Name: Micropatterning ve 3D mikrodamarlar Meclisi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-09T15:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 5 s
Description: Öğrenin, enjeksiyon kalıplama yöntemiyle fizyolojik özellikleri taklit eden 3D mikrodamarlar üretin. Bu teknik, damar biyolojisi ve hastalık mekanizmalarını incelemek için özelleştirilebilir koşullar sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar Kök Hücre ve Rejeneratif Tıp yanı sıra Washington Üniversitesi Washington Nanofabrikasyona Tesisi Enstitüsü Lynn ve Mike Garvey Görüntüleme Laboratuvarı kabul etmek istiyorum. Onlar da Ulusal Sağlık Enstitüsü maddi destek kabul (YZ) DP2DK102258 verir, eğitim ve (MAR) T32HL007312 (SSK ve MAR) T32EB001650 verir.

<ol><li>Rubanyi, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+endothelium+in+cardiovascular+homeostasis+and+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cardiovasc.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The role of endothelium in cardiovascular homeostasis and diseases.</a> J. Cardiovasc. Pharmacol. 22, Suppl 4 37-44 (1993).</li>
<li>van Hinsbergh, V. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endothelium%3A+vascular+control+of+haemostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Obstet.+Gynecol.+Reprod.+Biol%22%5BJournal%5D)">The endothelium: vascular control of haemostasis.</a> Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 95 (2), 198-201 (2001).</li>
<li>Chiu, J. -J., Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Disturbed+Flow+on+Vascular+Endothelium%3A+Pathophysiological+Basis+and+Clinical+Perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Effects of Disturbed Flow on Vascular Endothelium: Pathophysiological Basis and Clinical Perspectives.</a> Physiol. Rev. 91, 327-387 (2011).</li>
<li>Qi, Y., Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PDGF-BB+and+TGB-b1+on+cross-talk+between+endothelial+and+smooth+muscle+cells+in+vascular+remodeling+induced+by+low+shear+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">PDGF-BB and TGB-b1 on cross-talk between endothelial and smooth muscle cells in vascular remodeling induced by low shear stress.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 108, 1908-1913 (2011).</li>
<li>Sozzani, S., Del Prete, A., Bonecchi, R., Locati, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemokines+as+effector+and+target+molecules+in+vascular+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc.+Res%22%5BJournal%5D)">Chemokines as effector and target molecules in vascular biology.</a> Cardiovasc. Res. 107 (3), 364-372 (2015).</li>
<li>Huh, D., Hamilton, G. A., Ingber, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+3D+cell+culture+to+organs-on-chips%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">From 3D cell culture to organs-on-chips.</a> Trends Cell Biol. 21 (12), 745-754 (2011).</li>
<li>Staton, C. a, Reed, M. W. R., Brown, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+analysis+of+current+in+vitro+and+in+vivo+angiogenesis+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Exp.+Pathol%22%5BJournal%5D)">A critical analysis of current in vitro and in vivo angiogenesis assays.</a> Int. J. Exp. Pathol. 90, 195-221 (2009).</li>
<li>Greek, R., Menache, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+Reviews+of+Animal+Models%3A+Methodology+versus+Epistemology%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Systematic Reviews of Animal Models: Methodology versus Epistemology.</a> Int. J. Med. Sci. 10, 206-221 (2013).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Can+Animal+Models+of+Disease+Reliably+Inform+Human+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Med%22%5BJournal%5D)">Can Animal Models of Disease Reliably Inform Human Studies.</a> PLoS Med. van der Worp, H. B., Howells, D. W., et al. 7 (3), e1000245(2010).</li>
<li>Leong, X. -F., Ng, C. -Y., Jaarin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+in+Cardiovascular+Research%3A+Hypertension+and+Atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Res.+Int%22%5BJournal%5D)">Animal Models in Cardiovascular Research: Hypertension and Atherosclerosis.</a> Biomed Res. Int. 2015, 528757(2015).</li>
<li>Pries, A. R., Secomb, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+Microvascular+Networks+Work%3A+Angiogenesis%2C+Remodeling%2C+and+Pruning%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology%22%5BJournal%5D)">Making Microvascular Networks Work: Angiogenesis, Remodeling, and Pruning.</a> Physiology. 29, 446-455 (2014).</li>
<li>D'Amore, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+Of+Angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms Of Angiogenesis.</a> Annu. Rev. Physiol. 49, 453-464 (1987).</li>
<li>Geudens, I., Gerhardt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordinating+cell+behaviour+during+blood+vessel+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Coordinating cell behaviour during blood vessel formation.</a> Development. 138, 4569-4583 (2011).</li>
<li>Ribatti, D., Nico, B., Crivellato, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+the+vascular+system%3A+a+historical+overview%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">The development of the vascular system: a historical overview.</a> Methods Mol. Biol. 1214, 1-14 (2015).</li>
<li>Ribatti, D., Nico, B., Crivellato, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphological+and+molecular+aspects+of+physiological+vascular+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Morphological and molecular aspects of physiological vascular morphogenesis.</a> Angiogenesis. 12 (2), 101-111 (2009).</li>
<li>Bautch, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGF-directed+blood+vessel+patterning%3A+From+cells+to+organism%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb.+Perspect.+Med%22%5BJournal%5D)">VEGF-directed blood vessel patterning: From cells to organism.</a> Cold Spring Harb. Perspect. Med. 2 (9), 1-12 (2012).</li>
<li>Stratman, A. N., Schwindt, A. E., Malotte, K. M., Davis, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial-derived+PDGF-BB+and+HB-EGF+coordinately+regulate+pericyte+recruitment+during+vasculogenic+tube+assembly+and+stabilization%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Endothelial-derived PDGF-BB and HB-EGF coordinately regulate pericyte recruitment during vasculogenic tube assembly and stabilization.</a> Blood. 116, 4720-4730 (2010).</li>
<li>Bach, T. L., Barsigian, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VE-Cadherin+mediates+endothelial+cell+capillary+tube+formation+in+fibrin+and+collagen+gels%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">VE-Cadherin mediates endothelial cell capillary tube formation in fibrin and collagen gels.</a> Exp. Cell Res. 238 (238), 324-334 (1998).</li>
<li>Kubow, K. E., Conrad, S. K., Horwitz, aR. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix+microarchitecture+and+myosin+II+determine+adhesion+in+3D+matrices%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Biol%22%5BJournal%5D)">Matrix microarchitecture and myosin II determine adhesion in 3D matrices.</a> Curr. Biol. 23 (17), 1607-1619 (2013).</li>
<li>Potapova, I. A., Gaudette, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+Stem+Cells+Support+Migration%2C+Extracellular+Matrix+Invasion%2C+Proliferation%2C+and+Survival+of+Endothelial+Cells+In+Vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal Stem Cells Support Migration, Extracellular Matrix Invasion, Proliferation, and Survival of Endothelial Cells In Vitro.</a> Stem Cells. 25 (7), 1761-1768 (2007).</li>
<li>Bayless, K. J., Davis, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sphingosine-1-phosphate+markedly+induces+matrix+metalloproteinase+and+integrin-dependent+human+endothelial+cell+invasion+and+lumen+formation+in+three-dimensional+collagen+and+fibrin+matrices%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem.+Biophys.+Res.+Commun%22%5BJournal%5D)">Sphingosine-1-phosphate markedly induces matrix metalloproteinase and integrin-dependent human endothelial cell invasion and lumen formation in three-dimensional collagen and fibrin matrices.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 312 (4), 903-913 (2003).</li>
<li>Hellström, M., Gerhardt, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+pericytes+leads+to+endothelial+hyperplasia+and+abnormal+vascular+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Lack of pericytes leads to endothelial hyperplasia and abnormal vascular morphogenesis.</a> J. Cell Biol. 152 (3), 543-553 (2001).</li>
<li>Tulloch, N. L., Muskheli, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+of+Engineered+Human+Myocardium+With+Mechanical+Loading+and+Vascular+Coculture%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Growth of Engineered Human Myocardium With Mechanical Loading and Vascular Coculture.</a> Circ. Res. 109, 47-59 (2011).</li>
<li>Davis, G. E., Saunders, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+balance+of+capillary+tube+formation+versus+regression+in+wound+repair%3A+role+of+matrix+metalloproteinases+and+their+inhibitors%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Investig.+dermatology+Symp%22%5BJournal%5D)">Molecular balance of capillary tube formation versus regression in wound repair: role of matrix metalloproteinases and their inhibitors.</a> J. Investig. dermatology Symp. 11 (1), 44-56 (2006).</li>
<li>Kannan, R. Y., Salacinski, H. J., Butler, P. E., Hamilton, G., Seifalian, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+status+of+prosthetic+bypass+grafts%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Mater.+Res.+B.+Appl.+Biomater%22%5BJournal%5D)">Current status of prosthetic bypass grafts: a review.</a> J. Biomed. Mater. Res. B. Appl. Biomater. 74, 570-581 (2005).</li>
<li>Nerem, R. M., Seliktar, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+Tissue+Engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Vascular Tissue Engineering.</a> Annu. Rev. Biomed. Eng. 3 (1), 225-243 (2001).</li>
<li>Melchiorri, A. J., Hibino, N., Fisher, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+and+techniques+to+enhance+the+in+situ+endothelialization+of+small-diameter+biodegradable+polymeric+vascular+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng.+Part+B.+Rev%22%5BJournal%5D)">Strategies and techniques to enhance the in situ endothelialization of small-diameter biodegradable polymeric vascular grafts.</a> Tissue Eng. Part B. Rev. 19 (4), 292-307 (2013).</li>
<li>Abbott, W. M., Callow, A., Moore, W., Rutherford, R., Veith, F., Weinberg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+and+performance+standards+for+arterial+prostheses%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vasc.+Surg%22%5BJournal%5D)">Evaluation and performance standards for arterial prostheses.</a> J. Vasc. Surg. 17 (4), 746-756 (1993).</li>
<li>Niklason, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+Arteries+Grown+in+Vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Functional Arteries Grown in Vitro.</a> Science. 284 (5413), 489-493 (1999).</li>
<li>Niklason, L., Counter, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+vessels+engineered+from+human+cells+-+Authors%27+reply%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Blood vessels engineered from human cells - Authors' reply.</a> Lancet. 366 (9489), 892-893 (2005).</li>
<li>Zheng, Y., Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+microvessels+for+the+study+of+angiogenesis+and+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">In vitro microvessels for the study of angiogenesis and thrombosis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 109, 9342-9347 (2012).</li>
<li>Zheng, Y., Chen, J., Lòpez, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flow-driven+assembly+of+VWF+fibres+and+webs+in+in+vitro+microvessels%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">Flow-driven assembly of VWF fibres and webs in in vitro microvessels.</a> Nat. Commun. 6, 7858(2015).</li>
<li>Ligresti, G., Nagao, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Three-Dimensional+Human+Peritubular+Microvascular+System%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Nephrol%22%5BJournal%5D)">A Novel Three-Dimensional Human Peritubular Microvascular System.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 27, (2015).</li>
<li>Roberts, M. A., Tran, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stromal+cells+in+dense+collagen+promote+cardiomyocyte+and+microvascular+patterning+in+engineered+human+heart+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Stromal cells in dense collagen promote cardiomyocyte and microvascular patterning in engineered human heart tissue.</a> Tissue Eng. Part A. , (2016).</li>
<li>Qin, D., Xia, Y., Whitesides, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Soft+lithography+for+micro-+and+nanoscale+patterning%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Soft lithography for micro- and nanoscale patterning.</a> Nat. Protoc. 5 (3), 491-502 (2010).</li>
<li>Alpha-Step 200 Manual. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Tencor+Instruments%22">Tencor Instruments</a>. , (1989).</li>
<li>Rajan, N., Habermehl, J., Coté, M. -F., Doillon, C. J., Mantovani, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+ready-to-use%2C+storable+and+reconstituted+type+I+collagen+from+rat+tail+tendon+for+tissue+engineering+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Preparation of ready-to-use, storable and reconstituted type I collagen from rat tail tendon for tissue engineering applications.</a> Nat. Protoc. 1 (6), 2753-2758 (2006).</li>
<li>Baudin, B., Bruneel, A., Bosselut, N., Vaubourdolle, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+protocol+for+isolation+and+culture+of+human+umbilical+vein+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">A protocol for isolation and culture of human umbilical vein endothelial cells.</a> Nat. Protoc. 2 (3), 481-485 (2007).</li>
<li>Leung, A. D., Wong, K. H. K., Tien, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+expanders+stabilize+human+microvessels+in+microfluidic+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Mater.+Res.+-+Part+A%22%5BJournal%5D)">Plasma expanders stabilize human microvessels in microfluidic scaffolds.</a> J. Biomed. Mater. Res. - Part A. 100 (7), 1815-1822 (2012).</li>
<li>Tousimis SAMDRI-780 Critical Point Drying Apparatus. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Tousimis+Research+Corporation%22">Tousimis Research Corporation</a>. , (1987).</li>
<li>Palpant, N. J., Pabon, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+%CE%B2-catenin+signaling+respecifies+anterior-like+endothelium+into+beating+human+cardiomyocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Inhibition of β-catenin signaling respecifies anterior-like endothelium into beating human cardiomyocytes.</a> Development. 142 (18), 3198-3209 (2015).</li>
<li>Gimbrone, M. a, Topper, J. N., Nagel, T., Anderson, K. R., Garcia-Cardena, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Dysfunction%2C+Hemodynamic+Forces%2C+and+Atherogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb.+Haemost%22%5BJournal%5D)">Endothelial Dysfunction, Hemodynamic Forces, and Atherogenesis.</a> Thromb. Haemost. 82, 722-726 (1999).</li>
<li>Wu, M. H., Ustinova, E., Granger, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrin+binding+to+fibronectin+and+vitronectin+maintains+the+barrier+function+of+isolated+porcine+coronary+venules%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Integrin binding to fibronectin and vitronectin maintains the barrier function of isolated porcine coronary venules.</a> J. Physiol. 532 (3), 785-791 (2001).</li>
<li>Ribatti, D., Nico, B., Vacca, A., Roncali, L., Dammacco, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+cell+heterogeneity+and+organ+specificity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Hematother.+Stem+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Endothelial cell heterogeneity and organ specificity.</a> J. Hematother. Stem Cell Res. 11, 81-90 (2002).</li>
<li>Shanks, N., Greek, R., Greek, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+animal+models+predictive+for+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Philos.+Ethics.+Humanit.+Med%22%5BJournal%5D)">Are animal models predictive for humans.</a> Philos. Ethics. Humanit. Med. 4, 2(2009).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Engineered mikrodamarlar gibi lümen geometri, hidrodinamik kuvvetler ve çok hücreli etkileşimler gibi fizyolojik özellikleri mevcut ve ayarlanabilir olduğu bir in vitro model vardır. Platformun bu tip ve model in vitro kültür koşulları, söz konusu mikro-o eşleştirilebilir çeşitli bağlamlarda endotel davranışını incelemek olanağı sunar ki güçlüdür. Örneğin, damar endotel işlemleri, sürücü mekanizmaları, farklı organlarda ve sağlık ve hastalık 44 gibi farklı patolojik durumlarda, farklı oluştu...

Her organ mikrovasküler, doku mikro tanımlamak doku homeostazını korumak ve inflamasyon, geçirgenlik, tromboz ve fibrinoliz 1,2 düzenlenmesine yardımcı olur. 5 - mikrovasküler endotel, özellikle, bu nedenle, kan akışı ve çevreleyen doku arasında bir arayüz, hidrodinamik kuvvetler ve dolaşımdaki sitokinler ve hormonlar 3 gibi bir uyarıcıya tepki olarak vasküler ve organ fonksiyonu modüle önemli bir rol oynar. endotel, kan arasındaki ayrıntılı etkileşimleri anlamak ve çevredeki doku mikro-damar biyoloji ve hastalığın ilerlemesi çalışma için önemlidir. In vivo mikrovasküler yapısında özetlemek ve 6,7 çalışmayan in vitro araçları sınırlı tarafından Ancak, bu etkileşimlerin incelenmesinde ilerleme engellemiştir edilmiştir. Sonuç olarak, saha ve tedavi ilerleme masraflı ve zaman-ağır güvendi10 - genellikle insanlarda 8 başarının çevirmek için başarısız hayvan modelleri tüketen. In vivo modeller hastalık mekanizmaları ve vasküler fonksiyonları çalışmada değerli olmakla birlikte, karmaşık ve çoğu kez bireysel hücresel, biyokimyasal hassas kontrolü ve biyofizik ipuçlarını yoksundur. Vücutta damar sistemi optimize perfüzyon ve besin taşıma eş zamanlı olarak 11 sağlayarak, geniş kılcal yatak ile birlikte olgun hiyerarşik bir yapıya sahiptir. Başlangıçta, erken gelişme 12,13 sırasında hiyerarşik dallı bir ağa yeniden düzenleyen bir ilkel pleksus olarak damar formları. Bu süreçlerde yer alan sinyallerin çok iyi 14 anlaşılmış olmasına rağmen - 16, vasküler desenlendirme 15 nasıl belirlendiğini böyle zor kalır. Buna karşılık, organize damar ağları mühendisi in vitro bu süreci yansıtan arı vardırn zordur. Birçok mevcut in vitro platformları, iki boyutlu bir endotel hücre kültürleri olarak, bu tür çok hücreli yakınlığı, üç boyutlu bir lümen geometri, akış ve hücre-dışı matris olarak önemli özelliklerinin eksikliği, damar model. 3D hidrojeller tüp oluşumu deneyleri (kollajen veya fibrin) 17 - 19 veya istila deneyleri 20,21 diğer vasküler 17,22 veya doku hücre tipleri 23 ile 3D ve onların etkileşimleri endotel fonksiyonunu incelemek için kullanılır olmuştur. Bununla birlikte, bu deneylerde lümen birleştiricisi, hemodinamik akışı ve uygun perfüzyon eksikliği toplandı. Bundan başka, bu tüp oluşumu deneylerinde 24 vasküler gerileme eğilimi gerçekleştirilebilir fonksiyonel çalışmalar derecesini sınırlar süren uzun süreli kültürleri ve olgunlaşmasını önler. Böylece, uygun model olabilir mikrovasküler ağlarının en in vitro platformları mühendisi gelişen ihtiyaç vardırözelliklerini dothelial ve uzun süreli kültür yeteneğine sahiptirler. vasküler mühendislik teknikleri çeşitli damar hastalığı olan hastalarda değiştirmek için medikal uygulamalar veya bypass etkilenen gemiler için yılda ortaya çıkmıştır. Polietilen tereftalat (PET) ve politetrafloroetilen (ePTFE) gibi sentetik malzemelerden yapılmış geniş çaplı damarları uzun dönem açıklık (ortalama% 95 açıklığının 5 yıldan fazla) 25 ile önemli bir terapötik başarı oldu. Küçük çaplı sentetik greft (&lt;6 mm) tipik olarak intimal hiperplazi ve trombopoezde 26 gibi komplikasyonların karşı karşıya olmasına rağmen - doku biyolojik malzeme ile yapılmış küçük çaplı greft mühendislik 28, önemli ilerlemeler 29,30 yaptık. Bu tür ilerlemelere rağmen, böylece mikro üzerine tasarlanmış kaplar bir sorun kalmıştır. yeterli mikrovaskuleterini modellemek için, Suf karmaşık bir ağ desenleri oluşturmak için gerekli olanficient mekanik dayanım açıklığını ve parankimal hücreleri ve hücre yenileme için hem besin nüfuz sağlayan bir matris kompozisyonu ile korumak için. 34 - Bu protokol ayarlanabilir ve kontrol edilebilir mikroçevresinin 31 ayar in vivo bir yerli taklit eden bir roman yapay perfusable damar ağı sunuyor. tarif edilen yöntem, 100 um mertebesinde çapları ile mühendislik mikrodamarlar oluşturur. Engineered mikrodamarlar Ben hidrojel kollajen yumuşak türü içinde gömülü olduğu bir mikroakışkan kanal aracılığıyla endotel hücreleri perfüze tarafından üretilmektedir. Bu sistem, açık lümen yapı ile desenli ağlar oluşturmak çoklu hücresel etkileşimleri çoğaltmak, hücre dışı matris bileşimi modüle eden ve fizyolojik olarak uygun hemodinamik kuvvetleri uygulamak için kapasiteye sahiptir.

<table><tbody><tr><td><güçlü > Gofret İmalatı< / güçlü ></td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>AutoGlow Plazma Sistemi</td><td>AutoGlow</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Headway Spin Coater</td><td>Headway Research, Inc & nbsp;</td><td>PWM32 Spin Kaplayıcı&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>ABM Kontak Hizalayıcı</td><td>AB-M</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alfa Adım Profilometre</td><td>Tencor</td><td>Alpha Step 200</td><td></td></tr><tr><td>SU-8 Geliştirici</td><td>Microchem</td><td>Y020100</td><td></td></tr><tr><td>SU-8 Resist</td><td>Microchem</td><td>SU-8 2000</td><td></td></tr><tr><td>8" silikon gofret</td><td>Gofret Dünya A.Ş.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Masa Üstü Mikro Desen Jeneratörü</td><td>Heidelberg Instruments</td><td>&mu; PG 101</td><td>Fotoğraf maskesi üretimi için</td></tr><tr><td>Sıcak plaka</td><td>VWR</td><td>97042-646</td><td></td></tr><tr><td>İzpropil alkol</td><td>Avantor Performans Malzemeleri</td><td>9088</td><td></td></tr><tr><td>Petri kapları (120 x 120 mm, kare)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z617679</td><td></td></tr><tr><td>Trikloro(3,3,3-trifloropropil)silan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MKBG3805V</td><td></td></tr><tr><td>Polidimetilsiloksan (PDMS) elastomer taban ve sertleştirici</td><td>Dow Corning</td><td>Sylgard 184</td><td>10:1'de karıştırılmış (a/a)</td></tr><tr><td>Vakumlu kurutucu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z119024-1EA</td><td></td></tr><tr><td>Fırın</td><td>VWR</td><td>9120976</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Cihaz İmalatı ve Kültürü</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>poli(metil metakrilat) (PMMA)</td><td>Pleksiglas</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Korona İşlemcisi</td><td>Elektro-Teknik Ürünler A.Ş.</td><td>BD-20</td><td>PMMA cihazlarının ve PDMS kalıplarının plazma işlemi için el tipi cihaz</td></tr><tr><td>Lehimleme Demir Weller</td><td>&nbsp;</td><td>WTCPS</td><td></td></tr><tr><td>Paslanmaz Çelik Kafes Başlı Oluklu Makine Vidası</td><td>McMaster-Carr&nbsp;</td><td>91785A096</td><td></td></tr><tr><td>Paslanmaz çelik dübel pimleri</td><td>McMaster-Carr&nbsp;</td><td>93600A060</td><td></td></tr><tr><td>Cımbız&nbsp;</td><td>Miltex</td><td>24-572</td><td>Benzer cımbız kullanılabilir</td></tr><tr><td>Spatula (Mikro Kaşık)</td><td>Elektron Mikroskobu Hizmetleri</td><td>62410-01</td><td></td></tr><tr><td>Tornavida</td><td></td><td></td><td>Herhangi bir düz uçlu tornavida kullanılabilir, otoklavlanmış</td></tr><tr><td>Cam lameller (22 x 22 mm)</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-542B</td><td></td></tr><tr><td>Çamaşır suyu</td><td>Clorox</td><td>4460030966</td><td></td></tr><tr><td>Petri kapları (150 x 25 mm)</td><td>Corning</td><td>430599</td><td></td></tr><tr><td>Petri kapları (100 x 20 mm)</td><td>Corning</td><td>2909</td><td></td></tr><tr><td>Pamuk, 1 cm x 3 cm'lik parçalar</td><td></td><td></td> halinde kesilmiş <td>Otoklavlanmış</td></tr><tr><td>Polietilenimin (PEI)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3143</td><td>Hücre kültürü dereceli suda %1'e seyreltin</td></tr><tr><td>Gluteraldehit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G6257</td><td>Hücre kültürü dereceli suda</td></tr> <tr><td>%0,1'e seyreltinSteril H2O</td><td></td><td></td><td>Otoklavlanmış DI H2O</td></tr><tr><td>Tip I kollajen,% 0.1 asetik asit</td><td></td><td></td> içinde çözülmüş <td>Rajan et. al. 2006'da (ref #37)</td></tr><tr><td>1 ml şırınga</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>10 ml şırınga</td><td>BD</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>15 ml konik tüpler</td><td>Corning</td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>30 ml konik tüpler</td><td>Corning</td><td>352098</td><td></td></tr><tr><td>M199 10x Media&nbsp;</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>11825-015</td><td></td></tr><tr><td>1 N NaOH (steril)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>415413</td><td>Hücre kültürü dereceli su</td></tr><tr><td>HUVEC'lerde</td> 1 N'ye seyreltin <td>Lonza</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Endotelyal büyüme ortamı</td><td>Lonza</td><td>CC-3124</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin</td><td>Corning</td><td>25-052-CI</td><td></td></tr><tr><td>Fetal sığır serumu (FBS)</td> <td>Thermofisher Scientific</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>Leuconostoc spp.'den Dekstran (70&nbsp; kDa)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>31390</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat Tamponlu Salin (PBS)</td><td>Corning</td><td>21-031-CV</td><td></td></tr><tr><td>Hemositometre</td><td>Hausser Scientific Co.</td><td>3200</td><td></td></tr><tr><td>Jel yükleme uçları</td><td>VWR</td><td>37001-152</td><td></td></tr><tr><td>18 G Künt Dolgu İğnesi</td><td>BD&nbsp;</td><td>305180</td><td></td></tr><tr><td>20 G Paslanmaz Çelik Dağıtım İğnesi</td><td>McMaster-Carr</td><td>75165A123</td><td></td></tr><tr><td>Tygon 1/32" ID, 3/32 "OD Silikon Boru</td><td>Cole-Parmer</td><td>EW-95702-00</td><td></td></tr><tr><td>1/16" Borudan Boruya Kaplin</td><td>McMaster-Carr</td><td>5116K165</td><td></td></tr><tr><td>90&deg; Dirsek Konnektörleri, Tüpten Tüpe</td><td>McMaster-Carr</td><td>5121K901</td><td></td></tr><tr><td>Luer Kilit Kaplini (Dişi, 1/16" ID)</td><td>McMaster-Carr</td><td>51525K211</td><td></td></tr><tr><td>Plastik Forseps, Çene Saplı</td><td>Elektron Mikroskobu Hizmetleri</td><td>72971</td><td></td></tr><tr><td>Çift Şırınga Pompası</td><td>Harvard Aparatı</td><td>70-4505</td><td></td></tr><tr><td>5 ml Polistiren Yuvarlak tabanlı tüp</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-959-2A</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Cihaz Analizi</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Formaldehit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F8775</td><td></td></tr><tr><td>Sığır Serumu Albümini</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A8806-5G</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T-9284</td><td></td></tr><tr><td>Tavşan anti-hCD31</td><td>Abcam</td><td>ab32457</td><td>1:25 çalışma seyreltmesi</td></tr><tr><td>FITC konjuge anti-von Willebrand Faktör antikoru</td><td>Abcam</td><td>ab8822</td><td>1:100 çalışma seyreltmesi</td></tr><tr><td>Keçi anti-tavşan 568 ikincil antikor</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A-11011</td><td>1:100 çalışma seyreltmesi</td></tr><tr><td>Hoescht</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>H1399</td><td>DMSO</td></tr><tr><td>Sodyum kakodilat içinde yeniden süspansiyon & nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0250</td><td>0.2 M kkodilat tamponu yapmak için</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>VWR International</td><td>BDH1164-4LP</td><td></td></tr><tr><td>40 kDa FITC-konjuge Dekstran</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>FD40S&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Ek Kültür Reaktifleri&nbsp; </güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CHIR-99021</td><td>Selleck Chem</td><td>S2924</td><td>Küçük moleküllü GSK-3 inhibitörü</td></tr><tr><td>İnsan rekombinant VEGF</td><td>Peprotech</td><td>100-20</td><td></td></tr><tr><td>İnsan rekombinant bFGF</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-18B</td><td></td></tr></tbody></table>

micropatterning ve 3d mikrodamarlar meclisi

Micropatterning and Assembly of 3D Microvessels 

Nitro platformlarda, endotel hücreleri, vasküler biyolojisi ölçüde 2B endotelyal hücre kültürü ile sınırlıdır çalışma polimer veya cam bazlı substratlar ve hidrojel-bazlı tüp oluşumu testleri ile odaları akar. Bu testlerin, bilgilendirici olurken, vasküler fonksiyonun düzenlenmesinde önemli rol oynarlar lümen geometri, uygun hücre dışı matriks ve çok hücreli yakınlığı, recapitulate yok. Bu yazıda 100 um mertebesinde çapları ile mühendislik damarları üretmek için bir enjeksiyon kalıplama yöntemi tarif etmektedir. Mikrodamarlar Ben hidrojel kollajen yerel türü içinde gömülü bir mikroakışkan kanal endotel hücrelerin ekim tarafından üretilmektedir. oluşumu kanal önce kollajen matris içinde parankimal hücreler dahil olarak, belirli bir doku microenvironments modellenmiştir incelenebilir. hidrodinamik özellikleri ve medya kompozisyon ek modülasyon istenen mikroçevresinin içinde karmaşık vasküler fonksiyon kontrolü için izin verir.Bu platform, perivasküler hücre alımı, kan endotel etkileşimlerini akış cevap ve doku-mikrovasküler etkileşimleri çalışma sağlar. Engineered mikrodamarlar bir damar niş bireysel bileşenlerinden etkisini izole etmek olanağı sunmak ve hassas sağlık ve hastalık hem de vasküler biyoloji okumak için kimyasal, mekanik ve biyolojik özelliklerini kontrol eder.

Mühendislik gemi platformu I matris doğal kollajen tip içinde gömülü fonksiyonel mikrovaskuleterini oluşturur ve in vitro, hücresel biyofizik ve biyokimyasal ortamın sıkı kontrol sağlar. işlenmiş mikrodamarlar imal etmek için, insan göbek damarı endotel hücreleri (HUVEC&#39;ler), bir lümen ve birleşik endoteli oluşturmak için ekleme kolajen gömülü mikroakışkan ağ üzerinden perfüze edilir. Şekil 1A-C&#39;de gösterildiği gibi, kap geometrisi akış hızı, eğrilik ile...

Bu el yazması endotele fizyolojik özelliklerini recapitulate mikrodamarlar mühendisi bir enjeksiyon kalıplama yöntemi sunar. Mikroakışkan tabanlı süreç böyle akışı, hücresel kompozisyon, geometri ve biyokimyasal geçişlerini olarak Uyarlanabilen koşullar, patent 3D damar ağları oluşturur. üretim süreci ve potansiyel uygulama örnekleri açıklanmıştır.

Micropatterning ve 3D mikrodamarlar Meclisi

In vitro platforms to study endothelial cells and vascular biology are largely limited to 2D endothelial cell culture, flow chambers with polymer or glass ...

Mühendislik ürünü mikro damarlar kullanmanın genel amacı, normal ve hastalıklı durumlarda vasküler fizyolojiyi incelemek için vücuttaki damarların yapısını ve işlevini taklit etmektir. Bu yöntem, farklı anathema hücrelerinin akışa nasıl yanıt verdiği, doku işlevini nasıl etkiledikleri ve vasküler hastalıkların zamanla nasıl başladığı ve ilerlediği gibi vasküler biyoloji alanındaki temel soruların cevaplanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, farklı organ sistemlerini ve hastalık durumlarını taklit edecek şekilde kolayca modifiye edilebilmesidir.Bu işlem; hücre tipleri, matris ve medya kompozisyonu ile diğer değişkenler değiştirilerek gerçekleştirilebilir. Genellikle, bu yöntemde yeni olan kişiler, damar kalitesinin düşük olmasına yol açabilecek yaygın hataların farkına varmadan önce zorluk yaşayabilirler. Enjeksiyon kalıplama ve montaj aşamalarında başarılı üretimin çeşitli püf noktaları olduğu için, bu yöntemin görsel olarak gösterilmesi kritik önem taşır.Bu prosedür için, düz ve mikro desenli PDMS kalıpları ile PMMA gövde parçalarını önceden hazırlayın. Bu parçaların nasıl yapılacağına dair açıklama metin protokolünde sunulmuştur. PDMS kalıpları; vidalar, pinler, pensler ve bir spatula ile birlikte otoklavlayın.PMMA parçalarını otoklavlamayın. Bunlar, bir çeker ocuk altında çamaşır suyunda sterilize edilmelidir. PMMA parçalarının çamaşır suyunda en az bir saat boyunca bekletilmesinin ardından, çamaşır suyunu otoklavlanmış su ile iki kez durulayın.Ardından, parçaları steril kaplara yerleştirin. Fazla suyu aspire edin ve havada kurumaya bırakın. Her şey temizlendikten sonra, hem üst hem de alt PMMA parçaların iç kuyucuklarını el tipi plazma cihazı ile yaklaşık bir dakika boyunca işlemden geçirerek protokole başlayın.Plazma işleminin kapsama alanını daha iyi gözlemleyebilmek için ışığı kapatın. Ardından, iç kuyucuklara %1 PEI ekleyin. PEI kolayca yayılmıyorsa, plazma işlem süresini artırın.PEI'nin 10 dakika boyunca reaksiyona girmesine izin verdikten sonra solüsyonu uzaklaştırın, ardından cihazları steril su ile durulayın ve havada kurumaya bırakın. Kuruduktan sonra, işlem görmüş yüzeylere %0,1 glutaraldehit uygulayın ve glutaraldehitin yarım saat boyunca reaksiyona girmesine izin verin. Ardından, parçaları iki kez steril su ile durulayın ve havada kurumaya bırakın.Şimdi, önceden ayrılmış stok kolajen hacmini, ortam ve sodyum hidroksit içeren nötralizasyon çözeltisiyle birleştirerek damar üretimi için taze %0,75 nötralize kolajen hazırlayın. Çözelti homojen hale gelene ve rengi turuncuya dönene kadar bir spatula ile yavaşça ve dikkatle karıştırın. Ardından, gerekirse hücreleri istenen konsantrasyonda ekleyin ve hücreler eşit şekilde dağılana kadar çözeltiyi karıştırmaya devam edin.Montaj işlemine hazırlık amacıyla, mikro desenli PDMS kalıbı 100 x 20 milimetrelik bir kaba yerleştirin ve kalıba bir dakika boyunca plazma işlemi uygulayın. Ardından, kare rezervuarların giriş ve çıkış rezervuarlarıyla hizalanması için üst PMMA parçayı PDMS üzerine hizalayın. Daha sonra, kolajen enjeksiyonundan sonra açık kalmaları için giriş ve çıkış rezervuar deliklerine paslanmaz çelik pimler yerleştirin.Şimdi, hava kabarcığı oluşmasına izin vermeden kolajen hücre karışımını bir mililitrelik bir şırıngaya yükleyin. Ardından, pens yardımıyla üst PMMA parçasına hafifçe bastırarak PDMS kalıba sabitleyin ve enjeksiyon portundan yaklaşık yarım mililitre kolajen hücre karışımını yavaşça enjekte edin. Kolajen, desen üzerindeki 20 by 20 milimetre alanı doldurmalı ve dışarı sızmamalıdır.Ardından, sabitleme pimlerini sarsmadan kabı dikkatlice kapatın. Sonra, alt PMMA parçasındaki iç kuyucuğa 22 kare milimetrelik bir cam lamel yerleştirin. Daha sonra, camın üzerine yaklaşık 0,25 mililitre kolajeni eşit şekilde dağıtın.Düz PDMS'yi, arada hava kabarcığı kalmayacak şekilde PMMA'ya paralel olacak şekilde nazikçe kolajenin içine indirerek alt yarıyı tamamlayın. Şimdi, cihazın her iki yarısını dikkatlice 37 °C'lik bir inkübatöre yerleştirin ve devam etmeden önce kolajen çözeltisinin 30 dakika boyunca jelleşmesini bekleyin. Jelleşmeden sonra, alt parçadaki PDMS'yi çevreleyecek kadar PBS ekleyin.Ardından, kenarlarda kalan fazla kolajeni temizlemek için pens kullanın ve kolajeni PBS ile nemli tutarak düz PDMS parçayı yavaşça soyun. Üst parçayı hazırlamak için, PMMA ve PDMS düzeneğini pensle kaldırıp ters çevirin. Daha sonra iç yüze birkaç damla PBS ekleyin ve PDMS kalıbını üst PMMA parçadan hızlı ve sıkı bir şekilde soyarak çıkarın.Ardından, ikinci bir penset çifti ile PMMA yuvanın diğer tarafındaki pimleri nazikçe çıkarın. Pimleri çıkarmadan önce yukarı aşağı hareket ettirerek giriş ve çıkışların fazla kollajenden temiz olduğundan emin olun. Pimler kendiliğinden düşerse, giriş ve çıkışların temiz olduğundan emin olmak için sadece başka bir steril kama pimi kullanın.Ardından, mikro desenli kolajen üzerine daha fazla PBS damlatın, parçayı ters çevirin ve dört köşe deliğine vidaları yerleştirin. Şimdi, vidaları deliklerine hizalayarak üst parçayı alt parçanın üzerine nazikçe yerleştirin. İki parçanın birbirinin üzerinde kaymasına izin vermeyin.Ardından, parçaları aşırı sıkmamak için bir spatula yardımıyla ve nazikçe birbirine vidalayın. Montaj sırasında nazik ve hassas olmak kritik önem taşır. Yeterli miktarda PBS uygulanarak iç yüzeyler arasındaki sürtünme azaltılır.Vidaları sıkarken yavaş ilerleyin ve herhangi bir dirençle karşılaştığınız anda durun. Ardından, PMMA yüzeylerinin etrafındaki PBS'yi aspire edin ve cihazın bir kenarının altına küçük bir pamuk parçası yerleştirin. Sonrasında, rezervuarlardaki tüm PBS'yi aspire edin.Şimdi, rezervuarları hücre kültür ortamı ile yeniden doldurun ve jelleşme için cihazı en az bir saat inkübe edin. Cihaz monte edildikten sonra, cihazı ekmek için mililitre başına 10 milyon hücre içeren bir endotelyal hücre süspansiyonu kullanın. Giriş ve çıkış rezervuarlarındaki ortamı uzaklaştırın ve jel yükleme uçlarına sahip 20 µL'lik bir pipet kullanarak, giriş rezervuarının merkezine 10 µL hücre süspansiyonu ekleyin.Hücreler hemen ağın içine akacak ve ağı kaplayacaktır. Hücreler ağı doldurduğunda ve akış dengelendiğinde, her iki rezervuara 150 µL besiyeri ekleyin. Ardından, hücrelerin yayılıp tutunabilmesi için cihazı bir saat veya daha fazla süreyle inkübe edin.Uzun süreli kültür için, her 12 saatte bir medyumu uzaklaştırın ve giriş rezervuarına 150 microliters, çıkış rezervuarına ise 50 microliters taze medyum ekleyin. 24 saatlik kültürlemeden sonra, sürekli akış koşullarını sağlamak için bir şırınga pompası kullanılabilir. Malzemeleri biyolojik güvenlik kabinine getirdikten sonra, tüpleri otoklav torbalarından çıkarın ve bir kaba yerleştirin.Ardından, yan delikleri eritip boruları içinden geçirerek steril bir akış kabı hazırlayın. %3,5 Dextran içeren kültür ortamı ile doldurulmuş 10 mililitrelik bir şırınga hazırlayın. Sonra, dolu şırıngayı giriş borusunun ucundaki luer kilidine takın.Ardından, şırıngayı pompaya sabitleyin ve hapsolmuş hava kabarcıkları tüpten çıkana kadar besiyerini akıtın. Tüp besiyeri ile dolduğunda ve kabarcıklar temizlendiğinde, düzeneği yeni bir kaba aktarın ve giriş konnektörü bağlantısını gövde girişine yerleştirin. Son olarak, şırınga pompasını istenen akış hızına ayarlayın ve perfüzyona başlayın.18 gauge bir iğne ve bir mililitrelik şırınga kullanarak tüpleri hücre kültür medyası ile doldurup çıkışı hazırlayın. Boruyu kelepçeleyin ve iğneyi çıkarın. Ardından, bir havya kullanarak çıkış toplama tüpünün kapağında bir delik açın.Ardından, toplama tüpüne besiyeri ekleyin, boruyu yerleştirin ve konnektör eklemini gövde çıkışına takın. Bu işlem boyunca, besiyerini boruda tutmak için bir klempe kullanılır. İşlem tamamlandığında, düzeneğin tamamını bir inkübatöre aktarın.Deneysel koşullara bağlı olarak, şırınganın 24 ila 36 saat sonra yeniden doldurulması gerekebilir. Şırınga değişimi sırasında, boru hattına hava kabarcığı girmediğinden emin olun. Açık bir lümen ve konfluen endotelyum oluşturmak için insan göbek veni ve endotel hücreleri, kolajen gömülü mikro akışkan ağ üzerinden perfüze edilmiştir.Farklı akış koşullarını oluşturmak için çeşitli kap geometrileri kullanılmıştır. Endoteleum üzerine sabit kayma gerilmesi uygulamak için sürekli akışlı kültür koşulları kullanılmıştır. Yerçekimi destekli akış koşulları altında kültüre edilen cihazlar da uzun süreli canlılığı ve açıklığı korumuştur.Bu mikro damarların kritik bir özelliği, inflamatuar uyaranlara yanıt verme yetenekleridir. Bu durum, mikro damarların tam kan ilele perfüze edilmesiyle incelenmiştir. Uyarılmamış mikro damarlar, aktive olmamış endotelyum içermiş ve sükunet halini korumuştur.Uyarılmış mikro-damarlar aktive olmuş ve verdikleri yanıt trombüs oluşumunu başlatmıştır. Sistemin bir başka ilginç uygulaması, farklı endotelyal hücre popülasyonlarından oluşan damar yapılarındaki fenotipik değişiklikleri incelemektir. Örneğin, kök hücrelerin benzersiz popülasyonlarından oluşan mikro-damarlar, farklı anjiyojenik tomurcuklanma yetenekleri sergilemiştir.Bu videoyu izledikten sonra, mikro damarların nasıl üretileceği ve bunların vasküler biyolojiyi incelemek ve karmaşık model organ sistemleri kurmak için nasıl kullanılacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. Bu prosedürü uygularken, pratik yaptıkça başarılı damar oluşum oranının artacağını ve daha tutarlı sonuçlar alınacağını unutmamak önemlidir. Yöntem uzmanlaşmış bir kez olduğunda, üç ila dört saat içinde birkaç cihaz üretilebilir.Bu prosedürün ardından; endotelyal durgunluk, geçirgenlik, ilaç yanıtı ile hücrelerin ve damarların genel morfolojisini değerlendirmek için tam kan perfüzyonu, Dekstran veya farmasötik tedaviler gibi diğer yöntemler uygulanabilir.

micropatterning-and-assembly-of-3d-microvessels

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Biz hücre yakalama ve kültür etkinleştirebilirsiniz mikroakışkan cihazların imalatı için bir protokol tanımlamaktadır. Bu yaklaşımda, mikroakışkan kanallar içinde oluk gibi desenli mikro, içinde hücre sabitleyebilirsiniz Shear stresin düşük olduğu bölgelerde oluşturmak için kullanılır.

Hücresel Davranış incelenmesi için Groove Desenler mikroakışkan Aygıt

Biz, üç-boyutlu hücre kültürü için gözenekli polimer cips mikroimalat için iki süreç sunuyoruz. Bunlardan birincisi, solvent buhar kaynak işlemi ile birlikte sıcak kabartma. Ikincisi ise, kısa bir süre önce geliştirilen iyon izleme teknolojisi ile üretim önemli bir basitleştirme giden kombine microthermoforming süreci kullanır.

Üç boyutlu Hücre ekimi için Chip-ölçekli Yapı iskeleleri mikroimalat

Gözden çıkarılabilir bir bileşeni (vasküler) işleminin bir buharlaşma mikrovasküler yapılar imal etmek için kullanılır. Bu işlem lazer Mikroişlenmiş kılavuzu plakaları tarafından sağlanan hassas 3D geometrik konumlandırma ile içi boş mikro oluşturmak için kurban poli (laktik) asit lifleri kullanır.

Bir Kurban bileşeni buharlaşma kullanarak üç boyutlu Mikroyapılar Yapma Süreci

Desteklenen ikili lipid tabakalarıdır ve doğal zar parçacıkları hücre zarlarının özelliklerini yaklaşık ve analitik çeşitli stratejiler dahil edilmesi uygun sistemlerdir. Burada destekli lipid iki katmanlı kaplı SiO 2 boncuklar, fosfolipid vezikülleri ya da doğal zar parçacıklarının oluşan mikrodizileri hazırlanması için bir yöntemi göstermektedir.

Bir Çekçek tabanlı Meclisi Yöntemi ile Biomembrane Mikroarray&#39;ler oluşumu

Bir damlacık arayüz lipid ikili tabakasına karşı mikroakışkan jeti zar asimetri, zar proteinlerinin dahil edilmesi, ve malzeme kapsülleme üzerinde kontrol ve veziküllerin üretilmesi için güvenilir bir yöntem sağlar. Bu teknik, bölümlere biyomoleküllerin istenen biyolojik sistemlerin çeşitli çalışma uygulanabilir.

Mikroakışkan jeti kullanarak çift katlı lipid Vesikül Üretimi

Burada, kılcal bazlı santrifüjlü bir mikroakışkan cihaz kullanarak, boyutu kontrol edilebilir, monodispers, yağda su (W/O) mikro damlacıkları için basit bir üretim yöntemi gösteriyoruz. Bu yöntem sadece küçük bir numune hacmi gerektirir ve yüksek verimli üretim sağlar. Bu yöntemin hızlı biyokimyasal ve hücresel analizler için faydalı olacağını umuyoruz.

Tek dağılımlı mikro damlacıklar boyutu kontrollü Formasyonu için Kılcal tabanlı Santrifüj mikroakışkan Cihaz

Bu protokol, poli(etilen glikol) diakrilat (PEGDA) hidrojellere gömülü vasküler türetilmiş, biyomimetik mikroakışkan ağları üretmek için görüntü kılavuzlu, lazer tabanlı hidrojel bozunmasının uygulanmasını ana hatlarıyla belirtir. Bu biyomimetik mikroakışkan sistemler, doku mühendisliği uygulamaları, in vitro hastalık modellerinin oluşturulması ve gelişmiş "çip üzerinde" cihazların üretilmesi için yararlı olabilir.

Vasküler kaynaklı mikroakışkan Ağların görüntü kılavuzluğunda, Lazer tabanlı Fabrikasyon

Bu rapor, biyolojik araştırmalar için mikroakışkan kanalları hücreler ve substratlarla doldurmak için düşük basınçlı vakum kullanan basit, uygulaması kolay bir tekniği açıklamaktadır.

Desenlendirme Proteinlerin ve Hücreleri Çok Yönlü Yöntemi

Burada sunulan protokol, memeli hücrelerindeki sitoskeletal yapıları incelemek için hücre şeklini standartlaştıran mikropatternlerin otomatik olarak üretilmesini sağlar. Bu kullanıcı dostu teknik, piyasada bulunan görüntüleme sistemleri ile kurulabilir ve standart hücre biyolojisi laboratuvarlarına erişilemeyen özel ekipman gerektirmez.

Kızılötesi Lazer Destekli Mikropatterning ile Hücre Geometrisinin Kontrolü

Bakteri ve kolloidler gibi bir sıvıda asılı mikro boyutlu nesneleri polidimetilsiloksisan substratında öngörülen dizilere desenleştirmek için mikroakışkan bir platformda kapilarite destekli montaj kullanan bir teknoloji sunuyoruz.

Sıralı Capillarity destekli Montaj yoluyla Mikroorganizmaların ve Mikropartiküllerin Deseni

Geleneksel olarak, hücre kültürü, hücrelerin doğal ortamını in vivo olarak zayıf bir şekilde taklit eden düzlemsel substratlar üzerinde gerçekleştirilir. Burada, fizyolojik olarak ilgili kavisli geometrilere ve mikro desenli hücre dışı proteinlere sahip hücre kültürü substratları üretmek için bir yöntem tanımladık ve bu hücre dışı ipuçlarının hücresel olarak algılanmasına sistematik araştırmalara izin veriyoruz.

Üç Boyutlu Hücre Kültürü Substratlarının UV-Fotodesenlenmesi ile Multicue Hücresel Mikro Ortamların Oluşturulması

Öğrenin, enjeksiyon kalıplama yöntemiyle fizyolojik özellikleri taklit eden 3D mikrodamarlar üretin. Bu teknik, damar biyolojisi ve hastalık mekanizmalarını incelemek için özelleştirilebilir koşullar sunar.

Micropatterning ve 3D mikrodamarlar Meclisi

Daha fazla video keşfet