Yüzey Pad Elektrokardiyografi kullanılması Farelerde Miyokard İskemi ve Reperfüzyon Hasarı Onayı

Bu prosedürün genel amacı, farelerde başarılı bir miyokard iskemisi ve reperfüzyonunu doğrulamak için elektrokardiyografi kullanmaktır. Bu yöntem, iskemi reperfüzyon cerrahisinin tutarlılığını ve tekrarlanabilirliğini artırmaya yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, zaman alıcı cerrahi sonrası analiz gerektirmenin aksine, iskemi ve reperfüzyonun başarısının işlem sırasında değerlendirilmesine izin vermesidir.

EKG pedini hazırladıktan sonra, EKG pedi üzerindeki dört metalik elektrotun her birine kuruş boyutundan daha küçük bir miktar yüksek iletken elektrolit jel yerleştirin. Ardından, anestezi uygulanmış bir sırtüstü farenin her bir pençesini bir bant parçasına bastırın ve her bir pençenin jel ve elektrotla temas halinde olmasına dikkat ederek bandı bir EKG elektroduna takın. Ardından, makineyi EKG dalga formu gerçek zamanlı olarak görselleştirilebilecek şekilde yapılandırın ve çözünürlüğü gerektiği gibi genlik farklarını hesaba katacak şekilde ayarlayın.

R dalgasının tepe noktası veya Q dalgasının çukuru görsel çerçevenin dışındaysa, dalga formunun tüm yüksekliği gözlemlenene kadar çözünürlüğü ayarlayın. Ardından, farenin hareketsiz ve dokunulmamış olmasına dikkat ederek EKG alet pedini temizleyin ve hayvanın normal, sağlıklı EKG'sinin temel dalga biçimini elde edin. İskemi reperfüzyonunu gerçekleştirmek için, cerrahi bölgenin etrafındaki kılları çıkararak ve alanı betadin ve alkol solüsyonları ile dezenfekte ederek başlayın.

Daha sonra, yemek borusu ve trakeaya paralel dikey bir kesi yapmak için bir neşter kullanın, trakeayı kaplayan ince doku açığa çıkana kadar lenf düğümlerini insizyonun her iki tarafına nazikçe hareket ettirin. Forseps kullanarak, trakeanın beyaz kıkırdak halkaları görünene kadar dokuyu nazikçe ayırın. Ardından havalandırma tüpünü hızlı bir şekilde ağza boğaza doğru yerleştirin.

Borunun ucu açıkta kalan boyun bölgesinden göründüğünde, tüpü trakeanın başlangıcı ile hizalayın. Yarı saydam doku aracılığıyla görsel olarak onaylandığı gibi, boru trakeaya kayana kadar yukarı doğru basınç uygularken tüpü yan yana hafifçe hareket ettirin. Tüp yerindeyken, farenin iki ön dişini asmak için bir ip halkası kullanın ve hayvanın başını sabitlemek ve ventilasyon tüpünün ameliyat sırasında hareket etmemesini sağlamak için ip uçlarını EKG pedine bantlayın.

Ardından havalandırma borusunu hızlı bir şekilde kemirgen ventilatörüne takın ve havalandırma ayarlarını hayvanın ağırlığına göre ayarlayın. Dokunun kurumasını önlemek için açıkta kalan trakeayı ılık tuzlu suya batırılmış bir gazlı bezle örtün. Ardından, sternumun sol tarafı boyunca dikey bir kesi yapmak için bir neşter kullanın.

Forseps kullanarak, fasya tabakasını kas tabakasından nazikçe ayırın, ardından herhangi bir görünür kan damarına zarar vermeden alttaki kas tabakalarını dikkatlice kesin. Üçüncü kaburgayı yavaşça yukarı doğru çekmek için forsepsleri kullanın. Daha sonra, bir elinizle kaburga üzerindeki tutuşu koruyarak, üçüncü ve dördüncü kaburga arasındaki interkostal dokuyu dikkatlice kesmek için cerrahi makas kullanın.

Akciğerler geri çekildiğinde, kalbi çevreleyen ince perikard tabakasını nazikçe ayırmak için forseps kullanın. Ardından kaburgaları, kaburgalar arasında kalbin göründüğü bir konuma getirin. Kalbi, sol atriyal kulak kepçesi kolayca görünecek şekilde konumlandırmak için, farenin sol alt pençesini, sağ alt patisiyle örtüşecek şekilde hareket ettirin.

Sol kulak kepçesinin altındaki sol ön inen koroner arteri veya LAD'yi bulun ve 7-0 ipek konik dikiş iğnesini miyokardın içine LAD'ın altından geçecek kadar derine hızlı bir şekilde sokun, ancak sol ventrikül boşluğuna nüfuz edecek kadar derin değil. Dikiş bayağını, serbest uçta yaklaşık dört santimetre dikiş ipeği kalana kadar tutun ve basit bir dikiş düğümü bağlamaya başlayın. Dikiş ipeğinin serbest ucu, düğümü oluşturmak için ilmeklerden çekildikten sonra, dikiş ipeğinin hem serbest hem de iğne uçlarını forseps ile kavrayın ve şekillendirme düğümünün altına yaklaşık bir santimetrelik PE10 boru kesitini yerleştirin.

Boru yerine oturduğunda, sol alt pençeyi orijinal elektroduna geri koyun ve düğümü, PE10 borusunun kalbe dikilmesi için sıkın. EKG dalga formunun 10 saniye boyunca stabilize olmasını sağlamak için fare ile tüm fiziksel teması serbest bırakın, dalga formunu görsel olarak kontrol edin ve oklüzyon zamanı olarak kaydedin. Daha sonra, EKG ve miyokardiyal renk değişiklikleri iskemiyi gösteriyorsa, PE10 tüpünün etrafındaki dikişi iki kez düğümleyin ve açık göğüs boşluğunu ılık salin gazlı bezle kapatın.

İskemik dönemin sonunda, göğüs boşluğunu kaplayan gazlı bezi çıkarın ve kalbi görselleştirin. PE10 borusunun üstündeki dikiş ipeğini kesin ve boruyu çıkarın, ardından bağın miyokarddan nazikçe çıkarılmasını izleyin. Fare ile tüm fiziksel teması serbest bırakın ve EKG dalga biçiminin 10 saniye boyunca dönmesine izin verin, dalga biçimini reperfüzyon zamanı olarak kaydedin.

Deneysel uç noktada, genlikteki herhangi bir değişiklik için çözünürlüğü gerektiği gibi ayarlayın. T dalgası değişirse ve miyokard kırmızıya dönerse, başarılı bir reperfüzyonu gösterirse, göğüs boşluğunu kapatmak için ameliyat sırasında boşluğa giren fazla havayı dışarı atmak için farenin göğsüne hafif bir baskı uygularken interkostal boşluğu 5-0 ipek sütürle dikin. Daha sonra kas katmanlarını ve cildi dikerek, farenin izleme ile sabit sıcaklık kontrollü bir ortamda tamamen iyileşmesini sağlar.

Bu şekil, bir farenin bir taban çizgisi derecelendirmesinden reperfüzyon boyunca ilerlemesini takip eder ve ilk dalga formu kaydedilen taban çizgisinde normal bir sinüs ritmi gösterir. İkinci dalga formu, ligatür bağlandıktan ve arter tıkandıktan bir dakika sonra EKG'yi gösterir ve başlangıç, preligatür dalga formuna kıyasla yüksek, hiperakut bir T dalgası zirvesi gözlenir. Üçüncü dalga formu, beş dakikalık zaman noktasında tam bir ST segment yükselmesi gösterir ve kompleksin S kısmı, J ve T dalgalarına ilerlemeden önce, temel dalga formundaki kadar derin negatif bir şekilde ulaşmaz.

20 dakikalık iskemi durumunda, QT aralığı genişledi ve ST segmenti hala yükseldi, her iki bölüm de 45 dakikalık işarete kadar bu şekilde kaldı. Beş dakikalık reperfüzyondan sonra, derin, önemli Q dalgalarının kanıtları ortaya çıkmaya başlar ve T dalgası izoelektrik çizgiye geri döner. Bununla birlikte, 30 dakika sonra, negatif Q dalgaları hala kalır ve muhtemelen hem kalıcı hasarın hem de ölmekte olan kalp dokusunun hasarlı alanın etrafındaki elektrik akımlarını saptırdığının göstergesidir.

Ayrıca, sürekli iskemi ve yaralanma ve enfarktüse ilerleme, genellikle kalıcı olan artmış bir negatif T dalgası projeksiyonuna yol açar. Bu prosedürü denerken, hayvan üzerinde herhangi bir işaret yapmadan önce temel bir EKG almayı unutmamak önemlidir. EKG analizi, herhangi bir elektriksel değişikliği veya anormalliği tespit etmek için uygulanabilir.

Kalp, proteomik değişiklikleri araştırmak için protein analizi veya proteomik veya morfometrik değişiklikleri araştırmak için doku boyaması için daha fazla işlenebilir. Bu videoyu izledikten sonra, bir farede başarılı miyokard iskemisi ve reperfüzyonunu doğrulamak için elektrokardiyografinin nasıl kullanılacağını iyi anlamış olmalısınız.