Name: Murin Flexor Tendon yaralanmaları ve onarım Cerrahisi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Öğrenin fare fleksör tendon yaralanması ve onarım cerrahisi tekniğini kullanarak iyileşme sürecindeki hücresel ve moleküler mekanizmaları. Bu yöntem skar oluşumuna katkıda bulunan hücre popülasyonlarını belirlemeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma kısmen El Pilot Ödülü ve NIH / NIAMS 1K01AR068386-01 (AEL kadar) ve NIAMS / NIH P30AR061307 Cerrahisi Amerikan Derneği tarafından desteklenmiştir.

Rochester Üniversitesi&#39;nde Hayvan Araştırmaları Üniversite Komitesi, tüm hayvan deneyleri onayladı. On-12 haftalık dişi C57BL / 6J fareleri kullanılmıştır. Flexor Tendon Cerrahisi Animals 1. Hazırlık (~ 15 dk) <ol><li> Otoklav cerrahi aletler, sterilize boyunca steril eldiven giyin ve steril bir operasyon alanı korumak için. </li><li> vücut ağırlığına tekabül eden bir ketamin hacmi (80 mg / kg) ve ksilazin (10 mg / kg) ile intraperitoneal enjeksiyon (i.p.) ile fare anestezisi. ayak-tutam refleksinin yokluğu yoluyla sedasyon derinliği onaylayın. </li><li> subkutan enjeksiyon yoluyla rüçhan analjezi (buprenorfin, 0.05-0.1 mg / kg) yönetmek. kurumasını önlemek gözleri oftalmik merhem sürün. </li><li> tüm arka bacak üzerinde kürk kırpma cerrahi bölgeyi hazırlayın. povidon iyot ile tekrar% 70 etanol ve ardından povidon iyot ile sırayla, ovma cildi sterilize ve. </li></ol><ol><li> buzağı medial yüzeysel görülen fleksör digitorum longus (FDL) tendon, bulun. Bir neşter kullanılarak, tendon ortaya çıkarmak için mikro-makas ile deride küçük 0.5-1 cm&#39;lik kesi yapmak. </li><li> çevreleyen dokudan FDL tendon ayırmak ve myotendinous kavşağa o kadar izlemek için forseps kullanabilir. posterior tibial arter önlemek için özen, onu serbest bırakmak için yaylı makas ile bu kavşakta tendon kesin. </li><li> 5-0 naylon sütür ile cilt kapatın. Not: FDL transection ve tamiri (2.4 adımlar) Stereomikroskopta kullanılarak yapılmalıdır. </li><li> bahar mikro-makas kullanılarak arka pençe posterolateral yönü üzerinde 3 mm kesi yapmak. Yavaşça doku hasarı en aza indirmek ve FDL tendon tanımlamak için emin olun, forseps ile çevreleyen yumuşak doku ve kas geri çekin. <ol><li> Yavaşça FDL tendon yükseltmek ve tamamen mil kullanarak transectcro-makas. periyodik serum fizyolojik ile ıslatma yoluyla tendonun kurumasını önlemek, 8-0 sütür ile modifiye Kessler desen tendon birlikte FDL uçlarını dikin. </li><li> tendon üzerinde yumuşak doku ve kas değiştirin sonra 5-0 naylon sütür ile kesi kapatın. </li></ol></li><li> anestezi kurtarıldı kadar vücut ısısını korumak için, 37 ° C slayt sıcak seti fareler yerleştirin. </li><li> ameliyat sonrası artmış vokalli ve karıştırdı kürk dahil olmak üzere yetmezliği ya da enfeksiyon belirtileri için fareler izleyin. Farelerde kadar her 12 saatte artık ağrı veya sıkıntı belirtileri gösterebilir analjezik olarak buprenorfin (50 ul / fare) enjekte edilir. </li><li> fareler sonraki adımlara devam etmeden önce 10 gün sonrası cerrahi bir süre için iyileşmek için izin verin. Not: Hücreler herhangi bir zaman noktası sonrası cerrahi hasat edilebilir. Burada, 10 gün, şu anda doku nispeten yüksek selülarite verilen bu Örnek deneyler için seçilir. </li></ol> 3. LabeliBisiklet Hücreler ng (~ 10 dakika) <ol><li> Edu (5-etinil-2&#39;deoxyuridine) çözeltisi hazırlayın (steril fosfat tamponlu tuzlu su içinde 10 mg / ml [PBS] +,% 1 dimetil Sülfoksit [DMSO] çözünürlüğünü arttırmak için). </li><li> IP enjeksiyon yoluyla kurban önce 24 saat 100 ul edu (50 mg / kg) ile fareler enjekte edilir. </li></ol> Sitoloji Santrifüj 4. Hasat Hücreleri (2.5 saat, ~ 30 dakika Hands-Zaman) <ol><li> PBS içinde 3 mg / ml kollajenaz I hazırlayın. </li><li> en fazla 3 L / dakikalık bir akış oranında karbon dioksit ile boğularak ile fare öldürülür ve ikincil bir tedbir olarak servikal dislokasyon gerçekleştirin. </li><li> Yukarıdaki adım 2.4 kullanılarak onarılan bir tendonun bulun ve mikro makasla yaralanma bölgesinde her iki tarafında yaklaşık 2 mm keserek tendon dokusuna izole eder. <ol><li> 3 mg / ml kolajenaz 1 ml bir petri neşter ile kıyma doku daha sonra dokunun kırmak için 18 G iğneli birkaç kez ile karışım geçmektedir. 1.5 ml&#39;lik bir santrifüj tüpüne karışımın toplanması. </li&gt; <li> çalkalanarak 37 ° C&#39;de 1 saat süre ile tendon dokusuna Digest. </li><li> Sıkma dokusunu (5 dakika için 300 x g), aspirat kolajenaz, daha sonra birkaç kez pipetli yukan aşağı çekilerek PBS içinde 500 ul% 3 sığır serum albümin (BSA) ile hücre / doku tekrar süspansiyon. </li><li> 70 mikron hücre süzgecinden Filtre hücre süspansiyonu enkaz ve tendonun büyük parça ve 37 ° C inkübatör kenara kaldırın. </li><li> Başka bir 1.5 ml santrifüj tüpüne tendon dokusuna yerleştirin ve pipetleme, 1 mi kolajenaz çözeltisi ile yenileme aşağı karıştırın. </li><li> çalkalanarak 37 ° C&#39;de doku bir saat inkübe edin. </li><li> sindirilmiş tendon dokusu (5 dakika boyunca 300 xg) aşağı Spin, sonra yukarı pipetleme ve birkaç kez aşağı PBS içinde 500 ul% 3 BSA içinde tekrar süspansiyon. </li><li> , 70 mikron hücre süzgecinden hücre süspansiyonu Filtre 4.3.3 izole süspansiyon ile birleştirmek, daha sonra bir hemasitometre hücreleri saymak. </li><li> Daha sonra 3-6 kadar tekrar süspansiyon, PBS içinde% 3 BSA ile bir kez daha yıkama hücrelerix 10 4/100 ul. </li></ol></li><li> pozitif yüklü slayt bir sitoloji huni takın ve slayt taşıyıcısının içine kilitleyin. Bir sitoloji santrifüj içine tüm aparat takın ve huni 100 ul hücre süspansiyonu ekleyin. 5 dakika boyunca 300 xg&#39;de santrifüj slayta hücreleri dağıtmak için. </li></ol> 5. İmmünositokimya Edu Algılama için (2 saat, ~ 45 dakika Hands-Zaman) Not: Tüm bekletme işlemleri florofor photobleaching sınırlamak için karanlıkta yapılmalıdır. <ol><li> adımları için gerekli çözelti en aza indirmek için, bir hidrofobik bariyer kalemle daire hücreler, daha sonra hemen oda sıcaklığında PBS, 15 dakika içinde 150 ul% 3 paraformaldehit (RT) ile tespit edin. <ol><li> PBS içinde 150 ul% 3 BSA ile 5 dakika boyunca iki kez yıkanır. </li><li> Oda sıcaklığında PBS, 20 dakika içinde% 0.5 Triton-X-100 ile Permeabilize hücreleri. </li><li> 5.1.1 gibi tekrarlayın yıkama adımı. </li></ol></li><li> Edu reaksiyon cockt hazırlayınail kit talimatlarına fazla kullanımdan önce en az 30 daha uygun. <ol><li> Her slayt için 150 ul kokteyl ekle oda sıcaklığında 30 dakika inkübe. </li><li> 5.1.1 gibi tekrarlayın yıkama adımı. </li></ol></li><li> Oda sıcaklığında, 30 dakika PBS içinde 2,000: Nükleer karşıt Hoechst33342 1 seyreltilmiş 150 ul inkübe edin. <ol><li> PBS 1X 150 ul, 5 dakika boyunca iki kez yıkanır. </li></ol></li><li> daha sonra yavaş yavaş, 1-2 hücrelerine montaj orta anti-solmaya damla kabarcıklar önlemek için alt lamel ekleyin. <ol><li> Oda sıcaklığında, karanlıkta gece boyunca tedavi için orta montaj izin verin. </li><li> slayt lamel mühür net oje kullanın. </li></ol></li><li> DAPI (Hoeschst33342) saptayabilen uyarma / emisyon filtreleri ile donatılmış bir floresan mikroskop kullanılarak 40X büyütmede görüntü slaytlar, ve Texas Kırmızı (Alexa Fluor 594). </li></ol>

<ol><li>Lin, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanics+of+tendon+inury+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">Biomechanics of tendon inury and repair.</a> J Biomech. 37, 865-877 (2004).</li>
<li>Strickland, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+flexor+tendon+surgery%3A+twenty-five+years+of+progress%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hand+Surg+%5BAm%5D%22%5BJournal%5D)">Development of flexor tendon surgery: twenty-five years of progress.</a> J Hand Surg [Am]. 25, 214-235 (2000).</li>
<li>Bunnell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repair+of+tendons+in+the+fingers+and+description+of+two+new+instruments%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Gynecol+Obstet%22%5BJournal%5D)">Repair of tendons in the fingers and description of two new instruments.</a> Surg Gynecol Obstet. 26, 103-110 (1918).</li>
<li>Aydin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-stage+flexor+tendoplasty+in+the+treatment+of+flexor+tendon+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Orthop+Traumatol+Turc%22%5BJournal%5D)">Single-stage flexor tendoplasty in the treatment of flexor tendon injuries.</a> Acta Orthop Traumatol Turc. 38, 54-59 (2004).</li>
<li>Gelberman, R. H., Steinberg, D., Amiel, D., Akeson, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblast+chemotaxis+after+tendon+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hand+Surg+Am%22%5BJournal%5D)">Fibroblast chemotaxis after tendon repair.</a> J Hand Surg Am. 16, 686-693 (1991).</li>
<li>Lundborg, G., Rank, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+intrinsic+healing+of+flexor+tendons+based+upon+synovial+fluid+nutrition%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hand+Surg+Am%22%5BJournal%5D)">Experimental intrinsic healing of flexor tendons based upon synovial fluid nutrition.</a> J Hand Surg Am. 3, 21-31 (1978).</li>
<li>Aoki, M., Kubota, H., Pruitt, D. L., Manske, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanical+and+histologic+characteristics+of+canine+flexor+tendon+repair+using+early+postoperative+mobilization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hand+Surg+Am%22%5BJournal%5D)">Biomechanical and histologic characteristics of canine flexor tendon repair using early postoperative mobilization.</a> J Hand Surg Am. 22, 107-114 (1997).</li>
<li>Kim, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technical+and+biological+modifications+for+enhanced+flexor+tendon+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hand+Surg+Am%22%5BJournal%5D)">Technical and biological modifications for enhanced flexor tendon repair.</a> J Hand Surg Am. 35, 1031-1037 (2010).</li>
<li>Aoki, M., Manske, P. R., Pruitt, D. L., Kubota, H., Larson, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Work+of+flexion+after+flexor+tendon+repair+according+to+the+placement+of+sutures%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Orthop+Relat+Res%22%5BJournal%5D)">Work of flexion after flexor tendon repair according to the placement of sutures.</a> Clin Orthop Relat Res. , 205-210 (1995).</li>
<li>Zhao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Award+for+Outstanding+Orthopaedic+Research%3A+Engineering+flexor+tendon+repair+with+lubricant%2C+cells%2C+and+cytokines+in+a+canine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Orthop+Relat+Res%22%5BJournal%5D)">Award for Outstanding Orthopaedic Research: Engineering flexor tendon repair with lubricant, cells, and cytokines in a canine model.</a> Clin Orthop Relat Res. 472, 2569-2578 (2014).</li>
<li>Wong, J., Bennett, W., Ferguson, M. W., McGrouther, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microscopic+and+histological+examination+of+the+mouse+hindpaw+digit+and+flexor+tendon+arrangement+with+3D+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">Microscopic and histological examination of the mouse hindpaw digit and flexor tendon arrangement with 3D reconstruction.</a> J Anat. 209, 533-545 (2006).</li>
<li>Katzel, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+Smad3+loss+of+function+on+scarring+and+adhesion+formation+during+tendon+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Orthop.+Res%22%5BJournal%5D)">Impact of Smad3 loss of function on scarring and adhesion formation during tendon healing.</a> J. Orthop. Res. 29, 684-693 (2011).</li>
<li>Loiselle, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+marrow-derived+matrix+metalloproteinase-9+is+associated+with+fibrous+adhesion+formation+after+murine+flexor+tendon+injury%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Bone marrow-derived matrix metalloproteinase-9 is associated with fibrous adhesion formation after murine flexor tendon injury.</a> PloS one. 7, e40602(2012).</li>
<li>Lee, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parathyroid+hormone+1-34+enhances+extracellular+matrix+deposition+and+organization+during+flexor+tendon+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Parathyroid hormone 1-34 enhances extracellular matrix deposition and organization during flexor tendon repair.</a> J Orthop Res. 33, 17-24 (2015).</li>
<li>Geary, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+EP4+Inhibition+Increases+Adhesion+Formation+in+a+Murine+Model+of+Flexor+Tendon+Repair%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Systemic EP4 Inhibition Increases Adhesion Formation in a Murine Model of Flexor Tendon Repair.</a> PloS one. 10, e0136351(2015).</li>
<li>Loiselle, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+antisense+oligonucleotide+%28ASO%29+technology+against+Tgf-beta+signaling+to+prevent+scarring+during+flexor+tendon+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Development of antisense oligonucleotide (ASO) technology against Tgf-beta signaling to prevent scarring during flexor tendon repair.</a> J Orthop Res. 33, 859-866 (2015).</li>
<li>Orner, C. A., Geary, M. B., Hammert, W. C., O'Keefe, R. J., Loiselle, A. E. Low-dose and short-duration Matrix Metalloproteinase 9 Inhibition does not affect adhesion formation during murine flexor tendon healing. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aOrner%2C+CA+%22Plast+Reconstr+Surg%22">Plast Reconstr Surg</a>. , (2016).</li>
<li>Loiselle, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remodeling+of+murine+intrasynovial+tendon+adhesions+following+injury%3A+MMP+and+neotendon+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Remodeling of murine intrasynovial tendon adhesions following injury: MMP and neotendon gene expression.</a> J Orthop Res. 27, 833-840 (2009).</li>
<li>Tsubone, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+TGF-beta+inducible+early+gene+deficiency+on+flexor+tendon+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of TGF-beta inducible early gene deficiency on flexor tendon healing.</a> J Orthop Res. 24, 569-575 (2006).</li>
<li>Beason, D. P., Kuntz, A. F., Hsu, J. E., Miller, K. S., Soslowsky, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+evaluation+of+multiple+tendon+injury+models+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">Development and evaluation of multiple tendon injury models in the mouse.</a> J Biomech. 45, 1550-1553 (2012).</li>
<li>David, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tendon+repair+is+compromised+in+a+high+fat+diet-induced+mouse+model+of+obesity+and+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Tendon repair is compromised in a high fat diet-induced mouse model of obesity and type 2 diabetes.</a> PloS one. 9, e91234(2014).</li>
<li>Wong, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cellular+biology+of+flexor+tendon+adhesion+formation%3A+an+old+problem+in+a+new+paradigm%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">The cellular biology of flexor tendon adhesion formation: an old problem in a new paradigm.</a> Am J Pathol. 175, 1938-1951 (2009).</li>
</ol>

Yazarlar, rekabet eden hiçbir finansal çıkarları olmadığını beyan ederler

tam kesisi ve fleksör digitorum longus tendon onarım fare modeli için cerrahi prosedür bu çalışmada sunulmuştur. Buna ek olarak sitolojisi santrifüj küçük hücre popülasyonlarının konsantre yeni bir uygulama fleksor tendonu iyileşmesi sırasında hücresel ortamda kantitatif immünositokimyasal analizi için izin gösterilmektedir. Fleksor tendon onarımı Bu model nakavt modeller kullanılarak iyileşme sürecinde değişiklik ya da farmakolojik müdahale ile değerlendirmek için kullanılabilen bir yeniden üretilebilir iyileşme yanıtı...

fleksör önkol kaslarının ve dijital kılıflar ile uyum içinde el işçiliği fleksör tendon basamak fleksiyon ve el kavrama işlevini etkinleştirmek için. Fleksör tendonlar elin palmar uzanmak; Bu nispeten yüzeysel konumu genellikle elle travma sırasında fleksör tendon yaralanmaları ile sonuçlanır. Tendon, normal tendon dokusunun 1 bir skar dokusu tepki yerine rejenerasyon yoluyla iyileşir. Bu skar dokusu tendon sürekliliğini sağlarken, işlev sağlıklı tendon göre azalmış dramatik bir. Tendon-skar dokusu kompozitler kopma olasılığı daha yüksektir tamir tendonları render, bozulmuş mekanik özellikleri 1 ile karakterizedir. Buna ek olarak, yara dokusu, tendon boyutu ve toplu olarak bir artışa neden olur, yerli tendonun kollajen lif yapısının organizasyonu yoksundur. Tendon-kılıf biriminin anatomik kısıtlamalar, tendon boyutunda bile mütevazı bir artış göz önüne alındığında can ölçüde kırmızıkayma tendon fonksiyonunu ve hareket ve el fonksiyonu dolayısıyla haneli aralığını UCE. Fleksor tendonların 1960 yaralanmaları, el II.Bölgede özellikle öncesinde, rutin nedeniyle bu onarım 2 ile ortaya çıkan iyileşme ciddi komplikasyonlara tamir edilmedi. Elin Bu alan &#39;adam hiçbir arazi 3&#39; olarak sevk edildi. Ancak, cerrahi teknikler, dikiş desenleri ve fizik tedavi rehabilitasyon protokolleri gelişmeler dramatik fleksör tendon onarımı 2 sonuçlarını iyileştirilmiştir. Bu ilerlemelere rağmen, onarım% 40&#39;a varan el fonksiyonlarını 4 engellemek için yeterli yapışma oluşumuna neden. Bu nedenle, biyolojik bir iyileşme geliştirmek için gereklidir. Ne yazık ki, çok az hücresel ve moleküler düzeyde tendon iyileşme süreci hakkında bilinmektedir. Bu nedenle, amaç, temel understandin geliştirmek için kullanılabilecek bir sıçan modelinde geliştirmektişifa artırmak için yeni terapötik hedefler belirlemek için bir araç olarak fleksor tendon iyileşmesi ve skar oluşumu yanıt hücresel ve moleküler bileşenleri, g. Büyük hayvan modelleri fleksör tendon iyileşme sürecinin anlaşılmasını ilerletmek vesile olmuştur. Köpek ve tavşan çalışmaları fleksör tendonların 5,6 içsel ve dışsal şifa yeteneği hem de göstermiştir, immobilizasyon 7 adezyon göreceli minimize erken kontrollü pasif hareket önemi yanı sıra, iyileşme sürecine 8 farklı sütür desen etkileri 9. Buna ek olarak, köpek modeli şifa 10 artırmak için öteleme doku mühendisliği yaklaşımları test yararlı olmuştur. Bununla birlikte, görece maliyet sıçangil özel reaktiflerin mevcudiyeti dahil büyük hayvan modeli için bir fare modeli kullanılmaktadır kullanılarak birçok önemli avantajı vardır ve küresel Knoc üretilmesi kolaylığıya da dokuya özel silme / aşırı yapıları aşımlarının k. Ayrıca, fleksor tendonları 11 ile ilgili olarak insan ve fareler arasındaki fonksiyonel benzerlik bir kemirgen modeli geliştirme potansiyel yararını göstermektedir. fleksor tendon transeksiyonu ve onarım taklit bol skar dokusu ve bozulmuş mekanik özellikleri oluşumu da dahil olmak üzere klinik iyileşme birçok yönleri, bir fare modeli geliştirilmesi. Burada açıklanan model onarım sitesini korumak amacıyla nedeniyle myotendinous kavşakta FDL kesilerinden için klinik pratikte gerçek bir tekrarlama değil. Onarım meydana tendon orta kısmını kaplayan herhangi bir sinovyal kılıf yoktur Dahası, bu model, şifa yanıt sinovyal kılıf hücrelerinin katkısı hesaba katmaz. Bu kısıtlamalara rağmen, bu model fare modellerinde daha clos gösterilebilir henüz hareket sınırlayıcı yapışıklıklar üreten aralığı avantajı vardırely klinik senaryo yaklaşmaktadır. Bu model knock-out fare modelleri 12,13 değerlendirmek ve şifa 14-17 geliştirmek için farklı farmakolojik yaklaşımlar test etmek için kullanılır olmuştur. Histolojik immünohistokimyasal kullanarak, bu modelin analizleri ve in situ melezleme, iyileşme sırasında anahtar genlerin ve proteinlerin lokalizasyon için önemli bilgiler sağlayabilir. Ancak, histoloji yalnızca bir kesit mekansal analiz sağlar ve tüm doku boyunca kantifikasyonunu izin vermez. Akış sitometri daha nicel bir yaklaşımı temsil eder, ama hücrelerin sadece çok sınırlı sayıda fare modelinde iyileşen tendon dokusundan izole edilebilir, ve bu sayı daha da tespit, geçirgenleştirme ve yıkama adımları sırasında azaltılır. hesapta bu alarak, sitometri nedeniyle gerekli olacaktır hayvan sayısı bir olanaksız bir yaklaşım olur akar. Alternatif bir yöntem için, bu küçük bir hücre popülasyonunun çoğunluğunu korumak için gerekli olanayrıca şifa ortam karakterize etmek. Burada gösterilen Bunu gerçekleştirmek için kullanılan yöntem, bağışıklık kimyası ve ardından bir cam lam üzerine sitoloji santrifüj yoluyla izole hücrelerin konsantrasyonu içerir. Bu çalışmada edu (5-etinil-2&#39;deoxyuridine bir timidin analoğu) dahil edilmesi ve daha sonra etiket iyileşmesi yerinde hücrelerin göreceli proliferatif durumu belirlemek için kullanılmıştır. Bu yaklaşım, hücre çoğalması, gen nakavt veya aşırı ekspresyonuna farmakolojik tedavilerin etkisini test etmek için, ya da farklı hücre popülasyonu belirlemek ve ölçmek için uygulanabilir.

<table><tbody><tr><td><güçlü > Cerrahi hazırlık< / güçlü ></td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>C57BL / 6J fareler ve nbsp;</td><td>Jackson Laboratuvarları</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Hospira</td><td>NDC # 0409-2051-05</td><td></td></tr><tr><td>Ksilazin</td><td>Lloyd Inc.</td><td>NDC # 61311-482-10</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td>Par İlaç A.Ş.</td><td>NDC # 42023-179-10</td><td></td></tr><tr><td>%0.9 sodyum klorür sulama</td><td>Hospira</td><td>NDC # 0409-6138-03</td><td>Ketamin / ksilazin ve buprenorfin çözeltilerinin hazırlanması için</td></tr><tr><td>1 ml şırınga</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>30 G iğne</td><td>BD</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>Povidon-İyot çözeltisi</td><td>Aplicare</td><td>82-226</td><td></td></tr><tr><td>%70 etanol</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Puralube veteriner oftalmik merhem</td><td>Dechra Veteriner Ürünleri</td><td>NDC # 17033-211-38</td><td></td></tr> <tr><td>< güçlü > Adı</td><td>Company</td><td>Katalog Numarası</td><td> Yorumlar</td></tr><tr><td>Cerrahi aletler</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>taşınabilir denge 200 g</td><td>Ohaus</td><td>SP202</td><td></td></tr><tr><td>Yaylı makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>15124-12</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11251-30</td><td></td></tr><tr><td>İğne tutucular</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>91201-13</td><td></td></tr><tr><td>Mikro yaylı makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>15003-08</td><td></td></tr><tr><td>Mikro iğne tutucular</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>12061-02</td><td></td></tr><tr><td>5-0 naylon sütürler</td><td>Ethicon</td><td>668G</td><td></td></tr><tr><td>8-0 mikrocerrahi naylon sütürler</td><td>Ethicon</td><td>2808G</td><td></td></tr><tr><td>Lab-Line histoloji slayt ısıtıcı</td><td>Barnstead International</td><td>26025</td><td></td></tr><tr><td>Name<</td><td>strong>Company</td><td>Katalog Numarası</td><td>Yorumlar</td></tr><tr><td><güçlü>Sitospin yöntemi</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kollajenaz Tip I, liyofilize</td><td>Yaşam Teknolojileri&nbsp;</td><td>1700-017</td><td></td></tr><tr><td>Sığır Serumu Albümin</td><td>Hücre Sinyalizasyon Teknolojileri</td><td>9998S</td><td></td></tr><tr><td>1x PBS</td><td>Thermo Fisher</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>Sitoloji hunileri</td><td>Fisher HealthCare</td><td>10-354</td><td></td></tr><tr><td>HistoBond+ mikroskop slaytları</td><td>VWR</td><td>16005-110</td><td></td></tr><tr><td>Cytospin 2 santrifüj</td><td>Shandon</td><td>SH-CYTO2</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>Katalog Numarası</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Immunocytochemistry</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Siyah kapaklı sürgülü boyama tepsisi</td><td>IHC World</td><td>M920-2</td><td></td></tr><tr><td>Click-iT Plus EdU Görüntüleme Kiti</td><td>Yaşam Teknolojileri&nbsp;</td><td>C10639</td><td>EdU içerir ve&nbsp; Hoeschst 33342</td></tr><tr><td>İmmedge hidrofobik bariyer kalemi</td><td>Vektör Laboratuvarları</td><td>H-4000</td><td></td></tr><tr><td>ProLong Elmas montaj ortamı</td><td>Thermo Fisher</td><td>P36970</td><td></td></tr><tr><td>Cam lameller 24 x 50 mm #1.5</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Şeffaf oje</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

murin flexor tendon yaralanmaları ve onarım cerrahisi

Murine Flexor Tendon Injury and Repair Surgery

Tendon neredeyse tüm vücudun hareketini kolaylaştıran, iskelet kas ve kemik bağlar. elinde, fleksör tendonlar (FTS) parmakları ve genel el fonksiyonunun fleksiyonuna etkinleştirin. FT yaralanmaları yaygındır ve tatmin edici iyileşme çoğu zaman aşırı skar dokusu ve tendon ve çevre doku arasındaki yapışıklıklar bozulur. Ancak, küçük FT onarım moleküler ve hücresel bileşenleri hakkında bilinmektedir. Bu amaçla, hareket bozukluğu aralığı dahil olmak üzere, insanlardaki iyileşme birçok açıdan, tekrarlar ve mekanik özellikleri azalma FT tamir bir murin modeli, geliştirilmiş ve daha önce tarif edilmiştir. İşte bu cerrahi işlem derinlemesine bir gösteri kesiye ve fare arka pençesine fleksör digitorum longus (FDL) tendonun sonraki tamir edilmesi suretiyle sağlanır. Bu teknik gen kazanç veya kayıp fonksiyon-etkilerini değerlendirmek, ve verimli test etmek için, farklı hücre tiplerinin soyu analizi yapmak için kullanılabiliriyileşme sürecinde kullanılan ilaç tedavilerinin etkinlik gösterir. i) transeksiyonu ve onarım meydana fare arka ayağın, orta kısmında FDL tendon, bir sinovyal kılıf ile çevrili değildir: Ancak, bu modelin iki temel sınırlamalar vardır. Bu nedenle, bu model skar oluşumu sürecine kılıfın potansiyel katkısı hesaba katmaz. ii) onarım sitenin bütünlüğünü korumak için, FT olasılıkla artmış yara oluşumuna katkıda tendonun mekanik kuvvetleri azalan myotendinous kavşakta serbest bırakılır. akım sitometri analizi için iyileşme sürecinde FT granülasyon dokusu yeterli hücrelerin izolasyonu zor olduğu kanıtlanmıştır; Bu hücrelerin konsantre sitoloji santrifüj kullanılan başka bir yöntemdir, ve imünoflöresan markalama yapılabilir üzerinde hücre preparatlarının oluşturulmasına izin verir. Bu yöntem ile, FT iyileşme sırasında hücreler ya da ilgi duyulan proteinlerin ölçümü mümkün olur.

Fleksör digitorum longus buzağı bulunan (FDL) kas, myotendinous proksimal çalıştığı, (Şekil 1A mavi özetlenen ve Şekil 2A histolojik gösterilen) fleksör tendon aracılığıyla fare arka pençe rakamlarını flex hareket kavşak ve distal falanks sonlandırır. Arka pençe basamağı (kırmızı oklar, Şekil 1A) için çatallanma, proksimal fleksör tendon iyileşme Bu modelde, FDL tendonu nakledilmiştir ve orta dibinde onarıldı. Deneysel analiz engel olur ...

el fleksör tendonlar sıklıkla bozulmuş el fonksiyonu yol yaralandı. Bununla birlikte, yara izi dokusunu iyileşme yanıtı iyi karakterize değildir. fleksör tendon iyileşmesi bir fare modeli burada gösterilmiştir. Bu model iyileşme sürecinin genel anlayış geliştirmek ve şifa iyileştirmek için tedavi yaklaşımları değerlendirmek.

Murin Flexor Tendon yaralanmaları ve onarım Cerrahisi

Tendon connects skeletal muscle and bone, facilitating movement of nearly the entire body. In the hand, flexor tendons (FTs) enable flexion of the fingers ...

Bu cerrahi prosedürün genel amacı, fleksör tendon iyileşmesi sırasında skar ve adezyon oluşumunun hücresel ve moleküler süreçlerine dair anlayışı geliştirmektir. Bu yöntem, hangi hücre tiplerinin skar oluşumuna ve onarıma katkıda bulunduğu gibi, fleksör tendon iyileşme süreci hakkındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, iyileşme sürecini daha iyi anlamak için transgenik ve nakavt farelerin kullanılabilmesidir.Bu teknik, skar oluşumuna katkıda bulunan yetersiz tanımlanmış hücre popülasyonlarının araştırılmasını kolaylaştırdığı için fleksör tendon iyileşme sonuçlarını geliştirmeye yönelik potansiyel biyolojik hedeflerin belirlenmesini sağlayabilir. Ayak parmağı sıkıştırma uyarısına yanıt verilmediği onaylandıktan sonra, hayvanların gözlerine oftalmik pomad uygulayın ve tüm arka ekstremitenin tüylerini kısaltın. Cerrahi bölgeyi sırayla povidon iyot ve %70 etanol ile temizleyerek sterilize edin ve baldırın medial kısmında flexor digitorum longus veya FDL tendonunu bulun.Ardından, tendonu açığa çıkarmak için ciltte 0,5 ile 1 cm arasında bir insizyon yapın. FDL tendonunu çevre dokudan ayırmak için pens kullanın ve tendonu miotendinöz bileşkeye

murine-flexor-tendon-injury-and-repair-surgery

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Kaynak: Dalkin, W., et al. Fibular sinir yaralanması yöntemi: nöromüsküler kavşakları onaran faktörleri belirlemek ve test etmek için güvenilir bir test. J. Vis. Uzm. (2016)Bu video, nöromüsküler kavşak (NMJ) rejenerasyonunu incelemek için bir farede fibular sinir yaralanmasını indüklemek için cerrahi bir prosedürü göstermektedir. Prosedür, fibula sinirinin açığa çıkarılmasını, yaralanmayı indüklemek için kontrollü basınç uygulanmasını ve aksonal rejenerasyonu desteklemek için epinöryumun...

Nöromüsküler Kavşak Rejenerasyonunu İncelemek İçin Bir Farede Fibular Sinir Yaralanmasına İndükleme

Bu protokol mekanizmaları ameliyat sonrası neuroinflammation ve davranış değişiklikleri ve doku rejenerasyonu yaşlanma sırasında çalışmaya parabiosis, birlikte çalışma için kullanılan ortopedik cerrahi bir fare modeli açıklar.

Ameliyat sonrası bilişsel işlev bozukluğu ve doku rejenerasyonu çalışmaya ortopedik cerrahi bir fare modeli

Bu yazıda 1,5 cm'ye kadar tendon boşluğunun mühendislik kollajen grefti ile doldurularak onarılması için in vitro ve yerinde protokol sunulmuştur. Bu, greft konak dokuya olgunlaşana kadar mekanik yükü almak için modifiye edilmiş bir dikiş tekniği geliştirilerek gerçekleştirildi.

Büyük Tendon Kusurlarını Onarmak İçin Doku Mühendisliği Kollajen Greftli Yeni Bir Tenorhaphy Dikiş Tekniği

Burada, bir sıçan modelinde diz eklem immobilizasyonu için minimal invazif bir tekniği tarif etmek için bir protokol sunuyoruz. Bu tekrarlanabilir protokol, kas-Gap ayırma Modus ve mini-kesi beceri üzerine dayandırarak, elde edilen eklem kontraktürü altta yatan moleküler mekanizması incelemek için uygundur.

Rats Immobilizasyon kaynaklı diz fleksiyon kontraktürü eğitim için mini-Invaziv Iç Fikmasyon tekniği

Burada tendon onarımında yapilebilen bir "Q" dikiş tekniği ve onarılmış tendonun boşluk oluşumu ve çekme mukavemeti üzerindeki etkileri sayılabilir. Q sütür çekme direnci ve tendon onarım mukavemetini artırmada verimli olduğu gösterilmiştir.

Boyanır Fleksör Tendonun Boşluk Oluşumuna ve Çekme Mukavemetine Karşı Direnci artırmak için Q Sütür kullanma

Bu protokol, tendon onarımlarının biyofiziksel özelliklerini ex vivo olarak değerlendirmek için bir yöntem göstermektedir. Bir politetrafloroetilen (PTFE) sütür materyali bu yöntemle değerlendirildi ve farklı koşullar altında diğer malzemelerle karşılaştırıldı.

Tendon cerrahisinde dikiş materyali olarak politetrafloroetilen (PTFE)

Ayak bileği-subtalar kompleks eklem (ASCJ) ayağın çekirdeğidir ve günlük aktivitelerde denge kontrolünde önemli bir rol oynar. Spor yaralanmaları genellikle bu eklemde dengesizliğe yol açar. Burada, ASCJ'nin bağ transeksiyonuna bağlı instabilitesinin bir fare modelini açıklıyoruz.

Ayak Bileği Subtalar Kompleks Eklem İnstabilitesinin Bir Fare Modeli

Bu çalışma, kronik benzeri bir tavşan rotator manşet (RC) yaralanması oluşturma prosedürlerini detaylandırmaktadır. Spesifik olarak, yaralanma, şiddetli kas yağ dejenerasyonu (FD) dahil olmak üzere insan RC anatomisini ve patofizyolojisini taklit etmek için subskapularis (SSC) kas-tendon/miyotendinöz ünitede oluşturulur. Bu protokol, RC yaralanmalarını incelemek ve rejeneratif tedavileri değerlendirmek için uygulanabilir.

Fibrozis ve Kas Yağ Dejenerasyonunun İncelenmesi için Tavşan Kronik Benzeri Rotator Manşet Yaralanma Modelinin Geliştirilmesi

Tendon sıkışmasının mekanobiyolojisini keşfetmek için uygun bir model sağlayarak, sürekli hücre canlılığı ile murin arka ekstremite eksplantlarında Aşil tendonu insokulasyonunun sıkışmasının neden olduğu fibrokartilajinöz değişikliği yeniden yaratan özel bir deneysel platform ve doku kültürü protokolü sunuyoruz.

Aşil Tendonu Sıkışmasının Mekanobiyolojisini İncelemek için Murin Hind Limb Eksplant Modeli

Biz ratlarda spinal kord yaralanmasının akut veya kronik dönemlerde iki dokunma duyusal test yöntemleri açıklanmaktadır. Bu onaylanmış prosedürler allodini gibi duyumların geliştirme ve bakım algılayabilir.

Sıçanlarda Spinal Kord Yaralanma sonrası Akut ve Kronik Dokunsal Duyu Testi

Öğrenin fare fleksör tendon yaralanması ve onarım cerrahisi tekniğini kullanarak iyileşme sürecindeki hücresel ve moleküler mekanizmaları. Bu yöntem skar oluşumuna katkıda bulunan hücre popülasyonlarını belirlemeye yardımcı olur.

Murin Flexor Tendon yaralanmaları ve onarım Cerrahisi

Daha fazla video keşfet