Name: Akış kaynaklı pulmoner hipertansiyon için bir Sıçan Modelinde Şant Cerrahisi, Sağ Kalp kateterizasyonu ve Damar Morfometri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-02-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 23 s
Description: Keşfedin akış kaynaklı pulmoner arteriyel hipertansiyon için sıçan modeli oluşturma, sağ kalp kateterizasyonu ve damar morfometri yöntemleri. Bu teknikler hemodinamik değerlendirme ve histopatolojik analiz için standartlaştırılmış prosedürler sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Hollanda Kardiyovasküler Araştırma Girişimi, Hollanda Kalp Vakfı, Hollanda Üniversite Tıp Merkezleri Federasyonu, Hollanda Sağlık Araştırma ve Geliştirme Örgütü ve Hollanda Kraliyet Bilimler Akademisi (CVON nr. 2012-08, PHAEDRA, Sebald fonu, Stichting Hartekind) tarafından desteklenmiştir.

Hayvan denekleri Prosedürleri Hayvan Deneyleri için Hollanda Merkez Komitesi ve Üniversite Tıp Merkezi Groningen Hayvan Bakım Komitesi (NL) tarafından onaylanmıştır. 180 ve 300 g arasında ağırlıkları iki Wistar ve Lewis sıçanları kullanılmıştır. 1. Konut ve Aklimatizasyon <ol><li> kafes başına 5 gruplar halinde merkez hayvan tesis, ev sıçan geldikten sonra. 7 günlük bir iklimlendirme döneminde, insan kullanımdan sıçan alıştırmak, ancak herhangi bir deneysel prosedürler gerçekleştirmeyin. </li></ol> 2. Hazırlık Steril Monocrotalin enjeksiyonu <ol><li> 60 mg / ml monocrotalin (MCT) solüsyonu 1 mL için, 2 ml bir tüp içinde monocrotalin 60 mg ağırlığında. % 0.9 NaCl 700 uL ekleyin. 1 M HCI, 200 uL ekleyin. Sıcak çalışan musluk suyu ve vorteks o altında tüp içinde çözüm ısıtın. 7.0 doğru pH&#39;ı getirmek için 6 N NaOH kullanın. kemirgenler içine enjeksiyon için MCT hazırlanması için steril tekniği kullanın. </li&gt; <li> (300 g bir fare için 60 mg / ml MCT 0.3 mL) boyun kg deri altından her steril 60 mg / ml MCT çözeltisi 1 ml enjekte edilir. NOT: Bu yazıda enjekte doz uygun olmayacağını büyük şans daha küçük hacimli kullanmak için değil tercih ederim. </li></ol> 3. Aort-kaval Şant Cerrahisi <ol><li> Anestezi. <ol><li> (Akış: / dak 1 L)% 5 izofluran /% 100 O 2 ile indüksiyon odasına doldurun ve odasında sıçan yerleştirin. Bir arka ayak tutam yaparak anestezi yeterli derinlikte olup olmadığını kontrol edin. sıçan tartılır. </li><li> Tıraş ve yaklaşık 8 cm uzunluğunda ve 3 cm genişliğinde bir alana karın temizleyin. steril bir mat kaplı bir ısı mat (37 ° C) sırtında sıçan yerleştirin. </li><li> % 3 izofluran /% 100 O 2 (: / dk 1 L akışı) - 2 ile solunum maskesi / kaputu burun yerleştirin. Bir arka ayak tutam yaparak anestezi derinliğini kontrol edin. anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için göz merhemi sürün. </li></ol></li><li> şant Surgery. <ol><li> dezenfeksiyon için klorür-heksidinli cilt fırçalayın. kg buprenorfin subkutan post-operatif analjezi için 0.01 mg / enjekte edilir. </li><li> Ameliyat için steril aletler kullanın. Bir sadece genital üstünde aşağı uzanan diyafram altında 1 cm başlayarak, orta hat karın bir 10. neşter bıçağı ile bir kesi yapmak. </li><li> steril, ıslak gazlı bez (% 0.9 NaCl) içinde bağırsakları kapak, bir pamuklu çubukla bağırsak yukarı kaldırın ve hayvanın sol tarafına koyun. </li><li> abdominal aorta ve çevre dokulara inferior vena kava takmak membranlar ayırmak için pamuklu çubuklarla kullanın. NOT: aort ve vena kava arasındaki membranlar incelemek etmeyin. </li><li> splinter forseps kullanarak, sadece aort sağ tarafında ve tek iğne eklenecek sitede, sadece çatallanma üstünde perivasküler aort yağ çıkarmak. </li><li> 2 mm supe gelen aort ve vena kava ayırmak için pamuklu çubuklarla kullanınİğne bir Biemer kelepçesi için alan yaratmak amacıyla eklenir siteye Rior. </li><li> Bu alanda, ilk aort etrafında gevşek bir bitişik harfleri (5-0 dikiş) yerleştirin. Kesi (Şekil 1A) için Kocher üstün koyun sonra üzerine bir Kocher kelepçe koyarak dikilen gerginlik oluşturun ve. Biemer ligature (Figür e 1A) sadece üstün kelepçe yerleştirin. </li><li> Bir pamuklu çubuk kullanarak, akış (Şekil 1A) engel olarak distale mümkün olduğunca vena kava sıkıştırmak. Bend dışında (Şekil 1A) doğru menfez işaret ile 45 derecelik bir açı içine iğne (Bu protokol 18 G). </li><li> 90 derecelik bir açı ile, sol (Şekil 1A) iğne işaret deliği ile sadece çatallanma üzerinde aorta iğneyi. sola iğne ucu işleyin ve vena kava takın. NOT: İğne ucu şimdi olmalıdır visivena kava (Şekil 1B) ble. </li><li> trombozu önlemek için ekleme siteden aort kalan kan itmek için ikinci bir pamuklu çubuk kullanın. tutkal yeterince sopa için sırayla bir steril gazlı bez ile şant çevresini kurutun. </li><li> Aort dışarı tüm iğne çekin ve hemen aorta ponksiyon üzerine doku yapıştırıcısı bir damla uygulayın. dokuya pamuklu çubukla tutkal değil emin olun. aorta çözülme. </li><li> çekerek ve şantın aort proksimalinde bitişik harfleri serbest elle şant doğrulayın. Gevşeme parlak kırmızı şant vena kava distalinden renk ve şönt yerinde türbülans oluşturmanız gerekir. NOT: Sıkma geri koyu kırmızı vena kava kan dönecek. </li><li> geri hayvanda bağırsak yerleştirin. emilebilir 4-0 sütür ile kas tabakası ve cilt kapatın. Anestezi kurtarmak için% 100 O 2 ile hayvan havalandırınız. NOT: Bir ani bırakmayınsternal yatma korumak için yeterli bilinci yerine kadar mal katılımsız. </li></ol></li><li> Sham Cerrahi. <ol><li> Aort içine iğne sokulması haricinde yukarıdaki işlemlerin tümünü gerçekleştirebilir. </li></ol></li><li> Ameliyat sonrası bakım. <ol><li> Tek bir kafes ve ertesi sabaha kadar 37 ° C&#39;deki bir kuluçka makinesi içine sıçan yerleştirin. </li><li> Ameliyat sonrası 6 saat civarında, post-operatif analjezi için kg buprenorfin subkutan / 0.01 mg enjekte edilir. Sıçan rahatsızlık belirtileri gösterir, eğer ertesi sabah tekrarlayın. Not: Ameliyattan sonraki ilk 3 gün sonra, sıçanlar (yemi ya da içme suyu ilaçlar ile karıştırılmaktadır, bu özellikle önemlidir) ve yemek az içki eğilimindedir. Çoğu sıçanlar 3 gün ameliyattan sonra normal davranışı göstermektedir. Değilse, yakından izleyin. 1 hafta içinde% 15 aşan Zayıflama, anormal olarak kabul edilir ve bu fareler anestezi altında iken kan hacminin ekstre ötenazi edilmelidir. </li></ol></li></ol> NOT: Bu protokol, hayvan anestezi altında iken dolaşan kan hacminin çıkarılması ile ötenazi. <ol><li> Pulmoner kan akımının artırılması erken hücresel ve fonksiyonel yanıtları (örneğin, gen up-regülasyonu veya erken transkripsiyon faktörleri) için cerrahi (MF8) 1 gün sonra Kurban. </li><li> Bir erken evre PAH vasküler fenotip (neointimal lezyonlar olmadan medial hipertrofi) için cerrahi (MF14) 1 hafta sonra Kurban. </li><li> RVP ve mPAP hafif yükselti ile bir ileri evre PAH vasküler fenotip için cerrahi (MF21) (işaretli medial hipertrofi ve neointimal oluşumu) 2 hafta sonra Kurban. </li><li> RVP ve mPAP bir son dönem PAH vasküler fenotip için cerrahi (MF28) (işaretli neointimal tıkanıklığı) ve güçlü yükseklik 3 hafta sonra Kurban. sağ ventrikül yetmezliği klinik belirtileri, bu aşamada yaygındır. </li><li> gün 28 (MF-SVY&#39;nin sonra Kurban) Klinik nefes darlığı, şiddetli uyuşukluk ve kilo kaybı (&lt;1 hafta içinde% 10) olarak tanımlanan PAH ilişkili sağ ventrikül yetmezliği (RVF), için. Bu işaretlerden biri varken sıçan sonlandırın. Sık sık, fareler gün 28 ve 35 arasında bu belirtiler geliştirmek, korumasız bırakılırsa, bu zaman aralığında kendiliğinden ölür. </li></ol> 5. Sağ Kalp kateterizasyonu <ol><li> Anestezi. <ol><li> (Akış: / dak 1 L)% 5 izofluran /% 100 O 2 ile indüksiyon odasına doldurun ve kutuya sıçan yerleştirin. Bir arka ayak tutam yaparak anestezi yeterli derinlikte olup olmadığını kontrol edin. sıçan tartılır. </li><li> ekokardiyografi protokolü, toraks ve üst batın, Tıraş ve sıçan sağ ventral tarafında boyun temizlemek ve. </li><li> Bir ısı mat (37 ° C) sırtında sıçan yerleştirin ve 2 ile bir solunum maskesi / kaputu burun yerleştirin -% 3 izofluran /% 100 O 2 (akış: / dak 1 L). burun araştırmacı doğru karşıya edilmelidir. </li><li&gt; Anestezi derinliğini kontrol edin. Şiddetli PH bulunan fareler ile dikkatli olun. Kalp hızı azalırsa, anestezi derinliğini azaltmak. Tercih, 20 dakika içinde tüm ölçümler yapmak. anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için göz merhemi sürün. </li></ol></li><li> Ekokardiyografi protokolü. <ol><li> Brittain ve arkadaşları tarafından tarif edilen protokole göre ekokardiyografi gerçekleştirin. Jüpiter 13. </li></ol></li><li> Kateterizasyon protokolü. NOT: Bu protokol önceden ucu ile sert bir kanül ucu bir top 2 mm 15 cm silikon kateter rehberlik 20 derece bükülmüş kullanır. Içine hafifçe bükülmüş olan deliği ile 20-G iğne sağ juguler damara kanül eklemek için kullanılır (malzeme listesine bakınız). PAH ilerlemesi ve kontrol herhangi bir aşamasında Sıçanlar Bu protokolde kullanılabilir. <ol><li> klorür-heksidinli boyun dezenfekte edin. Sağ-ventral tarafta bir 10. neşter bıçağı ile 1.5 cm kesi yapmakBoyun, sağ köprücük kemiği üzerinde mandibular kemik. </li><li> makas kullanılarak doku yayıldı. boyun damarı görünene kadar cımbız kullanarak, yavaşça birbirinden doku çekin. kıymık forseps kullanarak damar şahdamarına etrafındaki zarların parçalara ayır. </li><li> Geminin etrafında gevşek bitişik harfleri (5-0 dikiş) koyarak juguler ven üzerindeki gerilimi koyun. Gerginliği artırmak ve havalandırma maskesi (Şekil 2A) üzerine bitişik harfleri bantlayın. </li><li> Ekleme bölgesinden akım-aşağı kanül sızıntı ve basınç kaybını önlemek için, yerinde sonra sıkıştırmak için teknenin etrafına gevşek bitişik harfleri yerleştirin. </li><li> Bir forseps kolları kullanarak, hafifçe kateter ile kanül yapmak için iç deliği ile 20 G iğne ucu bükün. </li><li> damara 20-G iğne ucu tanıtmak ve hızlı bir şekilde geminin içindeki kateter içeren kanül yerleştirin. iğne çekin ve ardından bitişik harfleri kapatınBu aşama 5.3.4 hazırlandı. </li><li> şah damara kateter içeren kanül yürütün. kanül ucu 20 derecelik eğri olan (adım 5.3.5 bakınız). Köprücük kemiği altında kanül Manevra ve sağ atrium (Şekil 2C) girmek için biraz ilerlemek. </li><li> Sağ ventrikül girmek için, kalp (Şekil 2B) doğru sola kanül ucu, işaret. Başucu monitöründe, bir rv basınç eğrisi Şekil 2D eşleşen görünmelidir. </li><li> RV basınç eğrisi sabit olduğunda, sistolik ve diyastolik sağ ventrikül basıncı 1 yazınız (sRVP1 / dRVP1). </li><li> sol ve yukarı kanül ucu işleyin. Kanül (Şekil 2E) içinde kateteri ilerletin. </li><li> Ana pulmoner arter (PA) içine kateteri ilerletin. Pulmoner vana geçerken hiçbir direnç hissettim edilmelidir. NOT: Kateter ana pulmoner arter girdiğinde, diastolic basınç artacak. Başucu monitörde, bir PA basınç eğrisi Şekil 2E eşleşen görünmelidir. </li><li> PA basınç eğrisi sabit olduğunda, sistolik, diyastolik yazmak ve PA basıncı 1 (sPAP1, dPAP1, mPAP1) anlamına gelir. </li><li> kateterin ucundaki topu pulmoner arter sıkışmış alır kadar daha fazla kanül içinde kateteri ilerlemek. Başucu monitör damla basınç eğrisi gözlemlemek ve Şekil 2F kama basıncı eğrisini maç. </li><li> wedge basıncı eğrisi sabit olduğunda, sistolik, diyastolik yazmak ve kama basıncı anlamına gelir. </li><li> Yavaş yavaş ve daha sonra kateter geri çekin ölçmek ve başucu monitörünüzde görüntülenen, sPAP2, dPAP2, mPAP2, sRVP2 ve dRVP2 değerlerini yazınız. </li><li> RV, biraz ölçmek için kanül ve kateter geri çekin sağ atriyal basıncı (RAP) anlamına gelir. Eğri Şekil 2A RAP eğrisini eşleşmesi gerekir. YOK HAYIRTE: Bu protokol, sıçanlar anestezi altında iken dolaşan kan hacminin çıkarılması ile kateterizasyon protokolünden sonra ötenazi. </li></ol></li></ol> 6. Morfoloji Değerlendirme ve Morfometri NOT: Bu protokol, hayvan anestezi altında iken dolaşan kan hacminin çıkarılması ile ötenazi. PAH ilerlemesi ve kontrol herhangi bir aşamasında Sıçanlar Bu protokolde kullanılabilir. <ol><li> Ölümden sonra 5 bronş çatallanma yukarıdaki mm ve kalp akciğerler bağlamak gemiler hakkında trakea keserek akciğerleri çıkar. soğuk tuzlu su içinde akciğerlere koyun. Sol akciğer parçalara ayır. çatallanma sol ana bronş kesin. </li><li> ,% 4 paraformaldehid ile 50 ml şırınga doldurun şırıngaya bir kanül ile bir tüp takın ve çalışma tablosu üzerinde bir metre şırınga asmak. pasif paraformaldehid ile akciğer doldurmak için sol ana bronş içinde kanül takın.dikkatli paraformaldehid anlaştım. </li><li> 48 saat paraformaldehid sol akciğer inkübe edin. </li><li> (% 70 etanol (1 H),% 80 etanol (1 H),% 90 etanol (1 H),% 100 etanol (3H), ksilol (2 saat) ve parafin ardışık olarak inkübe edilerek kalan akciğer kurutmak 2H). </li><li> Kaseti bakan akciğer hilus ile, parafin sol akciğer gömün. </li><li> Üreticinin talimatlarına 29 uyarınca, bir Verhoeff veya Elastica-van Gieson boyama kullanılarak parafine gömülü, 4 mikron akciğer bölümleri Leke. Emin olun elastik lamina iyi (Şekil 3 gibi) ayrılır. 40X büyütmede lekeli bölümleri tarayın. </li><li> 4 parçaya bölünür akciğer bölün. Her bir çeyrek daire olarak, &lt;dış çapı 50 um (içi asinar) ve 10 damarları&gt; bir dış çapa sahip 10 gemi 50 um (ön asinar) bulabilirsiniz. Bir resim (akciğer başına 2 x 40 resim) atın. rastgele her geminin 20x büyütme ve fotoğraf kadar büyütBu görüş sahası; seçim verevi en aza indirmek için. </li><li> &gt; 2 en uzun / kısa çap oranı, tam olmayan dairesel bir şekli, ya da kap duvarının fazla dörtte biri bir çöküş sahip damarları hariç. NOT: dışlanan geminin bir örneği aynı büyütme (40X) her resim yapın ve bir ölçek çubuğu dahil 3b Şekil gösterilmiştir. </li><li> Açık ImageJ ve ilk resim. &quot;Analyse&quot; yoluyla ölçek ayarlamak için resimdeki ölçek çubuğunda düz bir çizgi çizmek ve &quot;ölçek olarak ayarlayın.&quot; Için &quot;Bilinen mesafe,&quot; resmin ölçek çubuğunda değeri kullanın. uzunluk birimi olarak mikrometre (um) kullanın. Küresel için ölçek olarak ayarlayın. </li><li> &quot;Serbest seçimleri&quot; kullanma lümen alanı (Şekil 3) iç sınırında bir çizgi çizin, ve &quot;ölçmek&quot; kullanın (Ctrl m) bu alanı ölçmek için. Ardından, dış elast etrafında bir çizgi çizinic lamina (Şekil 3) toplam damar alanı ölçmek için. </li><li> (Luminal ve dış çapı hesaplamak <img alt="Denklem" src="/files/ftp_upload/55065/55065eq1.jpg" /> ) kullanılarak <img alt="Denklem" src="/files/ftp_upload/55065/55065eq2.jpg" /> . </li><li> kullanarak duvar kalınlığını hesaplamak <img alt="Denklem" src="/files/ftp_upload/55065/55065eq3.jpg" /> . </li><li> kullanarak duvar / lümen oranını hesaplamak <img alt="Denklem" src="/files/ftp_upload/55065/55065eq4.jpg" /> . </li><li> kullanarak tıkanıklığı puanı hesaplamak <img alt="Denklem" src="/files/ftp_upload/55065/55065eq5.jpg" /> . </li><li> Muskularizasyon gemiyi Puan (hayır, kısmi veya toplam muskularizasyon) (Şekil 3B). NOT: Tamamen muskularize olarak yarısından fazlasının çevresi için bir çift elastik lamina gemiler tanımlanır. Kısmen muskularize gibi bir çift elastik lamina yarısından daha az çevre gemiler tanımlanır. </li><li> Bir Neoi varlığına gemi Skoruntima (evet veya hayır) (Şekil 3C). NOT: (genellikle eksantrik) lümen tıkanıklığı ile birlikte açıkça tanımlanmış internal elastik lamina olmadan gemiler neointimal lezyonlar olarak tanımlanır. </li></ol>

<ol><li>Hoeper, M. M., Bogaard, H. J., Condliffe, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Definitions+and+diagnosis+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Definitions and diagnosis of pulmonary hypertension.</a> J Am Coll Cardiol. 62, D42-D50 (2013).</li>
<li>Stacher, E., Graham, B. B., Hunt, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modern+age+pathology+of+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Modern age pathology of pulmonary arterial hypertension.</a> Am J Respir Crit Care Med. 186 (3), 261-272 (2012).</li>
<li>Levy, M., Maurey, C., Celermajer, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+apoptosis+of+pulmonary+endothelial+cells+is+associated+with+intimal+proliferation+and+irreversibility+of+pulmonary+hypertension+in+congenital+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Impaired apoptosis of pulmonary endothelial cells is associated with intimal proliferation and irreversibility of pulmonary hypertension in congenital heart disease.</a> J Am Coll Cardiol. 49 (7), 803-810 (2007).</li>
<li>Sakao, S., Tatsumi, K., Voelkel, N. F. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20008280">Reversible or irreversible remodeling in pulmonary arterial hypertension.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 43 (6), 629-634 (2010).</li>
<li>Gomez-Arroyo, J. G., Farkas, L., Alhussaini, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+monocrotaline+model+of+pulmonary+hypertension+in+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 302 (4), L363-L369 (2012).</li>
<li>Jones, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serial+noninvasive+assessment+of+progressive+pulmonary+hypertension+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+-+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Serial noninvasive assessment of progressive pulmonary hypertension in a rat model.</a> Am J Physiol - Heart Circ Physiol. 283 (1), 364-371 (2002).</li>
<li>Hoffman, J. I., Rudolph, A. M., Heymann, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+vascular+disease+with+congenital+heart+lesions%3A+Pathologic+features+and+causes%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Pulmonary vascular disease with congenital heart lesions: Pathologic features and causes.</a> Circulation. 64 (5), 873-877 (1981).</li>
<li>van Albada, M. E., Berger, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+arterial+hypertension+in+congenital+cardiac+disease--the+need+for+refinement+of+the+evian-venice+classification%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiol+Young%22%5BJournal%5D)">Pulmonary arterial hypertension in congenital cardiac disease--the need for refinement of the evian-venice classification.</a> Cardiol Young. 18 (1), 10-17 (2008).</li>
<li>Dickinson, M. G., Bartelds, B., Borgdorff, M. A., Berger, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+disturbed+blood+flow+in+the+development+of+pulmonary+arterial+hypertension%3A+Lessons+from+preclinical+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">The role of disturbed blood flow in the development of pulmonary arterial hypertension: Lessons from preclinical animal models.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305 (1), L1-L14 (2013).</li>
<li>Garcia, R., Diebold, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simple%2C+rapid%2C+and+effective+method+of+producing+aortocaval+shunts+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Simple, rapid, and effective method of producing aortocaval shunts in the rat.</a> Cardiovasc Res. 24 (5), 430-432 (1990).</li>
<li>Okada, K., Tanaka, Y., Bernstein, M., Zhang, W., Patterson, G. A., Botney, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hemodynamics+modify+the+rat+pulmonary+artery+response+to+injury.+A+neointimal+model+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hemodynamics modify the rat pulmonary artery response to injury. A neointimal model of pulmonary hypertension.</a> Am J Pathol. 151 (4), 1019-1025 (1997).</li>
<li>van Albada, M. E., Schoemaker, R. G., Kemna, M. S., Cromme-Dijkhuis, A. H., van Veghel, R., Berger, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+increased+pulmonary+blood+flow+in+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">The role of increased pulmonary blood flow in pulmonary arterial hypertension.</a> Eur Respir J. 26 (3), 487-493 (2005).</li>
<li>Brittain, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+assessment+of+the+right+heart+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22JVis+Exp%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic assessment of the right heart in mice.</a> JVis Exp. (e81), (2013).</li>
<li>Dickinson, M. G., Bartelds, B., Molema, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Egr-1+expression+during+neointimal+development+in+flow-associated+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Egr-1 expression during neointimal development in flow-associated pulmonary hypertension.</a> Am J Pathol. 179 (5), 2199-2209 (2011).</li>
<li>Borgdorff, M. A., Bartelds, B., Dickinson, M. G., Steendijk, P., de Vroomen, M., Berger, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+loading+conditions+reveal+various+patterns+of+right+ventricular+adaptation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Distinct loading conditions reveal various patterns of right ventricular adaptation.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 305 (3), H354-H364 (2013).</li>
<li>Ruiter, G., de Man, F. S., Schalij, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversibility+of+the+monocrotaline+pulmonary+hypertension+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Reversibility of the monocrotaline pulmonary hypertension rat model.</a> Eur Respir J. 42 (2), 553-556 (2013).</li>
<li>van Albada, M. E., Bartelds, B., Wijnberg, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+expression+profile+in+flow-associated+pulmonary+arterial+hypertension+with+neointimal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Gene expression profile in flow-associated pulmonary arterial hypertension with neointimal lesions.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 298 (4), L483-L491 (2010).</li>
<li>Dickinson, M. G., Kowalski, P. S., Bartelds, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+role+for+egr-1+during+vascular+remodelling+in+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">A critical role for egr-1 during vascular remodelling in pulmonary arterial hypertension.</a> Cardiovasc Res. 103 (4), 573-584 (2014).</li>
<li>van der Feen, D. E., Dickinson, M. G., Bartelds, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Egr-1+identifies+neointimal+remodeling+and+relates+to+progression+in+human+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Jheart+lung+transplant%22%5BJournal%5D)">Egr-1 identifies neointimal remodeling and relates to progression in human pulmonary arterial hypertension.</a> Jheart lung transplant. 35 (4), 481-490 (2016).</li>
<li>Rungatscher, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+overcirculation-induced+pulmonary+arterial+hypertension+in+aorto-caval+shunt%5BTitle%5D)+AND+%22Microvasc+Res%22%5BJournal%5D)">Chronic overcirculation-induced pulmonary arterial hypertension in aorto-caval shunt.</a> Microvasc Res. 94, 73-79 (2014).</li>
<li>O'Blenes, S. B., Fischer, S., McIntyre, B., Keshavjee, S., Rabinovitch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+unloading+leads+to+regression+of+pulmonary+vascular+disease+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic unloading leads to regression of pulmonary vascular disease in rats.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 121 (2), 279-289 (2001).</li>
<li>Sakao, S., Taraseviciene-Stewart, L., Lee, J. D., Wood, K., Cool, C. D., Voelkel, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Initial+apoptosis+is+followed+by+increased+proliferation+of+apoptosis-resistant+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Initial apoptosis is followed by increased proliferation of apoptosis-resistant endothelial cells.</a> FASEB J. 19 (9), 1178-1180 (2005).</li>
<li>Spiekerkoetter, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FK506+activates+BMPR2%2C+rescues+endothelial+dysfunction%2C+and+reverses+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">FK506 activates BMPR2, rescues endothelial dysfunction, and reverses pulmonary hypertension.</a> J Clin Invest. 123 (8), 3600-3613 (2013).</li>
<li>Nickel, N. P., Spiekerkoetter, E., Gu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elafin+reverses+pulmonary+hypertension+via+caveolin-1-dependent+bone+morphogenetic+protein+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Elafin reverses pulmonary hypertension via caveolin-1-dependent bone morphogenetic protein signaling.</a> Am J Respir Crit Care Med. 191 (11), 1273-1286 (2015).</li>
<li>Meloche, J., Potus, F., Vaillancourt, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bromodomain-containing+protein+4%3A+The+epigenetic+origin+of+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Bromodomain-containing protein 4: The epigenetic origin of pulmonary arterial hypertension.</a> Circ Res. 117 (6), 525-535 (2015).</li>
<li>Happé, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pneumonectomy+combined+with+SU5416+induces+severe+pulmonary+hypertension+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Pneumonectomy combined with SU5416 induces severe pulmonary hypertension in rats.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 310 (11), L1088-L1097 (2016).</li>
<li>Ranchoux, B., Antigny, F., Rucker-Martin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial-to-mesenchymal+transition+in+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Endothelial-to-mesenchymal transition in pulmonary hypertension.</a> Circulation. 131 (11), 1006-1018 (2015).</li>
<li>de Raaf, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SuHx+rat+model%3A+Partly+reversible+pulmonary+hypertension+and+progressive+intima+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respy+J%22%5BJournal%5D)">SuHx rat model: Partly reversible pulmonary hypertension and progressive intima obstruction.</a> Eur Respy J. 44 (1), 160-168 (2014).</li>
<li>Elastic (Connective Tissue Stain) Instructions for Use. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://www.abcam.com/ps/products/150/ab150667/documents/ab150667-Elastic%20Stain%20Kit%20(website).pdf">http://www.abcam.com/ps/products/150/ab150667/documents/ab150667-Elastic%20Stain%20Kit%20(website).pdf</a> (1506).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Bu yöntem sıçanlarda prensip hemodinamik ve PAH ve bu modeli karakterize histopatolojik uç noktalarını değerlendirmek için akış kaynaklı PAH ve teknikleri oluşturmak için MCT ile ön işleme tabi bir aorto-kaval şant cerrahi prosedürü tanımlamaktadır. Protokolün ve Sorun Giderme içinde kritik adımlar Cerrahi ve ameliyat sonrası. aorta-kaval şant ameliyatı sırasında en kritik adım aort ve vena kava diseksiyonudur. aort ve vena kava yeterince disseke edilmelidir içine z...

Bu yöntemin amacı, farelerde şiddetli akım kaynaklı pulmoner arteriyel hipertansiyon için tekrarlanabilir bir model oluşturmak için ve prensip hemodinamik ve histopatolojik bitiş noktalarını ölçmektir. Pulmoner arteriyel hipertansiyon (PAH), sağ ventrikül yetmezliği ve ölüme yol açan pulmoner vasküler dirençte ilerleyici artış kapsayan bir klinik sendromdur. Pulmoner hipertansif hastalıklar (PH) superordinate hastalık spektrumu içinde, PAH tam iyileşme 1 olmadan kalır en ağır formu ve biridir. PAH altta yatan arteriopatidir damar lümeni tıkar vasküler yeniden tipik bir formu ile karakterizedir. Normal olmayan muskularize damarlar ve medial damar tabakasının hipertrofisi Muskularizasyon PAH erken hastalık fenomen olarak kabul edilmektedir, aynı zamanda PH 2 diğer şekillerde görülür ve 3 geri dönüşümlü olduğu düşünülmektedir. PAH a olarakdvances, intimal tabaka sonunda karakteristik neointimal lezyonlar 2 şekillendirme, pişmanlık başlar. Neointimal tipi pulmoner vasküler yeniden şekillenme PAH özeldir ve şu anda 4 geri dönüşümsüz olarak kabul edilir. PAH nadir bir hastalık olduğu için, onun biyopatolojik anlama gelişmeler ve yeni tedavilerin geliştirilmesi hayvan modellerinde dayanmıştır var. Sıçanlarda monocrotalin (MCT) model olmuştur basit bir tek vuruş modeli ve hala sık kullanılır. MCT pulmoner arteriol ve bölgesel inflamasyon 5 yaralanmasına neden olan bir zehirdir. / Kg MCT 60 mg ortalama pulmoner arter basıncında (mPAP), pulmoner vasküler rezistans (PVR) bir artışa yol açar ve 3 sonrası sağ ventrikül hipertrofisi (SVH) - 4 hafta 6. Histomorphology neointimal lezyonlar 5 olmadan izole medial hipertrofi ile karakterize edilir. MCTyaygın ikinci olarak sunulan rağmen sıçan modeli böylece ılımlı bir PH şeklini değil, PAH temsil eder. Konjenital sol-sağ şant (PAH-KKH) ile bağlantılı PAH çocuklarda pulmoner kan akımı neointimal lezyonlar 7, 8, 9 gelişmesi için gerekli tetikleyicisi olarak kabul edilir arttı. Sıçanlarda, artan pulmoner kan akışı abdominal aorta ve vena kava, ilk olarak 1990 10&#39;da tarif edilen bir teknik arasında bir şönt oluşturulması ile indüklenebilir. Artmış pulmoner akım oluşturmak için Alternatifler tek taraflı pnömonektomi veya pulmoner arter anastomoz 11 subklavyan tarafından uygulanır. Bu modellerin kavramsal dezavantajları nedeniyle ya da pulmoner vasküler iyatrojenik yaralanma pnömonektomi tarafından uyarılan kalan akciğer ve adaptif yolu aktivasyonu potansiyel telafi büyümesi oluşurpulmoner arter anastomoz, hem artmış pulmoner kan akımının etkilerini karıştırıcı. Bir aorta-kaval şant oluşturulur ve MCT ile tedavi edilen sıçanlarda ikinci vuruşu olarak uyarılan pulmoner kan akımını artar, karakteristik neointimal lezyonlar ortaya çıkar, ve artan sonra PAH ağır formu ve ilgili sağ ventrikül yetmezliği (RVF) 3 hafta geliştirmek 12 akar. Bu modelde PAH hemodinamik ilerlemesi ekokardiyografi ve sağ kalp kateterizasyonu in vivo değerlendirilebilir. Sağ kalp yetmezliği için damar histomorphology, damar duvar kalınlığı, arterioler tıkanıklığının derecesi ve parametreler PAH ex vivo karakterizasyonu ayağı oluşturur. Bu yöntem aorta-kaval şant (AC-şant) ameliyatı için ayrıntılı protokoller, sağ kalp kateterizasyonu ve damar histomorphology nitel ve nicel değerlendirmesini açıklar.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Shunt Surgery</td></tr><tr><td>Steril cerrahi eldiven</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Duratears Göz merhemi</td><td>Alcon</td><td>10380</td><td></td></tr><tr><td>Klorür-Heksidin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pamuklu çubuklar</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Histoakrilik doku yapıştırıcısı</td><td>B. Braun Medical</td><td>1050052</td><td></td></tr><tr><td>Silkam 5-0 sütürler siyah emilemeyen</td><td>B. Braun Medical</td><td>F1134027</td><td></td></tr><tr><td>Safil 4-0 sütürler menekşe emilebilir</td><td>B. Braun Medical</td><td></td><td></td></tr><tr><td>18 G iğne</td><td>Luer</td><td>NN1838R BD</td><td>ucu 45 derece bükülmüş dışa doğru</td></tr> delikli <tr><td>gazlı bezler 10 x 10 cm</td><td>Paul Hartmann</td><td>407825</td><td></td></tr><tr><td>Temgesic Buprenorphine</td><td>RB Pharmaceuticals</td><td>5429</td><td>deri altı enjeksiyon</td></tr><tr><td>Sodyum Klorür% 0.9</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Havalandırma maskesi Sıçan</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Scalple bıçağı</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Biemer kelepçe 18 mm, 5 mm açıklık ></td><td><a href="https://www.google.nl/url?sa=i&amp; rct=j& Q=& esrc=s& kaynak=görüntüler& cd=& cad=rja& uact=8& ved=0ahUKEwitqICpkITNAhWiL8AKHe6iCC8QjhwIBQ& url=http%3A%2F%2Fwww.agnthos.se%2Fquote%2Fquote%2Fcaturl%2Fid%2F242%2FBiemer& psig=AFQjCNEnfRXuMQ6Doi4_-2KMYu3qeRovMA& ust=1464777707579746">AgnTho</a></td><td>64-562</td><td></td></tr><tr><td>Isı matı</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kocher Kelepçe</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tıraş makinesi</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Sağ Kalp Kateterizasyonu</td></tr><tr><td>Steril cerrahi eldiven</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Göz merhemi</td><td>Duratears</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Klorür-Heksidin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pamuklu çubuklar</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gazlı bezler 10 x 10 cm</td><td>Paul Hartmann</td><td>407825</td><td></td></tr><tr><td>Silkam 5-0 sütürler siyah emilmeyen</td><td>B. Braun Medical</td><td>F1134027</td><td></td></tr><tr><td>İğnesi 20 G</td><td>Luer</td><td></td><td>Ucu hafifçe içe doğru bükülmüş</td></tr><tr><td>Kanül 20 G</td><td>Luer</td><td></td><td>kateter takmak için, uç 20 derecede önceden şekillendirilmiş</td></tr><tr><td>Silastik Kateter 15 cm uzunluğunda</td><td></td><td></td><td>0,5 mm top uçtan 2 mm</td></tr><tr><td>Basınç dönüştürücü</td><td>Ailtech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Başucu monitörü Cardiocap/5</td><td>Datex-Ohmeda</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tıraş makinesi</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>10 mL Şırınga</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Klorür %</td><td></td><td></td>0,9 <td>yıkama</td></tr><tr> için<td colspan="4"><güçlü>Vasküler Morfoloji</güçlü></td></tr><tr><td>50 mL Şırınga</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>%4 Formaldehit</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>18 G tüplü</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>kanül Verhoef boyama kiti</td><td>Sigma-Aldrich</td><td><a href="http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/ht254?lang=en&amp; region=NL">HT254</a></td><td>http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/ht254?lang=en&region=US</td></tr><tr><td>Dijital slayt tarayıcı</td><td>Hamamatsu</td><td>C9600</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Elastic (Bağ Dokusu Boması)&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>ab150667</td><td>http://www.abcam.com/elastic-connective-tissue-stain-ab150667.html 
http://www.abcam.com/ps/products/150/ab150667/documents/ab150667-Elastic%20Stain%20Kit%20(İnternet sitesi).pdf</td></tr></tbody></table>

akış kaynaklı pulmoner hipertansiyon için bir sıçan modelinde Şant cerrahisi, sağ kalp kateterizasyonu ve damar morfometri

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

Bu protokolde PAH, 60 mg / kg monokrotalin (MCT) enjeksiyonu ile aorto-kaval şant (MCT+Flow) yoluyla artan pulmoner kan akışının birleştirilmesiyle indüklenir. Şant, abdominal aorttan komşu kaval ven içine 18-G'lik bir iğne sokularak oluşturulur. Artmış pulmoner akış, erken medial hipertrofi ve ardından neointimal lezyonlar ve küçük pulmoner damarların ilerleyici oklüzyonu ile karakterize farklı hastalık ilerlemesi aşamalarına sahip ciddi bir PAH formu için temel bir tetikleyici olarak gösterilmiştir. Bu modelde sağ kalp ve pulmoner hemodinamiği ölçmek için sağ kalp kateterizasyonu, sağ juguler ven yoluyla sağ juguler ven yoluyla esnek bir top uçlu kateter içeren rijit bir kanülün sağ ventriküle yerleştirilmesiyle gerçekleştirilir. Kateter daha sonra ana ve daha distal pulmoner arterlere ilerletilir. Pulmoner vasküler sistemin histopatolojisi kalitatif olarak, pre- ve intra-asiner damarların muskülarizasyon derecesi ve neointima varlığı açısından skorlanmasıyla ve kantitatif olarak duvar kalınlığı, duvar-lümen oranları ve oklüzyon skoru ölçülerek değerlendirilir.

Örnek sonuçlar Şekil 4&#39;te sunulmaktadır. Kontrol grubu (n = 3), MF8 (n = 5), MF14 (n = 5), MF28 (n = 5), ve MF-RVF (: sunulan sonuçlar MCT + aşağıdaki grupları Lewis sıçanlarında akış özellikleri gösterir n = 10). İstatistiksel analizler Bonferroni düzeltmesi ile tek-yönlü ANOVA ile yapılmıştır. 60 / kg MCT mg ve sistolik sağ ventrikül basıncında ortalama artış (SRVP) (23 ± 6 56 ± 11 mmHg), sistolik pulmon...

Bu protokol, sıçanlarda akışa bağlı pulmoner arteriyel hipertansiyon (PAH) için bir model oluşturmak için cerrahi bir prosedürü ve bu modeldeki temel hemodinamik ve histolojik uç noktaları analiz etme prosedürlerini açıklar.

Akış kaynaklı pulmoner hipertansiyon için bir Sıçan Modelinde Şant Cerrahisi, Sağ Kalp kateterizasyonu ve Damar Morfometri

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Bu prosedürlerin genel amacı, sıçanlarda akımla indüklenen pulmoner arteriyel hipertansiyon için bir model oluşturmak ve sağ kalp kateterizasyonu ve vasküler morfometri ile temel hemodinamik ve histolojik sonlanım noktalarını analiz etmektir. İnsan pulmoner arteriyel hipertansiyonuna benzer yeni bir intimal tip vasküler yeniden şekillenme ile karakterize edilen ve klinik olarak iyi tanınan bir tetikleyici, yani artmış pulmoner kan akışı tarafından indüklenen, akışla ilişkili pulmoner hipertansiyon için bir sıçan modelinin oluşturulmasını sunuyoruz. Bu özellikler, bu modeldeki bulguların insan hastalığına çevrilmesini artıracaktır.Ayrıca kantitatif morfometri kullanarak histopatolojinin hemodinamik değerlendirmesi ve karakterizasyonu için standart yöntemler gösteriyoruz. Bu tekniklerin etkileri, yeni tedavi stratejilerinin keşfi ve değerlendirilmesine kadar uzanır ve pulmoner hemodinamik ve vasküler morfoloji üzerindeki spesifik etkilerin değerlendirilmesine izin verir. Prosedürleri göstermek, bu laboratuvardan mikro cerrahlar olan Annemieke Smit-Van Oosten ve Michel Weij olacak.Ameliyata başlamadan önce, anestezi uygulanmış bir sıçanın cildini dezenfeksiyon için klorür hekzaden ile ovalayın ve ameliyat sonrası analjezi için deri altına buprenorfin enjekte edin. Daha sonra, karın boyunca, diyaframın bir santimetre altından başlayarak cinsel organın hemen üstüne kadar uzanan bir orta hat kesisi yapmak için makas kullanın. Bağırsakları% 0.9 salin ile ıslatılmış steril bir gazlı beze hayvanın sol tarafına aktarın ve organı daha ıslak, steril gazlı bezle örtün.Abdominal aortu ve vena kava'yı çevreleyen dokulara alt bağlayan zarları ayırmak için yeni swablar kullanın. Diseksiyon mikroskobu altında, iğnenin yerleştirileceği aortun sağ tarafındaki bifurkasyonun hemen üzerindeki perivasküler aort yağını çıkarmak için kıymık forseps kullanın. Daha sonra, bir beamer klemp için alan yaratmak için aort ve vena kava'yı, iğne yerleştirme bölgesinden iki milimetre üstünden ayırın.Şimdi aortun etrafına gevşek bir 5-O sütür yerleştirin ve insizyondan daha üst ligatür üzerinde gerginlik oluşturmak için dikişin üzerine bir Kocher klempi yerleştirin. Beamer klempini sütürün hemen üstüne yerleştirin ve akışı engellemek için vena kava'yı mümkün olduğunca distal olarak sıkıştırmak için yeni bir takas kullanın. Daha sonra, 18 gauge bir iğneyi, eğim dışa doğru yerleştirilecek şekilde 45 derecelik bir açıyla bükün ve iğneyi hayvana 90 derece tutarak, iğne ucunu, eğim sola bakacak şekilde çatallanmanın hemen üzerindeki aort içine yerleştirin.Aortu ve vena kava'yı çevreleyen zarları, şant için yerleştirme alanının iyi bir görünürlüğünü sağlayacak kadar inceleyin, çünkü aşırı diseksiyon şantın sızmasına neden olacaktır. İğnenin ucunu sola doğru manipüle edin ve iğneyi damar içinde görülene kadar vena kava içine sokun. Trombozu önlemek için, kalan kanı aorttan yerleştirme bölgesinden dışarı itmek için yeni bir pamuklu çubuk kullanın ve şantın etrafındaki alanı kurutmak için steril bir gazlı bez kullanın.İğneyi çıkarın ve hemen delinme bölgesine bir damla doku yapıştırıcısı sürün. Daha sonra klempi aorttan çıkarın ve aort promikstal üzerindeki ligatürü şanta manuel olarak serbest bırakın. Şantın distalindeki vena kava parlak kırmızı renkte olmalı ve şant bölgesinde türbülans oluşturmalıdır.Şantı doğruladıktan sonra, bağırsakları karın boşluğuna geri koyun ve kas ve cilt katmanlarını kapatmak için emilebilir 4-0 dikişler kullanın. Daha sonra anestezi iyileşmesi için hayvanı% 100 oksijenle havalandırın. Sağ kalp kateterizasyonu için boynu klorür hekzaden ile dezenfekte edin ve 10 numara neşter bıçağı kullanarak boynun sağ ventral tarafında sağ köprücük kemiğinden mandibular kemiğe kadar 1,5 santimetrelik bir kesi yapın.Diseksiyon mikroskobu altında, dokuyu yaymak için makas kullanın, ardından juguler ven görünene kadar dokuyu nazikçe ayırmak için cımbız kullanın. Kıymık forseps kullanarak juguler ven etrafındaki zarları inceleyin. Daha sonra damarın etrafına gevşek bir 5-O sütür yerleştirin ve damar üzerindeki gerilimi artırmak için ligatürü ventilasyon maskesine bantlayın.Yerleştirme yerinin akış aşağısında, damarın etrafına gevşek bir bağ yerleştirin. Ardından, eğim içe bakacak şekilde 20 gauge iğnenin ucunu hafifçe bükmek için forseps kollarını kullanın ve iğnenin ucunu damarın içine sokun. Damarın içine hızlı bir şekilde kateter içeren bir kanül yerleştirin ve kanülü yerine sabitlemek için kanülün etrafındaki aşağı akış bağını kapatarak iğneyi çıkarın.Şimdi kanülü ve kateteri şah damarına iletin ve kanülü köprücük kemiğinin altında sağ atriyuma girmek için manevra yapın. Sağ ventriküle girmek için kanülün ucunu kalbe doğru tutun. Yatak başı monitöründe bir sağ ventrikül basınç eğrisi görünmelidir.Sağ ventrikül basınç eğrisi sabit olduğunda, sistolik ve diyastolik sağ ventrikül basıncını kaydedin ve kanülün ucunu sola ve yukarı doğru manipüle edin. Kateteri kanül içinde ilerletin, ardından kateteri ana pulmoner artere ilerletin. Pulmoner arter basınç eğrisi sabit olduğunda, sistolik, diyastolik ve ortalama pulmoner arter basıncı olanları kaydedin.Daha sonra kateterin ucundaki top bir pulmoner arterde sıkışana kadar kateteri kanül içinde ilerletin. Basınç eğrisindeki düşüş yatak başı monitöründe gözlenmelidir. Kama basınç eğrisi sabit olduğunda, sistolik, diyastolik ve ortalama kama basınçlarını kaydedin.Ardından kateteri yavaşça geri çekin ve başucu monitöründeki eğrilerin rehberliğinde, PA ve RV basıncı için ilgili değerleri kaydedin. Kateter sağ ventriküle ulaştığında, kanülü ve kateteri hafifçe geri çekin ve ortalama sağ atriyal basıncı ölçün. Bu temsili deneyde, MCT uygulamasından 28 gün sonra ve artmış pulmoner kan akışı, sistolik sağ ventrikül, sistolik pulmoner arter ve ortalama pulmoner arter basınçlarında ortalama bir artış gözlenir.Sağ ventrikül ile sol ventrikül ve septal ağırlık oranları, tedaviden sonraki 14. günden sağ ventrikül yetmezliği aşamasına kadar önemli ölçüde artar ve bu da sağ ventrikül hipertrofisine işaret eder. Karaciğerin ıslak-kuru oranı da sağ ventrikül yetmezliği aşamasında önemli ölçüde artar, bu da karaciğerin ödemini ve konjestif sağ ventrikül yetmezliğini gösterir. Pulmoner arter hipertansiyon ilerlemesi sırasında interasiner damarların kaslaşması giderek artar ve tedavinin hemen hemen tüm arteriyollerinde tedaviden 14. gün sonra toplam kas ortamı sergiler ve arteriyollerin neredeyse tamamı hastalığın son evresinde kaslanır.Ayrıca, neo-intimal lezyonlar ilk olarak 21. günde gözlenir ve tüm arteriyollerin yaklaşık% 65'i hastalığın ilerlemesinin sonunda neo-intimal bir tabaka sergiler. Bu, hastalığın son aşamasında lümenin %60'ına kadar tıkanan ilerleyici vasküler tıkanıklık ile sonuçlanır. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknikler teknik başına 20 dakika içinde tamamlanabilir.Bu prosedürü takiben, sağ ventrikül fonksiyonu ile ilgili ek soruları yanıtlamak için eko-kardiyografi veya basınç hacmi döngüsü gibi diğer yöntemler uygulanabilir. Geliştirildikten sonra, bu teknik, pulmoner arteriyel hipertansiyon alanındaki araştırmacıların, artan kan akışının pulmoner vaskülatür üzerindeki etkilerini keşfetmelerinin yolunu açmaktadır. Bu videoyu izledikten sonra, sıçanlarda akışa bağlı pulmoner arteriyel hipertansiyon için bir modelin nasıl oluşturulacağını ve temel hemodinamik ve histolojik uç noktalarının nasıl analiz edileceğini iyi anlamış olmalısınız.

shunt-surgery-right-heart-catheterization-vascular-morphometry-rat

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu makalede, sağ ventrikül boyut ve farelerde pulmoner hipertansiyon ekokardiyografik değerlendirilmesi için bir protokol sağlar. Uygulamalar transgenik ve kardiyomiyopati ve pulmoner vasküler hastalığı toksin kaynaklı fare modellerinde fenotip kararlılık ve seri değerlendirmesini içerir.

Farelerde Sağ Kalp Ekokardiyografik Değerlendirilmesi

Pulmoner arteriyel hipertansiyon (PAH), pulmoner arteriyollerin obliterasyonuna ve sağ ventrikül yetmezliği gelişmesine yol açan bir hastalıktır. PAH'ın kemirgen modelleri, PAH'ın patofizyolojisini anlamada kritik öneme sahiptir. Burada fare ve sıçanlarda sağ kalp kateterizasyonu ve ekokardiyografi ile hemodinamik karakterizasyonu gösterildi.

Pulmoner Hipertansiyon Kemirgen Modeller Hemodinamik Karakterizasyonu

Sol atriyal stenoz (LAS), Grup 2 pulmoner hipertansiyon (PH) ve pulmoner venöz arterialization altında yatan mekanizmaları eğitim için kullanılan yeni bir cerrahi tekniktir. Burada, bir titanyum klibi kullanarak pulmoner venöz arterialization neden ve PH kutusundaki bir fare orta sol atriyum sıkmak için bir protokol mevcut.

Sol atriyal stenoz indüklenen pulmoner venöz Arterialization ve Grup 2 sıçan pulmoner hipertansiyon

Kemirgen sol pneumonectomy pulmoner hipertansiyon araştırma değerli bir tekniktir. Burada, fare pneumonectomy yordam ve ameliyat sonrası bakım minimal morbidite ve mortalite sağlamak için açıklamak için bir iletişim kuralı mevcut.

Sıçanlarda pulmoner hipertansiyon bir Model olarak Monocrotaline ya da Sügen ile birlikte sol Pneumonectomy

Burada, açık göğüs cerrahisi yaklaşımı ile farelerde sağ ventrikül ve pulmoner arterin invaziv hemodinamik değerlendirmesini yapmak için bir protokol salıyoruz.

Farelerde Sağ Ventrikül Sistemi ve Hipoksiye Bağlı Pulmoner Arteriyel Hipertansiyon için İnvaziv Hemodinamik Değerlendirme

Bu protokol, sol kalp hastalığına bağlı pulmoner hipertansiyonun sıçan modelinde asendan aort bandını çıkarmak için cerrahi bir prosedürü tanımlamaktadır. Bu teknik, pulmoner dolaşımda ve sağ kalpte ters yeniden şekillenmenin endojen mekanizmalarını inceler, böylece pulmoner hipertansiyon ve / veya sağ ventrikül disfonksiyonunu tersine çevirmek için stratejileri bilgilendirir.

Sıçanlarda Aort Debandingi ile Sol Kalp Hastalığına Bağlı Pulmoner Hipertansiyonda Ters Vasküler Yeniden Şekillenme Modeli

Bu protokol, pulmoner arteriyel hipertansiyonun sıçan modelinde sağ ventrikül morfolojisinin ve fonksiyonunun ekokardiyografik karakterizasyonunu açıklamaktadır.

Pulmoner Arteriyel Hipertansiyonun Bir Sıçan Modelinde Sağ Ventrikül Fonksiyonunun Kapsamlı Ekokardiyografik Değerlendirmesi

Bu protokol, farelerde çoklu intravenöz bolus dozu uygulaması ve invaziv hemodinamik izleme yürütmek için adım adım bir prosedür sağlar. Araştırmacılar bu protokolü pulmoner arter hipertansiyonu için gelecekteki terapötik bileşik taraması için kullanabilirler.

Hipoksi ile İndüklenen Fare Pulmoner Arter Hipertansiyon Modelinde Çoklu İntravenöz Bolus Dozu ve İnvaziv Hemodinamik Değerlendirme

Sağ kalp yetmezliği (RHF), ventriküler ve atriyal fonksiyon bozukluğuna yol açan sağ taraflı kardiyak dilatasyon ve hipertrofi ile karakterizedir. RHF ile ilişkili kardiyopulmoner durumlara kardiyak aritmi riskinde artış eşlik eder. Bu makale, gelişmiş ventriküler ve atriyal aritmogenez ile ilişkili pulmoner arter bantlamasına bağlı RHF'nin standart bir modelini açıklamaktadır.

Pulmoner Arter Bantlaması Kullanılarak Sağ Taraflı Kardiyak Yeniden Şekillenme ve Aritminin Sıçan Modeli

Sağ ventrikül fonksiyonunun değerlendirilmesi için ayrıntılı yöntemlerin sunulması, pulmoner hipertansiyon araştırmalarının kalitesini ve güvenilirliğini artıracak, gelecekteki çalışmalar için sağlam bir çerçeve sunacak ve farklı laboratuvarlarda tekrarlanabilirliği artıracaktır.

Pulmoner Arteriyel Hipertansiyonun Deneysel Modellerinde Sağ Ventrikül Fonksiyonunun Değerlendirilmesi

Protokol, farelerde akciğer arter basıncını tespit etmek için doğru kalp kateterizasyon yönteminin kullanılması deneyimine ayrıntılı bir giriş sunar; bu da doğru veri elde edilmesine ve deneyin başarı oranını artırmaya yardımcı olur. Bu yöntem, farklı laboratuvarlarda deneylerin tekrarlanabilirliğini de artırır.

Sağ kalp kateterizasyonu kullanılarak sıçanlarda pulmoner arter basıncının ölçülmesi

Keşfedin akış kaynaklı pulmoner arteriyel hipertansiyon için sıçan modeli oluşturma, sağ kalp kateterizasyonu ve damar morfometri yöntemleri. Bu teknikler hemodinamik değerlendirme ve histopatolojik analiz için standartlaştırılmış prosedürler sunar.

Akış kaynaklı pulmoner hipertansiyon için bir Sıçan Modelinde Şant Cerrahisi, Sağ Kalp kateterizasyonu ve Damar Morfometri

Daha fazla video keşfet