Name: Tarla Şartlarında Tohum çimlenme, dormansi ve Ölümlerini değerlendirilmesi için güvenilir yöntem (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 3 s
Description: Öğrenin, tarla şartlarında tohum çimlenmesi, ölümleri ve dormansisini etiketli şeritler ve tetrazolium klorür testiyle değerlendirme yöntemini. Bu protokol tohum ekolojisi araştırmaları için sağlam bir çerçeve sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Amerika Birleşik Devletleri Tarım Bakanlığı, Ulusal Gıda ve Tarım Enstitüsü'nden A. Snow, K. Mercer ve H. Alexander'a 2006-39454-17438 numaralı Biyoteknolojik Risk Değerlendirme Hibe Programı tarafından desteklenmiştir. Bu yöntemi kullanan deneyler, Kansas Biyolojik Araştırması ve Kansas Üniversitesi'nin bir araştırma birimi olan Kansas Üniversitesi Saha İstasyonu'nda gerçekleştirildi ve desteklendi. Yazarlar, bu el yazmasının önceki versiyonları hakkındaki yararlı incelemeleri için P. Jourdan ve E. Regnier'e teşekkür eder. Ek olarak, bu çalışma, Kansas Üniversitesi Saha İstasyonu, Ohio Eyalet Üniversitesi'ndeki (OSU) Waterman Çiftliği, OSU'daki USDA Süs Bitkisi Germplazm Merkezi ve OSU'daki Bahçe Bitkileri ve Mahsul Bilimi Bölümü'ndeki Tohum Biyolojisi Laboratuvarı'ndaki personelin, özellikle E. Renze, S. Stieve, A. Evans'ın katkılarıyla desteklenmiştir. ve teknik destek için E. Grassbaugh.

1. Birden fazla Türlerin veya Tek Türlerin Kontrollü çarpılar gelen Seed toplayın Not: Anne (tohum üreten) ebeveyn olarak vahşi, karma ve mahsul türlerini kullanarak türler Helianthus annuus (ayçiçeği) içinde 15 çapraz türlerinden Bu örnek kullanılan tohum. <ol><li> büyüme mevsiminin sonunda, etiketli torbalarda olgun tohum kafaları toplamak. Standart formatta (yani anne x baba) ebeveyn çapraz tip etiketli zarf içerisinde saman ve yer tohumdan temiz bir tohum. </li><li> aynı ebeveyn çapraz türlerinin eşit sayıda tohumun eşit miktarda kullanarak büyük zarf içinde birlikte toplu tohum. Örneğin, aynı anne ve baba anne ile 10 arası türlerinden 100 tohum. belirlenmesi (çapraz tip) bilgilerle zarfları etiketleyin. Bu büyük zarflar Bölüm 2 mezar şeritler doldurulmasında kullanılacak tohum ustalar vardır. </li></ol><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody&gt; <tr><td></td><td colspan="3"> anne Veli </td></tr><tr><td> babalık Veli </td><td> Düzensiz: WXW </td><td> F 1: WXC </td><td> Mahsul: CXC </td></tr><tr><td> Düzensiz: WXW </td><td> 0% WXW </td><td> % 25 F 1 XW † </td><td> % 50 CXW † </td></tr><tr><td> BC: WxF1 veya F1xW </td><td> % 12.5 WxBC </td><td> % 37,5 F 1 XBc </td><td> % 62.5 CxBC </td></tr><tr><td> F 1: WXC </td><td> % 25 wxf 1 † </td><td> % 50 F 1 xf 1 </td><td> % 75 CXF 1 † </td></tr><tr><td> F 2: F 1 xf 1 </td><td> % 25 wxf 2 </td><td> % 50 F 1 xf 2 </td><td> % 75 CXF 2 </td></tr><tr><td> Mahsul: CXC </td><td> % 50 WXC † </td><td> % 75 F 1 xC † </td><td> % 100 CXC </td></tr></tbody></table> Tablo 1. Ebeveyn çapraz tEl polinasyon. Ayçiçeği bitki vahşi hibrid çapraz türlerinden imal Dosya türleri tohum gömülme deneyde kullanım için elde tozlaşma üretilmiştir. Tüm çapraz tipleri için, anne ebeveyn ilk olarak listelenir ve baba ebeveyn ikinci listelendi. † ile işaretlenmiş Çapraz tip aynı% kırpma allel ancak farklı anne anne ile karşılıklı çapraz tip çiftleri bir parçasıdır. Pace, Ba ve diğ: Tablo daha önce yayınlanmıştır. (2015) 15. 2. Özel Tohum Defin Şeritler oluşturun NOT: Bu örnekte, üç kaldırma tarih tedaviler ve 15 çoğaltır vardı, bu yüzden toplam 45 şeritler gerekli. Bu örnek şerit başına 15 bölme yüzden, biz 15, 7 x 10 cm bölmeleri ev için yeterli ince örgülü polyester kumaş ya da sivrisinek örgü gereklidir kullanır. Bkz: Şekil 1. <ol><li> Her tohum şerit için kumaş 20 x 105 cm şerit keserek başlayın. </li><li> Daha sonra ikiye kumaşı katlayın, ölçün ve bölmeleri işaretleyin. Bir HIG kullanarakh-sıcaklık tutkal tabancası, bir kısa (10 cm) ucunu mühür. Tutkal biraz, fakat tamamen soğuduktan sonra, bir yalıtım oluşturmak için bir araya kumaş tarafı basın. DİKKAT: Cilde temas uzamış ise Yüksek sıcaklık tutkal ve yapıştırıcı tabancası uçları yanıklara neden olabilir. </li><li> Her bölme işareti açık kısa sonuna kadar katlanmış kenarından Tutkal hatları. bölmeleri arasında deliksiz mühürler sağlamak için tutkal çizgisinde birlikte iki kumaş tarafı basın. bölmeleri arasında göç tohumları deneysel hata katkıda bulunur. NOT: Şimdi bölmeleri oluşturulmuş olduğunu, katlanmamış kenar tohum ve onların kimlik bilgilerini (çapraz tip adı) almak için açık ve hazır kalmalıdır. </li><li> Rastgele her şerit için bölmelere tohum çapraz türleri atayın. <ol><li> tohum muntazam sayısı (her bölüm için 20 Bu örnekte kullanılan) tohum bölmeleri doldurun. Onlar edebiliyoruz böylece etiketler için, cut-to-fit plastik bahçe dart endüstriyel kalıcı işaretleri kullanmakmezar dayanabilir. NOT: Alternatif etiketleme yöntemleri kullanılabilir. </li><li> Her bölme tohum ve etiket ile doldurulduktan sonra, yüksek sıcaklık tutkal tabancası ile hemen bölmesini kapatın. tüm tohum şeridi tamamen kapalı kadar devam edin. tekrarlanan, blok ve / veya tedavi bilgileri birinci bölme genel şerit etiketleyin. NOT: Biz zamansal giderim, blok vardı ve blok içinde şeritler çoğaltmak beri çalışma için, bu bilgilerin tümünü dahil. </li><li> Bir sonraki şerit geçmeden önce gerektiği gibi bölmeleri ve spot tutkal arasındaki boşlukların kontrol edin. </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/54663/54663fig1.jpg" /> Ayrı bölmelere için çapraz tip kimlik gösteren mezar şeridi Şekil 1. Defin tohum şerit şematik. Örnek. Anne ebeveyn ikinci listelenen baba ebeveyn ile ilk sırada listelenir. Renkler farklı anne ebeveynlik belirtmekürün için F 1 melez için mavi, vahşi sarı ve kırmızı ile. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54663/54663fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 3. Alanında Tohum Şeritler Bury <ol><li> Evin şeritler belirtilen derinliğe kadar araziler Dig. analizde subplot gibi (bu örnekte, çapraz tip) ana arsa ve bölme kimlik olarak kullanılmak üzere şeritler rasgele kaldırma tarihi sağlamak için düzenlenmiş olan tek tek blok şeritler atama. </li><li> toprakla şeritler örtün. Kesim metal örgü donanım bez gömülü şeritler üzerinde araziler ve yeri 10 cm&#39;den büyük olması. toprak kenarları ve kapak bez kenarları korumak için U-işaretçilerine kullanın. NOT: Bu kaplama Burrowing tohum yırtıcı hariç içindir. Başka bir seçenek olarak, Mercer ve ark., 13 inşa edilmiş ve saha loca yoğun gopher basınç nedeniyle tohum şeritleri çevrili donanım bez kutuları gömülüyon.) </li><li> şerit konumu ve kaldırma tarihleri ​​açık yazılı kayıtları tamamlayacak ayırt renkli haritacılara ait bayrakları yerleştirin. </li></ol> 4. Şeritler ÇıkardıSARAYBOSNA ve Seed değerlendirin <ol><li> Belirli bir kaldırma bugüne kadar atanan tohum şeritleri Kazıp. onlar tohum değerlendirme yer alacak laboratuvar ulaşana kadar serin, nemli ortamda şeritler koruyun. Bu ıslak gazete şeritleri ambalaj ve taşıma veya gece boyunca nakliye için bir soğutucu yerleştirerek gerçekleştirilebilir. </li><li> şeritler yeterli olduğunu, dış enkaz olacak karanlık değil tohumlar temizlenene kadar su içinde şeritlerden çamur ve toprak durulayın. </li><li> Bir anda açık bir bölme kesmek için makas kullanın. çimlenmiş tohum sayın ve bunları kaldırın. Açıkça ölü tohumlar (örneğin, çürüyen ya da çürümüş tohumlar) sayın. ayrıca, Filizlenmemiş uyuyan ve ölü tohumları ayırmak için etiketli, ıslak Petri boyutlu kurutma kağıdı üzerine Filizlenmemiş tohumları yerleştirin. <ol><li> Filizlenmemiş ile Petri kapları yerleştirin25 ° C / 10 ° C 12 saat gündüz / gece: Standart çimlenme koşulları için bir büyüme odası setine tohumları. Tohumlar bir hafta çimlenme izin verin. , Canlı olarak bu saymak, ancak saha koşullarında çimlenme yoktu çünkü Filizlenmemiş anlamına herhangi. </li></ol></li><li> Büyüme odası işlemden sonra deneme tetrazolyum klorit (TZ) 13 kullanılarak canlılık açısından Filizlenmemiş tohumları kalmıştır. Bunu başarmak için, AOSA Tetrazolium Test Handbook 14 kullanılarak çalışma türleri için TZ uygun bir yüzde çözelti hazırlayın. Bu örnek için, bir% 1 çözeltisi kullanılır. <ol><li> yarısında Filizlenmemiş tohumları kesin ve bir yarısını yerleştirin embriyo ve endosperm tohum karşılamak için yeterli TZ çözeltisi içeren bir Petri kabındaki görünür idi (tohumlar, bu tamam yüzer olabilir). </li><li> 30 ° C&#39;ye ayarlanmış bir inkübatöre TZ Petri kapları yerleştirin ve 3 saat beklemek. arzu edildiği takdirde daha yüksek sıcaklıklar, daha hızlı bir reaksiyon neden olur, ancak bir risk overstaining: Not. </li></ol></li> &lt;li&gt; inkübatör Petri kutularına çıkarın ve değerlendirir. lekesiz tohumlar ölü iken kendi embriyolar kırmızı lekeli tohumlar, germinable bulunmaktadır. ayırt edici marjinal durumlarda ve özellikle türler üzerinde daha fazla ayrıntı için AOSA Tetrazolium Test El Kitabı danışın. </li></ol>

<ol><li>Walck, J. L., Baskin, J. M., Baskin, C. C., Hidayati, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+transient+and+persistent+seed+banks+in+species+with+pronounced+seasonal+dormancy+and+germination+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Seed+Sci+Res%22%5BJournal%5D)">Defining transient and persistent seed banks in species with pronounced seasonal dormancy and germination patterns.</a> Seed Sci Res. 15 (3), 189-196 (2005).</li>
<li>Alexander, H. A., Schrag, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+soil+seed+banks+and+newly+dispersed+seeds+in+population+dynamics+of+the+annual+sunflower.+Helianthus+annuus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ecol%22%5BJournal%5D)">Role of soil seed banks and newly dispersed seeds in population dynamics of the annual sunflower. Helianthus annuus.</a> J Ecol. 91, 987-998 (2003).</li>
<li>Burnside, O. C., Wilson, R. G., Weiseberg, S., Hubbard, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seed+longevity+of+41+weed+species+buried+17+years+in+eastern+and+western%5BTitle%5D)+AND+%22Weed+Sci%22%5BJournal%5D)">Seed longevity of 41 weed species buried 17 years in eastern and western.</a> Weed Sci. 44 (1), 74-86 (1996).</li>
<li>Baskin, C. C., Baskin, J. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBaskin%2C+CC+%22Seeds%3A+Ecology%2C+biogeography%2C+and+evolution+of+dormancy+and+Germination%22">Seeds: Ecology, biogeography, and evolution of dormancy and Germination</a>. , Academic Press. San Diego, CA. (2001).</li>
<li>Finch-Savage, W. E., Leubner-Metzger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seed+dormancy+and+the+control+of+germination%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytol%22%5BJournal%5D)">Seed dormancy and the control of germination.</a> New Phytol. 171, 501-523 (2006).</li>
<li>Baskin, J. M., Baskin, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+classification+system+for+seed+dormancy%5BTitle%5D)+AND+%22Seed+Sci+Res%22%5BJournal%5D)">A classification system for seed dormancy.</a> Seed Sci Res. 14 (1), 1-16 (2004).</li>
<li>Donohue, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+and+genetic+influences+on+the+germination+of+Arabidopsis+thaliana+in+the+field%5BTitle%5D)+AND+%22Evolution%22%5BJournal%5D)">Environmental and genetic influences on the germination of Arabidopsis thaliana in the field.</a> Evolution. 54 (4), 740-757 (2005).</li>
<li>Roach, D. A., Wulff, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+effects+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Rev+Ecol+Syst%22%5BJournal%5D)">Maternal effects in plants.</a> Ann Rev Ecol Syst. 18, 209-235 (1987).</li>
<li>Pace, B. A., Alexander, H. M., Emry, J. D., Mercer, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seed+fates+in+crop-wild+hybrid+sunflower%3A+crop+allele+and+maternal+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Evol+Appl%22%5BJournal%5D)">Seed fates in crop-wild hybrid sunflower: crop allele and maternal effects.</a> Evol Appl. 8 (2), 121-132 (2015).</li>
<li>Alexander, H. M., Emry, D. J., Pace, B. A., Kost, M. A., Sparks, K. A., Mercer, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roles+of+maternal+effects+and+nuclear+genetic+composition+change+across+the+life+cycle+of+crop-wild+hybrids%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Bot%22%5BJournal%5D)">Roles of maternal effects and nuclear genetic composition change across the life cycle of crop-wild hybrids.</a> Am J Bot. 101 (7), 1176-1188 (2014).</li>
<li>Stewart, N. C., Matthew, J., Halfhill, D., Warwick, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgene+introgression+from+genetically+modified+crops+into+their+wild+relatives%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Transgene introgression from genetically modified crops into their wild relatives.</a> Genetics. 4, 806-817 (2003).</li>
<li>Mercer, K. L., Shaw, R. G., Wyse, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+germination+of+diverse+crop-wild+hybrid+sunflower+seeds%5BTitle%5D)+AND+%22Ecol+Appl%22%5BJournal%5D)">Increased germination of diverse crop-wild hybrid sunflower seeds.</a> Ecol Appl. 16, 845-854 (2006).</li>
<li>Delouche, J. C., Still, T. W., Rapset, M., Lienhard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+tetrazolium+test+for+seed+viability%5BTitle%5D)+AND+%22Mississippi+Sta+Uni+Ag+Exp+Sta+Techn+Bull%22%5BJournal%5D)">The tetrazolium test for seed viability.</a> Mississippi Sta Uni Ag Exp Sta Techn Bull. 51, 1-63 (1962).</li>
<li>Association of Official Seed Analysts. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Tetrazolium+Testing+Handbook%22">Tetrazolium Testing Handbook</a>. , 653 Constitution Avenue NE, Washington, DC 20002, USA. (2010).</li>
<li>Alexander, H. M., Emry, D. J., Pace, B. A., Kost, M. A., Sparks, K. A., Mercer, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roles+of+maternal+effects+and+nuclear+genetic+composition+change+across+the+life+cycle+of+crop-wild+hybrids%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Bot%22%5BJournal%5D)">Roles of maternal effects and nuclear genetic composition change across the life cycle of crop-wild hybrids.</a> Am J Bot. 10 (7), 1176-1188 (2014).</li>
<li>Weiss, A. N., Primer, S. B., Pace, B. A., Mercer, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+effects+and+embryo+genetics%3A+germination+and+dormancy+of+crop-wild+sunflower+hybrids%5BTitle%5D)+AND+%22Seed+Sci+Res%22%5BJournal%5D)">Maternal effects and embryo genetics: germination and dormancy of crop-wild sunflower hybrids.</a> Seed Sci Res. 23, 241-255 (2013).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Burada alanında önceden seçilen zaman aralıklarında tohum çimlenmesi, dormansi ve çeşitli tohum stoklarının mortalite gözlemlemek için tohum mezar şeritleri kullanmak için yöntemler sunuyoruz. tek tek paketler, paketlerin oluşturulması üzerinde şerit ve kompartman yapı (1) hız yalan yerine şeritler kullanmanın avantajları; ve (2) kullanım kolaylığı ve bir paket atlama veya istem dışı bir kaldırma tehlikesi olmadan bir hareket birden fazla bölme kaldırma hızı. Toprak zor ve saha koşullarının soğuk olduğunda Burada sunula...

Bu yöntemin genel amacı güvenilir tarla koşullarında zamanla tohum sağkalım değerlendirmektir. Toprak tohum bankaları geçici veya uzun yıllar 1,2 sürebilir ya toprak yüzeyinde, yüzey çöp içinde veya toprak profilinde içinde dağıtılan dağınık, canlı henüz Filizlenmemiş tohum, bir rezerv bulunmaktadır. Burada sunulan benzer tohum mezar yöntemleri birkaç düzine türleri kullanılarak 17 yıllık çalışmanın uygulandığı zaman, canlı tohumlar 3 test edilen türlerin birçoğu bulundu. Tohum dormansi hayatta fide koşullarının uygun kombinasyonu 4 ortaya çıkana kadar çimlenme tohum bir bloktur. uyuşukluk-serbest bırakılması için harici tetikleme çimlenme sağlar kadar uykuda kalan, tohumlar gibi düşük kış sıcaklıkları, besin sınırlama veya mevsimlik kuraklık gibi zor koşullarda hayatta kalmak için izin verebilirsiniz. uyku hali serbest bırakılması için tetikler f bıraktığı uzatılmış soğuk bileşiklere maruz değişebilirire, ya da hayvan mide asitleri 5 ile aşınmaya veya temas yoluyla tohum ceket fiziksel saldırı. çimlenme ipuçları cins veya belirli bir tür olması ve sık sık geçmiş doğal seçilim sonucu gibi, uyumsuz tohum çimlenme uygunsuz bir zamanda ortaya çıkar, ve tohum ya da fide ölüm veya kötü fide büyümesi neden olabilir hangi olmasıdır. Uyuşukluk dormansi sürümü (örneğin, fiziksel dinlenme, fizyolojik dormansi) mekanizmaları dayalı türde bir dizi ayrılır olsa da, 6 tohum dinlenmesi en az bir bitki biyolojisi konuları anlaşılamamıştır. Böylece, bireysel tohumlar veya ilgili ekolojik koşullarında tohum grupların durumunun değerlendirilmesi için izin alan çalışmaları sadece laboratuarda standart çimlenme testleri güveniyor daha yüksek açıklayıcı güce sahip. Bilinen tohum özelliklerinin Sömürü uyuşukluk mekanizmaları içgörü sağlayabilir. Tohum dormansi Kontrol eşfizyolojik ve morfolojik faktörler genetik kontrolü de dahil olmak üzere mplex. Uyuşukluk mekanizmalarının genişliği tam bir anlayış henüz aydınlatılamamıştır edilecek olsa da, genel bir model iki bitki hormonları Gibberellik Asit (GA) ve Absisik Asit (ABA) 7 arasında bir geri besleme ilişkisi içeren ortaya çıkmıştır. ABA uykuda durumunu korumak için hizmet ederken onların dinlenmesi için bir fizyolojik bileşeni ile tohum bu genelleştirilmiş modelde, GA, dormansi serbest bırakılması için bir sinyal olarak hizmet vermektedir. Maternal genetik etkiler yanı sıra anne oluşturulan doku ve gelişim sinyalleri 8 ile dinlenmesi ve boyut gibi diğer tohum özellikleri, etkileyebilir anne büyüme ortamı. Anne fizyolojik ipuçları ile birlikte zaman zaman, dormansi muhafaza edebilir harici yapılar (veya tohum kaplamaları) oluşturulur. maternal tohum kaplamaları anne bitkinin genler tarafından kontrol edildiğinden, bunlar tohumun gerçek nükleer genetik makyaj yansıtmayabilir. Bizi vared kırpma vahşi melez bir diziden Helianthus annuus achenes 9,10. Böylece, farklı türler, çapraz tip, veya genotipleri dahil çalışma tasarımları hakkında bilgi toplamaktadır tohum özelliklerine bu anne vs embriyo genetik etkileri didiklemek için haçlar ekoloji ve tohum dinlenmesi, çimlenme ve hayatta kalma genetiği. Tohum çimlenme ve hayatta kalma fenotipleri nüfus dinamiklerini nasıl etkilediğini önemli bir örnek kırpma vahşi hibrid bölgelerinde görülebilir. kültür bitkilerinin evcilleştirme sırasında Seçimi en uyuşukluk ortadan kaldırır ve büyüme mevsiminin dışında hayatta kalmak için tohumun yeteneğini azaltır. Oysa kırpma vahşi hibrid bölgelerinde ekili ve vahşi türleri arasında gen akışı, ya da melezleme, tohum bankası dinamikleri üzerindeki potansiyel etkileri ile, vahşi bir nüfus haline ekin allel (ya da genetik varyantları) reintroduce olabilir. ekili ve yabani akrabaları arasındaki melezleri potansiyel sahip olabilir kırpma vahşi hibrid bölgelerinde bulunduekimi (örneğin, kış aylarında) 11 dışında koşullarında hayatta beklenen sadece birkaç fenotipleri ile ara dinlenmesi fenotipleri çeşitli. Bu yazının amacı, biz saha koşullarında doğal varyasyonu araştırmak için farklı zaman dilimlerinde çimlenme, dormansi ve tohum türlerinin bir dizi hayatta değerlendirebilir tohum mezar şerit yöntemi kullanılarak, nasıl göstermektir. Biz tohum özelliklerine anne ve embriyo genetik etkileri ile ilgilenen beri örnekte, 15 kırpma vahşi melez çapraz türlerinden ayçiçeği tohumu kullandı.

<table><tbody><tr><td>Küçük madeni para zarfları</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Büyük madeni para zarfı</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ince gözenekli polyester cibinlik</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>yüksek sıcaklık tutkal tabancası</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>yüksek sıcaklık tutkal çubuğu yedeği</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Endüstriyel kalıcı işaretleyici</td> Herhangi <td>bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>plastik bahçe etiketleri</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>makas</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kürek</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metal örgü sert kumaş</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sörveyör bayrakları, birden fazla renk</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Islak gazete</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>soğutucu</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>kurutma kağıdı</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>petri kabı</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sıcaklık kontrollü büyüme odası</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>tıraş bıçağı</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Petri kabı</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tetrazolium klorür</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>su</td><td>Herhangi bir</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ısı kuluçka makinesi</td><td>Herhangi biri</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

tarla Şartlarında tohum çimlenme, dormansi ve Ölümlerini değerlendirilmesi için güvenilir yöntem

Reliable Method for Assessing Seed Germination, Dormancy, and Mortality under Field Conditions

Örnek bir çalışma türü olarak Helianthus annuus'u kullanarak zaman içinde tohum bankası dinamiklerini yaklaştırma tekniklerini açıklıyoruz. Geçirgen polyester kumaş ve yapıştırıcı şeritleri, toprak sızıntı suyu, su, mikroorganizmalar ve ortam sıcaklığı ile temasa izin verirken, tohumları ve tanımlayıcı bilgileri barındıran bir bölme şeridi oluşturmak için katlanabilir ve yapıştırılabilir. Şeritler, çok çeşitli bölme numaraları ve boyutları ile inşa edilebilir ve araştırmacının tek bir tür, farklı türler veya farklı tedavilerden geçmiş tohumlar içinde çeşitli genotipleri barındırmasına izin verir. Bireysel tohum paketlerinin aksine, şeritler bir birim olarak daha kolay alınır. Çoğaltılmış paketler bir şerit içine dahil edilebilirken, farklı şeritler bloklar olarak hareket edebilir veya zaman içindeki tohum davranışının gözlemlenmesi için farklı zamanlarda alınabilir. Bölmeleri tanımlamak için yüksek sıcaklıkta bir tutkal tabancası kullandık ve blok ve çıkarma sürelerini tanımlayan tohum ve etiketler yerleştirildikten sonra şeritleri kapattık. Tohum şeritleri daha sonra tarlaya istenen derinlikte gömüldü ve yer daha sonra çıkarılmak üzere işaretlendi. Oyuk açan hayvan avcıları, toprak yüzeyinde metal örgü donanım bezi kaplaması kullanılarak etkili bir şekilde dışlandı. Gömme için seçilen zaman aralığından sonra, şeritler kazıldı ve tohumlar çimlenme, uyku hali ve mortalite açısından değerlendirildi. Açıkça ölü tohumlar genellikle çimlenmemiş canlı tohumlardan gözle ayırt edilebilirken, hareketsiz tohumlar, tohum canlılığı için standart bir Tetrazolium klorür kolorimetrik testi kullanılarak kesin olarak tanımlandı.

Çeşitli anne ebeveynlik ve kırpma alel yüzdesi (Tablo 1) ile çapraz tip yüzde Filizlenmemiş çimlenmiş çıkarma tarihleri arasında farklılık ve ölü tohum (Şek. 2 ve 3). Üçüncü kaldırma (yay) tarafından Filizlenmemiş tüm tohumlar gerçekten atıl olduğu tespit edildi ise Filizlenmemiş tohumların TZ testini kullanarak, biz, ikinci kaldırma (erken ilkbahar) (Tablo 2) bazı gerçekten uyuyan tohumları bulundu. <p class="jove_c...

Burada gömülü, etiketli tohum şeritler ve tetrazolyum klorür (TZ) canlılık testi kullanılarak tarla koşullarında tohum hayatta kalma, çimlenme ve dormansi değerlendirmek için bir protokol mevcut.

Tarla Şartlarında Tohum çimlenme, dormansi ve Ölümlerini değerlendirilmesi için güvenilir yöntem

We describe techniques for approximating seed bank dynamics over time using Helianthus annuus as an example study species. Strips of permeable polyester ...

Bu prosedürün genel amacı, tohum çimlenmesini, mortaliteyi ve dormansiyi arazi koşullarında zaman içinde doğrudan gözlemlemek ve nicelendirmektir. Bu yöntem, tohum ekolojisi alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir; örneğin, farklı türlerin veya türlerin farklı ekotiplerinin, bir sonraki neslin popülasyonuna veya kalıcı toprak tohum bankasına bireysel fideler veya tohumlar aracılığıyla nasıl katkıda bulunduğu gibi.Bu tekniğin temel avantajı, herhangi bir sayıda deneysel tasarımın, türün, uygulamanın veya çıkarma tarihinin sahada kolayca uygulanabilmesi ve haftalarca veya aylarca gömülü kaldıktan sonra tam bir tekrar olarak geri alınabilmesidir. Başlamak için, her tohum şeridi için 20 x 105 cm boyutunda bir kumaş şerit kesin. Bir mezura kullanarak, şerit üzerine bölmeler işaretleyin.Kumaşı ikiye katlayın ve kısa uçlardan birine yapıştırıcı sürmek için yüksek sıcaklıklı bir silikon tabancası kullanın. Yapıştırıcının hafifçe soğumasını bekleyin ve ardından sızdırmazlık sağlamak için iki tarafı birbirine bastırın. Katlanmış kenardan açık olan kısa uca doğru, her bir bölme işaretinin boyunca yapıştırıcı şeritler oluşturun.Bölmeler arasında delikler oluşmaması için kumaşın iki tarafını yapıştırıcı çizgileri boyunca birbirine bastırarak mühürleyin. Her şerit için tohum melezleme tiplerini bölmelere rastgele atayın. Ardından, her bölmeye eşit sayıda tohum sayarak yerleştirin.Plastik bir bahçe oku kullanarak bölmeyi tohum tipiyle etiketleyin. Bölmeyi güvenli bir şekilde kapatmak için sıcak silikon tabancası kullanın. Tüm şerit doldurulup kapatılana kadar, tohum ceplerini tek tek doldurarak, etiketleyerek ve kapatarak şerit boyunca ilerleyin.Devam etmeden önce bölmeler arasında boşluk olup olmadığını kontrol edin ve gerektiğinde yapıştırıcı uygulayın. Gömme deneylerini yürütmek için, öncelikle deneysel tasarıma göre şeritleri yerleştireceğiniz parselleri belirtilen derinliğe kadar kazın. Tohum şeritlerini toprağa yerleştirin ve üzerlerini toprakla örtün.Ardından, metal tel örgü kumaşını, gömülü tohum parsellerinden her kenarı 10 cm daha büyük olacak şekilde bir panel olarak kesin. Tel örgü kumaşının kenarlarını toprakla mühürleyin. Bu kaplama, tohumları kazarak çıkaran yırtıcıların girişini engellemelidir.Son olarak, bölge konumuna, çıkarma tarihinin yazılı olduğu ve yazılı kayıtları tamamlayacak şekilde renk kodlanmış renkli plastik parsel etiketleri yerleştirin. Belirlenen çıkarma tarihinde, konu olan tohumları kazarak çıkarın. Nemli kalmalarını sağlamak için şeritleri ıslak gazete kağıdına sarın ve taşıma için bir soğutucuya yerleştirin.Laboratuvara geçildiğinde, bölmelerdeki tohumlar görünür hale gelene kadar şeritleri yabancı kir ve kalıntılardan arındırmak için suyla durulayın. Makas kullanarak her seferinde bir bölmeyi kesin. Mevcut tüm çimlenmiş tohumları sayın ve bunları çıkarın.Açıkça ölü olan tohumları sayın ve uzaklaştırın. Son olarak, çimlenmemiş kalan tüm tohumları toplayın ve bir Petri kabı içindeki etiketlenmiş ıslak bir blot kağıdı üzerine yerleştirin. Çimlenmeye izin vermek için kapları bir hafta boyunca büyüme odasına yerleştirin.Tohumları inceleyin; çimlenmiş olanları belirleyin ve sayın. Bu tohumlar saha koşullarında çimlenmediği için bunları canlı ancak çimlenmemiş olarak kaydedin. Kalan tohumları, tetrazolyum klorür kullanarak canlılık testi yapmak için ortadan ikiye kesin.Embriyo ve endospermin görünür olduğu bir yarıyı Petri kabına yerleştirin. Tohum yarılarını örtecek kadar tetrazolyum klorür ekleyin. Kabı, 30 °C'ye ayarlanmış bir inkübatöre üç saat süreyle yerleştirin.Son olarak, tohum yarılarını değerlendirin. Embriyosu kırmızı boyanma gösteren tohumlar çimlenebilir, boyanmamış tohumlar ise ölüdür. Bu grafik, sonbahar sonunda gömüldükten sonraki ilk çıkarma tarihindeki ayçiçeği kültür yabani çapraz türlerinin çimlenmesini göstermektedir.Çaprazlama türleri, artan ürün alel yüzdelerine göre düzenlenmiştir ve her çaprazlama için maternal ebeveyn belirtilmiştir. Genel olarak, daha düşük ürün alel yüzdeleri, geç sonbahardaki maladaptif çimlenmeyi azaltmıştır. Erken bahar temizlemesinde tüm genotipler yüksek çimlenme göstermiş, ancak çimlenmemiş veya ölü tohum sayılarında önemli ölçüde farklılık göstermişlerdir.Özellikle, kültür anaçlı melez türlerde mortalite daha yüksekken, yabani anaçlı melez türlerin çimlenmeme olasılığı daha fazlaydı. Bahar geldiğinde, bazı melez türlerde çimlenme oranları düştü. Bu durumun, daha erken çimlenen melez türlerin gömme şeritleri içindeki tohum mortalitesinden kaynaklandığı düşünülmektedir.Buna bağlı olarak, ürün ebeveyn maternal tipler tarafından üretilen, ürüne daha çok benzeyen çaprazlama tiplerinde mortalite daha yüksek seyretmiştir. Uzmanlaşıldığında, bu teknik tasarıma bağlı olarak birkaç saat içinde tamamlanabilir. Şeritlerin değerlendirilmesi genellikle kompartıman başına sadece birkaç dakika sürerken, buna büyüme odasında geçirilen süre ve TZ inkübasyonu eklenir. Bu prosedür uygulanırken, yalnızca büyüme odasından geçmiş ve ardından TZ testi ile canlı olduğu belirlenmiş tohumların gerçek anlamda dorman kabul edilebileceğinin hatırlanması önemlidir.Büyüme odasında çimlenen tohumlar çimlenmemiş olarak kabul edilir. Bu prosedürün ardından, tohum sağkalımının tohum çıkışına ve yaşam döngüsünün tamamlanmasına yansıyıp yansımadığı gibi ek soruları yanıtlamak amacıyla fide çalışmaları gibi diğer yöntemler paralel olarak yürütülebilir. Bu videoyu izledikten sonra, tohum çimlenmesi, mortalite ve dormansinin saha değerlendirmesinin nasıl yapılacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.Tetrazolyum klorürün tahriş edici bir madde olduğunu unutmayın ve bu prosedürü gerçekleştirirken eldiven takmak gibi önlemler her zaman alınmalıdır.

reliable-method-for-assessing-seed-germination-dormancy-mortality

Research

JoVE Journal

Environment

Çevre

Tohum bulaşmasını mantarlar tarafından tahılların yıkım daha iyi bitki-patojen etkileşimleri anlamak için sayısız araştırma çabaları açtı. Bir laboratuvar ortamında tohum-mantar etkileşimleri çalışmak için, mantar üretimi, biyokütle, ve çekirdek biyoanalizlerin kullanarak mikotoksin kontaminasyonu ölçümü için sağlam bir yöntem geliştirdi.

Çekirdek biyoanalizlerin kullanarak Fungal Kolonizasyon, Sporogenesis ve Mikotoksin Üretimi Kantitasyonu

Bu video, Arabidopsis thaliana bitkisindeki fide büyüme inhibisyonu testini göstermektedir. Artan immün peptit elisitör konsantrasyonunun fide büyümesi üzerindeki etkisi belirlenir.

Fide büyümesinin bağışıklık kaynaklı inhibisyonunun ölçülmesi

Biz Arabidopsis thaliana tohum tohum kat yatak tahlili (SCBA) monte prosedürü sunuyoruz. SCBA genetik ve in vitro keşfetmek için güçlü bir araç olduğu gösterilmiştir nasıl uyuyan tohum ve hafif uyaranlara yanıt olarak endosperm kontrolleri tohum çimlenme. SCBA endosperm embriyonik büyümeyi etkilemek için şüphelenilen her durumda altında uygulanabilir prensip olarak.

Genetiği keşfedin A Tohum Kabuğunun Yatak Deneyi<em&gt; In Vitro</em&gt; Nasıl Endosperminde Denetimler Çimlenme içinde<em&gt; Arabidopsis thaliana</em

Yabancı ot popülasyonlarında herbisit direncini doğrulamak için sağlam ve esnek bir yaklaşım sunulmuştur. Bu protokol, herbisit direnç seviyelerinin çıkarılmasına ve küçük adaptasyonlarla çok çeşitli yabani ot türlerine ve herbisitlere uygulanmasına izin verir.

Farklı Ot Türlerinin Sağlam Herbisit Direnci Testi için Protokoller

Bu çalışmanın amacı çamaşır suyu ve klor gazı sterilizasyon steril ortam üzerinde yetiştirilen bir aralığı Arabidopsis genotip tohum çimlenmesi üzerindeki etkilerini belirlemek için yapıldı. En iyi duruma getirilmiş sterilizasyon protokolleri tatmin edici tohum hayatta kalma sağlarken mikrobiyal kirleticiler gelişimini engellemek için geliştirilmiştir.

Yüksek işlem hacmi sterilizasyon Arabidopsis tohum için standart yöntem

Kurum mantarlar çok yıkıcı tarım hastalıkları neden. Yanıt olarak çevre ipuçları çimlenme uyuyan teliospores olarak dağılmış. Çimlenme sırasında moleküler değişiklikleri öğrenmek için iki yöntem anahat: metabolik aktivasyon algılamak için solunum artış ölçme ve moleküler olayları farklı morfolojik aşamalarında teliospores izole ederek değiştirme değerlendirilmesi.

Microrespiration analizi ve mikrodiseksiyon kullanarak soruşturma Teliospore çimlenme

Bir bileşik kitaplığın büyük ölçekli taraması ile foliar transpirasyon modülatörlerini tanımlamak için bir yöntem salıyoruz.

Helianthus Annuus'ta Büyük Ölçekli Termal Görüntüleme Taraması ile Bitki Transpirasyonunun Yeni Regülatörlerinin Belirlenmesi

Bu çalışmada nohut-Rhizoctonia bataticola etkileşiminin altında yatan patomorfolojik ve moleküler mekanizmaları incelemek için metodolojiler sunulmuştur. Blotting kağıt yöntemi hızla nohut genotip yanıtları çalışma için yararlıdır, hasta pot tabanlı yöntem aynı anda kuraklık ve R. bataticola enfeksiyon empoze etmek için kullanılabilir ve toleranslı genotipler için ekran.

Nohutta Kuru Kök Çürüklüğü Hastalığı Tahlilleri: Detaylı Bir Metodoloji

Arabidopsisthaliana (Arabidopsis) tohumlarının yüzey sterilizasyonu için yüksek verimli bir protokol sağlanır ve sıvı taşıma adımlarını vakum pompası ile inşa edilmiş basit bir emiş cihazı ile optimize eder. Bir günde yüzlerce tohum örneği yüzey sterilize edilebilir.

Arabidopsis Tohumlarının Yüzey Sterilizasyonu için Yüksek Verimli, Sağlam ve Son Derece Esnek Yöntem

Bu protokol, mikoheterotrofik bitki örneklerinin toplanması, sabitlenmesi ve sürdürülmesi için ayrıntılı prosedürler sağlamayı, mikorizal mantarlarla çimlenmiş bitki dokularında ve tohumlarda mantar kolonizasyonunu incelemek için tarama ve iletim elektron mikroskobu, ışık, konfokal ve floresan mikroskobu gibi farklı mikroskopi tekniklerini uygulamayı amaçlamaktadır.

Mikoheterotrofik Bitki Dokularında Mantar Kolonizasyonunu Yorumlamak ve Tohumların Simbiyotik Çimlenmesi için Mikroskopi Teknikleri

Öğrenin, tarla şartlarında tohum çimlenmesi, ölümleri ve dormansisini etiketli şeritler ve tetrazolium klorür testiyle değerlendirme yöntemini. Bu protokol tohum ekolojisi araştırmaları için sağlam bir çerçeve sunar.

Tarla Şartlarında Tohum çimlenme, dormansi ve Ölümlerini değerlendirilmesi için güvenilir yöntem

Daha fazla video keşfet