18 Aralık 2016
Organize beyin kesme prosedürleri kesin nöropatolojik tanıları ile belirli nöropsikiyatrik olayları ilişkilendirmek için gereklidir. Beyin kesimler çeşitli klinik-akademik beklenmedik göre farklı yapılır. Bu protokol, insan beyni patolojilerinde hemisferik farklılıkların araştırılması ve mevcut ve gelecekteki biomoleküler / beyin teknikleri en üst düzeye çıkarmak için bir simetrik bihemispheric beyin kesme prosedürü anlatılmaktadır.
Bu prosedürün genel amacı, çeşitli beyin hastalıklarının ciddiyetini, klinik patolojik evrelemesini ve hemisferik dağılımını değerlendirmek için insan beyninin her iki yarım küresinden simetrik olarak diseke edilen sabit bir serebral bölge serisini sistematik olarak toplamak ve analiz etmektir. Bu yöntem, ayrıntılı klinik patolojik ve görüntüleme patolojik korelasyonları için sistematik olarak organize edilmiş kalitatif ve kantitatif nöropatolojik veri koleksiyonu sağlayarak nöropatoloji alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin ana avantajı, her bir serebral hemisferin histofonksiyonel özel yönünün yanı sıra kendi başına patolojik süreçlerle ilgili verilerin elde edilmesidir.
Ölüm sonrası insan beyin dokusunu metin protokolüne göre sabitledikten sonra, beyni, ön kutupları araştırmacının karşısına gelecek şekilde düz bir yüzeye yerleştirin. Beyni, tüm beynin tüm kortikal girüs ve sulkuslarının tam ve net bir şekilde görüntülenmesine izin verecek şekilde yönlendirin. Dokuyu meningeal anomaliler, makroskopik hemisferik asimetriler, makroskopik doku bağlılığı, konjenital malformasyonlar, damar anormallikleri veya diğer anormallikler veya serebral yüzeyin olağandışı sunumları açısından inceleyin.
Ön kutuplar araştırmacıdan uzağa yönlendirilmiş ve hemisferlerin yüzeysel yönleri araştırmacıya dönük olarak, olası makro anomalileri belgelemek ve olası klinik, nöral, anatomik ve kesim sonrası hususları hesaba katmak için gerektiği kadar çok dijital fotoğraf çekin. Tüm kortikal yüzeyi yakalamak için beyne dik olarak dijital resimler çekin. Daha sonra mürekkep veya renkli iğneler kullanarak, merkezi kortikal jiri öncesi ve sonrasını işaretleyin.
Daha sonra, ön kutuplar hala uzağa bakacak şekilde, beyni 180 derece çevirin, ardından beyin tabanı dikkatlice inceleyin, serebrovasküler sistemlere ve beyin sapı çıkış ve giriş seviyelerindeki kraniyal sinirlere özellikle dikkat edin. Aşırı kırılganlıkları nedeniyle doku yırtılmasını önlemek için koku soğancıklarını ve yollarını özel bir dikkatle yönetin. Kortikal ve beyin sapı yüzeylerinin tamamını yakalamak için beyne dik olarak dijital fotoğraflar çekin.
Beynin tabanına bakacak şekilde ve bir neşter kullanarak, beyin sapını ponsun üst kısmından enine olarak beyin tabanına mümkün olduğunca yakın kesin. Substantia nigra'yı solukluk açısından dikkatlice inceleyin ve diğer komşu yapıları inceleyin. Bir ses kayıt cihazı kullanarak, normal bir beyne kıyasla beynin olağandışı görünümünü not edin.
Burada, sol ve ardından sağ hemisferlerin koku soğanı ve yolu diseke ediliyor. Beyni ters çevirin ve keskin bir bıçak kullanarak, korpus kallozum'u medial longitudinal fissür boyunca merkezi olarak keserek iki yarım küreyi ayırmak için fronto-oksipital bir yön izleyin. Her yarım kürenin her iki tarafını olası anormallikler açısından inceleyin.
Tüm kortikal yüzeyi yakalamak için beyne dik olarak da dahil olmak üzere gerektiği kadar çok fotoğraf çektikten sonra, iki yarım küreyi, ön loblar araştırmacıdan uzağa bakacak ve merkezleri birbirine değecek şekilde medial yönleri üzerine düz bir şekilde yerleştirin. Keskin bir bıçak kullanarak, ön kutuplardan başlayarak her iki serebral hemisferi manuel olarak kesin ve bir santimetre kalınlığında iki dizi beyin dokusu levhası elde etmek için hemisferlerin tüm uzunluğu boyunca oksipital kutuplara doğru hareket edin. Beyin levhalarını, fotoğraf çekmek için üzerine bir cetvel basılmış düz beyaz bir yüzeye anatomik olarak organize ve simetrik bir sırayla yerleştirin.
Levhanın koronal yüzeylerinin doğrudan göz muayenesi ve dijital fotoğrafçılık için görünür olduğundan emin olun. Beyin yapılarını, boyutlarını ve olası anormallikleri daha doğru bir şekilde lokalize etmek için her iki tarafında basılı milimetrik ızgaralar bulunan kesme yüzeyleri kullanın. Koronal yüzeyler görünür durumdayken, tüm kortikal yüzeyi yakalamak için dik olarak dijital fotoğraflar çekin.
Normal bir beyne kıyasla beynin herhangi bir olağandışı yönünü not alın. Daha sonra, keskin bir neşter kullanarak, kurulan her bir serebral bölge için küçük dikdörtgen beyin dokusu bloklarını manuel olarak inceleyin. Bu tabloda açıklanan önerilen serebral bölge toplama şemasını takip edin.
AD'nin Alzheimer Hastalığı Çalışması anlamına geldiği, 16'nın otopsinin yapıldığı yılı temsil ettiği ve 0001'in ilerleyici bir katılım örneği numarası olduğu her vaka için rastgele veya yarı rastgele sayılar üreterek histo kasetlerini etiketlemek için tanımlayıcı kodları oluşturun. Her doku bloğunu ayrı histo kasetlerine yerleştirin. Tüm kesilmiş beynin ve ilgili histo kasetlerinin daha önce anlatıldığı kadar çok dijital resim çekin.
Tam bir fotoğraf seti çektikten sonra, DNA ekstraksiyonu ve genetik analiz için iki ila beş milimetre doku parçasını delin. Son olarak, beyin dokusu blokları içeren tüm histo kasetlerini daha önce kullanılanla aynı tip fiksatif solüsyona daldırın ve dokuyu metin protokolüne göre işleyin. Bu tablo, beyin bankasında toplanan bir dizi insan beyni üzerinde gerçekleştirilen simetrik bir bihemisferik beyin kesme prosedürü kullanılarak bazı ön yarı nicel verileri açıklamaktadır.
Ön veriler, yaşlı deneklerden alınan çoğu kontrol beyninin aslında beta-A nöritik plaklar ve tau-nörofibriler yumaklar için pozitif olduğunu ve beta-A nöritik plakların çözünmeyen seviyelerinin sol entorinal korteks ve hipokampusta sağ taraftaki aynı beyin bölgelerine kıyasla daha yüksek olduğunu göstermektedir. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik düzgün bir şekilde uygulanırsa sabit beyinler için bir saat içinde ve taze beyinler için iki saat içinde tamamlanabilir. Bu prosedürü denerken, önerilen kesme şemasını takip etmeyi, kesin insan anatomik bilgisine dayanarak her bir serebral bölgeyi her iki yarım küreden toplamayı hatırlamak önemlidir.
Bu prosedürü takiben, belirli bir beyin hastalığında belirli bir hemisferdeki belirli bir beyin bölgesindeki belirli bir genin aktivasyon seviyeleri nelerdir gibi ek soruları yanıtlamak için DNA, RNA veya protein ekstraksiyonu gibi diğer yöntemler gerçekleştirilebilir. Her difüzyonda, bu teknik, nöropatoloji, klinik patoloji ve görüntüleme patolojisi korelasyonu alanındaki araştırmacıların çeşitli nöropsikiyatrik hastalıkların hemisferik ilişkili patolojik yönlerini keşfetmelerinin önünü açacaktır. Bu videoyu izledikten sonra, hastalığın ciddiyetini, hastalığın patolojik evresini ve farklı nöropatolojik süreçlerin hemisferik dağılımını değerlendirmek için insan beyninin her iki yarım küresinden belirli anatomik bölgelerin nasıl toplanacağını iyi anlamış olmalısınız.
İnsan beyniyle çalışmanın, karmaşık nöroanatomik devrelere sahip ve muhtemelen farklı hastalıkları olan bir kişinin geçmişiyle çalışmak olduğunu ve bıçakların, neşterlerin, formalinin son derece dikkatli bir şekilde ele alınması gerektiğini unutmayın.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu protokol, insan beyni patolojilerindeki hemisferik farklılıkların araştırılmasını amaçlayan simetrik bihemisferik beyin kesme prosedürünü ana hatlarıyla açıklamaktadır. Bu yöntem, klinik ve görüntüleme patolojik korelasyonlarını geliştirmek için kalitatif ve kantitatif nöropatolojik verilerin toplanmasını kolaylaştırır.
Simetrik bihemisferik beyin kesimi, her iki serebral hemisferden sistematik nöropatolojik veri toplanmasına olanak tanıyarak, nöropsikiyatrik hedef doğrulamadaki mekanistik risk azaltma süreçlerini destekler. Bu yaklaşım, klinik fenotiplerin hemisferle ilişkili patolojiyle ilişkilendirilmesi için anatomik olarak organize doku sağlayarak öngörüsel güveni artırır ve MSS ilaç geliştirme sürecindeki erken keşif kararlarına temel oluşturur.
Bu yöntem, hipotez odaklı araştırmalar için anatomik olarak kontrollü insan beyin dokusu sağlayarak, hedef doğrulamadan preklinik araştırmalara kadar uzanan keşif sürecine entegre olur.