Name: Akupunktur ile Sıçan ve Farelerde Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) Manipülasyon ve Uyku (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-12-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 6 s
Description: Öğrenin, sıçan ve fare modellerinde akupunktur ile epilepsi ve uyku üzerindeki etkileri değerlendirmek için ECoG ve EMG kayıt yöntemlerini kullanarak. Bu teknik, nörobilim araştırmalarında farmakolojik olmayan tedavi yaklaşımlarını keşfetmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Bilim ve Teknoloji Bakanlığı (MOST) hibeleri MOST104-2410-H-002-053 ve NSC99-2320-B-002-026-MY3 tarafından desteklenmiştir. Bu el yazması, profesyonel belgeleri gözden geçirme deneyimine sahip olan Bay Brian Chang tarafından düzenlenmiş ve düzeltilmiştir.

Tüm deneysel protokoller Ulusal Tayvan Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır. Implantasyon EcoG Elektrotlar, EMG Elektrotlar, Beyin Termistör ve Enjeksiyon Kılavuzu Kanül 1. Stereotaksik Cerrahi <ol><li> Fareler için (250-350 g, 6 ila 8 haftalık Sprague-Dawley sıçanları) <ol><li> 50 mg / kg zoletil IP enjeksiyonu ile sıçanlarda anestezisi. arka pençe sıkıştırdıktan sonra yanıt eksikliği gözlemleyerek anestezi uygun derinliğini kontrol edin. , Göz merhemi sürün kürk tıraş ve povidon-iyot çözeltisi ve% 75 etanol ile cilt sterilize edin. enfeksiyonu önlemek için bir antibiyotik (penisilin G) enjekte edilir. </li><li> Ameliyat için neşter, makas, hemostat, tül, ve koter makinesi hazırlayın. bir otoklav ve% 75 etanol ile dağlama cerrahi dişli ve Gauzes sterilize edin. </li><li> kulak kanalı içine kulak çubuğu yerleştirin ve stereotaksiyi sıçan monte edin. </li><li> kullanmaBir neşter, kaudal hareket, iki kulak arasında bir hat boyunca kafatası yaklaşık 2 cm orta hat kesi yapmak. kafatası maruz ve bir neşter kullanılarak kafatası üzerinde doku kaldırmak için hemostatlarla cilt flepleri Clip. </li><li> Matkap sekiz delik (F1, F2, P1, P2, A1, A2, R1 ve R2), bir döner aleti olan kafatası çapı her biri yaklaşık 0.7 mm. Sekiz EcoG frontal, parietal ve oksipital loblarda elektrotlar ve sol ve sağ hemisfer hem de beyincik vidalayın. Bu elektrotlar fokal epilepsi tespiti için kullanılır. <ol><li> orta hattan -2.0 mm ön bregma ve 3,0 mm: frontal (F1 ve F2): 2,0 mm ön bregma ve 2,5 mm orta hattan, paryetal (P1 ve P2) Aşağıdaki kayıt elektrotları için koordinatları kullanın ve oksipital (O1 ve O2): -5.5 mm ön bregma ve orta hattan 3,0 mm. </li><li> bregma ve midli gelen 4,0 mm beyincik (-11,0 mm anterior üzerinde iki referans elektrotlar (R1 ve R2) koyunne). </li></ol></li><li> sıçanlarda, matkap üç delik ve sağ frontal (F2) ve aynı koordinatlar korteks parietal lob (P2) üzerinden iki vida EEG elektrotları yerleştirin ayrı bir grup halinde aşama 1.1.5.1 açıklandığı gibi. hayvan zemin ve sinyal eserler azaltmak için hizmet sol beyincik (R1), üzerinde üçüncü bir EEG elektrot yerleştirin. Bu elektrotlar genelleştirilmiş epilepsi teyit ve uyanıklık aşamaları analiz etmek için kullanılır. </li><li> boyun deri ve kas ayırın ve boyun kasına iki EMG elektrotları yerleştirin. </li><li> Kafatasının başka delik delin ve sol CEA içine mikroenjeksiyon kılavuz kanül (AP, bregma 2.8 mm; ML, 4,2 mm; DV, bregma 7.8 mm göreceli) yerleştirmek sıçanlarda. Koordinatlar Paxinos ve Watson sıçan atlas 10 den uyarlanmıştır. </li><li> kafatası (1.6 mm bir çapı olan) daha büyük bir delik delin daha sonra çimentolu olan parietal korteks yüzeyi üzerinde ayarlanmış bir 30 kV&#39;luk termistörü yerleştirin Monisıçanlarda kortikal sıcaklık tor. </li><li> o ortaya çıktığında kanamayı durdurmak için gazlı bez ve koter kullanın. </li><li> Rota yalıtımlı bir kaide için EcoG elektrotlar ve EMG elektrotları gelen yol açar ve urgan için termistörü. kaidenin Çimento ve diş akrilik ile kafatasına kanül kılavuz. </li><li> enfeksiyonu önlemek için polysporin (basitrasin çinko / polimiksin B sülfat) ile topikal kesi davranın. Ameliyat sonrası bir hafta boyunca su içinde hayvanların ibuprofen ve penisilin G hem de verin. </li></ol></li><li> (- 30 g, 6 ila 8 haftalık C57BL / c fareleri 20) farelere <ol><li> 50 mg / kg zoletil IP enjeksiyonu ile fareler anestezi ve arka pençenin sıkıştırdıktan sonra cevap vermemesine gözlemleyerek anestezi doğru derinlik teyit etmektedir. göz merhemi sürün. kürk tıraş sonra, povidon-iyot solüsyonu ve% 75 etanol ile cilt sterilize edin. enfeksiyonu önlemek için bir antibiyotik (penisilin G) enjekte edilir. </li><li> kulak kanalı içine kulak çubuğu yerleştirin vestereotaksiyi fare monte edin. </li><li> Bir neşter kullanılarak, kaudal hareket, iki kulak arasında bir hat boyunca kafatası yaklaşık 1.5 cm orta hat kesi yapmak. kafatası maruz ve bir neşter ile kafatası üzerinde doku kaldırmak için hemostatlarla cilt flepleri Clip. </li><li> cerrahi makas ile kafatası üzerinde iki delik karıştırmak ve sağ frontal lob iki telli EcoG elektrotlar yerleştirmek (F2: 2,0 mm bregma ve orta hatta 1,5 kadar) ve sol parietal lob (P1: -3.0 mm bregma ve -2.5 orta hatta mm). </li><li> boyun deri ve kas ayırın ve boyun kasına iki EMG elektrotları yerleştirin. </li><li> diş akrilik ile kafatasına daha sonra çimento kadın terminallere ve 2.54 mm konnektörüne tel EcoG elektrotlar ve EMG elektrotları yalıtılmış kablolarını bağlayın ve. </li><li> enfeksiyonu önlemek için polysporin (basitrasin çinko / polimiksin B sülfat) ile topikal kesi davranın. Bir çiş suda hayvanlarda ibuprofen ve penisilin gAmeliyat sonrası k. </li></ol></li><li> Tüm hayvanlar deney başlamadan önce, yedi gün süre ile iyileşmeye izin verin. </li><li> Ev ayrı sıçanlar veya fareler, tek tek kayıt kafeslerde, izole edilmiş oda sıcaklığı 23 ± 1 ° C ve hafif tutulur burada: koyu (L: D) ritim kontrol edilen 12: 12-H döngüsünün (40 B x 4 tüp aydınlatma). Gıda ve su ad libitum sağlamak. </li><li> kayıtları başlatmak için ameliyattan bir hafta sonra amplifikatörler bir sabrının aracılığıyla EcoG, EMG ve termistörü. </li></ol> Odak TLE Epilepsi, SE, ve Spontan Tekrarlayan Epilepsi 2. kurulması <ol><li> fareler için <ol><li> mikroenjeksiyon pompa kullanılarak enjeksiyon kılavuz kanül aracılığı ile (2.4 mg / ml), sol CEA içine pilokarpin 0.5 mcL yönetme. Enjeksiyon oranı, fokal TLE uyarılması için 0.2 uL / ​​dakika ayarlanması gerekir. </li><li> IP 300 mg enjekte / pilokarpin kg genel epi indüklemeTekrarlayan SE epilepsisi. </li></ol></li><li> fareler için <ol><li> IP her gün belirli bir ZT noktada PTZ (0.035 mg / g fare vücut ağırlığı) yönetmek. Beş ardışık enjeksiyonlar kendiliğinden ve tekrarlı jeneralize epilepsi gelişimine neden olur. </li></ol></li><li> Her iki sıçan ve fareler için <ol><li> 5.000 tarafından EcoG sinyalleri yükseltmek ve 0.1 ile 40 Hz arasında analog bant geçiş filtresi. </li><li> 128 Hz örnekleme oranıyla dijital sinyallere analog ECoGs sinyalleri dönüştürmek için bir A / D dönüştürme tahtası kullanın. </li><li> görsel puanlama için bir yazılım kullanmak ve başlangıcını ve epilepsi süresini analiz eder. süresini temsil etmek üzere zaman ölçeğini ölçün. </li><li> 2 mV daha büyük genlikleri ile epileptik başak görünüşü ve 30&#39;dan fazla s 13 süreleri ile EcoG epilepsi tanımlayın. </li></ol></li></ol> Vigilance Devletler 3. Sınıflandırılması <ol><li> fareler için<ol><li> kayıt 12 s bölüm içinde ECoGs, EMG, beyin sıcaklıkları, ve hareket elde edilen parametreler kullanılarak uyanıklık durumlarını belirlemek. Kayda başlamak için ameliyattan bir hafta sonra amplifikatörler bir sabrının aracılığıyla EcoG, EMG ve termistörü. 3.1.7 - adımlara 3.1.5 göre ısmarlama yazılım ile durumlarını skor. </li><li> , Kızılötesi hareket detektörü kullanarak lokomotor etkinliklerini ölçmek sinyaller her 1 sn entegre ve sinyalleri saklayın. </li><li> kortikal sıcaklığını ölçmek ve sinyalleri saklayın. </li><li> Bizim daha önce tanımlanmış kriterlere 14 göre uyanıklık durumları sınıflandırır. </li><li> aşağıdaki özelliklere kullanarak uyanıklığı skor: (- 4.0Hz 0.5) ve düşük bir teta gücü yüksek frekanslı spektrumları küçük amplitüdlü ECoGs yüksek delta gücü (6,0-9,0 Hz); baskın lokomotor aktivite; yüksek EMG aktivitesi; ve yavaş yavaş kortikal sıcaklığının artırılması. </li><li> followin kullanarak NREM uyku skorg özellikleri: Büyük genlikli delta dalgası hakim ECoGs, EMG aktivitesi azalmış kortikal sıcaklık ve hiçbir lokomotor aktivite geriledi. </li><li> aşağıdaki özelliklere kullanarak REM uykusu Puan: vücut seyirmesi ile baskın teta frekansında, aniden artan kortikal sıcaklık, minimum EMG aktivitesi ve düşük lokomotor aktivite ile ECoGs genliğini azalmıştır. </li></ol></li><li> fareler için <ol><li> termistör kaydedilen hiçbir kortikal sıcaklık yoktur dışında, sıçanlarda yapılan farelerdeki teyakkuz devletlerin sınıflandırılmasını tekrarlayın. </li></ol></li></ol> Sıçanlar Manuel Akupunktur ve EA 4. Performans <ol><li> Sıçan EA protokolü için anestezi. </li><li> anatomi ile acupoint bulun ve akupunktur noktası düşük cilt empedansını onaylayın. Düşük cilt empedans tespit edildiğinde ışık yanıp sönüyor. Not: Fengchi acupoints posterior median hattan 3 mm uzakta bulunan olmakBoyunda, iki kulağı arasını. </li><li> 2 mm&#39;lik bir derinlikte akupunktur olarak paslanmaz çelik iğneler yerleştirin. </li><li> takılı iğneler 10 kez her 5 dk seğirme. </li><li> fonksiyonel elektrik stimülatörü kullanılarak iğne ile akupunktur 1 mA bir yoğunluğu ile bifazik bakliyat (150 us süresi her) bir tren sunar. </li><li> sahte akupunktur gerçekleştirmek ya da bir kontrol olarak EA sham. </li></ol>

<ol><li>Regesta, G., Tanganelli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+aspects+and+biological+bases+of+drug-resistant+epilepsies%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+Res%22%5BJournal%5D)">Clinical aspects and biological bases of drug-resistant epilepsies.</a> Epilepsy Res. 34 (2-3), 109-122 (1999).</li>
<li>Malow, B. A., Bowes, R. J., Lin, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+sleepiness+in+epilepsy+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Predictors of sleepiness in epilepsy patients.</a> Sleep. 20 (12), 1105-1110 (1997).</li>
<li>Stores, G., Wiggs, L., Campling, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+disorders+and+their+relationship+to+psychological+disturbances+in+children+with+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Child+Care+Health+Dev%22%5BJournal%5D)">Sleep disorders and their relationship to psychological disturbances in children with epilepsy.</a> Child Care Health Dev. 24 (1), 5-19 (1998).</li>
<li>Yi, P. L., Tsai, C. H., Lin, J. G., Lee, C. C., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kindling+stimuli+delivered+at+different+times+in+the+sleep-wake+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Kindling stimuli delivered at different times in the sleep-wake cycle.</a> Sleep. 27 (2), 203-212 (2004).</li>
<li>Yi, P. L., Chen, Y. J., Lin, C. T., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occurrence+of+epilepsy+at+different+zeitgeber+times+alters+sleep+homeostasis+differently+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Occurrence of epilepsy at different zeitgeber times alters sleep homeostasis differently in rats.</a> Sleep. 35 (12), 1651-1665 (2012).</li>
<li>Bazil, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+and+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Neurol%22%5BJournal%5D)">Sleep and epilepsy.</a> Semin Neurol. 22, 321-327 (2002).</li>
<li>Yi, P. L., Lu, C. Y., Jou, S. B., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+frequency+electroacupuncture+suppress+focal+epilepsy+and+improves+epilepsy-induced+sleep+disruptions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Low frequency electroacupuncture suppress focal epilepsy and improves epilepsy-induced sleep disruptions.</a> J Biomed Sci. 22, 49(2015).</li>
<li>Yi, P. L., Lu, C. Y., Cheng, C. H., Tsai, Y. F., Lin, C. T., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+amygdala+opioid+receptors+by+electroacupuncture+of+Feng-Chi+%28GB20%29+acupoints+exacerbates+focal+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complement+Altern+Med%22%5BJournal%5D)">Activation of amygdala opioid receptors by electroacupuncture of Feng-Chi (GB20) acupoints exacerbates focal epilepsy.</a> BMC Complement Altern Med. 13, 290(2013).</li>
<li>Yi, P. L., Lu, C. Y., Cheng, C. H., Tsai, Y. F., Lin, C. T., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amygdala+opioid+receptors+mediate+the+electroacupuncture-induced+deteriortation+of+sleep+disruptions+in+epilepsy+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Amygdala opioid receptors mediate the electroacupuncture-induced deteriortation of sleep disruptions in epilepsy rats.</a> J Biomed Sci. 20, 85(2013).</li>
<li>Paxinos, G., Watson, W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPaxinos%2C+G+%22The+Rat+Brain+in+Stereotaxic+Coordinates+%284th+edition%29%22">The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates (4th edition)</a>. , Academic Press. San Diego. (1998).</li>
<li>Siu, F. K. W., Lo, S. C. L., Leung, M. C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electro-acupuncture+potentiates+the+disulphide-reducing+activities+of+thioredoxin+system+by+increasing+thioredoxin+expression+in+ischemia-reperfused+rat+brains%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Electro-acupuncture potentiates the disulphide-reducing activities of thioredoxin system by increasing thioredoxin expression in ischemia-reperfused rat brains.</a> Life Sci. 77 (4), 386-399 (2005).</li>
<li>Yi, P. L., Tsai, C. H., Lin, J. G., Liu, H. J., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+electroacupuncture+at+%27Anmian%27+%28extra%29+acupoints+on+sleep+activities+in+rats%3A+the+implication+of+the+caudal+nucleus+tractus+solitaries%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Effects of electroacupuncture at 'Anmian' (extra) acupoints on sleep activities in rats: the implication of the caudal nucleus tractus solitaries.</a> J Biomed Sci. 11 (5), 579-590 (2004).</li>
<li>Jou, S. B., Kao, I. F., Yi, P. L., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrical+stimulation+of+left+anterior+thalamic+nucleus+with+high-frequency+and+low-intensity+currents+reduces+the+rate+of+pilocarpine-induced+epilepsy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Seizure%22%5BJournal%5D)">Electrical stimulation of left anterior thalamic nucleus with high-frequency and low-intensity currents reduces the rate of pilocarpine-induced epilepsy in rats.</a> Seizure. 22 (3), 221-229 (2012).</li>
<li>Chang, F. C., Opp, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blockade+of+corticotropin-releasing+hormone+receptors+reduces+spontaneous+waking+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Blockade of corticotropin-releasing hormone receptors reduces spontaneous waking in the rat.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 275 (3), Pt 2 793-802 (1998).</li>
<li>Cheng, C. H., Yi, P. L., Lin, J. G., Chang, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endogenous+opiates+in+the+nucleus+tractus+solitaries+mediate+electroacupuncture-induced+sleep+activities+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Evid+Based+Complement+Alternat+Med%22%5BJournal%5D)">Endogenous opiates in the nucleus tractus solitaries mediate electroacupuncture-induced sleep activities in rats.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2011, 159209(2011).</li>
<li>Tsui, P., Leung, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+effectiveness+between+manual+acupuncture+and+electro-acupuncture+on+patients+with+tennis+elbow%5BTitle%5D)+AND+%22Acupunct+Electrother+Res%22%5BJournal%5D)">Comparison of the effectiveness between manual acupuncture and electro-acupuncture on patients with tennis elbow.</a> Acupunct Electrother Res. 27 (2), 107-117 (2002).</li>
<li>Napadow, V., Makris, N., Liu, J., Kettner, N. W., Kwong, K. K., Hui, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+electroacupuncture+versus+manual+acupuncture+on+the+human+brain+as+measured+by+fMRI%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Brain+Mapp%22%5BJournal%5D)">Effects of electroacupuncture versus manual acupuncture on the human brain as measured by fMRI.</a> Hum Brain Mapp. 24 (3), 193-205 (2005).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

uygun bir epilepsi hayvan modeli seçme, her deney amacıyla gereklidir. Hedeflerimizden biri epilepsi bastırılmasına EA etkilerini aydınlatmak etmektir. EA epilepsi terapötik etkiye gösterebilir ve antik Çin literatüründe belgelenmiştir alternatif bir ilaçtır. Ancak, bunu kanıtlamak için bilimsel kanıt eksikliği vardır. Epilepsi üzerine EA etkilerini belirlemek için, öncelikle oldukça şiddetli jeneralize nöbet veya SE daha hafif fokal epilepsi üzerinde EA etkileri üzerinde duruldu. Daha önceki çalışmada, düşük frekanslı ...

Epilepsi tekrarlayan nöbetler hastanın yaşam boyu ortaya çıktığı yaygın bir nörolojik hastalıktır. En epilepsi nükslerin antiepileptik ilaçlar (AED&#39;ler) tarafından iyi kontrol edilebilir. Ancak, epilepsi hastalarının yaklaşık% 30 dirençli epilepsi 1 gelişir. Epilepsi nedenleri daha nüks arttırabilir bozuklukları, uyku. Kanıt epilepsi geceleri uyku bozabilir ya da gündüz aşırı uykululuk 2,3 neden olabileceğini göstermektedir. Daha önceki çalışmalar, yani ışık ışık dönemin başlangıcı zeitgeber zaman (ZT) 0, meydana gelen bu epilepsi göstermektedir: karanlık döngüsü, uyku azalır; Bu kortikotropin salan hormon (CRH), sokma faktörü aracılık etmektedir. ZT13 (karanlık dönemin başlangıcı) en Epilepsi uyku artıran bir başka faktör homeostatik, interlökin-1 (IL-1), ifadesini artırır. epilepsi, ZT6 de ortasına oluştuğunda uyku sirkadiyen ritimler değiştirildiğiışık periyodu 4,5. Öte yandan, uyku sorunları daha da epilepsi 6 ilerlemesini ve nüks şiddetlendirebilir. Söz konusu kanıtlara dayanarak, aynı zamanda epilepsi kontrol etmek ve epilepsi hastalarında uyku kesintileri önlemek için optimal tedavi yöntemi ortaya çıkarmak için çalışıyoruz. Daha önce başarılı bir şekilde electrocorticogram (ECOG) epilepsi faaliyetleri ve epilepsi ile indüklenen uyku bozuklukları engeller, mevcut belirli bir miktar bir paslanmaz çelik iğne ile akupunktur noktasına teslim edildiği bir 10-Hz stimülasyon frekansı o elektroakupunktur (EA) Bulunan 7 . 100 Hz stimülasyon frekansı ile EA ayrıca epileptik faaliyetleri ve sıçanlarda 8,9 uyku kesintileri bozulur. Bu başarılı deneme üç faktöre bağlıdır: Birincisi, uygun bir epileptik hayvan modeli; ikinci olarak, kemirgenlerde uyku kayıt ve analiz için bir yöntem olup; ve üçüncüsü, akupunktur doğru performans ve akupunktur locati doğruluğuons. fokal epilepsi ve jeneralize epilepsinin: Epilepsi iki ana tip olarak kategorize edilmiştir. Biz fokal temporal lob epilepsisi (TLE), jeneralize epilepsi, status epileptikus (SE) ve spontan jeneralize epilepsinin nüks ilgilendi. Bu nedenle, farklı manipülasyonlar eden deneyler için uygun epilepsi modelleri oluşturmak için uygulanır. fokal TLE kurmak için, pilokarpin bir düşük doz amigdala (CEA) sol merkez çekirdek içine tatbik edilmektedir. Bu modeli doğrulamak için, altı EcoG elektrotlar frontal (F1 ve F2), parietal (P1 ve P2) ve oksipital (O1 ve O2) sol ve sağ hemisfer hem de loblar implante ve başka bir iki referans elektrotlar (R1 &amp; edilir R2) her iki hemisferde beyincik üzerine yerleştirilir. Ek bir mikroenjeksiyon yol gösterici kanül, cerrahi (mi, 4,2 mm; DV, bregma 7.8 mm göre, AP bregmadan 2.8 mm) sol CEA implante edilir. Koordinatlar Paxinos ve W uyarlanmıştırATSON sıçan atlas 10. fokal TLE başarıyla başlatılır, sol CEA yakın sol parietal korteks üzerinde elektrot (P1), sadece kayıt, diğer EcoG elektrotlar kaydedilen önemli epilepsi ECoGs ile baskın epileptiform ECoGs alması gerekir. sıçanlara pilokarpin intraperitoneal (İP) enjeksiyonlar epilepsi ve SE yaygın indükleyebilir, ancak bu ölümcül olabilir. her enjeksiyon arasında bir günlük aralıklarla pentilentetrazol (PTZ) ile beş IP enjeksiyonu başarılı farelerde spontan genel epilepsi neden ve farelerin hayatta kalmasını sağlamak. İki telli EcoG elektrotlar EcoG sinyallerini almaya ve kendiliğinden tekrarlayan epilepsi doğrulamak için farelerde frontal ve parietal korteks implante edilir. Polisomnografi (PSG) uyku sırasında meydana gelen fizyolojik değişiklikleri kaydetmek kapsamlı bir yöntemdir ve nesnel olmayan hızlı göz hareketi (NREM) ve r farklı aşamalarında içine uyku sınıflandırabilirizAPID göz hareketi (REM) uykusu. PSG beyin dalgaları (EEG, EEG), göz hareketleri (elektrookülogram, EOG), iskelet kası sesleri (elektromyogram, EMG), kalp ritimleri (elektrokardiyogram, EKG) ve kan oksijen düzeyleri ve solunum parametreleri içeren vücut fonksiyonlarının parametreleri kaydeder. sıçanlarda, biz uyanıklık, NREM uyku ve REM uykusu içine uyanıklık durumları sınıflandırmak için ECoGs, EMGS, kortikal sıcaklık ve lokomotor aktiviteyi kaydedin. Farelerde uyku analizi ECoGs, EMGS ve lokomotor aktivite sonuçları kullanılarak yapılır. Sıçanlar cerrahi EcoG stereotaksik cerrahi ile frontal, parietal de elektrotlar ve kontralateral serebellar korteks vida üç ile implante edilir. uyanıklık devletler (uyanıklık, NREM uykusu ve REM uykusu) Post-satın alma belirleme ECoGs, EMG, beyin sıcaklığı ve lokomotor aktivite elde edilen parametrelere göre yapılır. Fare ve sıçanlarda hem de hayvan davranışını kategorize Ayrıntılı kriterler t tarif edilmektedirO protokol. , farelerde ve sıçanlarda el akupunktur EA gerçekleştirmeden önce, normal stereotaksik ameliyat sırasında uygulanması anestezik yarısı dozajı zoletil düşük doz (25 mg / kg), ile anestezi edilmesi gerekir. Bu doz hayvanların enjeksiyonundan sonra 30 ila 35 dakika uyanmak için izin verir. kılavuzu akupunktur ya EA ya 30 dakika sabit bir süre ile karanlık dönemin başlangıcında gerçekleştirilir ve her bir hayvana ardışık iki veya üç gün boyunca tedavi edilir. Uyarıcı EA akımları akupunktur noktasına yerleştirilmiş olan bir paslanmaz çelik bir iğne ile, belirli bir akupunktur noktasına gönderilir. uyarıcı akım bifazik kare bakliyat bir tren, hangi darbe süresi 150 ms ve uyarım yoğunluğu 1 mA. kuru iğne kılavuzu akupunktur kullanılırsa, akupunktur yerleştirilmiş iğne 10 kez her 5 dakika seğirdi edilir. manuel akupunktur veya EA zor kısmı kemirgenlerde acupoints lokalize etmektir. locsıçan veya farelerde acupoints tirme insanlarda anatomik konumda benzer. Örneğin, ikili Fengchi acupoints insanlarda 11 anatomik konuma benzer iki kulak arasında, 3 mm uzakta boyun arka orta hattan yer almaktadır. Ayrıca, deri üzerinde, düşük empedanslı acupoints daha da doğrulanabilir. Sahte akupunktur veya sahte EA manipülasyon akupunktur veya EA deneyler için gereklidir. Sahte akupunktur veya sahte EA gibi koltuk altı 12 yakın olarak, yakın akupunktur noktası bulunan olmayan bir akupunktur noktası yapılmalıdır. başarıyla epilepsi ve epilepsi kaynaklı uyku aksamalar üzerinde akupunktur veya EA etkilerini araştırmak amacıyla, aşağıdaki faktörler yerde olmalıdır: uygulanabilir bir epileptik hayvan modeli epileptiform ECoGs kesin analiz ve epilepsi nüks, uyanıklık durumları sınıflandırmak için bir yöntem kemirgenlerde akupunktur veya EA ve doğru performans.

<table><tbody><tr><td><güçlü > İlaçlar< / güçlü ></td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Zoletil</td><td>Virbac</td><td></td><td>50 mg / kg i.p.</td></tr><tr><td>pilokarpin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6503</td><td>300 mg / kg i.p.; 1.2 mg mikroenjeksiyon</td></tr><tr><td>PTZ</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6500</td><td>0.035 mg / fare</td></tr><tr><td>polisporini</td><td>Pfizer</td><td></td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Cerrahi< / güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ECoG elektrot</td><td>Plastikler Sıçanlar için bir</td><td>E363/20</td><td>vidalı elektrot</td></tr><tr><td>Kaide</td><td>Plastik Bir</td><td>MS363</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Kanül Plastik Bir</td><td>C315G/spc</td><td></td></tr><tr><td>Termistör</td><td>Omega Mühendisliği</td><td>44008</td><td></td></tr><tr><td>Dental akrilik</td><td>Tempron</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stereotaksik Alet</td><td>Çalmak</td><td></td><td>Dural kolları</td></tr><tr><td><güçlü>Kayıt ekipmanları</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ECoG amplifikatör</td><td>Colbourn Instruments</td><td>V75-01</td><td></td></tr><tr><td>A/D Kartı</td><td>National Instruments</td><td>NI PCI-6033E</td><td></td></tr><tr><td>Kızılötesi tabanlı hareket dedektörleri</td><td>Biobserve GmbH</td><td>ısmarlama</td><td></td></tr><tr><td>ICELUS</td><td>G-System</td><td></td><td></td></tr><tr><td>AxoScope 10 Yazılım</td><td>Moleküler Cihazlar</td><td></td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Akupunktur ihtiyaçları</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Paslanmaz iğneler</td><td>Şangay Yanglong Tıbbi Makaleler A.Ş.</td><td>32 ölçü x 1 inç</td><td></td></tr><tr><td>Fonksiyonlar Elektrik Stimülatörü</td><td>ITO, Japonya</td><td>Trio 300</td><td></td></tr><tr><td>AcuPen</td><td>Lhasa OMS</td><td>İşaretçi Excel II</td><td></td></tr></tbody></table>

akupunktur ile sıçan ve farelerde epileptiform electrocorticograms (ecogs) manipülasyon ve uyku

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture

Eski Çin literatürü, akupunkturun epilepsi ve uykusuzluk üzerinde etkili terapötik etkilere sahip olduğunu belgelemiştir. Bununla birlikte, bu etkilerin arkasındaki olası mekanizmaları ortaya çıkarmak için çok az araştırma vardır. Akupunkturun epilepsi ve uyku üzerindeki etkisini araştırmak için birkaç konunun ele alınması gerekir. Birincisi, insanlar, sıçanlar ve fareler arasında karşılık gelen akupunktur noktalarını tanımlamaktır. Ayrıca, akupunktur iğnesinin batırılma derinliği, manuel iğneli akupunkturda iğne bükülme derecesi ve elektroakupunktur (EA) için stimülasyon parametrelerinin belirlenmesi gerekir. Akupunkturun epilepsi ve uyku üzerindeki etkilerini değerlendirmek için kemirgenlerde uygulanabilir bir epilepsi modeli gereklidir. Sıçanlarda fokal temporal lob epilepsisini (TLE) simüle etmek için amigdalanın (CeA) sol merkezi çekirdeğine pilokarpin uyguluyoruz. Pilokarpinin intraperitoneal (IP) enjeksiyonu, sıçanlarda jeneralize epilepsi ve status epileptikusa (SE) neden olur. Her enjeksiyon arasında bir günlük aralıklarla beş IP pentilentetrazol (PTZ) enjeksiyonu, farelerde spontan jeneralize epilepsiyi başarılı bir şekilde indükler. Sıçanlarda uyku analizi için elektrokortikogramlar (ECoG'ler), elektromiyogramlar (EMG'ler), beyin sıcaklığı ve lokomotor aktivite kayıtları kullanılırken, farelerde uyku analizi için ECoG'ler, EMG'ler ve lokomotor aktivite kullanılır. ECoG elektrotları frontal, parietal ve kontralateral oksipital kortekslere implante edilir ve stereotaktik cerrahi ile serebral korteksin üzerine bir termistör implante edilir. EMG elektrotları boyun kaslarına implante edilir ve bir kızılötesi dedektör lokomotor aktiviteyi belirler. Uyanıklık, hızlı göz hareketi (REM) uykusu ve REM dışı (NREM) uyku dahil olmak üzere uyanıklık aşamalarını kategorize etme kriterleri, ECoG'ler, EMG'ler, beyin sıcaklığı ve lokomotor aktiviteden elde edilen bilgilere dayanır. Ayrıntılı sınıflandırma kriterleri metin içinde belirtilmiştir.

Farklı epilepsi türlerinin ihtiyaçlarını karşılamak için farklı sıçan ve fare modelleri vardır. fokal TLE neden olmak için, pilokarpin, 0.5 uL (2.4 mg / ml), sol CEA halinde tatbik edilmektedir. Ve nadir epileptik faaliyetleri (EcoG elektrotlar geri kalanından aldı Şekil 1A: a, c, d, e: baskın epileptiform ECoGs sol hemisfer parietal lob (b Şekil 1A) üzerine EcoG elektro...

Bu makale, akupunktur, epilepsi modelleri ve kemirgenlerde uyku analizinin performansını göstermektedir. Akupunktur prosedürü ve akupunktur noktalarının tanımlanması anlatılmaktadır. Epilepsiyi indüklemek için pilokarpin veya pentilentetrazol (PTZ) kullanılır. Uyku analizi için elektrokortikogram (ECoG), elektromiyogram (EMG), beyin sıcaklığı ve lokomotor aktivite kayıtları kullanılır.

Akupunktur ile Sıçan ve Farelerde Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) Manipülasyon ve Uyku

Ancient Chinese literature has documented that acupuncture possesses efficient therapeutic effects on epilepsy and insomnia. There is, however, little ...

Bu prosedürün genel amacı, bir hayvan modelinde epilepsiyi, uykuyu ve akupunkturun etkilerini değerlendirmektir. Bu yöntem, nörobilim alanındaki küçük hayvan modellerinde epilepsinin nasıl oluşturulacağı, uykunun nasıl analiz edileceği ve akupunkturun nasıl uygulanacağı ile ilgili temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, yan kortikal ve yan miyogram elektrotlarının stereotaksik cerrahi ile hızlı ve kolay bir şekilde implante edilebilmesidir.Bu prosedür, laboratuvarımdan lisansüstü öğrencisi Yi-Jou Wu tarafından uygulamalı olarak gösterilecektir. Ayak parmağı sıkıştırma testiyle sedasyon derinliğinin uygun olduğu onaylandıktan sonra, birinci gruptan altı ila sekiz haftalık, 250 ile 350 gram ağırlığındaki bir Spregg Dolly sıçanına göz pomadı uygulayın. Kafatasının üst kısmındaki tüyleri temizlemek için tıraş makinesi kullanın.Cildi sırasıyla povidon iyot çözeltisi ve %75 etanol uygulayarak dezenfekte edin, ardından enfeksiyonu önlemek için antibiyotik enjeksiyonu yapın. Daha sonra, hayvanı bir stereotaksik cihaza sabitleyin ve kulak kanalına bir kulak barı yerleştirin. Bir skalpel kullanarak, kulaklar arasındaki kafatası boyunca yaklaşık iki santi

manipulation-epileptiform-electrocorticograms-ecogs-sleep-rats-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Kaynak: Kodani, S., et.al. Farelerde Uyku / Uyanıklık Durumlarının İzlenmesi Sırasında Nöral Devrelerin Optogenetik Manipülasyonu. J. Vis. Uzm. (2019)Bu video, farelerde uykudan uyanıklığa geçişte yer alan nöral devrelerin optogenetik manipülasyonunu göstermektedir. Prosedür, ışık stimülasyonunu ve elektrofizyolojik kaydı mümkün kılmak için beyne ve kaslara bir optik fiber ve elektrotların cerrahi olarak implante edilmesini içerir. Stria terminalisin (BNST) yatak çekirdeğindeki ışığa duyarlı...

Farelerde Uykudan Uutanlığa Geçiş için Nöral Devrelerin Optogenetik Manipülasyonu

Bu videoda, anestezi uygulanmış bir fareye elektroensefalogram (EEG) ve elektromiyogram (EMG) elektrot düzeneğinin implante edilmesi için bir protokol gösterilmektedir. İşlem, fareyi stereotaksik bir çerçeve üzerine sabitlemeyi, kafatasında orta hat kesisi yapmayı, elektrotlar için delikler açmayı ve sinyal kaydı için elektrot ünitesini sabitlemeyi içerir. Kurtarma işleminden sonra, farenin uyku-uyanıklık davranışı kaydedilen sinyaller kullanılarak analiz edilir.

Elektroensefalogram ve Elektromiyogram Kayıtları ile Farelerde Uyku Davranışının Analiz Edilmesi

Bu video, fokal epilepsinin sıçan modelinde yüksek çözünürlüklü EEG kaydı için bir yöntemi göstermektedir. Sıçanın hazırlanması, çok kanallı bir EEG mini başlığının sıçanın kafa derisine bağlanması ve epilepsi modelinin karakteristiği olan nöbetle ilgili olayları tanımlamak için EEG'nin kaydedilmesi ile ilgili adımları ana hatlarıyla belirtir.

Fokal Epilepsinin Sıçan Modelinde Elektroensefalografi Kaydı

Bu video, epilepsiye bağlı sıçanlarda epileptik nöbetlerin elektroensefalografik (EEG) kaydını göstermektedir. Ventral hipokampusa implante edilen elektrotlu bir sıçan, EEG kayıt sistemine bağlanır ve bir pleksiglas odaya yerleştirilir. Nöbet oluşumunu izlemek için beyin aktivitesi kaydedilirken sıçanın serbestçe hareket etmesine izin verilir.

Epilepsiye Bağlı Sıçanlarda Epileptik Nöbetlerin Elektroensefalografik Kaydı

Serbest davranan farelerde elektroensefalogram (EEG) ve elektromiyogram (EMG) kaydı, davranış ve fizyolojiyi uyku ve uyanıklık ile ilişkilendirmek için kritik bir adımdır. Burada açıklanan deneysel protokol, farelerde EEG ve EMG kayıtlarını elde etmek için kablo tabanlı bir sistem sağlar.

Farelerde Uyku Ölçüm Basım Kayıt Prosedürü

Elektrokonvulsif nöbet (ECS) Elektrokonvulsif terapi şiddetli depresyon için bir deneysel hayvan modeldir. ECS synaptogenesis ve sinaptik plastisite yol hipokampüs, faaliyet genel olarak uyarır. Burada, ECS indüksiyon Sıçanlarda nöbet kaynaklı sinaptik protein değişimler incelemek için kendi hippocampi hücre altı ayırma yöntemleri açıklanmaktadır.

Elektrokonvulsif nöbetler fareler ve onların Hippocampi ayırma nöbet kaynaklı değişiklikleri postsinaptik yoğunluğu proteinlerde incelemek için

Burada, biz farelerde uyku/uyanıklık devletlerin izlenmesi sırasında nöronların belirli türlerinin optogenetik manipülasyon yöntemlerini açıklamak, bir örnek olarak stria terminalis yatak çekirdeği üzerinde son çalışma sunma.

Farelerde uyku/uyanıklık durumları Izleme sırasında nöral devrelerin optogenetik manipülasyon

Bu makalede, adeno ilişkili virüsler kullanılarak serebral korteksteki moleküler hedeflerin manipülasyonu ve elektrokortikografik kayıtlar kullanılarak uyanıklık ve uyku sırasında bu manipülasyonun etkilerinin izlenmesi için bir protokol açıklanmaktadır.

Farelerde Cofilin Hedef Alan Adeno İlişkili Bir Virüs Kullanılarak Manipüle Edilen Serebral Korteks Alanlarının Elektrokortikografik Kaydı

Burada, üç boyutlu (3D) baskılı bir tutucu kullanarak farelerde veya genç sıçanlarda verimli ve hızlı elektroakupunktur (EA) için bir protokol sunuyoruz. Bu teknik, birden fazla hayvan üzerinde aynı anda çalışmaya izin verir, zamandan tasarruf sağlar ve deneysel verimliliği artırır.

Fareler veya Genç Sıçanlar için Toplu Elektroakupunktur Operasyonu

Bu protokol, serbestçe hareket eden kemirgen EEG'sini kaydetmek için güvenilir ve kolay erişilebilir bir sistem oluşturmak için geliştirilmiştir.

Serbestçe Hareket Eden Farelerde Kronik Çok Bölgeli Elektroensefalografi Kaydı için Uygun Maliyetli ve Minimal İnvaziv Bir Protokol

Öğrenin, sıçan ve fare modellerinde akupunktur ile epilepsi ve uyku üzerindeki etkileri değerlendirmek için ECoG ve EMG kayıt yöntemlerini kullanarak. Bu teknik, nörobilim araştırmalarında farmakolojik olmayan tedavi yaklaşımlarını keşfetmeye yardımcı olur.

Akupunktur ile Sıçan ve Farelerde Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) Manipülasyon ve Uyku

Daha fazla video keşfet