Name: Dinamik ışık saçılımı Mikroskopi Bulanık Çözümleri Tane Büyüklüğü Dağılımının Ölçümü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-09T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: Öğrenin, bulanık çözeltilerde dinamik ışık saçılımı mikroskopisi ile tane boyutu dağılımını sulandırmadan ölçme yöntemini. Bu teknik, yoğun örneklerde partikül analizi için güçlü bir araç sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Milli Eğitim, Kültür, Spor, Bilim ve Teknoloji Bakanlığı'nın (M.S.'ye 25248027 No'lu Bilimsel Araştırma Hibeleri) tarafından mali olarak desteklenmiştir.

1. Numune Hazırlama <ol><li> Sıcaklığa duyarlı monomerlerin saflaştırılması <ol><li> 100 mL tolüen içinde bir N -isopropylacrylamide 20 g (NIPA) içinde çözülür. </li><li> toz ortadan kaldırmak için emme altında çözüm Filtre. </li><li> petrol eteri, 500 mL ile süzüntü karıştırın. </li><li> bir buz-su banyosu içinde, reaksiyon kabı yerleştirin. </li><li> Monomerler (tipik olarak 30 dakika) çökeltilir kadar çözelti karıştırılır. </li><li> Çöken monomerlerin elde etmek için emme altında çözüm Filtre. </li><li> gece boyunca düşük basınç (100 Pa) altında monomerlerin kurutun. </li></ol></li><li> Sıcaklığa duyarlı bir polimer çözeltisinin hazırlanması <ol><li> bir diyafram pompa ile 1.0 dakika boyunca iyonu giderilmiş su gazdan arındırın 20 mi. </li><li> gazı alınmış ve deiyonize su, 9.5 mL saflaştırılmış NIPA arasında 780,8 mg çözülür. </li><li> bir buz-su banyosu içinde, reaksiyon kabı yerleştirin. </li><li> Reaksıyona kalkanalüminyum folyo ile kaplayan aparat ışık. </li><li> yumuşak bir tüp ile gaz silindiri bağlanmış bir pipet ucu ile, Ar gazı orta akım eklenmesi, 10 dakika boyunca yavaşça çözelti karıştırılır. </li><li> N, N, N 11.9 uL ', N', bir mikropipet vasıtasıyla çözeltiye tetrametiletilendiamin ekleyin. </li><li> Ar, gazın ise adım 1.2.5 belirtildiği gibi, 1.0 dakika boyunca çözelti karıştırılır. </li><li> örnek karıştırılırken, gazı alınmış ve deiyonize su, 0.5 mL amonyum persülfat 4,0 mg çözülür. </li><li> ve (aşama 1.2.8 arasında) amonyum persülfat çözeltisi (aşama 1.2.7 gelen) örnek çözeltisi karıştırın. </li><li> Ar, gazın ise adım 1.2.5 belirtildiği gibi, 30 s için çözelti karıştırılır. </li><li> Alüminyum folyo ile çözelti örtün ve bir gece boyunca buzdolabında (4 ° C) 'de muhafaza edin. </li></ol></li><li> Numune bağlar hazırlanması <ol><li> dan (örnek çözeltisi 60 uL yerleştirinbir boşluk slayt adım 1.2.11). </li><li> dairesel cam kapak ile çözüm örtün. tuzak hava kabarcıkları için dikkatli olun. </li><li> Mikropipet ve laboratuvar mendil kullanarak fazla çözüm çıkarın. </li><li> yapıştırıcı ile örnek mühür. oda sıcaklığında (tipik olarak 6 saat) tutkal kurumasını bekleyin. </li><li> adımları 1.3.1-1.3.4 izleyerek ağırlıkça% 0.1 polistiren lateks (100 nm partikül çapı) süspansiyonu ile doldurulmuş bir slayt hazırlayın. Bu slayt, bir standart olarak kullanılır. </li></ol></li></ol> Dinamik Işık Saçılma Mikroskop ile 2. Partikül Boyutu Ölçümü <ol><li> Aygıtının optimizasyonu <ol><li> ters mikroskop sahnede (adım 1.3.5 itibaren) polistiren lateks süspansiyon slayt yerleştirin. cam kapak tarafı aşağı bakmalıdır. </li><li> Dedektörün önünde bir ışın damperi (çığ fotodiyot ve bir autocorrelator) yerleştirin. </li><li> Bir lazer ışını (solid-state lazer, λ = 488 nm, 30 mW uygulayın, sürekliobjektif lensi numuneye dalga) (10 x). Yansıyan ışığın bir kısmı mikroskop bir fırlatma ayna geçer ve bir CCD kamera ile gözlenen mikroskobu (Şekil 1) yan bağlantı monte edilir. </li><li> düşük-yüksek konumdan objektif lens yüksekliğini kaydırarak örnek süspansiyon de odak noktasını ayarlamak için objektif lens yüksekliğini ayarlayın. Kapak cam ve numune arasındaki arayüz, cam kapak yüzeyinde ve numune ve delik slayt cam arasındaki arayüzde: Bu işlem sırasında, yansıyan görüntü üç kez odaklanmıştır. İkinci ve üçüncü nokta arasındaki odak noktası ayarlayın. </li><li> lazer gücünü değiştirerek dağınık ışık yoğunluğunu hafifletir. </li><li> Dedektörün önündeki ışın damperi kaldırarak dedektör içine dağılmış ışık tanıtmak. Bu birim ışık şiddeti zaman korelasyon ölçer. </li><li> betw bir iğne deliği (φ = 50 mikron) Setkonfokal etkiyi elde etmek için mikroskop ve dedektör een. Dedektörün ışık yoğunluğunu en üst düzeye çıkarmak için iğne deliği konumunu ayarlayın. </li><li> Bir bilgisayar üzerinden korelatör çalışmasını başlatarak 30 saniye süreyle dağınık ışık şiddeti zaman korelasyon fonksiyonu ölçün. 1, t, korelasyon zaman 4 ve - ölçülen korelasyon fonksiyonu genellikle gr (2), (±) olarak ifade edilir <img alt="denklem 1" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq1.jpg"> . Burada, I (t) t zamanında ve (•••) T zaman ortalama olan en dağınık ışık şiddetidir. çürüme süresi yaklaşık 0.1 ms olacaktır. </li><li> Zaman korelasyon fonksiyonunun ilk genlik için geniş bir yelpazede elde etmek için odak noktası ayarlayın (g (2) (t = 0) - 1). NOT: İlk genlik kuvvetle yansıyan ışığın miktarına göre değişir. Odak noktası tow hareket ettirerekKapak cam ve numune, yansıyan ışık miktarında artma arasındaki arayüzü ard. polistiren lateks gibi güçlü bir ışık saçıcı için, başlangıç ​​genliği Ancak, 0 ile 1 arasında değiştirilebilir, yansıtılan ışığın yoğunluğu çok daha yüksek olduğu için daha yaygın polimer çözeltileri için 1 civarındadır başlangıç ​​genliğini ayarlamak zordur saçılan ışığın bu. </li><li> Ters Laplace dönüşümü boyutu dağılımı fonksiyonunu elde etmek için elde edilen zaman korelasyon fonksiyonu (kısıtlı düzenlilestirme programı CONTIN 13,14 kullanarak) uygulayın. Başlangıç ​​büyüklüğü en az 0.2 olarak ayarlanır durumlarda, hidrodinamik yarıçapının dağılım fonksiyonu iki gerçek yan çapı (ayrıntılar için tartışmaya bakınız) 100 nm civarında sivri bir tepe gösterir. </li></ol></li><li> örnek ölçümü <ol><li> 25 ° C'ye sahne sıcaklığını ayarlamak. </li><li> poli-NIPA (PNIPA) SOLUT ile hazırlanan bir slayt yerleştiriniyon mikroskobu sahnede (adım 1.3.4). </li><li> adımları 2.1.4-2.1.8 izleyerek saçılan ışık şiddeti zaman korelasyon fonksiyonu ölçün. İlk genlik 0.2 büyükse, adım 2.1.9 takip ederek zaman korelasyon fonksiyonunun ilk genlik yapmak için en az 0.2 odak noktasını ayarlayın. Küçük bir başlangıç ​​genlik analizi kolaylaştırır. </li><li> 35 ° C'ye sahne sıcaklığını ayarlamak ve çözüm bulanık dönene kadar bekleyin. PNIPA çözümün düşük kritik çözelti sıcaklığı (LCST'nin) C 15 32 ° 'dir. </li><li> Aşağıdaki adımlarla zaman korelasyon fonksiyonu ölçmek 2.1.4-2.1.8. Mümkünse, zaman korelasyon fonksiyonu az 0.2 başlangıç ​​genlik yapmak için odak noktası konumunu ayarlayın. bulanık çözeltiler için, başlangıç ​​genlikleri yansıtılan ışığın bu sabit kalmaktadır dağınık ışık artar yoğunluğu için, artma eğilimi gösterir. </li><li> Ters Laplace transformati uygulaElde edilen zaman korelasyon fonksiyonları üzerinde boyut dağılım fonksiyonlarını elde etmek. gerçek boyut, ilk büyüklüğü 0.2'den daha az olduğu durumlarda yarısı elde edilen değer olduğuna dikkat edin. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Hiroi, T., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+Light+Scattering+Microscope%3A+Accessing+Opaque+Samples+with+High+Spatial+Resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Express%22%5BJournal%5D)">Dynamic Light Scattering Microscope: Accessing Opaque Samples with High Spatial Resolution.</a> Opt. Express. 21, 20260-20267 (2013).</li>
<li>Barth, H. G., Flippen, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Particle+Size+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Particle Size Analysis.</a> Anal. Chem. 67, 257-272 (1995).</li>
<li>Liu, Y., Wang, Z., Zhang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+supramolecular+polymers%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Soc.+Rev%22%5BJournal%5D)">Characterization of supramolecular polymers.</a> Chem. Soc. Rev. 41, 5922-5932 (2012).</li>
<li>Berne, B. J., Pecora, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBerne%2C+BJ+%22Dynamic+Light+Scattering+with+Applications+to+Chemistry%2C+Biology+and+Physics%22">Dynamic Light Scattering with Applications to Chemistry, Biology and Physics</a>. , Dover Publications, Inc. (2000).</li>
<li>Phillies, G. D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+demonstration+of+ruultiple-scattering+suppression+in+quasielastic-light-scattering+spectroscopy+by+homodyne+coincidence+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+A%22%5BJournal%5D)">Experimental demonstration of ruultiple-scattering suppression in quasielastic-light-scattering spectroscopy by homodyne coincidence techniques.</a> Phys. Rev. A. 24, 1939-1943 (1981).</li>
<li>Phillies, G. D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+multiple+scattering+effects+in+quasielastic+light+scattering+by+homodyne+crosscorrelation+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Phys%22%5BJournal%5D)">Suppression of multiple scattering effects in quasielastic light scattering by homodyne crosscorrelation techniques.</a> J. Chem. Phys. 74, 260-262 (1981).</li>
<li>Ishii, K., Yoshida, R., Iwai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-scattering+spectroscopy+for+extremely+dense+colloidal+suspensions+by+use+of+a+low-coherence+interferometer%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Lett%22%5BJournal%5D)">Single-scattering spectroscopy for extremely dense colloidal suspensions by use of a low-coherence interferometer.</a> Opt. Lett. 30, 555-557 (2005).</li>
<li>Xia, H., Ishi, K., Iwai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrodynamic+Radius+Sizing+of+Nanoparticles+in+Dense+Polydisperse+Media+by+Low-Coherence+Dynamic+Light+Scattering%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn.+J.+Appl.+Phys%22%5BJournal%5D)">Hydrodynamic Radius Sizing of Nanoparticles in Dense Polydisperse Media by Low-Coherence Dynamic Light Scattering.</a> Jpn. J. Appl. Phys. 44, 6261-6264 (2005).</li>
<li>Maret, G., Wolf, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+light+scattering+from+disordered+media.+The+effect+of+brownian+motion+of+scatterers%5BTitle%5D)+AND+%22Z.+Phys.+B%22%5BJournal%5D)">Multiple light scattering from disordered media. The effect of brownian motion of scatterers.</a> Z. Phys. B. 65, 409-413 (1987).</li>
<li>Pine, D. J., Weitz, D. A., Chaikin, P. M., Herbolzheimer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diffusing+wave+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Diffusing wave spectroscopy.</a> Phys. Rev. Lett. 60, 1134-1137 (1988).</li>
<li>Cerbino, R., Trappe, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Dynamic+Microscopy%3A+ProbingWave+Vector+Dependent+Dynamics+with+a+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Differential Dynamic Microscopy: ProbingWave Vector Dependent Dynamics with a Microscope.</a> Phys. Rev. Lett. 108, 188102(2012).</li>
<li>Lu, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterizing+Concentrated%2C+Multiply+Scattering%2C+and+Actively+Driven+Fluorescent+Systems+with+Confocal+Differential+Dynamic+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Characterizing Concentrated, Multiply Scattering, and Actively Driven Fluorescent Systems with Confocal Differential Dynamic Microscopy.</a> Phys. Rev. Lett. 108, 218103(2012).</li>
<li>Provencher, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+constrained+regularization+method+for+investing+data+represented+by+linear+algebraic+or+integral+equations%5BTitle%5D)+AND+%22Comp.+Phys.+Comm%22%5BJournal%5D)">A constrained regularization method for investing data represented by linear algebraic or integral equations.</a> Comp. Phys. Comm. 27, 213-227 (1982).</li>
<li>Provencher, S. W., Stepanek, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+analysis+of+dynamic+light+scattering+autocorrelation+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Part.+Part.+Syst.+Charact%22%5BJournal%5D)">Global analysis of dynamic light scattering autocorrelation functions.</a> Part. Part. Syst. Charact. 13, 291(1996).</li>
<li>Takata, S., Norisuye, T., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small-angle+Neutron+Scattering+Study+on+Preparation+Temperature+Dependence+of+Thermosensitive+Gels%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecules%22%5BJournal%5D)">Small-angle Neutron Scattering Study on Preparation Temperature Dependence of Thermosensitive Gels.</a> Macromolecules. 35, 4779-4784 (2002).</li>
<li>Pusey, P. N., van Megen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+Light+Scattering+by+Non-Ergodic+Media%5BTitle%5D)+AND+%22Physica+A%22%5BJournal%5D)">Dynamic Light Scattering by Non-Ergodic Media.</a> Physica A. 157, 705-741 (1989).</li>
<li>Chu, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChu%2C+B+%22Laser+Light+Scattering.+2nd+Ed%22">Laser Light Scattering. 2nd Ed</a>. , Academic Press. (1991).</li>
<li>Shibayama, M., Tanaka, T., Han, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small-Angle+Neutron-Scattering+Study+on+Poly%28N-Isopropyl+Acrylamide%29+Gels+near+Their+Volume-Phase+Transition-Temperature%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Phys%22%5BJournal%5D)">Small-Angle Neutron-Scattering Study on Poly(N-Isopropyl Acrylamide) Gels near Their Volume-Phase Transition-Temperature.</a> J. Chem. Phys. 97, 6829-6841 (1992).</li>
<li>Tanaka, T., Sato, E., Hirokawa, Y., Hirotsu, S., Peetermans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+Kinetics+of+Volume+Phase+Transition+of+Gels%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Critical Kinetics of Volume Phase Transition of Gels.</a> Phys. Rev. Lett. 55, 2455-2458 (1985).</li>
<li>Hiroi, T., Ata, S., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transitions+of+Aggregation+States+for+Concentrated+Carbon+Nanotube+Dispersion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+C%22%5BJournal%5D)">Transitions of Aggregation States for Concentrated Carbon Nanotube Dispersion.</a> J. Phys. Chem. C. 120, 5776-5782 (2016).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Zaman bağıntı fonksiyonunun başlangıç büyüklüğü büyük ölçüde Şekil 2'de gösterildiği gibi, bir odak noktasına bağlıdır: (a). Bu görünüşte çözeltisi (arabiriminde ince bir tabaka hariç) homojen olduğu gerçeğini 8 çelişmektedir. Başlangıç ​​genlik Bu değişim yansıtılan ışığın miktarı bir varyasyon ilişkilendirilir. Kısmi heterodyne teorisi 16 ilk genlik, A, dağınık ışık şiddeti, ben s ve yansıyan ışık yoğunluğu, ben r, aşağıdaki denklemi tatmin tahmin 1 <img alt="denklem 2" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq2.jpg"> Bu denklem ı r büyür olduğunu gösterir, daha küçük bir hale gelir. Bu nedenle, A arayüzü yakın fokal konumunun ayarlanması ile azaltılır. Görünür difüzyon sabiti D A can, tek dağılımlı çözeltiler durumunda bu zaman bağıntı fonksiyonunu oturtulması ile elde edilebilir: <img alt="denklem 3" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq3.jpg"> nerede <img alt="denklem 4" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq4.jpg"> . Burada, n çözücü (su, 1.33) kırılma indeksi olduğu, θ dağınık açısı (180 °), ve λ hafif (514.5 nm) dalga boyudur. Biz geri saçılma geometri uygulanan bu yana, q değeri sabittir. Bununla birlikte, bu nokta farklı dalga boylarında ışık kullanılarak çözülmüştür. Sürekli dalga lazer kaynağının her türlü DLS mikroskop inşa etmek mevcut olduğunu lütfen unutmayınız. Küçük ışınlanmış hacmi sayesinde, tutarlılık faktörü 17 den fazla 0.99 olacağı tahmin ve göz ardı edilebilir olduğunu. Polidispers çözeltiler, D, A, dağılım fonksiyonu Ters Laplace transformasyonu ile elde edilir. Kısmi heterodyne incieory ayrıca D Bir gerçek difüzyon sabiti D aynı değildir öngörür. Bu iki difüzyon sabitleri aşağıdaki denklemi karşılar: <img alt="Denklem 5" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq5.jpg"> -Sındaki geçiş sabiti D Einstein Stokes denklemi kullanarak 4 hidrodinamik çapı R, H dönüştürülür. A = 1, bu ilişki D A = D olduğunda. Bu durumda, veri dönüştürme işlemi ortak dinamik ışık saçılımı için aynıdır. Şekil 2 (b) 'de gösterildiği kırmızı çizgi, bu durumda karşılık gelir. Bunun aksine, bu ilişki sınırında D A = 0.5 D olur → 0 küçük (pratik, daha az 0.2) olduğu zaman ile gösterildiği gibi nedenle, boyut, gerçek boyut olarak iki kat daha büyük olduğu tahmin edilmektedir Şekil 2 (b) 'nin mavi çizgi bir ölçüde küçük olduğunu biliyorsanız, Şekil 2 (c) 'de gösterildiği gibi, yatay eksen, itilebilir. Prensip olarak, biz A'nın herhangi bir değer için D içine D A dönüştürebilirsiniz. Basit yaklaşım D A ~ 0.5 D geçerlidir çünkü Uygulamada, ancak, 0.2 den ilk genlik küçük ayarlamak için daha iyidir. dinamik ışık saçılımı mikroskop tekniği belirgin özellikleri PNIPA çözeltisi kullanılarak gösterildi. Aşağıda ve LCST'nin üstünde PNIPA konformasyon yoğun 15,18 saçılma küçük açı nötron kullanılarak incelenmiştir. Bunun aksine, dinamik ışık saçılımı nedeniyle bulanıklık 19 LCST'nin üzerinde PNIPA analizi için kullanılan edilmemiştir. Şekil 3 'de gösterildiği gibi, bu sorun, dinamik ışık saçılımı mikroskobu ile çözülmüştür, (a) ve (b). Bu agrega büyüklüğü birkaç olup &amp;181. m, küçük açı X-ışını / nötron saçılımı veya geleneksel ışık saçılma teknikleriyle ya ile elde edilemeyen. Bu sistemi kullanarak zamana bağımlı ölçümler sıcaklık değişimi sırasında toplama süreci hakkında bilgi vermek. Dinamik ışık saçılım mikroskobu dezavantajı, Şekil 3 'de gösterilmiştir. LCST'nin altında sonuç için, zaman korelasyon fonksiyonu kuvvetle toz mevcut çok az miktarda (Şekil 3'te siyah çizgiler) tarafından etkilenir. Örneğin, zaman korelasyon fonksiyonu bile 1.0 sn sırasına göre korelasyon süreleri ile tamamen çürümez. Bu cihaz (yaklaşık 1.0 um) ışınlandı hacmi her zaman, dinamik ışık saçılımı cihazının (yaklaşık 100 um) olan bu ışınlanmış daha küçük olmasıdır. saçılan ışığın yoğunluğu zayıftır durumlarda, sinyal, s neden olduğu gibi, gürültü ile örtülü olduğuçözelti içinde toz merkezi miktarları. Boyutu genel sırası anlamlıdır sonucu, bu Şekil 3 (b) 'de gösterilen üç adet tepe noktası niceliksel bir öneme sahip olmayabilir. Bu zayıf saçıcı geleneksel bir dinamik ışık saçma cihazı ile ölçülebilir unutmayın. Biz dinamik ışık saçılımı mikroskobu bize aynı kurulum ile şeffaf ve bulanık hem örnekleri ölçmek için olanak olduğunu göstermiştir. Örneklerde optik yol uzunluğu kısa olduğu için, bu yöntem, C-nanotüp süspansiyonlar 20 kadar güçlü ışık emici örnekleri uygulanabilir. Buna ek olarak, yüksek uzaysal çözünürlüğü, bu teknik, biyolojik hücrelere uygulanabilir. biyoloji uygulanması için bu yöntem aynı zamanda, floresans ve Raman görüntüleme gibi görüntüleme teknikleri ile birleştirilebilir. Böylece, dinamik ışık saçılımı mikroskop araştırma alanları geniş bir yelpazede için güçlü bir araç olduğunu düşünüyoruz.

Partikül boyutu, kolloidal ve polimer çözeltilerinin en temel özelliklerinden biridir. Parçacık boyutunu ölçmek için çok sayıda teknik kullanılır. 1.0 μm veya daha büyük partikül boyutları doğrudan optik mikroskop kullanılarak ölçülebilir. Daha küçük parçacıklar için lazer kırınımı, elektron mikroskobu veya atomik kuvvet mikroskobu gibi alternatif teknikler kullanılır2,3. Dinamik ışık saçılımı, çözelti4'teki parçacık boyutu dağılımlarının ölçümü için yaygın olarak kullanılan bir tekniktir. Bu teknik kullanılarak elde edilen sonuçlar, parçacıkların görüntülerinden değil, saçılan ışık yoğunluğundaki dalgalanmaların karakteristik zamanından elde edilir. Bu dalgalanmalar, bir difüzyon sabiti ile karakterize edilen Brown hareketinden kaynaklanır. Boyut dağılımı, Einstein-Stokes denklemi kullanılarak difüzyon sabitlerinin dağılımından elde edilir. Basitliği nedeniyle, dinamik ışık saçılımı, boyalar ve gıda kolloidleri gibi çözeltilerin rutin değerlendirmesi için yaygın olarak kullanılmaktadır.
Çözelti numunelerinin partikül boyutu ölçümü için kullanılan tekniklerin çoğu için ön işlem gereklidir. Elektron mikroskobu ve atomik kuvvet mikroskobu durumunda, numune vakum koşulları altında analiz edilmelidir. Bu nedenle, örnekleri doğal formlarında gözlemlemek zordur. Ayrıca, lazer kırınımı ve dinamik ışık saçılımı için, yalnızca çoklu saçılma ve ışık absorpsiyonu içermeyen seyreltilmiş numuneler ölçülebilir. Bu zorluğun üstesinden gelmek için, seyreltilmemiş, konsantre çözeltilerden dinamik ışık saçılımının ölçümü için çapraz korelasyon spektroskopisi5,6, düşük tutarlılıklı dinamik ışık saçılımı7,8, difüzyon dalgası spektroskopisi9,10 ve diferansiyel dinamik mikroskopi11,12 gibi birkaç yeni teknik önerilmiştir.
Dinamik ışık saçılma mikroskobu1 adı verilen yeni bir cihaz geliştirdik. Bu cihaz, bir iğne deliği kullanılarak çoklu saçılmanın ortadan kaldırıldığı konfokal bir optik sistem vasıtasıyla bulanık numuneleri seyreltmeden ölçmemizi sağlar. Bununla birlikte, ölçüm prosedürü ve veri analizi, piyasada bulunan cihazlardan biraz daha karmaşıktır. Bu video, örnek olarak sıcaklığa duyarlı polimer olan poli(N-izopropilaminakrilamid) analizini kullanarak ölçüm prosedürünü ve veri analizini ayrıntılı olarak açıklamaktadır.

<table><tbody><tr><td>N-izopropilakrilamid, %98Tokyo</td> <td>Chemical Industry Co., Ltd.</td><td>I0401</td><td></td></tr><tr><td>toluen, %99</td> <td>Wako Saf Kimya Endüstrileri, Ltd.</td><td>201-01876</td><td></td></tr><tr><td>petrol eteri, damıtma sıcaklığı 30 ~ 60 derece; C</td><td>Wako Saf Kimya Endüstrileri, Ltd.</td><td>169-22565</td><td></td></tr><tr><td>N, N, N', N'-tetrametiletilendiamin,% 99</td> <td>Sigma</td><td>T9281</td><td></td></tr><tr><td>amonyum persülfat,% 98</td> <td>Sigma</td><td>248614</td><td></td></tr><tr><td>polistiren lateks süspansiyon, 1 ağırlıkça%</td> <td>Duke Scientific Corporation</td><td>3500A</td><td></td></tr><tr><td>argon</td><td>Koike Sanso Kogyo Co., Ltd.</td><td></td><td>saflık > 99.999 hacim%</td></tr> <tr><td>boşluk slaytı</td><td>Matsunami Cam Sanayi San.</td><td>83-0336</td><td></td></tr><tr><td>ters mikroskop</td><td>Nikon Instech Co., Ltd.</td><td>ECLIPSE Ti-U</td><td></td></tr><tr><td>Termo Plaka</td><td>Tokai Hit CO.,Ltd</td><td>TP-108R-C</td><td></td></tr><tr><td>Katı hal lazeri</td><td>Tutarlı</td><td>OBIS 488LX</td><td></td></tr><tr><td>çığ fotodiyot</td><td>ALV-GmbH</td><td>ALV-Yüksek QE Çığ Foto Diyot</td><td></td></tr><tr><td>korelatörü</td><td>ALV-GmbH</td><td>ALV-5000/EPP</td><td></td></tr></tbody></table>

dinamik ışık saçılımı mikroskopi bulanık Çözümleri tane büyüklüğü dağılımının Ölçümü

Measurement of Particle Size Distribution in Turbid Solutions by Dynamic Light Scattering Microscopy

Dinamik ışık saçılımı kullanarak konsantre polimer çözeltilerinin polidispersitesini ölçmek için bir protokol açıklanmıştır. Dinamik ışık saçılımı, polimer çözeltilerinin veya kolloidal parçacıkların boyut dağılımını ölçmek için kullanılan bir tekniktir. Bu teknik, polimer çözeltilerinin değerlendirilmesi için yaygın olarak kullanılmasına rağmen, çoklu saçılma etkisi veya güçlü ışık emilimi nedeniyle konsantre çözeltilerde partikül boyutunu ölçmek zordur. Bu nedenle, konsantre çözeltiler ölçümden önce seyreltilmelidir. Konfokal optik bileşenin dinamik bir ışık saçılma mikroskobu1'de uygulanması bu engelin üstesinden gelmeye yardımcı olur. Böyle bir mikroskobik sistem kullanılarak, hem şeffaf hem de bulanık sistemler, seyreltme olmadan aynı deney düzeneği altında analiz edilebilir. Temsili bir örnek olarak, sıcaklığa duyarlı bir polimer çözeltisinin boyut dağılımı ölçümü gerçekleştirildi. Sulu bir çözeltideki polimer zincirlerinin boyutları, düşük kritik çözelti sıcaklığının (LCST) altındaki bir sıcaklıkta birkaç on nanometre idi. Buna karşılık, boyutlar LCST'nin üzerindeyken 1.0 μm'nin üzerine çıktı. Bu sonuç, çözeltinin LCST'nin üzerinde bulanıklaştığı gözlemiyle tutarlıdır.

Bir polistiren lateks süspansiyon için saçılan ışık yoğunluğunun zaman korelasyon fonksiyonları (partikül çapı: 50 nm), Şekil 2 'de gösterildiği gibi, farklı odak noktalarında ölçülmüştür (a) dır. Bu korelasyon fonksiyonları Ters Laplace dönüşümü ile hidrodinamik yarıçapı dağılımı fonksiyonları dönüştürülmüştür (bakınız Şekil 2 (b) ve (c)). Aynı prosedür kullanılarak, PNIPA çözeltisi hidrodinamik yarıçapının zaman korelasyon fonksiyonları ve dağılım fonksiyonları sırasıyla 25 ° C'de elde edildi ve 35 ° C idi. Şekil 3 (a) ve (b) dağınık ışık yoğunluğunun zaman korelasyon fonksiyonlarını yukarıda PNIPA aşağıdaki çözeltisi (25 ° C) ve (35 ° C) LCST'nin karşılık gelen boyutu dağılımı fonksiyonları gösterir. boyut dağılım fonksiyonları takip Ters Laplace dönüşümü ile elde edilmiştirKısmi Heterodyne düzeltilmesi. LCST'nin altında ortalama hidrodinamik çapı polimer çözeltileri için tipik olan nanometre onlarca vardır. Bunun aksine, yukarıda belirtilen LCST'nin hidrodinamik çapı yaklaşık 1.0 mm. Bu sonuç, çözüm LCST'nin üzerinde bulanık olduğu gerçeği ile tutarlıdır. Şekil 3'te kırmızı ve mavi çizgiler hemen sonra elde edilen ve çözümden sonra 20 dk sırasıyla bulanık hale PNIPA çözümleri büyüklük dağılımını temsil etmektedir. Şekil 3 (b) açık bir şekilde toplanmasının büyüme gösterir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/54885/54885fig1.jpg"> Şekil dinamik ışık saçılımı mikroskobunun 1. Şemalar. İğne Deliği (PH), ışın ayırıcı (BS), polarize (Pol), ve çığ fotodiyot (AKB). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54885/54885fig1large.jpg" target="_blank">Görmek için buraya tıklayınız</a>Bu rakamın daha büyük bir versiyonu. <img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/54885/54885fig2.jpg"> Polistiren lateks süspansiyon için 2. Temsilcisi sonuçları Şekil. (A) polistiren lateks süspansiyon için dağınık ışık yoğunluğu Zaman korelasyon fonksiyonları. Nominal çapı 50 nm, yoğunluğu 0.1 ila% 'dir. Iki gerçekleştirmede farklı saçılma noktaları elde edilmiştir. (B) ters Laplace dönüşümlerinin elde edilen polistiren lateks süspansiyon (c) 'e uygun boyut dağılımı işlevleri (a) dır. kırmızı çizgi olan ilk genliği yaklaşık 1.0 kez korelasyon fonksiyonuna karşılık gelir ve mavi çizgi, yaklaşık 0.2 olan bir ilk genlikli karşılık gelir. Yatay eksen kısmi heterodin (PHD) etkisini göz önünde bulundurarak, (b) olmadan ve (c) hesaplandı BIR &lt;&lt; ; 1. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54885/54885fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/54885/54885fig3.jpg"> Şekil, bir PNIPA çözeltisi 3. Örnek sonuçlanır. (A) PNIPA çözümü için dağınık ışık yoğunluğu Zaman korelasyon fonksiyonları. (B) (a) ters Laplace dönüşümlerinin elde PNIPA çözümü için uygun büyüklükte dağılım fonksiyonları. Yatay eksen her veri seti için kısmi heterodyning etkisi dikkate alınarak hesaplandı. siyah çizgi 25 ° C'de elde edilen verileri temsil eder. Kırmızı çizgi çözüm bulanık döndü hemen sonra elde edilen verileri (35 ° C) temsil etmektedir. mavi çizgi kırmızı çizgi bir 20 dk ölçümden sonra elde edilen verileri temsil eder./54885/54885fig3large.jpg "Target =" _ blank "&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Dinamik ışık saçılım mikroskobu kullanılarak konsantre çözeltiler içindeki parçacık büyüklüğü dağılımının doğrudan ölçümü için bir protokol verilmektedir.

Dinamik ışık saçılımı Mikroskopi Bulanık Çözümleri Tane Büyüklüğü Dağılımının Ölçümü

A protocol for measuring polydispersity of concentrated polymer solutions using dynamic light scattering is described. Dynamic light scattering is a ...

Bu deneyin genel amacı, dinamik ışık saçılımı ve konfokal mikroskopinin, bulanık çözeltilerdeki partikül boyutu dağılımını seyreltme olmadan ölçmek için kullanılabileceğini göstermektir. Bu, dinamik ışık saçılma mikroskobunun kurulumudur. 488 nanometrede 30 miliwatt sürekli dalga işlemi yapabilen bir katı hal lazerine sahiptir.Ayrıca ölçümler için bir bilgisayara bağlı bir otokorelatör olan bir çığ fotodiyotu da vardır. Kurulumdaki ters çevrilmiş mikroskop, sıcaklık regülatörlü bir aşamaya sahiptir. Kutu, deney için gerekli olan diğer optik elemanları içerir.Bu şema, kurulum için düzenin daha eksiksiz bir görünümünü sağlar. Işın profili şekillendirildikten sonra, ışın mikroskoba sokulur. Işık saçılımı, bir geri saçılma geometrisi ile elde edilir ve bir dedektöre yönlendirilir.Bir fırlatma aynası, yansıyan ışığın bir kısmı bir CCD kamera aracılığıyla gözlemlenmesini sağlar. Deney için numuneler bir gün önceden hazırlanmalıdır. Numune hazırlama, 20 mililitre gazı alınmış, deiyonize edilmiş su ve ayrıca arıtılmış NIPA gerektirir.Ek olarak, az miktarda TMEDA ve amonyum persülfat gerektirir. Hazırlama adımlarında ayrıca bir karıştırıcı üzerinde bir buzlu su banyosu, iki reaksiyon kabı, alüminyum folyo ve bir argon gazı akış kaynağı kullanılır. 9,5 mililitre gazı alınmış ve deiyonize edilmiş suyu bir reaksiyon kabına ölçerek başlayın.NIPA'yı suya ekleyin. Ardından, reaksiyon kabını karıştırıcı üzerindeki buzlu su banyosuna taşıyın ve karıştırma çubuğunu ekleyin. Reaksiyonu ışıktan korumak için banyoyu ve kabı kaplamak için alüminyum folyo kullanın.Çözeltiye ılımlı bir argon akışı sağlamak için argon kaynağına bağlı bir pipet ucu kullanın. Çözeltiyi 10 dakika boyunca hafifçe karıştırmak için karıştırıcıyı açın. Ardından, 11,9 mikrolitre TMEDA'yı ölçmek için bir mikropipet kullanın.Kısaca, TMEDA'yı çözeltiye eklemek için folyoyu geri çekin ve ardından argon gazı altında bir dakika daha karıştırmaya devam edin. Numune karıştırılırken, ikinci reaksiyon kabı ile çalışın. Kabın içine 4 miligram amonyum persülfat yerleştirin.Ardından, 0,5 mililitre gazı alınmış ve deiyonize su ekleyin. Amonyum persülfat çözündüğünde, çözeltiyi numune çözeltisine ekleyin ve argon akışı altında 30 saniye karıştırmaya devam edin. 30 saniye sonra, reaksiyon kabını buz banyosundan ve karıştırıcıdan çıkarın.Depolamaya hazırlanırken, kabı alüminyum folyo ile örtün, çözeltiyi kullanmadan önce gece boyunca dört santigrat derecede saklamak için bir buzdolabına taşıyın. Numune çözeltisini aldıktan sonra, mikroskopla kullanım için hazırlayın. Bir numune ve standart bir referans slaytı yapmak için iki boşluklu slayt, iki dairesel cam kapak ve uygun yapıştırıcı hazırlayın.Numune slaytı için, numune çözeltisinin 60 mikrolitresini ölçün. Çözeltiyi boşluk slaytlarından birine yerleştirin. Solüsyonu dairesel bir kapakla örtün, hava kabarcıklarını sıkıştırmamaya dikkat edin.Fazla çözeltiyi bir mikropipet ve laboratuvar mendilleriyle çıkarın. Ardından, çözelti slaytını kapatmak için kapağın çevresine yapıştırıcı sürün. Ardından, standart bir referans oluşturun.Bunun için ağırlıkça yüzde 0.1 polistiren lateks çözeltisi kullanın. İkinci boşluk slaytına 60 mikrolitre polistiren lateks çözeltisi ekleyin, üzerini bir cam kapakla örtün ve kabarcıkların sıkışmadığından emin olun. Fazla çözeltiyi çıkardıktan sonra, slayttaki çözeltiyi kapatmak için yapıştırıcı sürün.Her iki slayt için de tutkalın oda sıcaklığında kurumasını bekleyin. Bu noktada, referans slaytını 10 kat objektif lens ile donatılmış ters çevrilmiş mikroskoba alın ve mikroskop tablasına yerleştirin. Kapak camı aşağı bakmalıdır.Dedektörün önüne bir ışın sönümleyici yerleştirerek devam edin. Ardından, lazer ışınını objektif mercek aracılığıyla numuneye uygulayın. Objektif lens ile çalışmaya devam edin.Odak noktasını ayarlamak için lensin yüksekliğini ayarlayın. CCD ile bakıldığında, objektif en düşük konumundan yükseldiğinde, yansıyan görüntü ilk olarak kapak camının yüzeyine odaklanacaktır. Daha sonra kapak camı ile numune arasındaki arayüze odaklanacaktır.Numune ile kayar cam arasındaki arayüze üçüncü kez odaklanacaktır. Kapak örnek arayüzü ile örnek slayt arayüzü arasındaki odak noktasını ayarlayın. Lazer gücünü azaltarak dağınık ışığı azaltın.Ardından, dedektöre dağınık ışık sokmak için ışın bloğunu çıkarın. Hazır olduğunuzda, kontrol bilgisayarı aracılığıyla 30 saniyelik bir zaman korelasyon ölçümü başlatın. Ardından, ölçümü tekrarlamadan önce mikroskobun odak noktasını ayarlayın.Zaman korelasyonu fonksiyonunun ilk genliği için geniş bir aralık elde etmek için birkaç odak noktası kullanın. Yeterli veri toplandığında, dedektörün önüne bir ışın damperi yerleştirin. Mikroskopta standart referans slaytını çıkarın.Numune ölçüm işlemini boş bir mikroskop aşaması ile başlatın ve sıcaklığı 25 santigrat dereceye ayarlayın. Ardından, hazırlanan numune slaytını kapak tarafı aşağı bakacak şekilde sahneye yerleştirin. Kapak örneği arayüzünü tanımlamak için objektif merceğin yüksekliğini ayarlayın.Örnek slayt arayüzünü bulmak için daha fazla ayarlayın. Ölçüm için odak noktasını bu iki konum arasına ayarlayın. Işın damperini dedektörün önünden çıkarın.Bilgisayarda, 30 saniyelik bir zaman korelasyon ölçümü yapın. Ardından, sahne sıcaklığını 35 santigrat dereceye ayarlayın. Bu ılımanlık, daha düşük kritik çözelti sıcaklığının üzerinde olduğundan, çözelti berraktan bulanıka geçecektir.Zaman korelasyonu fonksiyonunun başka bir ölçümünü gerçekleştirin. İşte polistiren lateks süspansiyon standardı için iki farklı odak noktasındaki zaman korelasyon fonksiyonları. Kırmızı eğri, başlangıç genliği yaklaşık olarak bir olan bir zaman korelasyon fonksiyonuna karşılık gelir.Mavi eğri, yaklaşık 0.2'lik bir başlangıç genliğine karşılık gelir. Bu, başlangıç genliği 0.2 olan verilerin ters laplace dönüşümü ile elde edilen boyut dağılımıdır. Hesaplama, kısmi heterodinleşmenin etkisini dikkate alır.Nominal parçacık yarıçapı 50 nanometredir. Bu zaman korelasyon fonksiyonları, düşük kritik çözelti sıcaklığının altındaki ve üstündeki poli (NIPA) içindir. Siyah eğri, 25 santigrat derecedeki bir ölçüme karşılık gelir.Kırmızı eğri, 35 santigrat derecede bir ölçüme karşılık gelir ve çözelti bulanıklaştıktan hemen sonra. Mavi eğri, çözelti bulanıklaştıktan 20 dakika sonra, 35 santigrat derecede bir ölçüm içindir. Ölçüm koşullarının her biri ile ilişkili boyut dağılımları aşağıda verilmiştir.Düşük kritik çözelti sıcaklığının altında, ortalama hidrodinamik yarıçap nanometrenin onda biridir. Kritik sıcaklığın üzerinde, boyut yaklaşık 1 mikrometredir. Ilıman ve zamanla eğrilerdeki kayma, kümelenmenin büyümesini önerir.

measurement-particle-size-distribution-turbid-solutions-dynamic-light

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Bu protokol, homojen bir yüksek derecede mikronaltı boyutlarda lipid kesecikler hazırlanması için bir çekme yöntemi açıklar. Bu yöntem, lipozom preparatı için kontrollü bir nitrojen akışı hızları ile bir basınç kontrol sistemi kullanır. Lipid...

Nano ölçekli Lipid Vesiküller Hazırlanması için Sabit Basınç kontrollü Ekstrüzyon Yöntemi

Source: Moore, M. D., et al. Alternative In Vitro Methods for the Determination of Viral Capsid Structural Integrity. J. Vis. Exp. (2017)The video demonstrates a protocol for monitoring the heat-induced aggregation of virus-like particles using dynamic light scattering (DLS). It begins with preparing a monodisperse suspension of purified particles. The sample is then loaded into a preheated DLS instrument. As the capsid proteins denature with heat, exposed hydrophobic regions cause particle...

Tracking Aggregation of Virus-Like Particles Using Dynamic Light Scattering

Bu makalede eksozomların tam kandan izolasyonu ve yarı otomatik bir alet kullanılarak nanopartikül izleme ile daha fazla analiz için bir yöntem sunulmaktadır. Sunulan teknoloji, sıvı süspansiyondaki partikülleri görselleştirmek ve analiz etmek için son derece hassas bir yöntem sağlar.

Exosome Kantifikasyon ve Boyut Ölçüm Yenilikçi Yöntem

Sigara karıştırıldı çökelti polimerizasyonu uyaranlara duyarlı poli (N -isopropylacrylamide) dar bir boyut dağılımı mikrojelleri sentezi için hızlı, kopyalanabilir bir prototip bir yaklaşım sağlar. Bu protokol sentezinde, ışık saçılması karakterizasyonu ve geniş alan mikroskopisi kurulumunda bu mikrojellerin tek parçacık floresan izleme gösterilmiştir.

Kontrollü Sentezi ve yüksek Düzgün Poli Floresan Takibi (<em&gt; K</em&gt; -isopropylacrylamide) Mikrojeller

Burada, Nanomalzemeler dağılımı için step-wise bir protokol sulu ortamda en uygun sonication koşulları, şiddeti ve süresi için geliştirilmiş kararlılık ve nanoparçacık tekdüzelik tanımlamak için gerçek zamanlı karakterizasyonu mevcut insanlara örnek bütünlüğünü etkileyen olmadan.

Nanomalzemeler sulu ortamda dağılımı: doğru iletişim kuralı en iyi duruma getirme

Bu iletişim kuralı manyetik parçacıklar sentezi ve değerlendirilmesi yolu ile dinamik ve elektroforetik ışık saçılma DNA'ya bağlanıcı özellikleri açıklar. Bu yöntem partikül büyüklüğü, onların polydispersity değişiklik izleme üzerinde odaklanır ve zeta potansiyeli oynamak parçacık yüzey Binbaşı bağlama DNA gibi malzemelerin rolü.

DNA Manyetik Parçacık dinamik ve elektroforetik ışık saçılma göre analiz bağlama

Burada, gerilim ve sıcaklık değişikliklerinin polimer agregasyonu üzerindeki etkisini araştırmak amacıyla dinamik ışık saçılma parçacık boyutu ölçümleri sırasında çözeltiye gerilim uygulamak için bir protokol sunulmuştur.

Dinamik Işık Saçılma Parçacık Boyut Analizinde Gerilim Uygulaması

Polielektrolit kompleks misellerin, polielektrolitlerin ve hidrofilik yüklü blok kopolimerlerin oluşturduğu çekirdek kabuklu nano partiküllerin tasarımı, montajı ve karakterizasyonu için protokoller ve temsili veriler salıyoruz.

Polielektrolit Kompleksi Misellerinin Montajı ve Karakterizasyonu

Fare perigonadal yağ dokusundan ve insan plazmasından izole edilmiş hücre dışı veznelerin boyut dağılımını ve toplam partikül konsantrasyonu tahmin etmek için yeni bir nanopartikül izleme analiz aracının nasıl kullanılacağını gösteriyoruz.

Hücre Dışı Veziklinlerin Nicelleştirilmesi ve Boyut Tayini için Nanopartikül Takip Analizi

Dinamik ışık saçılması (DLS), intravenöz olarak uygulanan demir-karbonhidrat komplekslerinin partikül boyutunu ve dağılımını değerlendirmek için uygun bir test olarak ortaya çıkmıştır. Bununla birlikte, protokoller standardizasyondan yoksundur ve analiz edilen her demir-karbonhidrat kompleksi için değiştirilmesi gerekir. Bu protokol, demir sakarozun analizi için uygulamayı ve özel hususları açıklamaktadır.

Demir-karbonhidrat komplekslerinin partikül boyutunun belirlenmesi için dinamik ışık saçılımı analizi

Diferansiyel dinamik mikroskopi (DDM), dinamik ışık saçılması ve mikroskopi özelliklerini birleştirir. Burada, vimentin ağlarındaki parçacıkların subdifüzyon ve kafesli dinamiklerini ve aktif miyozin güdümlü aktin-mikrotübül kompozitlerinin balistik hareketini ölçerek yeniden yapılandırılmış sitoiskelet ağlarını karakterize etmek için DDM'yi kullanma süreci sunulmaktadır.

Diferansiyel Dinamik Mikroskopi Kullanarak Sitoiskelet Dinamiğinin Ölçülmesi

Öğrenin, bulanık çözeltilerde dinamik ışık saçılımı mikroskopisi ile tane boyutu dağılımını sulandırmadan ölçme yöntemini. Bu teknik, yoğun örneklerde partikül analizi için güçlü bir araç sunar.

Dinamik ışık saçılımı Mikroskopi Bulanık Çözümleri Tane Büyüklüğü Dağılımının Ölçümü

Daha fazla video keşfet