Name: İndaktif Plazma - - Lazer Ablasyon Beyin Dokusu Görüntüleme Metaller Kütle Spektrometresi (LA-ICP-MS) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-22T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 5 s
Description: Öğrenin, LA-ICP-MS ile fare beyin dokusunda metal dağılımını nicel olarak haritalama yöntemini. Bu hassas teknik, nörodejeneratif hastalıklarda metal biyokimyasını incelemek için değerli bilgiler sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

DJH ve PAD Almanya&#39;nın Mükemmellik Girişimi [DFG GSC 98/3] tarafından finanse Ruhr Üniversitesi Araştırma Okulu PLUS, tarafından desteklenmiştir Agilent Technologies ve ESI Ltd. BK katılım Avustralya Araştırma Konseyi Bağlantı Projesi (LP120200081) tarafından desteklenmektedir. DJH kısmen Ramaciotti Vakfı tarafından desteklenmiştir. KK Sigrid Juselius Vakfı tarafından desteklenmektedir.

<ol><li>Barnham, K. J., Bush, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+metals+and+metal-targeting+compounds+in+major+neurodegenerative+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Soc+Rev%22%5BJournal%5D)">Biological metals and metal-targeting compounds in major neurodegenerative diseases.</a> Chem Soc Rev. 43 (19), 6727-6749 (2014).</li>
<li>Hare, D. J., Double, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Iron+and+dopamine%3A+a+toxic+couple%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Iron and dopamine: a toxic couple.</a> Brain. 139 (4), 1026-1035 (2016).</li>
<li>Savory, J., Herman, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+instrumental+methods+for+the+measurement+and+speciation+of+trace+metals%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Clin+Lab+Sci%22%5BJournal%5D)">Advances in instrumental methods for the measurement and speciation of trace metals.</a> Ann Clin Lab Sci. 29 (2), 118-126 (1999).</li>
<li>New, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tools+to+study+distinct+metal+pools+in+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Dalton+Trans%22%5BJournal%5D)">Tools to study distinct metal pools in biology.</a> Dalton Trans. 42 (9), 3210-3219 (2013).</li>
<li>Hare, D. J., New, E. J., de Jonge, M. D., McColl, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+metals+in+biology%3A+balancing+sensitivity%2C+selectivity+and+spatial+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Soc+Rev%22%5BJournal%5D)">Imaging metals in biology: balancing sensitivity, selectivity and spatial resolution.</a> Chem Soc Rev. 44 (17), 5941-5958 (2015).</li>
<li>Pozebon, D., Scheffler, G. L., Dressler, V. L., Nunes, M. A. G. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2014/ja/c4ja00250d">Review of the applications of laser ablation inductively coupled plasma mass spectrometry (LA-ICP-MS) to the analysis of biological samples.</a> J Anal At Spectrom. 29 (12), 2204-2228 (2014).</li>
<li>Becker, J. S., Zoriy, M. V., Dehnhardt, M., Pickhardt, C., Zilles, K. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/2005/JA/b504978b">Copper, zinc, phosphorus and sulfur distribution in thin section of rat brain tissues measured by laser ablation inductively coupled plasma mass spectrometry: possibility for small-size tumor analysis.</a> J Anal At Spectrom. 20 (9), 912(2005).</li>
<li>Hare, D. J., Austin, C., Doble, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+strategies+for+elemental+imaging+of+biological+samples+using+laser+ablation-inductively+coupled+plasma-mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22The+Analyst%22%5BJournal%5D)">Quantification strategies for elemental imaging of biological samples using laser ablation-inductively coupled plasma-mass spectrometry.</a> The Analyst. 137 (7), 1527-1537 (2012).</li>
<li>Hare, D. J., Lear, J., Bishop, D., Beavis, A., Doble, P. A. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2013/ay/c3ay26248k">Protocol for production of matrix-matched brain tissue standards for imaging by laser ablation-inductively coupled plasma-mass spectrometry.</a> Anal Meth. 5 (8), 1915-1921 (2013).</li>
<li>Hare, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/2009/MT/b816188g">Quantitative elemental bio-imaging of Mn, Fe, Cu and Zn in 6-hydroxydopamine induced Parkinsonism mouse models.</a> Metallomics. 1 (1), 53(2009).</li>
<li>Potter, D. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/2008/JA/b717322a">A commercial perspective on the growth and development of the quadrupole ICP-MS market.</a> J Anal At Spectrom. 23 (5), 690(2008).</li>
<li>Lear, J., Hare, D. J., Adlard, P., Finkelstein, D., Doble, P. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2012/ja/c1ja10301f/">Improving acquisition times of elemental bio-imaging for quadrupole-based LA-ICP-MS.</a> J Anal At Spectrom. 27 (1), 159(2012).</li>
<li>Matusch, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+bioimaging+of+Cu%2C+Fe%2C+Zn%2C+and+Mn+in+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease+using+laser+ablation+inductively+coupled+plasma+mass+spectrometry+%28LA-ICP-MS%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+MAss+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Cerebral bioimaging of Cu, Fe, Zn, and Mn in the MPTP mouse model of Parkinson's disease using laser ablation inductively coupled plasma mass spectrometry (LA-ICP-MS).</a> J Am Soc MAss Spectrom. 21 (1), 161-171 (2010).</li>
<li>Hare, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/2014/SC/c3sc53461h">An iron-dopamine index predicts risk of parkinsonian neurodegeneration in the substantia nigra pars compacta.</a> Chem Sci. 5 (6), 2160-2169 (2014).</li>
<li>Portbury, S. D., Hare, D. J., Sgambelloni, C., Finkelstein, D. I., Adlard, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+time-course+analysis+of+changes+in+cerebral+metal+levels+following+a+controlled+cortical+impact%5BTitle%5D)+AND+%22Metallomics%22%5BJournal%5D)">A time-course analysis of changes in cerebral metal levels following a controlled cortical impact.</a> Metallomics. 8 (2), 193-200 (2016).</li>
<li>Theiner, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LA-ICP-MS+imaging+in+multicellular+tumor+spheroids+-+a+novel+tool+in+the+preclinical+development+of+metal-based+anticancer+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Metallomics%22%5BJournal%5D)">LA-ICP-MS imaging in multicellular tumor spheroids - a novel tool in the preclinical development of metal-based anticancer drugs.</a> Metallomics. 8, 398-402 (2016).</li>
<li>Niedzwiecki, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multimodal+imaging+workflow+to+visualize+metal+mixtures+in+the+human+placenta+and+explore+colocalization+with+biological+response+markers%5BTitle%5D)+AND+%22Metallomics%22%5BJournal%5D)">A multimodal imaging workflow to visualize metal mixtures in the human placenta and explore colocalization with biological response markers.</a> Metallomics. 8, 444-452 (2016).</li>
<li>Austin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Barium+distributions+in+teeth+reveal+early-life+dietary+transitions+in+primates%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Barium distributions in teeth reveal early-life dietary transitions in primates.</a> Nature. 498 (7453), 216-219 (2013).</li>
<li>Hare, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2013/ja/c3ja50281c">The effect of paraformaldehyde fixation and sucrose cryoprotection on metal concentration in murine neurological tissue.</a> J Anal At Spectrom. 29, 565-570 (2014).</li>
<li>Dodt, H. -U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultramicroscopy%3A+three-dimensional+visualization+of+neuronal+networks+in+the+whole+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Meth%22%5BJournal%5D)">Ultramicroscopy: three-dimensional visualization of neuronal networks in the whole mouse brain.</a> Nat Meth. 4 (4), 331-336 (2007).</li>
<li>Hare, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+ablation-inductively+coupled+plasma-mass+spectrometry+imaging+of+white+and+gray+matter+iron+distribution+in+Alzheimer%27s+disease+frontal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroImage%22%5BJournal%5D)">Laser ablation-inductively coupled plasma-mass spectrometry imaging of white and gray matter iron distribution in Alzheimer's disease frontal cortex.</a> NeuroImage. 137, 124-131 (2016).</li>
<li>Günther, D., Heinrich, C. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/1999/JA/a901648a">Enhanced sensitivity in laser ablation-ICP mass spectrometry using helium-argon mixtures as aerosol carrier.</a> J Anal At Spectrom. 14 (9), 1363-1368 (1999).</li>
<li>Austin, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2011/ja/c0ja00267d">Factors affecting internal standard selection for quantitative elemental bio-imaging of soft tissues by LA-ICP-MS.</a> J Anal At Spectrom. 26 (7), 1494-1501 (2011).</li>
<li>Hare, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+elemental+bio-imaging+of+Fe%2C+Zn%2C+Cu%2C+Mn+and+P+in+a+6-hydroxydopamine+lesioned+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Metallomics%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional elemental bio-imaging of Fe, Zn, Cu, Mn and P in a 6-hydroxydopamine lesioned mouse brain.</a> Metallomics. 2 (11), 745-753 (2010).</li>
<li>Osterholt, T., Salber, D., Matusch, A., Becker, J. S., Palm, C. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1387380611001230">IMAGENA: Image Generation and Analysis - An interactive software tool handling LA-ICP-MS data.</a> Int J Mass Spectrom. 307 (1-3), 232-239 (2011).</li>
<li>Uerlings, R., Matusch, A., Weiskirchen, R. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1387380615004029">Reconstruction of Laser Ablation Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry (LA-ICP-MS) Spatial Distribution Images in Microsoft Excel 2007.</a> Int J Mass Spectrom. 395, 27-35 (2015).</li>
<li>Paul, B., et al. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/sc/2015/c5sc02231b">Visualising mouse neuroanatomy and function by metal distribution using laser ablation-inductively coupled plasma-mass spectrometry imaging.</a> Chem Sci. 6 (10), 5383-5393 (2015).</li>
<li>Paton, C., Hellstrom, J., Paul, B., Woodhead, J., Hergt, J. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/2011/JA/c1ja10172b">Iolite: Freeware for the visualisation and processing of mass spectrometric data.</a> J Anal At Spectrom. 26 (12), 2508(2011).</li>
<li>Lein, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+atlas+of+gene+expression+in+the+adult+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Genome-wide atlas of gene expression in the adult mouse brain.</a> Nature. 445 (7124), 168-176 (2007).</li>
<li>Hare, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+atlas+of+iron%2C+copper%2C+and+zinc+in+the+mouse+cerebrum+and+brainstem%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional atlas of iron, copper, and zinc in the mouse cerebrum and brainstem.</a> Anal Chem. 84 (9), 3990-3997 (2012).</li>
<li>Hjornevik, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+atlas+system+for+mouse+and+rat+brain+imaging+data%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+Neuroinform%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional atlas system for mouse and rat brain imaging data.</a> Frontiers Neuroinform. 1, 4(2007).</li>
<li>Bishop, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/Content/ArticleLanding/2016/JA/C5JA00293A">Elemental bio-imaging using laser ablation-triple quadrupole-ICP-MS.</a> J Anal At Spectrom. 31 (1), 197-202 (2016).</li>
<li>Balcaen, L., Bolea-Fernandez, E., Resano, M., Vanhaecke, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inductively+coupled+plasma+-+tandem+mass+spectrometry+%28ICP-MS%2FMS%29%3A+a+powerful+and+universal+tool+for+the+interference-free+determination+of+%28ultra%29trace+elements+-+a+tutorial+review%5BTitle%5D)+AND+%22Analytica+Chimica+Acta%22%5BJournal%5D)">Inductively coupled plasma - tandem mass spectrometry (ICP-MS/MS): a powerful and universal tool for the interference-free determination of (ultra)trace elements - a tutorial review.</a> Analytica Chimica Acta. 894, 7-19 (2015).</li>
<li>Van Malderen, S. J. M., Managh, A. J., Sharp, B. L., Vanhaecke, F. <a target="_blank" href="http://pubs.rsc.org/en/content/articlelanding/2016/ja/c5ja00430f">Recent developments in the design of rapid response cells for laser ablation-inductively coupled plasma-mass spectrometry and their impact on bioimaging applications.</a> J Anal At Spectrom. 31, 423-439 (2016).</li>
</ol>

RWH ve COC, ESI Ltd.'nin ücretli çalışanlarıdır. FF ve TPH, Agilent Technologies Australia'nın ücretli çalışanlarıdır.

Nörolojik dokusunda görüntüleme metaller bu protokol herhangi bir biyolojik matris içinde metallerin dağılımı ve miktarı hakkında yararlı bilgiler sağlayabilir nasıl sadece bir örnektir. standart referans malzemelerin hazırlanması zorlu olabilir rağmen, bir kez gerçekleştirilir ve daha sonra kullanılmak üzere arşivlenebilir bir deneydir. LA-ICP-MS, çoğunlukla erişilebilirlik ve duyarlılık açısından böyle sinkrotron tabanlı X-ışını floresan mikroskop gibi alternatif yöntemler üzerinde bazı avantajlara sahiptir. Ancak, LA-ICP-MS kullanılarak bir deney hazırlanırken dikkate alınması gereken bazı dezavantajları vardır, ve gibi genellikle alternatif metal analiz teknikleri yanı sıra karşılaştırmalı histokimya 5 içerir kimyasal görüntüleme için yararlı bir tamamlayıcı bir tekniktir. fare beyninin bilinen anatomik özellikleri ile uyum olası fonksiyonel relati hakkında yararlı bilgiler sağlayabilirmetal düzeylerinin ve mekansal dağılımı arasındaki öğrenmekten yararlanma. Daha önce, Allen Beyin Atlas online kaynak, hem metal bağımlı enzim ifade 14 ve nöroanatomi 27 uzaysal korelasyonu incelemek için C57BL / 6 fare beyninde hem anatomik ve gen ifade verilerinin açık erişim depodur 29 kullandık, 30. Böyle Kemirgen Beyin WorkBench 31 gibi diğer kaynaklar da genellikle küçük anatomik bölgelerde metal dağılımının doğru teşhisinde yardımcı olmak için kayıt ve metal görüntüleri hizalama yardımcı vardır. Bu tekniğin Uygulamaları, normal yaşam olayları hem boyunca mikroölçeklerde nasıl metal düzeyleri ve dağıtım değişikliği değerlendirmede yararlıdır (örneğin, yaşlanma) ve hastalık durumlarında; olarak tasarlanan iki metal ihtiva eden bileşikler ve uyuşturucu etkilerini araştırmak beni hedeftal metabolizması. mekansal metal dağılımı değerlendirmek için bir görüntüleme tekniği olarak LA-ICP-MS mevcut büyük sınırlamalar çıktı ve hassasiyet vardır. Uzun analiz süreleri gerektiren yüksek çözünürlüklü görüntüleri ile analiz hızı ve uzamsal çözünürlük 5, 12 arasında bir değiş tokuş vardır. manganez, kobalt ve selenyum gibi elementler ICP-MS ile bunların tespit normal doku ve / veya sınırlamalar düşük çokluğu nedeniyle sınırlıdır da teknik, yüksek konsantrasyonlarda biyolojik elemanları uygundur. Bu tür üçlü dört kutuplu kütle analizörleri giriş olarak ICP-MS teknolojisinde yeni gelişmeler, yüksek hassasiyetleri 33 böyle selenyum 32 gibi zor analit, hedeflenen tespiti için izin verir. Bir teknoloji odaklı bir prosedür olarak, artan teknik gelişmeye devam bu görüntüleme göreceksiniz lazer ve kütle spektrometresi tasarımı hem de gelişmeleranaliz ve duyarlılık 34 hızı.

Metallerin eşsiz redoks kimyası sinyal iletimi, enerji üretimi ve nörotransmitter sentezi de dahil olmak üzere nörolojik fonksiyonları, bir dizi kolaylaştırır. En temel nörodejeneratif hastalık, bir dizi, bu metallerin dyshomeostasis iki hastalıkta patogenezinde ve terapötik müdahale 1 potansiyel yeni hedeflerin olarak tanımlanmıştır. Daha iyi metaller Alzheimer ve Parkinson hastalığı (AD ve PD, sırasıyla) olarak koşullarda katılmaktadırlar anlamak için, metal dağıtım ve seviyeleri olumsuz hastalık sürecinden etkilenen bölgeler içinde nasıl değiştiğini ölçebilmek için zorunludur. Bu değişiklikler genellikle yakından böyle PD 2 demir ve dopamin nörotoksisitenin bizim son zamanlarda önerilen mekanizma olarak, hücre ölümünü başlatmak süreçlerle bağlantılı olabilir biyokimyasal reaksiyonlarda ince vardiya göstergesidir. Geleneksel olarak, bir metatanımlanmış anatomik bölgeler içinde l seviyeleri analitik teknikler 3 bir dizi kullanarak dikkatli eksizyonu, sindirim ve analiz yoluyla elde edilmiştir. Ancak, böyle bir yaklaşım hastalık durumları incelenmiştir küçük, iyi tanımlanmış bölgeler veya belirli hücre tiplerini içeren edilirken kritik olabilir uzamsal bilgiyi kaybeder. Analitik bir dizi yöntem emisyon spektroskopisi, floresan probları ve kütle spektrometresi 4 kullanılarak sağlam örneklerinden doku bölümleri ve iki ve üç boyutlu olarak biyolojik sistemlerde metaller, görselleştirmek için kullanılabilir. Her teknik hassasiyet, kimyasal türlerin seçicilik ve elde edilebilir uzaysal çözünürlüğü ile ilgili avantajları ve dezavantajları vardır. Mevcut tekniklerin aralığında kapsamlı bir bakış için, Hare ve arkadaşları tarafından gözden bakın. 5. Kütle spektrometrisi (MS) yöntemleri, bu tekniklerin en duyarlı tabanlı, Kendi ana konsantrasyonda 6 en biyolojik ilgili metalleri ölçebilen. Lazer ablasyon - indüktif eşleşmiş plazma - kütle spektrometresi (LA-ICP-MS) görüntüleme (bir dörtgen ışın şekil kullanılır veya genişlik)&gt; çapı 100 mikron 1 arasında değişen büyüklüklerde odaklanmış morötesi lazer ışınını, istihdam altında örnek 7 geçirilir. Nicel bilgiler farklı yaklaşımlar 8, teknik zorluk ve analitik pratiklik değişen derecelerde her çeşitli kullanılarak üretilebilir standart referans malzemelerin temsili ablasyon yoluyla elde edilebilir. En yaygın yaklaşım, numunenin karşılaştırılabilir baskın kimyasal yapısına sahip, standart bağımsız analiz vasıtasıyla 9 ile homojenliğe ve mutlak metal konsantrasyonu açısından değerlendirildi doğru hedef analit ile spike hazırlanabilir ve matris eşlemeyi kullanır </sup&gt; 10. Hazırlanan standartların ablasyon daha sonra sonuçta meydana gelen örnek bir görüntü konsantrasyonu verileri piksel başına ekstre sağlayan dış kalibrasyon amaçlı kullanılabilir. Resim çözünürlüğü kiriş boyutu ve örnek taranır hızına tarafından belirlenir. (Dünya çapında tüm yüklü ICP-MS sistemleri 11% 90&#39;ından sorumludur), standart dört kutuplu tasarım ICP-MS seçilen tüm kütle-ücret oranı ile kitle detektörü döngüleri, sıralı kütle analizörü (m / z ) yerine eş zamanlı olarak veri toplamak daha. Bu nedenle, kitlelerin her bir döngü için elde etme zamanı, istenen çözünürlük piksel temsilci 12 elde edilir sağlamak için, lazer ışınının bir genişliği hareket örnek için alınan zaman eşit olmalıdır. Lazer ışın boyutu seçimi duyarlılık ve toplam analiz süresi hem de önemli etkilere sahip olan bir çok önemli bir parametredir. lazer ablasyon fiziksel durumları olarakCally&#39;nin argon taşıyıcı bir gaz ile, ICP-MS süpürülür malzemenin fiziksel kütle analizörü ile tespit edilebilir madde miktarı ters kare kanununa göre hareket kaldırır. dört kat ablasyon malzemenin bir azalma 25 um sonuç - Örneğin, 50, lazer ışını çapının azaltılması. Ayrıca, bir tarama yöntemi olarak, daha küçük kiriş çapları seçilen bir alanı baskılamak için gereken toplam süreyi artırır. Bu nedenle, deneysel tasarım duyarlılık ihtiyaçları ve zaman kısıtlamaları gerekli uzaysal çözünürlük dengelemek için esastır. LA-ICP-MS ile görüntüleme nörolojik bozuklukların 13, 14, travmatik beyin yaralanması, 15 plasentada metal içeren anti-kanser ilaçları, 16 zehirli maruz dağılımı hayvan modellerinde de dahil olmak üzere, örnekler, matris ve hastalıkların bir dizi tatbik edilmiştir 17 ve metal distrErken yaşam diyet geçişler bir biyolojik belirteç olarak dişlerde ibution. Kolayca örnek türleri ve deneysel sonuçlar bir dizi adapte edilebilir olsa bu protokol 18 biz ihtiyaçlarına göre, 30 mikron çözünürlükte WT fare beyin demir, bakır ve çinko görüntüleme için genel bir yöntem tarif analisti.

<table><tbody><tr><td>Soda cam mikroskop slaytları</td><td>n/a</td><td>n/a</td><td>Tipik slaytlar tüm deneyler için uygundur</td></tr><tr><td>PTFE kaplı mikrotom bıçakları</td><td>C.L. Stuckey</td><td>DT315R50</td><td>Bıçak boyutu kriyostat bıçak tutucusuna bağlıdır. Sipariş vermeden önce kontrol edin.</td></tr><tr><td>Parafomaldehit (PFA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>16005</td><td>Uygun herhangi bir tedarikçi</td></tr><tr><td>Sükroz</td><td>n/a</td><td>n/a</td><td>Ticari sınıf beyaz şeker uygundur</td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu Salin (PBS)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5368</td><td>Listelenen önceden karıştırılmış poşetler, normal laboratuvar protokollerine göre hazırlanabilir</td></tr><tr><td>Xylene</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>247624</td><td>Herhangi bir tedarikçi uygun</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E7023</td><td>Herhangi bir tedarikçiye uygun</td></tr><tr><td>Kuzu beyni</td><td>n/a</td><td>n/a</td><td>Çoğu yerel kasaptan temin edilebilir</td></tr><tr><td>Metal tuzları</td><td>n/a</td><td>n/a</td><td>İstenilen analitleri içeren suda çözünür metal tuzları kullanın</td></tr><tr><td>Omni TH Doku Homojenizatörü</td><td>Omni Inc</td><td>THP115</td><td>Alternatif homojenizatörler uygundur</td></tr><tr><td>Polikarbonat homgenizatör probları</td><td>Omni Inc</td><td>TH115-PCRH</td><td></td></tr><tr><td>Mikrodalga parçalama ünitesi</td><td>n/a</td><td>n/a</td><td>İsteğe bağlı. Bkz. Bölüm 2</td></tr><tr><td>1,5 mL mikrofüj tüpleri</td><td>TechnoPlas</td><td>P4010</td><td>Metal içermeyen polipropilen tüpler. Asitle yıkanmış tüpler de uygundur</td></tr><tr><td>%65 nitrik asit</td><td>Merk Millipore</td><td>100441</td><td>İz analiz sınıfı</td></tr><tr><td>%30 hidrojen peroksit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>95321</td><td>İz analizi sınıfı</td></tr><tr><td>10 x 10 mm tek kullanımlık kriyokalıplar</td><td>Ted Pella</td><td>27181</td><td></td></tr><tr><td>İzopentan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>76871</td><td></td></tr><tr><td>Sıvı nitrojen</td><td>n/a</td><td>n/a Kullanım</td><td> yerel tedarikçi</td></tr><tr><td>NWR213 Lazer Ablasyon sistemi</td><td>ESI Ltd</td><td>n/a</td><td>Bu deneylerde kullanılır. Uygun olan diğer üreticiler, protokolde değişiklik yapılmasını gerektirebilir</td></tr><tr><td>Agilent 8800 Serisi ICP-MS</td><td>Agilent Technologies</td><td>n/a</td><td>Bu deneylerde kullanılır. Uygun olan diğer üreticiler, Iolite</td></tr><tr><td>Iolite</td><td>Yazılımı</td><td>n/a</td> protokolünde değişiklik yapılmasını gerektirebilir <td>http://iolite-software.com/'dan edinilebilir. Diğer yöntemler mevcuttur, protokole</td></tr><tr><td>bakın Excel</td><td></td><td>Microsoft yok</td><td></td></tr><tr><td>IGOR Pro</td><td>Wave Metrics</td><td>yok https://www.wavemetrics.com/products/igorpro/igorpro.htm'dan</td><td>kullanılabilir</td></tr></tbody></table>

İndaktif plazma - - lazer ablasyon beyin dokusu görüntüleme metaller kütle spektrometresi (la-icp-ms)

Imaging Metals in Brain Tissue by Laser Ablation - Inductively Coupled Plasma - Mass Spectrometry (LA-ICP-MS)

Metaller, belirli bir anatomik bölgede hem kimyasal reaktivite ve bolluk tarafından dikte biyolojik rolü, bir organizmanın boyunca yayg bulunur. beyin içinde, metaller, merkezi sinir sistemi içinde oynayabilir birincil işlevi ile ilgili olarak, bir yüksek bölümlere dağılımına sahiptir. Metallerin mekansal dağılımının görüntülenmesi Nöroanatomik bölgeler ve metal bağımlı süreçlerle ilgili kendi bilinen fonksiyonu arasındaki doğrudan bir ilişki sağlayan beynin biyokimyasal mimarisine benzersiz bir bakış açısı sağlamıştır. Buna ek olarak, çeşitli yaş ile ilişkili nörolojik bozukluklar genellikle, aksi analiz etmek zordur beynin küçük bölgelerle sınırlı metal homeostazını kesintiye sağlarlar. Burada, lazer ablasyon kullanarak, nicel fare beyninde metalleri görüntüleme için kapsamlı bir yöntem tarif - indüktif eşleşmiş plazma - kütle spektrometresi (LA-ICP-MS) ve özel olarak tasarlanmış görüntü işlemeyazılım. beyin içinde en bol ve hastalık ilgili metallerin üç olan demir, bakır ve çinko, üzerinde yoğunlaşırken, biz düşük mikrometre içindeki metal dağılımının haritalar üretmek için numune hazırlama, analiz, kantitatif ölçümler ve görüntü işleme temel adımları açıklar çözünürlük aralığı. herhangi bir kesim doku bölümü için geçerli Bu teknik, bir organ ya da sistemde metallerin oldukça değişken dağılımı sergileyebilme yeteneğine sahip olduğunu ve gayet iyi anatomik yapıların içindeki metal homeostazında değişiklik ve mutlak düzeylerini belirlemek için kullanılabilir.

Bu LA-ICP-MS görüntüleme yaklaşımının yeteneklerini göstermek için, koronal planda korpus kallosum de ikiye ve kesitli bir WT C57BL / 6 fare beyninin tek bir bölümünü kullanarak basit bir deney sunulmuştur. Analiz bölümü (Şekil 2), metal dağılımının temsili bir görüntüsünü temin etmek için hem de, Bölüm 6 ve 7&#39;de tarif edildiği gibi BioLite (Şekil 1) kullanılarak, veri analizi için bir iş akışı, aynı zamanda açıklanmaktadır. Görüldüğü gibi, fare beyninde metal dağıtım anatomik bölgeye göre değişkendir. Bu değişken roller metallere bağlanabilir ve daha özel olarak protein bağlı oldukları için, her beyin bölgesi 27 görüntülemektedir. Örneğin, demir, çinko Corti&#39;den en bol ise, orta beyin ve dentat girus birlikte yüksek konsantrasyonlarda eğilimical alanları. Yaygın olarak kullanılan bir iç standart 8 karbon, homojen dağıtılır. Metallerin ko bilgiler özel metal bağlayıcı proteinlerin ifade bir beynin içinde metallerin fonksiyonu içgörü sağlayabilir edebilir mevcut anatomik ve fonksiyonel referans atlasları 29 ile birlikte kullanıldığında Elemental haritalar (Şekil 2) özellikle yararlı olabilir bölgesi veya bir tespit hastalıkla ilişkili biyomolekülün uygun metal düzeylerindeki değişiklikler. analitlerin, daha geniş bir aralığı için optimize edilmiş açıklanan yaklaşım kullanarak, mangan gibi düşük bolluk elemanları duyarlılık engel yapar ve yöntemler diğer ölçülen kitlelerin pahasına bekleme sürelerini arttırarak bu analitin odaklanabilmenizi uyarlanabilir. LA-ICP-MS ile görüntüleme kullanarak büyük avantajı metal concentr göreli farklılıkları gözlemleyerek olduğunutirme ve deney grupları arasında dağılımı. Biz daha önce artan PD 2, 10 taklit bir nörotoksin hakaret aşağıdaki demir ve insan Alzheimer hastalığı dokusunda 21 kortikal demir düzeylerindeki değişimlerin göstermek için böyle bir teknik kullandık. Burada tarif edildiği gibi bir protokol kolayca belirtilen yöntemlere az değişikliklerle başka doku tipine adapte edilebilir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/55042/55042fig1.jpg" /> Şekil 1: Görüntü İşleme için iş akışı. fare beyin metal dağılımının niceliksel resimlere ICP-MS ham zamana bağımlı veri dönüştürme gösteren Bölüm 6 ve 7, tamamlayıcı iş akışı. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55042/55042fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> </p&gt; <img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/55042/55042fig2.jpg" /> Şekil 2: bir fare beyni içinde Biyo tipik Element dağılımı. LA-ICP-MS ile analiz tek bir fare beyin yarımkürede bir 30 mikron kalınlığında koronal bölümünün temsilcisi eleman haritaları. (Üst satır); Karbon-13 (C13), magnezyum-24 (MG24) ve fosfor-31 (P31) için Görüntüler Altın renkli pullarla (CPS saniye başına sayım) görüntülenen. Mangan-55 (Mn55), bakır-63 (Cu63), demir-56 (Fe56) ve çinko-66 (Zn66) kantitatif görüntüleri (alt sıra) karşılık gelen BlueHot renk ölçekleri (mikrogram g -1) görüntülenir. Beyin bölümü için toplam analiz süresi yaklaşık 5 saat oldu. Ölçek çubuğu = 2 mm. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55042/55042fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <strong&gt; Ek Kod veri çıkışı ICP-MS üreticinin yöntemine göre uygun bir Python editörü kullanılarak değiştirilebilir 6.1 de açıklandığı 1. Açık kaynak Python kodu, dosya. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55042/CopyFilesFromSubDirs_3.txt" target="_blank">Bu dosyayı indirmek için tıklayınız.</a>

Kantitatif lazer ablasyon ile dokuda metallerin haritalama - indüktif eşleşmiş plazma - kütle spektrometresi (LA-ICP-MS) metaller, normal fonksiyon ve hastalık sürecine katılmaları nasıl yeni bir fikir verebilir hassas bir analitik tekniktir. Burada, kantitatif fare nörolojik doku ince kesitlerde metal görüntüleme için bir protokol açıklar.

İndaktif Plazma - - Lazer Ablasyon Beyin Dokusu Görüntüleme Metaller Kütle Spektrometresi (LA-ICP-MS)

Metals are found ubiquitously throughout an organism, with their biological role dictated by both their chemical reactivity and abundance within a ...

Bu yöntemin genel amacı, lazer ablasyon indüktif eşleşmiş plazma kütle spektrometrisi kullanarak doku kesitlerindeki metallerin uzaysal dağılımını nicelleştirmektir. Bu yöntem, hem temel biyoloji hem de hastalık araştırmalarındaki temel soruları, özellikle metal biyokimyasının hastalık patolojisinde rol oynadığı durumlar için yanıtlayabilir. Bu tekniğin temel avantajı, geleneksel metal analiz teknikleri kullanıldığında genellikle kaybolan metallere ilişkin uzaysal bilgileri korumasıdır.Bu tekniğin etkileri, hücre ölümünün görüldüğü beyin bölgelerinde metallerin nasıl değiştiğini izlememize olanak tanıdığı için nörodejeneratif hastalıkların tedavisine ve teşhisine kadar uzanmaktadır. Genellikle, bu yöntemde yeni olan kişiler, uzun ve karmaşık deneyleri kurarken zorluk yaşayabilirler. Deneyi tasarlamak ve verileri analiz etmek zorlayıcı olabildiğinden ve her adımın belirli bir sırayla yürütülmesi gerektiğinden, bu yöntemin görsel olarak gösterilmesi kritik önem taşımaktadır.Öncelikle, bir beyin doku örneğini ve matrisle eşleştirilmiş tüm doku standartlarını lazer ablasyon haznesine yerleştirin. Örneklerin LACCD kamera alan derinliği içinde olduğundan emin olun. Hazne kapısını kapatın ve vidaları elinizle sıkın.Ardından, ICPMS yazılımında taşıyıcı gaz valfini açın ve akış hızını dakikada 1,2 litre olarak ayarlayın. LA yazılımında, ablasyon hücresini taşıyıcı gaz ile 30 dakikalık bir temizleme işlemine tabi tutun. İki hacimli bir ablasyon hücresi için, hücrede kalan hava miktarını azaltmak amacıyla her on dakikada bir numune tablasını haznenin her bir köşesine taşıyın.ICPMS'i açın ve cihazın iki saat boyunca ısınmasını bekleyin. Cihaz ısınırken, lazer ablasyon yazılımında ilk doku standardının yüzeyi boyunca yaklaşık üç milimetre uzunluğunda bir ablasyon hattı çizin. Ablasyon hattına tıklayarak varsayılan ışın çapını, tarama hızını ve ışınım akısını ayarlayın.Çizgiyi altı kez çoğaltın ve çizgileri ışın çapı kadar aralıklarla yerleştirin. Bu işlemi her standart için tekrarlayın. Ardından, standartlarla aynı parametreleri kullanarak, çizgi aracını kullanarak örneğin sol üst köşesinden başlayıp en geniş noktasından geçecek şekilde örnek üzerindeki ablasyon alanını çizin.Standartlarda kullanılanla aynı aralıkta, numunenin tamamen kapsanması için gerektiği kadar çizgiyi çoğaltın. Ardından, numunenin taranmasından sonra en geç 20 saat içinde veya her numune arasında standartların ara ara taranması için bir dizi çizgi çizin. Deneyin sonuna standartların bir taramasını ekleyin.Hat uzunluğuna ve tarama hızına dayanarak, numune ve standart hatları için analiz süresini belirleyin. Ardından, ICPMS yazılımında yeni bir seri (batch) oluşturun ve zaman çözünürlüklü analiz seçeneğini belirleyin. İlgilenilen kütle/yük oranı değerlerini seçin ve bir döngü için toplam entegrasyon süresi 0.25 saniye olacak şekilde her bir oran için entegrasyon sürelerini ayarlayın.Yığını kaydedin. Standart bir yığın için, lazer ısınma ve yıkama sürelerini hesaba katmak adına her satırın analiz süresini 15 saniyelik ek bir tampon süreyle doldurun. Her standart satırı için bir veri toplama işlemi içeren bir örnek çalıştırma listesi oluşturun.Numune grubu için, standart grubu çoğaltın ve süreleri ile kazanım sayılarını numune ablasyon paternine göre uygun şekilde ayarlayın. ICPMS ısındıktan sonra, ilk grubu sıraya ekleyin ve yazılımın LA cihazından tetikleme beklediğinden emin olun. Ardından, LA yazılımında lazer güç kaynağını açın, lazer ısınma ve yıkama sürelerini ayarlayın.Lazer sekansını başlatın ve ablasyon sonrası ICPMS'in veri toplamaya doğru şekilde başladığını kontrol edin. Veriler toplandıktan sonra, standartlara ait verileri CSV dosyalarından çıkarın. Çekim baz hattı düzeltmelerini gerçekleştirin ve arka plan sinyalini hariç tutun.Doku standartlarındaki deliklerin neden olduğu sinyal düşüşlerini belirleyin. Bu düşük sinyalli alanları maskeleyin ve ardından verileri bir hesap çizelgesi olarak dışa aktarın. Tanımlanan her element için CPS'den PPM'ye bir dönüştürme faktörü hesaplayın.Bu işlemi her bir standart için tekrarlayın. Ardından, kantitatif görüntü oluşturma yazılımını açın ve CSV dosyalarındaki örnek verilerini içe aktarın. Arka plan düzeltmesini uygulamak için arka plandan birkaç alan seçin.Grafik düzenleme aracını seçin, görüntüye sağ tıklayın ve görüntü görünümünü değiştir seçeneğini belirleyin. Arka plan sinyalini iyileştirmek için Z'deki ilk rengi büyük bir negatif değerle değiştirin ve tamam'a tıklayın. Ardından standartlar sekmesinde, her bir standart için CPS PPM düzeltme faktörlerini girin ve başlat'a tıklayın.Veri sekmesindeki veri tarayıcısını açın, düzeltilmiş bir görüntü dosyasına sağ tıklayın ve yeni görüntü seçeneğine tıklayın. Görüntü görünümünü değiştirme penceresini açarak renk tablosunu ve ölçeği ayarlayın. Görüntüye bir renk ölçeği yerleştirmek için açıklama ekleme aracını kullanın.Renk ölçeği penceresinden renk ölçeğini ayarlayın. Görüntü renklendirildikten ve açıklama eklendikten sonra, görüntüyü başka bir programa kopyalayıp yapıştırın veya görüntü oluşturma yazılımından dışa aktarın. ROI araçlarını etkinleştirmek için analiz paketlerinden görüntü işlemeyi seçin ve bir görüntü belirleyin.Görüntü sekmesinde ROI'ye tıklayın ve ROI çizimini başlatın. İlgi bölgesini seçin ve ardından ROI'yi bitir'e tıklayın. ROI verilerini elde etmek için görüntü sekmesinde istatistiklere tıklayın.Verileri bir hesap tablosuna kopyalayıp yapıştırın ve her ROI eklendiğinde kaydettiğinizden emin olun. İşlemi gerektiği kadar tekrarlayın. Bu teknik kullanılarak vahşi tip bir fare beyninin metal içeriği ve dağılımı incelenmiştir.Burada karbon, magnezyum ve fosfor dağılımları saniye başına sayım cinsinden gösterilmiştir. Manganez, bakır, demir ve çinko için kantitatif görüntüler sunulmuştur. Karbon dağılımı internal standart olarak kullanılmıştır.Demir, orta beyinde ve dentat girusda en yüksek miktarda bulunmaktaydı. Çinko ise en çok kortikal bölgelerde görülmekteydi. Bu görüntülerden elde edilen bilgiler, metal bağlayan proteinlerin ekspresyonunu ve işlevselliğini takip etmek için kullanılabilir. Yöntem kavrandıktan sonra, uygun şekilde yürütüldüğünde, birkaç gün süren bir deney bir saat içinde kurulabilir.Bu prosedürü uygularken, ablasyon hatlarınızı ve veri dosyalarınızı ICPMS ile senkronize etmeniz önemlidir. Bu prosedürün ardından, metallerin spesifik proteinlerle kolokalizasyonu gibi ek bilgiler sağlamak amacıyla, bitişik kesitler üzerinde histolojik boyama gibi ek yöntemler uygulanabilir. Bu yöntem fikri ilk olarak, Parkinson hastalığının laboratuvar modellerinde metal seviyelerinin nasıl değiştiğini incelemek istediğimizde ortaya çıkmıştır.Bu yöntem nörodejenerasyon hakkında bilgi edinmek için kullanılabildiği gibi, insan dokusu da dahil olmak üzere farklı doku türleri ve hastalık durumları ile bir dizi biyolojik matris için de kullanılabilir. Geliştirilmesinin ardından bu teknik, nörobilim alanındaki araştırmacıların hem insan örneklerinde hem de hastalıkların hayvan modellerinde metal seviyelerinin nasıl değiştiğini incelemelerinin yolunu açmıştır. Bu videoyu izledikten sonra, lazer ablasyon ICPMS deneyinin nasıl kurulacağı konusunda oldukça iyi bir fikre sahip olmalısınız.Biyolojik materyallerle çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini unutmayın ve bu prosedürü gerçekleştirirken uygun kişisel koruyucu donanım giymek gibi önlemler her zaman alınmalıdır.

imaging-metals-brain-tissue-laser-ablation-inductively-coupled-plasma

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Lazer ablasyon elektrosprey iyonizasyon (LAESI) kütle spektrometresi bir atmosferik basınçlı iyon kaynağı. Görüntüleme modunda, orta-kızılötesi lazer probları bir doku bölüm veya bir biyofilm boyunca moleküllerin dağılımları. Bu teknik, doğal deneysel koşullar altında yürütülen çeşitli biyoanalitik çalışmalar için yeni bir yaklaşım sunuyor.

Atmosferik basınç Moleküler Görüntüleme LAESI Kütle Spektrometresi Biyolojik Dokular ve Biyofilmler

Kaynak: Hare, D. J., et.al.  Lazer Ablasyon ile Beyin Dokusundaki Metallerin Görüntülenmesi - Endüktif Eşleşmiş Plazma - Kütle Spektrometresi (LA-ICP-MS). J. Vis. Uzm.  (2017)Bu video, fare beyin dokusundaki metal dağılımlarını görselleştirmek ve ölçmek için lazer ablasyon-indüktif olarak eşleştirilmiş plazma-kütle spektrometresinin (LA-ICP-MS) kullanımını göstermektedir. Protokol, numune parçacıklarının bir aerosolünü oluşturmak için lazer ablasyonunu, parçacıkların yüksek sıcaklıktaki...

Fare Beyin Dokusundaki Metalleri Görselleştirmek için Lazer Ablasyon-Endüktif Eşleştirilmiş Plazma-Kütle Spektrometresi

Ditranol (DT, 1,8-dihidroksi-9 ,10-dihydroanthracen-9-on) daha küçük moleküllerin doku görüntüleme için bir MALDI matris olarak bildirilmiştir; üzerinde endojen lipidlerin MALDI görüntüleme için DT kullanımı için protokoller Bir ultra çözünürlüklü kuadrupol-FTICR alet üzerinde pozitif iyon MALDI-MS tarafından doku kesitlerinin yüzey burada verilmektedir.

Bir Fourier Matrix Yardımlı Lazer Dezorpsivon / İyonizasyon Görüntüleme için bir Matrix olarak ditranol İyon Cyclotron Rezonans Kütle Spektrometresi Dönüşümü

Ince organ ve tümör dokusu üzerinde yapılan lazer kaynaklı arıza spektroskopi başarıyla Gd-tabanlı nanopartikülleri çıkarılacak doğal unsurlar ve yapay enjekte gadolinyum (Gd), tespit. Kimyasal elementlerin Görüntüler 100 mikron ve kantitatif alt mM hassasiyet çözünürlüğü ulaştı. Standart optik mikroskop ile kurulum uyumluluğu aynı biyolojik doku birden fazla görüntü sağlama potansiyelini vurguluyor.

Lazer kaynaklı Arıza Spektroskopisi: Organ Doku Nanopartikülün en Mapping ve Nicelik için Yeni Bir Yaklaşım

Endüktif olarak eşleştirilmiş plazma - kütle spektrometresi (ICP-MS) ile tirelenmiş boyut dışlama kromatografisi, metaloproteinlerin bolluğundaki değişiklikleri doğrudan biyolojik örneklerden ölçmek için güçlü bir araçtır. Burada, moleküler kütleyi ve bilinmeyen proteinlerle ilişkili metal miktarını tahmin etmek için kullanılan bir dizi metaloprotein standardını açıklıyoruz.

Boyut Dışlama ICP-MS kullanarak Nicel Metalloproteomic Analiz Standartları

Atmosferik basınçta çalıştırılan bir kütle spektrometresi görüntüleme (MSI) kaynağı, orta kızılötesi lazer desorpsiyonu ve elektrosprey post-iyonizasyonun birleştirilmesiyle geliştirilmiştir. Doku ile ilgili materyalin rezonans desorpsiyonunu kolaylaştırmak için enerji emici matris olarak eksojen buz matrisi kullanıldı. Bu makale, tüm vücut yenidoğan faresinin IR-MALDESI MSI'sini gerçekleştirmek için adım adım bir protokol sağlar.

Kızılötesi Matriks destekli lazer desorpsiyon Elektrosprey İyonizasyon tarafından tüm vücut Kütle Spektrometre Görüntüleme (IR-MALDESI)

Moleküler görüntüleme matris yardımlı lazer desorpsiyon/iyonlaşma tabanlı görüntüleme kütle spektrometresi (maldı-IMS) ile birden çok analitler eş zamanlı haritalama biyolojik örnekleri sağlar. Burada, Alzheimer hastalığı ve serebral amiloid angiopathy örnekleri maldı-IMS kullanarak beyin dokuları algılama ve görselleştirme amiloid β protein için bir iletişim kuralı mevcut.

Amiloid β mevduat matris yardımlı lazer desorpsiyon/iyonlaşma kütle spektrometresi Imaging ile insan beynindeki görselleştirme

Bu protokol, kütle spektrometresi görüntüleme ile birlikte ince filmlerdeki (DGT) difüzif gradyanlar kullanılarak birden fazla labile inorganik besin ve kirletici çözünür türünün mm altı 2D görselleştirilmesi için bir iş akışı sunar. Karasal bitkilerin rizosferinde solutların nicel haritalandırılması için çözünür örnekleme ve yüksek çözünürlüklü kimyasal analiz ayrıntılı olarak açıklanmıştır.

Topraktaki Labile, Inorganik Bitki Besinleri ve Kirleticilerin İki Boyutlu Görselleştirilmesi ve Nicelleştirilmesi

Dopamin değiştirme farmakoterapi L-DOPA ile Parkinson hastalığının en yaygın olarak kullanılan semptomatik tedavi, anormal istemsiz hareketleri olarak adlandırılan diskinezi dahil olmak üzere, yan etkileri ile...

Parkinson Hastalığında nöropeptitler MALDI Görüntüleme Kütle Spektrometresi

Bu tekniğin amacı farmakolojik manyetik rezonans görüntüleme (phMRI) ve selektif serotonin geri alım inhibitörü (SSRI), fluoksetin ile birlikte iv meydan okuma ile canlı ve ücretsiz-nefes hayvan serotonin (5-HT) nörotransmitter fonksiyonu değerlendirmektir.

Pre-klinik araştırma Farmakolojik-meydan fMRI Kullanımı: 5-HT Sistemi Uygulaması

Öğrenin, LA-ICP-MS ile fare beyin dokusunda metal dağılımını nicel olarak haritalama yöntemini. Bu hassas teknik, nörodejeneratif hastalıklarda metal biyokimyasını incelemek için değerli bilgiler sunar.

İndaktif Plazma - - Lazer Ablasyon Beyin Dokusu Görüntüleme Metaller Kütle Spektrometresi (LA-ICP-MS)

Daha fazla video keşfet