Koloni Düzeyde Bireysel olan Bal Arısı Kalkınma Çevre Kimyasalların Etkisinin Değerlendirilmesi

Bu deneyin genel amacı, çevredeki pestisit kalıntılarının arı kovanı kolonilerinin doğal durumundaki bireysel bal arılarını nasıl etkilediğini değerlendirmektir. Bu yöntemin temel avantajı, pestisitlerin veya diğer ilgili kirleticilerin hem bireysel bal arıları hem de tüm koloniler üzerindeki etkilerini araştırmasıdır. Bu yöntemin görsel olarak gösterilmesi kritiktir, çünkü pupaların manipülasyonu kırılgan oldukları için zordur.

Prosedürü göstermek, laboratuvarımdan bir doktora öğrencisi olan Ko Chong-Yu olacak. Deneyden önce, her koloniye bir litre% 50 şeker şurubu verin. Yiyecek haznesini haftalık olarak yenileyin, sağlıklı bir kolonide dokuz çerçeve arı peteği ve yumurtlayan bir kraliçe olacaktır.

Başlamak için, kolonideki ana arıyı bulun ve koloninin onun tarafındaki en az bir çerçeveyi boş bir çerçeve ile değiştirin. Ardından, kraliçeyi en az bir boş çerçeve içeren dört çerçeveli bir bölüme izole etmek için kraliçe dışlayıcılarını yerleştirin. Ertesi gün, çerçevelerde taze bırakılmış yumurta olup olmadığını kontrol edin ve yumurtaları 72 saat boyunca kraliçeden ayırın.

Daha sonra bu çerçeveleri çıkarın, işçi arıları fırçalayın ve kuluçka hücrelerindeki larvaları tedavi etmeye hazırlanın. Her tedavi için rastgele seçilen 50 günlük larvayı şeffaf slaytlarla çerçeveye yerleştirin. Slaytları raptiye ile sabitleyin, ardından kalıcı işaretleyici ile slaytlar üzerinde tanımlayıcı bilgiler yapın.

Şimdi 35 santigrat dereceye kadar ısıtılmış BLD kullanarak, 100 mL hacimlerde milyonda 0.1 ila 100 parça arasında değişen farklı konsantrasyonlarda PPN tedavisi yapın. Önümüzdeki üç gün boyunca, kuluçka hücre gruplarını tedavi edin. Larvaları tedavi etmek için onları ortaya çıkarın ve her kuluçka hücresine 10 mikrolitre PPN BLD çözeltisi ekleyin.

Ertesi gün 10 mikrolitre tedavi solüsyonu kullanarak tedaviyi tekrarlayın ve üçüncü gün 20 mikrolitre tedavi solüsyonu kullanarak tedaviyi tekrarlayın. Üçüncü tedaviden sonra, kolonide gelişmelerine izin verin Deneysel tasarımda, her tedavi grubunu farklı koloniler kullanarak dört kez tekrarlayın. Yedinci günde, PPN ile tedavi edilen larvaları inceleyin, tedavi gruplarındaki ölüm ve kapak oranlarını kaydedin.

13. günde, her tedavi grubunun eklosiyon oranını kaydedin. İlk olarak, arı mumunu kapaklı kuluçka hücrelerinden çıkarın. Daha sonra pupaları çok hafif tutmak için uçlu cımbız kullanarak çıkarın ve nazikçe dışarı çekin.

Pupaları çıkarırken, baş ve göğüs kafesi arasındaki tutuşu kullanın ve pupaları çok nazikçe çıkarın. Deneyi çalıştırmadan önce en az% 90'lık bir hayatta kalma oranı elde etmek için birçok kez pratik yapmak gerekecektir. Pupaları, iki kat laboratuvar dokusu ile kaplı 24 kuyulu doku kültürü plakasına aktarın.

Aktarım sırasında meydana gelen ölüm oranındaki herhangi bir hasarı not ettiğinizden emin olun. Kültür plakalarını çıkana kadar% 70 bağıl nem ile 34 santigrat derecede tutun. Önümüzdeki sekiz gün boyunca, eklosiyon oranını kaydedin.

Ana arının en az bir boş çerçeve içeren dört çerçeveli bir bölümle sınırlı olduğu sağlıklı bir dokuz çerçeve kolonisi ile daha önce olduğu gibi kurun. Dört çerçeve kesitli kısım A'yı ve beş çerçeve kesitli kısım B.Be ana arı dışlayıcılarının koloniyi tamamen böldüğünden emin olun, böylece ana arı bölümler arasında hareket edemez. Bu bölünme, bir günlük larva gruplarını toplamak için hayati önem taşır.

Ertesi gün, 100 kuluçka hücresinden oluşan bir grubu daha önce olduğu gibi taze bırakılmış yumurtalarla etiketleyin. Bu birinci grup, üç gün boyunca A bölümüne geri koyun. İki gün sonra, ana arıyı yumurtlamak için B kısmına aktarın.

Ertesi gün, B bölümündeki 100 taze yumurtlanmış yumurtayı ikinci grup olarak etiketleyin ve bölümü kolonideki B bölümüne geri koyun. Şimdi başka bir grup oluşturmak için işlemi tekrarlayın ve üç günlük aralıklarla bir günlük yumurtalardan dokuz grup atanana kadar her üç günde bir ana arıyı A bölümü ile B bölümü arasında değiştirmeye devam edin. Gelişimin ilk beş günü boyunca, etiketli her bir kuluçka hücresi grubunun kuluçka oranını puanlayın.

11 günlük gelişimden sonra, her gruptaki sınırlı kuluçka hücrelerinin sayısını kaydetmeye başlayın. Deneyin 13. gününde, koloniyi milyonda 10 veya 100 parça PPN içeren% 50 şeker şurubu ile tedavi edin. Bir litre tedavi içeren bir besleme kutusu yükleyin ve koloniye bağlayın.

Birinci grup, bu hücrelerin artık kapatılması gerektiği için tedavi edilmemiş bir kontroldür. 17. günden başlayarak, her grubun eklosiyon oranını kaydedin. Bunu yapmak için, larvaları daha önce gösterildiği gibi 24 oyuklu bir plakaya aktarın, daha sonra plakayı inkübe edin ve daha sonra eklosiyon oranını kaydedin.

49 gün sonra, dokuz grubun tümünden elde edilen eklosiyon verileri bilinmelidir. Bireysel kuluçka hücreleri, PPN BLD ile tarif edildiği gibi tedavi edildi. Pestisitin larva dönemi bal arıları üzerindeki olumsuz etkisi kolayca gözlendi ve doza bağımlıydı.

Bu etkiler melanizasyon ve kanat deformasyonunu içeriyordu. Çevresel PPN kalıntısından muzdarip bal arısı kolonilerini simüle etmek için, tüm kolonilere PPN şurubu verildi. Birinci grup, bu arıların tedaviden önce yetişkinlere geliştiği için bir kontroldür.

İkinci ve üçüncü grup başlangıçta larva aşamasında etkilendi ve dört ila dokuzuncu gruplar başlangıçta yumurta olarak etkilendi. PPN tedavileri ile tarama, kapaklama, eklosyon ve deformitelerde değişiklikler meydana geldi. PPN'nin milyonda 100 parçası, kuluçka oranı dışında, milyonda 10 parçadan daha etkiliydi.

Ayrıca, tedavilerden sonra birçok pupa siyah kütiküllerle veya çıkamayarak öldü. 100 ppm PPN tedavisinde, kapaklı hücreler yok edildi ve yaralı pupalar koloniden çıkarıldı. Bir kez ustalaştıktan sonra, koloni tedavi prosedürü yaklaşık bir ay içinde yapılabilir ve pupanın günlük manipülasyonu yaklaşık iki saat içinde tamamlanabilir.

Bu prosedürü denerken, bir deney yapmadan önce koloninizin durumunu düzenli olarak kontrol etmeyi ve pupaları kullanma konusunda iyi bir pratik yapmayı unutmamak önemlidir. Arı zehri alerjileri nedeniyle bal arıları ile çalışmanın tehlikeli olabileceğini unutmayın. Bu işlem yapılırken koruyucu kıyafet giymek gibi önlemler her zaman alınmalıdır.