Name: Tek Molekül Düzeyde Halkalı Polimerlerin Sentezi ve eritin Devlet Onların Pasif Hareket Karakterizasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 55 s
Description: Öğrenin, halkalı polimerlerin tek molekül düzeyinde difüzyon hareketini karakterize etme yöntemini. Bu teknik, polimer fizikçilerine topoloji bağımlı zamansal dinamikleri inceleme olanağı sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Japonya Bilimi Teşvik Derneği'nin 22750122 No'lu (S.H.), No. 26288099 (T.Y.) ve No. 23350050 (Y.T.) Bilimsel Araştırma Hibesi tarafından desteklenmiştir. S.H., Kurata Memorial Hitachi Bilim ve Teknoloji Vakfı'na minnettardır. Bu yayında bildirilen araştırma, Kral Abdullah Bilim ve Teknoloji Üniversitesi (SH) tarafından desteklenmiştir.

Tek fonksiyonlu ve iki fonksiyonlu Poli 1. N- (THF) <ol><li> Tek fonksiyonlu poli (THF) <ol><li> Alev 2 boyunlu 100 ml&#39;lik yuvarlak tabanlı bir şişeye kuru. Vakum ve nitrojen (3 kür) ile şişeyi doldurun. </li><li> şişeye damıtılmış tetrahidrofuran (THF) (50 mi) eklenir. 20 ° C&#39;de bir su banyosu içinde balon koyun ve sıcaklık dengelenmesi. </li><li> Bir şırınga ile bir şişeye metil triflat (0.5 mmol) ekleyin. 20 ° C&#39;de 5-10 dakika süreyle karıştırın. </li><li> Bir şırınga ile bir şişeye N-fenil pirolidin (4-6 eşi.) Eklenir. 30-60 dakika boyunca karıştırın. </li><li> Tamamen düşük basınçta (yaklaşık 100 Torr) altında çözücüyü çıkarın. aseton 3-5 ml artığı içinde çözündürülür. N-heksan 300-500 ml aseton solüsyonu ekleyin. çökelti filtre edin ve indirgenmiş basınç altında kurutulur. </li></ol></li><li> Çift işlevli poli (THF) <ol><li> Alev 2 boyunlu 100 ml&#39;lik yuvarlak tabanlı bir şişeye kuru. Vacuum ve azot (3 kez) ile şişesi doldurun. </li><li> şişeye damıtılmış THF (50 mi) eklenir. 20 ° C&#39;de bir su banyosu içinde balon koyun ve sıcaklık dengelenmesi. </li><li> Bir şırınga ile şişeye triflik anhidrit (0.3 mmol) ekleyin. 20 ° C&#39;de 5-10 dakika süreyle karıştırın. </li><li> Bir şırınga ile bir şişeye N-fenil pirolidin (4-6 eşi.) Eklenir. 30-60 dakika boyunca karıştırın. </li><li> Tamamen düşük basınçta (yaklaşık 100 Torr) altında çözücüyü çıkarın. aseton 3-5 ml artığı içinde çözündürülür. N-heksan 300-500 ml aseton solüsyonu ekleyin. çökelti filtre edin ve indirgenmiş basınç altında kurutulur. </li></ol></li></ol> 2. Perylene Sentezi etitkarbodiimit-dahil 4 kollu yıldız ve 8 şeklinde disiklik Poli (THF) <ol><li> Silahlı yıldız poli (THF) <ol><li> İyon değişimi <ol><li> Suda perilen diimid tetrakarboksilat, sodyum tuzu (10 mg / ml, 150 mi) içinde çözülür. eritmekAseton tek fonksiyonlu poli (THF) (160 mg / ml, 4 mi) eklenmiştir. kuvvetli bir şekilde karıştırıldı, sulu çözelti içine aseton çözeltisi damla damla ekleyin. süzme ile oluşan çökeltiyi toplamak. </li><li> kazanılan çökelti (2.1.1.1) dört kez yukarıdaki işlemi tekrarlayın. </li></ol></li><li> kovalent tespit <ol><li> toluen içinde elde edilen çökelti (5 mg / ml) içinde çözülür. 4 saat çözelti, geri akış. </li><li> Tamamen düşük basınçta (yaklaşık 100 Torr) altında çözücüyü çıkarın. N-heksan / aseton (2/1 hacim / hacim), bir silika jel tıpası içinden tortu filtre. Ürünü çöktürmek için buz gibi soğuk su (300-500 ml) içine çözeltisi ekleyin. Çökeltinin süzülerek toplanır. </li></ol></li></ol></li><li> Disiklik 8-şeklinde bir poli (THF) <ol><li> İyon değişimi <ol><li> Suda perilen diimid tetrakarboksilat, sodyum tuzu (6 mg / ml, 50 mi) içinde çözülür. (0.5 g çift fonksiyonlu poli (THF) içinde çözülür) Aseton 30-50 ml. 0 ° C&#39;de kuvvetli bir şekilde karıştırıldı, sulu çözelti içine aseton çözeltisi damla damla ekleyin. süzme ile oluşan çökeltiyi toplamak. </li><li> kazanılan çökelti (2.2.1.1) ile yukarıdaki işlemi tekrarlayın. </li></ol></li><li> kovalent tespit <ol><li> toluen içinde elde edilen çökelti (0,05 g / L) içinde çözülür. 4 saat çözelti, geri akış. </li><li> Tamamen düşük basınçta (yaklaşık 100 Torr) altında çözücüyü çıkarın. Kısmen tortu çözünmesi için toluen ekleyin. Yeniden çökeltilmesi n-heksan 300-500 ml. </li><li> N-heksan / aseton (2/1 hacim / hacim), bir silika jel tamponundan oluşan çökelti filtre. Yeniden çökeltilmesi su 300-500 ml. </li><li> Bir polistiren jel kullanılarak kolon kromatografisiyle 18 ile oluşturulan çökelti saflaştınlır. Bundan başka REM CHCI3 bir eluent ile 19 preparatif jel geçirgenlik kromatografisi (GPC) ile ham ürünün arıtılmasırefraktif indeks (RI) ve UV dedektörler izleyerek ove yan. </li></ol></li></ol></li></ol> 3. Tek-molekül Floresans Görüntüleme Deneyi <ol><li> örnek hazırlama <ol><li> Mikroskop kapak fişleri temizliği <ol><li> Yeri No 1.5 24 x 24 mm mikroskop kapağı boyama kavanoza kayıyor. </li><li> 15 dakika boyunca kavanoz ve sonikasyon olarak 1 M potasyum hidrit çözeltisi (100 mi) eklenir. durultma yoluyla potasyum hidroksit çözeltisi dökün ve birkaç kez ultra saf su ile kapak slipi üzerinde çalkalayın. 15 dakika boyunca kavanoz ve sonikasyon içine spektroskopik dereceli etanol (100 mi) eklenir. </li><li> durultma yoluyla etanol dökün ve birkaç kez ultra saf su ile kapak fişleri durulayın. durultma yoluyla ultra saf su kapalı döküldükten sonra, adımı 3.1.1.2 tekrarlayın. </li><li> 15 dakika boyunca kavanoz ve sonikasyon ultra saf su ekleyin. birkaç kez ultra saf su ile kapak fişleri durulayın. Bir plastik cımbız ile kavanoz kapağı fişleri çıkarın ve kuru hava veya kuru nitrojen ya onları kurutun. </li></ol></li><li> Polimer eriyiği örnekleri 14,15 hazırlanması <ol><li> bir cam şişe içinde etiketli olmayan lineer poli (THF) 100 ul ilave edin ve bir saç kurutma makinesi kullanılarak erime noktasından (yaklaşık 25 ° C) üzerindeki bir sıcaklığa kadar ısıtılır. </li><li> Florofor dahil polimer (lineer, 4 kollu bir yıldız, siklik ya da 8-şeklinde bir disiklik 2.1 ve 2.2 sentezlenir), kloroform (1 mi, 10 -6 M) içinde çözülür. etiketli olmayan lineer poli (THF) eriyiğin 100 ul çözelti 1 ul ekle. </li><li> İyice bir pipet ucu ile karıştırılarak sonra, kurutucu kullanılarak örnek ısıtılmasıyla kloroform buharlaşır. NOT: Bu florofor dahil polimerlerin 10 8 M ihtiva eden etiketli olmayan lineer poli (THF) içindeki bir eriyiği içerir. </li><li> örnek 10 ul mikro-pipet ve D&#39;nin kullanımı almakbir temizlenmiş kapak kayma üzerinde ROP. numune üzerinde başka temizlenmiş kapak kayma koyun ve iki kapak fişleri arasında örnek sandviç. </li><li> nazikçe plastik cımbız kullanarak örnek basınız. </li></ol></li></ol></li><li> Geniş alan floresan görüntüleme kurulumu 15 <ol><li> Ters mikroskop arka portuna bir uyarım lazer (488 nm) tanıtımı <ol><li> ışın yoluna bir uyarım bant geçiren filtre ve polarize takın. </li><li> Bir ışın genişletici tarafından çapı yaklaşık 1 cm ışını genişletin. </li><li> ışın yoluna çeyrek dalga plakası yerleştirin. polarizörün olduğu ile ilgili olarak 45 derece dalga plakası optik eksenine ayarlayın. Alternatif olarak, bir Berek kompansatör eklemek için / 4 l optik gecikmeyi ayarlamak. </li><li> kiriş boyutunu ayarlamak için uyarma ışın yolunda bir diyafram takın. </li><li> ters optik mikroskobik arka portuna lazer ışını tanıtan öncePE, bir odaklama lensi yerleştirin (Plan dışbükey lens, odak uzaklığı ≈ 300 mm) objektif lens üzerinden bir lazer ışını kolime olan bir pozisyonda. </li></ol></li><li> Bir filtre küpü üzerine monte edilmiş bir dikroik ayna kullanılarak lazer ışını yansıtılarak ve sonra yüksek bir sayısal açıklık (NA) objektif lens numuneye lazer ışını tanıtmak (örneğin NA 1.3, 100X büyütme, yağ daldırma). </li><li> objektife objektif bir ısıtıcı takın ve 30 ° C sıcaklığını ayarlamak. </li><li> Ters mikroskop aşamasında numune montaj <ol><li> objektif lens üzerinde immersiyon bir damla damla ve mikroskop durumuna örnek monte edin. </li><li> yaklaşık 10 um örnek kalınlığı numunenin alt ve üst yüzeyi eksenel pozisyonunu kontrol edilmesiyle elde olduğundan emin olun. </li><li> numunenin alt yüzeyi üzerinde bir kaç mikrometre mikroskop odağı ayarlayın. </li></ol></li&gt; <li> Objektif mercek altında dairesel polarize uyarma ışık elde <ol><li> objektif lens dışarı paralelleştirilmiş lazer ışınına bir polarize yerleştirin. </li><li> polarize sonra bir güç ölçer takarak polarize iletilen lazer yoğunluğunu kaydedin. polarize çevirerek farklı polarizasyon açılarında iletilen lazer gücünü kaydedin. </li><li> iletilen lazer gücü tüm polarizasyon açılarında sabit değilse, biraz uyarma ışın yoluna yerleştirilen çeyrek dalga plakası veya Berek kompansatör döndürün. </li><li> sabit iletilen lazer gücü kadar adımı yineleyin 3.2.5.2 ve 3.2.5.3 tüm polarizasyon açılarında elde edilir. dairesel polarize ışık numunesi elde emin olun. </li></ol></li><li> Kurulum EM (elektron çoğaltan) cihazı birleştiğinde -Ödeme (CCD) kamera <ol><li> mikroskop yan port EM-CCD kamera takın ve t bağlayıngörüntü elde etme yazılımı o. </li><li> Gerekirse, cihazlara EM-CCD kamera tarafından oluşturulan transistör-transistör mantığı (TTL) sinyalleri göndererek bir mekanik obtüratör veya uyarma ışın yolu takılı acousto-optik ayarlanabilir filtre kamera poz senkronize. Alternatif olarak, lazer EM-CCD kamera tarafından oluşturulan TTL sinyaller göndererek lazer çıkışına kamera poz senkronize. NOT:, çıkış gücü giriş transistörü-Transistör modüle edilebilir katı-hal lazer (TTL) sinyalleri deney için kullanılan yalnızca sonuncu seçenek, uygulanabilir. </li><li> Tek fluorofor yüksek kalitede floresan görüntü elde etmek için kamerayı kontrol yazılımı kullanarak CCD kamera bir EM kazanç (genellikle yaklaşık 300) uygulayın. </li><li> Faiz (ROI) bir bölge kamerayı kontrol yazılımı kullanarak (görüş alanının merkezinde tipik 128 x 128 piksel) olarak ayarlayın. NOT: Bu IMAGI sağlareriyik numunedeki fluorofor dahil polimer zincirleri hareketini görüntülenmesi için gerekli olan çerçeve aktarım modunda, 200 Hz - 100 kare hızında ng deneyler. </li></ol></li></ol></li><li> deneme çalıştırırken <ol><li> Deneysel koşulları optimize <ol><li> uyarma ışın yolu takılı diyafram kullanarak çapı yaklaşık 20 um numunenin aydınlatma alanını ayarlayın. </li><li> elle uyarma ışın yoluna yerleştirilen uygun bir nötr yoğunluk (ND) filtresi seçerek 8 mW - 4 numune uyarma lazer gücünü ayarlayın. NOT: - 2 kW cm -2 örnek de bu 1 ortalama lazer gücü sağlar. </li><li> 200 Hz - 100 kare hızlarında örnek rekor floresan görüntüler. Bireysel florofor dahil polimerlerden elde edilen floresans yoğunluğu çok düşükse, yavaş yavaş TH ile uyarım gücünü artırmaknumune yaklaşık 100 mW ulaşana kadar e ND filtre. </li><li> tek-molekül floresan görüntü kalitesi hala tatmin edici değilse, etiketli olmayan poli (THF) saf bir eriyik floresan görüntüleri kaydederek numunede floresan kirleri kontrol edin. Yüksek floresan arka plan görülmektedir durumda, farklı etiketli olmayan poli (THF) kullanın. </li><li> eriyik içinde florofor dahil polimerlerden elde floresan nokta yoğunluğu uzamsal olması (bu pasif hareket analizinde hatalara neden) izole etmek için çok yüksek ise, örnek kadar içeri florofor dahil polimer konsantrasyonunu azaltmak mekansal izole noktalar görülmektedir. </li><li> eriyik içinde florofor dahil polimerlerden elde floresan nokta yoğunluğu (bu görüntüleme deneyinde düşük verim neden olur) çok düşük ise, appropr kadar örnek florofor dahil polimer konsantrasyonunu arttırmakfloresan nokta iate yoğunluğu ulaşılır. </li><li> eriyik içinde fluorofor dahil polimerlerden elde edilen floresan görüntüleri bulanık ise, görüntüleme edinimi çerçeve oranlarını artırmak. NOT: Bu genellikle tipik olarak 64 x 64 piksel daha küçük bir yatırım getirisi gerektirir. </li></ol></li></ol></li><li> Görüntü edinme <ol><li> Deney koşulları optimize sonra örnek denge şartları ulaşır, böylece bir saat mikroskop sahnede monte örnek bırakın. </li><li> 200 Hz kare hızı - 100 eriyik halde fluorofor dahil polimerlerin 1000 floresan görüntü dizileri - 500 kaydediniz. varsayılan dosya biçimi TIFF değilse, TIFF formatında tüm resim dizilerini dönüştürmek. </li></ol></li></ol> Pasif Hareket 4. Analizi <ol><li> Ortalama kare deplasman (MSD) analizi <ol><li> bu şekilde floresan görüntü dizilerini kırpmaHer görüntü sırası gibi ImageJ gibi tek ve iyi odaklanmış difüzyon fluorofor-dahil polimer kullanılarak görüntü işleme yazılımı içerdiğini. </li><li> kırpılan görüntü dizileri 10&#39;dan fazla kare içerdiğinde, her dizi 10 kare oluşur, öyle ki birçok dizinin içine resim dizileri ayrıldı. </li><li> doğru görüntü iki boyutlu Gauss geçme ile, her resim dizilerinin molekül konumlarını belirler. </li><li> Denklem 20 Difüzyon katsayısı (D), ayrı ayrı moleküllerin difüzyon yörüngeleri (molekül, yani zamana bağlı pozisyonları) ortalama-kare yer değiştirme (MSD) analizi ile belirlemek <img alt="Equation1" src="/files/ftp_upload/54503/54503equation1.jpg" /> x i ve y ı resim çerçevesi i molekülün pozisyonları ve n çerçeve i dan time lapse ¨ t çerçeve numarasını ifade etmektedir. </li><li> difüzyon katsayıları arsabir frekans histogramı. Not: Genellikle, histogram 100&#39;den moleküllerden yapılmıştır. </li></ol></li><li> Kümülatif dağılım fonksiyonu (CDF) analizi NOT: Bir CDF, P (r 2 i Δ t) i t ö belli bir zaman gecikmesi sonrası kökenli bir yarıçap r içinde difüzyon molekülleri bulmak kümülatif olasılık karşılık gelir. <ol><li> Zaman 4.1.3&#39;de elde edilen tüm difüzyon yörüngeleri için 1Δt, 2Δt, ····, iΔt arasında gecikme sırasında ortaya çıkan kareli-yer değiştirme hesaplayın. NOT: Saat iΔt ve gecikme için bu hesaplamalar toplam i karesi-yer değiştirmeleri m verir. </li><li> Farklı r 2 değerlerinde r 2 daha küçük olan toplam m i veri kümesi içinde karesi-değiştirmeler (l i) sayıları hesaplamak (0 &lt;r2 &lt;∞). R 2 vs normalize l i<html> araziler CDF, P (r 2, iΔt) karşılık gelmektedir. </li></ol></li><li> Tat difüzyon modelleri ile TDF analizi Not: Elde edilen CDFs farklı difüzyon modelleri ile donatılmıştır; Homojen difüzyon modeli, D dağılımı Gauss (tek Gauss modeli) tarafından tarif edildiği birden fazla difüzyon modları ve birden fazla difüzyon modları, D dağılımı çok Gauss (çoklu Gauss modeli) ile ifade edilir. <ol><li> Homojen difüzyon modelde, bir denklem 21 kullanılarak CDF takarak ortalama D belirlemek <img alt="Equation2" src="/files/ftp_upload/54503/54503equation2.jpg" /> NOT: denklemin herhangi bir sapma molekülünün heterojen difüzyon göstermektedir. </li><li> Tek Gauss modelde, 15 kullanılarak CDF uydurma bir Gauss (f (D)) tarafından açıklanan D olasılık dağılımını belirlemek On3 &quot;src =&quot; / files / ftp_upload / 54503 / 54503equation3.jpg &quot;/&gt; <img alt="Equation4" src="/files/ftp_upload/54503/54503equation4.jpg" /> A, W ve D 0 Gauss genlik, genişlik ve merkez olduğu. </li><li> Çift Gauss modelde, 14 kullanılarak CDF uydurma bir Gauss (f (D)) tarafından açıklanan D bileşeni inci j olasılık dağılımını belirlemek <img alt="Equation5" src="/files/ftp_upload/54503/54503equation5.jpg" /> <img alt="Equation6" src="/files/ftp_upload/54503/54503equation6.jpg" /> Bir j her bir difüzyon bileşen fraksiyonu ve α j, j B ve D 0 burada, j, Gauss bileşeni j nolu amplitüd, genişlik, ve merkez vardır. </li></ol></li><li> Teorik olasılık göre dağılımın hesaplanmasıDifüzyon katsayısı Katkı NOT: nedeniyle farklı difüzyon modelleri için hesaplanan istatistiksel hatalar (p (D) d D) oluşan D olasılık dağılımları; Homojen difüzyon modeli, D dağılımı Gauss (tek Gauss modeli) tarafından tarif edildiği birden fazla difüzyon modları ve birden fazla difüzyon modları, D dağılımı çok Gauss (çoklu Gauss modeli) ile ifade edilir. <ol><li> Homojen difüzyon modelde, bir denklem 22 kullanılarak D istatistiksel olasılık dağılımını hesaplamak <img alt="Equation7" src="/files/ftp_upload/54503/54503equation7.jpg" /> N difüzyon yörünge veri noktalarının sayısı (n = 10, 4.1.2) olduğu, D, 0 ortalama difüzyon katsayısı (CDF analizi ile tespit, 4.2.3.1 bakınız) ve D, deneysel olarak elde edilen bir bağımsız bir yörünge için difüzyon katsayısı. </li><li> içindeTek Gauss difüzyon modeli, bir denklem 15 kullanılarak D istatistiksel olasılık dağılımını hesaplamak <img alt="Equation8" src="/files/ftp_upload/54503/54503equation8.jpg" /> F (d) CDF analizi ile belirlenir D olasılık dağılımını (4.2.3.2 bakınız) temsil eder ve d, 0, ortalama difüzyon katsayısıdır (CDF analizi ile tespit, 4.2.3.2 bakınız). </li><li> Çift Gauss difüzyon modelinde, bir denklem 14 kullanılarak D istatistiksel olasılık dağılımını hesaplamak <img alt="Equation9" src="/files/ftp_upload/54503/54503equation9.jpg" /> F (d, J) CDF analizi ile belirlenmiştir D (d, J) bileşeni j nolu olasılık dağılımını ifade etmektedir (4.2.3.3 bakınız) ve D 0j CDF tarafından belirlenen bir bileşen TH J (ortalama difüzyon katsayısıdır analiz) 4.2.3.3 bkz. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Honda, S., Yamamoto, T., Tezuka, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topology-Directed+Control+on+Thermal+Stability%3A+Micelles+Formed+from+Linear+and+Cyclized+Amphiphilic+Block+Copolymers%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">Topology-Directed Control on Thermal Stability: Micelles Formed from Linear and Cyclized Amphiphilic Block Copolymers.</a> J. Am. Chem. Soc. 132 (30), 10251-10253 (2010).</li>
<li>Honda, S., Yamamoto, T., Tezuka, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuneable+enhancement+of+the+salt+and+thermal+stability+of+polymeric+micelles+by+cyclized+amphiphiles%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">Tuneable enhancement of the salt and thermal stability of polymeric micelles by cyclized amphiphiles.</a> Nat. Commun. 4, (2013).</li>
<li>Jun, S., Mulder, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Entropy-driven+spatial+organization+of+highly+confined+polymers%3A+Lessons+for+the+bacterial+chromosome%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Entropy-driven spatial organization of highly confined polymers: Lessons for the bacterial chromosome.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 103 (33), 12388-12393 (2006).</li>
<li>McLeish, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymers+without+beginning+or+end%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Polymers without beginning or end.</a> Science. 297 (5589), 2005-2006 (2002).</li>
<li>McLeish, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymer+dynamics%3A+Floored+by+the+rings%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Mater%22%5BJournal%5D)">Polymer dynamics: Floored by the rings.</a> Nat. Mater. 7 (12), 933-935 (2008).</li>
<li>Roovers, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRoovers%2C+J+%22Topological+Polymer+Chemistry%3A+Progress+of+Cyclic+Polymers+in+Syntheses%2C+Properties+and+Functions%22">Topological Polymer Chemistry: Progress of Cyclic Polymers in Syntheses, Properties and Functions</a>. Tezuka, Y. , World Scientific Publishing Co. Pte. Ltd. 137-156 (2013).</li>
<li>Klein, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+reptation+in+an+entangled+polymer+melt%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Evidence for reptation in an entangled polymer melt.</a> Nature. 271 (5641), 143-145 (1978).</li>
<li>Leger, L., Hervet, H., Rondelez, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reptation+in+entangled+polymer-solutions+by+forced+rayleigh+light-scattering%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecules%22%5BJournal%5D)">Reptation in entangled polymer-solutions by forced rayleigh light-scattering.</a> Macromolecules. 14 (6), 1732-1738 (1981).</li>
<li>von Meerwall, E. D., Amis, E. J., Ferry, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-diffusion+in+solutions+of+polystyrene+in+tetrahydrofuran+-+comparison+of+concentration+dependences+of+the+diffusion-coefficients+of+polymers%2C+and+a+ternary+probe+component%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecules%22%5BJournal%5D)">Self-diffusion in solutions of polystyrene in tetrahydrofuran - comparison of concentration dependences of the diffusion-coefficients of polymers, and a ternary probe component.</a> Macromolecules. 18 (2), 260-266 (1985).</li>
<li>Kapnistos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unexpected+power-law+stress+relaxation+of+entangled+ring+polymers%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Mater%22%5BJournal%5D)">Unexpected power-law stress relaxation of entangled ring polymers.</a> Nat. Mater. 7 (12), 997-1002 (2008).</li>
<li>Adachi, K., Takasugi, H., Tezuka, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Telechelics+having+unstrained+cyclic+ammonium+salt+groups+for+electrostatic+polymer+self-assembly+and+ring-emitting+covalent+fixation%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecules%22%5BJournal%5D)">Telechelics having unstrained cyclic ammonium salt groups for electrostatic polymer self-assembly and ring-emitting covalent fixation.</a> Macromolecules. 39 (17), 5585-5588 (2006).</li>
<li>Oike, H., Imaizumi, H., Mouri, T., Yoshioka, Y., Uchibori, A., Tezuka, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Designing+unusual+polymer+topologies+by+electrostatic+self-assembly+and+covalent+fixation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">Designing unusual polymer topologies by electrostatic self-assembly and covalent fixation.</a> J. Am. Chem. Soc. 122 (40), 9592-9599 (2000).</li>
<li>Yamamoto, T., Tezuka, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topological+polymer+chemistry%3A+a+cyclic+approach+toward+novel+polymer+properties+and+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Polym.+Chem%22%5BJournal%5D)">Topological polymer chemistry: a cyclic approach toward novel polymer properties and functions.</a> Polym. Chem. 2 (9), 1930-1941 (2011).</li>
<li>Habuchi, S., Fujiwara, S., Yamamoto, T., Tezuka, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-molecule+imaging+reveals+topological+isomer-dependent+diffusion+by+4-armed+star+and+dicyclic+8-shaped+polymers%5BTitle%5D)+AND+%22Polym.+Chem%22%5BJournal%5D)">Single-molecule imaging reveals topological isomer-dependent diffusion by 4-armed star and dicyclic 8-shaped polymers.</a> Polym. Chem. 6 (22), 4109-4115 (2015).</li>
<li>Habuchi, S., Fujiwara, S., Yamamoto, T., Vacha, M., Tezuka, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-Molecule+Study+on+Polymer+Diffusion+in+a+Melt+State%3A+Effect+of+Chain+Topology%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Single-Molecule Study on Polymer Diffusion in a Melt State: Effect of Chain Topology.</a> Anal. Chem. 85 (15), 7369-7376 (2013).</li>
<li>Habuchi, S., Satoh, N., Yamamoto, T., Tezuka, Y., Vacha, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimode+Diffusion+of+Ring+Polymer+Molecules+Revealed+by+a+Single-Molecule+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Angew.+Chem.+Int.+Ed%22%5BJournal%5D)">Multimode Diffusion of Ring Polymer Molecules Revealed by a Single-Molecule Study.</a> Angew. Chem. Int. Ed. 49 (8), 1418-1421 (2010).</li>
<li>Habuchi, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHabuchi%2C+S+%22Topological+Polymer+Chemistry%3A+Progress+of+Cyclic+Polymers+in+Syntheses%2C+Properties+and+Functions%22">Topological Polymer Chemistry: Progress of Cyclic Polymers in Syntheses, Properties and Functions</a>. Tezuka, Y. , World Scientific. 265-290 (2013).</li>
<li>Fernandez, P., Bayona, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+off-line+gel-remeation+chromatography+normal-phase+liquid-chromatography+fro+the+determination+of+polycyclic+aromatic-compounds+in+environmental-samples+and+standard+reference+materials+%28air+particulate+matter+and+marine+sediment%29%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chromatogr%22%5BJournal%5D)">Use of off-line gel-remeation chromatography normal-phase liquid-chromatography fro the determination of polycyclic aromatic-compounds in environmental-samples and standard reference materials (air particulate matter and marine sediment).</a> J. Chromatogr. 625 (2), 141-149 (1992).</li>
<li>Biesenberger, J. A., Tan, M., Duvdevan, I., Maurer, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recycle+gel+permeation+chromatography.+1.+recycle+principle+and+design%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Polym.+Sci.+Pol.+Lett%22%5BJournal%5D)">Recycle gel permeation chromatography. 1. recycle principle and design.</a> J. Polym. Sci. Pol. Lett. 9 (5), 353(1971).</li>
<li>Kusumi, A., Sako, Y., Yamamoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confined+lateral+diffusion+of+membrane-receptors+as+studied+by+single-particle+tracking+%28nanovid+microscopy%29+-+effects+of+calcium-induced+differentiation+in+cultured+epithelial-cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Confined lateral diffusion of membrane-receptors as studied by single-particle tracking (nanovid microscopy) - effects of calcium-induced differentiation in cultured epithelial-cells.</a> Biophys. J. 65 (5), 2021-2040 (1993).</li>
<li>Schutz, G. J., Schindler, H., Schmidt, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-molecule+microscopy+on+model+membranes+reveals+anomalous+diffusion%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Single-molecule microscopy on model membranes reveals anomalous diffusion.</a> Biophys. J. 73 (2), 1073-1080 (1997).</li>
<li>Vrljic, M., Nishimura, S. Y., Brasselet, S., Moerner, W. E., McConnell, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translational+diffusion+of+individual+class+II+MHC+membrane+proteins+in+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Translational diffusion of individual class II MHC membrane proteins in cells.</a> Biophys. J. 83 (5), 2681-2692 (2002).</li>
<li>Margineanu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photophysics+of+a+water-soluble+rylene+dye%3A+Comparison+with+other+fluorescent+molecules+for+biological+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+B%22%5BJournal%5D)">Photophysics of a water-soluble rylene dye: Comparison with other fluorescent molecules for biological applications.</a> J. Phys. Chem. B. 108 (32), 12242-12251 (2004).</li>
<li>Tezuka, Y., Oike, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-assembly+and+covalent+fixation+for+topological+polymer+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Macromol.+Rapid+Commun%22%5BJournal%5D)">Self-assembly and covalent fixation for topological polymer chemistry.</a> Macromol. Rapid Commun. 22 (13), 1017-1029 (2001).</li>
<li>Deres, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Origin+of+Heterogeneity+of+Polymer+Dynamics+near+the+Glass+Temperature+As+Probed+by+Defocused+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecules%22%5BJournal%5D)">The Origin of Heterogeneity of Polymer Dynamics near the Glass Temperature As Probed by Defocused Imaging.</a> Macromolecules. 44 (24), 9703-9709 (2011).</li>
<li>Flier, B. M. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneous+Diffusion+in+Thin+Polymer+Films+As+Observed+by+High-Temperature+Single-Molecule+Fluorescence+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">Heterogeneous Diffusion in Thin Polymer Films As Observed by High-Temperature Single-Molecule Fluorescence Microscopy.</a> J. Am. Chem. Soc. 134 (1), 480-488 (2012).</li>
<li>Habuchi, S., Oba, T., Vacha, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-beam+single-molecule+defocused+fluorescence+imaging+reveals+local+anisotropic+nature+of+polymer+thin+films%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Chem.+Chem.+Phys%22%5BJournal%5D)">Multi-beam single-molecule defocused fluorescence imaging reveals local anisotropic nature of polymer thin films.</a> Phys. Chem. Chem. Phys. 13 (15), 6970-6976 (2011).</li>
<li>Zettl, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-Diffusion+and+Cooperative+Diffusion+in+Semidilute+Polymer+Solutions+As+Measured+by+Fluorescence+Correlation+Spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecules%22%5BJournal%5D)">Self-Diffusion and Cooperative Diffusion in Semidilute Polymer Solutions As Measured by Fluorescence Correlation Spectroscopy.</a> Macromolecules. 42 (24), 9537-9547 (2009).</li>
<li>Kirstein, J., Platschek, B., Jung, C., Brown, R., Bein, T., Brauchle, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploration+of+nanostructured+channel+systems+with+single-molecule+probes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Mater%22%5BJournal%5D)">Exploration of nanostructured channel systems with single-molecule probes.</a> Nat. Mater. 6 (4), 303-310 (2007).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

4 kollu 8-şekilli polimerleri içerir. Sentez için önemli bir adımdır ESA CF protokolü (Şekil 1) yoluyla elde 12,24 tek fonksiyonlu ve iki fonksiyonlu lineer poli (THF) N S -phenylpiperidinium uç grupları olan edildi önceki edilen prosedüre göre sentezlendi. 11 iyon değişim karboksilat aşırı miktarını içeren bir sulu çözelti içine triflat karşı-bir polimer öncüsünün bir aseton çözeltisinin tekrar çökeltme işlemi ile gerçekleştirilmiştir. 4-kollu...

Döngüsel polimerler, zincir uçlarına sahip olmamaları bakımından benzersizdir. Genellikle, doğrusaldan döngüye dönüşümle polimer misellerin artan termal stabilitesi1,2 ve bir döngü oluşumu ile bakteri hücrelerinde DNA'nın uzamsal organizasyonu dahil olmak üzere, doğrusal muadillerinden farklı olağandışı davranışlar sergilerler. 3 Döngüsel zincirler arasındaki topolojik etkileşimlerin, bu tür olağandışı davranışlar için kritik faktör olduğuna inanılmaktadır. 4,5 Bu nedenle, dolaşık koşullar altında döngüsel polimerlerin hareketini ve gevşemesini karakterize etmek, polimer biliminde onlarca yıldır önemli bir araştırma konusu olmuştur. 6
Döngüsel polimer dinamiği, nükleer manyetik rezonans (NMR), ışık saçılımı ve viskozite ölçümleri gibi topluluk ortalamalı deneysel yöntemler aracılığıyla hem sentetik hem de doğal olarak oluşan moleküller kullanılarak araştırılmıştır. 7-9 Bununla birlikte, bu çalışmalar genellikle numunelerdeki safsızlık moleküllerinden muzdariptir. 10 Ayrıca, dolaşık polimerlerin içsel yapısal heterojenliğinin neden olduğu tek tek moleküllerin hareketinin uzay-zamansal heterojenlikleri, bu çalışmalarda genellikle topluluk ortalamasının arkasına gizlenir. Siklik polimerlerin moleküler seviye dinamiklerini karakterize etmek için, yüksek saflıkta siklik polimerler sağlayan bir sentez yöntemi ve tek molekül düzeyinde moleküler hareketin kantitatif karakterizasyonuna izin veren bir deney ve analiz yöntemi geliştirilmelidir. Burada, elektrostatik kendi kendine montaj ve kovalent fiksasyon (ESA-CF) işlemi11-13 kullanarak bir florofor birimi içeren yüksek saflıkta siklik ve disiklik poli(THF) leri sentezlemek için bir yöntem ve ortalama kare yer değiştirme (MSD) ve kümülatif dağılım fonksiyonu (CDF) analizlerinin bir kombinasyonunu kullanarak bireysel florofor içeren polimer zincirlerinin hareketini analiz etmek için bir yöntem göstereceğiz.
 Yayılma hareketinin doğru karakterizasyonu için uygun bir veri işlemenin gerekli olduğu gösterilmiştir. Yeterli bir MSD ve CDF analizleriyle, doğrusal polimer zincirlerinin eriyik ve yarı seyreltik çözeltisindeki siklik ve disiklik polimerlerin çok modlu bir difüzyonu ortaya çıkarılmıştır,14-16 bu da polimerlerin topolojik durumlarının dolaşık koşullar altında zincirlerin difüzyon hareketi üzerindeki önemli etkilerini düşündürmektedir. 17 Döngüsel polimerlerin hareketini karakterize etmek için deneysel ve analitik yaklaşımlar bu protokolde açıklanırken, aynı yöntem diğer birçok heterojen sistemde yayılma hareketini nicel olarak karakterize etmek için kullanılabilir. Yaklaşım, numunelerde bulunan çoklu difüzyon bileşenlerinin analiz edilmesi gerektiğinde özellikle uygun olacaktır.

<table><tbody><tr><td><güçlü > Malzemeler< / güçlü ></td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>THF</td><td>Godo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Wakosil C-300</td><td>Wako Saf Kimya Endüstrileri</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Aseton</td><td>Godo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Toluen</td><td>Godo</td><td></td><td></td></tr><tr><td> n Hekzan</td><td>Godo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CHCl 3 </td><td>Kanto Kimyasal</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Biyo-Boncuklar S-X1</td><td>Bio-Rad</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metil triflate</td><td>Nacalai Tesque</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Triflik anhidrit</td><td>Nacalai Tesque</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Potasyum Hidroksit</td><td>Wako Saf Kimya Endüstrileri</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Wako Saf Kimya Endüstrileri</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Poli ( tetrahidrofuran)</td><td>Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kloroform</td><td>Wako Saf Kimya Endüstrileri</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Daldırma yağı</td><td>Cargille</td><td>Tip 37 / Tip A</td><td></td></tr> <tr><td><güçlü > Ekipman< / güçlü > 2 Boyunlu</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>100 ml yuvarlak tabanlı şişe</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Şişesi</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Beher</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Huni</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>Whatman</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Reflü kondansatör</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Şırınga</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Su banyosu</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Manyetik karıştırıcı</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Döner buharlaştırıcı</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop kapak fişleri (24 x 24 mm, No. 1)</td><td>Matsunami Cam</td><td>CO22241</td><td></td></tr><tr><td>Boyama kavanozu</td><td>AS ONE Corporation</td><td>1-7934-01</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasonik temizleyici</td><td>VWR International&nbsp;</td><td>142-0047</td><td></td></tr><tr><td>Ters mikroskop</td><td>Olympus</td><td>IX71</td><td></td></tr><tr><td>Ar-Kr iyon lazer</td><td>Tutarlı</td><td>Innova 70C</td><td></td></tr><tr><td>Berek kompansatör</td><td>Newport</td><td>5540</td><td></td></tr><tr><td>Uyarma filtresi</td><td>Semrock</td><td>LL01-488-12.5</td><td></td></tr><tr><td>Diklorik ayna</td><td>Omega optik</td><td>500DRLP</td><td></td></tr><tr><td>Emisyon filtresi</td><td>Semrock</td><td>BLP01-488R-25</td><td></td></tr><tr><td>Lens ve ayna</td><td>Thorlabs</td><td></td><td></td></tr><tr><td>EM-CCD kamera</td><td>Andor Teknolojisi</td><td>iXon</td><td></td></tr><tr><td>Objektif lens (100X, N.A. = 1.3)</td><td>Olympus</td><td>UPLFLN 100XOP</td><td></td></tr><tr><td>Objektif ısıtıcı</td><td>Bioptechs</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hazırlayıcı GPC</td><td>Japonya Analitik Endüstrisi</td><td>LC-908</td><td></td></tr></tbody></table>

tek molekül düzeyde halkalı polimerlerin sentezi ve eritin devlet onların pasif hareket karakterizasyonu

Synthesis of Cyclic Polymers and Characterization of Their Diffusive Motion in the Melt State at the Single Molecule Level

Döngüsel polimerlerin sentezi için bir yöntem ve tek molekül seviyesinde eriyik halde difüzyon hareketlerini karakterize etmek için bir protokol gösteriyoruz. Döngüsel poli(tetrahidrofuran) (poli(THF)) sentezi için bir elektrostatik kendi kendine montaj ve kovalent fiksasyon (ESA-CF) işlemi kullanılır. Eriyik durumdaki tek tek siklik polimer zincirlerinin difüzyon hareketi, siklik zincirlere bir florofor birimi dahil edilerek tek moleküllü floresan görüntüleme kullanılarak görselleştirilir. Zincirlerin difüzyon hareketi, ortalama kare yer değiştirme (MSD) analizi ve kümülatif dağılım fonksiyonu (CDF) analizinin bir kombinasyonu vasıtasıyla nicel olarak karakterize edilir. Döngüsel polimer, doğrusal muadilinden farklı olan çok modlu difüzyon sergiler. Sonuçlar, genellikle topluluk ortalamasının arkasına gizlenen polimerlerin difüzyonel heterojenliğinin, ESA-CF prosesi kullanılarak siklik polimerlerin verimli sentezi ve MSD ve CDF analizleri kullanılarak tek molekül düzeyinde difüzyon hareketinin kantitatif analizi ile ortaya çıkarılabileceğini göstermektedir.

Perilen 4 kollu yıldız ve diimid-dahil 8 şeklinde disiklik poli (THF) s elektrostatik kendini montaj ve kovalent tespit (ESA CF) işlemi (Şekil 1, Şekil 2) kullanılarak sentezlendi. Zaman atlamalı tek moleküllü Fluoresans görüntüleri 4-kollu (Şekil 3a) için ölçülmüş ve (Şekil 3b) polimerleri 8-şekillendirildi. Zaman atlamalı floresan görüntüleri (Şekil 3) mekansal nedeniyle zincirleri içine yüksek floresa...

sentez ve tek molekül düzeyinde halkalı polimerlerin uzadıya hareket karakterizasyonu için bir protokol sunulmuştur.

Tek Molekül Düzeyde Halkalı Polimerlerin Sentezi ve eritin Devlet Onların Pasif Hareket Karakterizasyonu

We demonstrate a method for the synthesis of cyclic polymers and a protocol for characterizing their diffusive motion in a melt state at the single ...

Bu deneyin genel amacı, topolojik polimerlerin, özellikle de halkalı polimerlerin, dolanık koşullar altındaki difüzyonel hareketini tek molekül seviyesinde karakterize etmektir. Bu yöntem, polimerlerin topolojiye bağlı uzay-zamansal dinamikleri gibi polimer fiziği alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, genellikle belirli bir düzeyde gizli kalan heterojen difüzyonun tek zincir seviyesinde kantitatif olarak karakterize edilebilmesidir.Bu prosedüre başlamak için, perilen diimid tuzunu 150 mililitre su içerisinde çözün, ardından monofonksiyonel poly(THF)'yi dört mililitre aseton içerisinde çözün. Aseton çözeltisini, şiddetli şekilde karıştırılan sulu çözeltiye damla damla ekleyin. Oluşan çökeltiyi vakum filtrasyonu ile toplayın.Ardından, çökeletin toluen içinde beş miligram/mililitre konsantrasyonunda bir çözeltisini hazırlayın. Çözeltiyi dört saat boyunca reflü edin. Çözeltinin soğumasını bekledikten sonra, çözücüyü döner evaporatör ile indirgenmiş basınç altında tamamen uzaklaştırın.İşlem tamamlandığında, kalıntıyı 2:1 oranında n-hekzan:aseton karışımında çözün ve elde edilen çözeltiyi bir silika jel tıpa üzerinden süzün. Ardından, ürünü çöktürmek için süzülen çözeltiyi buz gibi soğuk suya ekleyin. Polimer eriyik örneğini hazırlamak için, cam bir şişeye 100 µL etiketsiz lineer poli(THF) ekleyin ve bir saç kurutma makinesi kullanarak yaklaşık 25 °C'ye kadar ısıtın.Kloroform içerisinde florofor katkılı polimer çözeltisinin 10⁻⁶ molar çözeltisini hazırlayın. Ardından, bu çözeltiden 1 µL'yi, etiketlenmemiş doğrusal poli(THF) eriyiğinin 100 µL'sine ekleyin. Örnek bir pipet ucuyla iyice karıştırıldıktan sonra, kloroformu bir saç kurutma makinesi ile ısıtarak uçurun.Bir mikro-pipet kullanarak, temizlenmiş bir lam üzerine 10 µL numune yerleştirin. Numunenin üzerine başka bir temizlenmiş lam yerleştirin ve plastik penset kullanarak iki lamı hafifçe birbirine bastırın. Ardından, bir ters mikroskobun objektif lensine bir objektif ısıtıcısı takın ve sıcaklığı 30 °C'ye ayarlayın.Lensin üzerine bir damla imersiyon yağı damlatın ve numuneyi mikroskop tablasına yerleştirin. Numunenin alt ve üst yüzeyinin eksenel konumunu kontrol ederek yaklaşık 10 mikrometre kalınlık elde edildiğinden emin olun. Ardından, mikroskobun odağını numunenin alt yüzeyinin birkaç mikrometre üzerine ayarlayın.Bunu takiben, tekil floroforun yüksek kaliteli bir floresan görüntüsünü elde etmek için bir CCD kameraya elektron çoğaltıcı veya EM kazancı uygulayın. Şimdi, kamerayı kontrol eden yazılımı kullanarak bir ilgi alanı belirleyin. Deneysel koşulları optimize etmek için, eksitasyon ışın yolu boyunca yerleştirilen diyaframı kullanarak numunenin aydınlatma alanını yaklaşık 20 µm çapında olacak şekilde ayarlayın.Uyarılma ışını yoluna uygun bir nötr yoğunluk filtresi manuel olarak yerleştirilerek, numune üzerindeki uyarılma lazer gücü 4 ila 8 miliwatt değerine ayarlanır. Son olarak, eriyik haldeki florofor içeren polimerin 100 ila 200 hertz kare hızında 500 ila 1000 floresans görüntü sekansı kaydedilir. Dört kollu ve sekiz şekilli polimerler için ölçülen zaman ayarlı tek molekül floresans görüntüleri, yüksek derecede floresan olan perilen diimid floroforun zincirlere dahil edilmesi nedeniyle mekansal olarak izole edilmiş parlak ve keskin noktalar göstermektedir.Ortalama kare yer değiştirme analizi ile belirlenen difüzyon katsayısının frekans histogramları, hem analizin istatistiksel hatasından hem de difüzyonun heterojenliğinden kaynaklanan geniş dağılımlar sergilemektedir. Frekans histogramları, polimer moleküllerinin heterojen difüzyonunu kanıtlayan, homojen difüzyon modelinden belirgin sapmalar göstermektedir. Tekli ve çiftli Gauss modelleri, deneysel olarak elde edilen kümülatif dağılım fonksiyonlarına iyi uyum sağlamakta ve oluşan polimerin difüzyonunun difüzyon katsayısının geniş dağılımı ile tanımlandığını göstermekte; sekiz şeklindeki polimer ise iki farklı difüzyon modu sergilemektedir.Doğru şekilde uygulandığında, polimer sentezi altı saatte ve tek molekül daldırma deneyi birkaç saatte tamamlanabilir. Geliştirilmesinin ardından bu teknik, polimer bilimi alanındaki araştırmacıların kalabalık ortamlarda polimer dinamiğini keşfetmelerinin önünü açmıştır. Bu videoyu izledikten sonra, tek zincir düzeyinde, dolanık koşullar altındaki topolojik polimerlerin difüzyonel hareketinin nasıl karakterize edileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.Lazerler ve organik çözücülerle çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini ve bu prosedür gerçekleştirilirken lazer güvenliği ve MSDS'nin incelenmesi gibi önlemlerin her zaman alınması gerektiğini unutmayın.

synthesis-cyclic-polymers-characterization-their-diffusive-motion

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Sigara karıştırıldı çökelti polimerizasyonu uyaranlara duyarlı poli (N -isopropylacrylamide) dar bir boyut dağılımı mikrojelleri sentezi için hızlı, kopyalanabilir bir prototip bir yaklaşım sağlar. Bu protokol sentezinde, ışık saçılması karakterizasyonu ve geniş alan mikroskopisi kurulumunda bu mikrojellerin tek parçacık floresan izleme gösterilmiştir.

Kontrollü Sentezi ve yüksek Düzgün Poli Floresan Takibi (<em&gt; K</em&gt; -isopropylacrylamide) Mikrojeller

Burada, biz hazırlamak ve ikincil yapılar görselleştirmek için bir protokol mevcut (örneğin, lifler, toroid mimariler ve nano-küreler) sarmal polikarbodiimidler türetilmiş. Her iki atomik kuvvet mikroskobu (AFM) ve taramalı elektron mikroskobu (SEM) ile karakterize morfoloji moleküler yapı, konsantrasyon ve seçim çözücü bağlı olduğu gösterilmiştir.

Sarmal polikarbodiimidden Kopolimer ve Bunların Triazole Türevleri elde edilen kendinden montaj morfolojileri

hava-sıvı kristal arayüzünde megamolecular biyopolimerlerin kurutma kaynaklı kendini entegrasyon için bir yöntem olup burada sağlanır. Bu metodoloji Biyopolimerlerin makroskopik potansiyellerini anlamak için değil, aynı zamanda biyomedikal ve çevre alanlarında yumuşak malzemeler için bir değerlendirme yöntemi olarak sadece yararlı olacaktır.

Kurutma Hava-LC Arayüz üzerinde Megamolecular Biyopolimerlerin Kendinden entegrasyonu için Yöntemler

Bu makalede mikrosıvısal süreci ve sıvı kristal elastomerler kişiseldir parçacıkları hazırlamak için parametreler açıklanır. Bu işlem çalıştırma büyüklüğü yanı sıra parçacıklar ve onların boyutu ve şekli (gelen oblate şiddetle muhtemelen için çekirdek-kabuk ve Janus türleri morfoloji) varyasyon prensibi hazırlık sağlar.

Sıvı kristal Elastomer aktüatörler mikrosıvısal hazırlanması

Bu protokolün amacı, solvent kullanmadan hafif sıcaklıklarda (90 °C) Poly (S-divinylbenzene) dinamik sülfür bağları kullanarak polimerizasyon başlatmalıdır. Terpolimerler GPC, DSC ve 1H NMR ile karakterize edilir ve çözünürlük değişiklikleri için test edilmiştir.

Poly (S-Divinylbenzene) dinamik sülfür bağları kullanarak hafif sıcaklıklarda Terpolimerler sentezi

Kristalizasyon odaklı Self-montaj (CDSA), dar uzunlukta dağılımların silindirik nanoyapılarını üretebilmek için benzersiz bir yetenek gösterir. Ε-kapolakton ve Metil metakrilat ve n, n-dimetil akrilamid sonraki zincir uzantılarının organokatalyzed halka açma polimerizasyonu gösterilmiştir. 500 Nm uzunluğa kadar Monodisperse silindirleri üreten bir canlı CDSA Protokolü özetlenmiştir.

Biodegradable blok kopolimerlerin kristalizasyon Driven kendinden montajı ile Monodisperse silindirik Nanopartiküllerin sentezini

Burada, trans-siklobütan kaynaşmış siklooktenlerin (tCBCO) hazırlanması, depolimerize edilebilir olefinik polimerler hazırlamak için polimerizasyonları ve bu polimerlerin hafif koşullar altında depolimerizasyonu için protokolleri açıklıyoruz.  Ek olarak, depolimerize edilebilir ağların hazırlanması ve bu sisteme dayalı sert doğrusal plastiklerin sıkıştırma kalıplanması için protokoller açıklanmaktadır.

Kaynaşmış Halka Siklookten Monomerlerine Dayanan Depolimerize Edilebilir Olefinik Polimerler

Gram-negatif bakterilerin lipopolisakarit (LPS) lipid A alanı izolasyonu ve karakterize edilmesi, hücre yüzeyi antibiyotik direnç mekanizmaları göre, bakterinin yaşamda kalması ve spor ve nasıl kimyasal olarak çeşitli lipit A moleküler türün farklı olarak ana doğal immün yanıtları modüle fikir verir.

Gram-negatif bakterilerin izolasyonu ve Lipid A kimyasal karakterizasyonu

Peptid üçüncül amidler (PTAs) gibi peptitler, peptoidler ve N-metillenmiş peptidlere sınırlı değildir peptidomimetik bir süper ailesidir. Burada PTA bir tek tane tek bileşik kütüphanesi sentezlenmesi için iki-ve-havuz ve alt monomer stratejileri hem de birleştiren bir sentetik yöntem açıklanmaktadır.

Split-ve-havuz Sentezi ve Peptit Tersiyer Amid Kütüphanesi Karakterizasyonu

Bu protokol, antikanser ilaçların BBR3464 ve pikoplatin yönlerini birleştiren çok çekirdekli platin kompleksleri, sentezinde kullanılmak için müsait köprü ligandlar oluşturmak için izonikotinik asit ve diamino-amid birleştirme reaksiyonlarının kullanımı açıklanmaktadır.

Çekirdekli Antikanser Maddeleri olarak Platinum bispiridin tabanlı Ligandların ve kompleks Sentezlenmesi için kullanılan amid bağlantı reaksiyon

Öğrenin, halkalı polimerlerin tek molekül düzeyinde difüzyon hareketini karakterize etme yöntemini. Bu teknik, polimer fizikçilerine topoloji bağımlı zamansal dinamikleri inceleme olanağı sunar.

Tek Molekül Düzeyde Halkalı Polimerlerin Sentezi ve eritin Devlet Onların Pasif Hareket Karakterizasyonu

Daha fazla video keşfet