Farelerde Hızlandırılmış Ateroskleroz Indüksiyonu: "Tel-Yaralanma" Modeli

Bu işlemin genel amacı, yaralanma yanıtında yer alan moleküler mekanizmaları incelemek için farelerde revaskülarizasyon tedavisi sonrası restenozun insan durumunu taklit etmektir. Bu tekniklerin en önemli avantajları, son derece tekrarlanabilir ve kolayca gerçekleştirilebilir olmasıdır, küçük hayvan modellerinde yöntemi uygulamak için hatta en az deneyime sahip araştırmacı sağlayan. Prosedürü gösteren Adelina Curaj, laboratuvarım için doktora sonrası olacak.

Hiperlipidemi indüklemek için, altı ila sekiz haftalık 18-20 gram Apoe nakavt fareler bir aterojenik diyet bir hafta önce cerrahi işlem ve aterosklerotik plak analizi kadar beslemek. Ameliyat günü, parmak sıkışmayanıt eksikliği doğruladıktan sonra, ventral boyun bölgesinde anestezili fare tıraş ve Betadine ile maruz kalan cilt dezenfekte. Trakea üzerinde boynun ortanca bölgesinde bir santimetrelik deri kesi yapmak ve trakeal bölgenin tam bir görünüm elde etmek için iki yağ organları ayırın.

Kas tabakası açık tutmak için bir retraktör kullanarak, karotis arter ortaya çıkarmak ve iç ve dış karotis arter çatallanma alanı görünür kadar vagus sinir ve juguler ven arter ayırmak için keskin kavisli forceps kullanın. Gevşek, aort kemer karotis arter proksimal altında yedi santimetre uzunluğunda 0-5 ipek sütür yerleştirin, bir gevşek çatallanma noktasına yakın dış karotis arter etrafında 1.5 santimetre uzunluğunda 0-7 ipek sütür yerleştirilir, ve bir gevşek yerleştirilmiş 1.5 santimetre uzunluğunda 0-7 ipek sütür döngü mümkün olduğunca bifurcation distal olarak. Internal karotis arter altında başka bir açık 1.5 santimetre uzunluğunda 0-7 ipek sütür yerleştirin.

Sonra hayvanı saat altı pozisyonunda başıyla yerleştirin. Hemen, sıkıca iç karotis arter ve dış karotis arter üzerinde distal sütür üzerinde dikiş döngüleri kapatın. Ortak karotis arter yoluyla kan akışını durdurmak için 0-5 sütür uçlarını çekmek için hemostat forceps kullanın.

Küçük makas kullanarak, iki döngüler arasında dış karotis arter distal damar çapı distal yarısı küçük bir arteriotomi yapmak ve insizyon yoluyla ortak karotis arter içine% 0.9 sodyum klorür bir damla ile nemlendirilmiş bir 14 inç alkol cilalı esnek guidewire eklemek. Y-insizyon sırasında arteriyel patlamayı önlemek için, dikkatlice parlatılmış bir kılavuz tel kullanın. Üç kez dönerken damar boyunca tel geçerek endotel denudation elde, sonra sıkıca dış karotis arter proksimal döngü kapatın ve kan akışını geri yüklemek için ortak ve internal karotis arterler etrafında dikişleri kesti.

Sonra, retractors kaldırmak ve fizyolojik pozisyona kas tabakası ve iki yağ organları dönmek. Metal klipslerle deriyi kapatın, ardından farenin tamamen bükülene kadar izleyerek kızılötesi ışık altında sol tarafında toparlanmasına izin verin. Neointima oluşumu Movat boyama kullanılarak değerlendirilebilir.

Cerrahın becerisine bağlı olarak 70, 000 ve 100, 000 mikron kare arasında değişen toplam plak boyutu, daha sonra uygun yazılım kullanılarak her örnek için hesaplanabilir. Geliştirilen plak anlık restenosis benzer, hangi ağırlıklı olarak çoğalmış ve orta düz kas hücrelerinin göç oluşur. Düz kas hücresi içeriği plak yaklaşık% 30-40 temsil ederken makrofajlar yaralı damarın neointima içinde bulunan toplam hücre sayısının% 15-25 makyaj.

Re-endotelizasyon genellikle üç hafta sonra% 80-90 ulaşır ve dört hafta sonra neredeyse tamamlanmış olmalıdır. Gelişimi sırasında plak büyümesini takip etmek için, analiz deneysel soruya bağlı olarak tel yaralanmasından sonra birden fazla zaman noktasında tekrarlanabilir. Bir kez hakim, bu teknik düzgün yapılırsa 15 dakika içinde tamamlanabilir.

Bu işlemi yaparken, kurutmayı önlemek ve tel manipülasyonu kolaylaştırmak için cerrahi alanın sürekli olarak sulu olması gerektiğini unutmamak gerekir.