Name: 96 oyuklu bir plaka içerisinde hücre gücü / yara iyileşme gerçekleştirmek için bir cihaz (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-03-07T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 46 s
Description: Öğrenin, sekiz kanallı mekanik hücre yaralayıcı kullanarak 96 kuyucuklu plakada yara iyileşme deneyiyle hücre göçünü hızlı ve ekonomik bir şekilde nasıl ölçeceğinizi. Bu yöntem, kanser ve dermatoloji çalışmalarında yüksek verimli analiz sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar bu wounder prototipini yapımında Sayın Tam Po Leung, Bay Wong Chi Kin ve teknik becerileri Fen Fakültesi Atölyesi teknik personel, Hong Kong Baptist Üniversitesi ve danışmanlık teşekkür etmek istiyorum.

Wounder parçaları 1. Giriş (Şekil 1) <ol><li> eşit mesafelerde yaralama işaretçilerine sabitleyerek pim tutucu hazırlayın. pipet uçları tutun ve yukarı ve aşağı ayarlanabilir yaralama işaretçilerine hareket ettirerek ucu yüksekliğini ayarlayın. </li><li> 96-kuyu kültür plakaları farklı markalarda ayarlanabilir rehberlik-bar Fit ve yaralama alanı sabit bir pozisyonda olduğundan emin olun. </li><li> altıgen vidayı sıkarak ayarlanabilir yaralama pimini sabitleyin. iki ucunda altıgen başlı kapaklar sıkarak pozisyonda rehberlik-bar Fix. </li></ol> 2. Pin Tutucu genişliği Ayar (Şekil 2) <ol><li> M5 altıgen anahtar ile altıgen başlı kapaklarını gevşetin. </li><li> kılavuz çubukları 96 oyuklu bir kültür plakasına genişliği ile mükemmel uyum sağlar ve böylece çivili her iki taraf için halkalar ayarlama uygun sayıda yerleştirin. NOT: Corning ve Iwaki plakaları büyük halkalar 1 çift ve küçük halkalar 1 çift gerektirir. Şahin ve Nunc plates büyük halkalardan 1 çift gerekir. </li><li> altıgen soket kafası sıkın rehberlik çubuğu düzeltmek için kapaklar. </li></ol> 3. Rehberlik Barlar ayarlanması (Şekil 3) <ol><li> Steril 10-ul plastik pipet uçları ile yaralama pimlerini. </li><li> M5 altıgen anahtar ile altıgen başlı kapaklarını gevşetin. </li><li> wounder tutun ve 96 bölümlü kültür plakasının bir kolonuna yaralama işaretçilerini daldırın. </li><li> ancak kuyu alt dokunmak tüm ipuçları kadar yol gösterici çubukların yüksekliğini ayarlayın. </li><li> altıgen başlı kapaklarını sıkıştırın. wounder şimdi mükemmel kültür plaka üzerinde ve işaretçilerine kuyuların ortasında iyi bir konuma olduğundan oturduğundan emin olun. </li></ol> Pins 4. Kalibrasyon <ol><li> Düz steril bir yüzey (yani Petri kabı) dik wounder tutun ve M3 altıgen anahtar ile tüm altıgen vidayı gevşetin. </li><li> eşit düz steril yüzeyine dokunmayın tüm ipuçları kadar wounder dokunun. &lt;/ Li&gt; <li> pozisyonunda işaretçilerine kilitlemek için tekrar altıgen vidalarını sıkın. </li><li> Düz steril bir yüzeye hafifçe wounder dokunarak her ucu düzgünlüğü kontrol edin. </li></ol> 5. Kaşıma Hücre Tek tabakalı (Şekil 4) <ol><li> % 0.1 jelatin kaplı 96-iyi hücre kültür plakası üzerine tohum insan umbilikal damar endotelyal hücreleri. Ortama 199 Kültür hücreleri,% 20 ısı ile etkisiz hale getirilen fötal sığır serumu,% 1 penisilin / streptomisin ve 0.09 g / L heparin ile takviye edilmiştir. gece boyunca, kullanılmadan önce 37 ° C &#39;de,% 5 karbon dioksit ile nemlendirilmiş bir kuluçka makinesi içinde hücreleri korumak. Hücreler yaralama önce% 100 confluency ulaşması gerekir. </li><li> soldakinden (veya en sağdaki) kültür plaka aynı sütun içinde her bir kuyunun kenarındaki yaralama ipuçları yerleştirin. kuyunun üzerinden diğer tarafa wounder kaydırın; yaralama ipuçları kuyunun dibine dokunmadan emin olun. </li><li> tüm sütunlar için tırmalamak (Adım 5.2) tekrarlayın. </li><li> , Iskarta t yaralama sonraO, orta ve her bir oyuk taze ortam içeren test bileşikleri ile değiştirin. </li></ol> 6. Veri Toplama ve Görüntü Analizi <ol><li> Görüntü dijital kamera (örneğin 10X objektif) bir düşük güç mikroskop kullanılarak hücre tek tabaka mekanik yara ile tüm iyi derhal (t = 0 h) yaralama sonra. </li><li> arzu edildiği takdirde test bileşiklerinin ekleyin ve bir zaman istenilen uzunlukta inkübe edilir. Görüntü İstenilen kuluçka süresinden (t = AH) sonra yeniden yara alanı ile tüm iyi. </li><li> Böyle ImageJ gibi görüntü analiz yazılımı (kullanarak <a href="https://imagej.nih.gov/ij/">https://imagej.nih.gov/ij/</a> ), serbest aracını kullanarak resmin üzerine yaralı bölgeyi ölçer. </li><li> yara kapatma yüzdesini hesaplayın: <img alt="Denklem" src="/files/ftp_upload/55411/55411eq1.jpg" /></li></ol>

<ol><li>Friedl, P., Wolf, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumour-cell+invasion+and+migration%3A+diversity+and+escape+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Tumour-cell invasion and migration: diversity and escape mechanisms.</a> Nat Rev Cancer. 3 (5), 362-374 (2003).</li>
<li>Friedl, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prespecification+and+plasticity%3A+shifting+mechanisms+of+cell+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Prespecification and plasticity: shifting mechanisms of cell migration.</a> Curr Opin Cell Biol. 16 (1), 14-23 (2004).</li>
<li>Lampugnani, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+migration+into+a+wounded+area+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Cell migration into a wounded area in vitro.</a> Methods Mol Biol. 96, 177-182 (1999).</li>
<li>Sholley, M. M., Gimbrone, M. A. Jr, Cotran, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+migration+and+replication+in+endothelial+regeneration%3A+a+study+using+irradiated+endothelial+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Invest%22%5BJournal%5D)">Cellular migration and replication in endothelial regeneration: a study using irradiated endothelial cultures.</a> Lab Invest. 36 (1), 18-25 (1977).</li>
<li>Gotlieb, A. I., Spector, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migration+into+an+in+vitro+experimental+wound%3A+a+comparison+of+porcine+aortic+endothelial+and+smooth+muscle+cells+and+the+effect+of+culture+irradiation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Migration into an in vitro experimental wound: a comparison of porcine aortic endothelial and smooth muscle cells and the effect of culture irradiation.</a> Am J Pathol. 103 (2), 271-282 (1981).</li>
<li>Chen, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+migration+chip+for+chemotaxis-based+microfluidic+selection+of+heterogeneous+cell+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Single-cell migration chip for chemotaxis-based microfluidic selection of heterogeneous cell populations.</a> Sci Rep. 18 (5), 9980(2015).</li>
<li>Yarrow, J. C., Periman, Z. E., Westwood, N. J., Mitchison, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+cell+migration+assay+using+scratch+wound+healing%2C+a+comparsion+of+image-based+readout+methods%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">A high-throughput cell migration assay using scratch wound healing, a comparsion of image-based readout methods.</a> BMC Biotechnol. 4, 21(2004).</li>
<li>Lauder, H., Frost, E. E., Hiley, C. R., Fan, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+the+repair+process+involved+in+the+repair+of+a+cell+monolayer+using+an+in+vitro+model+of+mechanical+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Quantification of the repair process involved in the repair of a cell monolayer using an in vitro model of mechanical injury.</a> Angiogenesis. 2 (1), 67-80 (1998).</li>
<li>Yue, P. Y. K., Leung, E. P. Y., Mak, N. K., Wong, R. N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simplified+method+for+quantifying+cell+migration%2F+wound+healing+in+96-well+plates%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomol+Screen%22%5BJournal%5D)">A simplified method for quantifying cell migration/ wound healing in 96-well plates.</a> J. Biomol Screen. 15 (4), 427-433 (2010).</li>
<li>Yue, P. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elucidation+of+the+mechanisms+underlying+the+angiogenic+effects+of+ginsenoside+Rg%281%29+in+vivo+and+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Elucidation of the mechanisms underlying the angiogenic effects of ginsenoside Rg(1) in vivo and in vitro.</a> Angiogenesis. 8 (3), 205-216 (2005).</li>
<li>Kwok, H. H., Chan, L. S., Poon, P. Y., Yue, P. Y., Wong, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ginsenoside-Rg1+induces+angiogenesis+by+the+inverse+regulation+of+MET+tyrosine+kinase+receptor+expression+through+miR-23a%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Appl+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Ginsenoside-Rg1 induces angiogenesis by the inverse regulation of MET tyrosine kinase receptor expression through miR-23a.</a> Toxicol Appl Pharmacol. 287 (3), 276-283 (2015).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarları olduğunu beyan ederim.

Bizim hücre wounder geleneksel hücre göçü deneyleri sorunlarını çözmede birçok benzersiz özelliklere sahiptir. 8-kanallı mekanik hücre wounder otoklav ile sterilize edilebilir, uzun ömürlü, yüksek dereceli paslanmaz çelik (çelik 304) yapılmıştır. piyasada bulunan 96 oyuklu kültür plakaları neredeyse tüm ticari markalar için ayarlanabilir kılavuz çubuğunun bu mekanik hücre wounder kullanılabilir. Ayarlanabilir kılavuz çubuğunun tasarımı da kazıma alanı her bir merkezinde olmasını sağlar. oyuk bir merkez pozisyonda yara, ...

Hücre göçü gibi embriyojenez, nöron, anjiyogenez, yara iyileşmesi, mukozal tamiri, normal gelişim ve hastalık durumuna 1 altında epitelyal-mezenkimal-geçişler gibi hücresel süreçleri de önemli bir rol oynar. Bu sinyal molekül etkileşimleri, hücre kutuplaşma, hücre iskeleti yeniden, matris yeniden membran çıkıntı ve dinamik hücre-hücre yapışması modülasyonu 2 olmak üzere çok sayıda içi ve hücresel olayların koordinasyonunu içeren karmaşık bir süreçtir. hücre göçü inceleyerek, hücre hareketi ve bununla ilgili biyokimyasal yollar yol açan kimyasal madde veya biyomoleküllerin keşif ve doğrulama tespit edilebilir. Bu temel süreç böyle hastalık tedavisi ve ilaç hedefleme gibi çeşitli uygulamalar için bir vekil olarak yararlı bir şekilde kullanılabilir. Yaralama deney hücre göçü deneyleri 3 biridir. Burada, birhücrelerin tek tek örnek, kısmen hücre alanı kapsayacak şekilde göç bir soyulmuş alanı üretmek için mekanik araçlar ile kaldırılır. Belirli bir zaman noktasında geri kazanım yüzdesi izlenecektir. Örneklerin çok sayıda tutarken, bu tür örneklerin içinde deneysel maliyet ve çapraz kontaminasyon gibi konular sorunlu olabilir. Pek çok ticari araçlar ve deneyler, hücre göçü 4, 5, 6, çalışmak için uygun olmakla birlikte, bunların çok pahalı ve karmaşık ekipmanlar gerekmektedir ve geliştirmeler de ihtiyaç vardır. Bu nedenlerden dolayı, 8-kanallı mekanik hücre wounder (Şekil 1) olarak geliştirilmiştir. Bizim 8-kanal mekanik hücre wounder yukarıda belirtilen sorunların çözümünde birçok benzersiz özelliklere yer vermiş. Bu 96 gözlü kültür plakası formatında tahlilleri yaralama / hücre göçü gerçekleştirmek için esneklik sağlar. ayarlanabilir guiding bar tasarımı karalama alanı de her merkezi konumda olmasını sağlar. wounder kültür plakalarının çeşitli markalar için geçerlidir, böylece aynı zamanda, yönlendirme çubuklarının yüksekliğinin ayarlanabilir. Son olarak, ayarlanabilir yaralama pimi tasarımı aynı anda ve tekrarlanabilir yaralama 7, 8 ulaşmak için kültür plaka yüzeyi ile pipet uçları eşit teması sağlar.

<table><tbody><tr><td>96 oyuklu hücre kültürü plakası</td><td>Nunc</td><td>167008</td><td>96 oyuklu hücre kültürü plakasının diğer markaları da kullanılabilir</td></tr><tr><td>P10 pipet uçları</td><td>Axygen</td><td>301-03-051</td><td>Kısa P10 pipet ucunun şeffaf bir yara oluşturması daha kolaydır</td></tr><tr><td>Wounder</td><td>R& P Technology Limited</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Medium, 199</td><td>Sigma</td><td>M2520-1L:</td><td>İnsan umbilikal ven endotel hücrelerinin hücre kültürü için. Diğer hücre türleri için uygun kültür ortamını ve koşulunu kullanın.</td></tr><tr><td>Fetal sığır serumu</td><td>Gibco</td><td>26140079</td><td>İnsan umbilikal ven endotel hücrelerinin hücre kültürü için. Diğer hücre türleri için uygun kültür ortamını ve koşulunu kullanın.</td></tr><tr><td>Penisilin / Streptomisin</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td>İnsan göbek damarı endotel hücrelerinin hücre kültürü için. Diğer hücre türleri için uygun kültür ortamını ve koşulunu kullanın.</td></tr><tr><td>Domuz bağırsak mukozasından elde edilen heparin sodyum tuzu</td><td>Sigma</td><td>H3393</td><td>İnsan göbek damarı endotel hücrelerinin hücre kültürü için. Diğer hücre türleri için uygun kültür ortamını ve koşulunu kullanın.</td></tr><tr><td>Sığır derisinden elde edilen jelatin</td><td>Sigma</td><td>G9391</td><td>İnsan göbek damarı endotel hücrelerinin hücre kültürü için. Diğer hücre türleri için uygun kültür ortamını ve koşulunu kullanın.</td></tr></tbody></table>

96 oyuklu bir plaka içerisinde hücre gücü / yara iyileşme gerçekleştirmek için bir cihaz

A Device for Performing Cell Migration/Wound Healing in a 96-Well Plate

Hücre göçü / tahlil yaralama hücre göçü ve anjiyogenez ve tümör metastazı gibi diğer biyolojik süreçleri incelemek için yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir. Bu tahlilde, hücreler konfluent tek tabaka oluşturmak için büyütülür ve mekanik bir yara bir cihaz ile çizilerek oluşturulur. Sonra soyulmuş alanına doğru hücrelerinin göç hızı görüntüleme ile izlenebilir. Bizim 8 kanallı mekanik wounder hücre göçü deneyi ile ilişkili sorunların çoğunu çözmek için tasarlanmıştır. Birincisi, bizim wounder kolayca otoklav ile veya ortak dezenfektanlar ile sterilize edilebilir. İkinci olarak, tek tek ayarlanabilen pimleri daha keskin ve tekrarlanabilir yaralar oluşturulabilir, böylece hücre kültür plakası ile temas etmesi. Üçüncü olarak, wounder her iki tarafında kılavuz çubukları her bir tutarlı yaralama pozisyonunu garantiler. ayrıca wounder daha iyi yol tutuşu sağlayabilir yanı sıra çapraz contaminat en aza indirmek için yaralama için tek kullanımlık plastik pipet uçlarının kullanılmasıiyon. Sonuç olarak, hücre wounder standart 96 oyuklu bir kültür plakası kullanarak hücre göçü deneyi gerçekleştirmek için bir kullanıcı dostu ve yeniden üretilebilir bir cihazla araştırmacılar sağlayabilir.

Bu 8-kanal mekanik wounder hücre göçü deneyi gerçekleştirmek için hücre tek tabaka kazımak için imal edilir. Bu özel eğitim olmadan bir dakikadan az 96 oyuklu plakalarda hücre tırmalamak analizleri yapabilir kullanıcı dostu bir cihazdır. Bu wounder yaklaşık 600 um&#39;lik bir düzgün genişlikte ve keskin kenarlı hücre tekli katmanları üzerinde yara alanı neden olabilir (Şekil 5 ve 6). Yaraların genişliği pipet uçları marka ve kullanıcının performansına ba...

Burada, bir 96-yuvalı hücre kültürü plakasının bir yarı-yüksek verimli hücre göçü deneyi gerçekleştirmek için bir protokol mevcut. Bu protokol, bir hücre tek tabaka üzerinde tutarlı çizik yaraları oluşturmak için hızlı, basit ve ekonomik bir yöntemdir.

The cell migration/wounding assay is a commonly used method to study cell migration and other biological processes, such as angiogenesis and tumor ...

Bu sekiz kanallı mekanik hücre yaralama düzeneğinin genel amacı, pahalı ve karmaşık ekipmanlar kullanmadan, hızlı ve yarı yüksek kapasiteli bir şekilde yara iyileşme deneyi kullanarak tedavinin hücre göçü üzerindeki etkisini nicelleştirmektir. Hücre göçü, farklı fizyolojik ve güçlü fizyolojik koşullarda önemli bir hücresel süreçtir. In vitro yara iyileşme deneyleri; kanser, vasküler ve dermatolojik çalışmalar dahil olmak üzere farklı araştırmalarda kullanılmaktadır.Bu yöntemin temel avantajı, hücre göçü üzerindeki etkinin 96 kuyucuklu bir plaka üzerinde izlenebilmesi ve böylece farklı uygulama koşullarının eş zamanlı olarak gözlemlenebilmesidir. Prosedürü, laboratuvarımızdan lisansüstü öğrencisi Ka Chun Ng gerçekleştirecektir. Deneye başlamak için, yaralama pinlerini eşit mesafelerde sabitleyerek pin tutucuyu hazırlayın.Pipet uçlarını tutun ve uç yüksekliğini ayarlamak için ayarlanabilir yaralama pinlerini yukarı aşağı hareket ettirin. Ardından, farklı markalara ait ayarlanabilir kılavuz çubuğunu 96 kuyucuklu kültür plakalarına yerleştirin ve yaralama alanının sabit bir konumda olduğundan emin olun. Altıgen vidayı sıkarak ayarlanabilir yaralama pinini sabitleyin.Her iki uçtaki altıgen soket başlı kapakları sıkarak kılavuz çubuğu konumuna sabitleyin. Altıgen soket başlı kapakları gevşetmek için M5 altıgen anahtar kullanın. Kılavuz çubukların 96 kuyucuklu kültür plağının genişliğine tam olarak uyması için pin tutucunun her iki yanına uygun sayıda ayar halkası yerleştirin.Ardından, kılavuz çubuğu sabitlemek için altıgen soket başlı kapakları sıkın. Sarma pinlerini steril 10-mikrolitre plastik pipet uçları ile yerleştirerek kılavuz çubukları ayarlamaya başlayın. Sonrasında, M5 altıgen anahtar ile altıgen soket başlı kapakları gevşetin.Yaralayıcıyı tutun ve yaralama iğnelerini 96 kuyucuklu bir kültür plağının bir sütununa daldırın. Ardından, tüm uçlar kuyucukların tabanına hafifçe değene kadar kılavuz çubukların yüksekliğini ayarlayın. Altıgen soket başlı kapakları sıkın.Yara oluşturucunun kültür plağına tam olarak oturduğundan ve pinlerin kuyucukların ortasına doğru iyi yerleştirildiğinden emin olun. Yara oluşturucuyu, Petri kabı gibi düz ve steril bir yüzeye dik tutun ve tüm altıgen vidaları M3 altıgen anahtar ile gevşetin. Tüm uçlar yüzeye eşit şekilde değene kadar yara oluşturucuya hafifçe vurun.Uçlar yüzeye eşit şekilde temas ettikten sonra, pinleri konumlarında sabitlemek için altıgen vidaları tekrar sıkın. Ardından, wounder'ı düz steril yüzeye nazikçe vurarak her bir ucun eşitliğini kontrol edin. İnsan göbek bağı vasküler endotel hücrelerini %0,1 jelatin kaplı 96 kuyucuklu hücre kültürü plağına ekin.%20 ısı ile inaktive edilmiş fetal bovin serum, %1 penisilin streptomisin ve litre başına 0,09 gram heparin ile desteklenmiş medium 199 içinde hücreleri kültüre edin. Hücreleri, kullanmadan önce gece boyunca 37 °C'de, %5 karbondioksit içeren nemlendirilmiş bir inkübatörde tutun. Hücreler %100 konfluense ulaştığında, kültür plağının aynı sütunundaki her kuyuğun en sol tarafına yaralama uçlarını yerleştirin.Yaralama cihazını kuyucuğun diğer tarafına doğru kaydırın. Yaralama uçlarının kuyucuğun tabanına değdiğinden emin olun. Her bir hücre kuyucuğundaki yaranın merkezde ve aynı dalga şeklinde olduğundan emin olmak için, yaralama cihazını kuyucuk boyunca diğer uca kadar sallayın.Çizme işlemini tüm kolonlar için tekrarlayın. Yaralama işleminden sonra, her kuyuctaki besiyerini dökün ve yerine test bileşiklerini içeren taze besiyeri ekleyin. Ardından veri toplama ve görüntü analizine geçin.Çizme işleminden hemen sonra bir sıra ve bir sütun kuyucuğa ait temsili görüntüler, her bir yaranın genişliğinin kantitatif analizine olanak tanır. Yara görüntüleri, insan göbek bağı ven endotel hücrelerinden ve insan dermal fibroblastlarından elde edilmiştir. Kesikli çizgi yara alanını, düz çizgi ise hücre göçü alanını belirtmektedir.Bu videoyu izledikten sonra, bu cihazı kullanarak 96 kuyucuklu bir plaka üzerinde yarı yüksek kapasiteli bir şekilde yara iyileşme analizi nasıl gerçekleştirileceği ve her kuyucuğun yara oluşturucu ile çizilmesinin nasıl sağlanacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

a-device-for-performing-cell-migrationwound-healing-in-a-96-well-plate

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Gelişim Biyolojisi

Yaygın olarak kullanılan, in vitro olarak hücre göçü ve işgali incelenmesi için oldukça erişilebilir yöntemler tarif edilmiştir. Birinci yöntem, hücre motilitesini büyüklüğüne hücre yara kapatma deneyidir. İkinci yöntem kemotaktik ve hücrelerin invaziv kapasitesini değerlendirir transwell göç ve istila testtir.

Vitro Hücre Göç ve Invasion Tahliller

MRP4 hücre göçü bir süre önce aydınlatılmamıştır rolü dahil olmak üzere çeşitli siklik nükleotid-bağımlı sinyal olaylarını düzenler. Biz fibroblast göçü ince ayar düzenlenmesinde önemli roller oynamaktadır benzersiz MRP4 interaktom belirlenmesi ile sonuçlanan MRP4 aşağısında moleküler hedeflerin çözülmeye doğrudan, ama çok yönlü bir yaklaşım açıklar.

Yöntemler Fibroblast Göç Yönetmeliği Mrp4 içeren makromoleküler kompleksler Eğitim için

Bu iletişim kuralı yanlısı ve anti migratory faktörlerin etkisi hücre geçiş bir üç boyutlu fibrin matris içinde değerlendirmek için hedeftir.

İçinde üç boyutlu Vitro hücre göç karakterize ortamlar yara

Bu çalışmada cep işgali ve geçiş analizi için iki farklı yöntem raporları: Boyden odası tahlil ve vitro video mikroskobu tabanlı yara iyileşmesi tahlil. Bu iki deney protokollerde açıklanmış ve kendi yararları ve dezavantajları karşılaştırılır.

Cep işgali ve geçiş işlemi değerlendirilmesi: Video mikroskop esaslı çizik karşılaştırılması tahlil ve Boyden odası tahlil yara

Bu el yazması kültürlü epitel hücre monolayers üzerinde yapılan nasıl kesi benzeri lezyonlar elverişli bir konuma sahip modeli şifa vitrogörüntüleme için tarafından confocal sağlayan, yarası. açıklar veya lazer tarama mikroskobu ve yüksek kaliteli sağlayabilir nicel ve nitel veri hücre davranış ve mekanizmaları geçişinde dahil çalışmak için.

Mikroskopi Vitro yara iyileşmesi sırasında epitel hücre göç değerlendirilmesi için yöntemleri temel

Burada, peptidler etkisi bronş epitel hücrelerinin geçiş değerlendirmek için bir protokol mevcut. Bu yöntemi Nicel veri hücre göç ve yara kapatma hızı üzerinde hızlı ve son derece tekrarlanabilir elde olanak sağlar.

Roman Vitro hücre göç değerlendirmek için şifa tahlil yara

Geçerli protokol kanser hücre göç ve gerçek zamanlı olarak tek bir platformda işgali araştırma, kolayca tekrarlanabilir ve zamanı verimli bir seçenek hücre hareketlilik ve morfoloji çalışmaya sağlayan entegre bir yöntemini açıklar.

Otomatik bir canlı hücre Imager kullanarak basit geçiş/işgali iş akışı

Burada, primer fibroblastlar kullanarak in vitro çizik testve farelerde in vivo deri yara iyileşmesi test için bir protokol salıyoruz. Her iki tahliller in vitro ve in vivo yara iyileşmesini değerlendirmek için basit yöntemlerdir.

In Vitro ve In Vivo In Vivo Analizi Yara İyileşmesi için Scratch Migration Tahlil ve Dorsal Skinfold Odası

Bu yazıda, yeni tasarlanmış bir 3D baskılı ek, bir ko-kültür modeli olarak sunulmuş ve endotel hücreleri ile keratinositler arasındaki parakrin hücreler arası iletişimin incelenmesiyle doğrulanmıştır.

Basit 2D ve 3D hücre kültürlerini mümkün kılmak için tasarlanmış yenilikçi bir 3D baskılı ek parça

Etkileşim deneyimi tasarımı ve kullanıcı gereksinimleri analizinin dahil edilmesiyle, tekrarlanabilirlik, güvenilirlik, pratiklik, hücresel bütünlük ve kullanıcı deneyimi açısından hücresel yara iyileşme testlerini geliştiren yenilikçi bir hücre kazıyıcı sunuyoruz.

Hücre yara iyileşme testinin güvenilirliğini artırmak için otomatik olarak stabil ve tekrarlanabilir hücresiz boşluklar oluşturan bir araç

Granül hidrojellerin arayüzü içinde ve içine 3D hücre göçünün kantitatif değerlendirmesi için bir protokol burada sunulmaktadır.

Granül Hidrojel Biyomalzemeler İçinde ve İçine Üç Boyutlu Hücre Migrasyonunun Ölçülmesi

Öğrenin, sekiz kanallı mekanik hücre yaralayıcı kullanarak 96 kuyucuklu plakada yara iyileşme deneyiyle hücre göçünü hızlı ve ekonomik bir şekilde nasıl ölçeceğinizi. Bu yöntem, kanser ve dermatoloji çalışmalarında yüksek verimli analiz sağlar.

96 oyuklu bir plaka içerisinde hücre gücü / yara iyileşme gerçekleştirmek için bir cihaz

Daha fazla video keşfet