Name: Gap Junctional Hücreler arası iletişim: Doğal Ürünler Toksikantların ve Toksinler Yan Etkileri değerlendirmek için Fonksiyonel Biyomarker ve Sağlık Faydaları (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-12-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 27 s
Description: Öğrenin, memeli hücrelerdeki boşluk bağlantıları aracılığıyla hücreler arası iletişimi ölçmek için basit bir yöntem. Bu teknik, toksikolojide dokuların gelişimini ve bakımını değerlendirmek için hızlı bir analiz sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

NIEHS hibeleri #R01 ES013268-01A2 tarafından desteklenmektedir ve içerikler yalnızca yazarın sorumluluğundadır ve NIEHS'nin resmi görüşlerini temsil etmek zorunda değildir ve CETOCOEN UPgrade proje No. tarafından desteklenmektedir. CZ.1.05/2.1.00/19.0382.

Bu çalışma için protokol sıçanlar insanca ve sıkıntılarını azaltmak için ilgili tedavi edildi sağlamak için Hayvan Bakım ve in vivo deneyler yapılmıştır nerede Japonya Sağlık Bilimleri, National Institutes Kullanımı Komitesi tarafından onaylandı. 1. SL-DT Biyo <ol><li> Eagles ihtiva eden tohum 3 x 10 5 DB-F344 sıçan karaciğer epitel hücreleri 35 üzerine mm çaplı kültür plakaları 37 ° C,% 100 nispi nem (RH),% 5, bir kuluçka makinesi içinde ortam artı% 5 fetal sığır serumu ve kültür hücreleri modifiye CO 2. </li><li> Kültür hücreleri% 100 izdiham (tipik olarak 2 gün) ulaşmak ve aşağıda tarif edildiği gibi hücre istenen deney işlem yürütmek kadar. <ol><li> Doz Tepki Deneyler Davranış <ol><li> 10 ul% 100 asetonitril ve 4 ul, 6 ul fenantren bir 2 mM stok çözeltisi 20 ul ve phenan bir 20 mM stok solüsyonu 8 ul ekleStok çözeltisinin eklenen her birim için büyüme ortamının 2 ml ihtiva eden üç hücre plakalarına, 100% asetonitril threne. </li><li> 4 ul, 6 ul, 8 ul, 10 ul ve araç kontrolü olarak hizmet etmek üzere asetonitril çözeltisi eklenen her birim için büyüme ortamının 2 ml ihtiva eden üç hücre plakaları asetonitril% 100 çözeltisi 20 ul ekle. </li><li> 37 ° C'de,% 100 nem ve% 5 CO2 ayarlanmış bir kuluçka makinesi içinde, 15 dakika boyunca inkübe edin. </li><li> 1.3 adıma geçin. </li></ol></li><li> Davranış Zaman Tepki Deneyleri <ol><li> Her bir zaman noktası (yani, 0, 1, 2, 3, 4, 5, 10 dakika) için büyüme ortamına 2 ml ihtiva eden üç hücre plakalarına, 100% asetonitril fenantren bir 20 mM stok solüsyonu 7 ul ekle. </li><li> Her bir zaman noktası, araç kontrolü olarak hizmet etmek için büyüme ortamının 2 ml ihtiva eden üç hücre plakalarına% 100 asetonitril 7 ul ekle. </li><li> Her belirlenen zaman p inkübe37 ° C'de bir inkübatör içinde birleştirme yeri,% 100 nem ve% 5 CO2. </li><li> 1.3 adıma geçin. </li></ol></li><li> Zaman Kurtarma Deneyler Davranış <ol><li> 15 dakika boyunca büyüme ortamına 2 ml ihtiva eden üç hücre plakalarına, 100% asetonitril fenantren bir 20 mM stok solüsyonu 7 ul ekle. </li><li> Araç kontrol olarak hizmet etmek için 15 dakika boyunca büyüme ortamına 2 ml ihtiva eden üç hücre plakalarına% 100 asetonitril 7 ul ekle. </li><li> fenantren veya asetonitril ya da ihtiva eden bir ortam süzün ve fosfat tamponlu tuzlu su, 3 ml (PBS) ile 3 kez her durulama. </li><li> Istenen iyileşme süreleri (yani, 25, 35, 45, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 360 dak), 37 ° C'de bir inkübatörde, 100, her bir plaka taze büyüme ortamına 2 ml ilave edilir ve kuluçkaya % RH ve% 5 CO2. </li><li> 1.3 adıma geçin. </li></ol></li><li> Davranış Mekanizması Deneyleri <ol><li> Sinyal transdüksiyon inhibitörü ekleme örneğin, </li><li> Araç kontrol olarak hizmet etmek için 15 dakika boyunca büyüme ortamına 2 ml ihtiva eden üç hücre plakalarına% 100 asetonitril 5 ul ekle. </li><li> ilave bir 15 dakika boyunca büyüme ortamı artı D609 2 ml ihtiva eden üç hücre plakalarına, 100% asetonitril fenantren bir 20 mM stok solüsyonu 7 ul ekle. </li><li> araç kontrolü olarak hizmet etmek üzere bir 15 dakika daha büyüme ortamı artı% 100 2 ml asetonitril ihtiva eden üç hücre plakalarına% 100 asetonitril 7 ul ekle. </li><li> 1.3 adıma geçin. </li></ol></li></ol></li><li> Ya yavaşça orta kapalı dökerek veya vakum emme ile kültür ortamı atın. Not: Uygun tehlikeli atık içeren kültür ortamı bertaraf edin. </li><li> 3 PBS ml ve betwee tortusundan ayırma veya aspirat ya hücreleri üç kez her durulayınn durular. </li><li> Pipet 1 1 mg / ml Lucifer sarı boya her hücre plaka PBS (LY) içinde çözüldü ml. </li><li> hafifçe plaka, üç farklı alanlarda hücre popülasyonu ile yuvarlatılmış kenarı ile 20. Cerrahi çelik bıçak haddeleme ile hücreler içine boya önceden yükle. <ol><li> Dik neşter (90 ° açı) ve kültür plakasının kenarından 5 mm yerleştirerek başlayın ve 15 ° (Şekil 1 e bakınız) bir açı yaklaşık Bu dik açıdan neşter döndürün. Not: Bu parmağı ve başparmak arasında neşter kısma elde edilir. (Yuvarlak bıçak sadece hücreler üzerinde rulo gibi) neşter yavaşça 15 ° pozisyona 90 ° gitmek için izin yerçekimi kullanın. Bu hareket bir görsel fark girinti hattını bırakacaktır. </li></ol></li><li> Oda sıcaklığında 3 dakika boyunca LY çözeltisi ile inkübe hücreleri. </li><li> Süzün ve LY aspirat ve extrace uzaklaştırmak için PBS 3 ml ile üç kez yıkayınllular hücre dışı arka plan floresan ortadan kaldırmak için boya. </li><li> hücrelerin tespit edilmeleri için,% 10 fosfat tamponlu formalin çözeltisi 0.5 ml ilave edilir. Not: formalin giderdikten sonra, hava hücrelerini kurutmak ve LY minimum boya photobleaching ile iki yıla kadar süreyle karanlıkta saklayın. Gerektiğinde, floresan boya ön görselleştirmek için% 10 formalin solüsyonu ile rehidrate. </li><li> 200X büyütmede 428/536 nm uyarım / emisyon tepe için dikroik küp ile donatılmış bir epifluorışıma mikroskop kullanılarak tespit hücreleri gör. girinti hat görme yatay alanına paralel olacak şekilde tüm plakaları aynı hizaya getirin. Not: Bir FITC dikroik küp iyi çalışıyor. <ol><li> bir CCD kamera ve destekleyici yazılım ile görüntü yakalamak. <ol><li> CCD kamera için destek yazılımı açın ve otomatik pozlama ayarlarını kullanın. dijital görüntü elde etmek için "yakalama" düğmesini kullanın. "Kaydet" düğmesini kullanarak dosyaları tif olarak görüntü kaydetme. </li></ol></li></ol></li></ol> Karaciğer Dokusu SL-DT Testi 2. Adaptasyon <ol><li> 5 haftalık, erkek Fischer 344 sıçan kullanarak diseksiyon makas yaklaşık bir karaciğer sol lob 2 x 2 cm dilim çıkarın ve plaka ıslak bir gazlı bez 12 ile kaplı tartmak plastik üzerine yerleştirin. </li><li> Pipet 0.5 ila 1 mg içeren bir PBS çözeltisi / ml Lucifer sarı ve rodamin-dekstran (RD) plastik karaciğer dilimi yüzeyi üzerine ağırlığı plakanın her. Not: RD gap junction kanalları çapraz edemez ve yüklenen hücreleri işaretlemek bir boyadır. </li><li> keskin bir bıçak ile tartın plaka boya çözümü vardır karaciğer dilim yüzeyinde yaklaşık 1 cm uzunluğunda üç beş kesiler yapmak ve daha sonra kesi doldurmak için yeterli ek boya ekleyin. </li><li> plaka ağırlık plastik, oda sıcaklığında 3 dakika boyunca doku inkübe edin. </li><li> 5 ml PBS ile üç kere yıkayın. </li><li> Doku ove Fixoda sıcaklığında karanlıkta bir 50 mL konik santrifüj tüpü içinde% 10 fosfat tamponlu formalin 30 ml rnight. </li><li> Ertesi gün, su ile dilimleri yıkayın 1 x 1 x 0.5 cm 3 şeritler halinde makas diseksiyon ile kesi çevresinde doku Döşeme ve daha sonra parafin 13 dilimleri gömmek için standart teknikleri kullanın. </li><li> Bölüm hazır olana kadar karanlıkta 5 mikron kalınlığına insizyon hattına dik dilimleri ve depolamak numuneler mikrotom 13 standart kesit teknikleri kullanarak görüntülü edilecek. </li><li> Bölüm 1.10 7'ye göre floresan boya cephede görüntüleri görselleştirmek ve yakalamak için bir CCD dijital kamera ile donatılmış bir Epifloresans mikroskop kullanın. </li></ol> 3. ükler GJIC <ol><li> (Örneğin, ImageJ) morfometrik yazılım paketi kullanarak floresan boya yayılmasını ölçün. <ol><li> "Dosya" sekmesini tıklayın ve ardından açmak için "açık"kaydedilen görüntü. </li><li> boya ön hatlarını izlemek için Araç Çubuğu Tab "Ücretsiz Hand Tool" üzerine tıklayın. </li><li> "Analiz" sekmesini tıklayın ve ardından "Ölçü" butonuna tıklayınız. Not: Bu istenirse diğer tablolama programları içine kopyalanabilir bir tablosunu, bir alan değeri üretecektir. </li></ol></li><li> Bir tablo programı kullanarak, boya aşağıdaki denklem kullanılarak kontrol plakasında, seyahat alanında deneysel plaka boya yayılması alana bölünmesi kontrol (FOC) bölümünü hesaplamak: <img alt="Equation1" src="/files/ftp_upload/54281/54281equation1.jpg"> Bir E = Örneğin, belirli bir dozu veya bir zaman bir kimyasal ile muamele edilen hücreler gibi bir deney değişken maruz kalan hücrelerin, boya yayılması alanı Ilgi kimyasal çözünmesi için kullanılan araç ile tedavi edilen hücreler kontrol boya yayılması, bir c = alan Not: Aracın etkisini belirlemek için,Bir E araçla tedavi edilen hücrelerde, boya yayılması alanı olacak ve bir C araç ile işleme tabi tutulmamış hücreler, boya yayılması alanı olacaktır. aracın etkisi tercihan% 10 daha az olmalıdır. </li></ol>

<ol><li>Rotroff, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictive+endocrine+testing+in+the+21st+century+using+in+vitro+assays+of+estrogen+receptor+signaling+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.Sci.Technol%22%5BJournal%5D)">Predictive endocrine testing in the 21st century using in vitro assays of estrogen receptor signaling responses.</a> Environ.Sci.Technol. 48 (15), 8706-8716 (2014).</li>
<li>Axelsen, L. N., Calloe, K., Holstein-Rathlou, N. H., Nielsen, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Managing+the+complexity+of+communication%3A+regulation+of+gap+junctions+by+post-translational+modification%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Managing the complexity of communication: regulation of gap junctions by post-translational modification.</a> Front Pharmacol. 4, 130(2013).</li>
<li>Nielsen, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gap+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22Compr.Physiol%22%5BJournal%5D)">Gap junctions.</a> Compr.Physiol. 2 (3), 1981-2035 (2012).</li>
<li>Sovadinova, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphatidylcholine+specific+PLC-induced+dysregulation+of+gap+junctions%2C+a+robust+cellular+response+to+environmental+toxicants%2C+and+prevention+by+resveratrol+in+a+rat+liver+cell+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS.One%22%5BJournal%5D)">Phosphatidylcholine specific PLC-induced dysregulation of gap junctions, a robust cellular response to environmental toxicants, and prevention by resveratrol in a rat liver cell model.</a> PLoS.One. 10 (5), e0124454(2015).</li>
<li>Trosko, J. E., Chang, C. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTrosko%2C+JE+%22Biologically+Based+Methods+for+Cancer+Risk+Assessment%22">Biologically Based Methods for Cancer Risk Assessment</a>. Travis, C. C. , Plenum Press. New York. 165-179 (1989).</li>
<li>Trosko, J. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTrosko%2C+JE+%22Biomarkers+and+occupational+health%3A+progess+and+perspectives%22">Biomarkers and occupational health: progess and perspectives</a>. Mendelsohn, M. D., Peeters, J. P., Normandy, M. J. , John Henry Press. Washington D.C. 264-274 (1995).</li>
<li>Upham, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+integrative+signaling+through+gap+junctions+in+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.Protoc.Toxicol%22%5BJournal%5D)">Role of integrative signaling through gap junctions in toxicology.</a> Curr.Protoc.Toxicol. 47, 2.18:2.18.1-2.18:2.18.18 (2011).</li>
<li>Vinken, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connexins+and+their+channels+in+cell+growth+and+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.Signal%22%5BJournal%5D)">Connexins and their channels in cell growth and cell death.</a> Cell.Signal. 18 (5), 592-600 (2006).</li>
<li>Browne, C. L., Wiley, H. S., Dumont, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte-follicle+cell+gap+junctions+in+Xenopus+laevis+and+the+effects+of+gonadotropin+on+their+permeability%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Oocyte-follicle cell gap junctions in Xenopus laevis and the effects of gonadotropin on their permeability.</a> Science. 203 (4376), 182-183 (1979).</li>
<li>El-Fouly, M. H., Trosko, J. E., Chang, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scrape-loading+and+dye+transfer.+A+rapid+and+simple+technique+to+study+gap+junctional+intercellular+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Scrape-loading and dye transfer. A rapid and simple technique to study gap junctional intercellular communication.</a> Exp.Cell Res. 168 (2), 422-430 (1987).</li>
<li>Wade, M. H., Trosko, J. E., Schindler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fluorescence+photobleaching+assay+of+gap+junction-mediated+communication+between+human+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">A fluorescence photobleaching assay of gap junction-mediated communication between human cells.</a> Science. 232 (4749), 525-528 (1986).</li>
<li>Upham, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure-activity-dependent+regulation+of+cell+communication+by+perfluorinated+fatty+acids+using+in+vivo+and+in+vitro+model+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.+Health+Perspect%22%5BJournal%5D)">Structure-activity-dependent regulation of cell communication by perfluorinated fatty acids using in vivo and in vitro model systems.</a> Environ. Health Perspect. 117 (4), 545-551 (2009).</li>
<li>Paraffin Processing of Tissue. Protoplasma. , <a target="_blank" href="http://protocolsonline.com/histology/sample-preparation/paraffin-processing-of-tissue">http://protocolsonline.com/histology/sample-preparation/paraffin-processing-of-tissue</a> (2012).</li>
<li>Trosko, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gap+junctional+intercellular+communication+as+a+biological+%26%2334%3BRosetta+stone%26%2334%3B+in+understanding%2C+in+a+systems+biological+manner%2C+stem+cell+behavior%2C+mechanisms+of+epigenetic+toxicology%2C+chemoprevention+and+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Membr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Gap junctional intercellular communication as a biological &#34;Rosetta stone&#34; in understanding, in a systems biological manner, stem cell behavior, mechanisms of epigenetic toxicology, chemoprevention and chemotherapy.</a> J. Membr. Biol. 218 (1-3), 93-100 (2007).</li>
<li>Upham, B. L., Weis, L. M., Trosko, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulated+gap+junctional+intercellular+communication+as+a+biomarker+of+PAH+epigenetic+toxicity%3A+structure-function+relationship%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.Health+Perspect%22%5BJournal%5D)">Modulated gap junctional intercellular communication as a biomarker of PAH epigenetic toxicity: structure-function relationship.</a> Environ.Health Perspect. 106, 975-981 (1998).</li>
<li>Upham, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+promoting+properties+of+a+cigarette+smoke+prevalent+polycyclic+aromatic+hydrocarbon+as+indicated+by+the+inhibition+of+gap+junctional+intercellular+communication+via+phosphatidylcholine-specific+phospholipase%5BTitle%5D)+AND+%22C.+Cancer+Sci%22%5BJournal%5D)">Tumor promoting properties of a cigarette smoke prevalent polycyclic aromatic hydrocarbon as indicated by the inhibition of gap junctional intercellular communication via phosphatidylcholine-specific phospholipase.</a> C. Cancer Sci. 99 (4), 696-705 (2008).</li>
<li>Sai, K., Kanno, J., Hasegawa, R., Trosko, J. E., Inoue, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+the+down-regulation+of+gap+junctional+intercellular+communication+by+green+tea+in+the+liver+of+mice+fed+pentachlorophenol%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">Prevention of the down-regulation of gap junctional intercellular communication by green tea in the liver of mice fed pentachlorophenol.</a> Carcinogenesis. 21 (9), 1671-1676 (2000).</li>
<li>Upham, B. L., Deocampo, N. D., Wurl, B., Trosko, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+gap+junctional+intercellular+communication+by+perfluorinated+fatty+acids+is+dependent+on+the+chain+length+of+the+fluorinated+tail%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Cancer%22%5BJournal%5D)">Inhibition of gap junctional intercellular communication by perfluorinated fatty acids is dependent on the chain length of the fluorinated tail.</a> Int. J. Cancer. 78 (4), 491-495 (1998).</li>
<li>Trosko, J. E., Tai, M. H. Infections and inflammation: Impacts on oncogenesis. Impacts on Oncogenesis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTrosko%2C+JE+%22Contrib+Microbiol%22">Contrib Microbiol</a>. Dittmar, T., Zaenkar, K. S., Schmidt, A. , Karger. Basel. 45-65 (2006).</li>
<li>Trosko, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+stem+cells+as+targets+for+the+aging+and+diseases+of+aging+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Hypotheses%22%5BJournal%5D)">Human stem cells as targets for the aging and diseases of aging processes.</a> Med. Hypotheses. 60 (3), 439-447 (2003).</li>
<li>JE, T. rosko <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJE%2C+Trosko+%22Stem+Cells+and+Cancer%22">Stem Cells and Cancer</a>. Dittmar, T., Zaenkar, K. , Nova Publishers. New York. 147-188 (2008).</li>
<li>Osgood, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polycyclic+aromatic+hydrocarbon-induced+signaling+events+relevant+to+inflammation+and+tumorigenesis+in+lung+cells+are+dependent+on+molecular+structure%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS.+One%22%5BJournal%5D)">Polycyclic aromatic hydrocarbon-induced signaling events relevant to inflammation and tumorigenesis in lung cells are dependent on molecular structure.</a> PLoS. One. 8 (6), e65150(2014).</li>
<li>Weis, L. M., Rummel, A. M., Masten, S. J., Trosko, J. E., Upham, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bay+or+baylike+regions+of+polycyclic+aromatic+hydrocarbons+were+potent+inhibitors+of+gap+junctional+intercellular+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Environ.Health+Perspect%22%5BJournal%5D)">Bay or baylike regions of polycyclic aromatic hydrocarbons were potent inhibitors of gap junctional intercellular communication.</a> Environ.Health Perspect. 106 (1), 17-22 (1998).</li>
<li>Yotti, L. P., Chang, C. C., Trosko, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elimination+of+metabolic+cooperation+in+Chinese+hamster+cells+by+a+tumor+promoter%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Elimination of metabolic cooperation in Chinese hamster cells by a tumor promoter.</a> Science. 206 (4422), 1089-1091 (1979).</li>
<li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+caged+coumarin+fluorophores+with+extraordinary+uncaging+cross+sections+suitable+for+biological+imaging+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">New caged coumarin fluorophores with extraordinary uncaging cross sections suitable for biological imaging applications.</a> J. Am. Chem. Soc. 126 (14), 4653-4663 (2004).</li>
<li>Goldberg, G. S., Bechberger, J. F., Naus, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pre-loading+method+of+evaluating+gap+junctional+communication+by+fluorescent+dye+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">A pre-loading method of evaluating gap junctional communication by fluorescent dye transfer.</a> Biotechniques. 18 (3), 490-497 (1995).</li>
<li>Ziambaras, K., Lecanda, F., Steinberg, T. H., Civitelli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+stretch+enhances+gap+junctional+communication+between+osteoblastic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.Bone+Miner.Res%22%5BJournal%5D)">Cyclic stretch enhances gap junctional communication between osteoblastic cells.</a> J.Bone Miner.Res. 13 (2), 218-228 (1998).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

SL-DT tahlil GJIC ölçmek basit ve çok yönlü bir tekniktir, ancak uygun deneysel protokolleri tasarlama göz önüne alınmalıdır birçok kritik endişeler vardır. SL-DT tahlili kullanılarak GJIC sağlam ölçümler için hücrelerin gap junction aracılığıyla LY iyi bir boya yayılmış olması gerekir. En azından, uygun bir zaman boya her iki yönde de neşter yüklü hücrelerden hücre sekiz ya da daha fazla sıra yayılır sağlamak için seçilmelidir. Ayrıca, boya neşter yüklü hücrelerin göç mesafesi ölçme kolaylığı için, kontrol levhaları bo...

Bu yöntem genel amacı, bileşiklerin potansiyel toksisite değerlendirmek için basit, kapsamlı ve nispeten ucuz bir teknik sunmaktır. Bu, birden fazla hücre hatlarında kullanılan bir in vitro bir yaklaşımdır. Epifloresans mikroskopları ile donatılmış standart hücre biyoloji laboratuarları bu testi kullanılarak araştırma yapabilir. Hücre fonksiyonlarının temel bilgi, in vitro biyoanalizlere son derece bağımlı olmuştur ve ilaç, çevresel kirleticiler ve gıda doğan kirleticilerin toksikolojik değerlendirmeler önemli bir bileşeni haline gelmiştir. Ne yazık ki, kapsamlı, tüm toksikolojik değerlendirmeler için taleplerini karşılayacak tek in vitro biyoassay sistemi vardır. In vitro deneyler birçok tasarlanmış ve değerlendirmek ve aynı zamanda özel bir biyokimyasal ve moleküler uç noktasını değerlendirmek için optimize edilmiştir. Bunlar oldukça sık bir bir pertürbasyon yansıtmak için kurulmuş bir yüksek verimlilik birleştirilirBu östrojen reseptörü 1 sinyal belirli bir sinyal iletim yolu,. Bu strateji çok başarılı olmuştur, ama gen sentezlenmesine katılan sinyal transdüksiyon yollarının fazla sayıda oldukça karmaşık değerlendirmek için özel bir sinyal yolunu seçmek görevi yapar. Yüksek verimlilikte bir protokoller şu anda geliştirilen ve aynı anda tek tahlillerin bazı zayıf taraflarını bertaraf etmek bir yaklaşım olmuştur sayısız sinyal yolları, ölçmek için kullanılmaktadır. Ancak, tüm sinyal yolları başarıyla daha kapsamlı yaklaşımlar içine dahil edilmiştir, artı yeni sinyal yolları sürekli ileri daha karmaşık hale getirmektedir bu değerlendirme sürecini tespit edilmektedir. Özellikle yüksek verimlilikte bir sistemlerde, in vitro yaklaşımların geniş numaralarını kullanarak, kapsamlı toksikolojik değerlendirmeler de çok pahalı ve en tek araştırmacı için elverişli değildir için araştırma projeleri yürüttü. GJIC bir işlem tıg olduğuhtly zarı ve hücre iskeletinin proteinleri 2,3 ile önemli hücre içi sinyal iletim yolları ve etkileşimler tarafından düzenlenir voltaj değişiklikleri, kalsiyum konsantrasyonu, pH, redoks dengesinin tarafından kontrol edilir. Bu nedenle, GJIC inhibisyonu farklı hücresel stres tipleri, farklı hücresel fonksiyonları kesintiye uğraması ya da farklı sinyal iletim yollarının düzensizlikler yansıtabilir. Sınırlı sinyal iletim biyoanalizlere kullanımını aşmak için başka bir yaklaşım değil, en takdirde, sinyal iletim yolları daha gap junction kanalları 4-8 ile kooperatif arası sinyalizasyon sistemleri tarafından pek modüle edilir biyolojik olayların yararlanmak etmektir. arası sinyal sistemleri de çok sayıda ve çok yolu kontrolü altında olmakla birlikte, boşluk birleşim kanallardan arası sinyal sonuçta kısmen kapalı ya da tamamen kapalı açılan kanalların bir fonksiyonudur. Bu kolayca çeşitli kullanılarak ölçülebilir bir bitiş noktası sağlarnitro biyo-tahlil sistemlerinde 7. Bir doku homeostatik ayar noktası boşluk junctional içi iletişim bileşiklerin etkisini belirleyen, açık kanallar gerektirdiğini düşünürsek (GJIC) bileşiklerin 4,8 potansiyel toksik etkileri belirlemede daha kapsamlı bir yaklaşımdır. Esas olarak, gen ekspresyonunu kontrol çoklu sinyal transdüksiyon olayları koordine merkezi bir rol oynamaktadır, bu kritik bir biyolojik fenomen toksik etkileri geniş bir değerlendirmesi için olanak sağlar. Böylece, GJIC değerlendirmek biyo-bileşiklerin toksik potansiyelini değerlendirmek için mükemmel bir başlangıç ​​noktasıdır. GJIC değerlendirmek için kullanılan en geniş teknikler floresan prob hücreleri ön yükleme ve daha sonra komşu hücrelere yüklenen hücre veya hücrelerden boya geçişini takip dayanmaktadır. Boya önyükleneceği Teknikleri prob 11 yükleme 10, ve metil esterleri kazıyın, mikroenjeksiyon 9 yer var </sus&gt;. Neşter yükleme-floresan boya transferi (SL-DT) yöntemi kazıma yükünün bir değişiklik - El Fouly 10 tarafından geliştirilen aktarım deneyi boya. Aksine daha invaziv scrape daha bu raporun neşter yükleme yöntemi invaziv zararı en aza indirmek hücreleri (Şekil 1) bir tek tabaka ile yuvarlak bıçak ile bir neşter hafif bir rulo içerir. Bu tekniğin avantajları hücreleri yerine mikroenjeksiyon tahlilinin tek hücrelerden oluşan bir popülasyonun toksikolojik değerlendirilmesi bulunmaktadır. Mikroenjeksiyon teknikleri ve fluoresan problar metil esterlerini kullanmak teknikler kullanılarak yöntemleri çok daha fazla zaman alıcı ve önemli ölçüde daha yüksek yetenek ihtiyacı olmasına rağmen Ayrıca, bu deneyde basitliği, kısa sürede çok sayıda levha hızlı tespiti için verir. GJIC okuyan tüm ihtiyaçlarını karşılamak için tek bir yöntem olsa da; SL-DT tahlil o can, basit, oldukça ucuz ve çok yönlü bir testtirÇeşitli bileşiklerin toksisite ilk değerlendirmeler için birçok ihtiyaçlarını karşılamak. Önemli avantajları şunlardır: basitlik, (sıkı bağlamak) deneyi ve moleküler flüoresan prob deneyleri, büyük içinde GJIC arasında hızlı ve aynı anda değerlendirme lokal aktifleştirilmesi ile ışıkla ağartma sonra mikroenjeksiyon, floresan kurtarma gibi diğer yöntemler için gerekli olan ekipman veya beceri için özel bir ihtiyacı in vivo çalışmalar için otomatik floresans mikroskobu görüntüleme ve analiz, hem de kendi ile uyumlu olan bu yüksek işleme kapasiteli bir kurulumu için elverişli hücrelerin sayısı.

<table><tbody><tr><td>WB-F344 sıçan karaciğer epitel hücreleri</td><td>Kuzey Carolina Üniversitesi'nden (Chapel Hill, NC) Dr. J. W. Grisham ve M. S. Tsao'dan</td> <td>hiçbiri</td><td>Kuzey Carolina Üniversitesi-Chapel Hill-NC tarafından sağlandı</td></tr><tr><td>35 mm Kültür Plakaları</td><td>Corning</td><td>430165</td><td></td></tr><tr><td>25 cm2 kültür şişeleri</td><td>Corning</td><td>430639</td><td></td></tr><tr><td>75 cm2 kültür şişeleri</td><td>Corning</td><td>430641</td><td></td></tr><tr><td>D-medium, bir Eagles modifiye besiyeri&nbsp;</td><td>ThermoFisher/GIBCO&nbsp;</td><td>Formül No. 78-5470EF</td><td></td></tr><tr><td>fetal sığır serumu</td><td>ThermoFisher/GIBCO&nbsp;</td><td>10437</td><td></td></tr><tr><td>%0.25 tripsin-EDTA&nbsp;</td><td>ThermoFisher/GIBCO&nbsp;</td><td>15050</td><td></td></tr><tr><td>fosfat tamponlu tuzlu</td><td>su ev yapımı</td><td>malzeme için aşağıya bakın kedi #</td><td>137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2PO4, 2 mM KH2PO4</td></tr><tr><td>KCl JT</td><td>Baker - Mallinckrodt&nbsp;</td><td>3040-01</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>JT Fırıncı - Mallinckrodt&nbsp;</td><td>3624-05</td><td></td></tr><tr><td>Na2HPO4</td><td>JT Baker - Mallinckrodt&nbsp;</td><td>3819--01</td><td></td></tr><tr><td>KH2PO4</td><td>JT Baker - Mallinckrodt&nbsp;</td><td>3246-01</td><td></td></tr><tr><td>Lucifer Sarı CH, lityum tuzu</td><td>Sigma-Aldrich Kimyasal</td><td>L0259</td><td></td></tr><tr><td>rodamin-dekstran</td><td>Sigma-Aldrich Kimyasal</td><td>R9379</td><td></td></tr><tr><td>1-metilantrasen</td><td>Sigma-Aldrich Kimyasal</td><td></td><td></td></tr><tr><td>fenantren</td><td>Sigma-Aldrich Kimyasal</td><td>P11409</td><td></td></tr><tr><td>resveratrol</td><td>Sigma-Aldrich Kimyasal</td><td>R5010</td><td></td></tr><tr><td>D609</td><td>Tocris Biyobilim&nbsp;</td><td>1437</td><td></td></tr><tr><td>asetonitril</td><td>EMD</td><td>AX0145-1</td><td></td></tr><tr><td>%37 çözelti formaldehit</td><td>JT Baker - Mallinckrodt&nbsp;</td><td>2106-01</td><td></td></tr> <tr><td># 20 cerrahi bıçak</td><td>Güzel Bilim Araçları A.Ş. &nbsp;</td><td>10317-14</td><td></td></tr><tr><td>50 ml konik steril tüp</td><td>Thermo Scientific&nbsp;</td><td></td><td></td>339652</tr><tr><td>Nikon epifloresan mikroskobu&nbsp;</td><td>Nikon -Mager Scientific</td><td>Eclipse TE300</td><td></td></tr><tr><td>Nikon FITC dikroik küp</td><td>Nikon -Mager Scientific</td><td>96107</td><td></td></tr><tr><td>CCD fotoğraf makinesi</td><td>Nikon -Mager Scientific</td><td>Nikon Cool Snap EZ CCD</td><td></td></tr><tr><td>görüntüleme sistemi</td><td>Nikon -Mager Scientific</td><td>Nikon NIS-Elements F2.2 görüntüleme sistemi.</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>Ulusal Sağlık</td><td>Enstitüsü http://imagej.nih.gov/ij/</td><td></td></tr></tbody></table>

gap junctional hücreler arası iletişim: doğal Ürünler toksikantların ve toksinler yan etkileri değerlendirmek için fonksiyonel biyomarker ve sağlık faydaları

Gap Junctional Intercellular Communication: A Functional Biomarker to Assess Adverse Effects of Toxicants and Toxins, and Health Benefits of Natural Products

Bu protokol, doku homeostazı muhafaza edildiği bir önemli arası bir süreçtir gap junction kanalları aracılığıyla arası iletişimi ölçen bir neşter yükleme-floresan boya transferi (SL-DT) tekniği açıklar. Vb toksik maddelerin, toksinler, ilaçlar, tarafından boşluk junctional arası iletişim (GJIC) kesilmesi çok olumsuz sağlık etkileri ile bağlantılı olmuştur. Birçok genetik temelli insan hastalıkları gap junction genlerdeki mutasyonlarla bağlantılı olmuştur. SL-DT tekniği hücrelerinin geniş bir popülasyonda GJIC eşzamanlı değerlendirilmesi için basit bir işlevsel tahlildir. Deney kısa hücre popülasyonu ile bir neşter ile hücre zarı bozucu bir floresan boya ile ön yükleme hücreleri içerir. floresan boya sonra belirlenmiş bir süre için hücreler komşu gap junction kanalları aracılığıyla çapraz izin verilir. Bundan sonra, tahlil hücrelere formalin ilavesi ile sona erdirilir. fluo yayılmasıhücre popülasyonu ile rescent boya Epifloresans mikroskop ile değerlendirilir ve görüntüler kamu malı bulunan ücretsiz yazılım paketleri de dahil olmak üzere mevcut morfometrik yazılım paketleri, herhangi bir sayı ile analiz edilir. Bu deney, aynı zamanda tedavi edilen hayvanlardan elde edilen çeşitli organlarda doku dilimleri kullanılarak in vivo çalışmalar için adapte edilmiştir. Genel olarak, SL-DT deneyi in vitro farmakolojik ve toksikolojik ihtiyaçlarını geniş bir hizmet edebilir, ve potansiyel olarak daha kısa bir süre içinde daha fazla örnek aydınlatmak için otomatik floresans mikroskobu görüntüleme ve analiz ile yüksek verim kurulum sistemleri için adapte edilebilir.

GJIC kesilmesi yoğun olumsuz sağlık etkileri 14 uyarmaktadır gen kontrolünün nongenotoxic, epigenetik düzeyde toksik bileşiklerin belirlenmesi için bir biyolojik belirteç olarak kullanılmıştır. Örneğin, poliaromatik hidrokarbonlar (PAH), çevrenin yerde kirletici maddelerdir, ancak molekül yapıları 15 bir fonksiyonu olarak epigenetik toksisite olarak değişir. Düşük molekül ağırlıklı PAH tipik olarak, sigara dumanı 15,16 edilene kontamine Nehri çökeltilerin...

Bu protokol gap junction kanalları aracılığıyla arası iletişimi ölçen bir neşter yükleme-floresan boya aktarımı teknik anlatılmaktadır. Gap Junctional hücrelerarası iletişim doku homeostazı korunur ve bu hücre sinyal bozulması olumsuz sağlık etkileri vardır edildiği önemli bir hücresel bir süreçtir.

Gap Junctional Hücreler arası iletişim: Doğal Ürünler Toksikantların ve Toksinler Yan Etkileri değerlendirmek için Fonksiyonel Biyomarker ve Sağlık Faydaları

This protocol describes a scalpel loading-fluorescent dye transfer (SL-DT) technique that measures intercellular communication through gap junction ...

Genel amaç, geniş bir yelpazede in vitro farmakolojik ve toksikolojik ihtiyaçlara hizmet edebilen bir memeli hücresi popülasyonu aracılığıyla boşluk, bağlantı, hücreler arası iletişimi ölçmek için basit bir test sağlamaktır. Bu yöntem, bir bileşiğin bir dokunun gelişimini veya bakımını etkileyip etkilemediği gibi toksikoloji alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin ana avantajı, toksik maddelere ve toksinlere yanıt olarak geniş bir hücre popülasyonunda boşluk bağlantı fonksiyonunun basit ve hızlı bir değerlendirmesini sunmasıdır.Prosedürü göstermek, laboratuvarımdan bir lisans araştırma görevlisi olan Ajna Uzuni olacak. Deneye başlamak için, Eagle'ın modifiye edilmiş ortamı ve% 5 fetal-sığır serumu içeren 35 milimetre çapındaki kültür plakalarına beşinci WB-F344 sıçan karaciğer epitel hücrelerini üç kez 10 kez tohumlayın. Hücreleri bir inkübatörde %100 birleşime ulaşana kadar kültürleyin ve hücrelerin deneysel tedavisine devam edin.Doz-yanıt deneylerine devam etmek için, 10 mikrolitre ve 20 mikrolitre önceden hazırlanmış,% 100 asetonitril içinde iki milimolar stok fenantren çözeltisi ve dört mikrolitre, altı mikrolitre ve sekiz mikrolitre 20 milimolar stok fenantren çözeltisi% 100 asetonitril içinde% 100 eklenen stok çözeltisi hacmi için iki mililitre büyüme ortamı içeren üç hücre plakasına. Daha sonra, araç kontrolü olarak hizmet etmek üzere eklenen her hacim asetonitril çözeltisi için iki mililitre büyüme ortamı içeren üç hücre plakasına dört mikrolitre, altı mikrolitre, sekiz mikrolitre, 10 mikrolitre ve 20 mikrolitre% 100 asetonitril çözeltisi ekleyin. Asetonitrili ekledikten sonra plakaları inkübe edin.Zaman tepkisi deneylerini gerçekleştirmek için, her zaman noktası için iki mililitre büyüme ortamı içeren üç hücre plakasına% 100 asetonitril içinde 20 milimolar stok fenantren çözeltisinden yedi mikrolitre ekleyin. Daha sonra, araç kontrolü olarak hizmet etmek için her zaman noktası için iki mililitre büyüme ortamı içeren üç hücre plakasına yedi mikrolitre% 100 asetonitril ekleyin. Belirlenen her zaman noktası için plakaları inkübe edin.Ortamı nazikçe dökerek kültür ortamını atın. Hücreleri üç mililitre PBS ile durulayın ve durulamalar arasında boşaltın veya aspire edin. PBS'de çözünmüş mililitre başına bir mililitre bir miligram olan lucifer sarı boyayı her hücre plakasına pipetleyin.Neşteri işaret parmağı ile başparmak arasında sıkıştırarak boyayı hücrelere önceden yükleyin. Neşteri kültür plakasının kenarına dik ve beş milimetre uzağa yerleştirin ve ardından neşterin bu dik açıdan 15 derecelik bir açıyla nazikçe yuvarlanmasına izin vermek için yerçekimini kullanın. Bıçağı, toplam plakanın üç farklı bölgesindeki bir hücre popülasyonu boyunca yuvarlayın.Daha sonra, hücreleri LY çözeltisi ile oda sıcaklığında üç dakika inkübe edin. LY'yi boşaltın veya aspire edin ve tüm hücre dışı boyayı çıkarmak ve ekstra hücresel arka plan floresansını ortadan kaldırmak için hücreleri durulayın. Ardından, hücreleri sabitlemek için 0.5 mililitre% 4 fosfat tamponlu formalin çözeltisi ekleyin.200x büyütmede bir epifloresan mikroskobu kullanarak sabit hücreleri görüntüleyin. Tüm plakaları, girinti çizgisi yatay görüş alanına paralel olacak şekilde hizalayın. Artan dozlarda fenantren ile tedavi edilen WB-F344 sıçan karaciğer epitel hücrelerinin bir dizi SL-DT görüntüsü oluşturuldu.Lucifer sarı floresan boya göçündeki azalma, artan fenanttren dozlarından kaynaklanır ve bu da boşluk bağlantısal hücreler arası iletişimin veya GJIC'nin artan toksik madde kaynaklı inhibisyonunu gösterir. SL-DT görüntülerinden elde edilen kontrol fraksiyonunun veya FOC değerlerinin ortalaması alındı, istatistiksel olarak analiz edildi ve ardından grafiklendirildi. Bu prosedürü takiben, ek soruları cevaplamak için tek transdüksiyon proteinlerinin western blotları gibi diğer yöntemler de gerçekleştirilebilir.Mesela, bu bileşikler hücre perforasyonunun mitojenik olaylarını aktive ediyor mu?

gap-junctional-intercellular-communication-functional-biomarker-to

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Hem molekülleri etkileşen hücrelerin yüzeylerinde demirlemiş olan reseptör-ligand etkileşimi kinetiği ölçmek için bir yapışma frekans tahlil açıklanmıştır. Bu mekanik tabanlı test mikropipet basınçlı bir insan adezyon sensörü olarak kırmızı kan hücresi ve integrin αLβ2 ve hücrelerarası adezyon molekülü-1 reseptörleri ve ligandlar etkileşim olarak kullanarak örneklenir.

Yapışma için Frekans Testi Yerinde</emHücre-Hücre Arayüz Çapraz Junctional Moleküler Etkileşimler> Kinetik Analizi

Biz canlı hücrelerin boşluk bağlantıları aracılığıyla hücresel iletişim görselleştirmek için Lucifer Sarı bir tek hücreli mikroenjeksiyon gerçekleştirin ve bazı yararlı ipuçları sağlamak için nasıl burada açıklamak. Biz bu kağıt nedeniyle fonksiyonel gap junction hücresel bağlantı derecesini değerlendirmek için herkese yardımcı olacağını bekliyoruz. Burada tarif edilen her şey 1,000 Dalton altında molekül ağırlığına sahip diğer floresan boyalar için uyarlanmış, ilke olarak, olabilir.

Hücre Haberleşme Analizi İçin Tek hücreli Mikroenjeksiyon

Bu sunum, hücreler iletken ve şeffaf indiyum-kalay oksit ile kaplanmış bir slayt üzerinde büyürken, hücreler arası, kavşak iletişiminin incelenmesi için yapışık, kültürlenmiş hücrelerin elektroporasyonunun kullanıldığı bir yöntemi göstermektedir.

Gap Kavşak Sınavı Fonksiyonel Testi; İndiyum-Kalay Oksit Yapışık hücrelerin elektroporasyonu

Geliştirilmiş in vitro nörotoksisite testleri, yeni nöroprotektif bileşiklerin tanımlanmasına yardımcı olacaktır. Nöronal hücre hatlarında sitotoksisite ve sitoproteksiyonu belirlemek ve ikinci haberci yolakların katılımını tanımlamak ve böylece nöroproteksiyon mekanizması hakkında bilgi kazanmak için gerçek zamanlı empedans tabanlı bir hücre analizörünün faydası sunulmaktadır.

Bir Nöronal Hücre Line Neurotoxicity ve nöro ilgilendim Moleküler Pathways Delineate bir aracı olarak Real-Time Empedans tabanlı Cell Analyzer

protokoller, insan embriyonik kök hücreleri ve transcriptome çalışmalarına dayalı iki in vitro gelişimsel toksisite test sistemleri (UKK ve UKN1) açıklar. test sistemleri, insan gelişimsel toksisite tehlike tahmin ve hayvan çalışmaları, maliyet ve kimyasal güvenlik testi için gerekli süreyi azaltmak için katkıda bulunabilir.

Kimyasal Güvenlik Tarama ve Sistem Biyolojisi Veri Üretimi Gelişim Toksisite Tahliller Tabanlı İnsan Pluripotent Kök Hücre

Erken endotel hücre (EEC) göçünün araştırılması, bazı hastalıkların patofizyolojisini anlamak ve terapötik müdahale için potansiyel olarak yeni stratejiler belirlemek için önemlidir. Aşağıdaki protokol, EEC'nin araştırılması için uyarlanmış hücre göçünü değerlendirmek için teknikleri açıklamaktadır.

Toksik Kimyasalların Maruz sonra Endotel Hücre Göç Değerlendirilmesi

Burada, gap junction oransal kimyasal ilaç bulma ve toksikolojik değerlendirme için yüksek üretilen iş filtreleme için tasarlanmış bir roman gap junction hücreler arası iletişim tahlil için bir iletişim kuralı mevcut.

Bir iyodür-Sarı floresan Protein-Gap Junction hücreler arası iletişim tahlil

Burada, connexin 43 arasındaki boşluk kavşağını bozacak ve bunun endotel biyomekaniği üzerindeki etkisini çekişler ve hücreler arası gerilimlerin gözlemi yoluyla ölçmek için mekanik tabanlı bir protokol salıyoruz.

Connexin 43 Yapısal Bozulma ile Perturbing Endotel Biyomekanik

Bu protokol, terapötik bir anti-HER-2 antikoru varlığında doğal öldürücü hücre aracılı meme kanseri hücresi öldürmeyi modüle eden bileşikleri tanımlamak için otomatik, görüntü tabanlı yüksek verimli bir teknik sunar.

Antikor Bağımlı Hücresel Sitotoksisiteyi Modifiye Eden Bileşiklerin Tanımlanması için Yüksek İçerikli Tarama Testi

Bu videoya kaydedilmiş protokol stereomicroscope altında erişkin fareden dentat girus kaldırılması için diseksiyon tekniği gösterildi.

Yetişkin Mouse Hipokampal dentat girus diseksiyonu

Öğrenin, memeli hücrelerdeki boşluk bağlantıları aracılığıyla hücreler arası iletişimi ölçmek için basit bir yöntem. Bu teknik, toksikolojide dokuların gelişimini ve bakımını değerlendirmek için hızlı bir analiz sunar.

Gap Junctional Hücreler arası iletişim: Doğal Ürünler Toksikantların ve Toksinler Yan Etkileri değerlendirmek için Fonksiyonel Biyomarker ve Sağlık Faydaları (Video) | JoVE Journal

Gap Junctional Hücreler arası iletişim: Doğal Ürünler Toksikantların ve Toksinler Yan Etkileri değerlendirmek için Fonksiyonel Biyomarker ve Sağlık Faydaları

Daha fazla video keşfet