Akış kaynaklı pulmoner hipertansiyon için bir Sıçan Modelinde Şant Cerrahisi, Sağ Kalp kateterizasyonu ve Damar Morfometri

Bu prosedürlerin genel amacı, sıçanlarda akımla indüklenen pulmoner arteriyel hipertansiyon için bir model oluşturmak ve sağ kalp kateterizasyonu ve vasküler morfometri ile temel hemodinamik ve histolojik sonlanım noktalarını analiz etmektir. İnsan pulmoner arteriyel hipertansiyonuna benzer yeni bir intimal tip vasküler yeniden şekillenme ile karakterize edilen ve klinik olarak iyi tanınan bir tetikleyici, yani artmış pulmoner kan akışı tarafından indüklenen, akışla ilişkili pulmoner hipertansiyon için bir sıçan modelinin oluşturulmasını sunuyoruz. Bu özellikler, bu modeldeki bulguların insan hastalığına çevrilmesini artıracaktır.

Ayrıca kantitatif morfometri kullanarak histopatolojinin hemodinamik değerlendirmesi ve karakterizasyonu için standart yöntemler gösteriyoruz. Bu tekniklerin etkileri, yeni tedavi stratejilerinin keşfi ve değerlendirilmesine kadar uzanır ve pulmoner hemodinamik ve vasküler morfoloji üzerindeki spesifik etkilerin değerlendirilmesine izin verir. Prosedürleri göstermek, bu laboratuvardan mikro cerrahlar olan Annemieke Smit-Van Oosten ve Michel Weij olacak.

Ameliyata başlamadan önce, anestezi uygulanmış bir sıçanın cildini dezenfeksiyon için klorür hekzaden ile ovalayın ve ameliyat sonrası analjezi için deri altına buprenorfin enjekte edin. Daha sonra, karın boyunca, diyaframın bir santimetre altından başlayarak cinsel organın hemen üstüne kadar uzanan bir orta hat kesisi yapmak için makas kullanın. Bağırsakları% 0.9 salin ile ıslatılmış steril bir gazlı beze hayvanın sol tarafına aktarın ve organı daha ıslak, steril gazlı bezle örtün.

Abdominal aortu ve vena kava'yı çevreleyen dokulara alt bağlayan zarları ayırmak için yeni swablar kullanın. Diseksiyon mikroskobu altında, iğnenin yerleştirileceği aortun sağ tarafındaki bifurkasyonun hemen üzerindeki perivasküler aort yağını çıkarmak için kıymık forseps kullanın. Daha sonra, bir beamer klemp için alan yaratmak için aort ve vena kava'yı, iğne yerleştirme bölgesinden iki milimetre üstünden ayırın.

Şimdi aortun etrafına gevşek bir 5-O sütür yerleştirin ve insizyondan daha üst ligatür üzerinde gerginlik oluşturmak için dikişin üzerine bir Kocher klempi yerleştirin. Beamer klempini sütürün hemen üstüne yerleştirin ve akışı engellemek için vena kava'yı mümkün olduğunca distal olarak sıkıştırmak için yeni bir takas kullanın. Daha sonra, 18 gauge bir iğneyi, eğim dışa doğru yerleştirilecek şekilde 45 derecelik bir açıyla bükün ve iğneyi hayvana 90 derece tutarak, iğne ucunu, eğim sola bakacak şekilde çatallanmanın hemen üzerindeki aort içine yerleştirin.

Aortu ve vena kava'yı çevreleyen zarları, şant için yerleştirme alanının iyi bir görünürlüğünü sağlayacak kadar inceleyin, çünkü aşırı diseksiyon şantın sızmasına neden olacaktır. İğnenin ucunu sola doğru manipüle edin ve iğneyi damar içinde görülene kadar vena kava içine sokun. Trombozu önlemek için, kalan kanı aorttan yerleştirme bölgesinden dışarı itmek için yeni bir pamuklu çubuk kullanın ve şantın etrafındaki alanı kurutmak için steril bir gazlı bez kullanın.

İğneyi çıkarın ve hemen delinme bölgesine bir damla doku yapıştırıcısı sürün. Daha sonra klempi aorttan çıkarın ve aort promikstal üzerindeki ligatürü şanta manuel olarak serbest bırakın. Şantın distalindeki vena kava parlak kırmızı renkte olmalı ve şant bölgesinde türbülans oluşturmalıdır.

Şantı doğruladıktan sonra, bağırsakları karın boşluğuna geri koyun ve kas ve cilt katmanlarını kapatmak için emilebilir 4-0 dikişler kullanın. Daha sonra anestezi iyileşmesi için hayvanı% 100 oksijenle havalandırın. Sağ kalp kateterizasyonu için boynu klorür hekzaden ile dezenfekte edin ve 10 numara neşter bıçağı kullanarak boynun sağ ventral tarafında sağ köprücük kemiğinden mandibular kemiğe kadar 1,5 santimetrelik bir kesi yapın.

Diseksiyon mikroskobu altında, dokuyu yaymak için makas kullanın, ardından juguler ven görünene kadar dokuyu nazikçe ayırmak için cımbız kullanın. Kıymık forseps kullanarak juguler ven etrafındaki zarları inceleyin. Daha sonra damarın etrafına gevşek bir 5-O sütür yerleştirin ve damar üzerindeki gerilimi artırmak için ligatürü ventilasyon maskesine bantlayın.

Yerleştirme yerinin akış aşağısında, damarın etrafına gevşek bir bağ yerleştirin. Ardından, eğim içe bakacak şekilde 20 gauge iğnenin ucunu hafifçe bükmek için forseps kollarını kullanın ve iğnenin ucunu damarın içine sokun. Damarın içine hızlı bir şekilde kateter içeren bir kanül yerleştirin ve kanülü yerine sabitlemek için kanülün etrafındaki aşağı akış bağını kapatarak iğneyi çıkarın.

Şimdi kanülü ve kateteri şah damarına iletin ve kanülü köprücük kemiğinin altında sağ atriyuma girmek için manevra yapın. Sağ ventriküle girmek için kanülün ucunu kalbe doğru tutun. Yatak başı monitöründe bir sağ ventrikül basınç eğrisi görünmelidir.

Sağ ventrikül basınç eğrisi sabit olduğunda, sistolik ve diyastolik sağ ventrikül basıncını kaydedin ve kanülün ucunu sola ve yukarı doğru manipüle edin. Kateteri kanül içinde ilerletin, ardından kateteri ana pulmoner artere ilerletin. Pulmoner arter basınç eğrisi sabit olduğunda, sistolik, diyastolik ve ortalama pulmoner arter basıncı olanları kaydedin.

Daha sonra kateterin ucundaki top bir pulmoner arterde sıkışana kadar kateteri kanül içinde ilerletin. Basınç eğrisindeki düşüş yatak başı monitöründe gözlenmelidir. Kama basınç eğrisi sabit olduğunda, sistolik, diyastolik ve ortalama kama basınçlarını kaydedin.

Ardından kateteri yavaşça geri çekin ve başucu monitöründeki eğrilerin rehberliğinde, PA ve RV basıncı için ilgili değerleri kaydedin. Kateter sağ ventriküle ulaştığında, kanülü ve kateteri hafifçe geri çekin ve ortalama sağ atriyal basıncı ölçün. Bu temsili deneyde, MCT uygulamasından 28 gün sonra ve artmış pulmoner kan akışı, sistolik sağ ventrikül, sistolik pulmoner arter ve ortalama pulmoner arter basınçlarında ortalama bir artış gözlenir.

Sağ ventrikül ile sol ventrikül ve septal ağırlık oranları, tedaviden sonraki 14. günden sağ ventrikül yetmezliği aşamasına kadar önemli ölçüde artar ve bu da sağ ventrikül hipertrofisine işaret eder. Karaciğerin ıslak-kuru oranı da sağ ventrikül yetmezliği aşamasında önemli ölçüde artar, bu da karaciğerin ödemini ve konjestif sağ ventrikül yetmezliğini gösterir. Pulmoner arter hipertansiyon ilerlemesi sırasında interasiner damarların kaslaşması giderek artar ve tedavinin hemen hemen tüm arteriyollerinde tedaviden 14. gün sonra toplam kas ortamı sergiler ve arteriyollerin neredeyse tamamı hastalığın son evresinde kaslanır.

Ayrıca, neo-intimal lezyonlar ilk olarak 21. günde gözlenir ve tüm arteriyollerin yaklaşık% 65'i hastalığın ilerlemesinin sonunda neo-intimal bir tabaka sergiler. Bu, hastalığın son aşamasında lümenin %60'ına kadar tıkanan ilerleyici vasküler tıkanıklık ile sonuçlanır. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknikler teknik başına 20 dakika içinde tamamlanabilir.

Bu prosedürü takiben, sağ ventrikül fonksiyonu ile ilgili ek soruları yanıtlamak için eko-kardiyografi veya basınç hacmi döngüsü gibi diğer yöntemler uygulanabilir. Geliştirildikten sonra, bu teknik, pulmoner arteriyel hipertansiyon alanındaki araştırmacıların, artan kan akışının pulmoner vaskülatür üzerindeki etkilerini keşfetmelerinin yolunu açmaktadır. Bu videoyu izledikten sonra, sıçanlarda akışa bağlı pulmoner arteriyel hipertansiyon için bir modelin nasıl oluşturulacağını ve temel hemodinamik ve histolojik uç noktalarının nasıl analiz edileceğini iyi anlamış olmalısınız.