Name: Atıksu Arıtma Süreçlerinin Etkinliğinin Değerlendirilmesi için Kimya ve Ekotoksikolojik Yöntemlerinin bir pil kullanılması östrojenik Potency çıkarmak (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 49 s
Description: Keşfedin atık su arıtma teknolojilerinin östrojenik kirleticileri giderme etkinliğini analitik kimya ve ekotoksikolojik yöntemlerle. Bu hassas teknikler, sucul yaşamı korumak için en iyi arıtma süreçlerini belirlemenize yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu makalede sunulan projeler Severn Trent Water ve Brunel University London tarafından finanse edilmiştir. Yazarlar, saha ve laboratuvar yardımı sağladıkları için Alan Henshaw ve John Churchley'e teşekkür eder. T.J.C., Heinz Endowments'a desteği için teşekkür eder. M.R.M., Steinbrenner Doktora Bursu için Steinbrenner Enstitüsü'ne ve Başkanlık Bursu için Carnegie Mellon Üniversitesi'ne teşekkür eder.

<ol><li>Bergman, Å, Heindel, J., Jobling, S., Kidd, K., Zoeller, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((State-of-the-science+of+endocrine+disrupting+chemicals%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Lett%22%5BJournal%5D)">State-of-the-science of endocrine disrupting chemicals.</a> Toxicol. Lett. 211, (2012).</li>
<li>Rodgers-Gray, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+of+juvenile+roach+%28Rutilus+rutilus%29+to+treated+sewage+effluent+induces+dose-dependent+and+persistent+disruption+in+gonadal+duct+development%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Exposure of juvenile roach (Rutilus rutilus) to treated sewage effluent induces dose-dependent and persistent disruption in gonadal duct development.</a> Environ. Sci. Technol. 35 (3), 462-470 (2001).</li>
<li>Jobling, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+sexual+maturation+and+gamete+production+in+wild+roach+%28Rutilus+rutilus%29+living+in+rivers+that+receive+treated+sewage+effluents%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+reprod%22%5BJournal%5D)">Altered sexual maturation and gamete production in wild roach (Rutilus rutilus) living in rivers that receive treated sewage effluents.</a> Biol. reprod. 66 (2), 272-281 (2002).</li>
<li>Tyler, C. R., Der Eerden, B. V. an, Jobling, S., Panter, G., Sumpter, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+vitellogenin%2C+a+biomarker+for+exposure+to+oestrogenic+chemicals%2C+in+a+wide+variety+of+cyprinid+fish%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+B%2C+Biochem.+Syst.+Environ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Measurement of vitellogenin, a biomarker for exposure to oestrogenic chemicals, in a wide variety of cyprinid fish.</a> J. Comp. Physiol. B, Biochem. Syst. Environ. Physiol. 166 (7), 418-426 (1996).</li>
<li>Jobling, S., Nolan, M., Tyler, C. R., Brighty, G., Sumpter, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Widespread+sexual+disruption+in+wild+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Widespread sexual disruption in wild fish.</a> Environ. Sci. Technol. 32 (17), 2498-2506 (1998).</li>
<li>Jobling, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predicted+exposures+to+steroid+estrogens+in+U.K.+rivers+correlate+with+widespread+sexual+disruption+in+wild+fish+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Health+Perspect%22%5BJournal%5D)">Predicted exposures to steroid estrogens in U.K. rivers correlate with widespread sexual disruption in wild fish populations.</a> Environ. Health Perspect. 114, Suppl 1. 32-39 (2006).</li>
<li>Baynes, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Additional+treatment+of+wastewater+reduces+endocrine+disruption+in+wild+fish+-+a+comparative+study+of+tertiary+and+advanced+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Additional treatment of wastewater reduces endocrine disruption in wild fish - a comparative study of tertiary and advanced treatments.</a> Environ. Sci. Technol. 46 (10), 5565-5573 (2012).</li>
<li>Routledge, E. J., Sumpter, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogenic+activity+of+surfactants+and+some+of+their+degradation+products+assessed+using+a+recombinant+yeast+screen%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Toxicol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Estrogenic activity of surfactants and some of their degradation products assessed using a recombinant yeast screen.</a> Environ. Toxicol. Chem. 15 (3), 241-248 (1996).</li>
<li>Grover, D. P., Balaam, J., Pacitto, S., Readman, J. W., White, S., Zhou, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocrine+disrupting+activities+in+sewage+effluent+and+river+water+determined+by+chemical+analysis+and+in+vitro+assay+in+the+context+of+granular+activated+carbon+upgrade%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Endocrine disrupting activities in sewage effluent and river water determined by chemical analysis and in vitro assay in the context of granular activated carbon upgrade.</a> Chemosphere. 84 (10), 1512-1520 (2011).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22The+determination+of+steroid+oestrogens+in+waters+using+chromatography+and+mass+spectrometry+%282008%29+Methods+for+the+Examination+of+Waters+and+Associated+Materials%22">The determination of steroid oestrogens in waters using chromatography and mass spectrometry (2008) Methods for the Examination of Waters and Associated Materials</a>. (2008), Environment Agency. Bristol, UK. (2008).</li>
<li>Van den Belt, K., Berckmans, P., Vangenechten, C., Verheyen, R., Witters, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+on+the+in+vitro%2Fin+vivo+estrogenic+potencies+of+17beta-estradiol%2C+estrone%2C+17alpha-ethynylestradiol+and+of+17beta-estradiol%2C+estrone%2C+17alpha-ethynylestradiol+and+nonylphenol%5BTitle%5D)+AND+%22Aquat.+toxicol%22%5BJournal%5D)">Comparative study on the in vitro/in vivo estrogenic potencies of 17beta-estradiol, estrone, 17alpha-ethynylestradiol and of 17beta-estradiol, estrone, 17alpha-ethynylestradiol and nonylphenol.</a> Aquat. toxicol. 66 (2), 183-195 (2004).</li>
<li>Mills, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Removal+of+ecotoxicity+of+17%CE%B1-ethinylestradiol+using+TAML%2Fperoxide+water+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Rep%22%5BJournal%5D)">Removal of ecotoxicity of 17α-ethinylestradiol using TAML/peroxide water treatment.</a> Sci. Rep. 5, 10511(2015).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22EN+14962%3A2006+Water+quality+-+Guidance+on+the+scope+and+selection+of+fish+sampling+methods%22">EN 14962:2006 Water quality - Guidance on the scope and selection of fish sampling methods</a>. , British Standards Institute. London, UK. (2006).</li>
<li>Beresford, N., Brian, J. V., Runnalls, T. J., Sumpter, J. P., Jobling, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogenic+activity+of+tropical+fish+food+can+alter+baseline+vitellogenin+concentrations+in+male+fathead+minnow+%28Pimephales+promelas%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Toxicol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Estrogenic activity of tropical fish food can alter baseline vitellogenin concentrations in male fathead minnow (Pimephales promelas).</a> Environ. Toxicol. Chem. 30 (5), 1139-1145 (2011).</li>
<li>Nolan, M., Jobling, S., Brighty, G., Sumpter, J. P., Tyler, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+histological+description+of+intersexuality+in+the+roach%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Fish+Biol%22%5BJournal%5D)">A histological description of intersexuality in the roach.</a> J. Fish Biol. 58 (1), 160-176 (2001).</li>
<li>Dascenzo, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fate+of+natural+estrogen+conjugates+in+municipal+sewage+transport+and+treatment+facilities%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">Fate of natural estrogen conjugates in municipal sewage transport and treatment facilities.</a> Sci. Total Environ. 302 (1-3), 199-209 (2003).</li>
<li>Gomes, R. L., Birkett, J. W., Scrimshaw, M. D., Lester, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+natural+and+synthetic+steroid+estrogens+and+their+conjugates+in+aqueous+matrices+by+liquid+chromatography%2Fmass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Environ.+Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of natural and synthetic steroid estrogens and their conjugates in aqueous matrices by liquid chromatography/mass spectrometry.</a> Int. J. Environ. Anal. Chem. 85 (1), 1-14 (2005).</li>
<li>Metcalfe, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogenic+potency+of+chemicals+detected+in+sewage+treatment+plant+effluents+as+determined+by+in+vivo+assays+with+Japanese+medaka+%28Oryzias+latipes%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Toxicol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Estrogenic potency of chemicals detected in sewage treatment plant effluents as determined by in vivo assays with Japanese medaka (Oryzias latipes).</a> Environ. Toxicol. Chem. 20 (2), 297-308 (2001).</li>
<li>Stalter, D., Magdeburg, A., Wagner, M., Oehlmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ozonation+and+activated+carbon+treatment+of+sewage+effluents%3A+Removal+of+endocrine+activity+and+cytotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Water+Res%22%5BJournal%5D)">Ozonation and activated carbon treatment of sewage effluents: Removal of endocrine activity and cytotoxicity.</a> Water Res. 45 (3), 1015-1024 (2011).</li>
<li>Caldwell, D. J., Mastrocco, F., Anderson, P. D., Länge, R., Sumpter, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predicted-no-effect+concentrations+for+the+steroid+estrogens+estrone%2C+17%CE%B2-estradiol%2C+estriol%2C+and+17%CE%B1-ethinylestradiol%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Toxicol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Predicted-no-effect concentrations for the steroid estrogens estrone, 17β-estradiol, estriol, and 17α-ethinylestradiol.</a> Environ. Toxicol. Chem. 31 (6), 1396-1406 (2012).</li>
<li>Gardner, M., Comber, S., Scrimshaw, M. D., Cartmell, E., Lester, J., Ellor, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+significance+of+hazardous+chemicals+in+wastewater+treatment+works+effluents%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">The significance of hazardous chemicals in wastewater treatment works effluents.</a> Sci. Total Environ. 437, 363-372 (2012).</li>
<li>Filby, A. L., Shears, J. A., Drage, B. E., Churchley, J. H., Tyler, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+advanced+treatments+of+wastewater+effluents+on+estrogenic+and+reproductive+health+impacts+in+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Sci.+Technol%22%5BJournal%5D)">Effects of advanced treatments of wastewater effluents on estrogenic and reproductive health impacts in fish.</a> Environ. Sci. Technol. 44 (11), 4348-4354 (2010).</li>
<li>Magdeburg, A., Stalter, D., Oehlmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+effluent+toxicity+assessment+at+a+wastewater+treatment+plant+upgraded+with+a+full-scale+post-ozonation+using+aquatic+key+species%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Whole effluent toxicity assessment at a wastewater treatment plant upgraded with a full-scale post-ozonation using aquatic key species.</a> Chemosphere. 88 (8), 1008-1014 (2012).</li>
<li>Collins, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TAML+oxidant+activators%3A+a+new+approach+to+the+activation+of+hydrogen+peroxide+for+environmentally+significant+problems%5BTitle%5D)+AND+%22Acc.+Chem.+Res%22%5BJournal%5D)">TAML oxidant activators: a new approach to the activation of hydrogen peroxide for environmentally significant problems.</a> Acc. Chem. Res. 35 (9), 782-790 (2002).</li>
<li>Collins, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Designing+Ligands+for+Oxidizing+Complexes%5BTitle%5D)+AND+%22Acc.+Chem.+Res%22%5BJournal%5D)">Designing Ligands for Oxidizing Complexes.</a> Acc. Chem. Res. 27 (9), 279-285 (1994).</li>
<li>Truong, L., Denardo, M. A., Kundu, S., Collins, T. J., Tanguay, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+Assays+as+Developmental+Toxicity+Indicators+in+The+Design+of+TAML+Oxidation+Catalysts%5BTitle%5D)+AND+%22Green+Chem%22%5BJournal%5D)">Zebrafish Assays as Developmental Toxicity Indicators in The Design of TAML Oxidation Catalysts.</a> Green Chem. 15 (9), 2339-2343 (2013).</li>
<li>Murk, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+estrogenic+potency+in+wastewater+and+surface+water+with+three+in+vitro+bioassays%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Toxicol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Detection of estrogenic potency in wastewater and surface water with three in vitro bioassays.</a> Environ. Toxicol. Chem. 21 (1), 16-23 (2002).</li>
<li>Test No 455: The Stably Transfected Human Estrogen Receptor-alpha Transcriptional Activation Assay for Detection of Estrogenic Agonist-Activity of Chemicals. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22OECD+Guidelines+for+the+Testing+of+Chemicals%2C+Section+4%22">OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4</a>. , OECD Publishing. Paris. (2009).</li>
<li>Kolle, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+house+validation+of+recombinant+yeast+estrogen+and+androgen+receptor+agonist+and+antagonist+screening+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+in+Vitro%22%5BJournal%5D)">In house validation of recombinant yeast estrogen and androgen receptor agonist and antagonist screening assays.</a> Toxicol in Vitro. 24 (7), 2030-2040 (2010).</li>
<li>Lee, O., Tyler, C. R., Kudoh, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+transient+expression+assay+for+detecting+environmental+oestrogens+in+zebrafish+and+medaka+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Development of a transient expression assay for detecting environmental oestrogens in zebrafish and medaka embryos.</a> BMC Biotechnology. 12, 32(2012).</li>
<li>Brian, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accurate+prediction+of+the+response+of+freshwater+fish+to+a+mixture+of+estrogenic+chemicals%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Health+Perspect%22%5BJournal%5D)">Accurate prediction of the response of freshwater fish to a mixture of estrogenic chemicals.</a> Environ Health Perspect. 113 (6), 721-728 (2005).</li>
<li>Test No 229: Fish Short Term Reproduction Assay. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22OECD+Guidelines+for+the+Testing+of+Chemicals%2C+Section+2%22">OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 2</a>. , OECD Publishing. Paris. (2009).</li>
<li>Test No 230: 21-day Fish Assay: A Short-Term Screening for Oestrogenic and Androgenic Activity and Aromatase Inhibition. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22OECD+Guidelines+for+the+Testing+of+Chemicals%2C+Section+2%22">OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 2</a>. , OECD Publishing. Paris. (2009).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Atıksu arıtma tesisleri EDC ile yüzey suyu kirlenme önemli yol vardır. Geleneksel olarak ilerlemiş veya gelişmekte olan tedavi süreçlerinin endokrin aktivitesinin giderilmesi etkinliğinin değerlendirilmesi, kimyasal ve biyolojik tahlillerin çeşitli kullanılmasını gerektirir. hedeflenmemiş ve hedeflenen analizi kullanılarak kimyasal analiz tek tek bileşenlerin çıkarılması etkinliği üzerinde nitel ve nicel veriler sağlar ve bu nedenle bir değerlendirme çevresel kalite standartlarına karşı yapılan veya analiz bileşiklerin veya bileşimlerin karışımları etkisiz konsantrasyonlar tahmin sağlar. arıtılması ve bilinmeyen biyolojik olarak aktif bileşenlerin varlığında aşağıdaki maddelerden eksik mineralizasyon kaynaklanan dönüşüm ürünlerinin üretimi, tek başına kimyasal test kullanımlarını sınırlandırmaktadır. Analitik kimyager ile kombinasyon halinde in vitro biyo-deneyler, in vivo ve in bir kombinasyonury tarama atıksu arıtma süreçleri ortaya çıkan yoluyla EDC çıkarılması etkinliğini belirlemek için kullanışlı bir araç sağlar. geleneksel su kalite parametreleri ve diğer toksikolojik ve mikrobiyolojik uç noktaları ile birlikte yürütülen bu testler, mevcut ve gelişmekte olan atıksu arıtma teknolojilerinin kritik bir değerlendirmesini sağlar. Olmadığı Maya tabanlı östrojen ekranları (örneğin, YES) not kimyasallar ve atıksuların östrojenik gücünü belirlemek için deneyler in vitro önemlidir. Kararlı biçimde transfekte edilmiş memeli hücre bazlı deneyler arasında bir sayı, örneğin, ER-CALUX 27 ve insan göğüs kanseri hücreleri ya da servikal tümör hücreleri ile 28 hERα-HeLa-9903 sırasıyla, çok geliştirilmiştir. EVET benzer memeli hücre bazlı analizlerle kıyasla olmuştur ve tekrarlanabilirlik karşılaştırılabilir yüksek düzeyde olduğu tespit edilmiştir, gerçek pozitif ve gerçek negatif östrojenik kimlik oranları 29, bussesöf bazen 27 biraz daha az hassas olduğu kabul edilir. Maya tabanlı muhabiri deneyleri yararlarından biri daha az sıkı biyo-kontrol önlemleri ve steril teknikler gerektirir gibi memeli hücre kültürü ile önemli bir deneyime olmayan laboratuvarlarda EVET daha kolay (EVET gerekirse tezgah üstünde yapılabilir), kabul edilebilir olmasıdır . İnsan hücre bazlı deneyler de EVET kullanılan standart kuvöz ve mikro okuyuculara kıyasla CO 2 inkübatör ve luminometreyle gerektirir. İki maya bazlı östrojen raportör testleri (EVET, Saccharomyces cerevisiae ve A-EVET, Arxula adeninivorans) ISO 19040 onaylanması için şu anda geçiren laboratuvarlar arası yollar &quot;Su kalitesi - su ve atık su östrojenik potansiyelinin belirlenmesi&quot; endüstrileri vurgulayarak bu tekniklerin ilgi. etkiyi açıklanan yöntemlerle sınırlamaları vardıralan ya da laboratuvar ortamında veya insan kirlenme (örneğin, plastikleştiriciler, yüzey aktif maddeler, kişisel bakım ürünleri) ile kaynaklanan östrojenik maddeler ile numune, numune saklama ve analiz esnasında numune. EVET deneyi (ya da diğer hücre bazlı raportör tahlilleri) kontaminasyon Bu tip arka plan yükseltmek ve tahlil kullanımını etkileyecektir. plastik şişelerde saklanan su örnekleri veya çözücüler kolayca yanlış pozitif neden olabilir. LCMS / MS ve EVET tahlil hem saptanabilir düzeye östrojen konsantre SPE gerektiren yanlış negatifler endişe de bulunmaktadır. matrisi, SPE sorbent ve yıkama çözücü seçimi ekstraksiyon etkinliğini ve akıtılan bileşiklerin türlerini etkileyebilir. Çok kutuplu ve bazik bileşikler kötü sorbent tarafından muhafaza edileceği gibi, negatif bir eğilim oluşturabilir, bu protokolde belirtilen koşullar kullanılarak çıkarılması için C18 SPE kartuşları kullanarak. Ayrıca, bu protokol metan elüte EVET eluent sulandırılması gereklidirol uçucu bileşiklerin kaybı ile sonuçlanan fon sağlayıcısı azot kuruyana kadar buharlaştırma yolu ile etanol. Bunun bir sonucu olarak protokol test edilen örneklerin östrojenik aktivite hafife sağlamak olabilir. Onlar çıkarılan henüz ya da buharlaşma nedeniyle kaybolur, çünkü bilinmeyen veya beklenmeyen bileşikler olarak EVET deneyi, cevapsız olabilir göz önüne alındığında Bu sınırlamalar özellikle önemlidir. Ayrıca, LCMS / MS tekniği kurtarma düzeltmek için etiketli dahili standartların kullanımı yapar; Bu yaklaşım VAR testi ile kullanılamaz. Atık in vivo test önemli sınırlamalar, in vitro yöntemlerle karşılaştırıldığında değerlendirme için gerekli olan yüksek maliyet ve zaman bulunmaktadır. Şu anda östrojenik aktivite tespit etmek için balık embriyo testlerinin kullanımı sınırlıdır. Ancak, gelecekteki uygulamalara sahip olabilir balık embriyoları 30, parlayan östrojen duyarlı transgenik üreten bazı başarı olmuştur. Bu protoc kullanılan Etkafa balıklardır (ol), ortak bir laboratuar türleri ve erkek balık VTG indüksiyon östrojenik maruz iyi belgelenmiş bir biyo-marker atık çıkış maddesi östrojenizitede 22 ya da diğer östrojenik bileşikler veya bunların karışımları 31 bir ölçülebilir ölçer bulunmaktadır. Endokrin bozucu kimyasallara OECD testi kurallar VTG her üç türün östrojen maruz kalma hassas bir biyolojik belirteç olmak, yetişkin fathead Minnow, Japon Medaka ve zebrafish 32,33 ile onaylanmıştır. Ciddi interseks roach 3&#39;te görüldüğü gibi Ancak, VTG indüksiyon doğrudan üreme bozukluğu ve atıksu maruz kalma nedenle ekolojik sonuçlara ilişkili değildir. Öte yandan, hamamböceği nedeniyle büyük boyutlu, uzun nesil süre (2-3 yıl cinsel olgunluğa ulaşması), üreme tarzı için Ekotoksikoloji araştırma için bir klasik &#39;laboratuvar türleri&#39; değildir; grup yumurtlama (üreme) yılda bir kez gerçekleşir ve zorluk sırasında başka kadın dan erkeklere (tanımlamak içinyumurtlama mevsimi). Ancak, bu normal gonochoristic türün çok iyi nedeniyle östrojenik atıksu atık aşağı, erkek balıklar endokrinoloji (örneğin, kadın-spesifik kanlarında vitellogeninin varlığı) ve histopatolojik (ovotestes tedirginlikler sergilenen keşif, İngiltere&#39;de çalışılmıştır - testis ve / veya kadın üreme kanallarında) 5,6 yumurta geliştirilmesi. Bu nedenle, bu protokollerin bir gelecek uygulaması olarak, hamamböceği (veya benzeri türler) atıksu kalitesi (ve düşük östrojenizitede) gerçek iyileştirmeler ileri işlenmiş atık suların alıcı nehirler görülür olmadığını göstermek için yararlı bir vahşi nöbetçi tür olabilir. Onlar da pilot bitkilerden 7&#39;den teknolojik gelişmiş atık suları izlemek için boru sistemleri sonunda kullanılabilir. In vivo atıksu değerlendirmelerde kullanmak için hangi tür göz önüne alındığında nispeten hızlı ve kontrollü test kullanarak laboratuvar türler arasında bir değiş tokuş karşılaştırıldığında varuzun alan bazlı, ama yerli türler kullanılarak test daha çevreyle ilgili. Bununla birlikte, in vivo değerlendirmelerde yüksek maliyetli ve sadece kimyasal analizi kullanılarak değerlendirmeler, aşağıdaki testler nihai grubu olarak ve in vitro deneylerde dikkate alınmalıdır. Açıklanan protokoller dahilinde kritik adımlar hazırlanması ve örnekleri ve cam işleme dahil plastik ve örneklerin temas sınırlayıcı dahil olmak üzere çevresel kirleticilerden örneklerin kirlenmesini önlemek için (yani, şişeler ve örnekleme ekipmanları uygun yüzeye aktif temizlik maddesi ile ön tedavi edilmelidir) yanlış pozitif üretebilir diğer malzemeler. tasarımı ve aquaria ve balık pozlama sistemleri bina bu da aynı derecede önemlidir. İdeal akvaryumlar (konut stokları ve pozlama sırasında) en az kontaminasyon riski düşük adsorpsiyon 32 malzemelerden inşa edilmelidir. Paslanmaz çelik çıkış maddesi ya da bir su tutma tankı kullanılabilir.Bir cam yapım tanklar balık tankları için tercih edilir ise (bu da balığın kolay gözlem sağlar gibi). Düşük dereceli plastik boru ya da boru kullanımı, yani, kullanımdan önce en az 12 saat için seyreltme suyu altında herhangi bir kirletici süzülmeye bırakılır, &#39;doğru görmüş&#39; ise 32 PVC 34 ve ABS kullanılabilir kaçınılmalıdır. Tıbbi grade silikon boru tanklarına kimyasal ve atık su / seyreltme suyunun peristaltik pompa teslimat için tesisimizde başarıyla istihdam edilmiştir. Yanı sıra inşaat östrojenik kirlenmeyi dikkate ve su sporları sisteminin çalışan olarak, balıkların beslenme düşünmek de önemlidir; Birçok uygunluk balık yemleri balık östrojenik olduğu tespit edilmiştir. Nedenle önceki çalışmaların bu tür bunları kullanarak (Beresford ve ark. 14 Bkz, Maya Östrojen Ekranında, örneğin) faaliyet için herhangi bir yiyecek test edilmesi önemlidir. Sorun gidermekalite güvence örnekleri çoklu seyahat, laboratuvar dahil ve çözücü boşlukları yanlış pozitif ve yanlış negatif sonuçlara ortadan kaldırmak için pozitif kontroller ve gerçek örneklerin yanında analiz edilirse, basitleştirilmiş açıklanan kimyasal analiz veya EVET tahlil protokolleri. Pozitif (örneğin, EE2) ve negatif (seyreltme suyu sadece) kontrolü her zaman tespit edilecek herhangi bir beklenmedik kirlenme beklenen biyolojik belirteç veya son nokta (yani, VTG veya histopatoloji) hassasiyetini teyit ve izin in vivo deneylerde de kullanılması gerektiğini ( örneğin, deneysel seti yukarı, diyet ya da seyreltme suları) dan. protokolünde herhangi bir değişiklik herhangi bir çalışma yürütmektedir önce valide edilmelidir. AAT atıkları yoluyla çevreye giren östrojenik bileşiklerin sıkı düzenleme ile daha etkin atıksu arıtma teknolojileri geliştirilmesi gerektiğini canlandırmak olduğunu. Bu yazıda anlatılan testlerin pil iltifatekotoksikolojik ve kimyasal değerlendirme testleri normal atık su arıtma tesisi, atık su boşaltma başvurdu. Bu nedenle, atıksu teknolojisi geliştiriciler ve tesis operatörlerine imkan vermelidir testin bütünsel pilin bu tip gelecekteki uygulamaya özel düzenlenmiş östrojenik kimyasallar ve genel biyolojik aktiviteyi hem kaldırmak için en iyi yöntemler dikkate alınarak en ekolojik açıdan güvenli tasarımlar uygulamak.

Yaban hayatı üreme sağlığı konusunda endokrin bozan bileşiklerinin olumsuz etkileri ile ilgili endişeler Su Çerçeve Direktifi (SÇD) altında &quot;watch list&quot; iki östrojenik maddeler (östradiol ve etinilestradiol) yerleştirmek için Avrupa Birliği&#39;ne yol açmıştır. EDC doğal ve sentetik steroid östrojenler, uyuşturucu, böcek ilaçları ve endüstriyel kimyasallar ve yaban hayatı üzerinde bilinen olumsuz etkileri ile tüketici ürünlerinin bileşenleri de dahil olmak üzere kimyasal sınıfların, çeşitli kapsamaktadır. Bu bileşiklerin bazıları, potansiyel olarak insan sağlığını 1 etkileyebilir. Araştırma AAT gelen çıkış maddeleri halinde 2 balık östrojenik olduğunu göstermiştir ve bir sonucu olarak, birçok alıcı suların balık 3 östrojenik bulunmaktadır. Bu, ilk yabani erkek balıkların kanı ve yüksek öncesi (kadın özel sarısı protein habercisi 4) artarak vitellogeninin konsantrasyonlarını gösterdi Birleşik Krallık ulusal anketler aracılığıyla gösterilmiştirdeğerlik interseks normalde gonochoristic balık türlerinin 5,6 (erkek balık testislerde yumurta ve / veya kadın üreme kanalları geliştirerek). Geleneksel atık su arıtma tipik haliyle çözündürüldü ve organik madde atılır ve birincil ve ikincil muamele edilir, bir ön tarama oluşan üç aşamalı bir işlemdir. Bireysel EDC çıkarılması etkinliği maddelerin fiziko-kimyasal özelliklerine ve uygulanan muamele işleminin etkililiğinin bağlıdır. adsorpsiyon ve biyolojik bozulma yoluyla birçok EDC çıkarılması için önemli ama eksik olabilir. Üçüncül arıtma, kum filtrasyonu gibi (örneğin ozon için) ileri oksidasyon kullanarak gelişmiş tedavi ise EDC kaldırılmasını 7 arttırılmasında etkili olabilir ya da aktif karbon komple kaldırma 7 yakın ulaşmada etkili olabilir. Atıksu arıtma nee için herhangi bir yeni teknoloji değerlendirmesiDS EDC çıkarılması önerilen işlemin etkinliğini belirlemek için. Hedeflenen kimyasal ekotoksikolojisi test birlikte analiz, in vivo ve in vitro biyo-deneylerde kullanılarak dahil testlerin, bir pil, bu amaç için kapsamlı bir veri sağlar. düzenleyici amaçlar için çok yararlı olmasına rağmen, hedeflenen kimyasal analiz sadece izlenir bileşikler (ve spesifik metabolitler) hakkında veri sağlayabilir. Biyolojik tayinler ayrıca aksi halde 8,9 tespit edilmemiş olacaktır yan ürünleri metabolitleri ve tedavi oluşturulan atık su dönüşümün olumsuz etkileri &quot;algılama&quot; izin verir. Bu yazıda ham östrojenik etkiye ve tedavi kanalizasyon kaldırılması ve alıcı su ortamlarında gelişmiş ve gelişmekte olan atıksu arıtma süreçlerinin bir dizi etkinliğini değerlendirmek için kimyasal ve ekotoksisitesi laboratuvar deneyleri bir pil kullanımını açıklamaktadır.

<table><tbody><tr><td>Wellwash Versa plaka yıkayıcı</td><td>Thermo Scientific</td><td>5165010</td><td></td></tr><tr><td>Plaka okuyucu</td><td>Moleküler Cihazlar</td><td>SpectraMax 340PC</td><td></td></tr><tr><td>İnkübatör</td><td>Memmert</td><td>INB 400</td><td>37 & # 176; Sazan tahlili için C inkübasyonu gereklidir</td></tr><tr><td>Fisherbrand jakuzi Fisher</td><td>Scientific</td><td>13214789</td><td></td></tr><tr><td>Buz yapıcı</td><td>Scotsman</td><td>AF80</td><td></td></tr><tr><td>12 Kanallı F1 dijital çok kanallı pipet</td><td>Thermo Scientific Finnpipette</td><td>4661070</td><td></td></tr><tr><td>ELISA kitleri</td><td>Biosense Laboratuvarları</td><td>V01018401-096 (Fathead minnow) V01003402-096 (Sazan)</td><td></td></tr><tr><td>Mikrofuj tüpleri, 0.5 ml</td><td>Alfa laboratuvarları</td><td>LW2372</td><td></td></tr><tr><td>Mikrofüj tüpleri, 1.5 ml</td><td>Alfa laboratuvarları</td><td>LW2375</td><td></td></tr><tr><td>Sülfürik asit, %95-98</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>258105</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Histoloji</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Doku işlemcisi</td><td>Leica Biosystems</td><td>TP1020</td><td></td></tr><tr><td>Balmumu dağıtıcı</td><td>Thermo Scientific Raymond Lamb</td><td>E66HC</td><td></td></tr><tr><td>Metal gömme kalıbı</td><td>Leica Biosystems</td><td>Çeşitli</td><td></td></tr><tr><td>Sıcak plaka</td><td>Thermo Scientific Shandon</td><td>3120063</td><td></td></tr><tr><td>Soğuk plaka (EG1150 C)</td><td>Leica Biosystems</td><td>14038838037</td><td></td></tr><tr><td>Isıtmalı forseps (EG F)</td><td>Leica Biosystems</td><td>14038835824</td><td></td></tr><tr><td>Microtome</td><td>Leica Biosystems</td><td>RM2235</td><td></td></tr><tr><td>Parafin bölümü yüzdürme ve banyo</td><td>Elektrotermal</td><td>MH8517</td><td></td></tr><tr><td>Slayt kurutma tezgahı</td><td>Elektrotermal</td><td>MH6616</td><td></td></tr><tr><td>Stainmate otomatik boyayıcı</td><td>Thermo Scientific Shandon</td><td>E103/S10L</td><td></td></tr><tr><td>Kasetler, Histosette II, biyopsi</td><td>Simport</td><td>M493</td><td></td></tr><tr><td>Parafin mumu</td><td>Thermo Scientific Raymond Kuzu</td><td>W1</td><td></td></tr><tr><td>Histo-Clear II</td><td>Ulusal Teşhis</td><td>HS-202</td><td></td></tr><tr><td>IMS (etanol karışımı), IDA99</td><td>Tennants</td><td>ID440</td><td></td></tr><tr><td>Polisin yapışma kızakları</td><td>Thermo Scientific Gerhard Menzel</td><td>J2800AMNZ</td><td></td></tr><tr><td>Kapak kaymaları, 22x50 mm</td><td>VWR</td><td>631-0137</td><td></td></tr><tr><td>Histomount</td><td>Ulusal Teşhis</td><td>HS-103</td><td></td></tr><tr><td>Hematoksilen Harris GURR</td><td>VWR</td><td>351945S</td><td></td></tr><tr><td>Eozin, %1, sulu</td><td>Piramit İnovasyonu</td><td>S20007-E</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand sürgülü kutular Fisher</td><td>Scientific</td><td>11701486</td><td></td></tr><tr><td>Mikrotom bıçakları, MB35</td><td>Thermo Scientific Shandon</td><td>3050835</td><td></td></tr><tr><td>Bouin' s çözümü</td><td>Sigma Aldrich</td><td>HT10132-1L</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Maya ekranı</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Akış kabini</td><td>Labcaire Systems Ltd</td><td>SC12R</td><td></td></tr><tr><td>Soğutmalı inkübatör</td><td>LMS Soğutmalı İnkübatör</td><td>303</td><td></td></tr><tr><td>İnkübatör</td><td>Memmert</td><td>INB 400</td><td></td></tr><tr><td>Çalkalayıcı</td><td>Hibe</td><td>PSU-10i</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand jakuzi</td><td>Fisher Scientific</td><td>13214789</td><td></td></tr><tr><td>Plaka çalkalayıcı</td><td>Heidolph Titramax 100</td><td>544-11200-00</td><td></td></tr><tr><td>12 Kanallı F1 dijital çok kanallı pipet</td><td>Thermo Scientific Finnpipette</td><td>4661070</td><td></td></tr><tr><td>12 kanallı pipet, elektronik</td><td>Sartorius</td><td>735441</td><td></td></tr><tr><td>96 kuyulu düz tabanlı mikroplakalar</td><td>MP Biyomedikal Thermo Scientific Nunc Sarstedt</td><td>76-232-05 260860 82.1581.001</td><td>Bu çok kuyulu plakaların hepsinin düşük arka planlar ürettiğini bulduk</td></tr><tr><td>HPLC sınıfı su</td><td>Rathburn</td><td>RH1020</td><td></td></tr><tr><td>Mutlak etanol</td><td>Hayman Kimia</td><td>F200238</td><td></td></tr><tr><td>Potasyum fosfat monobazik susuz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P-5655</td><td></td></tr><tr><td>Amonyum sülfat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A-2939</td><td></td></tr><tr><td>Potasyum hidroksit, peletler</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P-1767</td><td></td></tr><tr><td>Magnezyum sülfat, susuz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M-2643</td><td></td></tr><tr><td>Demir (III) sülfat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>307718</td><td></td></tr><tr><td>L-Lösin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L-8912</td><td></td></tr><tr><td>L-histidin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H-6034</td><td></td></tr><tr><td>Adenin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A-2786</td><td></td></tr><tr><td>L-Argenin,</td><td>hidroklorür Sigma-Aldrich</td><td>A-6969</td><td></td></tr><tr><td>L-Metionin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M-5308</td><td></td></tr><tr><td>L-Tirozin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T-8566</td><td></td></tr><tr><td>L-İzolösin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I-7403</td><td></td></tr><tr><td>L-Lizin, hidroklorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L-8662</td><td></td></tr><tr><td>L-Fenilalanin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P-5482</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamik asit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G-8415</td><td></td></tr><tr><td>L-Valin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>V-0513</td><td></td></tr><tr><td>L-serin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S-4311</td><td></td></tr><tr><td>Tiamin, hidroklorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T-1270</td><td></td></tr><tr><td>Piridoksin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P-5669</td><td></td></tr><tr><td>D-Pantotenik asit, hemikalsiyum tuzu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P-5155</td><td></td></tr><tr><td>İnositol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I-5125</td><td></td></tr><tr><td>D-Biotin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B-4639</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-Glukoz susuz; karışık anomerler</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G-7021</td><td></td></tr><tr><td>L-Aspartik asit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A-4534</td><td></td></tr><tr><td>L-Treonin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T-8441</td><td></td></tr><tr><td>Bakır(II) sülfat, susuz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C-1297</td><td></td></tr><tr><td>Klorofenolred-&#946;-D galaktopiranosid (CPRG)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>10884308001</td><td></td></tr><tr><td>Gliserol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G-2025</td><td></td></tr><tr><td>17 ve beta;-Estradiol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E-8875</td><td></td></tr> <tr><td>< güçlü > Steroidler< / güçlü ></td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Aseton</td><td>Rathburn</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Asetonitril</td><td>Rathburn</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Amonyak çözeltisi</td><td>Rathburn</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Etilasetat</td><td>Rathburn</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bakır (II) nitrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Aseton</td><td>Rathburn</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Diklorometan</td><td>Rathburn</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2,4,16,16-d4-17&#946;-estradiol</td><td>CDN İzotopları</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2,4,16,16-d4-estron</td><td>CDN İzotopları</td><td></td><td></td></tr><tr><td>2,4,16,16-d4-17&#945;-etinil östradiol</td><td>CDN İzotoplar</td><td></td><td></td></tr><tr><td>17&#946;-estradiol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Estrone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>17&#945;-etinil östradiol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hekzan</td><td>Rathburn</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hidroklorik asit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sodyum hidrojen karbonat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sodyum hidroksit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stiren divinil benzen kartuşu (Çözünen ENV+) katı faz ekstraksiyon kartuşu (200 mg/6 ml)</td><td>Biyotaj</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Çözünen aminopropil katı faz ekstraksiyon kartuşu (500 mg/6 ml)</td><td>Biyotage</td><td></td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Balık çalışması</Güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Turuncu-Beyaz Silikon Manifold Boru 0.63 Delik Pk 6</td><td>Watson Marlow</td><td>982.0063.000</td><td></td></tr><tr><td>0.5 / 0.8 delik pk 20 için düz konektörler</td><td>Watson Marlow</td><td>999.2008.000</td><td></td></tr><tr><td>pomsil silikon boru 0.8 delik 15 m</td><td>Watson Marlow</td><td>913.A008.016</td><td></td></tr><tr><td>200 serisi çok kanallı persitaltic pompa</td><td>Watson Marlow</td><td>205CA</td><td></td></tr><tr><td>Silikon boru x 15 m (dozaj tankları)</td><td>VWR</td><td>SFM1-3250</td><td></td></tr><tr><td>silikon boru x 15 m (giriş/çıkış için büyük)</td><td>VWR</td><td>SFM1-5450</td><td></td></tr><tr><td>2,5 L cam winchester pk 4</td><td>Fisher Scienctific</td><td>BTF-505-050B</td><td></td></tr><tr><td>manyetik karıştırma çubuğu 51 x 8 mm pk 10</td><td>Fisher Scienctific</td><td>FB55595&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Etil 3-aminobenzoat metansülfonat (MS222)</td> <td>Sigma Aldrich</td><td>E10521-10G</td><td></td></tr><tr><td>17&alfa;-Etinylestrodiol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E4876-100MG</td><td></td></tr><tr><td>Mutlak etanol</td><td>Hayman Kimia</td><td>F200238</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>SPE</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1/8 inç PTFE tüpler 'pipetler' renk kodlu pk 4</td><td>Sigma Aldrich</td><td>57276</td><td></td></tr><tr><td>manifold için tek kullanımlık gömlekler</td><td>Sigma Aldrich</td><td>57059</td><td></td></tr><tr><td>fritsiz filtrasyon tüpleri 6 ml pk 30</td><td>Sigma Aldrich</td><td>57242</td><td></td></tr><tr><td>rezervuar adaptörleri pk 12</td><td>Sigma Aldrich</td><td>57020-U</td><td></td></tr><tr><td>manifold pk 4 için paslanmaz çelik ağırlık</td><td>Sigma Aldrich</td><td>57278</td><td></td></tr><tr><td>manifold pk 12</td> <td>için erkek Luer fişiSigma Aldrich</td><td>504351</td><td></td></tr><tr><td>SPE Vakum Manifoldu</td><td>Sigma Aldrich</td><td>57265</td><td></td></tr><tr><td>ekstraksiyon ana kadı için durdurma muslukları (supelco) pk 12</td><td>Waters</td><td>WAT054806</td><td></td></tr><tr><td>Sep-Pak Plus C18 kartuş kutusu 50&nbsp;</td><td>Sular</td><td>WAT020515</td><td></td></tr><tr><td>Metanol HPLC sınıfı 2,5 L</td><td>Fisher Scientific</td><td>M/4056/17</td><td></td></tr><tr><td>7 ml kapaklı cam şişeler (58 x 17 mm) pk 399</td><td>Fisher Scientific</td><td>TUL-520-031K</td><td></td></tr><tr><td>Mutlak etanol</td><td>Hayman Kimia</td><td>F200238</td><td></td></tr><tr><td>vakum pompası, örn., VP Serisi Vakum Pompası</td><td>Camlab</td><td>1136915</td><td></td></tr></tbody></table>

atıksu arıtma süreçlerinin etkinliğinin değerlendirilmesi için kimya ve ekotoksikolojik yöntemlerinin bir pil kullanılması östrojenik potency çıkarmak

Use of a Battery of Chemical and Ecotoxicological Methods for the Assessment of the Efficacy of Wastewater Treatment Processes to Remove Estrogenic Potency

Endokrin Bozucu Bileşikler sucul ortam için önemli bir risk oluşturmaktadır. Etinilistradiol (EE2) ve estron (E1), yakın zamanda Avrupa Su Çerçeve Direktifi kapsamında çevresel kirleticilerin izleme listesine dahil edilmiştir. Belediye atık su arıtma tesisleri, yüzey sularının östrojenik gücüne önemli katkıda bulunur. Atık su arıtma tesisi (AAT) atık sularının östrojenik potansiyelinin çoğu, bu maddelerin arıtma tesisinde eksik uzaklaştırılması nedeniyle estradiol (E2), EE2 ve E1 dahil olmak üzere steroid östrojenlerin deşarjına bağlanabilir. Atık su arıtma proseslerinin etkinliğinin değerlendirilmesi, çoğunlukla kimyasal analiz yöntemleri kullanılarak gerçekleştirilen tek tek maddelerin kantitatif olarak belirlenmesini gerektirir. En sık kullanılan yöntemler arasında Gaz Kromatografisi-Kütle Spektrometresi (GCMS/MS) veya çoklu reaksiyon izleme (MRM) kullanan Sıvı Kromatografisi-Kütle Spektrometresi (LCMS/MS) bulunur. Düzenleyici amaçlar için çok yararlı olmasına rağmen, hedeflenen kimyasal analiz yalnızca izlenen bileşikler (ve spesifik metabolitler) hakkında veri sağlayabilir. Ekotoksikoloji yöntemleri ayrıca, üretilen herhangi bir yan ürünün veya mevcut bilinmeyen östrojenik bileşiklerin de biyolojik aktivitelerinin ölçülmesi yoluyla değerlendirilmesini sağlar. Atık su numunelerinin östrojenik aktivitesini ölçmek için Maya Östrojen Ekranı (YES) dahil olmak üzere bir dizi in vitro biyo-analiz mevcuttur. İn vivo ve in vitro biyo-tahlillerle bağlantılı kimyasal analiz, östrojenik endokrin bozucu bileşiklere göre atık su arıtma proseslerinin etkinliğinin ve uygunluğunun değerlendirilmesi için yararlı bir araç kutusu sağlar. Bu makale, laboratuvar ve saha çalışmalarında konvansiyonel, gelişmiş ve gelişmekte olan atık su arıtma süreçlerini değerlendirmek için bir dizi kimyasal ve ekotoksikoloji testi kullanmaktadır.

Girişimleri atıksu arıtma süreçleri iyileştirme etkisini anlamak için ya da boşalmış atık endokrin bozan aktivitesinin kaldırılması etkinliği açısından AAT mevcut en yüksek tedavi olarak ekipman güçlendirme için en uygun teknolojiyi belirlemek için, anahtar kimyasal ölçümünü sadece gerektirir işleri girmek değil, aynı zamanda endokrin bozan aktiviteye sahip olabilir yıkım ürünlerinin analizini gerektirir bileşenleri. Evsel atık atık, bu en estrojenik maddeler, steroid hormonlar, estron (E1) 17β-estradiol (E2) ve 17α-etinilestradiol (EE2) 5,8 bulunmaktadır. Steroid estrojenler esas aktif olmayan konjugatlarının 16,17 bir karışımı olarak vücuttan atılır. Bu konjuge östrojenler ölçüde bakteriyel aktivite ile kanalizasyon sistemine ayrıştırdığından ve daha fazla bozulma AAT oluşur. ayrıştırdığından steroidler aradsorpsiyon yoluyla atık su akışından çıkarıldı e çamur ya da oluşumu ile sonuçlanan ikincil tedavi sırasında biyolojik olarak parçalanır, öncelikle dönüşüm yan ürünleri ve sonuçta tam mineralizasyon ilk aktif bileşen oluşabilir için. çıkış akımındaki tüm tek tek bileşiklerin kimyasal analiz zaman alıcı ve pahalı bir zor olacak ve bir numune içinde mevcut bilinmeyen aktif bileşenleri kapsamaz olacaktır. Ayrıca, her bir bileşenin estrojenik bir miktar, sadece analiz bileşiklerin bir numunesinin kümülatif estrojenik potansiyelleri estradiole göre bir göstergesini sağlayacaktır. Bu dönüşüm süreçleri bilinmeyen östrojenik maddeler ya da nerede içeri giren endüstriyel kaynaklı olduğunu oluşturmak bir risktir. In vivo ve in vitro ekotoksikolojisi biyo-deneylerde kimyasal analizi birleştiren gibi muamele edilmiş kanalizasyon gibi karışımlar bilinmeyen estrojenik bileşenlerin varlığı için bir çözüm sağlar. Maya östrojen Scr gibi in vitro deneylerleeen (VAR) kanalizasyon atık östrojenik aktivitesini belirlemek için ve işlenmiş numuneler 8,18,19 aktif bileşenleri tanımlamak için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, in vivo ve in vitro ile test karşılaştırmalar 11 önemli olabilir ve endokrin bölücü potens tedavisi ile ilgili olarak, yeni işlemler kapsamlı bir değerlendirme, kimyasal ve ekotoksikolojisi testlerin bir pil gerektirir. Bireysel arıtma tesisleri veya işlemler atık akımından aktif bileşikleri çıkarmak olmadığının belirlenmesi Örnek ekstraksiyonu, konsantrasyon ve özü, analizden önce temizlenmesi takip kimyasal analiz kullanılarak elde edilebilir, genellikle LCMS (/ MS) veya GCMS kullanılarak yapılan (/ MS) yöntemleri. Bireysel etkisiz konsantrasyonlar (PNEC) 20 veya çevresel kalite standardı tahmin kimyasal analizinden elde edilen veriler uygunluğunu belirlemek için kullanılabilirs (EQS) özel bireysel bileşiklerin 21 ve bu nedenle bu tür yöntemler yasal uyumluluk verileri için hayati önem taşımaktadır. Bundan başka, hedef ya da hedef olmayan kimyasal analiz yöntemleri toplam yanıt sağlamak, biyolojik yöntemler ile karşılaştırıldığında, tek tek bileşiklerin ya da izomerlerin tanımlanması ve kantitatif sağlar. Kimyasal analiz yöntemleri, bu nedenle ayrı bileşiklerin değerlendirilmesi karşılamak ve bireysel arıtma tesisi bazında bu atıksu arıtma sorunlarını çözmek için yapılabilir izin verir. Çalışmalar sentetik hormon çıkarılması EE2 daha az etkili olma eğilimindedir, ancak geleneksel bir atık su muamele (örneğin, aktif çamur bitkiler), doğal steroid hormon çıkarılması son derece etkili olduğunu göstermiştir. bunlar pred aşağıda EE2 kaldırmak için bir uç boru-çözeltisi olarak kullanılabileceğini ozon gibi teknikler kullanılarak, gelişmiş tedavi ile alan çalışmaları, granül aktif karbon (GAC) ve membranlar, yüksek maliyetli olsa göstermiştiretki seviyeleri icted ve algılama sınırları aşağıda. Şekil 3 pilot ölçekli belediye atık su arıtma tesisinde GAC kullanarak EE2 kaldırılmasını gösterir. Boru GAC tedavisinin ucunu kullanarak belediye atık su arıtma tesislerinde pilot ölçekte yapılan çalışmalar da östrojenik etki gücü azalma GAC aşağıdaki Şekil 4&#39;te görüldüğü gibi Maya Östrojen Ekranı (EVET) kullanılarak ölçülür gösteriyor. <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/54243/54243fig3.jpg" /> Şekil 3. gelişmiş üçüncül tedavi sonrası etinilestradiol kaldırılmasını gösteren örnek alan verisi. (A) Numuneler numune korunması için açıklanan prosedürler izlenerek, geleneksel (aktif çamur tesisi) tedavi sonrasında AAT tahsil edilir. (B) Numuneler normal faz SPE kullanarak müdahale maddeleri kaldırmak için katı faz ekstraksiyon, temizlenmiş-up kullanılarak ayıklanır veJel geçirgenlik kromatografisi. (C), temiz, konsantre edilmiş ekstrakt düşük bir hacme konsantre edildi ve MRM modunda negatif iyon elektrosprey LCMS / MS ile analiz edilir. Sonuçlar izotopik iç standartlarını kullanarak iç standardizasyon kullanılarak hesaplanır. Gösterilen örnekte, EE2 0.1 ng / L öngörülen etkisiz seviyeye (PNEC) üstünde bir konsantrasyonda nihai ASP çıkış maddesi içinde mevcut olan ve GAC ve ozon kullanılarak çıkarılır (O 3) çevresel olarak güvenli bir konsantrasyona seyreltildi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54243/54243fig3large.jpg" target="_blank">Burada tıklayın Bu rakamın büyük bir versiyonunu görmek için.</a> <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/54243/54243fig4.jpg" /> Bir Maya Östrojen Ekranı (EVET) tahlil plaka (A), sarıdan kırmızıya renk değişikliği gösteren örneklerin östrojenik aktiviteye ilişkin Şekil 4. Fotoğraf. EVET tahlil plaka gösteren oluşturulan araziler absorbans düzeltilmiş (540Estradiol standart (B) nm), aktif çamur çıkış (ASP) ve granül aktif karbon (GAC) ile muamele atık çıkış maddesi örnekleri (C). Her numune iki kez test edilmiştir. ASP ve GAC atıkları ayıklanır ve bölüm 1&#39;de belirtilen SPE yöntemleri kullanılarak konsantre edilmiştir <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54243/54243fig4large.jpg" target="_blank">bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> Ozonlama Ayrıca, geleneksel olarak işlenmiş atık su işleme tesisleri, steroid östrojen ve östrojenik aktivite giderilmesinde etkilidir. Ozon atık su numuneleri bir organik kirletici maddelerin geniş ve çözünmüş organik madde oksitleyebileceğini ve dezenfeksiyon özellikleri sağlar. ozonlama etkinliği pH, organik madde miktarına ve ozon uygulanan doz su özelliklerine bağlıdır. Kötü geleneksel muamele ile çıkarılır östrojenler olabilir0.8 ve 2 mg O 3 / mg DOC arasındaki dozlarda atık çıkarıldı. Ozon EDC bir dizi dökümü için uygulanabilir ozon yapan elektron yönünden zengin bir bölgede (doymamış karbon-karbon bağları, aromatik alkoller dahil olmak üzere aromatik bileşikler), ile reaksiyona giren bir seçici oksitleyici maddedir. Bununla birlikte, tek tek bileşiklerin ortadan kaldırılması gerekli orijinal bileşiğe tam mineralizasyon yol açmaz. Organik maddeler, aşağıdaki ozonlama yan ürünler, düşük molekül ağırlıklı bir dizi içerir üreten ara maddeleri ya da dönüşüm oksidasyon transforme edilebilir, aldehidler, ketonlar, karboksilik asitler, keto asitler ve bromlu bileşikler gibi bileşiklerin, polar sınıfları. Örnekler, bromat, formaldehit, asetaldehit ve karboksilik asitler yer alır. In vivo kullanma ve in vitro biyo-deneylerde ozon kısmen bazı kimyasal maddeler okside olmasına rağmen, elde edilen önemli bir transformasyon ürünleri daha düşük bir estrog sahip olduğu gösterilmiştirENIC gücü ve dolayısıyla östrojenik aktivitenin yüksek çıkarılmasına uygun bir doz sonuçlara ozon uygulanması. atıksuların ek tedavi önemli faydalarından biri alıcı su ortamlarında erkek balıkların feminizasyonu azalma olduğu; azaltılmış doğurganlık 3 yol açabilir olumsuz etkisi. balık kullanılarak in vivo çalışmalar (örneğin, hamamböceği ya da fathead minnow) (Şekil 5&#39;de görüldüğü gibi, örneğin) erkek balıkların testiste atıksu gösterisi dişi germ hücreleri veya oosit maruz. Interseks veya erkek VTG yoktur ya da önemli ölçüde bu tür GAC 7 veya ozon 22 gibi gelişmiş tedavi sonrası balık azaltılır. Bu çalışmalar, ancak bu üretilen çıkış maddesinin toksikliğini hitap etmez, ozonasyon sırasında üretilen dönüşüm ürünleri estrojenik olmadıklarını göstermektedir. Bu sorun, örneğin, diğer çalışmalarda Magdeburg ve arkadaşlarının çalışması ele alınmıştır. <syan ürünleri ozon oksidasyon gökkuşağı alabalığı için toksik ama bu toksisite ozonlama aşağıdaki aşağı kum filtre edilerek uzaklaştırıldı edilebileceğini göstermektedir&gt; 23 kadar. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/54243/54243fig5.jpg" /> Normal bir erkek (A) ve interseks Şekil 5. Fotomikrografları (B, C) ​​alan bazlı değerlendirme. Photomicrograph-A atıksuların maruz kalan yetişkin roach (Rutilus Rutilus) dan gonadlar, normal erkek testis histolojik bölüm göstermektedir. Fotomikrografıdır-B ve C, altı ay boyunca aktif çamur prosesi atiksuyun maruz kalmış bir interseks erkek balık histolojik bölümleri, göstermektedir. Oklar testis dokusunda bulunan oosit göstermektedir. Ölçek çubuğu her fotomikrografiyle 100 mikron temsil etmektedir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54243/54243fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <p class="jove_content" fo:keep-together.within-page = &quot;1&quot;&gt; ozon, GAC veya membran teknolojisini kullanarak boru tedavi sonunda yüksek maliyetli bir alternatif daha düşük maliyetle geliştirilmesini gerektirmektedir, kimyasal (EDC) çıkarılmasını bozmakta endokrin için sürdürülebilir yöntemler. Ayrıca, soğurma ve ayırma yöntemleri, sadece yıkımı yoluyla ortadan kaldırarak yerine başka bir fazdan EDC ayırın. 26 - TAML aktivatörleri atık 12,24 içinde organik mikro hidrojen peroksit oksidasyonu katalize etmek için geliştirilmiştir. TAML etkili bir saf laboratuvar suda yanı sıra belediye atıksu arıtma tesislerinden gelen atık ve çivili idrar örneklerinin 12 EE2 ve diğer steroid östrojen aşağılamak O 2 H 2 ile aktivatörlerinin. Laboratuar çalışmaları, TAML / H 2 O 2 tedavisi EVET biyoassay ve substantia kullanılarak in vitro ölçülen östrojenik aktiviteye EE2 çıkarılması dahil olmak üzere yüksek steroid östrojen temizlenmesini sağlar ve önemli ölçüde düşürdüğünü göstermektedirlly VTG biyoassay (Şekil 1 ve Şekil 6) kullanılarak ölçüldü vivo balık feminizasyon azalır. <img alt="Şekil 6," src="/files/ftp_upload/54243/54243fig6.jpg" /> Şekil 6. Ortalama EE2 konsantrasyon ve estrojenik etkinlik tedavi edilen ve edilmeyen tankı sular (A) ve başlangıç ​​plazma vitelogenin ve açıkta kalan bir erkek balık (B). A) EE2 konsantrasyonu (ng / L, koyu mavi bar) LCMS / MS ile ölçülmüştür , östrojenik aktivite (EE2 eşdeğer ng ​​/ L, koyu yeşil çubuklar) (EVET) in vitro Maya Östrojen Ekran ile ölçüldü. B) Plazma vitellogeninin (erkek fathead minnows içinde / ml, açık mavi bar) konsantrasyonu ng kantitatif enzim aracılığıyla ölçüldü immünosorbent deneyi (ELISA) -bağlı. Olarak rapor EE2 kimyasal analiz sonuçları &lt;0.03 ng / L EE2 (yani, saptama sınırı (LOD) daha düşük), yani (yarım LOD sahip olarak tedavi edildi </em&gt; ortalamalar, standart hata ve istatistiksel analiz hesaplamalarında kullanılmak üzere 0.015 ng / L EE2). EE2 ve östrojenik aktivite 21 gün aşırı maruz kalmak örneklenmiş ortalama ölçülen konsantrasyonlar vardır. Plazma VTG maruz kalmadan önce (taban) ve 21 gün maruziyetten sonra ölçülmüştür. Tedavi rejimi oluşuyordu; Negatif kontrol (seyreltme suyu sadece), EE2 + H 2 O 2 + TAML, EE2 + H 2 O 2 ve EE2 sadece. Grafik-A Hata çubukları, ortalamanın standart hatasını temsil etmekte, grafik,-B&#39;de Hata çubukları standart sapmayı temsil etmektedir. Grafik-B barlarda yukarıdaki harfler istatistiksel benzerlik gösterir. Bu rakam Mills ve ark modifiye edilmiştir. 12 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54243/54243fig6large.jpg" target="_blank">bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a>

Endokrin Bozucu Bileşikler (EDC) Akuatik çevre için önemli bir risk oluşturmaktadır. Belediye atıksu arıtma tesisleri yüzey sularının östrojenik etki gücüne önemli katkıda bulunmaktadır. Bu yazıda verilen metodoloji EDC kaldırılması ile ilgili etkinlik ve atıksu arıtma süreçlerinin uygunluğunun değerlendirilmesi için izin verir.

Atıksu Arıtma Süreçlerinin Etkinliğinin Değerlendirilmesi için Kimya ve Ekotoksikolojik Yöntemlerinin bir pil kullanılması östrojenik Potency çıkarmak

Endocrine Disrupting Compounds pose a substantial risk to the aquatic environment. Ethinylestradiol (EE2) and estrone (E1) have recently been included in ...

Analitik kimya ile in vitro ve in vivo yöntemleri içeren burada özetlenen test serisinin genel amacı, östrojenik kirleticileri gidermede gelişmekte olan ve yeni atık su arıtma teknolojilerinin etkinliğini belirlemektir. Bu yöntemler, örneğin atık suyun değişken östrojenik gücü göz önüne alındığında en etkili atık su arıtma süreçlerinin seçilmesi gibi çevre mühendisliğindeki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniklerin temel avantajı, aktif bileşiklerin çok düşük konsantrasyonlarına karşı hassas olmaları ve böylece sucul yaşamı korumak için en iyi teknolojileri ortaya koymalarıdır.Prosedürler, doktora sonrası araştırmacı Dr. Chris Green, lisansüstü öğrenci Angela Pinzon, araştırma görevlisi Dr. Alice Baynes ve kıdemli araştırma teknisyeni Nicola Beresford tarafından gösterilecektir. SPE işlemi, numunenin kontamine olmasını önlemek için temizlik ve düzen konusunda titiz bir dikkat gerektirir. Tüm tüpleri, muslukları ve fritleri metanol ile ön temizlemeden geçirin.Numuneleri çalıştırmadan önce, transfer hatlarını ekstraksiyon manifolduna bağlayın ve tüm sistemi deiyonize su ile durulayın. Numuneleri çalıştırmak için öncelikle tek kullanımlık valf astarlarını, ardından stiren divinilbenzen SPE kartuşlarını takın. Sonrasında, kartuşları şartlandırmak için her bir rezervuara beş mililitre etil asetat pipetleyin.Bu adım sırasında, SPE'nin sızdırmaz olduğundan emin olun. Ardından, 10 milimetre/dakika akış hızı için vakum pompasını çalıştırın. Kartuşlar kurumadan önce, beş mililitre metanol ve ardından beş mililitre su yükleyin.SPE kartuşlarının kurumasının önlenmesi çok önemlidir. Su büyük oranda çekildikten sonra pompayı kapatın ve her bir kartuş rezervuarını suyla doldurun. Ardından, kartuş rezervuarları ile cam numune şişeleri arasına 1/8 inç PTFE tüpler bağlayın.Şimdi, vakumu dakikada 10 mililitrenin altındaki bir akış hızına getirin ve tüm numunenin kartuştan geçmesini sağlayın. Ardından, kartuş içeriği renk değiştirene kadar SPE kartuşlarını iyice kurutun. Bunun için vakum veya bir gaz akışı kullanın.Şimdi, temiz ve kuru, 10 mililitrelik cam toplama tüplerini bir raka yerleştirin ve rağı ekstraksiyon manifoldunun içine yerleştirin. Her bir liner'ın bir tüpün üzerinde olduğunu kontrol edin. Numune rezervuarlarını, toplamda sekiz mililitre olacak şekilde iki kez dört mililitre diklormetan ile doldurun, vakum pompasını çalıştırın ve sıvının SPE'den geçerek toplama tüplerine dolmasını sağlayın.Ardından, tüm toplama tüplerindeki hacmi bir mililitreye düşürmek için bir konsantratör kullanın. Her örneği bir otomatik örnekleyici tüpüne aktarın ve azotla uçurma düzeneği kullanarak hacimleri 100 µL'ye kadar daha fazla konsantre edin. Sürecin bir sonraki aşaması, makromoleküler girişimleri gidermek için GPC kullanmaktır.İlk olarak, elüye edilmiş numune ekstraktının 95 µL'sini GPC donanımlı HPLC'ye enjekte edin. GPC ekstraktını bir konsantratör ve azotlu kurutma düzeneği kullanarak 200 µL'ye kadar konsantre edin ve ardından heksan ile iki mL'ye tamamlayın. Ardından, tek kullanımlık valf astarlarını, amino mor kartuşları ve kartuş rezervuarlarını SPE manifolduna ve 10 mL'lik cam toplama tüplerine takın.Şimdi, kartuşları koşullandırmak için her birine iki mililitre heksan yükleyin ve ardından solventi atın. Sonrasında, GPC örnek ekstraktını rezervuara yükleyin ve vakumla çekin. Ekstrakt toplama tüpünü kenara ayırın ve yıkama işlemini toplamak için rafındaki viyali değiştirin.Ardından, kartuştan hacimce yüzde 30'luk etil asetat ve heksan çözeltisinden iki mililitre geçirin. Daha sonra, iki mililitre daha etil asetat ve heksan ekleyin, ardından yıkama solüsyonu toplama kaplarını atın ve 10 mililitrelik toplama tüpünü rafa geri yerleştirin. Şimdi, rezervuara hacimce yüzde 50'lik etil asetat ve aseton çözeltisinden iki mililitre ekleyin ve pompayı dakikada iki mililitrenin altında düşük bir akış hızında başlatın.Sıvı çekildikten sonra, hazneye iki mililitre daha %50 etil asetat ekleyin. Şimdi, ekstrakt hacmini bir mililitreye düşürmek için bir konsantratör kullanın. Ardından, numuneyi daha küçük bir cam şişeye aktarın ve ekstraktı başlangıç aşamasına kadar uçurmak için nitrojen üfleme ekipmanı kullanın. 100 mikrolitre metanol ekleyin, numuneyi iyice karıştırın ve 0,3 mililitrelik bir insert içeren bir otomatik örnekleyici şişesine aktarın.Ardından, ekstraktın LC-MS/MS analizini gerçekleştirin. Deneye başlamadan bir gün önce taze büyüme besiyeri hazırlayın ve bunu kullanılan HER suşunun tenax bloğu ile eküle edin. Ertesi gün, test kimyasallarının veya atık su ekstraktlarının 100 microliter'lık seri seyreltmelerini ve ardından etanol içinde E2 standart eğrisini hazırlayarak deneye hazırlık yapın.Şimdi, 10 µL'lik alikotları etiketlenmiş steril bir 96 kuyucuklu plakaya aktarın. Ardından, etanolün buharlaşması için plakayı ağzı açık şekilde bırakın. Sonrasında, 0,5 mL CPRG çözeltisi içeren 50 mL büyüme ortamı hazırlayın.24 saatlik maya kültürünün hücre yoğunluğunu tahmin etmek için 620 nanometrede türbülans ölçümü yapın. Ardından, 50 mililitre analiz ortamına 40 milyon maya hücresi ekleyin. İnoküle edilmiş analiz ortamını steril bir hazneye aktarın ve analiz plakası kuyucuklarının her birine 200 mikrolitre ortam aktarmak için çok kanallı bir pipet kullanın.Analiz plakası kapağını kapatın, kenarlarını bantla mühürleyin ve bir plaka sallayıcı kullanarak analiz plakasını iki dakika boyunca kuvvetlice sallayın. Ardından, plakayı doğal havalandırmalı bir ısıtma kabininde 32 Celsius'de inkübe edin. Üç günlük inkübasyonun ardından sallama işlemini tekrarlayın ve ardından mayanın yaklaşık bir saat boyunca çökelmesini bekleyin.Son olarak, örneklerin ışık absorbsiyonunu 540 ve 620 nanometrede ölçün. Çamur sürecini aktive etmek için geleneksel bir atık su arıtma tesisinden alınan su örnekleri, negatif iyon elektrospray LCMS kullanılarak analiz edilmiş ve etinil estradiolün tahmin edilen etkisiz seviyenin üzerinde bir konsantrasyonda mevcut olduğu görülmüştür. Granül aktif karbon veya GAC gibi gelişmiş su arıtma yöntemleri kullanılarak etinil estradiol seviyelerinin önemli ölçüde azaltılması mümkün olmuştur.Tüm atık su ekstraktları, kantifikasyona olanak sağlamak amacıyla izotopik olarak işaretlenmiş bir iç standartla (kırmızı pik) analiz edilmiştir. Maya östrojen tarama testi, standart estradiol'e karşı belirgin şekilde duyarlıydı, ancak esasen boş kontrol (blank) olan etanol'e herhangi bir yanıt vermedi. Maya tarama hücreleri, aktive edilmiş çamur proses çıkış suyuna karşı belirgin şekilde yanıt verirken, GAC ile işlem görmüş çıkış suyu azalmış bir yanıt üretmiş olsa da hala boş kontrolden daha biyolojik olarak aktifti.Bu yeni atık su arıtma teknolojisi kullanılarak, maviyle gösterilen etanol estradiol konsantrasyonu ve yeşille gösterilen östrojenik aktivite, kombine hidrojen peroksit ve TAML işlemi ile önemli ölçüde azaltılmıştır. Atık su arıtma tesisleri, yüzey sularının östrojenik maddelerle kontamine olmasının temel kaynağıdır. Su arıtma süreçlerini iyileştirecek yeni yöntemler, östrojenik aktivitenin derinlemesine test edilmesini gerektirmektedir.Bu videoyu izledikten sonra, su örneklerindeki östrojenik aktiviteyi ölçmek için gerekli olan bir dizi kimyasal ve ekotoksikoloji testini iyi bir şekilde kavramış olmalısınız. Örneklerin ve ekstraktların dikkatli bir şekilde işlenmesiyle, kontaminasyonun minimize edildiğinden emin olmak son derece önemlidir. Örneğin, yaygın olarak kullanılan plastikler östrojenik bileşikler içerir; bu nedenle, kimyasal kontaminasyonu kontrol etmek için negatif kontrollerin ve ekstraksiyon yönteminin çalışıp çalışmadığını ve eklenen östrojenlerin iyi bir şekilde geri kazanıldığını doğrulamak için pozitif kontrollerin dahil edilmesi esastır.

use-battery-chemical-ecotoxicological-methods-for-assessment-efficacy

Research

JoVE Journal

Environment

Çevre

Otomatik ve minyatür bir sistem kullanılarak su örneklerinden östradiolün ekstraksiyonu ve ön konsantrasyonu için bir protokol sunulmuştur.

Küçük Kirleticilerin İmmünolojik Analizi Su Örneklerinin Otomatik Katı Faz Ekstraksiyon Basit Bir Yöntem

Bu el yazması, bir saha taşınabilir elektrikli hücre-substrat empedans sensöründe kullanılmak üzere Gökkuşağı alabalığı solungaç epitel hücreleri ile akışkan biyoçiplerin nasıl hazırlanacağını açıklamaktadır.  Sensörle hızlı bir içme suyu toksisitesi testi yapmak için protokol de açıklanmıştır.

Hazırlık ve Test zehirlilik için hızlı değerlendirme İçme Suyu Örnekleri için RTgill-W1 Hücreleri ile akışkan bioçipler Empedans tabanlı

Arıtılmış atık su ve yüzey (alıcı) suyu dahil olmak üzere su örneklerinin organik ekstraktlarında endokrin aktiviteyi taramak için bir protokol, ticari olarak temin edilebilen bölme tutuklu ("dondur ve çözdür") in vitro transaktivasyon biyotahlilleri kullanılarak uyarlanmıştır.

Su Kullanımı Endokrin Aktivitesi Tarama Piyasada satılan<em&gt; İn Vitro</em&gt; Transaktivasyon biyolojik tayinler

Bu makale, pestisitleri ve su zehirliliğiyle ilişkili diğer kirleticileri gidermek için kentsel yağmursuyu ve tarımsal sulama akışını tedavi eden arıtma sistemlerinin tasarım özelliklerini ve etkinliğini özetler.

Tarım ve Kentsel Akışta Yüzeysel Su Zehirlenmesiyle İlişkili Kirleticilerin Ortadan Kaldırılması İçin Vejetaryan Arıtma Sistemleri

Bu madde miktarının ligandlar kişisel bakım ürünlerinde (PCPs) östrojen reseptörleri alfa (ERα) ve/veya beta (ERβ) bağlamak için bir en iyi duruma getirilmiş Maya östrojen ekran sunar. Yöntem iki Renkölçer substrat seçenekleri, bir altı gün buzdolabında kuluçka kullanılmak üzere lisans dersleri ve veri analizi için istatistiksel araçlar içerir.

Kişisel bakım ürünleri için lisans öğretim laboratuvar bir maya östrojen ekran optimize kullanarak östrojenik ligandlar saptamak

Çevre toxicants maruz akut geliştirme uzun vadeli etkileri ile etkileyebilir. Detaylı iletişim kuralları Bisfenol A. için erken embriyonik pozlama etkisini incelemek için bir etkili lab modelini kullanarak bir strateji göstermek için sağlanan Sağladığımız verimlilik ve bizim yaydıkları pozlama biyo-deneyleri etkinliğini izlemek için davranışsal deneyleri.

Embriyonik maruz kalma düşük doz Toxicants uzun vadeli davranış ve üreme sonuçları

Biz bir protokol zaman uçuş kütle spektrometresi, eczacılık sularda tanımlamak için mükemmel bir araç olarak kullanarak olmayan hedef analizi için mevcut. Biz onların ortadan kaldırılması için UV radyoterapi uygulama göstermek. Işınlama, bileşik yalıtım, kimlik ve kinetik bozulması profilleri modelleme analiz gösterilmektedir.

Eczacılık HPLC-ESI-Q-TOF-MS ve eritromisin fotoğraf kaynaklı bozulması ile ortadan kaldırılması kullanılarak Su ortamındaki tanımlaması

Kantitatif yapı-aktivite ilişkisi (QSAR) modellemesi toksikolojik taramada biyoinformatik destekli bir yöntemdir. Bu protokol, sucul ortamlarda endokrin bozucuların (ED' lerin) risklerinin nasıl hesaplanabildiğini göstermektedir. OECD QSAR Toolbox'ı kullanan protokol, balıktaki ED'lerin toksisitesini analiz etmek için silico bir test uygular.

Endokrin Bozucuların Hesaplamalı SuToksikolojisi için Silico Modelleme Yöntemi: QSAR Toolbox Kullanarak Yazılım Tabanlı Bir Yaklaşım

Kirlilik tüm biyomları etkiler. Deniz ortamları özellikle, özellikle mercan resifleri, dünya üzerindeki en hassas ekosistemler biri etkilenmiştir. Biyoremediasyon, organizmaların kirleticileri bozabilme kapasitesidir. Burada, mercanlar için biyoremediasyon yeteneği ve potansiyel probiyotik özellikleri sunan mikropları izole etmek ve test etmek için metodolojileri tanımlıyoruz.

Metaorganizma Araştırma ve Koruma için Biyoremediasyon ve Probiyotikler Gelişimi için Mikrobiyal Suşların Prospektileri

Burada zebra balığı embriyoları Tg (vtg1: mCherry) östrojenik etkilerinin tespiti için kullanımı için ayrıntılı bir protokol dür. Protokol, balığın yayılmasını ve embriyoların tedavisini kapsar ve endokrin bozucu bileşiklerin (EDC) neden olduğu floresan sinyallerin saptanması, belgelenmesi ve değerlendirilmesini vurgular.

Endokrin Bozan Bileşiklerin Östrojenik Etkilerini Test Etmek Için Tg(Vtg1:mcherry) Zebrabalığı Embriyolarının Kullanılması

Ticari olarak mevcut bir östrojen reseptörü β muhabir testlerini, insan ve insan dışı primat gıdaları östrojenik aktivite için taramak için optimize ettik. Bilinen östrojenik insan gıda soyasının yüksek olduğunu, diğer gıdaların ise hiçbir aktivite göstermediğini göstererek bu tahlilini doğruladık.

Hücre Tabanlı Östrojen Reseptörü Kullanarak Fitoöstrojen taraması β Reporter Assay

Keşfedin atık su arıtma teknolojilerinin östrojenik kirleticileri giderme etkinliğini analitik kimya ve ekotoksikolojik yöntemlerle. Bu hassas teknikler, sucul yaşamı korumak için en iyi arıtma süreçlerini belirlemenize yardımcı olur.

Atıksu Arıtma Süreçlerinin Etkinliğinin Değerlendirilmesi için Kimya ve Ekotoksikolojik Yöntemlerinin bir pil kullanılması östrojenik Potency çıkarmak (Video) | JoVE Journal

Atıksu Arıtma Süreçlerinin Etkinliğinin Değerlendirilmesi için Kimya ve Ekotoksikolojik Yöntemlerinin bir pil kullanılması östrojenik Potency çıkarmak

Daha fazla video keşfet