolün genel amacı, fare yavrularından veya yetişkinlerden gelen ultrasonik seslendirmeleri kaydetmek ve analiz etmek ve ardından verileri mouseTube veritabanında herkese açık hale getirmektir. Daha önce otizmde mutasyonlar tespit etmiştik, bu yüzden şimdi bu genlerin rolünü anlamak istiyoruz. Fare modelleri kullanıyoruz ve özellikle farelerin ultrasonik seslendirmesine bakıyoruz.Bu model, sinirbilim alanındaki temel soruların anlaşılmasına yardımcı olabilir. Örneğin, otizm gibi nöropsikotik bozukluklar için fare modelinde genetik mutasyonların sosyal iletişimi nasıl etkilediği. Bu protokolün ana avantajı, fare adresleme seslendirmesinin güvenilir bir şekilde ortaya çıkarılmasıdır.Çalışma karşılaştırmaları arasında iyileştirmeler yapmak için bağlam bilgilerinin standardizasyonunu desteklemelidir. Bu yöntem aynı zamanda mouseTube veritabanını kullanarak fare intrasonik iletişimi hakkındaki bilgileri de artıracaktır. Fareleri hazırladıktan ve yeni doğmuş yavruları elde ettikten sonra, çağrılarını kaydetmek için bir kafes kurun.Ses geçirmez bir kutu veya strafor kutu kullanın. İlk olarak, iç sıcaklığı izlemek için bir termometre ayarlayın. Daha sonra, kutunun üst kısmındaki bir delikten, mikrofonun zarı zeminden yaklaşık 12 ila 15 santimetre yukarıda olacak şekilde bir kondansatör ultrason mikrofonunu indirin.Şimdi, mikrofonu bir bilgisayarın ses kartına bağlayın. Deneysel olmayan yavruyu kayıt kutusunun içindeki temiz bir plastik yavru tutucuya koyun ve kapatın. En yüksek kayıt sesini yapın, bozulma olmadan mevcut tam genliği kullanın.Deney sırasında bu ayarı değiştirmeyin. Şimdi, deneysel ölçümler için, yavruyu mümkün olduğunca nazik ve hızlı bir şekilde temiz bir plastik kaba koyun. Ardından, yavruyu mikrofonun altına yerleştirin ve kutuyu mümkün olduğunca nazik ve sessiz bir şekilde kapatın.Ardından, yüksek kaliteli bir veri kümesi için 16 bit, 300 kilohertz kayıt yapın. Beş dakikaya kadar kayıttan sonra yavruyu çıkarın. Pençe dövmesini not edin ve ardından cilt sıcaklığını dijital bir termometre ile ölçün.Şimdi, su bazlı mürekkep kullanarak yavru üzerinde küçük bir işaret yapın ve yuvasına geri koyun. Testler arasında bardağı %10 etanol kullanarak yıkayın ve tamamen kurumasını bekleyin. Yetişkin bir test kafesi için, düşük yoğunluklu beyaz ışıkla aydınlatılan ses geçirmez bir kutuya sığan bir Pleksiglas kafes kullanın.Kafesi sabunlu suyla temizleyin, kurutun ve iki santimetre taze yatakla doldurun. Mikrofonu kafesin bir köşesine sabitleyin ve tüm kafesten gelen sesleri yakalamak için mikrofonun açısını ayarlayın. Ardından, ses geçirmez odanın üzerine bir video kamera yerleştirin, böylece mikrofon bir köşeyi gizlemeden test kafesinin yüzeyini görür.Deneysel olmayan bir hayvan çifti kullanarak, kaydın kazancını daha önce olduğu gibi ayarlayın. Deney için, yolcu rolünü doldurmak için önce bir hayvanı kafese sokun. 20 dakika alışmasına izin verin.Bu süre zarfında bir temel kayıt yapılabilir. Ardından, video ve ses kayıtlarını başlatın ve yeni gelen rolü doldurmak için aynı cinsiyetten ikinci hayvanı tanıtın. İkinci dokunuş kafese girerken bir bip sesi tetikleyerek kayıtları senkronize edin.Hayvanların etkileşimlerini dört dakika gibi gerektiği kadar uzun süre kaydedin. Bu teste hazırlanmak için, test gününün sabahının erken saatlerinde, kızgınlık döngüsündeki durumlarını belirlemek için her kadından vajinal smear alın. Dişiyi kuyruğundan tutun ve kafes ızgarasını kavramasına izin verin.Bir pipet kullanarak, 20 mikrolitre PBS enjekte ederek ve geri toplayarak vajinasını birkaç kez durulayın. Vajinadan dışarı atıldığında PBS'ye dikkat edin. Hafif bulutlu olduğunda, yeterli hücre içerir.Mukus oluşturmaktan kaçınmak için bunu dikkatlice yapın. Örneği bir slayt üzerine yayın. Aynı anda en fazla dört tanesi incelenebilir.Devam etmeden önce numunelerin kurumasını bekleyin. Bir davlumbaz altında, slaytları PBS'de 0.1 molar May-Grunwald çözeltisi banyosunda üç dakika inkübe edin. Ardından, slaytları bir dakika boyunca bir PBS banyosuna aktarın.Ardından, slaytları PBS'de hacimce %5 ağırlıkça Giemsa R banyosuna aktarın. 10 dakika sonra, slaytları taze PBS'de bir dakika daha durulayın. Ardından lekeli slaytları inceleyin.Numune sadece çekirdeği olmayan ve maviye boyanmış büyük, kornifiye epitel hücreleri gösteriyorsa, dişi tam kızgınlık içindedir. Test için sadece bu tür dişiler kullanılabilir. Şimdi, test kafesini erkek yolcu olarak olacak şekilde kurun.10 dakika alışmasına izin verin ve gerekirse temel bir ses kaydı alın. Ardından, video ve ses kayıtlarını başlatın ve dişiyi tam kızgınlıkla tanıştırın. Kayıtları bir bip sesi kullanmadan önceki gibi senkronize edin.Ardından, hayvanların dört dakikalık bir süre gibi gerektiği kadar etkileşime girmesine izin verin. Kayıt tamamlandığında, fareleri ilgili kafeslerine geri koyun. Institut Pasteur'deki mouseTube web sitesine veri yüklemek için önce oturum açın.Strains düğmesine tıklayarak kaydedilen fare suşunun mouseTube veritabanında bulunup bulunmadığını kontrol edin. Değilse, yöneticilerden oluşturmalarını isteyin. Ardından, hayvan denekler oluşturun.Kaydedilen hayvanların kimlik kodlarını girin. Verilerin daha sonra alınmasını kolaylaştırmak için bunları gruplar halinde toplayın. Ardından, kullanılan protokolün bir açıklamasını sağlayın.Şimdi, her kayıt oturumu için bir deney oluşturun. Protokolü, kaydedilen kişi grubunu, kullanılan donanım ve yazılımı ve bunların özelliklerini belirtin. Deney, seslendirme dosyalarına karşılık gelen tüm meta verileri toplar.Ardından, seslendirme dosyalarına bağlantı oluşturun. İlk olarak, listeden denemeyi seçin. Ardından, seslendirme dosyasının URL'sini kopyalayıp Bağlanacak Dosyalar sütununun ilgili alanına yapıştırın.Bu veritabanına koyduğunuz bağlantı aslında iyi olmayabilir. Seslendirme dosyalarınızı barındıran sunucunun, topluluk üyeleri için kurumunuzun dışından erişilebilir olduğundan emin olun. Ayrıntılar'da, Notlar bölümünde, gerektiği gibi sağlamak için.Örneğin, bir ses dosyasına eşlik eden bir video dosyasına bağlantı girildiğini belirtin. Son olarak, girişleri yaptıktan sonra doğrulayın. Her dosya için her kutuyu doldurmak gerekli değildir.Gerekirse, girilen bağlantıları değiştirin. Otizm spektrum bozuklukları ile ilişkili bir gen olan Shank2'nin ekspresyonu olmayan fareler karakterize edildi. Bu fareler, ilk olarak kadın etkileşimlerinde azalmış bir çağrı oranı olarak gözlemlenebilen atipik vokal iletişim gösterdi.Daha sonra, yavruluktan yetişkinliğe geçen beş çağrının standart repertuarı değerlendirildi. Ölçümler ilk olarak P2 yavruları ile yapılmıştır. P6 yavrularında vokal repertuarı değişmedi.P10'da vokal repertuarı hala aynıydı. Bu noktaya kadar, Shank2 boş fareler tarafından gösterilen çok fazla bir açık yoktu. Bununla birlikte, yetişkinlikte, genotiple ilgili farklılıklar belirginleşti.Erkekler östrus döneminde dişilerle etkileşime girdiğinde, mutant erkekler tarafından yapılan kısa ve yapılandırılmamış çağrıların oranında kayda değer bir artış oldu. Dişiler arasında duyulan çağrı modellerinde, Shank2 boş dişiler, normal dişilerle eşleştirildiğinde daha kısa ve yapılandırılmamış çağrıların yanı sıra daha az karmaşık çağrılar ve daha az frekans atlama çağrıları yaydı. Erkek veya dişi eşleştirilmiş Shank2 boş fareler, vahşi tip çöp eşi çiftlerine kıyasla daha düşük bir tepe frekansı ile seslendirildi.Davranışsal olayların analizinin ve seslendirme emisyonunun senkronize edilmesi, mutant farelerde ultrasonik seslendirmelerin emisyonu bağlamında bozuklukların tanımlanmasına izin verdi. Shank2 boş fareler, yeni gelenlerle fiziksel temas halindeyken ve daha spesifik olarak anogenital bölgeyi koklarken daha az ses çıkardı. Yeni gelenler Shank2 boş farelerinin görsel alanındayken daha fazla seslendirme duyuldu.Bu videoyu izledikten sonra, fare ultrasonik seslendirmelerinin nasıl kaydedileceğini ve mouseTube veritabanına veri yükleneceğini iyi anlamış olmalısınız. Bu prosedürü denerken, fare ses bariyerindeki yükseklik ve iç canlılık göz önüne alındığında, yeterli sayıda bireysel ön koşullandırılmış kaydetmeyi unutmamak önemlidir.

recording-mouse-ultrasonic-vocalizations-to-evaluate-social

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Farelerde ultrasonik seslendirmeler (USV'ler) yaşa, cinsiyete, duruma ve genetik geçmişe bağlı olarak farklılık gösterir. Farklı konumlarda aynı anda yayın yapan iki ultrason yayıcı kullanan bu iki seçenekli test, USV'lerin farklı özelliklerine göre murin tanıma ve tercih yanıtlarını değerlendirebilir.

Bir iki seçim Oynatma Testi kullanarak Fare Ultrasonik Seslendirme Tercihleri ​​belirlenmesi

Fareler, ultrasonik vokalizasyonlar (USV'ler) gibi karmaşık bir multisylabic repertuar üretirler. Bu USV'ler, nöropsikiyatrik bozukluklar için okundu olarak yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu protokol, fare şarkılarının akustik özelliklerini ve sözdizimini sürekli olarak teşvik etmek, toplamak ve analiz etmek için öğrendiğimiz ve geliştirdiğimiz bazı uygulamaları anlatmaktadır.

Erkek Fare Ultrasonik Seslendirme (USV) Şarkılarından Yararlanma ve Analiz Etme

Laboratuvar fare ve fare ultrasonik seslendirmeleri (USV'ler), ses ve sinir fonksiyonlarını incelemek için faydalıdır. Bu protokol, çiftleşme ile ilgili sorunlar olmadan iştah açıcı USV'leri güvenilir şekilde ortaya çıkaran bir gıda-ödül paradigmasını tanımlar. Hayvan koşullandırma, uyarıcı sunum, kayıt ve akustik analizleri detaylandırarak, duygusal motivasyonel ve kafatası sensorimotor fonksiyonlarını incelemek için tekrarlanabilir bir yöntem sunar.

Laboratuvar sıçanları ve farelerde iştah açıcı ultrasonik seslendirmelerin önleyici gıda-ödül çıkarılması

Stresin sosyal boyutu üzerine yapılan önceki araştırmalar iki önemli değişkene odaklanmıştı: sosyal kimlik ve sosyal destek. Bu protokol, bu iki sosyal değişkenin etkili bir deneysel manipülasyonunu ortaya koyar ve bunların standart bir stres indüksiyon paradigmasında (Trier Sosyal Stres Testi) uygulanmasını açıklar.

Stres Sosyal Boyutu: Trier Sosyal Sosyal Destek ve Sosyal Kimlik Deneysel manipülasyonları Testi Stres

Çalışma belleği konuşma, okuma ve yazma da dahil olmak üzere çeşitli bilişsel görevler için önemli miktarda varyans öngörür. Bununla birlikte, çocuklarda çalışma belleğini değerlendirmek için kullanılabilecek birkaç araç bulunmaktadır. Okul çağındaki çocuklarda çalışma belleğinin farklı bileşenlerini kapsamlı bir şekilde değerlendiren yenilikçi, bilgisayar tabanlı bir pil sunuyoruz.

Çocuklarda Çalışma Belleğinin Değerlendirilmesi: Çocuklar için Kapsamlı Değerlendirme Aküsü - Çalışma Belleği (CABC-WM)

Bir kablosuz fareler serbestçe davranışlar içinde stimülasyon ve çok kanallı sinirsel kayıtları için çift yönlü sistemi tanıttı. Hafif ve küçük, böylece animal´s davranış repertuar üzerinde en az etkiye sistemidir. Ayrıca, bu çift yönlü sistem beyin harekete geçirmek desen ve davranışı arasındaki nedensel ilişkileri değerlendirmek için gelişmiş bir araç sağlar.

Kablosuz, Vivo içinde kayıt ve fareler serbestçe davranışlar içinde sinirsel aktivite uyarılması için çift yönlü arayüzü

Burada bir protokol yönetim bir kağıt veya çevrimiçi sürümünü kullanarak video başvurulan Rating karşılıklı sosyal davranış (vrRSB) için mevcut. Bu anket RSB, mademki bir konu bir üç dakikalık videoda gösterildiği bir başvuru çocuk kıyasla "video-başvurulan" öğeler arasında toddlers yılında sosyal yeterlilik için bir ön koşul quantifies.

Toddlers yılında sosyal iletişim hızlı seri değerlendirmesi için çapa puanlama bir Video kullanımı

Bu kağıt otizm spektrum bozukluğu (ASD) olan bireylerde anlamsal işleme araştırmaya modalite içindeki çiftlerini Resimler ve kelime kullanarak anlamsal astar ERP görev açıklar.

Otizm spektrum bozukluğu lexico semantik ve Visuo-anlamsal işlemede çalışmaya bir anlamsal Priming olay-ilişkili potansiyel (ERP) görev

Dinlerken veya konuşulan bir dil konuşan görsel dünya paradigma katılımcıların göz hareketleri görsel çalışma alanında izler. Bu paradigma psycholinguistic sorular, ayırt edici deyimi gibi anlam olarak karmaşık ifadeler de dahil olmak üzere çok çeşitli çevrimiçi işlenmesi araştırmak için kullanılabilir.

Konuşulan dil çevrimiçi işlenmesi keşfetmek için görsel dünya paradigmada kaydedilen göz hareketleri kullanarak

Kliplerin ve beraberindeki tanımları bir deneysel enfeksiyon senaryoda resimli, yaprak kesme karıncalar hastalığı savunma davranışlar için görsel bir kılavuz mevcut. Anahtar savunma davranışları tanımak diğer araştırmacılar yardımcı olmak ve bu alanda gelecekteki araştırmalar için ortak bir anlayış sağlamak ana hedefimizdir.

Patojen için davranışsal savunma eğitimi için görsel bir kılavuz içinde yaprak kesme karıncalar saldırıları

Öğrenin fare ultrasonik seslenmelerini kaydetme ve analiz etme yöntemini, sosyal iletişim ve nöropsikiyatrik bozukluklardaki genetik etkileri araştırmak için. Bu protokol, mouseTube veritabanıyla veri paylaşımını kolaylaştırır.

Fare Ultrasonik seslenmelere kayıt Sosyal İletişim değerlendirin

Daha fazla video keşfet