Name: Histolojik Analiz Domuz MSS Pozlama: Decapitation, Kafatası Açılış İçin El Kitabı ve Beyin Kaldırma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-04-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 38 s
Description: Öğrenin, domuz beyni ve hipofiz bezinin bütünlüğünü koruyarak çıkarılması tekniğini. Bu yöntem, makroskopik ve histolojik analizler için etik standartlara uygun hazırlama sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar minnettarlıkla Bayan Trine W. Mikkelsen ve usta yardımı, Montaj Bayan Lise M. ve Påskehøjgaard personeli kabul. Danimarkalı Tıbbi Araştırma Konseyi, Lundbeck Vakfı ve Novo Nordisk Vakfı maddi çalışmayı desteklemiştir.

Hayvan anestezi ve euthanesia (NIH yayın sayılı 86-23, 1985 revize) ve Hayvan Araştırmaları Etik Danimarka Konseyi tarafından onaylanan &quot;laboratuvar hayvan bakımı İlkeleri&quot; uyarınca gerçekleştirilmiştir. 1. Araçlar <ol><li> Enstrümanlarını videoda sunulan ve Malzemelerin Tablo listelenen toplayın. </li></ol> 2. Decapitation Not: Anestezi midazolam 5 mL (5 mg / mL) ve ketamin 5 ml (25 mg / ml) içeren bir intramüsküler enjeksiyon ile oluşturuldu. Hayvan derin sedasyon zaman 5-10 dakika sonra, bir kulak toplar damarına kanül takıldı ve sodyum pentobarbitalin letal doz (vücut ağırlığı 100 mg / kg) (200 mg / ml) damardan verilmiştir. Ettrup ve arkadaşları tarafından gösterildiği gibi hayvan tamamen ötenazi emin olmak için, interdijital ağrı refleks test edilmiştir. (2011) 20. açıklandığı gibi Komple euthanization sağlanmıştırEttrup ve arkadaşları tarafından gösterildiği gibi ve, izotonik tuzlu su, 5 L bir transcardial perfüzyon ile takip edilen etik bildirimi. (2011) 20. Bütün gösterilen işlemler, uzun süreli anestezi ve işlem sonrası hayatta kalması için gerekli olan sosyal önlemler ihtiyacını ortadan kaldırarak, otopsi yapılır. <ol><li> Sadece alt çene açı (Şekil 1A) altında, bir cerrahi bıçak kullanılarak, yüksek bir dairesel servikal kesiği ile domuz başını kesmek. </li><li> kemik omurga yaklaşık kafatası-boyun birleşme seviyesinde, ulaşılana kadar yine cerrahi neşter ile, larenks, yemek borusu da dahil olmak üzere boyun, yumuşak doku yoluyla anterior kesi devam edin. </li><li> (Atlas ön yay üzerinde, kafatası-boyun birleşme ön taraftan bir cerrahi bıçakla kesildi Advance ve anterior atlantooksipital membrandan ve böylece spinal kanal ve omurilik açığaŞekil 1B). Aynı anda kafa tabanı ve birinci boyun omuru arasında erişimi kolaylaştırmak için domuz kafasından uzakta domuz gövdesini çekmek için bir asistan isteyin. </li><li> Dural kese ve omurilikte (Şekil 1B) üzerinden cerrahi kesi devam edin. Omuriliğin tam enine kesiti elde edilmesini sağlamak için özel dikkat gösterin. NOT: decapitation işleminin aşağıdaki adımları sırasında omurilik ve beyin üzerinde istenmeyen çekiş yol açabilir önceki adımı gerçekleştirmek için başarısızlık. </li><li> Zorla bölüm seviyesinde (Şekil 1C) cranocervical birleşme uzanır. Aynı zamanda, oksipital kondil ve Atlas üst ifade işlemi arasındaki mafsal serbest bölümüne geri kalan atlantooksipital ligament cerrahi neşter kullanmak. Vücuttan domuz kafasını ayırın. </li></ol><img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/55511/55511fig1.jpg" style="font-size: 14px;" /> Şekil 1: MiniPig dekapitasyon. (A), boynu insizyonu (ok, mandibular açı). (OC, oksipital kondil C1 atlas ön kavis) atlantooksipital bağ ve kafatası-boyun birleşme yerinde dura çevrili omurilik (SC) ila (B) bir kesik. (C) atlantooksipital mafsal arka kısmı kesit düzeyinde güçlü bir uzantı (oklar) tarafından serbest bırakılır. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55511/55511fig1large.jpg" style="font-size: 14px;" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> 3. Kafa Açma <ol><li> Bir masaya domuz kafasını yerleştirin. </li><li> arka kısmından deri ve başının tepe üzerinde burnu arkasından, alttaki dokuların içinden bir cerrahi neşter ile dorsal boyuna yarık açarsa ve aşağıoksipital bölgesi. </li><li> Cerrahi bir bisturi ile insizyon yanal yer yumuşak doku kaldırarak kafatası sırt ve arka parçası Açığa. </li><li> Cerrahi bir bisturi ile kafatası (Şekil 2A) iki taraflı olarak zamansal kas bırakın. Posterior oksipital kemik, yumuşak doku temizlenir emin olun. </li><li> Bir Kerrison kemik delme ve kemik rongeurs Oksipital kemiği kaldırmak ve dura kaplı serebellum (Şekil 2B) ortaya çıkarmak için foramen magnumun arka giriş kullanın. </li><li> Sadece gözlerinin önünde, kafatasının maruz ön tarafına dönün ve frontal kemikte bir giriş noktası seçin. Bu noktada, kafatası nüfuz ve frontal sinüs (Şekil 2C) girmek için bir çekiç ile bir kemik keski. </li><li> kemik rongeur veya kemik zımba dış kafatası tabakanın dorsoposterior kaldırılmasını ilerletmek için Frontal sinüs, kullanımda ve iç ince açığaSerebrumu (Şekil 2D) kapsayan kemik kafatası tabaka. </li><li> Yavaşça dura kaplı Serebrumu (Şekil 2E) ortaya çıkarmak için bir çekiç ve keski ile kemik anterior iç kemik kafatası lamina açın. </li><li> Yanal olarak dura kaplı beyin ve beyincik (Şekil 2F) daha önce maruz kalan parçanın arasına kafatası son dorsoposterior parçası, serbest bırakmak için temporal hem de parietal kemik içinden bir kemik keskisi ve kemik rongeur kullanarak kemik kaldırılmasını devam edin. NOT: Bu prosedürün son adımı sırasında, sıklıkla mümkündür biri kapıyı açar gibi, bir taraftan açık kalan arka kafatası kemiğini kırmak için keski kullanmak. </li></ol><img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/55511/55511fig2.jpg" style="opacity: 0.9; font-size: 14px;" /> Şekil 2: MiniPig kafatası açma. (A) &#39;dorsoposterio maruz kalmasıoksipital ve temporal kas çıkarılması dahil olmak üzere R kafatası yüzeyi. Oksipital kemiğin (B) çıkarılması (CB dura kaplı serebellum; OB, oksipital kemik OC, oksipital kondil ve SC, omurilik). (C) Bir çekiç ve bir kemik keski öne kafatası nüfuz ve göz hizasında ön sinüse girmek için kullanılır. (D) Frontal sinüs (FS) derecesi, bir ince iç kemik tabaka (2) serebrum kaplama açığa (1) dış kalın kafatası kemiği kaldırmak için kullanılır. Dura kaplı Serebrumu (ok) maruz bırakılması, ince kemik tabakanın (E) çıkarılması. (F) Son olarak, bir çekiç ve keski kemik yanal olarak ön ve arka kafa açıklıkları bağlamak için kullanılır. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55511/55511fig2large.jpg" style="font-size: 14px;" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> 4. Beyin Removark <ol><li> Dura kaldırın ve ince bir cerrahi neşter (Şekil 3A) kullanılarak damar üstün sagital sinüs hafif bir kesi yakın oluşturmak için cerrahi forseps. </li><li> bundan başka, beyin dorsal yüzeyini kaplayan dura açmak için mikro makas veya Dura-bıçak kullanın. Not: serebellar tentoryumu (Şekil 3B) &#39;e uygun dura çıkarılması, özel bir dikkat sonraki beyin kaldırılmasını önlemek bu dura yaprak sağlanması ve alınması gerekir. </li><li> Domuz kafası dik (Şekil 3C) yerleştirin. </li><li> Kafa boşluğu (Şekil 3D) dura kaplı zeminden koku ampul künt diseksiyon sayesinde ventroanterior Serebrumu serbest bırakmak için, kemik keski veya dissektörü kullanın. </li><li> Bölümüne maruz optik kiazma (Şekil 3E) ince bir cerrahi neşter kullanın. Hipofiz sapı Okülomotor sinirleri Açığa ve bölüm. </li><li> lo kesit tarafından ventral beyin sapı serbest bırakınince bir cerrahi bisturi ile wer kranyal sinirler (Şekil 3F). Dural serebellar tentoryum tamamen (Şekil 3B) kesilmiştir bu dura yaprak aksi salma işlemi esnasında, beyin sapı yoluyla kesecek şekilde sağlanması. </li></ol><img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/55511/55511fig3.jpg" style="font-size: 14px;" /> Şekil 3: MiniPig beyin çıkarılması. Cerrahi forseps ve dura bıçakla (A) Dural açılışı. (B) Bakım tamamen beyin ve beyincik arasında yer alan dura yaprak (ok), kesilirken alınmalıdır. (C), domuz kafası kafa tabanı yapıları daha iyi görülebilmesi için ve yerçekimi beyin amaçlanan yer değiştirmesine yardımcı olmak için sırayla dikey olarak konumlandırılmıştır. (D), bir ayırıcı kesici veya bir kemik keski Dura-covere künt bölümü tarafından koku ampul rahatlatmak için kullanılırd kafa tabanı. (E) diseksiyon kiyazmanın (ok), infundibulum sap Okülomotor sinirlerin maruz kalma ve bölümlere ayırma için kafa tabanı boyunca bir posterior yönde devam edilir. Beyin sapı ventral yüzeyi yola gibi (F), beyin salma alt kranyal sinirlerinin bölümü ile tamamlandı (eden IV troklear sinir, III, Okülomotor sinir V, üçlü sinir ve VI, abdusens). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55511/55511fig3large.jpg" style="font-size: 14px;" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a> 5. Hipofiz Kaldırma <ol><li> Prolaktin ve kafatası kat (Şekil 4A) &#39;de çevresindeki dura yaprak (diapragma sella) belirlenmesi. </li><li> Ince bir cerrahi neşter (Şekil 4B) ile hipofiz sapı dura yaprak yanal İnsizyon. </li><li> çukur serbest bırakmak için bir dissektörü kullanınuitary ve hipofiz fossa (Şekil 4C) üzerinden kaldırın. </li></ol><img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/55511/55511fig4.jpg" style="opacity: 0.9; font-size: 14px;" /> Şekil 4: MiniPig hipofiz çıkarılması. (A), hipofiz fossa (*) kafatası kat tanımlanır (1, koku ampul, 2, optik kiazma ve PF posterior fossa). (B), dura örtü (Sellar diagphragm, (ok)) yanal olarak kesilir. (C), hipofiz (ok) bir dissektör ile serbest bırakılır ve hipofiz fossa dışına çıkar. Ölçek çubuğu (AC), 10 mm =. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55511/55511fig4large.jpg" style="font-size: 14px;" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayın.</a>

<ol><li>Lind, M. N., Moustgaard, A., Jelsing, J., Vajta, G., Cumming, P., Hansen, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+pigs+in+neuroscience%3A+Modeling+brain+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">The use of pigs in neuroscience: Modeling brain disorders.</a> Neurosci Biobehav Rev. 31, 728-751 (2007).</li>
<li>Bjarkam, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuromodulation+in+a+minipig+model+of+Parkinson+disease%5BTitle%5D)+AND+%22British+J+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Neuromodulation in a minipig model of Parkinson disease.</a> British J Neurosurg. 22 (Suppl. 1), S9-S12 (2008).</li>
<li>Bjarkam, C. R., Cancian, G., Glud, A. N., Ettrup, K. S., Østergaard, L., Sørensen, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI-guided+stereotaxic+targeting+in+pigs+based+on+a+stereotaxic+localizer+box+fitted+with+an+isocentric+frame+and+use+of+SurgiPlan+computer-planning+software%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">MRI-guided stereotaxic targeting in pigs based on a stereotaxic localizer box fitted with an isocentric frame and use of SurgiPlan computer-planning software.</a> J Neurosci Methods. 183 (2), 119-126 (2009).</li>
<li>Sauleau, P., Lapouble, E., Val-Laillet, D., Malbert, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pig+model+in+brain+imaging+and+neurosurgery%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">The pig model in brain imaging and neurosurgery.</a> Animal. 3 (8), 1138-1151 (2009).</li>
<li>Bjarkam, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+function+of+a+new+clinical+intracerebral+microinjection+instrument+for+stem+cells+and+therapeutics+examined+in+the+G%C3%B6ttingen+minipig%5BTitle%5D)+AND+%22Stereotact+Funct+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Safety and function of a new clinical intracerebral microinjection instrument for stem cells and therapeutics examined in the Göttingen minipig.</a> Stereotact Funct Neurosurg. 88 (1), 56-63 (2010).</li>
<li>Fjord-Larsen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+delivery+of+nerve+growth+factor+by+encapsulated+cell+biodelivery+in+the+minipig+basal+forebrain%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Therapy%22%5BJournal%5D)">Long-term delivery of nerve growth factor by encapsulated cell biodelivery in the minipig basal forebrain.</a> Mol Therapy. 18 (12), 2164-2172 (2010).</li>
<li>Sørensen, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+neuromodulation+treatments+in+a+large+animal+model+-+Do+neurosurgeons+dream+of+electric+pigs%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Development of neuromodulation treatments in a large animal model - Do neurosurgeons dream of electric pigs?</a> Prog Brain Res. 194, 97-103 (2011).</li>
<li>Dolezalova, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pig+models+of+neurodegenerative+disorders%3A+utilization+in+cell+replacement-based+preclinical+safety+and+efficacy+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Pig models of neurodegenerative disorders: utilization in cell replacement-based preclinical safety and efficacy studies.</a> J Comp Neurol. 522 (12), 2784-2801 (2014).</li>
<li>Mikkelsen, M., Moller, A., Jensen, L. H., Pedersen, A., Harajehi, J. B., Pakkenberg, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MPTP-induced+Parkinsonism+in+minipigs%3A+A+behavioral%2C+biochemical%2C+and+histological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicol+Teratol%22%5BJournal%5D)">MPTP-induced Parkinsonism in minipigs: A behavioral, biochemical, and histological study.</a> Neurotoxicol Teratol. 21, 169-175 (1999).</li>
<li>Danielsen, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+DaNEX+study+of+embryonic+mesencephalic%2C+dopaminergic+tissue+grafted+to+a+minipig+model+of+Parkinson%27s+disease%3A+Preliminary+findings+of+effect+of+MPTP+poisoning+on+striatal+dopaminergic+markers%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">The DaNEX study of embryonic mesencephalic, dopaminergic tissue grafted to a minipig model of Parkinson's disease: Preliminary findings of effect of MPTP poisoning on striatal dopaminergic markers.</a> Cell Transplant. 9 (2), 247-259 (2000).</li>
<li>Dalmose, A., Bjarkam, C. R., Sørensen, J. C., Jørgensen, T. M., Djurhuus, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+high+frequency+deep+brain+stimulation+on+urine+storage+and+voiding+function+in+conscious+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourol+Urodyn%22%5BJournal%5D)">Effects of high frequency deep brain stimulation on urine storage and voiding function in conscious minipigs.</a> Neurourol Urodyn. 23 (3), 265-272 (2004).</li>
<li>Dalmose, A., Bjarkam, C. R., Djurhuus, J. C. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1464-410X.2005.05421.x/full">Stereotactic electrical stimulation of the pontine micturition center in the pig.</a> Br J Urol. 95, 886-889 (2005).</li>
<li>Andersen, F., Watanabe, H., Bjarkam, C. R., Danielsen, E. H., Cumming, P. The DaNeX Study Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pig+brain+stereotaxic+standard+space%3A+Mapping+of+cerebral+blood+flow+normative+values+and+effect+of+MPTP-lesioning%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">Pig brain stereotaxic standard space: Mapping of cerebral blood flow normative values and effect of MPTP-lesioning.</a> Brain Res Bull. 66 (1), 17-29 (2005).</li>
<li>Glud, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+gene+transfer+in+the+minipig+CNS+using+stereotaxic+lentiviral+microinjections%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurobiol+Exp%22%5BJournal%5D)">Direct gene transfer in the minipig CNS using stereotaxic lentiviral microinjections.</a> Acta Neurobiol Exp. 70 (3), 1-8 (2010).</li>
<li>Glud, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+MRI-guided+stereotaxic+viral+mediated+gene+transfer+of+alpha-synuclein+in+the+minipig+CNS%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurobiol+Exp%22%5BJournal%5D)">Direct MRI-guided stereotaxic viral mediated gene transfer of alpha-synuclein in the minipig CNS.</a> Acta Neurobiol Exp. 71 (4), 508-518 (2011).</li>
<li>Ettrup, K. S., Sørensen, J. C., Rodell, A., Alstrup, A. K. O., Bjarkam, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothalamic+deep+brain+stimulation+influences+autonomic+and+limbic+circuitry+involved+in+the+regulation+of+aggression+and+cardiocerebrovascular+control+in+the+minipig%5BTitle%5D)+AND+%22Stereotact+Funct+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Hypothalamic deep brain stimulation influences autonomic and limbic circuitry involved in the regulation of aggression and cardiocerebrovascular control in the minipig.</a> Stereotact Funct Neurosurg. 90 (5), 281-291 (2012).</li>
<li>Nielsen, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+MPTP+intoxication+in+the+minipig+results+in+chronic+parkinsonian+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurobiol+Exp%22%5BJournal%5D)">Continuous MPTP intoxication in the minipig results in chronic parkinsonian deficits.</a> Acta Neurobiol Exp. 76, 198-210 (2016).</li>
<li>Bjarkam, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+MRI-compatible+stereotaxic+localizer+box+enables+high-precision+stereotaxic+procedures+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A MRI-compatible stereotaxic localizer box enables high-precision stereotaxic procedures in pigs.</a> J Neurosci Methods. 139 (2), 293-298 (2004).</li>
<li>Bjarkam, C. R., Jorgensen, R. L., Jensen, K. N., Sunde, N. A. A., Sørensen, J. C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+brain+stimulation+electrode+anchoring+using+BioGlue%C2%AE%2C+a+protective+electrode+covering%2C+and+a+titanium+microplate%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Deep brain stimulation electrode anchoring using BioGlue®, a protective electrode covering, and a titanium microplate.</a> J Neurosci Methods. 168, 151-155 (2008).</li>
<li>Ettrup, K. S., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3197034/">Basic Surgical Techniques in the Minipig: Intubation, Transurethral Bladder Catheterization, Femoral Vessel Catheterization, and Transcardial Perfusion.</a> J Vis Exp. (52), e2652(2011).</li>
<li>Ettrup, K. S., Tornøe, J., Sørensen, J. C., Bjarkam, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+surgical+device+for+minimally+invasive+implantation+of+experimental+deep+brain+stimulation+leads+in+large+research+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A surgical device for minimally invasive implantation of experimental deep brain stimulation leads in large research animals.</a> J Neurosci Methods. 200 (1), 41-46 (2011).</li>
<li>Danielsen, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.academia.edu/13111607/Positron_emission_tomography_of_living_brain_in_minipigs_and_domestic_pigs">Positron emission tomography of living brain in minipigs and domestic pigs.</a> Scand J Lab Anim Sci Suppl. 25 (1), 127-135 (1998).</li>
<li>Røhl, L., et al. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/jmri.10068/pdf">Time evolution of cerebral perfusion and ADC measured by MRI in a porcine stroke model.</a> J Magn Reson Imaging. 15 (2), 123-129 (2002).</li>
<li>Cumming, P., Gillings, N. M., Jensen, S. B., Bjarkam, C. R., Gjedde, A. <a target="_blank" href="http://europepmc.org/abstract/med/12831994">Kinetics of the uptake and distribution of the dopamine D2/3 agonist (R)-N-[1-11C]n-propylnorapomorphine in brain of healthy and MPTP-poisoned Gottingen miniature pigs.</a> Nucl Med Biol. 30 (5), 547-553 (2003).</li>
<li>Jensen, K. N., Deding, D., Sørensen, J. C., Bjarkam, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+implantation+of+deep+brain+stimulation+electrodes+in+the+pontine+micturition+centre+of+the+minipig%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurochir%22%5BJournal%5D)">Long-term implantation of deep brain stimulation electrodes in the pontine micturition centre of the minipig.</a> Acta Neurochir. 151 (7), 785-794 (2009).</li>
<li>Rosendal, F., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16298581">Does chronic low dose treatment with ciclosporin influence the brain? A histopathological study in pigs.</a> Transplantation Proc. 37 (8), 3305-3308 (2005).</li>
<li>Nielsen, M. S., Sørensen, J. C., Bjarkam, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+substantia+nigra+pars+compacta+of+the+minipig%3A+An+anatomical+and+stereological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Struct+Funct%22%5BJournal%5D)">The substantia nigra pars compacta of the minipig: An anatomical and stereological study.</a> Brain Struct Funct. (4-5), 481-488 (2009).</li>
<li>Sørensen, J. C., Bjarkam, C. R., Simonsen, C. Z., Danielsen, E., Geneser, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oriented+sectioning+of+irregular+tissue+blocks+in+relation+to+computerized+scanning+modalities.+Results+from+the+domestic+pig+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Oriented sectioning of irregular tissue blocks in relation to computerized scanning modalities. Results from the domestic pig brain.</a> J Neurosci Methods. 104, 93-98 (2000).</li>
<li>Bjarkam, C. R., Pedersen, M., Sørensen, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+strategies+for+embedding%2C+orientation+and+sectioning+of+small+brain+specimens+enable+direct+correlation+to+MR-images%2C+brain+atlases%2C+or+use+of+unbiased+stereology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">New strategies for embedding, orientation and sectioning of small brain specimens enable direct correlation to MR-images, brain atlases, or use of unbiased stereology.</a> J Neurosci Methods. 108, 153-159 (2001).</li>
<li>Bjarkam, C. R., Sørensen, J. C., Geneser, F. A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12625454">Distribution and morphology of serotonin-immunoreactive axons in the hippocampal region of the New Zealand white rabbit. I. Area dentata and hippocampus proper.</a> Hippocampus. 13 (1), 21-37 (2003).</li>
<li>Bjarkam, C. R., Glud, A. N., Orlowski, D., Sørensen, J. C., Palomero-Gallagher, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+telencephalon+of+the+minipig%2C+cytoarchitecture+and+cortical+surface+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Struct+Funct%22%5BJournal%5D)">The telencephalon of the minipig, cytoarchitecture and cortical surface anatomy.</a> Brain Struct Funct. , e-pub ahead of print (2016).</li>
<li>Boltze, J., Nitzsche, B., Geiger, K. D., Schoon, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathological+investigation+of+different+MCAO+modalities+and+impact+of+autologous+bone+marrow+mononuclear+cell+administration+in+an+ovine+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Stroke+Res%22%5BJournal%5D)">Histopathological investigation of different MCAO modalities and impact of autologous bone marrow mononuclear cell administration in an ovine stroke model.</a> Transl Stroke Res. 2, 279-293 (2011).</li>
<li>Jortner, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+return+of+the+dark+neuron.+A+histological+artifact+complicating+contemporary+neurotoxicologic+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicology%22%5BJournal%5D)">The return of the dark neuron. A histological artifact complicating contemporary neurotoxicologic evaluation.</a> Neurotoxicology. 27, 628-634 (2006).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

En çok deneysel nörolojik çalışmalar, CNS&#39;ye erişim ince skull- ve dural-kalınlığıyla kolaylaştırılmaktadır fareler ve sıçanlar gibi küçük hayvan türleri, gerçekleştirilir. Bununla birlikte, domuz, 1, 4, 8, koyun 32 ve insan olmayan primatlar gibi daha büyük bir deney hayvanlarında, bu yapıların önemli kalınlığı kafatası kemik çıkarılması için güçlü bir araçlar (malzemelerin tablo) ve uygun bir giriş...

<html> domuzlarda Translasyonal nörobilim çalışmaları son yirmi yılda giderek popüler hale gelmiştir. Domuz beyin büyük boyutlu klasik klinik beyin görüntüleyiciler ve doğrudan kullanımı ve insan klinik 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 den nörocerrahi usul ve ekipman test kullanımını mümkün kılmaktadır. Son 20 yıl içinde, domuz, özellikle küçük domuzu (örneğin, Göttingen Minipig gibi), kök hücre transplantasyonu, nöromodülatör tedavi yöntemleri incelemek için kullanılmıştır; Viral vektör transfeksiyon; ve Parkinson hastalığı, obezite, depresyon ve Alzheimer hastalığı 2, 6 yönelik derin beyin uyarımı,= &quot;xref&quot;&gt; 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17. Bu MiniPig MSS 3, 18, 19, 20, 21 işlemek için stereotaksik ve cerrahi yaklaşımların geliştirilmesi takip edilmiştir. Tesis MSS değişiklikleri (PET 10, 13, 22, 24 ve MR 23), sistometrisi 11, 12, 25, beyin görüntüleme kullanılarak canlı hayvanlarda değerlendirilmiştir, yürüme analizi17, nörolojik değerlendirme 9, 17 ve histoloji ve stereolojik analizi 14, 15, 17, 26, 27, 31 temel ölüm sonrası inceleme. Bununla birlikte, ölüm sonrası analizi kalın, kemik kafatası ve domuz beyin çevreleyen kapsayan lifli bir dural olarak maruz kalma ve kolay bir iş değildir domuz beyin, kaldırılmasını gerektirir. Bu kağıt ve öğretim videonun amacı postmortem domuz beyin ve hipofiz motorsuz cerrahi aletler kullanılarak 15-20 dakika içinde bozulmamış bir halde maruz ve kaldırılabilir nasıl tarif etmektir. MiniPig hipofiz bezi üzerinde anatomik bir çalışma için kullanılan öğretim video ve fotoğraf çizimler erkek domuzu (20-25 kg: 6 ay, vücut ağırlığı yaş) göstermektedir.

<table><tbody><tr><td>Ağır Neşter Sapı #4</td><td>FST (Güzel Bilim Araçları)</td><td>10008-13</td><td>Cilt kesisi ve yumuşak doku çıkarılması için iyi</td></tr><tr><td>Steril Olmayan Neşter Bıçakları #23</td><td>FST&nbsp;</td><td>10023-00</td><td></td></tr><tr><td>Neşter Sapı #7</td><td>FST&nbsp;</td><td>10007-12</td><td>Dural insizyon ve hassas çalışma için ideal</td></tr><tr><td>Steril Olmayan Neşter Bıçakları #11</td><td>FST&nbsp;</td><td>10011-00</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi Forseps</td><td>FST&nbsp;</td><td>11024-18</td><td>Cerrahi forsepsin ucu sıkı bir tutuş sağlar&nbsp;</td></tr><tr><td>Kerrison Bone Punch</td><td>Aesculap Nöroşirürji</td><td>FF713R</td><td>Sağlam olmalı, ısırma boyutu 3-5 mm</td></tr><tr><td>Kemik Rongeur</td><td>Aesculap Nöroşirürji</td><td>MD615</td><td>Sağlam olmalı, ısırma boyutu 15 x 5 mm</td></tr><tr><td>Kemik Rongeur</td><td>Aesculap Nöroşirürji</td><td>FO551R</td><td>Sağlam olmalı, ısırık boyutu 25 x 15 mm&nbsp;</td></tr><tr><td>Kemik Keski</td><td>Lawton</td><td>67-0335</td><td>Keski kafasının boyutu 20 mm'yi geçmemelidir</td></tr><tr><td>Tokmak (Çekiç)</td><td>Millarco</td><td>5624108</td><td>Ağırlık 300 g, uzunluk 30 cm, kafa vuruş alanı boyutu 2 x 2 cm</td></tr><tr><td>Mikro Makas</td><td>FST&nbsp;</td><td>14002-14&nbsp; &nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Dissektör</td><td>Aesculap Nöroşirürji</td><td>OL165R</td><td></td></tr><tr><td>G&ouml; ttingen minipigs</td><td>Ellegaard G&ouml; ttingen Minipigs A/S, Danimarka</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Euthanimal</td><td></td><td></td><td>pentobarbital</td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Pfizer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Midazolam&nbsp;</td><td>Hameln İlaç</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

histolojik analiz domuz mss pozlama: decapitation, kafatası açılış İçin el kitabı ve beyin kaldırma

Exposure of the Pig CNS for Histological Analysis: A Manual for Decapitation, Skull Opening, and Brain Removal

Domuzlar insan olmayan primatlar için ekonomik ve etik açıdan uygun yerine büyük hayvan translasyonel sinirbilim araştırmalarında giderek daha popüler hale gelmiştir. domuzun büyük beyin boyutu geleneksel klinik beyin kameralar ve insan klinikten doğrudan kullanımı ve beyin cerrahisi prosedürleri ve ekipmanın test kullanımına izin verir. Daha fazla makroskopik ve histolojik analizi, ancak, domuz, merkezi sinir sistemi (CNS) ve daha sonra beyin çıkarılması postmortem maruz kalmayı gerektirir. Bu merkezi sinir sistemi kalın, kemik kafatası ve omurga ile kapsül olup domuz gibi kolay bir iş değildir. Bu kağıt ve öğretim videonun amacı açığa ve postmortem domuz beyni ve sonraki makroskopik ve histolojik analiz için uygun bozulmamış bir halde hipofiz bezini, nasıl kaldırılacağı tanımlamaktır.

kurumasını doku malzeme önlemek için, sabitleştirici veya makroskopik analizi yapılmıştır hemen sonra izotonik tuzlu su ile dolu bir kavanoz içinde ayrılmıştır beyin ve hipofiz saklanması tavsiye edilir. doku materyali, izotonik tuzlu su depolama oysa yıl süreyle tespit sıvısı içerisinde depolanabilir da bir buzdolabı içinde zamanla doku çürümesine neden olur. Sağlam domuzu beyin doğrudan dondurma 28 iç...

Bu kağıt ve öğretim videonun amacı ortaya çıkarmak ve daha sonraki makroskopik ve histolojik analiz için uygun bozulmamış bir halde, domuz beyin ve hipofiz bezi otopsi nasıl kaldırılacağı tanımlamaktır.

Histolojik Analiz Domuz MSS Pozlama: Decapitation, Kafatası Açılış İçin El Kitabı ve Beyin Kaldırma

Pigs have become increasingly popular in large-animal translational neuroscience research as an economically and ethically feasible substitute to ...

Bu videoda, kafatasını ve durayı açarak sağlam domuz beyninin ve sağlam hipofizin nasıl ortaya çıkarılacağını ve alınacağını sunuyoruz. Etik beyanı: Hayvan anestezi ve ötanazisi "Laboratuvar hayvanlarının bakımı prensipleri" uyarınca gerçekleştirilmiş ve Danimarka Hayvan Araştırmaları Etik Konseyi tarafından onaylanmıştır. Erkek Gottingen minipiglerde anestezi, midazolam ve ketaminin intramüsküler enjeksiyonu ile indüklenmiştir.Beş ila on dakika sonra, hayvanlar derin sedasyona girdiğinde, bir kulak venine kanül yerleştirildi ve intravenöz olarak öldürücü dozda sodyum pentobarbital verildi. Hayvanların tamamen ötanize edildiğinden emin olmak için, daha önce gösterildiği şekilde interdigital ağrı refleksi test edildi. Uygun ötanazi işleminin ardından, hayvanlar beş litre izotonik salin ile transkardiyal olarak perfüze edildi.Buna göre, gösterilen tüm prosedürler postmortem olarak gerçekleştirilmiştir; böylece uzun süreli anestezi ve prosedür sonrası sağkalım için gerekli olan refah önlemlerine ihtiyaç duyulmamıştır. Kullanılan aletler: Dört numara ağır bistüri sapı ve 23 numara steril olmayan bistüri uçları.Cilt insizyonları ve yumuşak doku çıkarımı için uygundur. Yedi numaralı bistüri sapı ve steril olmayan 11 numara bistüri uçları kullanılır. Dural insizyon ve hassas çalışmalar için idealdir.Sıkı bir tutuş sağlayan ağız yapısına sahip cerrahi forsepsler. KAIRison kemik ponçabı. Üç ila beş milimetre ağız boyutunda ve dayanıklı olmalıdır.Kemik rongeuru. Hassas kemik çalışmaları için sağlam olmalı ve yaklaşık 5 ila 15 mm kesme boyutuna sahip olmalıdır. Daha büyük kemik rongeuru.Daha kalın kemik parçalarının çıkarılması için yaklaşık 25 x 15 milimetre boyutunda bir ısırık alanı ile. Kemik keskisi. Baş kısmı 20 milimetreden daha büyük olmamalıdır.Kemik keskisine uygun bir tokmak. Sivri uçlu mikro makaslar. Disektör. Dekapitasyon. Domuz, mandibula açısının hemen altından yüksek dairesel bir servikal insizyon yapılarak kafası kesilir.Kesiye boynun yumuşak dokusu üzerinden devam edin. Kemik ve omurgaya ulaşana kadar laringeks ve özofagus boyunca kesin. Bu işlem yaklaşık olarak kranioservikal bileşke seviyesinde gerçekleştirilmelidir.Kesi işlemini kraniyoservikal bileşkenin ön tarafındaki anterior atlanto-oksipital membran boyunca ilerleterek devam ettirin. Böylece spinal kord açığa çıkarılacaktır. Bu esnada, kafatası tabanı ile birinci servikal vertebra arasındaki erişimi kolaylaştırmak için bir asistan, domuz gövdesini domuz başından uzağa doğru çekecektir.Kraniyo-servikal birleşim yerindeki güçlü bir ekstansiyonla kafatası ayırma işlemi tamamlanmadan önce, omuriliğin tamamen kesildiğinden emin olun. Kafatasının açılması. Deri ve altındaki yumuşak doku boyunca dorsal longitudinal bir insizyon yapın.Burun ucunun arkasından başlayarak başın tepe noktasının üzerinden geçip oksipital bölgenin arka kısmına doğru ilerleyin. İlk insizyonun lateralinde bulunan yumuşak dokuları uzaklaştırarak kafatasının dorsal ve posterior kısımlarını açığa çıkarın. Temporal kası kafatasından ayırın. idea posterior oksipital kemiği yumuşak dokudan temizleyin. Dura ile örtülü serebellumu açığa çıkarmak için, foramen magnumun posterior kısmını kullanarak oksipital kemiği çıkarın. Kafatasının anterior tarafına dönün ve gözlerin hemen önündeki frontal kemikten bir giriş noktası seçin.Bu aşamada, kafatasını delmek için bir kemik keskisi kullanın ve frontal sinüse girin. Kafatasının diğer laminasının daha fazla uzaklaştırılması için frontal sinüsün genişliğini kullanın. Serebrumu örten ince bir iç kafatası laminası açığa çıkar.Beynin ön kısmını örten durayı açığa çıkarmak için bu laminayı nazikçe açın. Kemik çıkarma işlemine temporal ve parietal kemikler üzerinden lateral olarak devam edin. Serebrum ve serebellumun halihazırda açığa çıkarılmış kısımları arasında yer alan kafatasının son kısmını serbest bırakın.Kalan posterior kafatası kemiğini, tıpkı bir kapıyı açar gibi, tek bir taraftan keski yardımıyla kırarak açın. Beynin çıkarılması. Sagittal sinüse yakın bölgeden nazikçe insizyon yapmak için durayı kaldırın.Beyni kaplayan dural kesenin daha fazla uzaklaştırılması için dural açılışı kullanın. Serebrum ile serebellum arasında yer alan durayı kaldırırken özel dikkat gösterilmelidir. Çünkü bu dural yaprağın korunması, sonraki beyin çıkarma işlemini engelleyecektir.Son olarak, beyinciği ve alt beyin sapını örten dura kesilir. Domuz başı dikey konuma getirilir ve olfaktör bulbların dura ile kaplı kafatası tabanından künt diseksiyonla serbest bırakılmasıyla serebrum ayrılır. Açığa çıkan optik kiazma kesilir.Ardından hipofiz sapının ve okülomotor sinirlerin sırasıyla açığa çıkarılması ve kesilmesini gerçekleştirin. Alt kraniyal sinirlerin kesilmesiyle beyin sapını serbest bırakın. Beyni kafatası tabanından ayırmak için bir keski kullanın.Hipofiz bezinin çıkarılması. Kafatası tabanında, çevresindeki dural yaprakla birlikte hipofiz sapını belirleyin. Dural yaprağı hipofiz sapının yan tarafından kesin.Pitüiteri serbest bırakmak için bir dissektör kullanın ve onu pitüiter fosadan kaldırın. Sonuçlar ve sonuç. Açıklanan teknik, postmortem domuz beyninin ve pitüiterin yaklaşık 15 ila 20 dakika içinde güvenli bir şekilde çıkarılmasını sağlar.Elde edilen doku, ardından daha küçük beyin dilimleri şeklinde yönlendirilmiş kesit alma işlemi uygulanarak mikroskobik analize sunulabilir. Bu dilimler, kimyasal analiz veya ileri histolojik işlemler için uygundur.

exposure-pig-cns-for-histological-analysis-manual-for-decapitation

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Genetik Đndüklenebilir Kader Haritalama (GIFM) işaretleri ve ince, mekansal ve zamansal kontrolü ile parça...

Genetik Đndüklenebilir Kader Haritalama Pratik Bir Yaklaşım: Hücreler Mark ve Track Görsel Bir Rehberi In Vivo</em

Bu makale hazırlamak ve korumak için tam bir metodoloji...

Uzun vadeli potansiyelize bir çok Kararlı ve tekrarlanabilir Kayıt için geliştirilmiş Hazırlık ve Hipokampal Fare Dilimleri korunması

Perinatal asfiksiyi takiben hipoksik-iskemik ensefalopati hayvan modelleri kullanılarak incelenebilir. Yenidoğan hipoksik-iskemik ensefalopatisinin bir domuz yavrusu modeli oluşturmak için gerekli prosedürleri gösteriyoruz.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

Bu iletişim kuralı bir en iyi duruma getirilmiş Nuygulanmasını gösteren-metil-D-glucamine (NMDG) koruyucu kurtarma yöntemi beyin dilim hazırlık. Bir tek medya formülasyon güvenilir bir şekilde sağlıklı beyin dilimleri her yaştan ve çeşitli deneysel uygulamalar için hayvanlardan elde etmek için kullanılır.

En iyi duruma getirilmiş bir Nkullanarak akut beyin dilimleri hazırlanması-metil-D-glucamine koruyucu kurtarma yöntemi

Anesteziye bağlı gelişme nörotoksisitesi (AIDN) araştırmaları, insanlar için geniş ölçüde uygulanmayan kemirgenler üzerine yoğunlaşmıştır. İnsan olmayan primat modelleri daha alakalı, ancak maliyet önleyici ve deney için kullanımı zor. Domuz yavrusu aksine, anestezik nörotoksisite çalışması için klinik açıdan önemli, pratik bir hayvan modeli idealdir.

Anesteziye Bağlı Gelişimsel Nörotoksisite (AIDN) Çalışması İçin Bir Piglet Modelinin Kullanımı: Bir Translasyonel Sinirbilimi Yaklaşımı

Bu çalışmada domuz yavruları. vivo nörotransmitter etkinliğini izlemek için elektrot enzim tabanlı dizi (MEA) teknoloji romanı kullanımı araştırıyor Hipotez o Glutamat bozukluk anestezik nörotoksisite mekanizmasına katkıda olduğunu. Burada, MEA teknoloji anestezi kaynaklı nörotoksisite mekanizması çalışmaya uyum için bir protokol mevcut.

Elektrot dizi teknoloji adaptasyon anestezi kaynaklı nörotoksisite sağlam Piglet beyinde incelenmesi için

Bu protokol, domuz beyninin bütünüyle çıkarılması ve sinirbilimde yaygın olarak çalışılan birkaç beyin bölgesinin diseksiyonu tekniğini detaylandırıyor.

Evcilleştirilmiş Domuz Beyninin Ekstraksiyonu ve Diseksiyonu

Bu makale, domuzların sarnıç magnasında doğrudan canül implantasyonu için adım adım bir protokol sunun.<br...

Domuzların Sarnıç Magnasında Doğrudan Kanın İmplantasyonu

Bu protokol, fare beyninden son derece saf sinaptozomlar, sinaptik veziküller ve diğer sinaptik fraksiyonları elde etmek için sağlam ve ayrıntılı bir yöntem sunar. Bu yöntem, protein lokalizasyonunun ve fonksiyonunun kompartmanlı çözünürlükle biyokimyasal analizi de dahil olmak üzere sinaptik süreçlerin değerlendirilmesini sağlar.

Sinaptik Bileşenlerin Murin Beyinden İzolasyonu için Hücre Altı Fraksiyonasyonu

Burada, bir minipig modelinde yumuşak subdural elektrot dizilerinin uzun süreli performans ve güvenlik değerlendirmesi için cerrahi yöntem ve araçları, postoperatif manyetik rezonans görüntülemeyi, işitsel korteksin elektrofizyolojisini, implantın elektrokimyasal özelliklerini ve postmortem immünokimyayı açıklayan bir yöntem sunuyoruz.

Minipiglerde Subdural Yumuşak Elektrokortikografi (ECoG) Dizisi İmplantasyonu ve Uzun Süreli Kortikal Kayıt

Bu protokol, 3 aylık bir Danimarka Landrace domuzu üzerinde yüksek hızlı bir pnömatik matkap kullanılarak bir kraniektomi yapılmasını açıklar. Erişim frontal kemikten yapılır ve ventral dura mater ve altta yatan serebral hemisferleri ortaya çıkarır. Bu prosedür, domuz beyninin büyük bir bölümüne erişim sağlar.

Yüksek Hızlı Pnömatik Matkap Kraniektomi ile Domuz Beynine Erişim

Öğrenin, domuz beyni ve hipofiz bezinin bütünlüğünü koruyarak çıkarılması tekniğini. Bu yöntem, makroskopik ve histolojik analizler için etik standartlara uygun hazırlama sağlar.

Histolojik Analiz Domuz MSS Pozlama: Decapitation, Kafatası Açılış İçin El Kitabı ve Beyin Kaldırma

Daha fazla video keşfet