20 Ağustos 2016
Yüksek dereceli kısıtlı, tekrarlayan davranışlar (RRB'ler) etkilenen bireylerin yaşamlarını bozar. Bu davranışların kemirgenlerde modellenmesi zordur ve RRB'ler için potansiyel tedavilere veya müdahalelere yönelik temel biyomedikal araştırmaları zorlaştırır. Burada, farelerde daha yüksek dereceli RRB'ler için potansiyel bir test olarak yeni nesne keşfini tanımlıyoruz.
Bu davranışsal testin genel amacı, farelerde daha yüksek dereceli tekrarlayan davranışların varlığını belirlemektir. Bu tahlil, potansiyel fare modellerinin ve kendi içinde yetiştirilmiş C 58 J fare türü gibi otistik benzeri davranışların doğrulanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajları, herhangi bir fare eğitimi gerektirmemesi ve özellikle kaygı uyandırmamasıdır.
Test alanını doldurarak başlayın. Yarım inç mısır koçanı yatağına sahip şeffaf plastik dikdörtgen bir kafes. Şekil ve renk bakımından farklı olan dört yeni nesne seçin.
Örneğin, pembe bir oyuncak tuğla, kırmızı bir maymun, mavi yazılı beyaz bir karo ve standart bir beyaz kalıp. Bu nesnelerin yaklaşık olarak aynı boyutta olduğundan ve temizliği kolaylaştırmak ve çiğnemeye karşı koymak için yüksek yoğunluklu plastikten yapıldığından emin olun. Dikdörtgen arenada, bu nesneleri test boyunca rastgele ve dengeli bir sırayla köşelerden üç santimetre uzağa yerleştirin.
Her nesnenin yerleşimini birden dörde kadar farklı bir sayı olarak kaydedin. Son olarak, bir kamerayı doğrudan test alanlarının üzerine yerleştirin, böylece iklimlendirme ve dinlenme dönemlerinde tüm arena kaydedilir. Işık döngüsünün başında, yaklaşık 100 lükste floresan aydınlatma ile aydınlatılan bir odada teste başlayın.
Video kaydı sırasında görünümü standartlaştırmak için aydınlatmanın test alanı boyunca tek tip olduğundan emin olun. Ardından, daha sonra kalibrasyon standardı olarak kullanmak üzere test alanının altına bilinen boyutlarda bir not kartı yerleştirin. Ve video kameradaki kayıt düğmesine basın.
Ardından, alışma süresi olarak hizmet etmesi için bir test faresini 10 dakika boyunca boş test alanına aktarın ve kayda devam edin. Alışma döneminden sonra, fareyi arenada bırakın ve dört yeni nesneyi hızla arenaya ekleyin. Bu test süresi boyunca fare davranışını 10 dakika daha kaydedin.
Son olarak, test süresi tamamlandıktan sonra, test faresini ev kafesine geri koyun. Yeni nesneleri ve test alanını kokusuz bulaşık deterjanı ve suyla temizleyin ve kurulayın. Davranışsal günlük kaydı yazılımında proje kodlama şemasını ayarlayarak başlayın.
Proje kurulum kutusunda, veri alımını çevrimdışı, çevrimdışı gözlem olarak ayarlayın. Davranış kodlama kutusu içinde, durum olayları olarak scrabble, kazma, yetiştirme, tımar etme ve nesne bir, iki, üç ve dördünü koklamayı programlayın. Bir nokta olayı olarak program atlama.
İkincil klavyeyi programlamak için klavye yazılımını açın, ekranda görüntülenen ikincil klavye düğmesine tıklayın, uygun tuş vuruşu kombinasyonunu yazın ve tamam'a tıklayın. İkincil klavye programlandıktan sonra, yazılımı kapatın ve programın bilgisayarın arka planında çalışmasına izin verin. Proje yazılımda kurulduktan sonra, aşağıdaki tekrarlayan davranışların her birinin sayısını ve süresini puanlamaya hazırlanın.
Arkalar, kazmalar, kendi kendine damatlar ve zıplar. Bir videoyu puanlamak için dosya, projeyi aç, gözlem, gözlem ve yeni'yi tıklayın. Yeni dosya için bir ad seçin ve ardından puanlanacak video medya dosyasını seçin.
Gözleme başla düğmesine tıklayarak tekrarlayan davranışları puanlamaya başlayın. Tüm durum olayları için iki tuş vuruşu kullanın. Biri davranışın başlangıcını, diğeri ise davranışın sonunu belirtmek için.
Ve nokta olayları için yalnızca bir tuş vuruşu kullanın. Ardından, farenin her bir nesneyi koklama sayısını ve süresini puanlamak için yazılımı kullanın, bu da bir farenin burnunu bir nesnenin 0,5 santimetre yakınında hareket ettirdiği herhangi bir zaman olarak tanımlanır. Bir fare bir nesneyi her kokladığında, nesnenin karşılık gelen konum numarasını kaydedin ve 10 dakikalık test süresinin sonuna kadar konum numaraları dizisini manuel olarak kaydedin.
Fare bir nesneyi kokladığında, başka tarafa baktığında ve sonra nesneyi tekrar kokladığında bir konumu iki kez sayın. 10 dakikalık test videosu koklamalar için puanlandıktan sonra, analiz, davranış analizi ve yeni'ye tıklayarak verileri görselleştirin. Ardından, veriler ekranda göründüğünde, ayrı bir elektronik tabloya aktarın.
Ardından, test sırasında farenin arena içinde kat ettiği toplam mesafeyi kaydedin. Bunu yapmak için, not kartının her iki ucu boyunca bir kalibrasyon çizgisi ayarlayarak ve yazılımın kalibrasyon ekranına uygun uzunluğu girerek her videoyu kalibre etmek için not kartını kullanın. Çizgiler çizildikten sonra, her satıra karşılık gelen not kartının bilinen uzunluğunu ve genişliğini girin.
Ardından, arena ayarlarında tüm arenayı seçin. Rota kontrolü ayarlarında 10 dakikalık bir süre seçin. Ve algılama ayarlarında, açık renkli bir arka plan üzerinde karanlık bir nesne seçin.
Bu ayarlar programlandıktan sonra, edinmeyi tıklayarak videoları puanlayın ve edinmeyi açın. Edinme kontrol kutusunda yeni deneme sürümü'ne tıklayın. Ve sonra denemelere başlayın.
10 dakika geçtikten sonra programı durdurun ve verileri gözlemleyin. Son olarak, istatistikleri analiz et ve hesapla'yı tıklayın. Veriler ekranda göründükten sonra, ayrı bir elektronik tabloya aktarın.
En yaygın üç üç desen dizisinin tekrarlanma sayısının yüzdesi, üç farklı akraba fare suşunda gözlendi. C 58 dişileri, dikdörtgen arenada değil, yuvarlak arenada tercih ettikleri desenlere güçlü bir bağlılık gösterdiler. Erkek fareler her iki alanda da birbirinden farklı değildi.
Dahası, yuvarlak arenadaki erkek ve dişi C 58 fareleri, en çok tercih ettikleri nesne için diğer iki suştan daha güçlü bir tercih gösterdi. Dikdörtgen arenada nesne tercihinde herhangi bir farklılık gösterilmemiştir. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik bir saatin altında tamamlanabilir, veri toplama için 15 dakika ve davranışsal puanlama için 20 dakika gerekir.
Bu prosedürü denerken, farelerin çevrelerindeki değişikliklere karşı çok hassas olduklarını hatırlamak önemlidir. Lütfen test ortamının deney boyunca tutarlı kaldığından emin olun. Bu prosedürü takiben, Barnes Labirenti veya Takım Labirenti gibi diğer yöntemler, daha yüksek dereceli tekrarlayan davranışların varlığını daha fazla doğrulamak için kullanılabilir.
Bu videoyu izledikten sonra, farelerde daha üst düzey tekrarlayan davranışların varlığını belirlemek için yeni nesne keşfinin nasıl kullanılacağını iyi anlamış olmalısınız.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, farelerde yüksek dereceli tekrarlayıcı davranışları (RRB'ler) belirlemek için tasarlanmış bir davranışsal testi sunmaktadır. Test, önceden eğitim gerektirmeksizin otistik benzeri davranışların incelenmesi için kullanılan fare modellerinin doğrulanmasını kolaylaştırmayı amaçlamaktadır.
Preklinik sistemlerde üst düzey tekrarlayıcı davranışların (RRB'ler) modellenmesi, otizm spektrum bozukluğu (ASD) ilaç keşfinde kritik bir boşluk olarak kalmaya devam etmekte; bu durum mekanistik risk azaltma ve hedef doğrulama çabalarını kısıtlamaktadır. Yeni nesne keşif testi, farelerde örüntülü keşif davranışının kantitatif değerlendirmesine olanak sağlayarak bu boşluğu doldurmakta ve üst düzey RRB'leri hedefleyen terapötik adayların değerlendirilmesi için translasyonel bir araç sunmaktadır. Bu yaklaşım, fenotipik tarama ve preklinik model seçimindeki öngörücü güvenilirliği artırarak erken keşif iş akışlarını desteklemektedir.
Bu analiz; hedef doğrulamadan öncü bileşik tanımlamaya ve preklinik değerlendirmeye kadar uzanan keşif sürecine uygundur ve özellikle ASD ile ilgili araştırmalarda fenotipik bir son nokta olarak yüksek dereceli RRB'lerin objektif ölçümüne olanak tanır.