Name: Farelerde Bir Tekrarlanan Concussive Kafa Travması Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 42 s
Description: Öğrenin, farelerde tekrarlayan konvülsif kafa travması modelini elektromanyetik darbe sistemi kullanarak kurmayı. Bu yöntem, hafif travmatik beyin hasarı ve beyin fonksiyonları üzerindeki etkilerini incelemek için araştırmacılara güvenilir bir çerçeve sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Florida Sağlık hibesinden (Beyin ve omurilik yaralanması araştırma fonu) (KKW) sağlanan finansmanla desteklenmiştir.

Tüm işlemler Florida Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından ve Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanım Sağlık Rehberi National Institutes göre onaylanan protokoller # 201207692 altında gerçekleştirildi. 1. Hayvan Bakımı <ol><li> 3-4 aylık erkek C57BL / 6J fareler kullanın. Yatak, yuvalama malzeme, yiyecek ve su ad libitum sağlamak. Sabit 12 saat ışık / 12 saat karanlık döngüsü ile 22 ° C - 20 kontrol edilen ortam sıcaklıklarında fareler tutun. </li></ol> 2. Ön impaksiyon Hazırlık <ol><li> Elektromanyetik stereotaksik darbe cihazına ısmarlama silikon kauçuk kaplı metal ucu takın. Ucunun düz tabanlı prob ucu (Şekil 1A) yüzeyine paralel olduğundan emin olun. </li><li> % 2.5 izofluran bakım anestezi ardından% 4 izofluran ile fare anestezisi. debimetre aracılığıyla anestezi kontrol edin. monitor hayvan kadar anestezi seviyesi pedalı geri çekme refleksi kaybı göstererek anestezi cerrahi düzeyine ulaşır. </li><li> bir ısıtma yastığı üzerinde yüzükoyun pozisyonda fare koyun. Anestezi altında fare tutmak için bir huni şeklinde bir burun konisi kullanın. Tamamen bir düzeltici kullanarak tıraş. anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için farenin gözleri vazelin oftalmik merhem kullanın. </li></ol> 3. Etki Parametreleri Ayar NOT: Etki sistemi darbe parametrelerini ayarlamak için bir kontrol kutusu, impaction gerçekleştirmek için bir aktüatör ve 3-hareket eksenleri ile bir dijital stereotaktik çerçeve içerir. <ol><li> 4 m / sn darbe cihazın hızını önceden ayarlanmış ve kontrol kutusu üzerinde 240 msn bekleme süresi. </li></ol> 4. Konumlandırma Darbe Merkezi <ol><li> 39 ° C&#39;ye yakın vücut ısısını korumak için hayvanın vücudunun altında yumuşak bir ısıtma yastığı koyun. Bir pron bir stereotaktik çerçeve içinde fare montekünt uç kulak çubukları ile e konumu. </li><li> Z-sürücü hareket ettirerek farenin kafasına yakın darbe ucu indirin. Hedef sagital sütür üzerinde koordinatları ortada X- ve Y-sürücüleri hareket ettirerek düz darbe ucu (9 mm çapında) ayarlayın. </li><li> Dikey iki kulak (Şekil 1C) arasında çizilen hayali bir yatay çizgi paralel olan darbe ucunun emin bir kenarı olun. etkinin merkezi (0 mm, yanal 4.5 mm kulaklararası için interaural 9 mm) interfrontal ve lambdoidea&#39;nın sütürler arasındaki merkezi sagital sütür yarıda karşılık gelir. </li></ol> 5. Darbe Derinlik Ayarı <ol><li> doğru etki derinliğini ayarlamak için, yalıtımlı silikon kauçuk kaplı darbe ucu yerine ek prob ucunu kullanın. </li><li> ipuçları geçmeden önce sıfıra dijital stereotaksik kontrol panelindeki X ve Y kanalı ayarlamak anahtarlama ipuçları sonra darbe merkezinin herhangi bir kayma var olduğundan emin olmak için. </li><li> prob taşıEl X ve Y-sürücüleri hareket ettirerek darbe alanının merkezine e ucu. </li><li> farenin kuyruk klibi temas sensörü. </li><li> prob ucu darbe sitenin yüzeyine temas edene kadar aşağı impaktörü (Z sürücü) taşıyın. </li><li> sıfıra stereotaksik kontrol panelindeki Z kanalını ayarlayın. </li><li> elle X ve Y sürücüleri kadar X- ve Y-sürücüleri (NOT dijital stereotaksik kontrol panelinde sıfır düğmeleri) ayarlayarak geri etki alanının darbe ucu taşı (darbe ucu daha önce yerleştirildi) sıfırdır. </li><li> kontrol kutusu üzerindeki geri çekme anahtarı hareket ettirerek çalıştırıcıyı geri çekin. El ile 4 mm aşağı impaktörü (Z sürücüsü) hareket ettirin. </li></ol> 6. Darbe <ol><li> kontrol kutusu üzerindeki etkisi anahtarını tıklayarak etkiyi tetikleyebilir ve 4 mm deformasyon derinliği elde. </li></ol> 7. Sonrası impaksiyon <ol><li> farenin ilk nefes bir zamanlayıcı kullanarak kadar etkisinden zamanı ölçmek. </li><li&gt; Enstrüman hayvan çıkarın ve vücut ısısını korumak için sıcak bir ped üzerine koyun. sternal yatma korumak için yeterli bilinci yerine kadar sahipsiz hayvan bırakmayın. </li><li> Temiz bir kafes içine geri hayvan dönmeden önce kurtarma için izin verin. Tamamen iyileşene kadar diğer hayvanların şirkete bir hayvan iade etmeyin. </li><li> Gözlemleyin ve günlük fareler tartmak. Fareler ağrı belirtileri varsa, intraperitoneal 1 de Meloksikamın ile enjekte - 24 saat - 2 mg / her 12 kg. </li></ol> 8. Tekrarlanan Gömülü <ol><li> gün 4, 7 farelere ek yaralanmaları verin ve ilk yaralanma (etkileri arasındaki 72 saat aralığı) sonra 10. </li></ol> 9. İmmunohistokimya (İHK) <ol><li> transcardial perfüzyon <ol><li> 200 m / kg pentobarbital intraperitonal enjeksiyon yoluyla fareler anestezi. </li><li> Değerlendirmek ve bir ayak tutam cerrahi düzlem anestezi sağlamak. saniyeure hafifçe kimyasal davlumbaz içine plastik bir çalışma yüzeyine forepaws ve arka pençeleri bantlama ile yatar pozisyonda fare. </li><li> Sadece klavikulaya kılıç şeklinde bir süreç altından göğüs orta hat boyunca deri yoluyla bir kesi yapmak. kılıç şeklinde bir süreç iki ek cilt kesiler yapmak ve yanal ventral göğüs kafesi tabanı boyunca devam edin. </li><li> göğüs boşluğu açın ve göğüs kaslarının ve göğüs kafesi üzerinden keserek kalp maruz. </li><li> künt forseps ile kalpte sabitleyin ve 1 yapmak - sol ventrikül 2 mm kesi. </li><li> Hemen sağ atrium içine kelebek iğne takın. yavaş yavaş şırınga iterek 20ml tuzlu su infüzyon başlayın. </li><li> tuzlu dan% 4 paraformaldehid geçin. paraformaldehit 20ml ile perfüzyon devam edin. </li><li> fare başını kesmek ve makasla cilt kaldırmak. Bir kemik kesici kullanarak kafatası beyin izole edin. </li></ol></li><li> Ckesit ryostat <ol><li> -80 ° C&#39;de optimum kesme sıcaklığı (OKT) formülasyonu ve donma embed beyin dokuları. sagital yönde kriyostat beyin yerleştirin. Kes beyin kesitleri 5 mikron kalınlığında. </li></ol></li><li> boyanma <ol><li> 1 saat süre ile, oda sıcaklığında dondurulmuş bölümler kurutun. </li><li> Oda sıcaklığında 1 saat için fosfat tamponlu tuzlu suda 100% 2 keçi serumu ul ve% 0.1 Triton X-100 (PBS) ile slaytlar inkübe edin. </li><li> PBS 300 ul slaytlar 3 kere yıkayın. 4 ° C&#39;de gece boyunca ayrı (200 1) ya da anti-ferritin antikor sonra anti-GFAP (200 1) ile slaytlar kuluçkalayın. </li><li> PBS 300 ul slaytlar 3 kere yıkayın. Daha sonra biyotin-konjuge sekonder antikor ile oda sıcaklığında 2 st için slaytlar inkübe edin. </li><li> PBS 300 ul slaytlar 3 kere yıkayın. Daha sonra 30 dakika boyunca oda sıcaklığında avidin-biyotin kompleksi (ABC) solüsyonu (1:50) ile slaytlar kuluçkalayın. </li><li>PBS 300 ul slaytlar 3 kere yıkayın. 8 dakika - sonra 3,3&#39;-diaminobenzidin 5 için (DAB) alt-tabaka çözeltisi (50 ml PBS, 10 ul H2O 2, 10 mg, DAB hap, kullanımdan önce filtre) &#39;de inkübe edilir. pozitif hücreler ortaya çıkıncaya kadar mikroskop altında slaytlar uyun. </li><li> 5 dakika boyunca yavaş çalışan musluk suyunda slaytlar durulayın. laboratuar silin bir ile temiz slaytlar. Sonra montaj orta ve lamel ile bölümleri monte edin. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Baugh, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+traumatic+encephalopathy%3A+neurodegeneration+following+repetitive+concussive+and+subconcussive+brain+trauma%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Imaging+Behav%22%5BJournal%5D)">Chronic traumatic encephalopathy: neurodegeneration following repetitive concussive and subconcussive brain trauma.</a> Brain Imaging Behav. 6 (2), 244-254 (2012).</li>
<li>McKee, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+traumatic+encephalopathy+in+athletes%3A+progressive+tauopathy+after+repetitive+head+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neuropathol+Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Chronic traumatic encephalopathy in athletes: progressive tauopathy after repetitive head injury.</a> J. Neuropathol Exp Neurol. 68 (7), 709-735 (2009).</li>
<li>Petraglia, A. L., Dashnaw, M. L., Turner, R. C., Bailes, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+mild+traumatic+brain+injury%3A+translation+of+physiological+and+anatomic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Models of mild traumatic brain injury: translation of physiological and anatomic injury.</a> Neurosurgery. 75 Suppl (4), S34-S49 (2014).</li>
<li>Goldstein, L. E., McKee, A. C., Stanton, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Considerations+for+animal+models+of+blast-related+traumatic+brain+injury+and+chronic+traumatic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Alzheimers+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Considerations for animal models of blast-related traumatic brain injury and chronic traumatic encephalopathy.</a> Alzheimers Res Ther. 6 (5), 64(2014).</li>
<li>Gold, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+assessment+of+long-term+deficits+in+rodent+models+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22RegenMed%22%5BJournal%5D)">Functional assessment of long-term deficits in rodent models of traumatic brain injury.</a> RegenMed. 8 (4), 483-516 (2013).</li>
<li>Xiong, Y., Mahmood, A., Chopp, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Animal models of traumatic brain injury.</a> Nat Rev Neurosci. 14 (2), 128-142 (2013).</li>
<li>Luo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+cognitive+impairments+and+pathological+alterations+in+a+mouse+model+of+repetitive+mild+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Long-term cognitive impairments and pathological alterations in a mouse model of repetitive mild traumatic brain injury.</a> Front Neurol. , 5-12 (2014).</li>
<li>Yang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+MRI+characterization%2C+neurobiochemical+and+neurobehavioral+changes+in+a+mouse+repetitive+concussive+head+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Temporal MRI characterization, neurobiochemical and neurobehavioral changes in a mouse repetitive concussive head injury model.</a> Sci Rep. 10 (5), 11178(2015).</li>
<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+monoacylglycerol+lipase+prevents+chronic+traumatic+encephalopathy-like+neuropathology+in+a+mouse+model+of+repetitive+mild+closed+head+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Inhibition of monoacylglycerol lipase prevents chronic traumatic encephalopathy-like neuropathology in a mouse model of repetitive mild closed head injury.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 35 (3), 443-453 (2015).</li>
<li>Petraglia, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+spectrum+of+neurobehavioral+sequelae+after+repetitive+mild+traumatic+brain+injury%3A+a+novel+mouse+model+of+chronic+traumatic+encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">The spectrum of neurobehavioral sequelae after repetitive mild traumatic brain injury: a novel mouse model of chronic traumatic encephalopathy.</a> J Neurotrauma. 31 (13), 1211-1224 (2014).</li>
<li>Lumpkins, K. M., Bochicchio, G. V., Keledjian, K., Simard, J. M., McCunn, M., Scalea, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glial+fibrillary+acidic+protein+is+highly+correlated+with+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma%22%5BJournal%5D)">Glial fibrillary acidic protein is highly correlated with brain injury.</a> J Trauma. 65 (4), 778-782 (2008).</li>
<li>Yang, Z., Wang, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glial+fibrillary+acidic+protein%3A+from+intermediate+filament+assembly+and+gliosis+to+neurobiomarker%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Glial fibrillary acidic protein: from intermediate filament assembly and gliosis to neurobiomarker.</a> Trends Neurosci. 38 (6), 364-374 (2015).</li>
<li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+expression+of+ferritin+in+cerebral+cortex+after+human+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">Increased expression of ferritin in cerebral cortex after human traumatic brain injury.</a> Neurol Sci. 34 (7), 1173-1180 (2013).</li>
<li>Jordan, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+clinical+spectrum+of+sport-related+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurol%22%5BJournal%5D)">The clinical spectrum of sport-related traumatic brain injury.</a> Nat Rev Neurol. 9 (4), 222-230 (2013).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak herhangi bir mali çıkarı yoktur.

klinik durum morfolojik olarak benzer beyin yaralanmaları taklit etmek, post-sarsıntı belirtileri bekleniyor. Post-sarsıntı semptomlar genellikle baş ağrısı, baş dönmesi, baş dönmesi, yorgunluk, hafıza ve uyku problemleri, sorun konsantre yanı sıra anksiyete ve depresif ruh hali sayılabilir. somatik semptomlar henüz hayvan modellerinde ölçülebilir olabilir, bu motor ve bilişsel işlev ve duygusal davranış değişiklikleri mantıklı bir hayvan modellerinde beyin sarsıntısı değerlendirmek için bir kriter olarak kullanılır. Ön...

Sarsıntı da adlandırılan hafif travmatik beyin hasarı (HTBH), travmatik beyin hasarı (TBI) en sık görülen bir durumdur ve ABD&#39;de milyonlarca insanı etkilemektedir. Beyin sarsıntısı teşhis etmek zor olabilir ve sarsıntı için özel bir tedavisi yoktur. Büyüyen bir tanıma ve spor yaralanmaları, askeri mücadele ve diğer fiziksel ilgi çekici takipçiliği kaynaklanan hafif mekanik travma kümülatif ve kronik nörolojik sonuçları 1,2 olabileceği bazı kanıtlar vardır. Ancak, yine de sarsıntı ve onların etkilerine ilişkin bir bilgi eksikliği vardır. Sadece nörolojik değerlendirme ve görüntüleme değerlendirilmesi klinik tanı için kullanılabilir çünkü Güncel metodoloji insanlarda patoloji ve tedavi çalışmalarını kısıtlar. Hayvan modelleri, teşhis ve daha HTBH tedavisinde umut etkili, sıkı, ve kontrollü bir şekilde beyin sarsıntısı incelemek için bir araç sağlar. Çalışmalar geleneksel TBI adapte olmasıBöyle kontrollü kortikal etkisi (CCİ) olarak modeller, sıvı-perküsyon etkisi (FPI), ağırlık düşüşü yaralanma ve patlama hasarı HTBH gerçekleştirmek ve yaralanma parametreleri değiştirerek düşük yaralanma şiddet derecelerine uyarmak için. Bu modeller nedeniyle klinik durumuna morfolojik olarak benzer beyin travması çoğaltmak kabiliyetlerine için kullanmak yararlıdır; Ancak, aynı zamanda kendi sınırlamaları vardır. Bir ivme yaralanma (ağırlık damla) ile uyarılan yaralanma şiddeti genellikle oldukça değişkendir. Hafif CCI iki sonuçları - subaraknoid kanama ve fokal kontüzyon - tipik insan sarsıntı ile karşılaştırılabilir değildir. Blast yaralanma maruz 3-6 esnasında farklı pozlama pozisyon ve pik basınç ölçümleri açısından daha tartışmalı bir model yanı sıra değişken ikincil yaralanma ise CCİ ve FPI, klinik açıdan anlamlı olmayan bir kranyotomi gerektirir. Güncellenmiş sarsıcı hayvan modeli klinik Setti içine pre-klinik araştırma çevirebilirng araştırma gereklidir. Hafif TBI modelleme önemli bir konu en yakın bir klinik ortamda yaralanma çoğaltır deneysel yaralanma şiddetini, tanımlamaktır. Son zamanlarda, farklı araştırma grupları kapalı kafa travması veya Kafa travması (CHI) modeli 7-10 geliştirdi. CHI bir kraniotomi olmadan CCİ&#39;nin bir değişiklik, ama yine de bir kafa etkisini oluşturmak için geleneksel elektronik manyetik darbe sistemi kullanır. Bir CHI darbe parametrelerini ayarlayarak hafif ve orta şiddette değişen bir sarsıntı neden olabilir. bilinç (LOC) kaybı solunum hızı ya da solunum geçici fesih bir azalma tespit ederek bir darbeden sonra hemen görülebilir. LOC süresi yaralanmanın şiddetini belirlemek için kullanılır. Bu kağıt ayrıntılı adım-adım protokolü ve temsilcisi sonuçları ile birlikte farelerde tekrarlayan CHI (rCHI) modelin biraz geliştirilmiş ve güncelleştirilmiş bir sürümünü içerir. rCHI modeli araştırma stratejileri,sarsıntı kaynaklı patolojik değişikliklerin tümünü taklit edebilen hiçbir bireysel bir hayvan modeli var, özellikle de HTBH etkileri ve potansiyel tedaviler belirlenmesinde yararlı yeniden.

<table><tbody><tr><td>anestezi makinesi</td><td>Eagle Eye Anesthesia, Inc</td><td>Model 150&nbsp;</td><td>Anestezi</td></tr><tr><td>Elektromanyetik Çarpma Tertibatı</td><td>LeicaBiosystems</td><td>Impact One Stereotaksik Çarpma</td><td>Tertibatı gerçekleştirme</td></tr><tr><td>Dijital Stereotaksik alet</td><td>LeicaBiosystems</td><td>39462501</td><td>montaj faresi ve konumlandırma uçları</td></tr><tr><td>Sicilone kauçuk kaplı metal uç</td><td>Hassas Alet ve Mühendislik, Gainesvill FL</td><td>ısmarlama darbeli</td><td>uç</td></tr><tr><td>Lityum İyon Hepsi Bir Arada Düzeltici</td><td>WAHL Ev Ürünleri</td><td>9854-600</td><td>tıraş faresi saç</td></tr><tr><td>ataçları</td><td></td><td>ısmarlama</td><td>prob ucu</td></tr><tr><td>Pamuk uçlu aplikatörler</td><td>MEDLINE</td><td>MDS202055</td> tuzlu su ile <td>ovma başlığı</td></tr><tr><td>Doku Tek OCT</td><td>ASKURA FINETEK USA INC</td><td>4583</td><td>doku gömme</td></tr><tr><td>anti-GFAP</td><td>Dako</td><td>CA93013</td><td>IHC</td></tr> için <tr><td>anti Ferritin antikoru</td><td>Sigma</td><td>F6136</td><td>antikoru IHC</td></tr><tr><td>VECTASTAIN Elite için ABC&nbsp; kiti</td><td>Vektör laboratuvarları</td><td>PK-6100</td><td>IHC algılama sistemi</td></tr><tr><td>Permount Montaj Ortamı</td><td>Fisher Scientific</td><td>SP15-100</td><td></td></tr><tr><td>Aperio XT ScanScope tarayıcı</td><td>Leica Microsystems Inc,</td><td></td> <td>slaytları tarama</td></tr><tr><td>Leica AutoStainer XL</td><td>Leica patoloji Şirketi</td><td>ST2010</td><td>H & E boyama</td></tr><tr><td>DAB&nbsp;</td><td>sigma</td><td>D3939</td><td>IHC algılama sistemi</td></tr></tbody></table>

farelerde bir tekrarlanan concussive kafa travması modeli

A Repetitive Concussive Head Injury Model in Mice

Beyin sarsıntısı/hafif travmatik beyin hasarı (mTBI) travmatik beyin hasarının en sık görülen oluşumu olmasına rağmen, yaralanma ve etkileri hakkında hala bilgi eksikliği vardır. Beyin sarsıntısının daha iyi anlaşılmasını sağlamak için hayvanlar genellikle kontrollü, titiz ve verimli bir model sağladıkları için kullanılır. Çalışmalar, yaralanma parametrelerini değiştirerek hafif yaralanma şiddetini uyarmak için mTBI gerçekleştirmek için geleneksel hayvan modellerini uyarlamıştır. Bu modeller, klinik duruma morfolojik olarak benzer beyin yaralanmaları üretebildikleri ve bir dizi yaralanma şiddeti sağlayabildikleri için kullanılmıştır. Bununla birlikte, hastalarda yaralanmaların aynı özelliklerini sunma yetenekleri sınırlıdır. Geleneksel bir darbe sistemi kullanarak, tekrarlayan bir sarsıntı yaralanması (rCHI) modeli, hafif ila orta derecede insan benzeri sarsıntıya neden olabilir. Yaralanma derecesi, solunumun geçici olarak sonlandırıldığına dair bir işaret ile bilinç kaybı süresinin (LOC) ölçülmesiyle belirlenebilir. rCHI modelinin, mTBI etkilerini ve potansiyel tedavileri belirlemedeki doğruluğu ve basitliği nedeniyle kullanılması faydalıdır.

Bu modelde (Şekil 1 AC) ise, nefes nefese ve sığ respirations kısa dönemler vardı. (Bilinçsiz) bilinç kaybı solunum hızı veya normal solunumu devam etmeden önce nefes geçici fesih bir azalma olarak tanımlanır. Başın ortasına bir darbe kısa süreli bilinç kaybı nedeniyle (7.5 ± 4.7, ± 5.5 7.8, ± 8.8 10.2, ayrı ayrı etkisine 9.5 ± 8.0 sn, Şekil 1D). Fare beyinleri etkisi (Şekil 2A) bir sonucu olarak ortaya belirgin yapısal lezyonlar veya do...

Beyin sarsıntısı, travmatik beyin hasarının en yaygın tipini sunar. Bu nedenle, hastalarda bir yaralanmanın önemli özelliklerini çoğaltan tekrarlayan bir sarsıntılı hayvan modeli, sarsıntıyı titiz, kontrollü ve verimli bir şekilde incelemek için bir araç sağlayabilir.

Farelerde Bir Tekrarlanan Concussive Kafa Travması Modeli

Despite the concussion/ mild traumatic brain injury (mTBI) being the most frequent occurrence of traumatic brain injury, there is still a lack of ...

Bu prosedürün genel amacı, geleneksel bir darbe sistemi kullanarak tekrarlayıcı sarsıntıya maruz kalan bir fare modeli oluşturmaktır. Bu fareler, hafif travmatik beyin hasarı (TBI) modelleme alanında, sarsıntının beyin fonksiyonları üzerindeki etkisine dair temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, elektronik mıknatıslı darbe sisteminin basitçe çalıştırılabilir olması ve darbelerin iletilmesi sürecinin kontrol edilebilmesidir.Özel yapım silikon kauçuk kaplı metal ucu, kaplı ucun düz tabanının darbe cihazı prob ucu yüzeyine paralel olduğundan emin olarak, elektromanyetik stereotaksik darbe cihazına takarak başlayın. Ardından, anestezi uygulanmış fareyi ısıtma pedinin üzerine yüzüstü pozisyonda yerleştirin ve ayak parmak sıkıştırmasına yanıt vermediğini doğrulayın. Daha sonra, baş bölgesini tamamen tıraş etmek için bir tüy düzeltici kullanın ve hayvanın gözlerine pomad uygulayın.Hayvan hazır olduğunda, kontrol kutusu üzerinden darbe cihazının hızını saniyede dört metreye ve bekleme süresini 240 milisaniyeye ayarlayın. Vücut ısısını 39 °C civarında tutmak için hayvanın gövdesinin altına yumuşak bir ısıtma pedi yerleştirin. Ardından, fareyi yüzüstü pozisyonda stereotaktik çerçeveye sabitlemek için küt uçlu kulak barları kullanın.Darbe ucunu farenin kafasına yaklaştırmak için Z sürücüsünü kullanın. Düz darbe dokuz milimetre çapındaki ucunu ayarlamak için X ve Y sürücülerini sagital sütürün üzerindeki hedef koordinatların orta noktasına hareket ettirin; bu sırada darbe ucunun bir kenarının iki kulak arasında çizilen hayali bir yatay çizgiye dikey olarak paralel olduğundan emin olun. Darbe derinliğini doğru şekilde ayarlamak için, uçların değiştirilmesinden sonra darbe merkezinde herhangi bir kayma olmadığını doğrulamak amacıyla dijital stereotaksik kontrol panelindeki X ve Y kanallarını önce sıfıra getirin.Ardından, ek prob ucunu farenin beynindeki darbe bölgesine taşıyın. Prob ucunu darbe alanının merkezine getirmek için X ve Y sürücülerini manuel olarak ayarlayın ve kuyruğa bir temas sensörü takın. Prob ucu darbe bölgesinin yüzeyine değene kadar darbe cihazını aşağı indirmek için Z sürücüsünü kullanın ve stereotaksik kontrol panelindeki Z kanalını sıfıra ayarlayın.Ardından, X ve Y sürücülerini kullanarak, X ve Y sürücüleri sıfırlanana kadar darbe ucunu manuel olarak darbe alanına geri getirin. Sonra, kontrol paneli Z sürücüsünün 4.00 olduğunu gösterene kadar Z sürücüsünü aşağı indirin. Ve aktüatörü geri çekmek için kontrol kutusundaki geri çekme şalterini hareket ettirin.Şimdi, dört milimetrelik bir deformasyon derinliğine sahip bir darbeyi tetiklemek için kontrol kutusundaki darbe anahtarına tıklayın ve darbe anından farenin ilk nefesine kadar geçen süreyi ölçmek için bir zamanlayıcı kullanın. Ardından, hayvanı tamamen iyileşene kadar izleme eşliğinde sıcak bir ped üzerine yerleştirin. Tekrarlayan yaralanma düzenini kurmak için farelere ilk yaralanmadan sonraki dördüncü, yedinci ve 10. günlerde ek yaralanmalar uygulayın.Başın merkezine uygulanan bir darbe, solunumun geçici olarak durmasıyla tanımlanan kısa süreli bilinç kaybına neden olur. Beyinler normal morfoloji sergiler; histolojik olarak darbeden kaynaklanan belirgin bir yapısal lezyon veya doku hasarı gözlemlenmemiştir. TBI'a yanıt olarak astrositlerin aktivasyon, proliferasyon veya reaktif gliyoz dahil olmak üzere belirli değişiklikler geçirdiği bilinmektedir.Nitekim, tekrarlayan konküzyonel kafa travması uygulanan fare beyinlerinin korpus kallozumunda, son etkileşimden yedi gün sonra bile astrosit aktivasyonunun belirgin işaretleri gözlemlenebilmektedir. Ayrıca, son etkileşimden bir gün sonra başlayarak en az yedi güne kadar fare korteksinde ferritin immünopozitif hücreler tespit edilebilmektedir; bu durum, çoklu etkileşimlerin kortikal mikrokanamalarla sonuçlanabileceğini göstermektedir. Bu teknikte uzmanlaşıldığında, uygun şekilde uygulandığı takdirde işlem 15 dakika içinde tamamlanabilir.Bu prosedürü uygularken, fare beyninin darbe alan tarafının doğru konumlandırıldığından emin olmak önemlidir. Geliştirilmesinin ardından bu teknik, hafif TBI etkilerini, tanısını ve model sporculardaki potansiyel tedavileri araştırmak amacıyla TBI alanındaki araştırmalara öncülük etmiştir. Bu videoyu izledikten sonra, geleneksel bir darbe sistemi kullanarak tekrarlayan konküzyon fare modelinin nasıl kurulacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

a-repetitive-concussive-head-injury-model-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Kaynak: Yang, Z., et.al. Farelerde tekrarlayan sarsıntılı kafa travması modeli. J. Vis. Uzm. (2016). Bu video, bir elektromanyetik darbe cihazı kullanılarak bir farede tekrarlayan sarsıntılı kafa yaralanmalarının indüksiyonunu göstermektedir. Prosedür, darbe ucunun anestezi uygulanmış bir farenin kafatasındaki interfrontal ve lambdoid sütürler arasına yerleştirilmesini ve darbe derinliğini hassas bir şekilde ayarlamak için bir prob ucunun kullanılmasını içerir. Darbe, hafif travmatik beyin...

Bir Fare Modelinde Tekrarlayan Beyin Sarsıntılı Kafa Yaralanmalarının Modellenmesi

Sporcular, her yıl birkaç yüz hafif travmatik beyin yaralanması (mTBI) / sarsıntıyı emerler; Bununla birlikte, bunların beynin üzerindeki sonuçları tam olarak anlaşılamamıştır. Bu nedenle, klinik olarak ilgili semptomları sürekli olarak çoğaltan tek ve tekrarlayan bir mTBI'nin bir hayvan modeli mTBI ve sarsıntı çalışmalarını ilerletmenin yollarını sağlar.

Tek ve Tekrarlayan Hafif Travmatik Beyin Hasarı İçin Bir Fare Modeli

Nörotransmitter değişimi, beyin sarsıntısı sonrası meydana gelen ve bazen-felaket uzun vadeli sonuçlara katkı sağlayan bir nöral fonksiyon bozukluğu mekanizmasıdır. Bu sıçan modeli, insan kraniyoerebral travmanın önemli bir faktörü olan baş ve gövdedeki hızlı hızlanma ve yavaşlama sağlayan bir ağırlık düşürme tekniği ile, in vivo nörotransmitter quantification ile mikrodiyalizi birleştirir.

In vivo serebral mikrodiyaliz ile kuvvet ve rotasyonu birleştiren bir yeni ve translasyonel rat modeli

Protokol, bir fare modelinde hafif travmatik beyin hasarını tanımlar. Özellikle, hafif bir orta hat kapalı kafa travmasını indüklemek için adım adım bir protokol ve hayvan modelinin karakterizasyonu tam olarak açıklanmaktadır.

Farelerde Hafif Travmatik Beyin Hasarının Elektromanyetik Kontrollü Kapalı Kafa Modeli

Bu protokol, kapalı kafa travması (CHI) yöntemiyle indüklenen tekrarlayan hafif travmatik beyin hasarının (rmTBI) modifiye edilmiş bir fare modelini sunar. Yaklaşım, meninkslere maruz kalmanın yaygın olarak neden olduğu iltihabı azaltmak için inceltilmiş bir kafatası penceresi ve sıvı perküsyonunun yanı sıra kemirgenlerde rmTBI modellemesinde gelişmiş tekrarlanabilirlik ve doğruluk içerir.

İnceltilmiş kafatası penceresi ve sıvı perküsyonu içeren tekrarlayan hafif travmatik beyin hasarının modifiye edilmiş fare modeli

Pediatrik sarsıntılar, fizyolojik ve psikolojik bozulmalarla birlikte uzun süreli sekellere neden olabilir. Bu pediatrik beyin sarsıntısı fare modeli, uzun süreli nöroinflamasyon, beyaz cevher değişiklikleri ve davranışsal işlev bozukluğu ile nöronal modifikasyonlar ile sonuçlanır. Model, yaşam süresi değişikliklerini değerlendirmek için diferansiyel çarpma konumlarına veya tekrarlanan sarsıntılara uyarlanabilir.

Farelerde Pediatrik Beyin Sarsıntısı Modeli: Uzun Süreli Bozukluklarla Kapalı Kafa Travması (ÇOCUK) 

Ayrılan Sinir Sakatlık hayvan modeli kalan sural sinir zedelemeden, siyatik sinirin kısmi denervasyon aşağıdaki tibial ve peroneal sinir dallarının lezyon periferik nöropatik ağrı bir fare modeli olarak burada açıklanmıştır. Mekanik allodini kaynaklanan davranış değişikliği von Frey filamentler miktarı.

Fare İndüklenmiş Mekanik allodini ayrılan sinir hasarı (SNI) Model

Bir tekrarlanabilir oluşturmak için bir roman...

Farelerde Kontrollü Servikal yırtığı Sakatlık

Biz fareler tabi olan orta ve ağır iskemi-reperfüzyon bağlı böbrek hasarı modelleri tanımlamak tek taraflı renal pedikül sırasıyla, eş zamanlı veya gecikmeli taraf nefrektomi takip sıkma. Bu modeller sürekli böbrek fonksiyon bozukluğu ve post-yaralanma fibrozis yol, ancak yaralanma şiddeti ve yaşam fare arka plan, yaş ve cerrahi ekipman bağlıdır.

Farelerde Akut Böbrek Hasarı ve Post Yaralanma Fibrozis iskemi-reperfüzyon Model

Bu yöntem, fare modellerinde yeni ilaçların farmakokinetiğini değerlendirmek için, karotid arter yoluyla sabit bir ilaç çözeltisi sunmak amacı ile geliştirilmiştir.

Farelerde Taksanlar Farmakokinetik ve Farmakodinamik Analiz Karotis Arter İnfüzyonlar

Öğrenin, farelerde tekrarlayan konvülsif kafa travması modelini elektromanyetik darbe sistemi kullanarak kurmayı. Bu yöntem, hafif travmatik beyin hasarı ve beyin fonksiyonları üzerindeki etkilerini incelemek için araştırmacılara güvenilir bir çerçeve sunar.

Farelerde Bir Tekrarlanan Concussive Kafa Travması Modeli

Daha fazla video keşfet