Name: Hidrofilik Kaplama için Gliadin-siyanoakrilat Nanopartiküller Üretimi için Protokol (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-07-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 1 s
Description: Keşfedin protein bazlı nanopartiküllerle hidrofobik yüzeyleri hidrofilik hale getirme yöntemini. Gliadin-siyanoakrilat kullanılarak bir dakikadan kısa sürede kaplama yapılabilir. Bu protokol biyomalzeme ve nanoteknoloji alanlarında uygulama sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

uzman teknik yardım için Bay Jason Adkins için teşekkürler.

1. yağları azaltır Ticari Gliadin <ol><li> bir silindire sahip 150 mL aseton ölçülür ve 250 ml&#39;lik bir Erlenmeyer şişesi içine dökün. <ol><li> Oda sıcaklığında, bir manyetik karıştırıcı üzerinde eğirme ile karıştırılır iken, ticari bir gliadin tozu 30 g ekleyin. alüminyum folyo ile balonun açılış damga ve kaputu O / N karıştırma devam. </li></ol></li><li> Bir filtre kağıdı ile çözeltisi filtre. <ol><li> Taze aseton (yaklaşık 50 mL) ile süzüntü yıkayın. 10 dk aseton akmasını sağlamak için bekletin. </li><li> Böyle bir hücre kültür kare çanak gibi büyük bir çanak altında filtre kağıdı ile birlikte süzüntü aktarın. artık aseton buharlaşmasını yavaşlatmak için büyük bir filtre kağıdı ile bütün çanak örtün. </li><li> Süzüntü kaput O / N tamamen kurumasını bekleyin. Oda sıcaklığında hava geçirmez bir kapta yağsız gliadin saklayın. </li></ol></li></ol> Arıtılmış Gliadin 2. Hazırlık <ol><li> wa 150 ml ölçünbir silindire sahip ter 1000 ml&#39;lik bir Erlenmeyer şişesi içine dökün. <ol><li> dağınıklık silindiri ile mutlak etanol 350 ml ölçülür ve aynı 1.000 ml&#39;lik bir Erlenmeyer şişe içine dökün. hiçbir kabarcık çözüm karışımından oluşturulana kadar bir dönme çubuğu ile - (1.000 rpm 800) kuvvetlice karıştırın. </li></ol></li><li> Karıştırılırken, yağı alınmış ticari gliadin tozu 20 g ekleyin. orta hava içeren topaklar oluşmasını önlemek için bir zaman az miktarda gliadin ekleyin. O / N karıştırma devam edin. </li><li> 1.000 ml&#39;lik karışıklık silindire bütün çözüm aktarın. İki gün bekletin. Bu süre boyunca, yabancı maddeler silindirin alt kısmında çökeltilir. </li><li> bir pipet, bir döner buharlaştırıcı süpernatantı aktarın ve mümkün olduğu kadar çok süpernatandan etanol çıkarın. etanol yüzdesi azalır gibi gliadin agrega olarak çözelti içinde görünecektir. </li><li> Metanol dönen / daldırarak çözüm içeren gliadin agrega Freeze/ Kuru buz karışımı dondurma-kurutma, vakum altında -70 ° C&#39;de ilave edildi. Dondurularak kurutulmadan önce, bütün çözüm herhangi bir sıvı olmadan donmuş olduğundan emin olun. NOT: dondurularak kurutuldu gliadin gözenekli bir katı oluşturacaktır. </li><li> havan ve havan tokmağı ile dondurularak kurutuldu gliadin ezmek ve ince güç (&lt;0.5 mm) elde etmek üzere bir kahve değirmeni ile öğütülür. Oda sıcaklığında hava geçirmez bir kap ve depoya ürünü aktarın. </li></ol> Gliadin ECA 3. polimerizasyon reaksiyonu <ol><li> Bir tartı denge ve dara bir parıldama ampulünün (hacim yaklaşık 20 ml) koyun. scitillation şişede 3.2 g damıtılmış su ve 6.8 g mutlak etanol ekleyin. </li><li> şişeye manyetik dönüş çubuğunu (20 x 3 mm) koyun, bir manyetik karıştırıcı üzerine parıldama ampulünün taşımak ve kuvvetli bir şekilde karıştırıldı - hava kabarcığı sulu etanol karışımından elde edilen kadar (800 ila 1000 rpm). </li><li> karıştırılırken şişenin içine 4 N HCI 40 ul ekle. sti ise şişenin içine gliadin 20 mg ekle<html> rring ve gliadin tozu tamamen sulu etanol karışımı içinde çözündürülür kadar karıştırmaya devam edin. </li><li> 1000 rpm - karıştırma hızı hala 800 iken ECA 100 ul - emin olduktan sonra gliadin çözüm çıplak gözle açıktır, yavaş yavaş 80 ekleyin. <ol><li> 500 rpm karıştırma hızı indirin ve 1 saat daha karıştırmaya devam edilir. Reaksiyon ilerledikçe, polimerizasyon reaksiyonu devam ettiğini gösterir bulanıklık dikkate alınmalıdır. </li></ol></li><li> Reaksiyon sona erdiğinde, santrifüj tüplerine çözeltisini ve boruların ağırlığını dengeler. 20 dakika boyunca 10,000 x g&#39;de reaksiyon ürününü santrifüjleyin. Bu süre boyunca, yan ürün çökelir ve nanotanecikler süpernatantından kalır. Yan ürünün ana bileşeni PACA homopolimeridir. </li><li> santrifüj sonra, sintilasyon şişesine (veya herhangi bir hava geçirmez bir kap) bir pipet ile üretilen nanoparçacık süspansiyonu (üst faz) aktarmak ve oda sıcaklığında saklayın. </li></ol>Ürün başlığı &quot;&gt; 4. Karakterizasyonu <ol><li> 20 mL&#39;lik bir parlatma şişesine 3,2 g su ve 6.8 g mutlak etanol karıştırılarak 68 ağırlık% sulu etanol içinde, 10 g hazırlamak ve hiçbir kabarcık çözeltisi karışımından oluşturulur kadar karıştırın. <ol><li> karıştırılırken çözeltisi karışıma 4 N HCI 40 ul ekle. karıştırılarak hazırlanmış etanol çözeltisine nanopartikül süspansiyon 50 ul ekle. </li></ol></li><li> Yukarıda hazırlanan örnek solüsyonu kullanılarak dinamik ışık saçılımı (DLS) ile Nanopartikülün boyutunu ölçmek ve üreticinin talimatlarına uyun. NOT: Son ürünün boyutu daha küçük 200 nm olarak yer alır. Bu daha büyük 200 nm, ürün, uzun bir süre boyunca sabit değildir. istihdam ECA taze değilken Büyük nanopartiküller üretilmektedir. </li></ol> Ürünün 5. Sınav <ol><li> Böyle bir el ayna olarak, bir cam plaka hazırlanır. sabunlu suyla cam plaka yüzeyini yıkayın. Rakan su ile cam plaka yüzeyinde böcek ö. temizlenen yüzeye kurutun veya bir sonraki adım için kurutma olmadan kullanın. </li><li> cam levha bir kısmında 3.6&#39;da elde edilen nanoparçacık süspansiyon) sprey ve hemen akan su ile yüzey durulayın. </li><li> cam levha yüzeyi üzerinde saf su püskürtülür. kaplanmamış yüzey açık iken kaplanmış (nanoparçacık süspansiyonu püskürtülür) yüzey tutma su tabakası gözlemleyin. </li></ol>

<ol><li>Vauthier, C., Dubernet, C., Fattal, E., Pinto-Alphandary, H., Couvreur, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Poly%28alkylcyanoacrylates%29+as+biodegradable+materials+for+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Drug+Deliver.+Rev%22%5BJournal%5D)">Poly(alkylcyanoacrylates) as biodegradable materials for biomedical applications.</a> Adv. Drug Deliver. Rev. 55, 519-548 (2003).</li>
<li>Wieser, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemistry+of+gluten+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Chemistry of gluten proteins.</a> Food Microbiol. 24, 115-119 (2007).</li>
<li>Bietz, J. A., Wall, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identity+of+high+molecular+weight+gliadin+and+ethanol+soluble+glutenin+subunits+of+wheat%3A+Relation+to+gluten+structure%5BTitle%5D)+AND+%22Cereal+Chem%22%5BJournal%5D)">Identity of high molecular weight gliadin and ethanol soluble glutenin subunits of wheat: Relation to gluten structure.</a> Cereal Chem. 57, 415-421 (1980).</li>
<li>Kim, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+composites+by+using+gliadin+as+a+bonding+material%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereal+Sci%22%5BJournal%5D)">Production of composites by using gliadin as a bonding material.</a> J. Cereal Sci. 54, 168-172 (2011).</li>
<li>Kim, S., Kim, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+gliadin-poly%28ethyl+cyanoacrylate%29+nanoparticles+for+hydrophilic+coating%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Nanopart.+Res%22%5BJournal%5D)">Production of gliadin-poly(ethyl cyanoacrylate) nanoparticles for hydrophilic coating.</a> J. Nanopart. Res. 16, 1-10 (2014).</li>
<li>Behan, N., Birkinshaw, C., Clarke, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Poly+n-butyl+cyanoacrylate+nanoparticles%3A+a+mechanistic+study+of+polymerisation+and+particle+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Poly n-butyl cyanoacrylate nanoparticles: a mechanistic study of polymerisation and particle formation.</a> Biomaterials. 22, 1335-1344 (2001).</li>
<li>Nicolas, J., Couvreur, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+of+poly%28alkyl+cyanoacrylate%29-based+colloidal+nanomedicines%5BTitle%5D)+AND+%22Wiley+Interdiscip.+Rev.+Nanomed.+Nanobiotechnol%22%5BJournal%5D)">Synthesis of poly(alkyl cyanoacrylate)-based colloidal nanomedicines.</a> Wiley Interdiscip. Rev. Nanomed. Nanobiotechnol. 1, 111-127 (2009).</li>
<li>Kim, S., Evans, K., Biswas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+BSA-poly%28ethyl+cyanoacrylate%29+nanoparticles+as+a+coating+material+that+improves+wetting+property%5BTitle%5D)+AND+%22Colloid+Surface.+B%22%5BJournal%5D)">Production of BSA-poly(ethyl cyanoacrylate) nanoparticles as a coating material that improves wetting property.</a> Colloid Surface. B. 107, 68-75 (2013).</li>
<li>Lander, L. M., Siewierski, L. M., Brittain, W. J., Vogler, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+comparison+of+contact+angle+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">A systematic comparison of contact angle methods.</a> Langmuir. 9, 2237-2239 (1993).</li>
<li>Davies, J., Nunnerley, C. S., Brisley, A. C., Edwards, J. C., Finlayson, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+Dynamic+Contact+Angle+Profile+Analysis+in+Studying+the+Kinetics+of+Protein+Removal+from+Steel+Glass%2C+Polytetrafluoroethylene%2C+Polypropylene%2C+Ethylenepropylene+Rubber%2C+and+Silicone+Surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22+J.+Colloid+Interf.+Sci%22%5BJournal%5D)">Use of Dynamic Contact Angle Profile Analysis in Studying the Kinetics of Protein Removal from Steel Glass, Polytetrafluoroethylene, Polypropylene, Ethylenepropylene Rubber, and Silicone Surfaces.</a> J. Colloid Interf. Sci. 182, 437-443 (1996).</li>
<li>Giolando, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nano-crystals+of+titanium+dioxide+in+aluminum+oxide%3A+A+transparent+self-cleaning+coating+applicable+to+solar+energy%5BTitle%5D)+AND+%22Sol.+Energy%22%5BJournal%5D)">Nano-crystals of titanium dioxide in aluminum oxide: A transparent self-cleaning coating applicable to solar energy.</a> Sol. Energy. 97, 195-199 (2013).</li>
</ol>

Bu yayında ticari isimlerden veya ticari ürünlerden bahsedilmesi yalnızca belirli bilgiler sağlama amaçlıdır ve ABD Tarım Bakanlığı tarafından tavsiye veya onay anlamına gelmez. USDA, fırsat eşitliği sağlayıcısı ve işverenidir.

Nanopartikül süspansiyonunun üretiminde birkaç kritik adım vardır. Saflaştırılmış gliadin safsızlıklar içeriyorsa, ECA ile reaksiyon yan ürünler üretecektir. Bu istenmeyen ürünler, santrifüjleme aşamasında reaksiyon ortamından uzaklaştırılabilse de, ana ürünün verimini düşürür. Deneysel adım 2.3) sırasında hazırlanan gliadin çözeltisi iki gün sonra süpernatan ve çökelti arasında net bir ayrım göstermezse, çözeltinin daha uzun süre beklemesi gerekir. ECA'nın raf ömrü sınırlı olduğu için taze ECA kullanmak son derece öneml...

Bu makalenin amacı, malzemelerin ıslatma özelliğini basit bir sprey ile değiştiren nanopartikül süspansiyonunun hazırlanması için protokolü göstermektir. Sunulan nanopartikül süspansiyonu, alkil siyanoakrilat1 ve bir tahıl proteini olan gliadin2,3'ten yapılmıştır. Üretim prosesi sırasında, sulu etanol4'te protein agregaları oluşturulur. Monomer (alkil siyanoakrilat) ile müteakip reaksiyon, doğrusal polimer zincirleri [poli (alkil siyanoakrilat)] ile çevrili bir protein çekirdeğinden oluşan nanoparçacığı üretir5.
Poli(alkil siyanoakrilat)lar biyolojik olarak parçalanabilir ve emülsiyon polimerizasyonu6 yoluyla nanopartiküllerin üretimi için kullanılmıştır. Bu reaksiyon, sudan ayrışan hidroksil grupları veya reaksiyon ortamındaki7 diğer nükleofilik gruplar tarafından kendiliğinden başlatılır. Bu makalede sunulan reaksiyon durumunda, protein agregatlarının yüzeyindeki amin grupları, alkil siyanoakrilat monomerlerinin5,8 polimerizasyon reaksiyonunu başlatır. Bu reaksiyonun bir sonucu olarak, reaksiyon ortamında nanopartiküller oluşur. Nanopartikülün çekirdeği protein agregatlarıdır ve dış tabaka poli (alkil siyanoakrilat) (PACA) zincirleridir. Hazırlanan nanopartikül, çoğu malzeme üzerinde (daha doğrusu, PACA'nın adsorbe edebileceği herhangi bir malzeme) güçlü bir afiniteye sahiptir ve nanometre ölçeğinde ince bir kaplama oluşturmak için yüzeylerine yapışır. Basit bir sprey kaplama, malzemelerin yüzeyini anında hidrofilik hale getirir.
Gliadin, buğdayın endospermlerinde bulunan glütenin ana fraksiyonlarından biridir. Gliadinler esas olarak moleküler ağırlıkları 28.000 - 55.000 arasında olan monomerik proteinlerdir. Hidrojen bağları, iyonik bağlar ve hidrofobik bağlar gibi kovalent olmayan bağlar, gliadinlerin2 toplanmasından sorumludur. Bu makalede bir reaktan olarak gliadin seçilmiş olsa da, diğer birçok protein de aynı amaç için kullanılabilir. Bununla birlikte, reaksiyon koşulunun buna göre değiştirilmesi gerekir, çünkü agregasyonu indükleme koşulu, kullanılacak protein türüne bağlıdır8. Diğer proteinlerle karşılaştırıldığında, gliadin daha kolay temin edilebilir, saflaştırma basittir ve üretim maliyeti düşüktür. Sunulan reaksiyon için bir monomer olarak etil siyanoakrilat (ECA) seçilmesine rağmen, aynı reaksiyon için diğer alkil siyanoakrilatlar da kullanılabilir. ECA'nın seçilmesinin nedeni, düşük maliyetle kolayca temin edilebilmesidir.

<table><tbody><tr><td>Etil siyanoakrilat (ECA) monomer</td><td>K& R International (Laguna Niguel, CA)</td><td>I-1605</td><td>Herhangi bir saf ECA kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Gliadin</td><td>MGP Ingredients, Inc (Atchison, KS)</td>Gliadin <td>şirketinden hediye</td><td>Sigma-Aldrich'ten (kedi #: G3375-25G) satın alınabilir. Gliadin yerine, herhangi bir ticari&nbsp; glüten kullanılabilir.</td></tr><tr><td>HCl</td><td>Herhangi Bir</td><td></td><td>reaktif dereceli kimyasal kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Aseton</td><td>Herhangi Bir</td><td></td><td>reaktif dereceli kimyasal kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Metanol</td><td>Herhangi Bir</td><td></td><td>reaktif dereceli kimyasal kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Etanol (% 100)</td> <td>Herhangi bir</td><td></td><td>reaktif dereceli kimyasal kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>Herhangi biri</td><td></td><td>10 cm'den büyük herhangi bir sınıf filtre kağıdı kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Hücre kültürü kare tabak</td><td>Herhangi biri</td><td></td><td>20 x 20 cm'den büyük herhangi bir tabak kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Kahve değirmeni</td><td>Herhangi Herhangi</td><td></td><td>bir kahve değirmeni kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Döner buharlaştırıcı</td><td>Herhangi herhangi</td><td></td><td>bir döner buharlaştırıcı kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Dondurarak Kurutucu</td><td>Herhangi Bir</td><td></td><td>-70 dereceye ulaşabilen herhangi bir dondurarak kurutucu; C kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Herhangi</td> 1.000 <td></td><td>x g uygulayabilen herhangi bir santrifüj kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Manyetik karıştırıcı</td><td>Herhangi Döndürme</td><td></td><td>çubuğunu 1.000 rpm'ye çevirebilen herhangi bir manyetik karıştırıcı kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Dinamik Işık Saçılımı (DLS)</td><td>Brookhaven Instruments Corporation</td><td>NanoBrook Omni Zeta Potansiyel Analizörü</td><td>DLS herhangi bir şirketten kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Taramalı Elektron Mikroskobu (SEM)</td><td>Carl Zeiss Inc.</td><td></td><td>Herhangi bir SEM kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Dinamik Temas Açısı (DCA)</td><td>Thermo Cahn Instruments</td><td></td><td>Herhangi bir DCA kullanılabilir.</td></tr></tbody></table>

hidrofilik kaplama için gliadin-siyanoakrilat nanopartiküller Üretimi için protokol

A Protocol for the Production of Gliadin-cyanoacrylate Nanoparticles for Hydrophilic Coating

Bu makalede, basit sprey kaplama ile hidrofilik hidrofobik yüzey değişiklikleri protein bazlı nano partiküllerin üretilmesi için bir protokol sunulur. Bu nanopartiküller tahıl proteini (gliadin) moleküllerinin yüzeyi üzerinde de alkil siyanoakrilat polimerizasyon reaksiyonu ile imal edilir. Alkil siyanoakrilat Bu malzeme yüzeyine tatbik edildiği zaman, hemen oda sıcaklığında polimerize olan bir monomerdir. Bu polimerizasyon reaksiyonu nem de dahil olmak üzere yüzey üzerinde zayıf bazik ya da nükleofilik bileşik, eser miktarlarda ile başlatılır. polimerize sonra nitril grupları, poli (alkil sıyanoakrılat) omurgası olduğu için, polimerize alkil siyanoakrilatlar amacı malzeme ile güçlü bir afinite gösterirler. bunlar siyanoakrilat polimerizasyonunu başlatabilen amin grubu içerdiği için proteinleri de bu polimerizasyon için başlatma maddesi olarak çalışır. birleştirilmiş protein, bir başlatıcı olarak kullanılırsa, protein kümeleşme hidrofobik çevrilipoli (alkil sıyanoakrılat) alkil siyanoakrilat polimerizasyon reaksiyonundan sonra zincirler. Deneysel durum kontrol edilerek, nanometre aralığında parçacıklar üretilmektedir. üretilen nanopartiküller kolaylıkla cam, metal, plastik, ahşap, deri, kumaş ve da dahil olmak üzere birçok malzemenin yüzeyine adsorbe eder. Bir maddenin yüzey elde nanopartikül süspansiyonlu püskürtülür ve su ile durulanır zaman nanoparçacık misel yapısı konformasyonunu değiştirir ve hidrofilik proteinler havaya maruz kalır. Bunun bir sonucu olarak, nanopartikül kaplı yüzeyi hidrofilik olarak değişir.

Nanopartiküller Çeşitli reaksiyon koşulları hazırlanabilir. Gliadin formları etanol içeriğinin 5 geniş bir yelpazede bir araya. Ancak agrega büyüklüğü ek bir katman (yani., Polimerize ECA) bu toplama eklenir, çünkü mümkün olduğunca küçük olması gerekir, bu işlem nihai boyutu daha büyük hale getirecektir. partikülün nihai boyutu çok büyük olduğu takdirde, tanecik kararsız olur ve kolay bir şekilde çökeltilebilir olacaktır. Bu nedenle,% 68 sulu etanol bir reaksiyon orta...

Bu makale, hidrofobik yüzeyi hidrofilik hale getiren protein bazlı nanopartiküllerin üretimi için bir protokol sunmaktadır. Üretilen nanoparçacık, gliadin-siyanoakrilat diblok kopolimerlerinin bir montajıdır. Üretilen nanopartikül ile sprey kaplama, hedef malzemenin yüzeyini hidrofilik bir yüzeye dönüştürür.

Hidrofilik Kaplama için Gliadin-siyanoakrilat Nanopartiküller Üretimi için Protokol

This article presents a protocol for the production of protein-based nanoparticles that changes the hydrophobic surface to hydrophilic by a simple spray ...

Bu gösterimin genel amacı, hidrofobik yüzeyleri hidrofilik hale getiren protein tabanlı nanopartiküllerin üretimine yönelik bir protokol sunmaktır. Bu gösterim, hidrofilik kaplama için protein tabanlı nanopartiküllerin nasıl üretildiğini ve hedef malzemelerin yüzeyinde ne kadar iyi performans gösterdiklerini ortaya koymaktadır. Bu tekniğin temel avantajı, kaplamanın bir dakikadan kısa sürede gerçekleştirilmesidir.Gösterim, son 16 yıldır USDA laboratuvarında çalışan teknisyenim Jason Adkins tarafından gerçekleştirilecektir. Bu prosedüre başlamak için, mezürle 150 mililitre aseton ölçün ve bunu 250 mililitrelik bir Erlenmeyer flaskına aktarın. Karıştırırken, aseton içeren flaskın içerisine 30 gram ticari gliadin tozu ekleyin.Balonun ağzını alüminyum folyo ile kapatın ve çözeltiyi oda sıcaklığında gece boyunca karıştırmaya devam edin. Ertesi gün, çözeltiyi süzgeç kağıdından süzün. Ardından, tutulan maddeyi yaklaşık 50 mililitre taze aseton ile yıkayın.Filtrasyonun ardından, retentatı ve filtre kağıdını kare bir hücre kültürü kabına aktarın. Kalan asetonun buharlaşmasını yavaşlatmak için kabın üzerini büyük bir filtre kağıdı parçasıyla örtün. Yağdan arındırılmış gliadinin gece boyunca kurumasına izin verdikten sonra, onu hava geçirmeyen bir kaba aktarın ve laboratuvar tezgahında saklayın.Şimdi, mezür kullanarak 150 milliliters deiyonize su ölçün ve bunu 1.000 milliliters bir Erlenmeyer flask içine aktarın. Mezür ile 350 milliliters mutlak etanol ölçün ve bunu deiyonize su içeren flaska ekleyin. Hava kabarcıkları gözlemlenmeyene kadar çözeltiyi kuvvetlice karıştırın.Ardından, karıştırma çözeltisine 20 gram yağsız gliadin tozu ekleyin. Gece boyunca karıştırıldıktan sonra, çözeltinin tamamını 1.000 mililitrelik bir mezürle aktarın ve iki gün boyunca bekletin. Bunun ardından, süpernatantı esnek tüpler yardımıyla yuvarlak tabanlı bir balona aktarın ve döner evaporasyon yöntemiyle süpernatanttaki etanolü mümkün olduğunca uzaklaştırın.Bu aşamada, gliadin agregatlarını içeren çözeltiyi, balonu bir metanol-kuru buz karışımına daldırarak dondurun. Ardından vakum altında -70 °C'de liyofilize edin. Liyofilize edilmiş gliadini bir havan ve havan eli ile ezin ve ince bir toz elde etmek için kahve öğütücü ile öğütün.Ardından tozu hava sızdırmaz bir kaba aktarın ve oda sıcaklığında saklayın. Polimerizasyon reaksiyonu için, daralan bir sintilasyon şişesine 3,2 gram distile su ve 6,8 gram mutlak etanol ekleyin. Hava kabarcıkları gözlenmeyene kadar çözeltiyi kuvvetlice karıştırın.Ardından, karıştırmaya devam ederken tüpe 40 µL dört normal hidroklorik asit ekleyin. 20 mg saflaştırılmış gliadin tozu ekleyin ve toz tamamen çözünene kadar karıştırmaya devam edin. Çözeltinin homojen olduğundan emin olduktan sonra, karıştırarak yavaşça 80 ila 100 µL etil siyanoakrilat monomer ekleyin.Karıştırma hızını 500rpm'e düşürün ve çözeltiyi bir saat boyunca karıştırmaya devam edin. Reaksiyon tamamlandığında, çözeltiyi bir santrifüj tüpüne aktarın ve tüpün ağırlığını dengeleyin. Numuneyi 10,000 ×g hızında 20 dakika boyunca santrifüjleyin.Santrifüj işleminden sonra, üretilen nanoparçacık süspansiyonunu bir pipet yardımıyla sintilasyon şişesine aktarın ve oda sıcaklığında saklayın. Ürünü karakterize etmek için, 20 mililitrelik bir sintilasyon şişesinde ağırlıkça %68'lik sulu etanol çözeltisi hazırlayın. Hava kabarcıkları gözlemlenmeyene kadar çözeltiyi karıştırın.Ardından, karıştırırken çözeltiye 40 µL dört normal hidroklorik asit ve 50 µL nanoparçacık süspansiyonu ekleyin. Şimdi, üretici talimatlarını izleyerek dinamik ışık saçılımı ile nanoparçacıkların boyutunu ölçün. Bu aşamada, el aynası gibi bir cam plakanın yüzeyini sabunlu suyla yıkayın.Nanoparçacık süspansiyonunu cam plakanın bir kısmına püskürtün ve yüzeyi hemen suyla durulayın. Ardından, cam plakanın tüm yüzeyine su püskürtün. Kaplanmış ve kaplanmamış yüzeyler arasındaki farkı gözlemleyin.Nanopartikül süspansiyonundaki etanol içeriği azaldıkça, her bir nanopartikülün yüzeyi yüksek derecede yüklü hale gelir ve partikül yüzeyinin hidrofilliği önemli ölçüde artar. Absorbe edilen nanopartiküllerin SEM görüntüsü, nanopartiküllerin bir cam plaka yüzeyinde iyi dağıldığını ve partiküller arasında ışığın geçebilmesi için yeterli boşluk olduğunu göstermektedir. Partiküllerin bu uzaysal dağılımı ve küçük partikül boyutu, cam plakanın şeffaflığının kaplamadan etkilenmeme nedenini açıklamaktadır.Cam ve polistirenle ilgili nanopartikül kaplama öncesi ve sonrası temas açıları, kaplamadan sonra yüzey geriliminin önemli ölçüde düştüğünü göstermektedir. Kaplama etkisi, polikarbonat üzerindeki nanopartikül kaplama öncesi ve sonrası ıslanma etkileri karşılaştırılarak kolayca görselleştirilebilir. Nanopartiküllerle kaplanmış olan sağ yarı ince bir su filmi oluştururken, kaplanmamış sol yarı su damlacıkları oluşturarak suyun yüzeyi ıslatmadığını göstermektedir.Nanoparçacık kaplı ve kaplanmamış oto cam pencereler suya maruz bırakıldığında, kaplı cam üzerinde ince bir su tabakası oluşurken, kaplanmamış cam su damlacıklarıyla kaplanmış ve bu durum kaplı camın daha iyi görüş sağladığını kanıtlamıştır. Bu videoyu izledikten sonra, protein tabanlı nanoparçacıkların nasıl hazırlandığı ve malzemelerin ıslanma oranlarını değiştirmek için nasıl kullanıldıkları hakkında iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

a-protocol-for-production-gliadin-cyanoacrylate-nanoparticles-for

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Bu makale diblock co-polimerler kullanarak polimer bazlı nanopartiküller sentezlemek için nanoprecipitation yöntem açıklanır. Biz diblock sentezi co-polimerler, nanoprecipitation tekniği ve potansiyel uygulamalar ele alınacaktır.

Nanoprecipitation Tekniği Diblock Polimerik Nanopartiküller formülasyonu

Bu makale, yüksek bir verim yöntemi antijen sunan hücreler üzerinde belirli reseptörlerine yönelik olarak kullanım için polianhidrid Nanopartiküllerin yüzeyine oligosaccharidler ve ekin sentezi için sunulmuştur.

Polianhidrid Nanopartiküller Yüksek throughput Karbonhidrat sentezi ve işlevsel

Biz minimum maliyetle veya uzmanlık ECM proteinlerinin doğrudan bağlanma sağlar hidroksi-PAAm adında yeni bir poliakrilamid hidrojel, sunuyoruz. Microcontact baskı hücresel mechanostransduction eğitim için doğal hücre mikroçevresinin birçok ipuçlarının bağımsız kontrolünü kolaylaştırır ile hidroksi-PAAm kombinasyonu hidrojellerinin.

Mechanotransduction Cues Etkileri Ayırma için Hidroksi-PAAm Hidrojeller hazırlanması

poli (N-izopropil akrilamid) -graft-kondroitin sülfat oluşan enjekte edilebilir doku mühendisliği iskelesi (PNIPAAm-g-CS) içeren aljinat mikro hazırlandı. Özellikleri ve in vitro biyouyumluluk şişme yapışma mukavemeti, bu çalışmada incelenmiştir. Burada geliştirilen karakterizasyon teknikleri diğer thermogelling sistemleri için geçerli olabilir.

Doku Mühendisliği Aljinat mikropartiküllerin ile Thermogelling Poli (N-izopropil) -graft-kondroitin Sülfat Kompozitlerin Sentezi

Hücre ve ilaç iletimi için cihazlar olarak RGD ile işlevselleştirilmiş hidrojellerin sentezi için bir protokol sunuyoruz. Prosedür, alkin ile modifiye edilmiş poliakrilik asit (PAA) ile bir RGD-azid türevi arasında bakır katalizli alkin-azid siklo ilavesini (CuAAC) içerir. Hidrojeller, mikrodalga destekli polikondensasyon kullanılarak oluşturulur ve fizikokimyasal özellikleri araştırılır.

Tedavi Uygulamaları için bir alet olarak RGD-fonksiyonelleştirilmiş Hidrojeller Sentezi

Flash NanoPrecipitation (FNP) polimer çekirdek-kabuk nano tanecikleri üretmek için ölçeklenebilir bir yaklaşımdır. Laboratuvar ölçekli formülasyonları hidrofobik veya hidrofilik therapeutics Kapsülleme için açıklanmıştır.

Hidrofobik ve hidrofilik bileşikler polimer nano tanecikleri Kapsülleme için NanoPrecipitation flash

Bu protokol enjekte edilebilir, supramoleküler polimer-nanopartikül (PNP) hidrojel biyomalzemelerin sentezini ve formülasyonlarını açıklar. Bu malzemelerin ilaç dağıtımı, biyofarmasötik stabilizasyon ve hücre kapsülleme ve teslimi için uygulamaları gösterilmiştir.

Hücre ve İlaç Dağıtım Uygulamaları için Enjekte Edilebilir Supramoleküler Polimer-Nanopartikül Hidrojelleri

Nanojeller, biyolojik maddelerin verilmesi için mükemmel ve çok yönlü bir nanoparçacık platformudur. Protein bazlı yükleri kapsülleyebilen uyaranlara duyarlı poli (etilen) glikol bazlı polimerik nano jeller, sulu koşullarda tek aşamalı çapraz bağlama ko-nanopolimerizasyon stratejisi kullanılarak sentezlendi. Bu yeni nanopartiküllerin optimal üretimi ve karakterizasyonu burada sunulmaktadır.

Sulu Tek Adımlı Çapraz Bağlama ve Ko-nanopolimerizasyon Kullanılarak Uyaranlara Duyarlı Nanojellerin Sentezi

Granüler iskeleler içindeki partikül fraksiyonundaki değişkenliği en aza indirmek, tekrarlanabilir deneyleri kolaylaştırır. Bu çalışma, in vitro doku mühendisliği uygulamaları için kontrollü parçacık fraksiyonlarına sahip granüler iskeleler üretme yöntemlerini açıklamaktadır.

3D Hücre Kültürü için Mikro Gözenekli Tavlanmış Partikül İskelelerinde Partikül Fraksiyonunun Kontrol Edilmesi

Burada sunulan protokol, güçlü bir yapışkan hidrojel jelatin o-nitrosobenzaldehitin (jelatin-NB) sentezini göstermektedir. Jelatin-NB, yara yüzeylerini korumak için güçlü bir fiziksel bariyer oluşturabilen hızlı ve etkili doku yapışma yeteneğine sahiptir, bu nedenle yaralanma onarımı biyoteknolojisi alanına uygulanması beklenmektedir.

Güçlü yapışkan hidrojel, jelatin o-nitrosobenzaldehit sentezi

Bu makalede, mikroakışkan cihazlar kullanılarak yüksek verimli jelatin metakriloil mikrojel üretimi, mikrojellerin yeniden askıya alınabilir toza (mikro-aerojeller) dönüştürülmesi, granüler hidrojel iskeleleri oluşturmak için mikrojellerin kimyasal montajı ve 3D biyobaskı için korunmuş mikroporoziteye sahip granüler hidrojel biyomürekkeplerinin geliştirilmesi için protokoller açıklanmaktadır.

Jelatin Metakriloil Granül Hidrojel İskeleleri: Yüksek Verimli Mikrojel İmalatı, Liyofilizasyon, Kimyasal Montaj ve 3D Biyobaskı

Keşfedin protein bazlı nanopartiküllerle hidrofobik yüzeyleri hidrofilik hale getirme yöntemini. Gliadin-siyanoakrilat kullanılarak bir dakikadan kısa sürede kaplama yapılabilir. Bu protokol biyomalzeme ve nanoteknoloji alanlarında uygulama sunar.

Hidrofilik Kaplama için Gliadin-siyanoakrilat Nanopartiküller Üretimi için Protokol

Daha fazla video keşfet